脂肪干细胞研究进展与应用前景

员摇 粤阅杂悦泽 的来源与培养
在怎噪 藻贼 葬造［员］首次从人脂肪抽吸物中分离出 粤阅鄄 杂悦泽，其方法简述如下：首先将脂肪抽吸物用生理盐 水反复冲洗，加 园郾 园苑缘豫 胶原酶，猿苑益 消化 员 澡，员 圆园园 则 辕 皂蚤灶 离心 员园 皂蚤灶，弃上清，取细胞沉淀加入 阅酝耘酝 培养液［ 含 员园豫 胎 牛 血 清（ 云月杂）］。细 胞 计 数，每 员园园 皂皂圆 培 养 皿 接 种 员 伊 员园远 个 细 胞，猿苑益 、缘豫 悦韵圆 、员园园豫 饱 和 湿 度 条 件 下 培 养。圆源 澡 后 首 次 换 液，以后每周换液 圆 次，细胞融合达 愿园豫 时传代，细
·愿源远· ◇综摇 摇 述◇
安徽医科大学学报摇 粤糟贼葬 哉灶蚤增藻则泽蚤贼葬贼蚤泽 酝藻凿蚤糟蚤灶葬造蚤泽 粤灶澡怎蚤摇 圆园员猿 允怎造；源愿（苑）
脂肪干细胞研究进展与应用前景
周紫微 综述摇 赵摇 宇 审校
摘要摇 脂肪干细胞是一类存在于脂肪组织中，能够自我更 新、具有多向分化潜能的成体干细胞，在一定的条件下可以 分化成许多有特定功能的细胞系，具有一般干细胞的特点， 可作为多种组织工程的种子细胞。现就脂肪干细胞的生物 学特性、多向分化的潜能以及在骨组织工程领域中的研究进 展作一综述。 关键词摇 脂肪干细胞；生物学特性；多向分化潜能 中图分类号摇 砸 猿员愿 文献标志码 粤 文章编号 员园园园 原 员源怨圆（圆园员猿）园苑 原 园愿源远 原 园源
圆园员猿 原 园员 原 圆源 接收 基 金 项 目：安 徽 省 教 育Βιβλιοθήκη Baidu厅 自 然 科 学 基 金 重 大 项 目（ 编 号：
运允圆园员员在阅园源、运允圆园员圆在阅园怨）；国家自然科学基金（ 编号： 愿员员苑员愿圆怨） 作者单位：安徽医科大学第一附属医院整形外科，合肥摇 圆猿园园圆圆 作者简介：周紫微，女，硕士研究生； 赵摇 宇，男，教授，主任医 师，硕 士 生 导 师，责 任 作 者，耘鄄
·愿源愿·
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猿摇 粤阅杂悦泽 的多向分化潜能
脂肪细胞来源于中胚层，实验证明其具有向骨、 软骨、神经元、肌腱、脂肪等方向分化的潜能。 猿援 员摇 向成骨方向分化摇 在怎噪 藻贼 葬造［苑］用二羟维生素 阅猿、抗坏血酸磷酸酯、磷酸甘油诱导 粤阅杂悦泽 向成骨 方向分化，并进行总钙测定及 砸栽鄄孕悦砸 检测骨钙素
安徽医科大学学报摇 粤糟贼葬 哉灶蚤增藻则泽蚤贼葬贼蚤泽 酝藻凿蚤糟蚤灶葬造蚤泽 粤灶澡怎蚤摇 圆园员猿 允怎造；源愿（苑）
摇 摇 再生医学的兴起激发了人们对各种干细胞、组 织工程支架和细胞生长因子的研究热潮，选用合适 的干细胞作为种子细胞的来源已经成为研究的焦 点。脂肪组织在人体内储量丰富，获取简便，通过抽 脂从 中 获 得 大 量 的 脂 肪 干 细 胞（ 葬凿蚤责燥泽藻 贼蚤泽泽怎藻鄄凿藻鄄 则蚤增藻凿 糟藻造造泽，粤阅杂悦泽）不仅在体内外具有多向分化潜 能，在不同的诱导因子作用下可以像脂肪细胞、软骨 细胞、肌细胞、成骨细胞、神经细胞、神经胶质细胞及 胰岛细胞分化，而且可以分泌多种促血管生成因子 和抗凋亡因子。现就这一领域新的研究进展与应用 作一综述。
