植物细胞质膜透性的测定
植物细胞质膜透性的测定原理以及步骤
植物细胞质膜透性的测定一、原理植物细胞质膜:是指植物细胞的细胞质外方与细胞壁紧密相接的一层薄膜。
这层膜主要由磷脂和蛋白质组成,具有选着透过性。
但是,在各种不良的外环境下,比如极端温度、干旱、重金属离子、大气污染物质等都会作用于这层膜,使膜受到不同程度的损伤。
这种损伤一般表现在膜的透性变大,使细胞内的电解质外渗,引起外液的电导率增大。
所以可以通过测定电导率的大小,推断外条件作用下膜透性变化的大小,间接反映植物细胞膜的受伤程度。
如果植物的抗性强,那么其在外条件作用下细胞膜的受伤害程度就小,膜的透性变化就越小,泡内电介质外渗就越少,外液的电导率就越小,反之越大。
生物膜:除了细胞质膜,还包括核膜、叶绿体膜、线粒体膜等细胞器的膜,统称为生物膜。
细胞质膜的作用:细胞质膜不仅仅是一种物理界线,还起着屏障作用,维持稳定的内环境,有选着地使物质进入或排除细胞质。
胞饮作用,即通过质膜向细胞内凹陷,而吞噬液体的过程。
吞噬作用,即通过质膜向细胞内凹陷,而吞噬固体小颗粒的过程。
扩散作用:是指物质从高浓度向低浓度自发移动的现象。
渗透作用:是指水分子通过选择透过性膜的扩散作用。
菲克第一定律扩散速度与距离为∆x的两点之间不同物质的浓度差∆c s成正比。
公式如下:J s=−D s ∆c s ∆xJ s:扩散速度,也叫转运速度、流量密度。
指单位时间内通过单位面积的物质的量。
单位为mol/(m2∙s)D s:扩散系数,用来衡量物质通过某种特定介质的难易程度。
跟扩散物本身的大小、扩散介质和扩散体系的温度有关。
注意:负号表示运动方向顺着浓度梯度方向进行的。
电导指电阻的倒数,可以用来表示导体的导电能力。
公式如下:G=1R=1UI=IU单位为Ω−1电阻率是指用来表示各种物质电阻特性的物理量。
某种材料制成的长1米、横截面积是1平方米(m2)的导线在常温下(20℃时)的电阻,叫做这种材料的电阻率。
公式为:R=ρl s其中,R:电阻;ρ:电阻率;l:导线的长度;s:导线的横截面积电阻率的单位是欧姆·米(Ω∙s)。
实验7-1-质膜透性的测定
实验7-1 质膜透性的测定【实验目的】1、掌握用电导率法测定植物质膜透性的原理及方法。
2、根据质膜透性大小判断植物遭受伤害的程度。
【实验原理】植物细胞质膜具有独特的选择透性,正常情况下,植物细胞与外界环境之间的一切物质交换都必须经过质膜。
测定质膜透性最常用的方法是测定细胞外液的电导率变化。
当植物处于逆境(高温、低温、干旱、盐渍、病害等)下时,不良环境因素首先作用于质膜,使质膜受到损伤,膜透性增大。
将受胁迫的植物组织浸入去离子水中,电解质外渗,水的电导率增大,因此可用电导仪通过测定细胞外液的电导率变化来测定质膜透性的变化。
【实验器材与试剂】1、实验材料女贞、香樟等植物叶片2、实验试剂去离子水3、实验仪器电导仪、电子天平、打孔器、小烧杯、真空干燥器、真空泵、电炉、量筒、纱布等【实验步骤】1、选取叶龄相同的叶片,剪下包在湿纱布中。
实验时将供试叶片用自来水冲洗干净后,再用去离子水冲洗2-3次,用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,用打孔器打取圆片(注意避开大叶脉)。
将剪下的叶圆片混合均匀备用。
2、称取叶圆片3份,每份1g ,放入三个小烧杯中:一份放入-18℃左右的冰箱中作低温处理,一份放入40-50℃的恒温箱中作高温处理,另一份包在湿纱布中室温放置作为对照。
分别处理30min。
3、在各烧杯中加入20ml去离子水,浸没叶圆片,然后放入真空干燥箱中,用真空泵抽气10 min,抽出细胞间隙的空气,然后缓缓放入空气,水渗入细胞间隙,叶片变成半透明状下沉。
4、将抽过气的烧杯取出,室温放置1h,其间注意多次摇动。
5、用电导仪测定各组的初电导率(S1)。
6、将烧杯再放入100℃沸水浴中处理15min杀死植物组织。
取出后冷却至室温,分别测定其终电导率(S2)。
同时测定去离子水的电导率作为空白电导率(S0)。
7、根据公式计算相对电导率,以相对电导率的大小表示质膜透性变化的程度。
相对电导率(L)=(S1- S0)/(S2- S0)由于室温对照也有少量电解质外渗,可通过计算伤害度来表示由于胁迫而产生的外渗。
逆境对植物细胞膜透性的影响 (电导法)
逆境对植物细胞膜透性的影响 (电导法)植物在其生命周期内时常会遭遇到各种逆境,比如极端温度、干旱、盐碱、重金属等,这些逆境都会对植物细胞膜的生理功能产生一定的影响。
其中,植物细胞膜的透性是重要的一环,直接影响到植物的营养代谢、水分调节和抗逆能力等方面。
电导法是研究逆境对植物细胞膜透性影响的有效方法之一,本文将着重从电导法的应用、原理和研究成果三方面进行阐述。
电导法是通过测定电流强度来检测被测物体内部或表面的电阻值变化的一种方法。
在研究植物细胞膜透性时,电导法通常采用离体的植物根、叶片等组织,将其置于含有一定离子浓度的凝胶中,测定从根、叶片等组织释放出来的电解质的电导率变化。
一般而言,电导率的增加表明细胞膜透性的增加,在极端情况下,电导率可能会显著增加,导致离子外溢、水分丧失和细胞死亡等情况的发生。
