项目八 食品中亚硝酸盐含量的测定
食品中检测亚硝酸盐的含量
肉制品中亚硝酸盐的含量检测摘要：在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料 ,建立了一种简易快速的测定食品中微量亚硝酸盐的方法。
分光光度法抗干扰能力强，根据朗伯-比耳定律能较快地测定自制食品中香肠中亚硝酸盐的含量。
关键字：亚硝酸盐亚硝酸盐测定引言亚硝酸盐是一种有毒物质，半致死量为22mg/kg，对于体重60kg的人来说是1.32g。
亚硝酸盐与蛋白质分解产物在酸性条件下发生反应，易产生亚硝胺类致癌物。
胃中的酸碱度适宜亚硝胺的形成。
亚硝胺类化合物在腌肉、香肠、熏肉、鱼干、虾皮、鱿鱼丝等动物性食品中含量较高，有强烈的致胃癌作用。
在胃酸不足的情况下，胃中细菌繁殖使食物中原本无毒的硝酸盐还原成亚硝酸盐，更会加大胃癌的危险。
一、亚硝酸盐的相关性质1亚硝酸盐的性质护色剂又称呈色剂或发色剂，是食品加工中为使肉与肉制品呈现良好的色泽而适当加入的化学物质。
发色剂在食品中的作用：(1)可发色作用；(2)抑菌作用；(3)产生风味。
2中毒后症状过量亚硝酸盐进入人体，会氧化血液中的血红蛋白为高铁血红蛋白，后者无携氧功能，导致组织缺氧，引起肠原性青紫症，皮肤青紫是本病的特征，尤以口唇青紫最为普遍。
口服亚硝酸盐10分钟至3小时后，可出现头晕、恶心、呕吐等症状。
严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭，甚至死亡。
二．亚硝酸盐含量测定（α-萘胺法）2.1 实验原理自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与α-萘胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。
其颜色的深度与样液中亚硝酸含量成正比，可比色测定。
反应式如下： N H 2SO 3H N +N SO 3H NO 2-H +O H 2+++ NSO 3H N NH 2N +N SO 3H +NH 2肉制品中亚硝酸盐含量==50150040100010001⨯⨯⨯⨯m X （mg/kg ） 式中：X 为由测得的吸光度什在标准曲线上对应的亚硝酸钠质量浓度（μg/mL ）；m 为样品质量（g ）。
实验二食品中亚硝酸盐含量的测定
实验二食品中亚硝酸盐含量的测定一、实验目的1. 了解亚硝酸盐的危害，掌握测定食品中亚硝酸盐含量的方法。
2. 掌握色谱法和分光光度法的原理和操作方法，学会利用这两种方法测定食品中亚硝酸盐的含量。
二、实验原理1. 亚硝酸盐的危害亚硝酸盐是一种常见的致癌物质，它在在一定条件下可以转化为亚硝胺，而亚硝胺是一种强致癌物。
人体摄入过量的亚硝酸盐会导致亚硝胺的形成，从而增加患癌症的风险。
2. 色谱法测定亚硝酸盐含量色谱法测定亚硝酸盐含量的原理是利用反相色谱分离亚硝酸盐，并通过紫外检测器检测样品中亚硝酸盐的含量。
具体步骤如下：（1）样品制备：将待测样品加入水中，同时加入明矾和硫酸铜，使亚硝酸盐被还原为亚硝酸钠。
（2）色谱柱处理：用反相色谱柱，在样品进样口处注入样品，经过一定的进样残留时间后，以一定的流速进行柱洗脱。
柱洗脱时，先用无机盐水拉平基线，再用有机溶剂进行洗脱。
（3）检测：用紫外检测器检测亚硝酸盐的吸光度，从而得到亚硝酸盐的含量。
分光光度法测定亚硝酸盐含量的原理是利用亚硝酸盐和硫酸铁（Ⅱ）发生化学反应，在一定的酸性条件下生成的重氮化合物与磺基苯二胺反应，生成紫色产物，其最大吸收波长为540 nm。
具体步骤如下：（2）反应：加入磺基苯二胺后，放置反应10-30min，其间温度保持在5℃-25℃之间。
（3）检测：利用分光光度计测定紫色产物在540nm处的吸光度，计算出亚硝酸盐的含量。
三、实验步骤1. 应注意的问题（1）亚硝酸钠充分还原后，一定要在酸性环境下进行测定。
（2）在反应中要控制好温度，以保证反应的准确性。
（3）样品应尽量少受光照，以防止光照影响样品的含量。
2. 实验器材和试剂（1）色谱仪、分光光度计（2）无水乙醇、对乙酰胺、对乙酰苯胺等试剂（3）标准亚硝酸钠（4）食品样品（2）色谱柱处理：将反相柱的一端用具有无机盐的水洗涤，并用有机溶剂过渡洗脱，直到出现白色较少的沉淀为止，这表明柱已达到欧拉。
（1）样品准备：取适量待测样品，加入约150mL的水中，用硫酸酸化使亚硝酸盐转化为硝酸盐，加入对乙酰苯胺拌匀，静置10min。
食品中亚硝酸盐的测定
食品中亚硝酸盐的测定
1.样品处理：将每种被检样品分别用离心机将悬浮液稀释成容转移2倍以下，滤过慢滤纸，然后将得到的滤液进行2次相同比例稀释，比如用蒸馏水稀释2倍；
2.试剂准备：用液体硫酸，甲酸钠，甲基橙等试剂，配制一定比例的滴定液；
3.试验条件：将滴定液加入溶液中，按一定的体积加入样品，置于37℃的水浴中，在pH6.0-6.8正负0.1的范围内搅拌2min；
4.实验测定：将搅拌好的溶液迅速用pH仪测量溶液的pH值，根据pH值和浓度值，使用分光光度计测量亚硝酸盐含量；
5.数据记录：将检测结果按规定格式记录在检验报告中。
;。
实训项目六 食品中亚硝酸盐含量的测定
课程：生物产品分析姓名：曹龙刚学号：09229****实训项目六食品中亚硝酸盐含量的测定一、实验目的（1）熟悉掌握样品制备，提取的基本操作技能；（2）进一步学习并熟练地掌握分光光度计的使用方法和技能；（3）学习盐酸萘乙酸二胺比色法测定亚硝酸盐的原理及操作要点。
二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对安吉苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，其最大吸收波长为550nm，可测定吸光度并标准比较定量分析。
三、试剂1、亚铁氰化钾溶液：称取106克K4Fe9(CN)5·3H2O溶于水后，稀释至1000毫升。
2、乙酸锌溶液：称取220克Zn(CH2C00)2·2H20，加30毫升冰乙酸溶于水，并稀释至1000毫升。
3、饱和硼砂溶液：称取5克 Na2B07·10H20)，溶于100毫升热水中。
4、0.4％对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20％的盐酸中。
5、0.2％盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中。
6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入500毫升容量瓶中，并稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。
