微透析_高效液相色谱法测定大鼠脑脊液中4种氨基酸的含量测定

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微透析-高效液相色谱法测定米诺环素大鼠血液和脑内的药动学

微透析-高效液相色谱法测定米诺环素大鼠血液和脑内的药动学董文彬;程佳祎;陈爱瑛;郑高利【期刊名称】《中国临床药理学与治疗学》【年(卷),期】2012(17)6【摘要】目的:研究米诺环素在大鼠血液和脑内的药动学。

方法:采用微透析结合高效液相色谱技术,测定米诺环素大鼠血浆蛋白结合率;大鼠尾静脉注射米诺环素,测定给药后10h内不同时间点大鼠血液、海马CA1区中游离药物的浓度。

结果:米诺环素大鼠血浆蛋白结合率为82.08%,给药后迅速进入脑组织,在给药后3.83h左右浓度达到峰值,其后缓慢下降,脑组织的游离药物-时间曲线下面积(AUC0-10h)可达血液的62.42%。

结论:微透析结合高效液相色谱技术可以测定米诺环素的大鼠血浆蛋白结合率,并实现大鼠血液和脑组织中游离米诺环素浓度的动态监测。

结果表明米诺环素易于透过血脑屏障,且能长时间维持较高浓度,从而发挥其神经保护作用。

【总页数】5页(P654-658)【关键词】米诺环素;药动学;血浆蛋白结合率;微透析;高效液相色谱【作者】董文彬;程佳祎;陈爱瑛;郑高利【作者单位】浙江省医学科学院药物研究所;浙江中医药大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R964;R917【相关文献】1.基于UPLC-TOF/MS和脑内微透析技术的异嗪皮啶在帕金森病模型大鼠脑内药动学研究 [J], 卢芳;范振群;张颖;周世慧;刘树民;唐波;杨婷婷2.微透析-高效液相色谱法测定大鼠脑脊液中4种氨基酸的含量测定 [J], 韩进;万海同;别晓东;李金辉;张宇燕3.高效液相色谱法分析大鼠脑微透析液中的去甲肾上腺素 [J], 贺赛琳;岳云;张英民;郝建华;郭徽;盛志勇4.微透析和高效液相色谱法测定大鼠脑内天麻素及天麻苷元含量 [J], 吕允凤5.微柱高效液相色谱法测定大鼠脑微透析液中的乙酰胆碱和胆碱 [J], 贾兴元;吴安石;岳云;刘敬忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定氨基酸

脑蛋白水解物溶液氨基酸含量分析方法研究方案1、仪器与试药1.1 仪器1525型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；Waters1525型泵，Waters2487型检测器，Waters5CH 型柱温箱，WatersBREEZE数据处理软件，水浴恒温器（精度±0.1℃），旋涡器，微量移液器，衍生专用管；CP225D型分析天平（德国）；4umNora-Pak TM C18（3.9mm×150mm，5μm）色谱柱（美国）1.2 药品与试剂16种氨基酸（门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）由中国药品生物制品检定所提供。

脑蛋白水解物注射液，云南盟生药业有限公司生产，规格10ml/支。

批号：2013、2013、2013.乙腈（HPLC级）；EDTA（分析纯）；磷酸（分析纯）；二乙胺（分析纯）；三水合乙酸钠（分析纯）。

2、方法与结果2.1色谱条件流动相A为AccQTag醋酸—磷酸盐缓冲液；由AccQTagEluent A浓缩制备AccQTag洗脱液,用前稀释10倍（或按以下方法配制：称19.04g三水合乙酸钠，加1000ml纯化水，搅拌，溶解，用50%H3PO4将pH调至5.2，加入1ml 1mg/ml的EDTA溶液，加入2.37ml二乙胺，用50%H3PO4滴定至pH4.95，用水溶性过滤器过滤，超声，脱气，备用。

）；流动相B为60% HPLC级乙腈，按梯度表梯度洗脱；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；进样量5μl；柱温38℃。

2.2对照品溶液、供试品溶液的制备分别精密称取16种氨基酸标准品，用纯化水配制成浓度如下表所示的混合溶液。

取上述溶液0.1ml，加纯化水0.9ml，旋涡器混匀，作为对照品溶液；取脑蛋白水解物注射液，加水稀释成含总氮为1mg/ml的溶液，取0.1ml，加纯化水0.9ml,旋涡器混匀，作为供试品溶液。

