菌种传代记录
菌种传代记录
②藤黄微球菌—表面凸起、光滑、不透明黄色③短小芽孢杆菌—表面光滑、白色；④枯草芽孢杆菌-表面粗糙、呈灰黄色、边缘锯齿状；
⑤白色念珠菌-表面凸起且光滑、呈圆形、乳白色、边缘整齐;⑥大肠埃希菌—菌落扁平、光滑、圆润； ⑦生孢梭菌—蔓延生长、边缘不规则,有锯齿状突起；长絮状Байду номын сангаас有恶臭，液体由混浊变清； ⑧铜绿假单孢杆菌-菌落湿润扁平大山脉状或粗燥突起、乳头状； ⑨黑曲霉-透明小圆点或不规则丝状物，正面黑褐色,色泽均一，侧面无色。
pagepage1菌种传代记录母代菌种号传代日期传代数量传代后编号用途培养温度培养时间菌落形态操作人备注传代后的菌落形态应符合以下条件
菌种传代记录
母代菌种号
传代日期
传代数量
传代后编号
用途
培养温度
培养时间
菌落形态
操作人
备注
传代后的菌落形态应符合以下条件：1。形态与母代一致；2.各菌种菌种生长形态特征:①金黄色葡萄球菌—表面凸起且光滑、边缘整齐、金黄色;
菌种传代记录
菌种名称
菌种代数
传代传代次数
传代数量
传代人
传代结束日期
保存温度
培养时间（小时）
传代步骤：
1、在无菌条件下，将经复活后的菌种置于洁净工作台面。
2、点燃酒精灯，在火焰旁的上部空间操作。
3、灼烧接种环，环进入试管的部分，在通过火焰灼烧。灼烧时，把环置于酒精灯的外焰上，灼烧完毕将环稍冷片刻再进行操作。
7、先将灼烧过的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基上，如有熔印则表明接种环未冷却，能烫死细菌。一定待冷后，再从斜面上挑取菌苔少许。取出时接种环不能通过火焰，应在火焰旁迅速插入接种管，在斜面上轻轻划线接种。划线时先由下而上划一直线后，再由下而上划曲线。操作过程应迅速，勿使菌苔沾至管壁或管口。
8、当接种完毕，立即将管口通过火焰灭菌，右手到火焰旁塞上棉塞，不要将管口离开火焰旁去迎接右手的棉塞。最后将接种环灼烧灭菌放置原处，再把可能未塞紧的棉塞塞紧，即可进行培养。
9、每支菌种需标明菌株编号、传代次数、菌种名称、接种日期、有效期、接种人。
10、将接种好的培养基放置培养箱中（按照菌种说明书所规定的时间和温度要求培养），观察菌种生长情况。
传代管编号：________________________________
________________________________
________________________________
________________________________
4、菌种管与接种管持在左手，菌种管在前，接种管在后。应斜持试管呈45°角，使试管斜面向上。
5、以右手在火焰旁转动两管的棉塞，以便接种易于拔取。再以右手持接种环的柄端，把接种环在火焰上烧灼。顶端的环必须烧红，以彻底灭菌。
菌种记录表格
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日 期
冰箱温度（℃）
塞子是否松动
是否霉变
处理措施
观察人
附表5：《检定菌种鉴定记录》
记录名称
检定菌种鉴定记录
代码
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菌种名称及编号
鉴定原因
开始鉴定日期
鉴定人
复核人
年 月 日
鉴定项目
菌落形态
革兰染色
显微镜下形态
典型生化反应特征
鉴定结论
日期： 年 月 日
附表6：《检定菌种使用登记台账》
附表1：《检定菌接收记录》
记录名称
检定菌种接收记录
代码
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名称及编号
数量
代数
来源
接收日期
接收人
检查情况
保存条件
附表2：《检定菌种传代、分离、保存记录》
记录名称
检定菌种传代、分离记录
代 码
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名称及编号
购进（领取）日期
年 月 日
来源
传代前菌种保存方法
传代用培养基
传代日期
传代用
菌种编号
总数量
传代用菌种
工作用菌种
操作人
数量
编号
有效期
保存
方法
数量
编号
有效期
保存
方法
分离与纯化过程
纯度
检查结果
操作人： 复核人：
附表3：《检定菌种使用登记台账》
记录名称
检定菌种保存、领用登记台账
代码
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收到日期
名称及编号
数量
接收人
移交人
菌种记录表格
操作人
数量
编号
有效期
保存
方法
数量
编号
有效期
保存