7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。
四、仪器可见分光光度计，50ml容量瓶，移液管五、方法步骤1.样品处理：称取10.0g经绞碎混匀的火腿肠，置于50ml烧杯中，加8ml硼砂饱和液，搅拌均匀，然后一面转动一面加入3ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入3ml乙酸锌溶液，以70℃左右约 100ml水将火腿肠洗入500ml容量瓶内，水浴15min,冷却，加水至刻度，摇匀，放置30min，用滤纸过滤清液，弃去初滤液30ml，滤液备用。
2.测定吸取40ml上述滤液于50ml容量瓶中，另吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5ml亚硝酸钠应用液，分别置于9个50ml容量瓶中。
食品中亚硝酸盐含量的测定
对未来研究的展望
01
深入研究影响因素
未来研究可进一步探讨食品加工、保存过程中影响亚硝酸盐含量的各种
因素，为优化食品加工工艺和储存条件提供理论依据。
02 03
开发快速检测方法
针对现有测定方法存在的操作繁琐、耗时较长等问题，未来可研究开发 更加快速、简便的亚硝酸盐含量检测方法，以满足现场快速检测的需求 。
结果展示
03
将处理后的数据以表格、图表等形式展示，便于直观比较和分
析。
结果分析与讨论
样品间比较
比较不同样品间的亚硝酸盐含量差异，分析可能的原因。
与标准值比较
将测定结果与国家标准或行业标准进行比较，评估样品的合规性 。
结果可靠性分析
根据实验方法、操作过程等因素，分析结果的可靠性。
误差来源及改进措施
06 结论与展望
实验结论总结
成功建立测定方法
本研究成功建立了准确、可靠的 食品中亚硝酸盐含量的测定方法 ，为食品安全监管提供了有力支 持。
验证方法准确性
通过对实际样品进行检测，验证 了本测定方法的准确性和实用性 ，表明该方法可用于实际生产和 监管中的亚硝酸盐含量著差异，可能与 食品加工方式、保存条件等因素 有关。
试剂
包括显色剂、缓冲液、掩 蔽剂等，用于优化实验条 件和提高测定准确性。
实验仪器与设备
分光光度计
用于测定吸光度，从而 计算亚硝酸盐含量。
恒温水浴锅
用于控制实验温度，保 证反应在恒定温度下进
行。
离心机
用于分离样品中的固体 和液体成分，便于后续
测定。
移液器及吸头
用于准确移取液体样品 和标准溶液。
实验原理与方法
第二季度
第三季度
实验项目食品中亚硝酸盐的测定
实验项目食品中亚硝酸盐的测定
按照工作过程咨询、计划、实施、检查、评价五个步骤设计实验项目，通过情景模拟，设计任务及问题，使学生尽可能自主完成实验项目。
模拟情景：某食品公司通过工艺改进生产了一批酱腌菜和肉制品，现委托对其重要卫生指标亚硝酸盐进行分析检测，请对所送检样品亚硝酸盐含量进行分析。
任务：
1、亚硝酸盐含量是酱腌制品及肉制品监测的重要卫生指标，请查阅GB2760亚硝酸盐在不同产品中的最大限量值。
2、请查阅并下载亚硝酸盐分析的国家标准，了解其分析方法，并根据实验室条件选择和确定实验方案。
3、对照国家标准，列出所需仪器和试剂。
4、依照国家标准，设计分析操作流程图。
5、在提取亚硝酸的试样匀浆中，为何添加饱和硼砂溶液，过滤是为何要弃去粗滤液？
6、为何要显色反应需3—5min？
7、如果样品溶液的吸光度不在工作曲线线性范围，应如何处理？
8、为保证测定结果准确性，操作中应注意哪些环节？
9、编写亚硝酸盐检验的原始记录表，记载原始数据（注意数据记录及运算规则），并对检验数据进行分析（精密度等）；
10、撰写检验报告。
食品中亚硝酸盐含量测定
硝酸盐、亚硝酸盐：肉制品加工
防腐剂：肉毒梭状芽胞杆菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌…… 发色剂：
亚硝酸盐食物中毒
定义：肠源性青紫症 食用了含硝酸盐及亚硝酸盐的蔬菜或误食亚硝酸盐后引起的高铁血红蛋白血症 症状： 潜伏1～3h 头痛、头晕、无力、胸闷、气短、嗜睡、心悸、恶心、呕吐、腹痛、腹泻，口唇、指甲及全身皮肤、粘膜发绀等 严重者心率减慢、心律不齐、昏迷、惊厥等，常因呼吸循环衰竭而死亡 急救处理： 催吐、洗胃和导泻以排出毒物；美蓝、维生素C、葡萄糖联合解毒；对症治疗 预防： 保持蔬菜新鲜，禁食腐烂变质蔬菜，不要短时间进食大量含硝酸盐较多的蔬菜 勿食大量刚腌的菜，腌菜时盐应稍多，至少待腌制15天以上再食用 肉品加工严格按照国家限量使用标准 不喝苦井水，不用苦井水煮饭、煮粥，尤其勿存放过夜 妥善保管好亚硝酸盐，防止误食中毒
食品添加剂使用标准GB2760-2011
硝酸钠、硝酸钾 腌腊肉制品类（如咸肉、腊肉、板鸭、中式火腿、腊肠）；酱卤肉制品类；熏、烧、烤肉类；油炸肉类；西式火腿（熏烤、烟熏、蒸煮火腿）类；肉灌肠类；发酵肉制品类：限量使用0.5 g/kg，残留量（以NaNO2计）≤30mg/kg 亚硝酸钠、亚硝酸钾 腌腊肉制品类（如咸肉、腊肉、板鸭、中式火腿、腊肠）；酱卤肉制品类；熏、烧、烤肉类；油炸肉类；肉灌肠类；发酵肉制品类：限量使用0.15 g/kg，残留量（以NaNO2计）≤30mg/kg 西式火腿（熏烤、烟熏、蒸煮火腿）类：限量使用0.15 g/kg，残留量（以NaNO2计）≤70mg/kg 肉罐头类：限量使用0.15 g/kg，残留量（以NaNO2计）≤50mg/kg
测 定 步 骤
样品处理
样品测定：取25ml比色管，依次加入
样品
标 准 曲 线
食品中亚硝酸盐的含量测定
一、实验目的 1.掌握样品制备、提取的基本操作技能。 1.掌握样品制备、提取的基本操作技能。 掌握样品制备 2.进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。 2.进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。 进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法 3.掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。 3.掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。 掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法 二、实验原理 样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后， 样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后，在弱酸的条 件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应， 件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应，生成 重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合， 重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合，形成紫红色的
