实验 34 种子生活力的快速测定 - 食品伙伴网
种子生活力的快速测定定稿PPT课件
快速测定种子生活力实训结果报告单
作物名称
测定粒数
活种子数
种子生活力 （发芽率） （要求写出计算 公式及过程）
（%）
死种子数
实训结果评价
测定人姓名
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感谢您的观看！
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一 力的原理、方法及其发芽率的计算。
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二、实训原理
理论依据：有生活力的细胞生物膜对物 质具有选择吸收的能力。
未染色种子
活种子
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死种子
三、仪器设备、材料和试剂
（一）仪器设备 刀片、镊子、烧杯、放大镜、垫板、
盘子等。 （二）材料：小麦种子 （三）试剂：5%的红墨水
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四、方法步骤
浸种
观察计算
切种
染色冲洗
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五、操作要点及结果评价标准
（一）操作要点：切种方法正确，部 位准确；观察细心，分辨准确；操作 规范安全。 （二）结果评价标准：死种子、活种子 分辨准确；计算结果准确；操作规范、 安全；操作文明，台面地面干净整洁。
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六、实训结果报告单的填写
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。
种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。
本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。
实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。
2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。
3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。
结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。
培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定种子生活力快速测定实验人员：候勇 2012年度国培班果蔬花卉专业试验目的：种子生活力是指种子的发芽潜力，即发芽力，是判断种子质量的重要指标；要了解种子生活力的大小，最可靠的方法是测定种子的发芽率。
种子的发芽率是指在适宜条件下种子发芽的百分数，它是鉴定种子质量的主要依据，在确定播种量以及种子生理研究中具有重要意义。
本实验的目的就是快速测定种子生活力的方法。
实验仪器及材料：1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶、红墨水5%3、材料：玉米、小麦吸胀种子方法一：红墨水染色法实验原理：红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
操作步骤：1、浸种：取不同种子一部分用沸水煮5-10min，作为死种子；一部分用凉水浸泡一昼夜，吸涨备用。
2、染色：取已吸涨种子100粒，玉米种子可在中间阔面将胚纵切为两半将其中一半放入培养皿中，用5%红墨水染色。
3、结果观察：经过5-8min，倒出红墨水，多次用清水清洗后观察胚的颜色，凡是胚部不着色的为生活良好的种子，有略带红色的说明生活力较弱，都染红的说明无生活力。
结果：活种子%=胚不着色的种子数/供试种子*100 50%=5/10*100方法二：BTB变色法实验原理：活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。
CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。
BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。
BTB 变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。
色泽差异显著，易于观察。
操作步骤：1%BTB染色将吸胀的小麦种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，胚向下，间距约1cm。
培养皿置于30C培养箱中培养0.5h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。
实验七种子生活力的快速测定(精)
种子冲洗l~2次，观察种胚被 染色的情况。凡种胚全部或 大部分被染成红色的即为具 有生活力的种子，种胚不被 染色的为死种子。如果种胚
（30℃~35℃）中保温
中非关键性部位（如子叶的
0.5~1h。另取100粒吸涨种 一部分）被染色，而胚根或
子，于沸水中煮5min后，
胚芽的尖端不染色，都属于
再加入0.5%TTC溶液染色。 不能正常发芽的种子。根据
2
实验原理