方法
分离与纯化过程
附表3：《检定菌种使用登记台账》
记录名称
检定菌种保存、领用登记台账
代码
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收到日期
名称及编号
数量
接收人
移交人
领用日期
用途
数量
发放人
领用人
附表4：《检定菌种观察记录》
记录名称
检定菌种观察记录
代码
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日期
冰箱温度（℃）
塞子是否松动
是否霉变
处理措施
观察人
附表5：《检定菌种鉴定记录》
记录名称
检定菌种鉴定记录
代码
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菌种名称及编号
鉴定原因
开始鉴定日期
鉴定人
复核人
年月日
鉴定项目
菌落形态
革兰染色
显微镜下形态
典型生化反应特征
鉴定结论
日期：年月日
附表6：《检定菌种使用登记台账》
记录名称
检定菌种使用登记台账
代码
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领用日期
名称及编号
数量
使用人
制备菌悬液浓度
(CFU/ml)
用于检验的
产品批号
记录名称
废弃菌种（物品）销毁处理记录
代码
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日期
被处理菌种（物品）名称
销毁原因
处理方式
批准人
操作人
监督人
备注：废弃菌种要标明编号、数量（支）
菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程
菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程传代用菌种采用甘油冷冻管保存法。
将菌种接种在适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，将菌液混合甘油并分装至冷冻管中，冷冻管标注菌种名称、代数、保存日期等信息，然后放置于-80℃冰箱中保存。
每年进行一次复苏和传代，保存时间不超过5年。
5.3.2.2液体石蜡保存法对于一些难以保存的菌种，采用液体石蜡保存法。
将菌种接种在适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，将菌液混合液体石蜡并分装至玻璃瓶中，瓶口用铝箔密封，标注菌种名称、代数、保存日期等信息，保存温度为-70℃。
每年进行一次复苏和传代，保存时间不超过5年。
5.4菌种的传代传代用菌种每年进行一次复苏和传代。
复苏后，将菌种接种至适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，按照规定的传代代数制备传代用菌种，并及时更新菌种库存记录。
5.5菌种的使用使用菌种前，应先确认菌种的品质和纯度，并按照规定的传代代数制备工作用菌种。
使用后，应及时更新菌种库存记录，并进行相应的消毒处理。
5.6菌种的销毁菌种在使用过程中，如出现变异或污染等情况，应及时进行应灭活处理，并填写《菌种销毁记录表》，经主管部门审核同意后，进行销毁处理。
菌种库存中长期未使用的菌种，应定期进行清理和销毁处理。
菌复苏、复壮；Sabouraud葡萄糖琼脂培养基：用于白色念珠菌复苏、复壮；青霉素-链霉素琼脂培养基：用于铜绿假单胞菌复苏、复壮。
5.4.1.1.3复苏步骤：1.取出保存好的菌种管，用接种针在酒精灯上消毒；2.将接种针在75%酒精中消毒，再用酒精棉球擦拭消毒；3.用接种针在相应的培养基上进行接种；4.置于适宜温度下孵育，待菌落出现后进行传代或进行实验。
5.4.1.2标准菌株的确认通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法进行鉴定，确认菌株的纯度和种属。
5.4.1.3标准菌株的传代将菌株从原始保存方式中转移到新的保存方式中，确保菌株的保存和传承。
传代次数不宜过多，一般不超过10代。
菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程
菌种管理制度1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程，规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。
2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。