2.测定 2.测定 吸取上述滤液40ml 50ml容量瓶中 同时吸取0.0 40ml于 容量瓶中， 0.0、 吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中，同时吸取0.0、 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 钠标准使用液（相当于0.0 1.0、2.0、3.0、4.0、 0.0、 钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠 的亚硝酸钠） 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别置于 50ml容量瓶中 各加水至25ml 容量瓶中， 25ml处 50ml容量瓶中，各加水至25ml处。在样品管及标准管 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml 0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml， 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml，混匀后静置 分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2% 0.2%盐 3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐 酸萘乙二胺溶液2ml 加水至刻度，摇匀，静置15 2ml， 15分 酸萘乙二胺溶液2ml，加水至刻度，摇匀，静置15分 钟后， 1cm的比色皿 以零管调节零点， 的比色皿， 钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长 538nm处 测吸光度， 538nm处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的 亚硝酸盐含量。 亚硝酸盐含量。
食物中亚硝酸盐含量的测定
食物中亚硝酸盐含量的测定
亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，主要指亚硝酸钠，为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。
以下是一些测定食物中亚硝酸盐含量的方法：
1. 分光光度法：这是一种常用的分析方法，基于亚硝酸盐在特定波长下的吸光度来定量。
将食物样品与化学试剂反应，形成一种有色化合物，然后通过分光光度计测量其吸光度，并与标准曲线进行比较，从而确定亚硝酸盐的含量。
2. 离子色谱法：这是一种分离和分析离子的技术，可用于测定亚硝酸盐。
食物样品经过前处理后，通过离子色谱仪进行分离和检测，根据保留时间和峰面积来定量亚硝酸盐的含量。
3. 气相色谱法：该方法适用于分析挥发性化合物，如亚硝酸盐。
食物样品经过衍生化处理，将亚硝酸盐转化为易挥发的衍生物，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。
4. 酶联免疫吸附法：这是一种基于抗体-抗原相互作用的分析方法。
使用特异性的亚硝酸盐抗体与食物样品中的亚硝酸盐结合，然后通过酶标抗体或显色底物进行检测。
无论选择哪种方法，都需要根据具体的实验条件和要求进行适当的样品前处理，以去除干扰物质并提取出亚硝酸盐。
同时，应该使用标准物质进行校准和质量控制，确保测量结果的准确性和可靠性。
这些方法通常需要专业的实验室设备和技术，因此如果你需要测定食物中亚硝酸盐的含量，建议咨询专业实验室或相关机构。
食物中的亚硝酸盐含量测定实验
食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。
过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。
因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。
本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。
实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。
- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。
- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。
实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。
取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。
2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。
得到的溶液即为10%油酸银试剂。
3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。
4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。
5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。
6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。
数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。
标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。
通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。
实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。