对植物细胞膜透性进行电导法研究的原理基于细胞膜结构的特性。
植物细胞膜是由脂质双层组成的,其中脂质双层的疏水性决定了部分物质难以通过膜透过,因此膜上存在一系列具有特定功能的蛋白质通道和传输体来调节物质的通过。
细胞膜透性的变化通常和膜蛋白的功能发生变化有关。
一些逆境因素会破坏细胞膜表面的膜蛋白结构,从而使膜通透性发生变化。
在研究过程中,通过对逆境因素的处理及其所引起的电导率变化,可以初步了解植物细胞膜受逆境害处理的情况。
例如,研究发现不同温度对甜菜叶片的膜透性影响不同。
在25℃下,叶片的膜透性较低,而在40℃时,膜透性显著增加。
这表明高温对植物细胞膜透性的影响显著,这种影响可能是由于高温所导致的膜蛋白结构的改变所造成的。
类似地,研究还发现,在重金属污染的土壤中生长的植物叶片的膜透性明显高于正常土壤中生长的植物叶片,这可能是由于重金属元素干扰细胞膜的蛋白质结构所导致的,从而使膜通透性发生变化。
从上述研究结果来看,通过电导法能够定量测定细胞膜透性变化情况,为研究逆境对植物生长、发育及抗逆能力的影响提供了重要的线索。
探究细胞膜透性的实验方法
探究细胞膜透性的实验方法细胞膜是细胞内与外环境之间的重要屏障,其透性在维持细胞正常功能中起着关键作用。
为了深入了解细胞膜的透性特性及相关生物学过程,科学家们经过长期的研究和实验,总结出一系列可行的实验方法。
本文将探究细胞膜透性的实验方法,从简单的渗透实验到更复杂的电生理试验,一一介绍其原理、步骤和实验装置。
一、渗透实验渗透实验是最常用的实验方法之一,通过观察物质在细胞膜中的渗透情况来判断细胞膜透性。
以下为一种常见的渗透实验方法:材料和仪器:1. 洋葱(或其他植物材料);2. 盐水;3. 显微镜。
步骤:1. 将洋葱切成薄片,并在显微镜下观察洋葱细胞;2. 将洋葱薄片放入一瓶盐水中,静置一段时间;3. 观察洋葱细胞在盐水中的变化。
原理:细胞膜是半透性膜,允许某些物质通过,而阻止其他物质进入或离开细胞。
在渗透实验中,通过将洋葱薄片放入盐水中,观察洋葱细胞对盐水的反应,可以判断盐水中溶质对细胞膜的渗透情况。
二、渗透压实验渗透压实验是通过比较溶液对细胞的渗透压差异来检测细胞膜透性的实验方法。
以下为常见的渗透压实验方法:材料和仪器:1. 鸡蛋(或其他植物或动物细胞);2. 不同浓度的蔗糖溶液;3. 显微镜。
步骤:1. 取一个鸡蛋,将蛋壳完整地取下,然后将蛋浆倒入一个容器中;2. 准备不同浓度的蔗糖溶液,分别注入鸡蛋的不同容器中;3. 等待一段时间后,观察鸡蛋在不同浓度蔗糖溶液中的变化。
原理:渗透压是溶液中溶质对溶剂渗透的压力,细胞膜是半透性,它具有选择性地控制物质的渗透。
在渗透压实验中,通过比较不同浓度蔗糖溶液对鸡蛋膜的渗透压差异,可以判定鸡蛋细胞膜的透性。
三、电生理实验电生理实验是一种更为精密和复杂的方法,利用细胞膜对离子的选择性渗透性来测量细胞膜电位和离子电流。
以下为常见的电生理实验方法:材料和仪器:1. 玻璃微电极(电位记录);2. 钳型电极(电流记录);3. 欧姆计;4. 基线电阻。
步骤:1. 制备玻璃微电极和钳型电极,并插入待测细胞;2. 通过欧姆计和基线电阻进行校准;3. 测量细胞膜的电位和离子电流。
植物细胞在盐胁迫下的膜透性研究
植物细胞在盐胁迫下的膜透性研究摘要:改善已经盐碱化的土壤的一种行之有效的方法是筛选抗盐碱,耐干旱的植物进行栽植。
作为抵御盐离子侵入细胞的第一道屏障,细胞膜的膜透性至关重要。
当植物处于盐胁迫的条件下时,其细胞内生理活动会受到盐离子的影响而发生改变,进而影响细胞膜的稳定性。
本文选取沙棘作为研究对象,首先对比分析了氯化钠和硫酸钠两种盐类的盐胁迫对样品细胞内保护酶含量的影响,分析了沙棘植物细胞在盐胁迫条件下的膜透性。
结果表明盐胁迫会使植物细胞内保护酶含量下降,从而导致植物细胞的膜透性增加,同时氯化钠盐胁迫对膜透性影响的程度显著强于硫酸钠。
关键词:植物细胞膜;盐胁迫;膜透性;保护酶;1引言随着近年来人类对耕作土壤的过度开发,许多地区的土壤已经出现了盐碱化的现象,这一问题直接影响到农作物的产量,对于人类发展的影响不可忽略[1]。
对于已经发生盐碱化的土壤,筛选出抗盐碱,耐干旱的植物进行栽植是一种行之有效的,改善盐碱化的方法。
在盐碱土壤中,植物所面临不利条件主要为盐胁迫,过高的盐浓度直接影响植物细胞内部的生理活动,进而影响植物的存活率。
作为抵御盐离子侵入细胞的第一道屏障,细胞膜的膜透性研究引起了学者的广泛关注[2]。
植物细胞膜透性对于植物抵抗过高盐浓度的伤害起到了至关重要的作用。
本文选取了沙棘作为研究对象,研究了植物细胞在盐胁迫下的膜透性,为筛选耐盐碱,抗干旱植物提供了依据。
2实验方法2.1 实验材料本文选用沙棘作为植物样本进行研究,进行实验的土壤为苗圃中的地表土,将土壤进行过筛后加入沙子,土壤和沙子的质量比为3:1。
选用的土壤中各种离子的含量如表1所示:表1 实验土壤中各种离子的含量2.2 实验过程将植物置于木桶中进行栽植,同种土壤质量为11kg,将两种盐类划分为四个浓度,分别为1.5,4.5,8.5,12.5g/kg,每种浓度的盐均分为三份相隔5d依次加入,盐胁迫20d后取样测试。