微透析_高效液相色谱法测定大鼠脑脊液中4种氨基酸的含量测定

本实验采用微透析技术将透析探针埋入动物的脑中, 透析探针可除去分子量大于 30 000 的分子 [ 4, 5] , 对周围组织损伤很小, 取样量少, 并且多位点多时点采样进行动态监测。样品不经预处理, 灌流速度稳定在 31 0 L L /m in可使回收率提高。
雄性 SD大鼠以水合氯醛 ( 400 m g/kg)腹腔麻醉, 固定在立体定位仪上, 将透析套管定位于右侧纹状体 (前囟前 01 2 mm, 旁开 315 mm, 皮层下 512 mm )并用小螺钉固定。开启透析灌流系统, 调节恒流泵控制液流速 310 LL# m in- 1, 透析探针与人工脑脊液灌流系统直接相接。灌流平衡 120 m in 后, 每 15 m in收集 1管, 每管 30 LL, 共收集 8管透析液。收集的透析液立即放入 - 20 e 冰箱保存。 6 OPA 柱前衍生
的含量。结果: 该体系可在 30 m in内对脑脊液中 4种氨基酸实现良好的分离, 4种氨基酸在 01625- 10 Lmol/L浓
度范围内与色谱峰面积线性关系良好, 保留时间分别是天门冬氨酸 41392 m in、谷氨酸 51592 m in、牛磺酸 131 625 m in、
C - 氨基丁酸 141833 m in。结论: 本方法准确、灵敏、方便、重复性好, 可用于微透析样品中氨基酸的含量测定。
液相分析采用梯度洗脱, 缩短分析时间, 改善峰形和提高样品的检测灵敏度。选用 KH 2 PO4 缓冲液配制流动相, 其浓度为 01 1 m ol/L, 如果浓度过高会破坏键合相的稳定性, 对色谱柱的损害较大。另外, 缓冲液一定要用低浓度的, 临用前现配, 并用 01 22 Lm 滤膜过滤。水用超纯水系统去除杂质。

利用微透析技术在大鼠脑内取样的方法

利用微透析技术在大鼠脑内取样的方法本文通过查询文献并结合笔者的实际操作经验，介绍微透析技术原理，以及利用微透析技术进行清醒大鼠rACC脑区定位取样的方法。

标签：微透析；透析液；立体定位；rACC脑区；大鼠前扣带皮层（anterior cingulate cortex，ACC），尤其是其吻侧部（rostral ACC，rACC）是参与情绪情感反应的重要中枢[1-3]。

已有研究证实，rACC也是伤害性刺激传入高位中枢时形成痛厌恶情绪的重要脑区[4-6]，那么在痛情绪发生时rACC脑区神经元释放的神经递质有何变化是我们所关注的。

微透析技术正是一种可以探究这一問题的手段。

该技术是将灌流取样和透析技术结合起来并逐渐完善的一种从生物活体内进行动态微量生化取样的新技术，具有活体连续取样、动态观察、定量分析、采样量小、组织损伤轻等特点[7]。

目前，微透析技术主要应用于大脑、血液、脊髓等部位[8-11]，通过定位后取样再检测，观察目标神经递质的相对变化，可在麻醉或清醒的生物体上使用。

在清醒生物体上进行微透析实验比起麻醉生物体，取得的样本会更接近于正常生理状态[12]。

但由于动物处于可自由活动的状态，存在很多不确定因素，因此实验中所需的条件和对动物的各种操作均要在不断地摸索和尝试中确定。

笔者通过查询文献并结合作者的实验操作经验，介绍利用微透析技术进行清醒大鼠rACC脑区定位取样的方法，现报道如下。

1 定位1.1 微透析探针的选取微透析探针的供应商有瑞典的CMA公司，美国的BAS公司和日本的EICOM公司，另外也有实验室采用自制的微透析探针。

本实验室采用的是EICOM公司的探针，根据定位脑区的深度和所需检测的目标神经递质的分子量大小（一般检测的神经递质为氨基酸类神经递质和单胺类神经递质），选择所需的探针规格。

EICOM公司的脑组织探针主要有三个系列，本实验室选用的探针样式为A-Z系列带有导管、内芯和导管配套的螺帽，探针规格为管长4 mm，膜长2 mm，膜材料：人造纤维素，50 kDa截留分子量，见图1。

高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量-精品文档

高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量复方氨基酸注射液是一种透明、无色或微黄色的澄明液体，适用于不能口服或经肠道补给营养，以及营养不能满足需要的患者。

复方氨基酸注射液具有促进人体蛋白质代谢正常，纠正负氮平衡，补充蛋白质，加快伤口愈合的作用。

氨基酸（Amino acid）是构成蛋白质的基本单位，赋予蛋白质特定的分子结构形态，使他的分子具有生化活性[1-4]。

蛋白质是生物体内重要的活性分子，包括催化新陈代谢的酵素和酶。

酪氨酸是一种芳香族氨基酸，亦是20种用来合成蛋白质的蛋白氨基酸之一[5-11]。

色氨酸具有促进胃液及胰液产生的作用。

目前主要生产复方氨基酸注射液的厂家有上海长征富民金山制药XX公司、广东利泰制药XX公司、八峰药化宜昌有限责任公司、石家庄四药XX公司、西南药业XX 公司、湖南科伦制药XX公司、安徽丰原药业XX公司、广东科伦药业XX公司、广东利泰制药XX公司、广州百特侨光医疗用品XX公司等。