有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸代谢途 径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的2，3， 5 - 三苯基氯化四唑（2，3，5 - triphenyl tetrazolium chloride 简称为TTC）还原为红色、不溶 性的甲月替，而且种子的生活力越强，代谢活动越
旺盛，被染成红色的程度越深。死亡的种子由于没 有呼吸作用，因而不会将TTC还原为红色。种胚生 活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被
染色。因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的 深浅程度来判定种子的生活力。
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3
实验材料和器材
• 实验材料
水稻种子
• 器材：恒温箱、小白瓷碗、
镊子、刀片、小烧杯
• 试剂： 0.5% TTC溶液：
称取0.5 g TTC放入小烧杯 中，先加少许乙醇溶解后， 再用蒸馏水稀释定容至100 mL。TTC溶液最好随用随 配，不宜久藏。溶液应遮光
实验七：种子生活力的快速测定
（一）实验目的及意义 （二）实验原理 （三）实验步骤 （四）实验报告
2019/5/4
1
实验目的和意义
种子生活力（seed viability测定种子
生活力常采用萌发实验，即在适宜的条件下，
实验3 种子生活力的测定
实验3 种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。
特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。
通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
一、 氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或NADPH ）还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC 还原反应如下：TTC（无色）TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。
【试剂】TTC 溶液的配制：取1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。
药液p Ｈ应在6.5～7.5，以pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC 溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1 染色法测定种子生活力记载表+Cl+CN N NN +2HCN N NNHHCl【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定一、实验原理通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。
二、实验原理（1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。
当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。
（2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以据此鉴别细胞是否死亡。
三、实验材料、药品和器具1、实验材料：花生、黄豆2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等四、试验方法1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。
胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。
2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。
胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。
五、实验结果品种测定方法测定种子总数有生活力种子粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC 30 28 2 93% 品红30 28 2 93%黄豆TTC 30 30 0 100% 品红30 29 1 97% 实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。
结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。
六、注意事项1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。
2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。
实验3 种子生活力的测定
实验3 种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。
特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。
通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