圆摇 粤阅杂悦泽 的生物学特性
培养的 粤阅杂悦泽 传代后，形态上与骨髓来源的间 质干细胞没有区别。阅燥皂蚤灶蚤糟蚤 藻贼 葬造［源］提出根据 猿 个 标准来限制间充质干细胞：能黏附到塑料制品上、具 有向成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞分化的多向 分化潜 能 及 特 殊 的 表 面 抗 原 表 达。 阅藻 哉早葬则造藻 藻贼 葬造［缘］比较了 粤阅杂悦泽 和骨髓干细胞间表面抗原表达 的差 异，发 现 两 类 细 胞 的 表 面 标 记 相 似，都 表 达 悦阅员猿、悦阅圆怨、悦阅源源、悦阅缘愿、悦阅怨园、悦阅员园缘 和 悦阅员远远， 均不 表 达 悦阅员员糟、悦阅员怨、悦阅猿员、悦阅猿猿、悦阅猿愿、悦阅源缘 等。运藻增蚤灶 藻贼 葬造［远］发现新分离的 粤阅杂悦泽 表达一些造 血干细胞的标记，包括普通白细胞的抗原 悦阅源缘、单 核 辕 巨噬细胞标记 悦阅员员葬 和 悦阅员源、酝匀悦陨陨 类 阅砸 组 织相容性抗原和协同刺激分子 悦阅愿远，但传代后，以 上的大多数表面标记会消失。
有分化为成 软 骨 细 胞 的 能 力。 研 究［ 员圆］显 示 生 长 因 子鄄圆 可诱导 粤阅杂悦泽 向软骨细胞分化，形成软骨结节 并表达软骨相关的细胞外基质如磷酸蛋白多糖、多 聚蛋白聚糖等。 猿援 源摇 向成肌方向分化摇 砸燥凿则蚤早怎藻扎 藻贼 葬造［员猿］首先报道 将 粤阅杂悦泽 移植到 阅怎糟澡藻灶灶藻 型肌营养不良小鼠模型 中后，干细胞表现出分化成肌肉组织的潜能。通过 应用 特 殊 的 诱 导 培 养 基，粤阅杂悦泽 能 表 达 肌 源 性 表 型，形 成 肌 管，表 现 出 骨 肌 的 特 征 。 砸葬灶早葬责责葬 藻贼 葬造［员源］从兔脂肪组织中分离出 粤阅杂悦泽，在以 砸孕酝陨 为 基础的培养基中加入 缘鄄氮杂胞苷诱导培养，员 周后 部分细胞呈双核化；圆 周后约 猿园豫 的细胞体积增大， 形成了圆形外观；猿 周后显微镜下观察到细胞出现 自发性搏动；圆 个月后免疫组化染色证明肌球蛋白 重链、α鄄肌动蛋白和肌钙蛋白鄄员 呈阳性，由此表明 粤阅杂悦泽 具向心肌分化的潜能。 猿援 缘摇 向神经方向分化摇 杂葬枣枣燥则凿 藻贼 葬造［员缘］将人和鼠的 粤阅杂悦泽 用丙戊酸、丁羟基茴香醚、氯化钾和氢化考 的松等诱导后，员 耀 猿 澡 后可产生类神经元的细胞， 其中鼠的 粤阅杂悦泽 圆源 澡 后检验 郧云粤孕、灶藻泽贼蚤灶、晕藻怎晕 均 呈阳性，人的 粤阅杂悦泽 诱导 员 凿 后 陨云鄄酝、晕藻怎晕、灶藻泽贼蚤灶、 宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼 的检测亦有上述蛋白的表达。国内学 者 再葬灶早 藻贼 葬造［员远］从 成 年 大 鼠 的 脂 肪 组 织 中 分 离 出 粤阅杂悦泽，采用 β鄄巯基乙醇诱导分化后，发现分化的细 胞早期表达巢蛋白，后期有约 苑园豫 的细胞表达神经 元的标志物———神经元特异性烯醇化酶（ 晕杂耘）和神 经微丝，从而认为 粤阅杂悦泽 具有可分化为神经元细胞 的潜能。 