2.3 指标测试本实验所设计到的PDO (过氧化物酶),CAT (过氧化氢酶),膜透性分别采用愈创木酚法,紫外吸收法法和电导法进行测定3 结果分析图1 不同种类盐胁迫下植物细胞中保护酶含量的变化植物细胞中含有的保护酶可以将细胞内产生的超氧自由基和过氧化物消除,同时防止或减少羟基自由基的形成,有利于维持植物细胞膜的稳定存在。
植物细胞质膜透性的测定(电导率法)
植物细胞质膜透性的测定(电导率法)植物细胞质膜透性的测定是一个很重要的实验,可以用于评估植物细胞受到环境影响的程度。
本文将介绍测定植物细胞质膜透性的一种方法——电导率法。
一、实验原理细胞膜是细胞的保护层,它与外部环境隔离,控制着物质的进出。
当受到外界刺激时,细胞膜的通透性会受到影响,导致细胞膜的电导率增加。
因此,用该方法可以测定细胞膜的透性。
实验中,我们将生理盐水中的细胞浸泡一段时间后,再将溶液中的电导率测定。
通过比较不同浓度或处理的细胞的电导率差异,可以评估细胞膜透性的变化。
二、实验步骤1.准备实验材料:生理盐水、青豆或其他细胞材料、电导率计和计量杯等实验器材。
2.将一定量的青豆或其他细胞材料放入生理盐水中,使其充分浸泡。
3.等待一定时间(如30分钟),直到细胞完全吸收生理盐水。
4.使用电导率计测量细胞浸泡后的生理盐水中的电导率。
5.重复上述步骤,对不同浓度或处理的细胞进行测定。
6.将测定结果进行比较,并评估细胞膜透性的变化。
三、实验注意事项1.为避免影响测定结果,应在室温下进行实验。
2.细胞样品应摆放平整,避免细胞受压。
3.电导率计应先进行零点校准,以确保测得的值准确。
4.测定细胞样品的时间和生理盐水的浸泡时间应相同。
5.不同浓度或处理的细胞宜使用相同的体积,使得测定结果可比较。
四、实验结果及分析实验结果将显示出不同处理下电导率的变化情况,通过比较可以得到不同浓度或处理的细胞膜透性的差异。
例如,如果处理后的细胞样品的电导率增加,则说明细胞膜透性增加,细胞受到的外部刺激大于未经处理的细胞。
通过这种方法,我们可以更加深入了解细胞膜的透性变化,并判断植物细胞对于环境变化的适应能力。
电导法植物实验报告
一、实验目的1. 了解电导法在植物逆境生理研究中的应用。
2. 掌握电导法测定植物细胞膜透性的原理和操作步骤。
3. 通过电导法,分析不同逆境条件下植物细胞膜透性的变化,探讨植物的抗逆性。
二、实验原理植物细胞膜是细胞与环境之间进行物质交换的主要通道,也是细胞感受环境胁迫最敏感的部位。
当植物受到逆境胁迫时,细胞膜的选择透过性会发生改变,导致细胞内物质(尤其是电解质)大量外渗,从而引起组织浸泡液的电导率发生变化。
通过测定外渗液电导率的变化,可以反映出质膜的伤害程度和所测材料抗逆性的大小。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:小麦、玉米、大豆等植物叶片。
2. 实验仪器:电导率仪、电子天平、恒温箱、剪刀、纱布、无离子水、NaCl溶液等。
四、实验步骤1. 准备工作:将植物叶片用纱布擦拭干净,剪成适当大小,称取2g,放入烧杯中。
2. 设置实验组:将烧杯放入恒温箱中,分别设置不同逆境条件(如高温、低温、干旱、盐渍等),处理时间为24小时。
3. 对照组设置:将烧杯放入室温条件下,作为对照组。
4. 电导率测定:将处理后的叶片浸泡在无离子水中,待叶片恢复原状后,用电子天平称取2g,放入电导率仪的烧杯中,读取电导率。
5. 数据记录:记录不同逆境条件下植物叶片的电导率。
五、实验结果与分析1. 不同逆境条件下植物叶片的电导率变化:通过实验数据可以看出,在高温、低温、干旱、盐渍等逆境条件下,植物叶片的电导率均高于对照组,说明逆境胁迫导致植物细胞膜透性增大,电解质外渗。
2. 植物抗逆性分析:通过比较不同植物在相同逆境条件下的电导率变化,可以分析植物的抗逆性。
实验结果表明,小麦、玉米、大豆等植物在高温、低温、干旱、盐渍等逆境条件下的电导率依次增大,说明它们的抗逆性依次增强。
六、实验结论1. 电导法可以有效地测定植物细胞膜透性,为研究植物逆境生理提供了一种简便、快速的方法。
2. 植物在逆境条件下,细胞膜透性增大,电解质外渗,导致电导率升高。
植物细胞质膜透性的测定(电导率法)
45实验45 植物细胞质膜透性的测定(电导仪率法)作者:佚名资源来源:本站原创点击数:1933 更新时间:2008-5-26实验四十五植物细胞质膜透性的测定一、目的植物细胞质膜是细胞与外界环境的一道分界面,对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。
但植物常受到外界不良因子的影响,而不同植物种类其抗逆性则不同。
用电导仪率法测定植物质膜透性的变化,可作为植物抗逆性的生理指标之一。
本实验主要测定低温对细胞质膜透性的影响,并掌握用电导仪法测定植物细胞质膜透性的原理及方法。
二、原理植物细胞的细胞质由一层质膜包围着,这种质膜具有选择透性的独特功能。
植物细胞与外界环境之间发生的一切物质交换都必须通过质膜进行。
各种不良环境因素对细胞的影响往往首先作用于这层由类脂和蛋白质所构成的生物膜。