2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。
3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。
结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。
这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。
同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。
食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法可以通过以下几种方式进行：
1. 硝酸还原法：该方法是将食品样品经过预处理后，加入硫酸与碘化钾混合后还原生成亚硝酸，再通过测定溶液中的亚硝酸盐含量来确定样品中的亚硝酸盐含量。
2. 色谱法：色谱法是利用高效液相色谱或气相色谱的原理和技术，将食品样品中的亚硝酸盐分离出来，并通过不同检测器来测定其含量。
3. 光谱法：光谱法是通过红外光谱或紫外-可见光谱等光学方法，对食品样品进行扫描或测定，通过峰的强度来确定样品中亚硝酸盐的含量。
4. 电化学法：电化学法是利用电化学技术，将食品样品中的亚硝酸盐转化成电化学信号，再通过电极的测定来确定亚硝酸盐的含量。
需要注意的是，不同的食品样品可能需要不同的预处理方法，以及不同的仪器和设备来进行测定。
同时，还需要根据国家或地区的相关标准来进行测定，以确保测定结果的准确性和可靠性。
亚硝酸盐含量的测定(精)
亚硝酸盐含量的测定1、测定亚硝酸盐含量的原理在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1－萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。
将经过反应显色后的待测样品与标准液比色，即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。
2、材料与器具泡菜、对氨基苯磺酸、N-1－萘基乙二胺盐酸盐、氯化钠、氢氧化钠、氢氧化铝、氯化镉、氯化钡、亚硝酸钠、蒸馏水、移液管、容量瓶、比色管、榨汁机等3、步骤（1）配置溶液对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶解于100ml体积分数为20％的盐酸中，避光保存(4mg/ml)。
N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液：称取0.2克N-1－萘基乙二胺盐酸盐，溶解于100ml的水中，避光保存(2mg/ml) 。
亚硝酸钠溶液：称取0.10克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，用水溶解至500ml，再转移5 ml溶液至200 ml容量瓶，定容至200ml(5ug/ml)提取剂：分别称取50克氯化镉、氯化钡，溶解于1000ml蒸馏水中，用盐酸调节pH至1。
氢氧化铝乳液和2.5mol/l的氢氧化钠溶液。
（2）配制标准液用移液管吸取0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml亚硝酸钠溶液，分别置于50ml比色管中，再取1支比色管作为空白对照。
并分别加入2.0ml对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5分钟后，再分别加入1.0ml N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，加蒸馏水至50ml，混匀，观察亚硝酸钠溶液颜色的剃度变化。
（3）制备样品处理液将3坛样品做好标记后，分别称取0.4千克泡菜，榨汁过滤得200ml汁液。
取其中100 ml至500ml 容量瓶中，加200ml 蒸馏水、 100ml 提取剂，混匀，再加入40ml 氢氧化钠溶液，用蒸馏水定容至500ml 后，立即过滤。
将60ml 滤液转移至100ml 容量瓶中，加入氢氧化铝（吸附脱色）乳液，定容至100ml ，过滤。
项目八食品中亚硝酸盐含量的测定
在食品加工过程中，经常使用某些化学物质和食品中某 些成份作用，而使产品呈现良好旳色泽，这些物质称发色剂。 常用旳是硝酸盐和亚硝酸盐。
发色剂在食品中旳作用： 发色作用、抑菌作用、产生风味。
亚硝酸盐毒性 亚硝酸盐是添加剂中急性毒性较强旳物质之一，是一种 剧毒药，可使正常旳血红蛋白变成高铁血红蛋白，失去携带 氧旳能力，造成组织缺氧。 其次亚硝酸盐为亚硝基化合物旳前体物，具致癌性。 最大使用量0.15g/kg，残留量（以亚硝酸钠计）为30mg/kg
⑥亚硝酸钠原则溶液：精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥二十 四小时亚硝酸钠，加水溶解移入500 ml容量瓶中，并稀释至刻度。 此溶液每ml相当于200ug亚硝酸钠。（7组）
⑦亚硝酸钠原则使用溶液：临用前，吸收亚硝酸钠原则溶液5.00 ml, 置于100 ml容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每ml相当于 10ug亚硝酸钠。（8组）
②醋酸锌溶液：称取220g醋酸锌，加30ml冰醋酸，溶于水并定容 至1000ml。（2组）
③硼砂饱和溶液：称取5g硼砂溶于100 ml热水中，冷却后备用。 （3、4组各配置100ml）
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100 ml 20%旳盐酸中，避光保存。（5组）
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100 ml水 中，避光保存。（6组）
反应如下：
2HCl+ NaNO2 + H2N-
-SO3H 重氮化
Cl- -
-SO3H + NaCl+ 2H2O
--
--
2HCl .H 2 NH 2 CH 2 CHN-
盐酸萘乙二胺
2HCl .H 2 NH 2 CH 2 CHN-
食品中亚硝酸盐含量测定操作规程
食品中亚硝酸盐含量测定操作规程1 目的对公司泡菜类亚硝酸盐含量测定制定标准操作规程，检验室操作人员按本规程操作，保证公司亚硝酸盐含量检测结果准确。
2 范围适用于所有泡菜类亚硝酸盐含量的测定3 依据GB 5009.33-2016《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》第二法分光光度法4 实验原理试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，外标法测定亚硝酸盐含量。
