基因工程原理练习题及其答案

基因工程原理练习题及其答案

一、填空题

1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。

2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。

3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。

4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。

5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。

6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。7．第一个分离的限制性切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性切核酸酶是_____________。

8．限制性切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。

9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。11．EGTA是____________离子螯合剂。

12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。

13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。

14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。

15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。

16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。

17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。

18．琼脂糖凝胶的分辨力与胶浓度的关系是。

19．如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为________________。20．影响限制性切酶活性的因素________________、________________、________________、________________。

21．连接反应的实用温度为________________。

22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过

和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。

23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是

和。

25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。

26．野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1)

(2) (3) 。

27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。

28．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的围。

29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是

。

30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc，其目的是。

31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2)

(3) (4) 。

32．Clark发现用T aq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在

。

34．乙醇沉淀DNA的原理是。

35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：

(1)________________________________ (2)_____________________________

(3)_________________________________。

36．受体细胞的感受态是___________________________________。

37．DNA重组连接的方法大致分为四种：(1)_____________(2)_______________

(3)___________________________(4)___________________________。

38．将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个___________，各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_________________。

39．将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个____________，源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个_________________。

40．只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成，用___________可以将这段DNA 进行百万倍的扩增。

41．人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为___________时吸附DNA, ___________时摄人DNA。

42．目前，在重组体的筛选中，已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。

大致可以分为：(1)_______________(2)_______________(3)___________________