如极端的温度、干旱、盐渍,重金属离子(如Cd2+等)和大气污染物(如SO2、HF、O3)等都会使质膜受到不同程度的损伤,其表现往往为细胞膜透性增大,细胞内部分电解质外渗,外液电导率增大。
该变化可用电导仪测定出来。
细胞膜透性变得愈大,表示受害愈重,抗性愈弱,反之则抗性愈强。
三、材料、仪器设备1. 材料:植物叶片。
2. 仪器设备:电导仪;电子天平;冰箱;真空泵;真空干燥器;恒温培养箱;电炉;50ml烧杯;50ml量筒;小镊子;纱布;表皿;滤纸条;镜头纸;剪刀;玻棒;胶头滴管;瓷盘。
四、实验步骤1. 清洗用具所用玻璃用具均需先用洗衣粉清洗,然后用自来水、蒸馏水洗3次,干燥后备用。
2. 实验材料的准备及处理选取叶龄相似的植物叶片,剪下后用湿布包住。
实验时用自来水将供试叶片冲洗,除去表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1cm2的小叶片(或用直径为1的打孔器钻取小园片),注意除掉大叶脉。
将剪下的小叶片混合均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中。
作如下处理:A杯放入冰箱0℃以下作低温处理,处理15~30min后取出(供试叶片也可以在实验前低温处理好待用,处理温度及时间依不同植物叶片耐寒性而定),加入蒸馏水50ml。
植物生理生化实验原理和技术
植物生理生化实验原理和技术植物生理生化实验旨在研究植物生命过程中的生理和生化相关現象,改进对植物的了解及应用。
以下是实验原理和常用技术。
1. 光合作用测定:光合作用是植物生理的重要过程之一,可使用光合速率仪测量光合速率。
原理是通过测量植物叶片释放或吸收的氧气量,来间接测定光合速率。
2. 蒸腾作用测定:蒸腾作用是植物水分代谢的关键环节。
可利用蒸腾速率仪测量植物叶片释放的水蒸气量,从而确定植物的蒸腾速率。
3. 细胞呼吸测定:细胞呼吸是植物细胞产能的主要途径,可以通过测量释放的二氧化碳量来测定细胞呼吸速率。
常用的测定方法有测量呼吸速率的气体分析仪或密闭系统测定二氧化碳的累积。
4. 酶活性测定:酶是植物生物化学过程中的重要催化剂。
酶活性的测定可以通过测量糖类、蛋白质、核酸等底物的代谢速率,或通过测量底物与产物之间的光学、电化学变化来实现。
常用的方法有光谱法、酶促反应连续监测法等。
5. 色素提取:植物体内的色素对光合作用和其他生化过程至关重要。
常用的色素提取方法包括酒精提取、乙醚提取等。
提取后的色素溶液可以通过紫外-可见光谱仪进行定量测定。
6. 蛋白质测定:蛋白质是植物细胞内的重要有机物。
常用的蛋白质测定方法包括巴雷特试剂法、劳氏试剂法、比色试剂法等。
通过测定样品和标准溶液的吸收值,可以计算出蛋白质的含量。
7. 酶动力学测定:酶动力学是研究酶催化作用速度的科学。
可以通过测定底物浓度、酶浓度、反应时间等因素对酶活性的影响来研究酶的催化机理。
常用的测定方法有Michalis-Menten曲线法、双倒数法等。
8. 膜透性测定:膜透性是指物质穿过细胞膜的能力。
可以通过测定溶液中离子浓度的变化,来评估膜透性的改变。
常用的测定方法有电导率法、吸光度法等。
9. RNA/DNA提取和定量:RNA/DNA是植物遗传信息的主要表达形式。
可以使用相关试剂盒从植物样品中提取RNA/DNA,然后通过紫外-可见光谱仪或荧光定量仪测定其浓度。
植物细胞膜透性的测定
实验二植物细胞膜透性的测定——电导仪法一、原理:植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。
在正常情况下,细胞膜对物质具有选择透过性能力,当植物体受到逆境影响时,如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内的电解质外渗,以致植物细胞浸提液的电导率增大。
膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关,也与植物抗逆性的强弱有关。
这样,比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度,即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱,因此,电导法目前已成为作物抗逆性栽培、育种上坚定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。
二、植物材料及仪器设备:1.植物材料:黄瓜叶片(完全培养下的黄瓜叶片和不同浓度铅溶液胁迫下的黄瓜叶片)2.仪器设备:冰箱、恒温箱、真空泵(附真空干燥器)1套、电导仪、恒温水浴箱、剪刀、打孔器、镊子、试管架、具塞普通试管5支、10ml移液管(或移液枪)、玻璃棒、吸球、洗瓶、滤纸、保鲜膜等。
三、实验步骤:1.清洗用具:实验所用的玻璃器皿用洗衣粉清洗→自来水洗干净→去离子水润洗→倒置在试管架上,备用。
2.将不同处理的黄瓜叶片分别用自来水洗干净并用去离子水润洗,再用洁净滤纸吸干表面水分。