猿援 远摇 向内皮方向分化摇 血管内皮细胞与 粤阅杂悦泽 均 属于中胚层，且前者是胚胎发育过程中第一个分化 的组织，由此可以推测 粤阅杂悦泽 有分化为血管内皮细 胞的潜能。粤阅杂悦泽 的旁分泌功能可分泌大量血管 生长因子，如血管内皮生长因子（ 灾耘郧云）、肝细胞生 长因子（ 匀郧云）、血管生成素、碱性成纤维细胞生长 因子（ 遭云郧云）、胰岛素样生长因子（ 陨郧云鄄员）等，这些细 胞因子能促进血管重建与组织修复。国外研究证实 粤阅杂悦泽 在内皮生长因子及外来剪力的作用下可向 成熟内皮细胞分化［员苑］，分化的细胞表达内皮细胞特 异性标记 悦阅猿员 及Ⅷ因子，并可吞噬乙酰化的低密 度脂蛋白。 猿援 苑摇 向肝细胞方向分化摇 杂藻燥 藻贼 葬造［员愿］利用制瘤素 酝（ 韵杂酝）及 匀郧云 在体外成功诱导 粤阅杂悦泽 向肝细胞 方向分化，并发现加入的二甲基亚砜（ 阅酝杂韵）可增 强 粤杂阅悦泽 向肝细胞分化的能力。砸栽鄄孕悦砸 及免疫细
·愿源苑·
（ 韵悦）、核 心 结 合 因 子 α鄄员（ 悦月云粤鄄员 ）、碱 性 磷 酸 酶 （ 粤孕）、骨结合素（ 韵晕）、骨桥蛋白（ 韵孕）、骨形态发生
蛋白鄄圆（ 月酝孕鄄圆）、糟鄄枣燥泽、Ⅰ型胶原（ 悦晕 Ⅰ）等基因的 表达，均为阳性；宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼 亦检测到了 韵晕、韵孕、 悦晕Ⅰ的蛋白表达，说明 粤阅杂悦泽 具有向成骨方向转 化的潜能。另有研究［愿］表明，从男性浅层脂肪组织 获得的 粤阅杂悦泽 向成骨细胞分化能力强，且分化早、 速度快、成 功 率 高。 有 研 究［怨］表 明 体 外 培 养 时，血 小板血浆（ 孕砸孕）可促进人 粤阅杂悦泽 增殖并诱导其向 成骨细胞转化，其可能机制为：孕砸孕 中血小板源性生 长因子（ 责造葬贼藻造藻贼 凿藻则蚤增藻凿 早则燥憎贼澡 枣葬糟贼燥则，孕阅郧云）、血管内 皮 生 长 因 子（ 增葬泽糟怎造葬则 藻灶凿燥贼澡藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 枣葬糟贼燥则， 灾耘郧云）、转化生长因子鄄β（ 贼则葬灶泽枣燥则皂蚤灶早 早则燥憎贼澡 枣葬糟贼燥则鄄 β，栽郧云鄄β）和表皮生长因子（ 藻责蚤凿藻则皂葬造 早则燥憎贼澡 枣葬糟贼燥则， 耘郧云）等各种生长因子协同作用刺激成骨前体细胞 的有丝分裂，增加成骨细胞数量，促进其分泌形成细 胞外基质（ 藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 皂葬贼则蚤曾，耘悦酝）。 猿援 圆摇 向脂肪方向分化摇 在怎噪 藻贼 葬造［苑］在 阅酝耘酝 基础 培养基 中 加 入 员园豫 云月杂、员 μ皂燥造 辕 蕴 地 塞 米 松、园郾 缘 皂皂燥造 辕 蕴 异丁基鄄甲基黄嘌呤、员园 μ皂燥造 辕 蕴 胰岛素、圆园园 μ皂燥造 辕 蕴 吲哚美辛诱导 粤杂阅悦泽 向脂肪细胞分化，用 油红 韵 染色和 砸栽鄄孕悦砸 检测脂蛋白脂酶的表达，结 果表明 粤阅杂悦泽 可以分化为成熟的脂肪细胞。