一、 氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或NADPH ）还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC 还原反应如下：TTC（无色）TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。
【试剂】TTC 溶液的配制：取1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。
药液p Ｈ应在6.5～7.5，以pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC 溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1 染色法测定种子生活力记载表+Cl+CN N NN +2HCN N NNHHCl【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
实验五、种子活力的快速测定
实验五、种子活力的快速测定一、实验目的熟悉种子活力快速测定的方法⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法⏹BTB（溴麝香草酚蓝）法⏹红墨水法⏹纸上荧光法二、实验原理⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法二、实验原理⏹红墨水法⏹活细胞的原生质膜具有选择透性，死亡的种胚细胞原生质膜无选择透性；⏹红墨水中的染色成分大红G不能通过选择透性膜，但能通过非选择透性膜。
三、实验材料、器材及试剂⏹材料：小麦种子⏹仪器及器皿：恒温箱，恒温水浴锅，镊子，刀片，培养皿，小烧杯⏹试剂：⏹0.5% TTC溶液（随配随用，若已变为红色则不能继续使用。
）⏹5%红墨水四、实验步骤⏹1、材料准备：将待测小麦种子用30-35℃温水浸种6~8h。
⏹2、切种子：随机取种子30粒以上,用刀片沿种子胚中心线切成两半。
⏹3、染色处理：取一半的种子放在培养皿中，加入染色溶液（刚好浸没种子），30-35℃恒温箱中保温0.5-1h。
⏹4、对照处理：另一半于沸水中煮死，染色同3。
⏹5、结果观察：倒出染色溶液，TTC处理种子用清水将种子冲洗1-2次，红墨水处理种子则用水冲洗至冲洗液无色为止。
观察种胚着色状况。
⏹6、结果验证：随机取种子30粒以上，25℃保温保湿培养，48h检测发芽率。
五、结果与讨论⏹1、计算两种测定法得到的种子发芽率。
统计分析两种测定方法的结果是否有差异。
⏹讨论两种方法有什么不同？你认为哪一种方法测定的结果较好，为什么？⏹2、统计分析种子活力快速测定结果与实际种子萌发结果的差异性。
⏹讨论可能原因。
比较分析种子活力快速测定与种子直接发芽率测定的优缺点。
注意事项⏹TTC处理染色结束后要立即进行鉴定。
凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。
如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不能染色都属于不能正常发芽的种子。
⏹红墨水处理后要冲洗充分后观察。
凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
实验三种子生活力测定
进行实验操作
种子处理
对种子进行适当的处理，如消毒、催芽等，以准备进行生活力测定。
实验操作
按照实验要求，对种子进行染色、培养等操作，观察种子的萌发情况。
记录实验数据
数据记录
详细记录每个种子样本的萌发情况， 包括萌发时间、萌发率等。
数据整理
对实验数据进行整理和分析，得出种 子生活力的结论。
04
实验结果与分析
实验收获与体会
实验收获
通过实验三，我们学会了使用染色法测定种子的生活力，掌握了种子萌发的原理和影响因素，了解了种子质量对 农业生产的重要性。
实验体会
实验过程中，我们深刻体会到了科学研究的严谨性和细致性，明白了种子生活力测定的实际意义和应用价值，增 强了我们对农业科学研究的兴趣和信心。
对实验的改进建议
掌握测定种子生活力的方法
01
常用的测定方法有：染 色法、发芽试验法和电 导率法等。
02
染色法是通过染色剂对 种子进行染色，根据染 色结果判断种子是否具 有生活力。
03
发芽试验法是将种子置 于适宜的发芽条件下， 观察其发芽情况，计算 子的电导率来间接反映 种子的生活力。
实验结论总结
实验结论
根据实验结果和分析，得出种子生活力的测定结论，包括发芽率、 发芽速度、幼苗生长状况等方面的评价。
实验意义
阐述实验对于农业生产的重要意义，如指导种子选择、提高种植效 益等。
实验不足与展望
指出实验存在的不足之处，并提出改进和进一步研究的方向，为后 续研究提供参考和借鉴。
05
实验总结与展望
实验三种子生活力测 定
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与展望
实验三十九种子生活力的快速测定
实验三十九种子生活力的快速测定种子发芽率是鉴定种子品质的重要标志，在确定播种量以及种子生理研究方面具有重要的作用，常需加以测定。
但一般测定发芽率的方法所需时间长，尤其是对处在深休眠状态的种子，根本无法应用，所以有必要根据活种子的生理特性建立起一套快速鉴定种子生活力的方法，以克服常规方法的缺点。
本实验介绍剥胚法，染色法和荧光法三类方法，可根据具体情况选用。
Ⅰ、剥胚法一、目的掌握用剥胚法测定种子生活力的原理和方法。
二．原理此法适于测定休眠状态的种子的生活力。
种子深休眠的原因很多，有些是因为果皮或种皮的束缚（如不透水、不透气）造成的；也有的在果皮、种皮、胚乳中存在着萌发抑制剂，这类障碍可以用除去果皮、种皮、胚乳或切去一部分子叶的办法克服。
当阻碍萌发的物理或化学因素被排除以后，胚就很快萌发。
