实验六 VC含量测定

实验六 Vc含量测定
------2，6-二氯酚靛酚法
实验目的
学习定量测定维生素C的原理和方法 掌握滴定管基本操作过程
实验原理
Vc是人类营养中重要的维生素之一，绿色蔬菜和水 果中含量很丰富。Vc有强的还原性，在碱性、加热并有 氧化剂存在时Vc易被氧化破坏。2,6-二氯酚靛酚在碱性 溶液中为蓝色，在酸性溶液中为红色，被还原后变为无 色。因此可用2,6-二氯酚靛酚测样品中的Vc含量， Vc可 将染料还原为无色同时Vc被氧化成脱氢Vc，Vc全部被氧 化后，滴入的染料使溶液呈淡粉红色。根据消耗染料的 量可计算出样品中Vc的含量。
取两份10ml 样品所用染料溶液体积的平均值， 代入下面公式计算100g样品中还原型Vc的含量：
（V1-V2）×V总×M×100 Vc含量 (mg/100g) = V3×W
V1：为滴定样品所消耗染料溶液的平均体积 V2：为滴定空白对照所消耗染料溶液体积 V总： 样品提取液的总体积 V3：滴定时所取的样品提取液的体积 M：1ml染料溶液所能氧化Vc的量（mg） W：样品的重量（g）
思考题
维生素C主要生理功能有哪些？
抗坏血酸浓度*消耗抗坏血酸体积 1毫升染料氧化Vc的质量= 消耗染料体积
3、空白滴定： 取10ml 1%草酸溶液放入锥形瓶中， 滴定，方法同2中的操作，作为空白对照。 4、样品滴定： 另吸取两份10ml 样品，放入两个锥 形瓶中，分别滴定，方法同2中的操作 。 记录染料溶液所用的体积。
结果、分析讨论
注意事项
1、样品提取过程避免与铜、铁接触，滴定过程要迅速， 习题不超过2min，样品滴定消耗染料1~5ml为宜，如超 出此范围，应增加或减少样品用量。 2、如果样品泡沫过多，可加几滴辛醇消泡。 3、样品中含有色素会干扰对终点的判断。 4、本法只能测定还原型Vc，不能测出具有相同生理功 能的氧化型Vc和结合型Vc。 5、 用2%草酸溶液制备提取液可有效抑制Vc氧化酶， 而1%草酸溶液无此作用。
实验报告
实验报告的格式应为： 实验报告的格式应为： 实验目的； ⑴ 实验目的； 实验原理； ⑵ 实验原理； 仪器、材料和试剂； ⑶ 仪器、材料和试剂； 实验步骤； ⑷ 实验步骤； 结果讨论（含数理据处）； ⑸ 结果讨论（含数理据处）； 注意事项。 ⑹ 注意事项。 注意：实验结果的讨论要充分， 注意：实验结果的讨论要充分，尽可能多查阅一些有 关的文献和教科书， 关的文献和教科书，充分运用己学过的知识和生物化 学原理，进行深入的探讨， 学原理，进行深入的探讨，勇于提出自己独到的分析 和见解，并欢迎对实验提出改进意见。 和见解，并欢迎对实验提出改进意见。
材料：
柚子
操作步骤
1、提取Vc： 称取柚子10g~15g，加入15ml 2%草酸溶 液，用研钵磨成匀浆。两层滤布过滤取得滤 液，用少量 2% 草酸溶液洗研钵几次，倒入 滤渣中，合并滤液，定容至50ml。（注意： 切勿过量）
2、标准液滴定： 取Vc标准液4ml于100ml锥形瓶中，加 6ml 1% 草酸溶液，用2，6-二氯酚靛酚溶液 滴定至淡红色。记录所染料溶液的量，计算 出1ml染料溶液所能氧化Vc的量。
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实验仪器、试剂和材料
仪器： （1）天平 （2）研钵 （3）5ml微量滴定管 （4）50ml容量瓶 （5）10ml胖肚吸管 （6）100ml锥形瓶 （7）量筒 （8）漏斗 （9）滤布 (10)吸量管
试剂：
（1）1%草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000ml； （2） 2%草酸溶液：称20g草酸，加水至1000ml； （3）Vc标准液：准确称10 mg Vc溶于100 ml 1%草酸中， 即Vc的浓度为 0.1 mg/ml； （4） 0.05 % 的2，6 - 二氯酚靛酚溶液：称取2，6-二氯 酚靛酚500mg，溶于300ml含有104mg碳酸氢钠的热水中， 冷却后，稀释至1000ml，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱 内。