本文采用高校液相测定了复方氨基酸注射液中酪氨酸和色氨酸的含量。

1 仪器与试药瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；SCQ-1020超声波清洗器（上海声彦超声仪器XX公司）；UltiMate3000 高效液相色谱仪（上海仪先仪器XX公司）；E2000制冷色谱柱温箱（上海子期实验设备XX公司）；UV2800紫外可见分光光度计（上海舜宇恒平科学仪器XX公司）；PHS-3C酸度检测仪（深圳市卡迪亚科技XX公司）；MP-TA-10L 超纯水器（成都优越科技XX公司）。

乙腈（济南汇丰达化工XX公司）、三乙胺（吴江市吉祥精细化工XX公司）、冰醋酸（济南汇丰达化工XX公司）、甲醇（吴江市吉祥精细化工XX公司）、醋酸钠（济南汇丰达化工XX公司）、磷酸二氢钠（吴江市吉祥精细化工XX 公司）、四氢呋喃（济南汇丰达化工XX公司）、磷酸（淄博丰仓化工XX公司）。

2 含量测定2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果[11]，确定色谱条件如下。

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸王锦;沈霖霖;曹银祥;钱源;朱大年【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2005(020)005【摘要】目的建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法.方法通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光(激发波长280 nm,发射波长340 nm)检测氨基酸浓度.用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH值6.00～6.25)和甲醇(46%)混合液(加入四氢呋喃2%)作流动相,流速为1 ml/min.结果在0.1～40.0μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数(r)均值为0.999 2,日内和日间变异系数(CV)分别为2.41%～5.23%、3.51%～6.48%,平均回收率为90.13%～98.47%.结论本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定.【总页数】4页(P424-427)【作者】王锦;沈霖霖;曹银祥;钱源;朱大年【作者单位】复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032;复旦大学上海医学院生理与病理生理学系,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.高效液相色谱-荧光检测法快速测定植物油中的α-生育酚 [J], 寇立娟;李兰晓;王明林;胥洪2.高效液相色谱荧光检测法快速测定天然生育酚中痕量苯并[a]芘 [J], 董新艳;杨亦文3.基于涡流色谱技术的在线固相萃取/高效液相色谱-荧光检测法结合在线稀释快速测定牛奶中5种氟喹诺酮抗生素残留 [J], 张艳海;金燕4.高效液相色谱-荧光检测法快速测定血清中的色氨酸 [J], 王清平;唐爱国5.多环芳烃分子印迹柱-高效液相色谱荧光检测法快速测定烤肉中15种多环芳烃[J], 阳文武;谭顺中;郭娅;周浓因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱的使用及氨基酸标样的分析

三、流动相的选择
• • • • • 采用 “HPLC” 级溶剂避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂对试样有适宜的溶解度溶剂粘度要小与检测器相匹配
四、高效液相色谱仪的基本结构高效液相色谱仪由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统等五大部分组成，其基本结构如下图：高效液相色谱的特点与基本结构.ppt
石油醚色素碳酸钙颗粒玻璃柱
二、定义
色谱法：利用组分在两相之间分配系数不同而进行分离的技术
移动相：携带样品流过整个系统的流体
固定相：静止不动的一相，通常为色谱柱固定
液

反相液相色谱
流动相极性大于固定相极性能溶于水/有机混合物的中性或非离子化合物

正相液相色谱
流动相极性小于固定相极性
不溶于水/有机混合液的亲脂样品、异构体混合物和制备HPLC
二、LC-10AVP液相色谱仪键盘操作
三、氨基酸标样的分析
一、实验目的（1）熟悉高效液相色谱仪的结构、分离原理和操作程序。（2）掌握氨基酸标样的分析方法、原理。
二、实验原理氨基酸与PITC发生反应生成的衍生物，在 254nm处有最大吸光值。氨基酸衍生物进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积可进行定性和定量。该方法是柱前衍生法中的一种。PITC方法的反应方程式如下图所示：
PITC
PTC
• 三、实验仪器和试剂
1、仪器：高效液相色谱仪（带紫外检测器）。
2、材料氨基酸标样 3、试剂：
衍生液：异硫氰酸苯：甲醇：三乙胺：水（V/V）=1：7：1：1 正己烷、乙腈、乙酸、乙酸钠以上试剂中乙腈为色谱醇，水为二次蒸馏水，其它为分析醇。
四、实验步骤 1、柱前衍生步骤：（1）将200ul衍生液加入200ul氨基酸标样或样品中，震荡使混合均匀，室温放置1小时。（2）反应液中加入400ul正己烷，充分震荡后放置使分层。（3）取下层溶液用一次性滤膜过滤器（0.45ul）过滤。（4）取滤液5ul注入HPLC。