运葬噪怎鄄 凿燥 藻贼 葬造［员园］用成纤维细胞生长因子鄄圆 对 粤阅杂悦泽 预处 理后诱导其向脂肪细胞分化，结果表明 粤阅杂悦泽 向脂 肪细胞分化能力增强；员园 代以内的 粤阅杂悦泽 除了向脂 肪细胞分化外还向骨细胞分化，但 员园 代以后的 粤阅鄄 杂悦泽 主要向骨细胞分化；雌激素水平越高，粤阅杂悦泽 向 脂肪分化能力越强。运葬噪怎凿燥 藻贼 葬造［员园］认为 耘郧云 促进 粤阅杂悦泽 成脂分化是通过有丝分裂原激活蛋白激酶 激酶 辕 细胞 外 信 号 相 关 激 酶（ 皂蚤贼燥早藻灶鄄葬糟贼蚤增葬贼藻凿 责则燥鄄 贼藻蚤灶 噪蚤灶葬泽藻 噪蚤灶葬泽藻 辕 藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 泽蚤早灶葬造鄄则藻早怎造葬贼藻凿 噪蚤鄄 灶葬泽藻，酝耘运 辕 耘砸运）信号通路，同时伴随着过氧化物酶 体增殖物激活受体 γ（ 责藻则燥曾蚤泽燥皂藻 责则燥造蚤枣藻则葬贼燥则泽 葬糟贼蚤增葬鄄 贼藻凿 则藻糟藻责贼燥则γ，孕孕粤砸鄄γ）基因表达的增加。 猿援 猿摇 向软骨方向分化摇 匀怎葬灶早 藻贼 葬造［员员］将形成微团 状的 粤阅杂悦泽 置入含 员园 灶早 辕 皂造 转化生长因子 β员、缘园 灶皂燥造 辕 蕴 抗坏血酸二磷酸盐、园郾 员 μ皂燥造 辕 蕴 地塞米松、 员豫 云月杂、远郾 圆缘 μ早 辕 皂造 胰岛素等确定成分的 阅酝耘酝 培 养基中，圆 凿 后形成肉眼可见的小球体逐渐增多，切 片观察可见小球体外层存在一些软骨膜样的细胞。 第 苑、员源 天时取样进行组织化学染色，可显示硫酸蛋 白多糖的存在；砸栽鄄孕悦砸 技术可探测到表达Ⅱ型胶 原蛋白 皂万砸晕方粤数的据存在并逐渐增多。说明 粤阅杂悦泽 确
皂万葬蚤造：方扎澡葬数燥赠据怎扎躁岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
胞以 圆 伊 员园源 个 辕 糟皂圆 接种于新的培养皿内。初分离 的细胞接种 源 澡 后开始贴壁，圆源 耀 源愿 澡 细胞形态呈 小圆形，色深。源愿 澡 后细胞呈梭形，生长有方向性。 缘 耀 远 凿 后细胞呈集落样生长。传代后细胞仍呈成 纤维细胞样 生 长，经 多 次 传 代，细 胞 增 殖 速 度 无 减 慢，这表明 粤阅杂悦泽 体外扩增能力强，易于传代培养。 运怎则蚤贼葬 藻贼 葬造［圆］研究不同的离心力对分离 粤阅杂悦泽 的影 响，发现过度离心会破坏 粤阅杂悦泽，员 圆园园 则 辕 皂蚤灶 为最 佳离 心 力，能 获 得 最 大 量 的 粤阅杂悦泽。酝葬贼泽怎皂燥贼燥 藻贼 葬造［猿］研究发现，人脂肪吸取物在 源益 下过夜保存，不 会影响 粤阅杂悦泽 的 数 量 和 生 物 活 性。有 研 究 者 将 粤阅杂悦泽 冻 存 后 复 苏，发 现 其 扩 增 和 分 化 能 力 未 丢 失，形成的脂肪组织与新鲜分离的 粤阅杂悦泽 形成的一 样。这使 得 建 立 脂 肪 来 源 干 细 胞 库 成 为 可 能，为 粤阅杂悦泽 的应用提供了广阔的前景。