三、材料与设备1. 材料：苹果、柑桔的成熟种子或玉米乳熟期籽粒。
2. 设备：培养皿；滤纸；刀片；镊子。
3. 试剂：0.1﹪升汞。
四、实验步骤1. 种子处理取刚从成熟果实中剥出的新鲜柑桔种子300粒，已晒干的柑桔种子100粒，乳熟期新鲜玉米种子200粒，经晒干的乳熟期玉米种子或贮存三年以上的玉米陈种子各100粒，用0.1％升汞消毒后再用水充分洗净，进行以下处理：1.1柑桔新鲜种子，不加处理，作为对照；1.2 柑桔新鲜种子，用镊子小心剥去种皮，留下完整的胚；1.3柑桔新鲜种子，用刀片把种子横切为二，留下带胚根的一半，注意切除部分应不少于种子全长的一半。
1.4晒干的柑桔种子*，处理同1.2；*柑桔种子经晒干后即失去发芽能力。
1.5新鲜乳熟期玉米粒，不加处理作为对照（新鲜乳熟玉米种子粒因胚乳中存在着萌发抑制剂，不能萌发）。
1.6新鲜乳熟期玉米子粒，用镊子小心地将胚剥出。
1.7 晒干的乳熟期玉米子粒，不加处理。
1.8 贮存三年以上的玉米陈子粒，不加处理。
2. 观察测定以上处理完毕，随即将种子或胚整齐地摆在铺有适当大小滤纸的培养皿里，用蒸馏水湿润滤纸，加盖后置30℃左右的温箱中培养，并注意随时补充水分（但不可加水过多，否则易因缺氧而霉烂），从第二天起每天统计发芽种子数，记入下表，连续观察二星期。
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告实验室报告
种子生活力的快速测定实验报告
实验目的：
本实验的主要目的是通过快速测定种子的生活力，判断种子的
萌发能力和健康情况。
实验材料：
实验所需材料包括：玉米种子、过滤纸、蒸馏水、万能生长液、密封容器和显微镜。
实验步骤：
1. 将所需的玉米种子分为两组，每组取30颗。
2. 把过滤纸浸泡在蒸馏水中。
3. 用过滤纸分别包裹两组玉米种子，并将其放置在密封容器中，然后加入适量的万能生长液。
4. 在25摄氏度下孵育48小时，然后观察并记录萌发情况。
5. 在显微镜下观察良好萌发的玉米种子，并计算出其的萌发率。
实验结果：
经过48小时的孵育，观察到第一组玉米种子共有27颗萌发，
而第二组玉米种子只有17颗萌发。
通过对结果的分析，可知第一组的种子生命力更强，萌发率达
到了90%，而第二组的种子生命力相对较弱，萌发率只有56.6%。
结论：
本实验通过种子生活力的快速测定，有效地分析了种子的生命力和种植力，为今后的种子生产和种植工作提供了帮助。
建议：
对于同类实验，我们可以适当加大样本量或者调整测定环境，以提高实验结果的准确性和可靠性。
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告种子生活力是衡量种子种植成活率和生长力的关键参数之一，其快速测定是种子质量检测的重要手段之一。
本实验旨在通过快速测定种子生活力的方法来评估不同种子的品质，并提供一些根据实验结果制定相应种植策略的指导。
1. 实验材料与方法材料：玉米种子、1%硒酸钠（Na2SeO4)、蓝色指示剂溶液（蓝色分子公司生产）、迷你冷柜。
实验步骤：1. 将需要测定的种子取出一定量，并将其表面消毒清洗，去除杂质。
2. 将种子用0.1%质量浓度的硒酸钠溶液浸泡4小时，然后用蒸馏水冲洗干净。
3. 将已处理的种子放入离心管内，加入一定量的蓝色指示剂溶液，管口用胶带密封。
4. 将离心管放入迷你冷柜内，温度设定为10°C，时间为24小时。
5. 经过一定时间的低温处理后，取出离心管，观察种子与指示剂的反应情况。
2. 实验结果与分析经过测定，观察不同种子与蓝色指示剂的反应情况，其中良种子的表现为指示剂颜色转变较深，而劣种子的表现为指示剂颜色变化有限或不显著。
根据测定结果，我们将种子分为良种子和劣种子两类，并统计不同种子品质的占比，如下表所示。
品质 | 良种子 | 劣种子-----|-------|-------样本1 | 85% | 15%样本2 | 75% | 25%样本3 | 90% | 10%从实验结果可以看出，样本1和3的品质相对较好，良种子占比高于劣种子；而样本2的种子品质相对较差，良种子占比仅为75%。
通过实验结果，我们可以对不同种子品质制定相应的种植策略。
对于品质较好的种子，可以考虑减少播种量，以保证良种子的使用率最大化；而对于品质较差的种子，则需要增加播种量，以提高种植成活率和生长力。
3. 实验总结种子生活力的快速测定方法可以在较短时间内评估种子品质，为种植策略制定提供了有效的参考。
在实验过程中，需要注意对种子进行消毒和清洗，以保证实验结果的准确性；同时，还需要控制低温处理时间和温度，以避免不必要的误差。
种子生活力测定
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载 表
产地 送检样品重（g）
品种名称
ห้องสมุดไป่ตู้
重复 检验粒数
Ⅰ
Ⅱ
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
填表日期：
年月日
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
任务1 浸泡：将种子用温水（约30--35℃）浸泡5h左右，使种 子充分吸胀，便于染色（一般用先泡好的种子）。
任务2 试样数取与切取：随机数取4份，每份50粒种子。沿种 胚中线纵向切成两半，取其中的一半（一定要带胚并且要 完整的暴露在切面上），置于编号的培养皿中备用。
任务3 样品染色：向上述4个培养皿中加入 5%的红墨水溶液，将切好的种子浸没，室 温下浸10min染色。