HPLC测定脑组织和脑脊液中4种氨基酸类神经递质含量的方法改良研究

HPLC测定脑组织和脑脊液中4种氨基酸类神经递质含量的方法改良研究王炜;刘朝;江卫国;王式平;何善述【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】1999(028)002【摘要】谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)等神经递质的代谢异常是诱发多种神经系统疾病的因素之一.由于神经递质在脑内的含量很低,改良建立了一种用HPLC 荧光检测Glu、GABA等4种神经递质的方法,以高丝氨酸为内标,流动相为磷酸缓冲液和甲醇,梯度洗脱20min,荧光检测.分离效果及线性关系良好,Glu、GABA的相关系数分别为0.9969、0.9996;精密度CV批内3.4 %,批间5.6 %;其最小检测限分别为3.3 pmol、1.6 pmol.【总页数】2页(P92-93)【作者】王炜;刘朝;江卫国;王式平;何善述【作者单位】同济医科大学基础医学院生物化学教研室,武汉,430030;同济医科大学附属协和医院中心实验室,武汉,430022;同济医科大学基础医学院生物化学教研室,武汉,430030;同济医科大学基础医学院生物化学教研室,武汉,430030;同济医科大学基础医学院生物化学教研室,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】Q592.5;R322.8【相关文献】1.AQC柱前衍生RP-HPLC荧光法测定颅脑损伤患者脑脊液中氨基酸类神经递质[J], 陈为;柯雪红;杨小催2.OPA柱前衍生RP-HPLC-FLD测定小鼠脑组织中6种氨基酸类神经递质 [J], 黄冰琳3.大鼠脑组织中氨基酸类神经递质的rP—HPLC—UV柱前衍生定？… [J], 祁艳斌;张纬4.RP-HPLC法测定大鼠脑组织及脑脊液中四种氨基酸类神经递质的含量 [J], 周卿;代广会;左巨波;尚京川5.荧光高效液相色谱法测定三种失眠模型大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量 [J], 涂星;郜红利;卢映;吴俊洪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

氨基酸类神经递质含量测定

❖ 方法2【高效液相色谱法检测小鼠脑组织中氨基酸类神经递质】
美国 waters 2695 高效液相色谱仪、UV检测器及色谱数据处理系统。
色谱条件：Diamonsil C18色谱柱(4 .6×200nm， 5μm)；流动相A 为醋酸钠缓冲液，B为乙睛-水。柱温：28℃，进样量20μL，采用外标法定量。
Agilent 1100 高效液相色谱仪；G1321A荧光检测器
色谱条件：Zorbax Eclipse AAA C18柱色谱柱； 75×4. 6 mm，3. 5μm；流动相A为NaH2PO4·H2O缓冲液；流动相B为乙腈/甲醇/水，梯度洗脱。
DAD检测波长：紫外波长338 nm；FLD检测波长：激发波长340 nm，发射波长450 nm。
一、样品处理
❖ 方法1【高效液相色谱法检测小鼠脑组织中氨基酸类神经递质】脑组织称重，加入 9倍体积的甲醇/水，冰浴匀
浆；离心，上清液低温保存。衍生化反应：小脑组织液加入乙睛，混匀离心，
取上清液加入 NaHCO3和2,4 -二硝基氟苯，混匀，暗中衍生 (水浴 65 ℃ )，进样。
❖ 方法2【反相高效液相色谱荧光法测定大鼠脑组织中氨基酸类神经递质】
色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX C18柱 (4.6 mm× 150mm，5μm)，采用梯度洗脱。流动相 A为甲醇，流动相B为醋酸钠缓冲液。柱温30℃，进样量20μL。
荧光检测波长：激发光波长为 340 nm，发射光波长为 450 nm。
0 . 625-5μmol /L浓度范围内线性关系良好
荧光检测波长：激发波长为340 nm，发射波长为 455 nm。
在 0.5-40μmol/L 浓度范围有较好的线性关系

高效液相色谱_电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量

第25卷第2期2006年3月分析测试学报FENXI CESH I X UEBAO(J ournal of Ins tru m en talAnal ys i s)V ol 25No 290~92高效液相色谱/电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量谭炳炎1,郑琳1,冯翔2(1.中山大学公共卫生学院中心实验室,广东广州 510080;2.中山大学公共卫生学院营养学系,广东广州 510080)摘要:建立了高效液相色谱/电化学检测法测定大鼠脑组织和血液中单胺递质及其代谢产物的方法。

能同时测定去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、3,4-二羟基苯乙酸(DO PAC)、多巴胺(DA)、高香草酸(HAV)、5-羟色胺(5-HT),并能和内标3,4-二羟卞胺(DHBA)分离良好。

