170925 3-1 显微镜油镜的使用
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16. 观察完毕，擦拭镜头（次数？）。
17. 复原：先将电压调节旋钮复原， 关闭主开关，切断电源，放开粗 调锁挡。
18. 放置归位。
19. 样品归位。
思考题
油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注 意些什么？
使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接
用高倍镜或油镜观察？
油镜使用的原理
油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头 之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受 到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介 质是一层油（其折射率与玻片的相近，n=1.52），则几 乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加 清晰。
显微镜物镜的分类
①低倍物镜 指1×—6×，NA值为0.04—0.15； ②中倍物镜 指6×—25×，NA值为0.15— 0.40； ③高倍物镜 指25×—63×，NA值为0.35—0.95； ④油浸物镜 指90×—100×，NA值为1.25—1.40。
5.使用完毕，用擦镜液（乙醚7份，纯酒精3份）擦拭镜 头。 6.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可 单手拿，更不可倾斜拿。 7.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐 蚀镜片。
实验程序
显微镜的使用方法
1. A、整理后显微镜罩。B、接通 电源。
2. 打开主开关。 3. 移动电压调整旋，使亮度适中。 4. 把标本固定在再物台上。 5. 放松粗调锁挡。 6. 用低倍物镜，旋转粗调和微控
电子显微镜：The Transmission Electron Microscope
The Scanning Electron Microscope
Confocal Microscopy
Scanning Probe Microscopy （scanning tunneling microscope）
OLYMPUS生物显微镜是由日本进口的一种双筒光学显微镜，它使 用方便，分辨率高，并且有立体感。是目前研究微生物的良好工具。
显微镜的结构
录像演示
实验程序
显微镜保养和使用中的注意事项：
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布或滤纸，以 保证光洁度 3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油 镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用 粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯， 以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。
显微镜油镜的使用
目的要求 显微镜油镜使用的原理 实验材料 实验程序 思考题
目的要求
学习并掌握显微镜油镜的使用技术及维护的基本知识 使用油镜观察细菌的几种基本形态
Phase 1: Beginning of Microbiology
1664年，英国人罗伯特-虎克（Robert Hooke）曾原始的显微镜对生长在皮革表 面及蔷薇枯叶上的霉菌进行观察。
显微镜油镜使用的原理
显微镜的构造
1.光学部分:目镜 、 物镜 、 照明装置(聚光镜、
虹彩光圈等). 它使检视物放大,造成物象.
2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、
载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等 部件.它起着支持 调节 固定等作用.
油镜使用的原理
油镜使用的原理
显微镜的放大倍数和分辨率
1676年，微生物学的先驱荷兰人列文-虎克首次观察 到了细菌。他没有上过大学，是一个只会荷兰语的小商 人，但却在1680年被选为英国皇家学会的会员。
1725年
1690年
源自文库
1720年
1760年
1790年
1840年
1881年
1890年
Microscopes used by Louis Pasteur and Joseph Lister, late 19th century.
光学显微镜：Bright-Field Light Microscope，DarkField Light Microscope，Phase-Contrast Light Microscope，Differential Interference Contrast Microscope，Fluorescence Microscope
实验材料
显微镜、香柏油、乙醚酒精混合液（乙醚7份，纯酒 精3份）、擦镜纸、吸水纸等。
compound microscope, lens paper and lens cleaner, immersion oil, glass slides, cover slips
奥林巴斯（OLYMPUS）生物显微镜
制钮来进行对焦。 7. 调节双目镜筒间距和视度差。 8. 再适当调节照明度。 9. 使焦点正确地对准标本。 10. 锁紧粗调锁挡。 11. 调节孔径光栏。
12. 依次用低、中、高倍镜观察。
13. 旋转转换器，将40倍物镜调至空 挡，在标本观察区上滴镜油。
14. 旋转转换器将100倍物镜浸入镜 油
15. 油镜观察：与普通光学显微镜方 法一致。
1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能 力，可用公式表示为：D=λ/2n·sinθ （ D=λ/2NA ） 式中D：物镜分辨 出物体两点间的最短距离。
：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率 θ＝ /2 ：镜口角（即入射角）
• 数值孔径（NA）是透镜与被检物体之间介质的折射率（n） 和孔径角（2θ ）半数的正弦之乘积。
• 用公式表示如下：NA = n * sinθ 。 • 与分辨率成正比，与放大率成正比，焦深与数值孔径的平方
成反比，NA值增大，视场宽度与工作距离都会相应地变小。 • 观察时，聚光镜的NA值应等于或略大于物镜的NA值。