3、定义➢标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。
➢传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。
➢工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。
➢菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代。
4、职责4.1部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。
4.2微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。
5、规程5.1菌种的申购部门主管根据菌种的使用情况，提出年度购买计划（包括临时检验需要），填写申购流程，经审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌株）或传代用菌种，购买时，需确定菌种的代数，以便控制传代代数。
5.2菌种的接收菌种到达实验室后，由部门主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《标准菌株库存记录》上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中，在一周内必须完成转种。
5.3菌种的保存5.3.1工作用菌种的保存工作用菌种采用斜面低温保存法。
将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4～8℃冰箱中保存。
此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。
保存时间根据菌种种类而不同，细菌：每个月转种一次；酵母菌及芽胞：3~6个月转种一次；丝状真菌每年转种一次。
菌种传代、使用、保存操作规程
菌种传代、使用、保存操作规程1.目的本文件规定了微生物检验用菌、无菌检验用菌及抗生素检验用菌的接种、保存，传代方法及要求，适用于中心化验室进行检验用菌的接种和传代操作。
2. 适用范围适用于中心化验室菌种管理人员进行检验用菌的接种、保存和传代操作。
3.职责菌种管理人员应按本程序的规定操作。
4.参考文件及相关程序B08(02)005 微生物实验室标准管理程序B08(02)019 微生物检验用菌标准管理程序B08(02)020 检验用培养基标准管理程序5. 程序5.1.对照菌株名称·金黄色葡萄球菌〔CMCC(B) 26 003〕·铜绿假单胞菌〔CMCC(B) 10 104〕·生孢梭菌〔CMCC(B) 64 941〕·枯草芽孢杆菌〔CMCC(B) 63 501〕·大肠埃希菌〔CMCC(B) 44 102〕·白色念珠菌〔CMCC(F) 98 001〕·黑曲霉〔CMCC(F) 98 003〕·短小芽孢杆菌〔CMCC(B) 63 202〕·藤黄微球菌〔CMCC(B) 28 001〕·乙型副伤寒沙门菌〔CMCC(B) 50 094〕5.2.菌种来源中国药品生物制品检定所提供的冷冻干燥菌种（即安瓿）。
5.3. 微生物检验用菌菌悬液的制备5.3.1.菌种的复苏与传代5.3.1.1. 取备妥的冷冻菌种安瓿，灭菌的毛细滴管、双碟、镊子、注射器、灭菌水及复苏菌种所需的培养基等物品，移入超净工作台。
5.3.1.2. 用75%酒精棉球擦净冷冻菌种安瓿外壁，放在灭菌双碟内，待干。
5.3.1.3. 点燃酒精灯，将安瓿的封口一端在火焰上烧灼，用灭菌毛细管吸取灭菌水或胰酪大豆胨液体培养基少许在灼热处，使其骤冷,用干燥无菌纱布包裹安瓿，安瓿掰开。
5.3.1.4. 在不离开火焰圈内，迅速用注射器抽取约0.5ml胰酪大豆胨琼液体培养基，注入安瓿内，轻轻震摇使冷冻菌块溶解、混匀，随即用注射器吸取安瓿内容物分别接种至1支胰酪大豆胨液体培养基，1支普通胰酪大豆胨胰酪大豆胨琼脂斜面培养基内。
菌株传代记录纯度
菌株传代记录纯度
标准菌株传代记录：
（1）菌株供应商的选择
选择有资质的标准菌株合格供应商，每批标准菌株必须附带有供应商的合格证或检测报告或说明书，来证明所采购的标准菌株是合格的。
（2）标准菌株和验收
实验室收到标准菌株，首先应进行符合性感官检查，记录菌株号和标准菌株来源途径信息，确保溯源性清楚。
同时还应记录标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等情况。
（3）冻干标准菌株的复苏