本方法快速、简便,回收率为92%~105%,线性范围2 8~680ng/mL,检出限为0 05ng(S/N=3)。

本方法已应用在服用中药的大鼠下丘脑组织及血液的测定中,数据显示,本法能满足测定要求。

关键词:高效液相色谱;电化学检测;单胺类神经递质中图分类号:O657 1 文献标识码:A 文章编号:1004-4957(2006)02-0090-03D eter m i nati on o fM onoa m i ne T rans m itters i n R at Blood and Brai n T issues byH i gh Perf or m ance L i qu i d Chro m atographyTAN B ing-yan1,Z H E NG Lin1,FE NG X iang2(1.Central L aboratory,Schoo l o f Pub lic H ealth,Sun Y at-sen U n i versity,G uangzhou 510089,China;2.D epart m ent o fNutritiona l Sc i ences,School o f Publi c H ea lth,Sun Y a t-sen U n i versity,G uangzhou 510089,Ch i na) Abstrac:t A m ethod was developed to deter m i n e m onoa m ine trans m itters and their m etabo lites in rat blood and brain tissues by h i g h perfor m ance li q u i d chro m atog raphy w ith electroche m i c al detection.No r-ep i n ephri n e(NE),ep i n rphri n e(E),3,4-d i h ydr oxypheny lacetic acid(DOPAC),dopa m ine hydrochlo-ride(DA),ho m ovan illi c ac i d(HVA),and5-hydr oxytrypta m i n e(5-HT)cou l d be deter m i n ed si m ulta-neously and disti n ctly separated fro m i n ter nal standar d(3,4-dihydroxybenzyla m ine,D H BA)by th is m ethod.The recoveries of these co mpounds w ere bet w een92%and105%and the li n ear range w as2 8-680ng/m L.The detecti o n li m itw as0 05ng(S/N=3).This m ethod was app lied to deter m i n i n gt h e m onoa m i n es i n hypothala mus tissues of rats upon taking traditional Ch i n ese m ed ici n e,and satisfac-to r y resu lts w ere achieved.Key words:H i g h perfor m ance li q u i d chr o m atography;E lectroche m i c al detecti o n;M onoa m ines单胺类神经递质包括去甲肾上腺素(NE),肾上腺素(E),多巴胺(DA),5-羟色胺(5-HT)等物质。

高效液相色谱法测定氨基酸

脑蛋白水解物注射液，云南盟生药业有限公司生产，规格10ml/支。

批号：2013、2013、2013.乙腈（HPLC级）；EDTA（分析纯）；磷酸（分析纯）；二乙胺（分析纯）；三水合乙酸钠（分析纯）。

）；流动相B为60% HPLC级乙腈，按梯度表梯度洗脱；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；进样量5μl；柱温38℃。

2.2对照品溶液、供试品溶液的制备分别精密称取16种氨基酸标准品，用纯化水配制成浓度如下表所示的混合溶液。

高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量

高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量【摘要】本文采用高校液相测定了复方氨基酸注射液中酪氨酸和色氨酸的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），甲醇-乙腈-0.1%醋酸钠水溶液（3：5：92）为流动相，检测波长为280nm；色氨酸在50～150μg·mL-1范围内呈良好的线性关系；酪氨酸在100～900μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

色氨酸和酪氨酸的平均回收率分别为99.5%、99.5%，RSD为0.63%（n=6）、0.56%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于复方氨基酸注射液中色氨酸和酪氨酸的含量测定。

【关键词】复方氨基酸注射液；色氨酸；酪氨酸复方氨基酸注射液是一种透明、无色或微黄色的澄明液体，可提供完全、平衡的18种必需和非必需氨基酸，改善氮平衡。

复方氨基酸注射液具有促进人体蛋白质代谢正常，纠正负氮平衡，补充蛋白质，加快伤口愈合的作用。

复方氨基酸注射液用于大面积烧伤、创伤及严重感染等应激状态下肌肉分解代谢亢进、消化系统功能障碍、营养恶化及免疫功能下降的病人的营养支持。

复方氨基酸注射液含有L-脯氨酸（C5H9NO2）、L-组氨酸（C6H9N3O2）、L-色氨酸（C11H12N2O2）、L-丝氨酸（C3H7NO3）、L-丙氨酸（C3H7NO2）、L-精氨酸（C6H14N4O2）、L-缬氨酸等。

本文采用高校液相测定了复方氨基酸注射液中酪氨酸和色氨酸的含量。

1.仪器与试药WP-UP-Ⅱ-30分析型实验室专用超纯水机（四川沃特尔水处理设备有限公司）；FL2200-2高效液相色谱仪（浙江福立分析仪器有限公司）；CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）；B8510E-DTH超声波清洗机（必能信超声（上海）有限公司）；320 XT 电子分析天平（上海精科天美贸易有限公司）；U-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

高效液相色谱仪测定发酵液中的氨基酸含量

高效液相色谱仪测定氨基酸的含量1 L--色氨酸含量的测定1.1实验仪器与试剂色氨酸样品，甲醇，高效液相色谱仪，0.03%KH2PO4溶液1.2 HPLC色谱分析条件流动相为0.03%KH2PO4溶液（A）-甲醇（B），线性梯度淋洗，流速1.0mL/min，柱温35℃，检测波长276nm。

1.2标准溶液的配制精密称取色氨酸标准标准品50mg，置100ml容量瓶中，振摇，用流动相溶解到刻度，作为供试品溶液，另取色氨酸样品适量，同法操作。

1.3标准直线的制作精密称取色氨酸标准样品适量,分别稀释制成每1ml 中含色氨酸50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液，注入液相色谱仪，以色氨酸峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，制作回归标准直线。