5 仪器和设备5.1 比色管5.2 电子天平：感量为0.1mg。
5.5 紫外分光光度计6 试剂除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水或去离子水。
6.1亚铁氰化钾溶液（106g/L）：称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000mL。
6.2乙酸锌溶液（220g/L）：称取220.0g乙酸锌，加30mL冰乙酸溶解，并用水稀释至1000mL。
6.3饱和硼酸钠溶液（50g/L）：称取5.0g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。
6.4对氨基苯磺酸钠溶液（4g/L）：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%（V/V）盐酸中，置于棕色瓶中混匀，避光保存。
6.5盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL水中，混匀后，置于棕色瓶中，避光保存。
6.6亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.1000g于110-120℃干燥恒重的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。
此溶液每毫升相当于200ug的亚硝酸钠。
6.7亚硝酸钠标准使用液：吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液每毫升相当于5.0ug亚硝酸钠。
7 实验步骤7.1 样品制备取有代表性样品用粉碎机粉碎或用研钵研细，不易研磨的样品应尽可能切碎。
7.2 操作步骤标准曲线的绘制：分别吸取亚硝酸钠标准使用液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50mL 于50mL 带塞比色管中，（相当于0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5ug 亚硝酸钠），分别置于50mL 带塞比色管中。
食品中亚硝酸盐的测定
食品中亚硝酸盐的测定（分光光度法）一、实验目的上层脂1. 明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。
肪用滴2. 掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项管吸除。
二、实验原理结果保样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸留 2 位重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，最大吸收波长538nm下测有效数吸光度值 A, 与标准系列比较定量。
字。
三、仪器1. 722 分光光度计若干，提前 20min 打开预热2. 组织绞碎机，菜刀，砧板1-2 套3. 50mL烧杯 2 个/ 组500mL烧杯 1 个 / 组3L 大烧杯 2 个4. 电炉 2 个5. 托盘天平 1 个 / 组6. 200mL容量瓶 1 个500mL容量瓶 1 个 / 组7. 恒温水浴锅1-2 个8. 25mL具塞比色管11个/组9. 滴管，漏斗，滤纸，吸小球， 1 个 / 组10. 玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸若干四、试剂（所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂。
）1. 亚铁氰化钾溶液：称取 106.0g 亚铁氰化钾分装，1 瓶/ 大[K 4Fe6(CN)·3H2 O]，用水溶解后，稀释至 1000mL。
组2 ．乙酸锌溶液：称取 22.0g 乙酸锌分装，1 瓶/ 大[Zn(CH C00) ·2H20]，加 3mL冰乙酸溶于水，并稀组3 2释至 100mL。
3、饱和硼砂溶液：称取 5.0g 硼酸钠 (Na B0·10H0) ，分装， 1 瓶/ 大2 7 2溶于 100mL热水中，冷却后备用。
组4、对氨基苯磺酸溶液 (4g/L) ：称取 0.4 g 对氨基苯磺分装，1 瓶/ 大酸，溶于 100mL20％的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光组保存。
5、盐酸萘乙二胺溶液（ 2g/L ）：称取 0.2 克盐酸萘乙分装，1 瓶/ 大二胺，溶于 100mL水中，避光保存。
有致癌作用6、亚硝酸钠标准溶液（0.2g/L ）：精密称取0.1000g 于硅胶干燥器中干燥24h 的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml 容量瓶中，并稀释至刻度。
实验十 食品中亚硝酸盐含量的检测
实验十 食品中亚硝酸盐含量的检测1.实验目的掌握盐酸萘乙二胺法检测肉制品中食品添加剂——亚硝酸盐的基本操作技术。
2.实验原理在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色化合物，颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比，其最大吸收波长为538nm ，可测定吸光度并与标准比较定量。
2HCl+NaNO 2+H 2N3H重氮化H 3SO-Cl----+NaCl 2H +2O2HCl .H 2NH 2CH 2+--N-Cl N3H偶合CHN 2CH 2NH 2H .2HCl N -H 3SON +HCl盐酸萘乙二胺紫红色3.仪器、试剂及材料3.1仪器50mL 小烧杯，752型分光光度计，250mL 容量瓶，1mL 移液管，25mL 具塞试管，洗耳球 3.2试剂（1）饱和硼砂溶液：溶解5g 硼酸钠于100mL 热水中，冷却后备用。
（2）硫酸锌溶液：溶解30g 硫酸锌于100mL 水中。
（3）对氨基苯磺酸溶液（0.4%）：溶解0.4g 对氨基苯磺酸于100mL20%盐酸中，避光保存。
（4）盐酸奈乙二胺溶液（0.2%）：溶解0.2g 盐酸奈乙二胺于100mL 水中，避光保存。
（5）亚硝酸钠标准溶液：精确称取0.1000g 亚硝酸钠（硅胶干燥中干燥24小时），加水溶解，移入500mL 容量瓶，并稀释至刻度，混匀，临用前吸取5.00mL 容量瓶中，加水至刻度，混匀，此溶液每毫升相当5μg 亚硝酸钠。