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗， 不要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情 况（可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活 力的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生 活力的种子。
种子生活力测定
项目六. 结果报告
姓名：
送检单位 作物名称
种子生活力测定的记载 表
产地 送检样品重（g）
品种名称
重复 检验粒数
Ⅰ
Ⅱ
种子 生活 力测 定
有生活力种子数 种子生活力
Ⅲ
Ⅳ
平均种子生活力
填表日期：
年月日
项目七. 注意事项
1）切取时，一定要沿胚的中线切开； 2）染色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 3）染色时间不足或太长，否则不易区分； 4）冲洗次数不够，冲洗时把麦粒冲到废液杯中； 5）鉴别错误，把活种子看着死种子，把死种子看着活种子； 6）计算结果4组平均生活力保留整数。
任务1 浸泡：将种子用温水（约30--35℃）浸泡5h左右，使种 子充分吸胀，便于染色（一般用先泡好的种子）。
任务2 试样数取与切取：随机数取4份，每份50粒种子。沿种 胚中线纵向切成两半，取其中的一半（一定要带胚并且要 完整的暴露在切面上），置于编号的培养皿中备用。
任务3 样品染色：向上述4个培养皿中加入 5%的红墨水溶液，将切好的种子浸没，室 温下浸10min染色。
模块三 快速测定种子生活力
➢ 红墨水染色法
种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生 命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。
项目一. 实验目的 ➢ 掌握快速测定种子发芽率的方法。 ➢ 能正确计算发芽率。
项目二. 实验方法 ➢ 红墨水染色法。
项目三. 实验原理
➢有生活力种子胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不 染色。
任务4 冲洗与观察鉴定：染色后的种子用清水冲洗种子 至少2次，直至洗液无红色为止（注意要缓慢冲洗， 不要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情 况（可借助放大镜查看），凡种胚不着色的为有生活 力的种子，种胚和胚乳都被染成相同红色的就是无生 活力的种子。
种子生活力快速测定(TTC法红墨水法)
• 3。如种胚死亡便不被染色；如种胚生活力下降，呼吸作 用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，染色较浅；故可 根据种胚染色的部位或深浅来鉴定种子的生活力。
• 红墨水染色法（染料染色法）（酸性大红G)
生活力观察
立即对比观察新旧 种子种胚着色情况， 判断种子的生活力
计算
计算种胚不着色的 （活种子）种子个 数，计算种子发芽 率。 发芽率=发芽种子粒 数 ÷用做发芽种子 的总数×100%
问题处理
• 1、比较TTC染色法和红墨水染色法测定何不同？
• 2、为何用TTC染色法，种胚染红的为活种子，而用红墨 水染色法，种胚不着色的为活种子？ • TTC(无色) 氧化还原反应 TTF(红色) • 原生质膜具有半渗透性,染料无法进入活细胞内
红墨水染色法
种子处理
取大豆种子100粒， 新、陈种子各1份， 用冷水浸泡一夜或 用40℃左右温水浸 泡40-60min，取出 沥干水分，用单面 刀片沿胚的中心纵 切为两半
种子染色
取其中胚的各部分 比较完整的一半， 放在小烧杯内，加 经稀释的红墨水至 浸没种子，染色 20min左右
冲洗种子
染色到预定时间， 倒去红墨水，用自 来水冲洗2-3次
• 1.有生命力种胚细胞的原生质膜具有半透性，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染 色。
• 2.而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选 择吸收能力，染料可自由进入细胞内使胚部染色。所以可 根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。
实验准备
• （一）材料：玉米种子、大豆种子 • （二）仪器设备：恒温培养箱、刀片、镊子、培养皿、 放大镜、滤纸 • （三）TTC染液、5%的红墨水
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告以下是种子生活力的快速测定实验报告：一、实验目的：1、了解种子的萌发过程；2、掌握种子活力的快速测定方法。
二、实验原理：种子的萌发是指种子在适宜的环境下，经过一定的时间后，胚根和胚芽开始向外生长并形成幼苗。
种子活力是指种子在一定时间内能够完成萌发的能力。
通过测定种子的吸水力、萌发率等指标来评估种子的活力。
常用的种子活力测定方法包括浸泡法、吸水力测定法、电导率测定法等。
三、实验材料：1、不同品种的玉米种子；2、清水；3、容器；4、计时器；5、电子天平；6、试管；7、吸水纸巾；8、显微镜。
四、实验步骤：1、将不同品种的玉米种子放入不同的容器中，每种品种的种子数量应相同；2、用清水将每个容器中的种子浸泡10分钟；3、取出浸泡过的种子，用试管将每个种子内的水分吸干，然后将吸干后的种子放在吸水纸巾上，用电子天平称重；4、记录每个种子的重量，并计算出其含水量；5、将每个种子放入一个装有适量水的容器中，观察其萌发情况并记录萌发时间和萌发率；6、使用显微镜观察每个种子的胚根和胚芽的生长情况。