1.4发酵液中样品中色氨酸含量的测定取发酵液，稀释配制成约500μg/ ml 的溶液，摇匀，过滤，取25μl进样，在高效液相色谱仪下测量，记录峰值面积，作图。

2L-精氨酸含量的测定2.1实验仪器与试剂L-精氨酸标准样品，乙腈，高效液相色谱仪，磷酸二氢铵。

PH计，磷酸，2.2HPLC色谱分析条件流动相: 以磷酸二氢铵溶液( 称取磷酸二氢铵1.15g, 加水800m 溶解后, 用磷酸调节pH 值至2.0±0.1, 加水稀释至1000ml ) - 乙腈为流动相，线性梯度淋洗; 柱温为30℃检测波长为206nm；进样量：25μl。

2.2标准直线的制作精密称取精氨酸标准标准品50mg，置100ml 容量瓶中，振摇，用流动相溶解到刻度，作为供试品溶液，另取色氨酸样品适量，同法操作。

精密称取精氨酸标准样品适量,分别稀释制成每1ml 中含精氨酸50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液，注入液相色谱仪，以精氨酸峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，制作回归标准直线。

2.3发酵液中样品中精氨酸含量的测定取发酵液，稀释配制成约500μg/ ml 的溶液，摇匀，过滤，取25μl 进样，在高效液相色谱仪下测量，记录峰值面积，作图。

高效液相色谱法测定氨基酸含量操作流程

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高效液相色谱法测定食物中氨基酸含量北京液相色谱仪分析案例-推荐下载

对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术关，系电通，力1根保过据护管生高线产中0不工资仅艺料可高试以中卷解资配决料置吊试技顶卷术层要是配求指置，机不对组规电在范气进高设行中备继资进电料行保试空护卷载高问与中题带资2负料2，荷试而下卷且高总可中体保资配障料置各试时类卷，管调需路控要习试在题验最到；大位对限。设度在备内管进来路行确敷调保设整机过使组程其高1在中正资，常料要工试加况卷强下安看与全22过，22度并22工且22作尽22下可护都能1关可地于以缩管正小路常故高工障中作高资；中料对资试于料卷继试连电卷接保破管护坏口进范处行围理整，高核或中对者资定对料值某试，些卷审异弯核常扁与高度校中固对资定图料盒纸试位，卷置编工.写况保复进护杂行层设自防备动腐与处跨装理接置，地高尤线中其弯资要曲料避半试免径卷错标调误高试高等方中，案资要，料求编试技5写、卷术重电保交要气护底设设装。备备置管4高调、动线中试电作敷资高气，设料中课并技3试资件且、术卷料中拒管试试调绝路包验卷试动敷含方技作设线案术，技槽以来术、及避管系免架统不等启必多动要项方高方案中式；资，对料为整试解套卷决启突高动然中过停语程机文中。电高因气中此课资，件料电中试力管卷高壁电中薄气资、设料接备试口进卷不行保严调护等试装问工置题作调，并试合且技理进术利行，用过要管关求线运电敷行力设高保技中护术资装。料置线试做缆卷到敷技准设术确原指灵则导活：。。在对对分于于线调差盒试动处过保，程护当中装不高置同中高电资中压料资回试料路卷试交技卷叉术调时问试，题技应，术采作是用为指金调发属试电隔人机板员一进，变行需压隔要器开在组处事在理前发；掌生同握内一图部线纸故槽资障内料时，、，强设需电备要回制进路造行须厂外同家部时出电切具源断高高习中中题资资电料料源试试，卷卷线试切缆验除敷报从设告而完与采毕相用，关高要技中进术资行资料检料试查，卷和并主检且要测了保处解护理现装。场置设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。

2024版药典氨基酸检测方法

2024版药典氨基酸检测方法2024年版药典对氨基酸的检测方法尚未施行，因此在这篇文章中我们将着重介绍氨基酸的分析技术和方法。

氨基酸是构成蛋白质的基本单元，对于新药研发、蛋白质工程以及食品营养分析等领域来说，准确、快速、灵敏的氨基酸分析是非常重要的。

目前，氨基酸的分析方法主要包括色谱法、电泳法、质谱法和光谱法等。

色谱法是目前最常用的氨基酸分析方法之一、常见的色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。

HPLC是一种基于液相色谱技术的分析方法，其优势在于可以同时测定多种氨基酸，并且具有准确度高、分析时间短等特点。

但是，HPLC的分离介质和流动相对氨基酸的分析结果有重要的影响，因此需要选用合适的HPLC柱和优化流动相的组成。

GC则是基于气相色谱技术的分析方法，其主要优势在于对样品的洗脱和检测具有较高的选择性。

但是，GC对于热敏性和易挥发性氨基酸的分析效果较好，而对于其他非极性或极性氨基酸的分析效果较差。

电泳法又被称为毛细管电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，是基于电场作用下分离氨基酸的分析方法。

