实验四
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实验四
细菌的单染色及革兰氏染色
（一）简单染色法
目的要求
学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的
简单染色法；
巩固显微镜（油镜）的使用方法和无菌操作技术。
基本原理
借助物理因素（如：细胞及细胞物质对染料的毛
细现象、渗透、吸附作用等）和化学因素（如： 正负离子之间的相互吸引等）的作用而进行的。
不影响最终结果？在什么情况下可以采用？
列表说明你所观察到的细菌形状、颜色和革
兰氏染色反应。
菌 种 形 态(绘图) 颜 色 结果（Ｇ＋、Ｇ－）
思考题
你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确
性？其中最关键的环节是什么？
在革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太
老，用老龄细菌染色会出现什么问题？
你认为革兰氏染色中，哪一个步骤可以省去而
大肠杆菌约24h营养琼脂斜面培养物
土壤样品分离纯化后得到的细菌
染色剂
草酸铵结晶紫染液
卢戈氏碘液
95%乙醇 番红染色液
仪器或其他用具
显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。
操 作 步 骤
萌发芽孢的枯草 芽孢杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合涂片 油镜下形态（革兰氏染色）
实验结果
实验器材
菌种
土壤样品分离纯化后得到的细菌、八叠球菌
染色剂
草酸铵结晶紫染液 番红染液
仪器或其他用具
显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。
涂 片 干 燥 固 定 染 色 水 洗 干 燥 镜 检
操 作 步 骤
实验结果
根据观察结果，绘出细菌形态图。
思考题（P76五、2. （１）（2）（3））
在进行细菌涂片时应注意哪些环节？
细菌制片时为什么要进行加热固定？在加热固
定时应注意什么？
为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？
（二）革兰氏染色法
目的要求
学习并初步掌握革兰氏染色法；
Baidu Nhomakorabea
了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中
的重要性。
实验器材
菌种
枯草芽孢杆菌12-18h营养琼脂斜面培养物
细菌的单染色及革兰氏染色
（一）简单染色法
目的要求
学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的
简单染色法；
巩固显微镜（油镜）的使用方法和无菌操作技术。
基本原理
借助物理因素（如：细胞及细胞物质对染料的毛
细现象、渗透、吸附作用等）和化学因素（如： 正负离子之间的相互吸引等）的作用而进行的。
不影响最终结果？在什么情况下可以采用？
列表说明你所观察到的细菌形状、颜色和革
兰氏染色反应。
菌 种 形 态(绘图) 颜 色 结果（Ｇ＋、Ｇ－）
思考题
你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确
性？其中最关键的环节是什么？
在革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太
老，用老龄细菌染色会出现什么问题？
你认为革兰氏染色中，哪一个步骤可以省去而
大肠杆菌约24h营养琼脂斜面培养物
土壤样品分离纯化后得到的细菌
染色剂
草酸铵结晶紫染液
卢戈氏碘液
95%乙醇 番红染色液
仪器或其他用具
显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。
操 作 步 骤
萌发芽孢的枯草 芽孢杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合涂片 油镜下形态（革兰氏染色）
实验结果
实验器材
菌种
土壤样品分离纯化后得到的细菌、八叠球菌
染色剂
草酸铵结晶紫染液 番红染液
仪器或其他用具
显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。
涂 片 干 燥 固 定 染 色 水 洗 干 燥 镜 检
操 作 步 骤
实验结果
根据观察结果，绘出细菌形态图。
思考题（P76五、2. （１）（2）（3））
在进行细菌涂片时应注意哪些环节？
细菌制片时为什么要进行加热固定？在加热固
定时应注意什么？
为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？
（二）革兰氏染色法
目的要求
学习并初步掌握革兰氏染色法；
Baidu Nhomakorabea
了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中
的重要性。
实验器材
菌种
枯草芽孢杆菌12-18h营养琼脂斜面培养物