用6~8min的打孔器避开主脉打取圆叶片(或切割成大小一致的叶块),每组叶片打取30片小圆片,分装在2支洁净的试管中,每管放15片。
3.在装有叶小圆片的试管加入15ml去离子水,用保鲜膜封口,并用解剖针将保鲜膜扎几孔(以防止叶圆片在抽气时翻出试管)以便抽气。
然后将试管放入真空干燥箱中用真空泵抽气10min,以抽出细胞间隙的空气,然后缓缓打开进气阀,空气重新进入干燥箱时水即被压入组织中而使叶片下沉(即水渗入细胞间隙,叶片变成半透明状,沉入水下)4.将以上试管置室温下30min,期间要多次摇动试管,促进水分交换。
5.30min后将各试管充分摇匀,用电导仪测其初电导值,同时测定去离子水的电导值作为空白对照组。
抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定方法79498
抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性测定方法一、超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(氮蓝四唑光化还原法)1、试剂的配制(1)0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS,pH7.8):A母液:0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O(分子量358.14)71.7g;B母液:0.2mol/L磷酸二氢钠溶液:取NaH2PO4·2H2O(分子量156.01)31.2g。
分别用蒸馏水定容到1000ml。
0.05mol/L PBS(pH7.8)的配制:分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml,B母液(NaH2PO4) 21.25ml,用蒸馏水定容至1000ml。
参考文献:李合生主编:植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社,2000:267~268。
(2)14.5mM甲硫氨酸溶液:取2.1637g Met用磷酸缓冲液(pH7.8)定容至1000ml。
(3)30μM EDTA-Na2溶液:取0.001gEDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至100ml。
(4)60μM核黄素溶液:取0.0023g核黄素用磷酸缓冲液定容至100ml,避光保存。
(5)2.25mM 氮蓝四唑(NBT)溶液:取0.1840g NBT用PBS定容至100ml,避光保存。
酶液制备:取0.2g(可视情况调整)样品(新鲜叶片或根系)洗净后置于预冷的研钵中,加入1.6ml 50mmol/L预冷的磷酸缓冲液(pH7.8)在冰浴上研磨成匀浆,转入离心管中在4℃、12000g下离心20min,上清液即为酶液。
2、酶活性测定(1)反应混合液配制(以60个样为准):分别取Met溶液162ml,EDTA-Na2溶液0.6ml,磷酸缓冲液5.4ml,NBT溶液6ml,核黄素溶液6ml,混合后摇匀;(2)分别取3ml反应混合液和30μl酶液于试管中(3)将试管置于光照培养箱中在4000 lux光照下反应20min;同时做两支对照管,其中1支试管取3ml反应混合液加入30μl PBS(不加酶液)照光后测定作为最大光还原管,另1支只加缓冲液置于暗中测定时用于调零。
植物细胞质膜透性的测定(电导率法)
45实验45 植物细胞质膜透性的测定(电导仪率法)作者:佚名资源来源:本站原创点击数:1933 更新时间:2008-5-26实验四十五植物细胞质膜透性的测定一、目的植物细胞质膜是细胞与外界环境的一道分界面,对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。
但植物常受到外界不良因子的影响,而不同植物种类其抗逆性则不同。
用电导仪率法测定植物质膜透性的变化,可作为植物抗逆性的生理指标之一。
本实验主要测定低温对细胞质膜透性的影响,并掌握用电导仪法测定植物细胞质膜透性的原理及方法。
二、原理植物细胞的细胞质由一层质膜包围着,这种质膜具有选择透性的独特功能。
植物细胞与外界环境之间发生的一切物质交换都必须通过质膜进行。
各种不良环境因素对细胞的影响往往首先作用于这层由类脂和蛋白质所构成的生物膜。
如极端的温度、干旱、盐渍,重金属离子(如Cd2+等)和大气污染物(如SO2、HF、O3)等都会使质膜受到不同程度的损伤,其表现往往为细胞膜透性增大,细胞内部分电解质外渗,外液电导率增大。
该变化可用电导仪测定出来。
细胞膜透性变得愈大,表示受害愈重,抗性愈弱,反之则抗性愈强。
三、材料、仪器设备1. 材料:植物叶片。
2. 仪器设备:电导仪;电子天平;冰箱;真空泵;真空干燥器;恒温培养箱;电炉;50ml烧杯;50ml量筒;小镊子;纱布;表皿;滤纸条;镜头纸;剪刀;玻棒;胶头滴管;瓷盘。
四、实验步骤1. 清洗用具所用玻璃用具均需先用洗衣粉清洗,然后用自来水、蒸馏水洗3次,干燥后备用。