17. 复原：先将电压调节旋钮复原， 关闭主开关，切断电源，放开粗 调锁挡。
18. 放置归位。
19. 样品归位。
思考题
油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注 意些什么？
使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接
用高倍镜或油镜观察？
油镜使用的原理
油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头 之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受 到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介 质是一层油（其折射率与玻片的相近，n=1.52），则几 乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加 清晰。
显微镜物镜的分类
①低倍物镜 指1×—6×，NA值为0.04—0.15； ②中倍物镜 指6×—25×，NA值为0.15— 0.40； ③高倍物镜 指25×—63×，NA值为0.35—0.95； ④油浸物镜 指90×—100×，NA值为1.25—1.40。
5.使用完毕，用擦镜液（乙醚7份，纯酒精3份）擦拭镜 头。 6.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可 单手拿，更不可倾斜拿。 7.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐 蚀镜片。
实验程序
显微镜的使用方法
1. A、整理后显微镜罩。B、接通 电源。
2. 打开主开关。 3. 移动电压调整旋，使亮度适中。 4. 把标本固定在再物台上。 5. 放松粗调锁挡。 6. 用低倍物镜，旋转粗调和微控
电子显微镜：The Transmission Electron Microscope
The Scanning Electron Microscope
Confocal Microscopy
Scanning Probe Microscopy （scanning tunneling microscope）
OLYMPUS生物显微镜是由日本进口的一种双筒光学显微镜，它使 用方便，分辨率高，并且有立体感。是目前研究微生物的良好工具。
显微镜的结构
录像演示
实验程序
显微镜保养和使用中的注意事项：
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布或滤纸，以 保证光洁度 3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油 镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用 粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 4.观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯， 以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。
显微镜油镜的使用
目的要求 显微镜油镜使用的原理 实验材料 实验程序 思考题
目的要求
学习并掌握显微镜油镜的使用技术及维护的基本知识 使用油镜观察细菌的几种基本形态
Phase 1: Beginning of Microbiology
1664年，英国人罗伯特-虎克（Robert Hooke）曾原始的显微镜对生长在皮革表 面及蔷薇枯叶上的霉菌进行观察。
显微镜油镜使用的原理
显微镜的构造
1.光学部分:目镜 、 物镜 、 照明装置(聚光镜、
虹彩光圈等). 它使检视物放大,造成物象.
2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、
载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等 部件.它起着支持 调节 固定等作用.
油镜使用的原理
油镜使用的原理
显微镜的放大倍数和分辨率
1676年，微生物学的先驱荷兰人列文-虎克首次观察 到了细菌。他没有上过大学，是一个只会荷兰语的小商 人，但却在1680年被选为英国皇家学会的会员。
1725年
1690年
源自文库
1720年
1760年
1790年
1840年
1881年
1890年
Microscopes used by Louis Pasteur and Joseph Lister, late 19th century.
光学显微镜：Bright-Field Light Microscope，DarkField Light Microscope，Phase-Contrast Light Microscope，Differential Interference Contrast Microscope，Fluorescence Microscope
实验材料
显微镜、香柏油、乙醚酒精混合液（乙醚7份，纯酒 精3份）、擦镜纸、吸水纸等。
compound microscope, lens paper and lens cleaner, immersion oil, glass slides, cover slips
奥林巴斯（OLYMPUS）生物显微镜
制钮来进行对焦。 7. 调节双目镜筒间距和视度差。 8. 再适当调节照明度。 9. 使焦点正确地对准标本。 10. 锁紧粗调锁挡。 11. 调节孔径光栏。
12. 依次用低、中、高倍镜观察。
13. 旋转转换器，将40倍物镜调至空 挡，在标本观察区上滴镜油。
14. 旋转转换器将100倍物镜浸入镜 油
15. 油镜观察：与普通光学显微镜方 法一致。
1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能 力，可用公式表示为：D=λ/2n·sinθ （ D=λ/2NA ） 式中D：物镜分辨 出物体两点间的最短距离。
：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率 θ＝ /2 ：镜口角（即入射角）
• 数值孔径（NA）是透镜与被检物体之间介质的折射率（n） 和孔径角（2θ ）半数的正弦之乘积。
• 用公式表示如下：NA = n * sinθ 。 • 与分辨率成正比，与放大率成正比，焦深与数值孔径的平方
成反比，NA值增大，视场宽度与工作距离都会相应地变小。 • 观察时，聚光镜的NA值应等于或略大于物镜的NA值。