血琼脂培养基配制标准操作规程

血琼脂培养基配制标准操作规程

1．目的

规范血琼脂培养基配制标准操作规程，保证培养基质量。

2．原理

羊血或兔血等是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45～50℃的基础培养基中加入血液可以完好保存血液中某些不耐热的生长因子，同时血细胞不被破坏。若将NaCl浓度提高到0.85%，可使血平皿在35℃培养18～24小时后色泽仍然新鲜。

3．用途

供一般病原菌的分离培养、溶血性鉴别及保存菌种用。

4．配方

特殊蛋白胨23g、淀粉1g，氯化钠5g、琼脂10g、无菌脱纤维羊血（或兔血）5%～10%，pH7.1～7.5。

5.操作步骤

将上述成分混合，溶于1000ml蒸馏水中，加热溶化，校正pH，121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃加入无菌血液，充分摇匀后倾注平板，待凝固后冷藏备用。血琼脂层厚4mm。

6.储存条件

2～8℃冰箱。

7.有效期

实验室自行规定，确保培养基质量。

8. 质量控制

8.1 质控频度每次新配制时做质控

8.2 质控方法及结果见表5-18.

表5-18 配制血琼脂培养基质量控制方法及结果

试验方法结果

无菌试验<100块抽检5%，>100块随机取10

块，35℃培养，观察有无细菌生长

化脓性链球菌ATCC19615，35℃，培

无细菌生长

生长试验

平行试

验

养18～24小时

肺炎链球菌ATCC6305，35℃，培养

18～24小时

金黄色葡萄球菌ATCC25923，

35℃，培养18～24小时

大肠埃希菌ATCC25922，35℃，培养

18～24小时

做质控时，取新旧批号的培养基同时

做

生长良好，β溶血

生长良好，a溶血

生长良好，β溶血

生长良好，

9.注意事项

倾注时温度不易过高，否则血细胞易被破坏而溶血；若

温度过低，琼脂易凝固。

参考文献

[1] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：

上海科学技术出版社，2007

[2] 王钦升，周正明，高屹主编.实用医学培养基手册.北京：人民军医出版社，1999

（周庭银）

编写人：AAA、BBB 操作人：本室操作人员批准人：