（6）亚铁氰化钾溶液：称取10.6g 亚铁氰化钾于100mL 容量瓶中定容。
3.3材料火腿肠4.实验步骤4.1亚硝酸钠的提取4.2 测定试剂按照表1进行添加表1 各试剂添加顺序滤液20 0.4%对氨基苯磺酸1 1 1 1 1 1 混匀3~5min 0.2%盐酸奈乙二胺0.50.50.5 0.5 0.50.5补水至25mL数据处理公式与方法：1000250201000A X ⨯⨯⨯=mX ——样品中的亚硝酸盐的含量，mg/kg ；A ——测定用滤液中亚硝酸钠的含量，μg ； m ——样品的质量，g ；20/250——测定用样液体积mL/试样处理液总体积mL 。
食品中亚硝酸钠含量的测定
食品中亚硝酸钠含量的测定-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1食品中亚硝酸盐含量的测定专业：xxxx班级：xxx姓名：xxx学号：2010037102时间：2013/7/5指导教师：xxx摘要：亚硝酸盐是一种毒性很强的物质，一般情况下，当人体一次性摄取300-500 mg亚硝酸盐时就会引起中毒，称为亚硝酸盐中毒或紫绀症、肠原性青紫病等。
亚硝酸盐能使血液血红蛋白中的亚铁离子氧化成高铁离子，从而使其失去结合氧的能力，阻碍体内氧的运输，使人体发生急性中毒，严重时引起生命危险。
亚硝酸盐可导致维生素A的氧化破坏并阻碍胡萝卜素转化为维生素A，致使人体维生素A不足。
同时进入肠胃中的亚硝酸盐遇到胺极易转化成致癌物质亚硝胺，从已经进行的实验已证实亚硝胺具有强烈的致癌性。
由于亚硝酸盐的毒性严重危害健康，而亚硝酸盐广泛存在于自然环境中，特别是食物中。
粮食、豆类、蔬菜、肉类、蛋类等都可以测出一定量的亚硝酸盐，比如蔬菜中约有 4 mg/kg，肉类中约有3 mg/kg，蛋类中约有5 mg/kg。
在我国居民的膳食结构中咸菜是不可缺少的，在农村尤为突出。
而咸菜中一般都会含有亚硝酸盐，所以检测咸菜中亚硝酸盐的含量势在必行。
本次试验，我们小组测定了10种不同的咸菜中亚硝酸盐的含量，目的在于通过比较不同品牌的亚硝酸盐的含量来了解目前咸菜行业的亚硝酸实际加入量，给广大消费者一个购买的导向。
关键词：亚硝酸盐；咸菜、肉脯、泡椒鸡爪、香肠；分光光度法目的：1.熟悉食品中亚硝酸盐的卫生标准。
2.掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法。
3.为了探究市场中销售的一些咸菜类、香肠类以及肉脯泡椒鸡爪等中的亚硝酸盐含量，探究其含量是否符合要求。
仪器与试剂：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、研钵；亚铁氰化钾溶液、乙酸锌溶液、饱和硼砂溶液、对氨基苯磺酸溶液、盐酸萘乙二胺溶液、亚硝酸钠标准贮备液测定方法：1.样品制备：称取5g左右的试样置于研钵中，研磨充分，加12.5ml硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约150ml将试样洗入250ml容量瓶中，于沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加入5ml亚铁氰化钾，摇匀，再加入0.5ml 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
食品中亚硝酸盐测定（盐酸萘乙二胺法）实验
实验4 食品中亚硝酸盐测定（盐酸萘乙二胺法）一、实验原理制品中加入的亚硝酸盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应，生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白，使肉制品有美观的颜色。
同时亚硝酸盐也是一种防腐剂，可抑制微生物的增殖。
由于蛋白质代谢产物中仲胺基与亚硝酸反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝胺，因此，亚硝酸盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行。
亚硝酸盐的测定方法主要是重氮偶合比色法，此外可与荧光胺偶合，测定其荧光吸收强度，或衍生后用气相色谱法测定。
自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与盐酸2—萘乙二胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。
其颜色的深度与样品种亚硝酸含量成正比，故可比色测定。
二、试剂和器材①饱和硼砂溶液：5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中，冷却备用。
②亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并稀释至1000mL。
③乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌，加30mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000mL。
④果蔬抽提液：溶解50g氯化汞和50g氯化钡于1000mL重蒸水中，用浓盐酸调整到pH值为1。
⑤氢氧化铝乳液：溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中，滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀。
用蒸馏水反复洗涤，真空抽滤，直至洗液分别用氯化钡溶液检验不发生浑浊。
取下沉淀物，加适量重蒸水使之呈薄糨糊状，捣拌均匀备用。
⑥0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%的盐酸溶液中，闭关保存。
⑦0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL重蒸水中。
⑧亚硝酸钠标准溶液（5微克每毫升）：精确称取0.1000g亚硝酸铵，以重蒸水定容到500mL。
再吸取此溶液25mL，以重蒸水定容到1000mL，此工作液每毫升含亚硝酸钠5微克。
分光光度计，组织捣碎机。
三、试验步骤1、样品处理果蔬类样品用组织捣碎机打浆。
称取适量浆液（视式样中硝酸盐含量而定，如青刀豆取10g，桃子、菠萝取30g），置于500mL容量瓶中。
食品中亚硝酸盐含量的测定
［６］范亚娜，盖 轲．几种腌制蔬菜中亚硝酸盐含量的测定［Ｊ］．宝鸡文 理学院学报（自然科学版），２００８，２８（１）：４１－４３．