2. 实验材料的准备及处理选取叶龄相似的植物叶片,剪下后用湿布包住。
实验时用自来水将供试叶片冲洗,除去表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1cm2的小叶片(或用直径为1的打孔器钻取小园片),注意除掉大叶脉。
将剪下的小叶片混合均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中。
作如下处理:A杯放入冰箱0℃以下作低温处理,处理15~30min后取出(供试叶片也可以在实验前低温处理好待用,处理温度及时间依不同植物叶片耐寒性而定),加入蒸馏水50ml。
10 2014细胞(质膜)透性测定 (2)
实验原理
1. 植物组织在受到各种不利的环境条件(如干旱、低温、
高温、盐渍和大气污染)危害时,细胞膜的结构和功 能首先受到伤害,细胞膜透性增大
2. 将受到伤害的组织浸入无离子水中,其外渗液中电解 质的含量比正常组织外渗液中含量增加。组织伤害越 严重,电解质含量增加越多。 3. 通过测定组织浸提液电导率,可以了解组织细胞膜通
透性变化,反应植物抗逆性强弱或受到伤害的程度。
实验原理
不良环境 (低温处理) 植物材料放入 无离子水中 测外界水溶液 电导率变化 膜透性变得越大 受害越重 抗性越弱
细胞膜损伤 (透性增大)
细胞内电解质外渗 至外界溶液
实验方法
1. 将植物材料切割成一定大小的小块,不同低温处理一定时间后,
浸泡在无离子水中一定时间,用电导率仪测外界水溶液中的电解 质,得到电导值(1);
本次实验报告
和
课程总结 下周五之前交给班长
1. 2. 3. 未开电源前,检查表针是否指零; 开关扳在“校正”位置,打开开关,预热15分钟; 调节“常数”钮,与电极常数标称值一致; (例:电极常数为0.98,则把“常数”钮白线对准0.98)
4.
5. 6.
调节“调正”旋钮使指针满刻度;
将量程开关扳在最大量程,然后逐档下降,以防止指针打弯; 电极浸入待测液中,把开关扳在“测量”挡,读取表针指示值,再 乘以量程开关指向的倍数,即为实际电导率(量程开关指红色时, 读表中红色数字;指黑色时则读黑色数字)。 (读数时指针位于中间为宜)
电极常数标称值
电极
注意事项
电导率数值小于300uS/cm时,高低周转换开关扳向“低周”;
电导率数值大于300uS/cm时,高低周转换开关扳向“高周”。
细胞生物学实验《细胞膜的渗透性》
了解细胞膜渗透性的机制和影响 因素有助于深入理解生物学过程 和疾病机制,为疾病诊断和治疗
提供新的思路和方法。
02
CATALOGUE
实验原理
细胞膜的结构和功能
01
细胞膜是由磷脂双分子层和镶嵌 其中的蛋白质组成的半透性膜, 具有选择透过性,能够控制物质 进出细胞。
02
细胞膜的主要功能是维持细胞的 内部环境稳定,参与细胞信号转 导,以及实现细胞与外界环境的 物质交换。
渗透性的定义和机制
渗透性是指物质通过细胞膜的能力,是细胞膜的一种重要特 性。
物质通过细胞膜的方式主要有被动运输和主动运输两种。被 动运输是物质顺浓度梯度进行的跨膜运输,不需要消耗能量 ;主动运输则是物质逆浓度梯度进行的跨膜运输,需要消耗 能量。
影响细胞膜渗透性的因素
温度
温度会影响细胞膜的流动性,进而影响其渗透性。一般来 说,温度升高会使细胞膜的流动性增加,渗透性增大。
究可以拓展其在药物研发、疾病诊断和治疗等方面的应用。
03
深入研究细胞膜的结构与功能
细胞膜的结构和功能是密切相关的,深入研究细胞膜的结构与功能有助
于更深入地理解细胞膜渗透性的机制和影响因素。
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脂溶性
物质的脂溶性越强,越容易通过细胞膜。这是因为脂溶性 物质可以溶解在磷脂分子中,从而更容易穿过细胞膜。
物质浓度
物质的浓度也会影响其通过细胞膜的能力。一般来说,浓 度差越大,物质通过细胞膜的速率越快。
细胞膜的完整性
细胞膜的完整性对于维持其渗透性至关重要。如果细胞膜 受到损伤或破裂,其渗透性会受到影响,可能导致物质大 量进出细胞,影响细胞的正常功能。
逆境对植物细胞膜透性的影响测定
逆境对植物细胞膜透性的影响【原理】植物在受到各种逆境(如干旱、低温、高温、盐渍和大气污染等)危害时,细胞膜的结构和功能首先受到伤害,导致膜透性增大。
因此细胞膜透性的变化反映了外部不良环境对植物细胞的伤害程度,同时细胞膜在逆境下的稳定性也反映了植物抗逆性的高低逆境条件下植物细胞的膜系统首先受到伤害,细胞膜透性增大,内容物外渗,若将受伤害的组织浸入去离子水中,其外渗液中电解质的含量比正常组织外渗液中含量增加。
组织受伤害越严重,电解质含量增加越多。
用电导仪测定外渗液电导率的变化,可以反映出质膜受伤害的程度。
【仪器设备】真空泵(3个)、DDS-307型电导仪(2-3台)、恒温水浴(2个)、剪刀15把、试管100支(大小与真空泵管子相配套,管子能放到试管里面,并密封严)、电子天平2台、玻璃棒15根,移液管:10mL,15支、滤纸(3盒)、烘箱1个【试剂】去离子水。
【材料】正常生长的以及经逆境处理的小麦、玉米或其他植物的叶片。