电泳法具有在线分离和检测、分离速度快、耗样量小等优点。

但是，由于电泳法对于氨基酸的分离度和灵敏度较低，因此电泳法常常与质谱法和光谱法结合使用，以提高分析的准确性和灵敏度。

光谱法是一种利用分子吸收、发射或散射光谱进行分析的方法。

氨基酸的紫外吸收光谱是其分析中最常见的光谱。

通过分析氨基酸在特定波长下的吸光度，可以定量测定其浓度。

另外，红外光谱和核磁共振光谱也可以用于氨基酸的结构和含量分析。

需要注意的是，以上介绍的氨基酸分析方法在样品前处理和仪器操作中都需要一定的专业知识和技能。

此外，针对特殊要求，也有一些新的技术正在不断发展和研究中，如基于表面增强拉曼光谱（SERS）的氨基酸检测方法和基于纳米孔技术的单分子氨基酸测定方法等。

综上所述，虽然2024年版药典对氨基酸的检测方法尚未施行，但是已有多种快速、准确、灵敏的氨基酸分析方法在实际应用中得到广泛的应用。

氨基酸类神经递质含量测定

氨基酸类神经递质含量测定
一、样品处理
方法1 方法【高效液相色谱法检测小鼠脑组织中氨基酸类神经递质】脑组织称重，倍体积的甲醇脑组织称重，加入 9倍体积的甲醇水，冰浴匀倍体积的甲醇/水离心，上清液低温保存。浆；离心，上清液低温保存。衍生化反应：小脑组织液加入乙睛，混匀离心，衍生化反应：小脑组织液加入乙睛，混匀离心，二硝基氟苯，取上清液加入 NaHCO3和2,4 -二硝基氟苯，混匀，二硝基氟苯混匀，暗中衍生 (水浴 65 ℃ )，进样。水浴，进样。
方法5 方法【高效液相色谱 - 质谱 - 质谱法测定脑组织中氨基酸类神经递质】脑组织称重，脑组织称重，加入 HCl，冰浴超声粉碎匀浆，冰浴超声粉碎, 液加入内标，离心取上清加入甲醇甲醇，液加入内标，离心取上清加入甲醇，振荡 30 s，，离心，上清液备用。离心，上清液备用。衍生化反应：组织液60 吹干，衍生化反应：组织液 ℃加热并 N2吹干，取出后加入盐酸正丁醇盐酸正丁醇，出后加入盐酸正丁醇，60 ℃衍生化反应 30 min。。吹干，残渣用甲醇醋酸铵水溶液甲醇-醋酸铵 60 ℃ 加热并 N2吹干，残渣用甲醇醋酸铵水溶液溶解，过滤后待用。溶解，过滤后待用。
二、测试方法
方法1 方法【高效液相色谱荧光法同时测定小鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质】液相色谱仪系统：购自日本岛津，液相色谱仪系统：购自日本岛津，RF-10AXL荧光日本岛津检测器色谱条件：色谱柱为Agilent C18柱色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX C18柱 (4.6 mm× 150mm，5µm)，采用梯度洗脱。流动相 × ，，采用梯度洗脱。缓冲液。 A为甲醇，流动相为醋酸钠缓冲液。柱温 ℃，进为甲醇，流动相B为醋酸钠缓冲液柱温30℃ 样量20µL。样量。荧光检测波长：荧光检测波长：激发光波长为 340 nm，发射光，波长为 450 nm。。

高效液相色谱法检测小鼠脑组织中氨基酸类神经递质

高效液相色谱法检测小鼠脑组织中氨基酸类神经递质宋泰【期刊名称】《吉林农业科技学院学报》【年(卷),期】2009(018)004【摘要】建立了高效液相色谱法测定小鼠脑中四种氨基酸类神经递质含量的方法.以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,Diamomil C18(4.6×200mm,5μn)色谱柱,乙腈和醋酸钠缓冲液为流动相,采用二元梯度洗脱,UV350nm检测.结果显示:在18min内四种氨基酸分离完全,在0.01～100ug·mL-1范围内线性关系良好,Asp、Glu、Gly、GABA相关系数分别为0.998 5,0.997 6,0.994 3,0.992 4;日内变异系数分别为2.4%,3.8%,3.2%和3.5%;标准加入平均回收率分别为95.18%,94.70%,97.60%和95.90%.本方法快速、准确、简单、灵敏度高、重现性好,为临床检测及科研提供参考.【总页数】3页(P18-20)【作者】宋泰【作者单位】吉林农业科技学院动物医学学院,吉林,132101【正文语种】中文【中图分类】S1392【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定大鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质 [J], 张宇浩;马昱;郭曦;王勤;曹志娟2.OPA柱前衍生RP-HPLC-FLD测定小鼠脑组织中6种氨基酸类神经递质 [J], 黄冰琳3.OPA柱前衍生反相高效液相色谱法测定脑组织中氨基酸类神经递质 [J], 孙建良;段世明;王钧;曾因明4.大豆异黄酮对小鼠脑组织中胆碱酯酶和氨基酸类神经递质及记忆的影响 [J], 辛天蓉;刘燕强;吕宪禹;任自立;赵强5.荧光高效液相色谱法测定三种失眠模型大鼠脑组织氨基酸类神经递质的含量 [J], 涂星;郜红利;卢映;吴俊洪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