［７］路桂华，李贤新．食品中亚硝酸盐的格里斯试剂比色测定法的实践 体会［Ｊ］．职业与健康，２００４，２０（９）：４８－４９．
临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液 ５．００ ｍＬ，置于 ２００ ｍＬ 容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液为每毫升 相当于 ５．０ μｇ 的亚硝酸钠。 1. 4 试样的预处理[7]
称取约 ５．０ ｇ 经绞碎混匀的试样，置于 ５０ ｍＬ 烧 杯中，加 １２．５ ｍＬ 硼酸钠饱和溶液，搅拌均匀，以 ７０ ℃左右的水将试样洗入 ２５０ ｍＬ 容量瓶中，于沸水 浴中加热 １５ ｍｉｎ，取出后冷至室温，然后一边转动， 一边加入 ５ ｍＬ 亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入 ５ ｍＬ 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置 ０．５ ｈ，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液 ２０ ｍＬ，滤液备用。 1. 5 测定 1. 5. 1 标准曲线的绘制
［８］食品卫生国家标准［Ｓ］．北京：中国标准出版社，２００６．
The Determination of the Nitrite Content of Several Foods
ＹＵ Ｂａｏ－ｘｉａ
（Ｌｉｇｈｔ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｈｅｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００６，Ｃｈｉｎａ） Abstract:Ｎｉｔｒｉｔｅ ｒｅａｃｔ ｗｉｔｈ ４－ａｍｉｎｏｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｗｅａｋ ａｃｉｄｉｃ ｍｅｄｉａ ｔｏ ｐｒｏｄｕｃｅ ４－ｓｕｌｆｏｂｅｎｚｅｎｅｄｉａｚｏｎｉｕｍ， ｗｈｉｃｈ ｒｅａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｎ′－（ｎａｐｈｔｈａｌｅｎ－１－ｙｌ）ｅｔｈａｎｅ－１，２－ｄｉａｍｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｔｏ ｐｒｏｄｕｃｅ ａ ｒｅｄ ｄｉａｚｅｎｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ．Ｔｈｅ ｒｅｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ．Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｇｒａｐｈ ｆｏｒ ａｑｕｅｏｕｓ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｐｌｏｔｔｉｎｇ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｖａｌｕｅｓ ａｔ ５５０ ｎｍ ａｇａｉｎｓｔ ｎｉｔｒｉｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ． Ｂｅｅｒ＇ｓ ｌａｗ ｗａｓ ｏｂｅｙｅｄ ｏｖｅｒ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ０～２５ μｇ ｎｉｔｒｉｔｅ ｉｎ ａｎ ｏｖｅｒａｌｌ ａｑｕｅｏｕｓ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ２５ ｍＬ． Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｇｒａｐｈ ｉｓ ａ ｓｔｒａｉｇｈｔ ｌｉｎｅ， ｏｂｅｙｉｎｇ ｅｑｕａｔｉｏｎ Ａ＝０．０１３ ２ ｘ， ｗｈｅｒｅ Ａ ｉｓ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ａｎｄ ｘ（μｇ） ｉｓ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｎｉｔｒｉｔｅ． Ｔｈｅ ｎｉｔｒｉｔｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｓｅｖｅｒａｌ ｐｉｃｋｌｅｄ ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ ｓｏｌｄ ｉｎ ｔｈｅ ｍａｒｋｅｔ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｎｉｔｒｉｔｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｉｃｋｌｅｄ ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ ｗａｓ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｏｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａｃｃｕｒａｔｅ， ｒａｐｉｄ， ｓｉｍｐｌｅ，ａｎｄ ｔｈａｔ ｃａｎ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｎｉｔｒｉｔｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｏｄｓ． Key words:ｆｏｏｄｓ；ｎｉｔｒｉｔｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ
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反应如下：
2HCl+ NaNO2 + H2N-
-SO3H 重氮化
Cl- -
-SO3H + NaCl+ 2H2O
--
--
2HCl .H 2 NH 2 CH 2 CHN-
盐酸萘乙二胺
2HCl .H 2 NH 2 CH 2 CHN-
紫红色
+ Cl- NN
-N- N-
-SO3H 偶合 -SO3H + HCl
⑥亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24小 时亚硝酸钠，加水溶解移入500 ml容量瓶中，并稀释至刻度。此 溶液每ml相当于200ug亚硝酸钠。（7组）