购回的标准菌株一般为冻干粉剂，依照随产品附有的菌种复活方法，在相应的生物安全水平下打开包装，选择合适的培养基和培养条件（根据生产商说明或有关技术通则）进行复活。
冻干菌株的传代次数不得超过5代。
（4）菌株性能的确认
①菌株传代记录纯度检查（观察菌落形态）：取复活后的培养物，在相应的鉴别平板或非选择平板上划线分离，培养出单菌落，观察菌落形态是否符合该菌株要求，同一平板上的单菌落大小、形状、颜色、质地和光泽是否相似，对于出现两种以上形态的菌株，应再分别挑取单菌落划线，检测是否出现相同特征。
②细胞形态：取划线平板上的单菌落，革兰染色反应应符合要求，且呈现一致性。
③必要时进行生化鉴定。
④污染处理：如发现菌株有污染，挑选目标菌培养成功后，将培养物灭菌销毁（121℃，30分钟）。
菌种传代、接受和使用记录
菌种名称：
□Staphylococcus aureus /S.a/金黄色葡萄球菌□Escherichia coli /E.c/大肠埃希氏杆菌□Pseudomonas aeruginosa /P.a/铜绿假单胞菌□Bacillus subtilis /B.s/枯草芽孢杆
□Clostridium sporogenes /C.s/生孢梭菌□Candida albicans /C.a/白色念珠菌□Aspergillus niger /A.n/黑曲霉菌
菌种编号：
、、、
、、、
、、、
□传代菌种□工作菌种
保存条件：
传代所用菌种编号：
传代人/日期：
复核人/日期：
培养基/批号：
培养温度
□30-35℃
□20-25℃
培养时间：
□h
□d
传代数量：支
编号：
编号：
传代所用菌种编号：
传代人/日期：
复核人/日期：
培养基/批号：
培养温度
□30-35℃
□20-25℃
培养时间：
保存温度
有效期
复核人/日期
使用人/日期
用途
复核人/日期
备注
□ -20 ℃ □ 2-8 ℃
□ -20 ℃ □ 2-8 ℃
□ -20 ℃ □ 2-8 ℃
□ -20 ℃ □ 2-8 ℃
□ -20 ℃ □ 2-8 ℃
□ -20 ℃ □ 2-8 ℃
工作菌种接受和使用登记
菌种名称：
□Staphylococcus aureus/S.a/金黄色葡萄球菌□Escherichia coli/E.c/大肠埃希氏杆菌□Pseudomonas aeruginosa/P.a/铜绿假单胞菌□Bacillus subtilis/B.s/枯草芽孢杆
检定菌种接收、传代记录(附表1-7)
用途 用于 20220301 批次产品初始污 染菌阳性对照菌 用于洁净区环境监测沉降菌阳 性对照菌 用于菌悬液的制备
文件编号：
废弃菌种（物品）销毁记录
日期 被处理菌种（物品）名 销毁原因 处理方式
销毁人 销毁监督人
备注：废弃菌种要标明编号、数量（支）
表码： 接收日期
名称
代号
编号
标准菌株库存记录 数量 代次
来源
检查情况 保存条件 接收人Biblioteka 备注：表码： 接收日期
名称
编号
检定菌种接收记录
数量 代次
来源
检查情况 保存条件 接收人
备注：
表码： 菌种名称
传代前菌种代次 传代前菌种状态
检定菌种传代记录
大肠埃希菌
0代 正常
菌种代号
传代前菌种保存方 法
传代数量
备注
表码： 日期
检定菌种观察记录
塞子是否
冰箱温度（℃）
是否染菌
松动
处理措施
记录人
文件编号： 菌种名称及编号
鉴定原因
菌落形态
检定菌种鉴定记录 开始鉴定日期
革兰氏染色
鉴定 项目
显微镜下形态
典型生化特征 鉴定结果：
备注：
操作人：
复核人：
文件编号： 领用日期 菌种名称
检定菌种使用登记台账
菌种编号
数量
使用人
CMCC(B)44102
冷藏＞-30℃ 1支
传代日期
2022.3.1
编号
E.c-G1-220301-01
传代用菌种
□工作用菌种
培养基信息 生产批号：
胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）
生产日期：
菌种传代操作规程2024版药典菌种传代
菌种传代操作规程2024版药典菌种传代
菌种传代操作规程2024版药典菌种传代将依照以下步骤进行：
1. 准备工作：确保操作台面和工具已经经过清洁和消毒处理，确保操作室内环境的无
菌状况。
准备所需的培养基、试管、移液器、平板等。
2. 菌种接种：将初代培养物中适量的菌液采用无菌的移液器转接到新的无菌培养基中，或将菌液均匀地刷在无菌平板上。
注意避免交叉污染。
3. 培养：将接种好的培养基或平板放置于恒温箱中，在适当的温度和湿度条件下培养
一定时间，以确保菌种生长繁殖。
4. 传代：在培养基的不同时间点上，将菌种取出进行传代。
传代时，选择菌落或液体
中适量的菌液接种到新的无菌培养基中，或刷在无菌平板上。