五、实验结果：通过实验，我们可以得出以下结论：1、不同品种的玉米种子在吸水力方面存在差异，其中某些品种的吸水力较强，而某些品种则较弱；2、不同品种的玉米种子在萌发方面也存在差异，其中某些品种的萌发率较高，而某些品种则较低；3、通过观察胚根和胚芽的生长情况，我们可以看出种子的活力强弱与胚根和胚芽的发育情况有关。
六、实验分析：通过以上实验结果，我们可以得出以下结论：1、吸水力较强的种子具有较高的活力，因为它们能够在较短时间内吸收足够的水分并完成萌发过程；2、萌发率较高的种子也具有较高的活力，因为它们能够在较短的时间内完成萌发过程并产生幼苗；3、胚根和胚芽的发育情况也可以反映出种子的活力强弱，因为它们是植物生长发育的关键部位。
种子生活力的测定方法
种子生活力的测定方法种子生活力的测定有以下几种方法：（一）氯化三苯基四氮唑法( TTC)1．将种子用温水（约30℃）浸泡2--6小时，使种子充分吸胀。
2．随机取种子100粒，红花、蓖麻等具有外壳的需要去掉外壳，豆类种子要去皮。
然后沿种胚中央准确切开，取一半备用。
3．将准备好的种子浸于2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中，于恒温箱( 30～35℃)中保温30分钟。
4．染色结束后要立即进行鉴定，因放久会褪色。
倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗1--2次，观察种胚被染色的情况，凡种胚全部或部分被染成红色的即为具有生命力的种子，种胚不被染色的为死种子。
如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不染色，都属于不能正常发芽的种子。
（二）溴麝香草酚蓝法（BTB法）1．浸种：同上述 TTC 法。
2．BTB 琼脂凝胶的制备：取 0.1% BTB 溶液 100 mL 置于烧杯中，将 1 g 琼脂剪碎后加入，用小火加热并不断搅拌。
待琼脂完全溶解后，趁热倒在 4 个干洁的培养皿中，使成一均匀的薄层，冷却后备用。
3．显色：取吸胀的种子 200 粒，整齐地埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中，种子胚朝下平放，间隔距离至少 l cm 。
然后将培养皿置于 30 ～ 35 ℃下培养1 ～2 小时，在蓝色背景下观察，如种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
4．计算活种子百分率。
用沸水杀死的种子作同样处理，进行对比观察。
（三）靛红染色法步骤同TTC染色法。
注意事项1．染料的浓度要适当，染色时间不能太长（如用红墨水染色，只需要5～10分钟即可），否则不容易区别染色与否。
2．靛红染色法测定种子生活力，适用于豆类、麻类、瓜类、十字花科、果树、乔灌木种子的生活力测定。
（四）碘化钾反应法1．将种子在水中浸18小时。
2．取出种子放在垫有湿滤纸的培养皿内，将培养皿置30℃恒温箱中，不同植物种子放置时间不同，如松种子放48小时，落叶松放72小时。
实验 植物种子生活力快速测定 (1)
实验十一植物种子生活力快速测定一、实验目的掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。
二、实验原理种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现（指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标），种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力（通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率）。
种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的，因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。
测定种子生活力方法常用发芽率测定法，该法是指在最适宜的条件下，在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
但是常规方法（直接发芽）测定种子发芽率所需的时间较长，对于处于深休眠状态的种子，几乎难于应用。
特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定种子发芽率，所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。
红墨水染色法凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力，它对某些染料不让透过，因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。
而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，于是染料进入死细胞，将胚完全染色。
因此，可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。
三、实验材料小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。
四、设备与试剂恒温箱，培养皿，烧杯，镊子，刀片，紫外荧光灯，滤纸（无荧光），琼脂，沸水。
5％红墨水：市售红墨水5 mL加95 mL自来水。
五、实验步骤1．红墨水染色法将待测种子在30～35℃温水中浸种（小麦、大麦、籼稻种子6～8h；玉米种子5 h 左右；粳稻种子2 h），以增加种胚的呼吸速率，使显色迅速；取吸胀的种子200 粒，沿种子胚的中心线纵切为二半，将其中的一半置于红墨水培养皿中5～10 min；用红墨水染色后，倒去废液，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止，并检查种子死活。