⑦亚硝酸钠标准使用溶液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00 ml, 置于100 ml容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每ml相当于 10ug亚硝酸钠。（8组）
2.测定
标准曲线绘制： 吸取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚
硝酸钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、8.0、 12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别置于25ml比色管中，各加 水至12.5ml处。在样品管及标准管中分别加入0.4%对氨基苯磺酸 溶液4ml，混匀后静置3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别 加入0.2%盐酸萘乙二胺溶液2ml，加水至25ml刻度，摇匀，静置 15分钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长538nm处， 测吸光度，绘制标准曲线。 样品测定：
m—样品的质量，g。
—40测定时吸取样品液的体积与样品定容体
2积50 之比。
9
五、结果表述
以重复性条件下获得的在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝 对差值不得超过算术平均值的10%。
本方法亚硝酸盐检出限为1 mg/kg。
第三部分 工作任务
②醋酸锌溶液：称取220g醋酸锌，加30ml冰醋酸，溶于水并定容 至1000ml。（2组）
③硼砂饱和溶液：称取5g硼砂溶于100 ml热水中，冷却后备用。 （3、4组各配置100ml）
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。（5组）
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100 ml水 中，避光保存。（6组）
吸 取 上 述 滤 液 10 m l 于 比 色 管 中 ， 重 复 上 述 步 骤 ， 于 波 长 538nm处，测吸光度，根据标准曲线得到待测液的亚硝酸盐含量。
四、结果计算
X=
A 1000
m 40 1000 1000
250
式中：X—样品中亚硝酸盐的含量，g/kg；
A—样品溶液中亚硝酸盐的含量，ug；
注意事项 1、显色后稳定性与室温有关，一般显色温度为15～30℃时，
任务：香肠中亚硝酸盐含量测定 1.试剂配制 2.样品处理 3.标准曲线绘制 4.样品测定及计算。
第四部分 分组讨论 设计方案
要求在30分钟内完成，注意按照真实的实验过程来写方 案，特别是实验的先后顺序。完成后由组长交到老师处，进 行评阅。
第五部分 任务布置
①亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并定容至 1000ml。（1组）
三、步骤
1.样品处理 称取经绞碎并混合均匀的样品20克于100ml烧杯中，加硼
砂饱和溶液40ml，搅拌均匀后，以70℃以上的热水100～ 150ml将样品全部洗入250ml容量瓶中，放入沸水浴中加热15 分钟，取出冷却后，边转动容量瓶边加入亚铁氰化钾溶液 20ml，摇匀后，再加入醋酸锌溶液20ml，以沉淀蛋白质。然 后，加水至刻度，混匀，放置半小时后，弃去上层脂肪，清 液用滤纸或脱脂棉过滤，弃去初滤液5～10ml，滤液备用。
4
二、仪器与试剂
1.仪器 ①小型绞肉机 ②分光光度计 2.试剂 ①亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水， 并定容至1000ml。 ②醋酸锌溶液：称取220g醋酸锌，加30ml冰醋酸， 溶于水并定容至1000ml。 ③硼砂饱和溶液：称取5g硼砂溶于100 ml热水中， 冷却后备用。
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺 酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。 ⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺, 溶于100 ml水中，避光保存。 ⑥亚硝酸钠储备液：精密称取0.1000g于硅胶干 燥器中干燥24小时亚硝酸钠，加水溶解移入500 ml容 量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200ug亚 硝酸钠。 ⑦亚硝酸钠标准使用溶液：临用前，吸取亚硝酸钠 标准溶液5.00 ml, 置于100 ml容量瓶中，加水稀释 至刻度。此溶液每ml相当于10ug亚硝酸钠。
项目八 食品中亚硝酸盐 含量测定
食品安全国家标准GB 5009.33-2010
任务8.1 实验准备
2
第二部分 基础知识
一、原理
样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后，在弱酸的条件下， 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应，生成重氮化合物， 再与盐酸萘乙二胺偶合，形成紫红色的染料，其颜色的深浅 与亚硝酸盐的含量成正比，可与标准比较定量。通过分光光 度计比色测定，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
第一部分 引入
在食品加工过程中，经常使用一些化学物质和食品中某 些成分作用，而使产品呈现良好的色泽，这些物质称发色剂。 常用的是硝酸盐和亚硝酸盐。
发色剂在食品中的作用： 发色作用、抑菌作用、产生风味。
亚硝酸盐毒性 亚硝酸盐是添加剂中急性毒性较强的物质之一，是一种 剧毒药，可使正常的血红蛋白变成高铁血红蛋白，失去携带 氧的能力，导致组织缺氧。 其次亚硝酸盐为亚硝基化合物的前体物，具致癌性。 最大使用量0.15g/kg，残留量（以亚硝酸钠计）为30mg/kg
第六部分 操作
1.配制试剂 2.样品预处理（处理完毕后将样液贴标保存） 3.分光光度计的使用练习
任务 8.2 香肠中亚硝酸亚含量测定操作
1.绘制标准曲线 各组按方案进行标准曲线的测定，由组长将测得的亚硝
酸钠含量（质量）与吸光度，交到老师处，算出回归方程。 2.样品测定
测出样品吸光度，根据回归方程算出亚硝酸钠含量（质 量）。