5. 观察和记录：观察传代后菌种的生长情况，如菌落形态、色素等，进行记录。
注意
观察菌种的纯度和无菌状态。
6. 储存：将传代后的菌种保存在适当的条件下，如冷冻保存或冷藏保存，以备后续使用。
7. 清理：完成菌种传代后，及时清理操作区域和工具，进行消毒处理，确保无菌状态。
以上操作规程为菌种传代的基本步骤，根据具体的实验目的和条件，还可以根据需要
进行相应的修改和调整。
GMP质量体系检定菌传代记录
GMP质量体系检定菌传代记录GMP（Good Manufacturing Practice）质量体系是一种合乎标准的制药生产管理体系，旨在确保药品的质量、安全和有效性。
在GMP质量体系中，对于菌传代记录的检定是非常重要的一个环节。
下面是一个关于GMP质量体系检定菌传代记录的示例，共计1200字以上。
1.菌种准备和菌株鉴定1.1选择合适的菌株作为菌种，并确保其完全符合产品标准要求。
1.2进行菌种的准备，包括培养基的制备、菌株接种等。
1.3对于新购的菌株，应进行鉴定和鉴定记录的保留。
2.1每一批菌传代都应有详细的记录，包括传代方法、传代时间、传代次数等。
2.2记录每次传代的起始菌株数量、培养基的配比和加料时间等信息。
2.3记录每次传代后的培养条件，如温度、湿度等。
2.4注意记录传代过程中的观察结果，如菌株的生长情况、菌落形态等。
3.菌株存储管理3.1定期对菌株进行冷冻保存，以确保菌株的长期稳定性和可用性。
3.2记录每次菌株的冷冻保存情况，如保存时间、保存温度等。
4.菌株使用及应用4.1对于每一次使用菌株进行实验或生产，需在记录中注明使用的菌株编号、存储位置等信息。
4.2记录每次使用菌株的数量、菌种起始数量等，以便于对菌株的使用情况进行追溯。
4.3记录每次使用菌株的实验目的、实验方法和实验结果等信息。
5.不合格菌株的处理5.1若发现菌株存在异常情况，如生长受阻、菌落变异等，应立即停止使用，并记录详细情况。
5.2对于不合格的菌株，应进行进一步的分析和实验，以确定问题的原因，同时记录处理过程和结果。
6.菌传代记录的存档和保存6.1菌传代记录应及时整理和分类，并进行存档，以便于日后查阅。
6.2存档的菌传代记录应包括传代的详细信息，记录的时间和创建人等。
6.3存档的菌传代记录需要进行定期的备份和保存，以防止信息的丢失或损坏。
以上内容是一个关于GMP质量体系检定菌传代记录的示例，涉及到菌种准备和菌株鉴定、菌株传代记录、菌株存储管理、菌株使用及应用、不合格菌株的处理以及菌传代记录的存档和保存等方面。
菌种累计代次定义-概述说明以及解释
菌种累计代次定义-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述:在微生物学领域，菌种累计代次是指微生物在培养过程中经历的总代数。
它是衡量微生物生长与繁殖速度的重要指标，也是评价微生物在不同条件下适应能力的重要参数。
菌种累计代次的定义与计算方法对于研究微生物的生长规律、繁殖机制以及对外界环境的适应能力具有重要意义。
本文将对菌种累计代次的概念、重要性和应用进行详细阐述，希望能够给读者带来对该概念的全面理解和启发。
1.2 文章结构本文主要分为引言、正文和结论三个部分。
在引言部分，会先对菌种累计代次的概念进行简要介绍，然后说明文章的结构和目的。
在正文部分，将详细阐述菌种累计代次的概念、重要性和应用。
最后在结论部分，对全文进行总结，展望菌种累计代次在未来的发展方向，并留下结束语。
整篇文章的逻辑清晰，层次分明，旨在全面展现菌种累计代次的定义及其在实践中的重要性和应用场景。
1.3 目的本文旨在对菌种累计代次的概念进行详细阐述，探讨其在微生物学领域的重要性和应用价值。
通过对菌种累计代次的定义和意义进行深入分析，可以加深对微生物生长与演化规律的理解，为菌种研究和应用提供理论支持和指导。
同时，本文还旨在促进学术交流和合作，为相关领域的研究人员提供参考和启示。
希望通过本文的阐述，能够引起更多学者对菌种累计代次这一重要概念的关注，推动相关研究的深入发展，促进微生物学领域的进步与创新。
2.正文2.1 菌种累计代次的概念菌种累计代次是指在实验室环境中培养的微生物菌株的代次累计总和。
一般来说，每次将微生物菌株移植到新的培养基中，这个移植过程就称为一代。
通过连续的代次培养，我们可以观察到微生物在不同代次下的生长情况、遗传稳定性以及产生的代谢产物等信息。
菌种累计代次的概念对于微生物学研究具有重要意义。
通过对菌种在不同代次下的生物学特性进行研究，可以了解微生物在长期培养过程中可能发生的变化，探究微生物的遗传适应性、进化速率以及可能存在的变异现象。
菌种传代.