微透析和高效液相色谱法测定大鼠脑内天麻素及天麻苷元含量

微透析和高效液相色谱法测定大鼠脑内天麻素及天麻苷元含量吕允凤
【期刊名称】《实用药物与临床》
【年(卷),期】2014(17)3
【摘要】目的考察不同剂量天麻素皮下及口服给药后大鼠脑内的天麻素及其代谢产物天麻苷元的浓度变化.方法采用脑内微透析技术进行在体动态取样,建立了高效液相-串联四级杆质谱方法测定脑透析液中的天麻素含量,建立了高效液相-二极管阵列检测方法测定脑透析液中的天麻苷元含量.结果两种给药方式大鼠不同脑区内天麻素浓度均较低,天麻苷元脑内浓度明显高于其原型药物天麻素.结论天麻素的血脑屏障透过能力差,但其活性代谢产物天麻苷元能够较好地进入脑内发挥作用.【总页数】4页(P326-329)
【作者】吕允凤
【作者单位】国家食品药品监督管理局医疗器械技术审评中心,北京,100044
【正文语种】中文
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定不同加工工艺天麻中天麻素和天麻苷元含量 [J], 沈肖晶;金传山;许凤清;李保明;胡雨;
2.高效液相色谱法测定天麻素片中天麻素的含量 [J], 蒲恒然;陈娟
3.高效液相色谱法测定天麻素胶囊中天麻素含量 [J], 张治军;罗亚虹;周杰强
4.高效液相色谱法测定天麻及全天麻胶囊中天麻素的含量 [J], 莫志江;莫可元
5.高效液相色谱法测定不同加工工艺天麻中天麻素和天麻苷元含量 [J], 沈肖晶;金传山;许凤清;李保明;胡雨
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HPLC法测定大鼠脑组织游离天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽及γ-氨基丁酸

HPLC法测定大鼠脑组织游离天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽及γ-氨基丁酸宋杨;于涛;庞磊;刘影;韩璐;杨菁【期刊名称】《辽宁医学院学报》【年(卷),期】2010(031)004【摘要】目的建立测定大鼠脑组织中游离天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽以及γ-氨基丁酸含量的高效液相色谱法.方法采用C18色谱柱,以乙腈和25 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.8)为流动相,用邻苯二甲醛为柱前衍生剂,流速为1 mL/min,激发波长为338 nm,发射波长为425 nm,在柱温38℃下采用二元梯度洗脱,同时对大鼠脑组织中游离天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽以及γ-氨基丁酸的含量进行了测定.结果天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽以及γ-氨基丁酸在该色谱条件下均可基线分离,在0.5～6μg/mL范围内呈现良好线性关系,天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽以及γ-氨基丁酸的相关系数分别是0.9991,0.9998,0.9996,0.9995.回收率分别为99.80%,99.74%,99.63%,99.34%.结论该方法灵敏可靠,专属性强,重现性好.天门冬氨酸、谷氨酸、肌肽以及γ-氨基丁酸在大鼠脑组织中的含量分别为0.77±0.04、1.16±0.07、0.36±0.05、1.30±0.06 mg/g.【总页数】3页(P314-316)【作者】宋杨;于涛;庞磊;刘影;韩璐;杨菁【作者单位】辽宁医学院生物化学教研室,辽宁,锦州,121000;辽宁医学院生物化学教研室,辽宁,锦州,121000;辽宁医学院生物化学教研室,辽宁,锦州,121000;辽宁医学院生物化学教研室,辽宁,锦州,121000;辽宁医学院生物化学教研室,辽宁,锦州,121000;辽宁医学院生物化学教研室,辽宁,锦州,121000【正文语种】中文【中图分类】Q593【相关文献】1.醒脑通脉胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织谷氨酸、天门冬氨酸的影响 [J], 刘泰;张青萍;吴林;谭璐璐;秦若飞;黄小琪2.柱前衍生-电化学检测HPLC法测定大鼠脑内的谷氨酸和γ-氨基丁酸 [J], 刘建芳;侯艳宁;刘会臣3.HPLC法测定tremor大鼠脑组织中谷氨酸和GABA含量 [J], 俞军龄;陈再兴;毛小元;孟秀君;郭凤;刘睿;吴坤灿;谢妮;蔡际群4.RP-HPLC法测定人血清中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸含量 [J], 曹晶萍;崔颖;高颖5.拟除虫菊酯对大鼠脑组织谷氨酸和天门冬氨酸含量的影响 [J], 牛玉杰;石年;李龙;刘毓谷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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