半微量蒸馏法测定植物的全氮含量

半微量蒸馏法测定植物的全氮含量摘要主要介绍了利用h2so4-h2o2消煮法、半微量蒸馏法检测植物全氮时的注意事项，以为准确测定植物全氮提供参考。

关键词植物全氮；测定；半微量蒸馏法；注意事项

中图分类号 tq444；ts2 文献标识码 a 文章编号 1007-5739（2012）22-0226-01

氮关系到植物生长、产量形成与品质改善。因此，掌握作物全氮含量，在生产和科研上有重要的意义。一般植物含氮占干物重的0.3%~5.0%，氮素主要以有机氮（如蛋白质和氨基酸等）形态存在于植物组织中。该试验用h2so4-h2o2消煮法、半微量蒸馏法检测植物全氮的含量。植物组织中的含氮有机化合物，在浓h2so4溶液中分解出新生态铵，h2o2具有强烈的氧化作用，分解h2so4所没有破坏的有机酸和碳，变成co2和水，使有机氮转化成铵盐，然后加碱蒸，用硼酸溶液吸收氨，用标准酸滴定，可同时适用n、p、k的测定。试验过程中要提高测定准确性，需注意以下几点。

（1）选用质量合格的仪器、药品、试剂、纯水。一是在实验开始前1周对仪器进行清洗、调试、校准，确保仪器正常使用，测定中用的吸管、消化管、三角瓶、容量瓶要冲洗干净；二是购买的药品要纯度高、质量好，特别是h2o2应不含氮和磷，其质量影响消煮快慢，为保证实验效果，一般采用上海生产的医用h2o2，h2o2在光照和加热的条件下易分解，应存于阴凉干燥处。同时，酸性条

件也能阻止h2o2分解，故保存时可加入适量h2so4；三是试剂的配制要精确，配制的2% h3bo3指示剂溶液ph值要调解至4.5（紫红色），用酸度计测量时一定要确保测量结果准确。指示剂混合液配置好后应尽快使用，使用中若ph值发生变化，要立即用稀酸或碱调节；四是纯水机不使用时应关掉电源、水源，再将机内储存的纯水全部排放。纯水机在每次使用后，要冲洗5 min。另外，在连续使用一段时间后，应将机内的纯水全部排放1次，以清洗纯水机；五是试验中一般用聚已烯或玻璃容器盛装纯水，容器使用前用20%盐酸溶液浸泡2~3 d，再用待储存的水反复冲洗，然后注满，浸泡6 h以上方可使用[1-2]。

（2）试验人员每次称取药品、土样要精准，吸取试剂时凹面要与吸管的刻度相切，同时，努力学习专业技术知识，提高化验能力，尽量减少人为误差对结果的影响。

（2）因试样烘干过程中可能使全氮量发生变化，所以测量全氮含量应用风干样品测定。

（3）使用万分之一分析天平称取样品，精确到0.000 1 g，使用前用200 g砝码进行校准。称样量决定于n、p、k含量，健壮茎叶称0.5 g，种子称0.3 g，老熟茎叶称1 g，新鲜茎叶样按干样的5倍称样。称样量大时，适当增加浓h2so4用量。

（4）加入浓h2so4的植物样品一定要放置过夜，使消煮管中待测样品被酸液浸透部分碳化后，再进行消煮。

（5）在消煮时，小火加热至浓h2so4发白烟，再继续升温，直至溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加10滴h2o2，并不断摇动消化管，再放到消煮炉上继续加热。此时可将炉温调到380 ℃，在微沸状态下，消煮7~10 min取下，稍冷后重复加h2o2，每次添加量逐渐减少，一般籽粒重复4次，秸秆重复5~6次即可澄清。加h2o2应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶颈内壁上，h2o2会很快分解，将不起氧化作用，若遗留下来会影响磷的显色。消煮的温度应控制在380~390 ℃，此时消煮的溶液保持微沸，硫酸蒸汽在消化管上部1/3处冷凝流回。超过400 ℃溶液将剧烈沸腾，硫酸蒸汽达到消化管顶部甚至溢出，引起硫酸铵热分解而导致氮素损失。

（6）消煮过程中，为避免h2o2残留对比色测定的影响，在溶液呈无色或清亮色后，继续加热10 min。冷却后，用少量水冲洗小漏斗于消化容量管中，将消煮液转移到100 ml容量瓶中，并用纯水冲洗2次消化管，然后定容，摇匀。每批消煮的同时进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。

（7）蒸馏时，对清洗过的蒸馏装置检查是否漏气和管道是否洁净，然后吸取定容后的消煮液10 ml注入半微量蒸馏器的内室。在150 ml三角瓶中加入5 ml 2% h3bo3指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于h3bo3液面以上3～4 cm处，然后向蒸馏器内慢慢加入naoh 溶液，通入蒸汽蒸馏。待馏出物体积50~60 ml时，停止蒸馏，用少量已调节至ph值为4.5的水冲洗冷凝管末端。开放冷凝水时，

勿使馏出液温度超过40 ℃，一般籽粒蒸馏2 h，秸秆蒸馏2.5~3.0 h，但由于仪器型号及蒸馏电流设置不同，应首先作试验确定，即用纳氏试剂逐分钟检查蒸馏液中是否含有铵。

（8）在用酸标准溶液滴定时，馏出液由蓝绿色突变为紫红色，终点的颜色应和空白测定的滴定终点颜色相同。与此同时，进行空白测定的蒸馏、滴定，以校正试剂和滴定误差。

（9）如果样品含氮量高，可将消煮液定容，取一部分进行定容，计算结果按所取溶液的分取倍数计算[3-4]。

（10）每批样品测定时，要做空白试验、平行试验，并带1个参比样，以检测滴定结果的准确性，不准确的重新称样。

（11）试验人员要认真填写原始记录，字迹工整，记录齐全，更改规范并注意保存，要做好样品的称取、转移、定容，并且每一项操作都要认真核对，避免人为出错。

参考文献

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[2] 周德庆，马敬军，徐晶晶.半微量蒸馏法测定水产品中挥发性盐基氮不确定度的研究[j].中国食品学报，2003（z1）：206-210.

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[4] 黄瑾，章厉劼.buchik-370全自动凯氏定氮仪与半微量蒸馏

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