【方法与步骤】1、选取小麦或其他作物一定叶位和叶龄的功能叶片,一份放入水中作为对照,另一份放入40℃烘箱中或其他胁迫条件下使其萎蔫,作为处理。
对照和处理各取3个叶片,用自来水洗去表面灰尘,再用去离子水冲洗一次,用干净纱布擦去水分。
2、将叶片叠起,剪取0.5cm长的片段12个(或用打孔器打取12个叶圆片),放入试管内,然后加入10mL去离子水。
对照和处理均设3个重复,将试管放入真空干燥器内,开动真空泵抽气,以抽出细胞间隙空气。
缓慢放入空气水即渗入细胞间隙,叶片变成半透明状,叶片全部沉入水底(约10min)。
取出试管,间隔2~3min震荡一次,室温下保持30min。
3.外渗液电导率测定:将DDS-307型电导仪电极插入外渗液,测定其电导值(L1)。
测定之后,将试管放入沸水浴中加热3~5min以杀死组织。
待冷至室温后,再次测定外渗液的电导值(L2)4.结果计算(1)以细胞膜相对透性大小表示细胞受害的程度。
植物细胞质膜透性的测定
实验四十五植物细胞质膜透性的测定一、目的植物细胞质膜是细胞与外界环境的一道分界面,对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。
但植物常受到外界不良因子的影响,而不同植物种类其抗逆性则不同。
用电导仪率法测定植物质膜透性的变化,可作为植物抗逆性的生理指标之一。
本实验主要测定低温对细胞质膜透性的影响,并掌握用电导仪法测定植物细胞质膜透性的原理及方法。
二、原理植物细胞的细胞质由一层质膜包围着,这种质膜具有选择透性的独特功能。
植物细胞与外界环境之间发生的一切物质交换都必须通过质膜进行。
各种不良环境因素对细胞的影响往往首先作用于这层由类脂和蛋白质所构成的生物膜。
如极端的温度、干旱、盐渍,重金属离子(如Cd2+等)和大气污染物(如SO2、HF、O3)等都会使质膜受到不同程度的损伤,其表现往往为细胞膜透性增大,细胞内部分电解质外渗,外液电导率增大。
该变化可用电导仪测定出来。
细胞膜透性变得愈大,表示受害愈重,抗性愈弱,反之则抗性愈强。
三、材料、仪器设备1.材料:植物叶片。
2.仪器设备:电导仪;电子天平;冰箱;真空泵;真空干燥器;恒温培养箱;电炉;50ml 烧杯;50ml量筒;小镊子;纱布;表皿;滤纸条;镜头纸;剪刀;玻棒;胶头滴管;瓷盘。
四、实验步骤1.清洗用具所用玻璃用具均需先用洗衣粉清洗,然后用自来水、蒸馏水洗3次,干燥后备用。
2.实验材料的准备及处理选取叶龄相似的植物叶片,剪下后用湿布包住。
实验时用自来水将供试叶片冲洗,除去表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1cm2的小叶片(或用直径为1的打孔器钻取小园片),注意除掉大叶脉。
将剪下的小叶片混合均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中。
作如下处理:A杯放入冰箱0℃以下作低温处理,处理15~30min后取出(供试叶片也可以在实验前低温处理好待用,处理温度及时间依不同植物叶片耐寒性而定),加入蒸馏水50ml。
植物细胞的渗透性
六、作业
• 完成以下表格,并回答几种浓度中质壁分离现象程度? 试分析原因。 表4-1植物细胞渗透势测定记载表 蔗糖浓度 (mol/L) 质壁分离的 相对程度
实验人
日期
材料名称
Байду номын сангаас
实验室温度
• (三)仪器设备 • 显微镜,载玻片,盖玻片,温度计,尖头 镊子,刀片,小培养皿(直径为6cm), 试剂瓶,烧杯,容量瓶,量筒,吸管,吸 水纸等。
三、实验步骤
• 1 、取干燥、洁净的培养皿4套编号,将配制好的 不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿,使之 成一薄层,盖好皿盖备用。 • 2 、用镊子撕取(或用刀片刮取)供试材料的表 皮,大小以0.5 cm × 0.5 cm 为宜,迅速分别投 入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,每一 浓度 4~5 片。(为了便于观察,无色材料可先将 切片于 0.03% 中性红内染色 5 min 左右,吸去水 分,再浸入蔗糖溶液中,但如不染色即能区别质 壁分离时,仍以不染色为宜)。
一、目的 通过实验观察了解植物细胞膜的渗透性
二、原理
• 植物细胞是一个渗透系统,如果将其放入高渗溶 液中,细胞内水分外流而失水,细胞会发生质壁 分离现象,若细胞在等渗或低渗溶液中则无此现 象;如果先将其放入高渗溶液中,再将其放入低 渗溶液中,质壁分离现象会逐渐恢复;细胞处在 等渗溶液中,此时细胞的压力势为零,那么细胞 的等渗势就等于溶液的渗透势即为细胞的水势。 • 当用一系列梯度的蔗糖液观察细胞质壁分离 时,细胞的实际等渗浓度略低于刚刚引起初始质 壁分离溶液的浓度,
?当用一系列梯度的蔗糖液观察细胞质壁分离时细胞的实际等渗浓度略低于刚刚引起初始质壁分离溶液的浓度当用一系列梯度的蔗糖液观察细胞质壁分离时细胞的实际等渗浓度略低于刚刚引起初始质壁分离溶液的浓度二实验材料试剂与仪器设备?一实验材料?洋葱鳞茎紫鸭跖草苔藓红甘蓝或黑藻丝状藻红杜鹃花瓣菊花瓣等