种子活性鉴定
种子活性鉴定TTC法快速鉴定植物种子生活力一、实验目的学习掌握TTC法和红墨水染色法快速测定种子活力的原理和方法二、实验原理TTC法：活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。
当TTC 渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯基甲腙（TTF）；如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。
红墨水染色法：活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。
三、实验材料、试剂实验材料：玉米、小麦种子实验试剂：0.3%(w/v)TTC 5%红墨水（红墨水5ml+95ml 自来水)实验工具：烧杯100ml（2）；镊子（1）；三脚架（1）；石棉瓦（1）；酒精灯（1）；刀片（1）；火柴四、实验步骤A、TTC法快速鉴定植物种子生活力1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种子充分吸胀。
2. 随机取种子30粒，沿种胚中央准确切开，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜，置于30 ℃观察培养箱中培养30min ；另30半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30 ℃培养箱中染色处理作为对照观察。
3. 倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗2次，观察种胚被染色的情况。
4.观察：种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的为死种子。
B、5%红墨水显色1.同样将吸胀的玉米、小麦种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半；2.其中一半置于培养皿中，加入5%红墨水，以覆盖种子为宜，置于30 ℃培养箱中培养10min.染色后倒去红墨水并用水冲洗多次至冲洗液无色为止。
另30半粒玉米置于沸水中2min以杀死胚，同样加入5%红墨水置于30℃培养箱中染色处理作为对照观察；3.观察：凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
种子活力的快速测定
种子活力的快速测定
杨清;王伟
【期刊名称】《现代农业科技》
【年(卷),期】2006(000)021
【摘要】为了快速而又准确地测定种子生活力,及时间种和播种,确保全苗、壮苗,对TTC法和红墨水法测定种子生活力进行试验研究.结果表明,对每种种子的最终的种子生活力的测定可以以TTC中各种种子染色率为准.需要注意的是,由于种子是随机选取以及人为操作和判断,所以各个重复间有一定差异.
【总页数】2页(P98,101)
【作者】杨清;王伟
【作者单位】河南信阳农业高等专科学校,河南,信阳,464000;河南信阳农业高等专科学校,河南,信阳,464000
【正文语种】中文
【中图分类】S5
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实验 17 种子生活力的快速测定
种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
测定种子生活力常采用发芽实验，即在适宜条件下，让种子吸水萌发，在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。
但是常规方法（直接发芽）测定种子生活力所需时间较长，特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定发芽率，遇到休眠种子也无法知道。
而采用以下的化学方法，则能在较短时间内获得结果。
Ⅰ氯化三苯基四氮唑法（ TTC 法）
一、原理
凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲（ TTF ），而且种子的生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深。
死亡的种子由于没有呼吸作用，因而不会将 TTC 还原为红色。
种胚生活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被染色。
因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
玉米、小麦等种子。
（二）试剂
0.5% TTC 溶液：称取 0.5 gTTC 放在烧杯中，加入少许 95% 乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至 100 mL 。
溶液避光保存，若变红色，即不能再用。
（三）仪器设备
恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子，天平。
三、实验步骤
1. 浸种将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色取吸胀的种子 200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿 100 个半粒，加入适量的 0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。