1. 目的建立菌种的传代、保藏及菌液制备的操作规程。
2. 范围适用于质检中心菌种的传代、保藏及菌液制备。
3. 责任人实验室检定菌保管员、检验中心主任。
4. 内容4.1 标准菌种的概念及其管理4.1.1标准菌种是指由国家授权机构制备的具有稳定的生物学特性并用妥善方法保藏的菌种。
我国的标准菌种统一由中国菌种保藏管理委员会（CCCCM）管理，涉及药品微生物检验的菌种由医学微生物菌种保藏管理中心（CMCC）提供。
4.2 菌种代号的意义4.2.1国内药品微生物检验所用的菌种代号是：CMCC（F）或 CMCC（B）CMCC ——中国医学菌种保藏中心；B ——代表细菌， F ——代表真菌。
4.2.2 菌种的名称▪铜绿假单胞菌［ＣＭＣＣ（Ｂ）１０１０４］▪生孢梭菌［ＣＭＣＣ（Ｂ）６４９４１］▪大肠埃希菌［ＣＭＣＣ（Ｂ）４４１０２］▪金黄色葡萄球菌［ＣＭＣＣ（Ｂ）２６００３］▪枯草芽孢杆菌［ＣＭＣＣ（Ｂ）６３５０１］▪白色念珠菌［ＣＭＣＣ（Ｆ）９８００１］▪黑曲霉［ＣＭＣＣ（Ｆ）９８００３］4.3 标准菌种的保藏形式我国提供的标准菌种通常是以冻干粉的形式包装于熔封的厚玻璃容器中。
在这种容器中，微生物通常与赋形剂共存，由于缺乏生长必须的环境条件，一般呈休眠状态。
4.4 培养基的选择细菌一般用营养琼脂培养基，特别指出的是生孢梭菌用硫乙醇酸盐流体培养基加琼脂制成的培养基进行传代，真菌一般用改良马丁培养基。
4.5 菌种的传代4.5.1 菌种的复苏4.5.1.1把冻干菌种管、灭菌1ml 滴管、双碟、镊子、营养肉汤培养基、营养琼脂斜面数支，移入接种室或净化工作台。
4.5.1.2先用砂轮将冻干菌种安瓶颈部挫出刻痕,再将冻干菌种管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干，用75% 乙醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待干。
点燃酒精灯，将菌种管的封口一端在火焰上，烧灼红热，用灭菌滴管吸取营养肉汤培养基，滴在灼热的菌种管封口一端，使骤冷而炸裂。
4.5.1.3取灭菌镊子，在火焰旁，将炸裂的管口打开，放入灭菌双碟内，另取1支灭菌滴管，在火焰旁吸取营养肉汤少许，加至菌种管底部，将冻干菌搅动促使溶解，随即吸出管内菌液，分别接种至营养琼脂斜面及普通肉汤内，并将滴管及菌种管投入消毒液内，将已接种的营养肉汤及营养琼脂斜面置35~37℃培养22~24 h。