热原检查标准操作规程

XXXX药业有限公司

标准操作规程(S O P)

1.目的

规范热原检查操作，保证热原检查结果的准确可靠。

2.范围

热原检查

3.责任

质量保证科、化验室、实验动物室负责人及相关人员

4. 制定依据：

《中国药典》2010年版三部

5.规程

5.1 实验材料及用具

5.1.1 天平精度 10g 家兔称量用

5.1.2 电热干燥箱

5.1.3 ZRY-2D型热原仪

5.1.4 家兔固定盒

5.1.5 实验用具注射器、广口试剂瓶（均需去热原）、直镊、时钟、脱脂棉5.1.6 试剂75%乙醇

5.2.实验动物

5.2.1 健康无伤、体重1.7kg以上、同一来源、同一品系家兔，雌兔应无孕，一兔一笼，标兔号。

5.2.2 新兔预选

5.2.2.1 新兔经饲养7日后,进行预测体温,测温的条件与热原检查要求相同。

5.2.2.2 测量体温时,肛门体温计插入肛门的深度各兔应相同,约为6cm,测温时间不得少于1.5分钟。

5.2.2.3 每隔30分钟测温1次，共8次。

5.2.2.4 8次体温均在38.0-39.6℃（一般多选用38.4-39.4℃）的范围内，且最高最底体温数不超过0.4℃（以不超过0.35℃为佳）的家兔，可供3周内实验用。

5.2.2.5 录用新兔编号，登记入兔史记录卡，未被录选家兔，可饲养7日按2.2.1至2.2.3程序再预测体温一次，如仍不符合要求则淘汰。

5.2.3 家兔的重复使用

5.2.3.1 供试品判定为符合规定的家兔；升温达0.6℃的家兔应休息2周以上，方可供下次试验用。

5.2.3.2 供试品判定为需重复实验的家兔，应暂作休息处理，如重复合格，升温≥0.6℃的家兔，应重新测温挑选。

5.2.3.3 供试品判定为不符合规定的家兔，不再使用。

5.2.3.4 复试用家兔挑选体重在2.0-2.4kg、正常体温在38.8-39.2℃、使用过2～3次的家兔进行实验。

5.3 实验前的准备

5.3.1 温度探头每6个月校验一次，不符合要求者不能使用。

5.3.2 用具除热原清洗干净的玻璃器皿、注射器、针头、直镊等放入金属制容器内，密闭，置电热干燥箱中经250℃30分钟或180℃2小时加热除热原。去除热原未曾开启的密封容器内用具，可供一周内使用。或者使用一次性注射器

5.3.3 实验室的温度

5.3.3.1 实验室的温度应在17～25℃范围内。

5.3.3.2 实验室与饲养室的温度相差不得大于3℃。

5.3.3.3 实验全过程中，室温变化不得大于3℃。

5.4. 检查法

5.4.1 选符合规定的家兔，停止给饲料和水，称重后置于家兔固定盒内至少1小时。

5.4.2 每隔30分钟测量家兔体温1次，一般测量2次，两次体温之差不得超过0.2℃，以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。

5.4.3 当日使用的家兔，正常体温应在38.0-39.6℃范围内，且各兔间相差不得超过1℃。

5.4.4 每个供试样品用家兔3只，在测定正常体温后15分钟内给药。

5.4.4.1 供试品的剂量，在不影响家兔正常生理的前提下，按体重计算（人按50kg计），用临床一次剂量的3-10倍。

5.4.4.2 供试品注射的体积，按家兔体重每kg不小于1ml，不大于10ml。体积在5-10ml的溶液应在37-38℃预热后注射。

5.4.4.3 供试品打开后，应在30分钟内注射于家兔体内。

5.4.4.4 注射前，先用75%乙醇棉球轻擦耳静脉的注射部位，从耳尖静脉进针，如进针不利，应顺序向前进行。

5.4.4.5 注射完毕，拔出针头时，按住针眼数秒，止血。

5.4.5 给药后每隔30分钟测量体温1次，共6次。

5.4.6 温差计算

5.4.

6.1 注射药液后以6次测得体温中最高的一次减去正常体温，为该兔体温的升高度数，如6次体温均低于正常体温，则升温度数以“0”计。

5.4.

6.2 6次体温中最低的一次，减去正常体温，即为降温值。

5.5 结果判定

5.5.1 判定复试

5.5.1.1 初试3只家兔中仅有1只体温升高0.6℃或0.6℃以上，或3只家兔升温均低于0.6℃但升温的总和达1.4℃或1.4℃以上，应另取5只家兔复试。

5.5.1.2 含有热原的供试品，一般在给家兔静脉注射后1-2小时出现升温高峰。

5.5.1.4 3只家兔中有1只降温值≥0.6℃，或3只家兔中有2只降温值在0.45-0.55℃，应另取3只家兔复试。

5.5.2 判定合格

5.5.2.1 初试3只家兔中，体温升高均在0.6℃以下，并且3只家兔升温的总和在1.4℃以下，可判断为符合规定。

5.5.2.2 复试5只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔仅有1只，并且初复试合并，8只家兔的升温总和为3.5℃或3.5℃以下，可判定为符合规定。

5.5.3 判定不合格

5.5.3.1 初试3只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔数有2只或3只，可判定为不符合规定。

5.5.3.2 复试的5只家兔中，体温升高0.6 ℃或0.6℃以上的家兔有2只或2只以上，可判定为不符合规定。

5.5.3.3 初复试合并8只家兔的升温总和超过3.5 ℃，可判定为不符合规定。

6.变更历史