1 实验一 植物细胞膜透性的测定-电导仪法-柯20140402上课-中加园艺-农资-茶加工
四、植物材料: 正常叶片
《植物生理生化实验B》
低温处理(-20℃ 30min) 叶片 高温处理(50℃ 30min) 叶片 桂花叶片----功能叶
福建农林大学生命科学学院2011级生物基地班/柯玉琴
五、仪器设备:
《植物生理生化实验B》
真空抽气设备、 电导仪、恒温水浴 、试管架、普通具 塞玻璃试管5支、 1 0 ml 移液管、打孔 器、镊子、记号笔
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沸水浴煮10min
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福建农林大学生命科学学院2011级生物基地班/柯玉琴
七、结果计算:
《植物生理生化实验B》
1、相对电导度=初电导值-空白电导值/终电导值-空白电导值
相对电导度的大小表示细胞膜受伤害的程度。
逆境叶片的相对电导度-正常叶片的相对电导度 2、伤害率(%)= ×100 1-正常叶片的相对电导度
膜机械损伤以及逆境和衰老过程中的膜脂过氧化作用,都可以 增大细胞膜通透性。因此,细胞质膜透性的测定常作为作物抗
性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实 用的重要生理指标。
福建农林大学生命科学学院2011级生物基地班/柯玉琴
二、目的要求:
《植物生理生化实验B》
1、了解细胞膜透性测定在实际应用中意义; 2、掌握电导仪、真空设备使用方法; 3、掌握电导仪法测定植物细胞膜透性的原理 及要点; 4、观察并分析高、低温因子对叶片细胞膜透 性的影响。
福建农林大学生命科学学院2011级生物基地班/柯玉琴
取样方法:
《植物生理生化实验B》
A)用打孔器打小圆片 B)用剪刀剪成大小基本一致的小方块
2 0.5cm
福建农林大学生命科学学院2011级生物基地班/柯玉琴
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实验四十五植物细胞质膜透性的测定
一、目的
植物细胞质膜是细胞与外界环境的一道分界面,对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要作用。
但植物常受到外界不良因子的影响,而不同植物种类其抗逆性则不同。
用电导仪率法测定植物质膜透性的变化,可作为植物抗逆性的生理指标之一。
本实验主要测定低温对细胞质膜透性的影响,并掌握用电导仪法测定植物细胞质膜透性的原理及方法。
二、原理
植物细胞的细胞质由一层质膜包围着,这种质膜具有选择透性的独特功能。
植物细胞与外界环境之间发生的一切物质交换都必须通过质膜进行。
各种不良环境因素对细胞的影响往往首先作用于这层由类脂和蛋白质所构成的生物膜。
如极端的温度、干旱、盐渍,重金属离子(如Cd2+等)和大气污染物(如SO2、HF、O3)等都会使质膜受到不同程度的损伤,其表现往往为细胞膜透性增大,细胞内部分电解质外渗,外液电导率增大。
该变化可用电导仪测定出来。
细胞膜透性变得愈大,表示受害愈重,抗性愈弱,反之则抗性愈强。
三、材料、仪器设备
1.材料:植物叶片。
2.仪器设备:电导仪;电子天平;冰箱;真空泵;真空干燥器;恒温培养箱;电炉;50ml 烧杯;50ml量筒;小镊子;纱布;表皿;滤纸条;镜头纸;剪刀;玻棒;胶头滴管;瓷盘。
四、实验步骤
1.清洗用具
所用玻璃用具均需先用洗衣粉清洗,然后用自来水、蒸馏水洗3次,干燥后备用。
2.实验材料的准备及处理
选取叶龄相似的植物叶片,剪下后用湿布包住。
实验时用自来水将供试叶片冲洗,除去表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1cm2的小叶片(或用直径为1的打孔器钻取小园片),注意除掉大叶脉。
将剪下的小叶片混合均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中。
作如下处理:A杯放入冰箱0℃以下作低温处理,处理15~30min后取出(供试叶片也可以在实验前低温处理好待用,处理温度及时间依不同植物叶片耐寒性而定),加入蒸馏水50ml。
B杯常温处理,加入蒸馏水50ml。
将A、B二杯放入真空干燥器,用真空泵抽气20—30min(以抽出细胞间隙中的空气),然后缓缓放入空气,从真空干燥器中取出A、B杯。
C杯加入蒸馏水50ml,称重,盖上表皿,置于电炉上煮沸10~15min(煮沸时间依不同植物叶片而定),冷却后再称重并加蒸馏水至原重量,继续浸泡叶片。
将A、B、C三杯放置室温下浸提1 h左右(经常摇动,以有利电解质外渗)。
然后将叶片从杯中夹出进行下一步测定。
3.电导率测定
用电导仪分别测定A、B、C三杯的电导率,同时测定蒸馏水(空白)的电导率(注意:每测定完一个样液后,用蒸馏水漂洗电极,再用滤纸将电极擦干,然后进行下一个样液的测定),所测得的结果记入下表:
电导率测定记录表。