然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。
观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。
将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。
3. 计算活种子的百分率，如果可能的话与实际发芽率作一比较看是否相符？
Ⅱ溴麝香草酚蓝法（ BTB 法）
一、原理
凡活细胞必有呼吸作用，吸收空气中的 O 2 放出 CO 2 。
CO 2 溶于水成为 H 2 CO 3 ， H 2 CO 3 解离成 H + 和 HCO 3 ˉ，使得种胚周围环境的酸度增加，可用溴麝香草酚蓝（ BTB ）来测定酸度的改变。
BTB 的变色范围为 pH6.0 ～ 7.6 ，酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为 pH 7.1 ）。
色泽差异显著，易于观察。
二、实验材料、试剂与仪器设备
玉米种子。
（二）试剂
0.1% BTB 溶液：称取 BTB 0.1 g ，溶解于煮沸过的自来水中（配制指示剂的水应为微碱性，使溶液呈蓝色或蓝绿色，蒸馏水为微酸性不宜用），然后用滤纸滤去残渣。
滤液若呈黄色，可加数滴稀氨水，使之变为蓝色或蓝绿色。
此液贮于棕色瓶中可长期保存。
（三）仪器设备
恒温箱，天平，刀片，烧杯，镊子，培养皿，滤纸，漏斗。
三、实验步骤
1. 浸种同上述 TTC 法。
2. BTB 琼脂凝胶的制备取 0.1% BTB 溶液 100 mL 置于烧杯中，将 1 g 琼脂剪碎后加入，用小火加热并不断搅拌。
待琼脂完全溶解后，趁热倒在 4 个干洁的培养皿中，使成一均匀的薄层，冷却后备用。
3. 显色取吸胀的种子 200 粒，整齐地埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中，种子胚朝下平放，间隔距离至少 l cm 。
然后将培养皿置于 30 ～ 35 ℃下培养 1 ～ 2 小时，在蓝色背景下观察，如种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。
4. 计算活种子百分率。
用沸水杀死的种子作同样处理，进行对比观察。
Ⅲ红墨水染色法
一、原理
有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的大红 G 不能进入细胞内，胚部不着色。
而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内是胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
玉米、小麦等种子。
（二）试剂
5% 红墨水。
（三）仪器设备
恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子。
三、实验步骤
1 ．浸种同上述 TTC 法。
2 ．染色取已吸胀的种子 200 粒，沿胚的中线切为两半，将一半置于培养皿中，加入 5% 红墨水（以淹没种子为度），染色 10 ～ 15 min （温度高时间可短些）。
3 ．观察染色后倒去红墨水，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止。
检查种子死活，凡种胚不着色或着色很浅的为活种子；凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
可用沸水杀死的种子作对照观察。
4 ．计算有生活力种子的百分率。
Ⅳ纸上荧光法
一、原理
具有生活力的种子和已经死亡的种子，它们的种皮对物质的透性是不同的，而许多植物的种子中又都含有荧光物质。
利用对荧光物质的不同透性来区分种子的死活，方法简单，特别是对十字花科植物的种子，尤为适用。
二、实验材料与仪器设备
油菜、白菜等十字花科植物的种子。
（二）仪器设备
紫外荧光灯，镊子，培养皿，滤纸（无荧光）。
三、实验步骤
1. 将完整无损的种子（油菜、白菜等十字花科植物的种子） 100 粒，于 25 ～ 30 ℃水中浸泡 2 ～ 3 小时。
2. 把已吸胀的种子，以 3 ～ 5 mm 间隔整齐地排列在培养皿中的湿滤纸上，滤纸上水分不能过多，以免荧光物质流散彼此影响。
培养皿可以不必加盖，放置 1.5 ～ 2 小时，取去种子，将滤纸阴干。
取出的种子仍按原来顺序排列在另一培养皿中（以备验证）。
3. 将阴干的滤纸置于紫外荧光灯下进行观察，观察如能在暗室中进行，则效果更好。
在放过种子的位置上如见到荧光圈，则为死种子。
如要确证它们是死种子，可将排列在另一培养皿中的这些种子拣出来，集中在一只培养皿的湿滤纸上，而让不产生荧光圈的种子留在培养皿中，维持湿度，让其自然发芽。
4. 3 ～ 4 天后记录培养皿中发芽种子数。
此方法的成败，首先决定于种子中荧光物质的存在，其次决定于种皮的性质。
有些种子无论有无发芽能力，一经浸泡，即有荧光物质透出，大豆即属此类；也有些种子由于种皮的不透性，无论种子死活，都不产生荧光圈，许多植物的种子都会碰到这种个别现象，此时只要用机械方法擦伤种皮，可重复验证。
相反，有时由于收获时受潮，种皮已破裂，也会产生荧光圈，试验时都应该注意。
最好将浸泡液进行检查，没有荧光则适于作试验材料。
[ 思考题 ]
1. 试验结果与实际情况是否相符 ? 为什么 ?
2. 就你所知还有哪些快速方法，可以测定种子的发芽率 ?
3. 试比较 TTC 法、 BTB 法、红墨水法以及纸上荧光法，测定的结果是否相同 ? 为什么 ?。