阳离子交换树脂

强酸性阳离子交换树脂及沉淀剂用于纯化富集川贝母总生物碱1强酸性强离子交换树脂

2.1强酸性阳离子树脂的预处理

树脂以去离子水浸泡过夜，并洗至去离子水近无色; 先加入5BV 7%HCl溶液浸泡1h，注意随时搅拌，用去离子水洗至洗出水近中性；后加入8BV 8%NaOH溶液浸泡1h，随时搅拌，用去离子水洗至洗出水近中性；最后加入5BV 7%HCl溶液浸泡2h，使阳离子树脂转化成H型，并用去离子水洗至洗出水近中性，即可装柱。

1.2药材的预处理

取20g伊贝母，打粉过80目筛，用25ml氨水浸润2h后，用80%乙醇常压回流提取4h，减压蒸干。将得到的伊贝母浸膏用50ml去离子水溶解，滴加HCl至pH3.0,用50ml石油醚脱脂3次，加入氨水至pH10.0，最后用50ml氯仿萃取，直至氯仿萃取液检测不到生物碱为止，合并氯仿萃取液，依据2010版《药典》川贝母项下生物碱含量测定方法测定20g伊贝母中生物碱含量。最后将氯仿萃取液减压蒸干。

1.3强酸性阳离子树脂的选择

贝母中生物碱主要为叔胺类生物碱，碱性较弱，故选用强酸性阳离子交换树脂用于纯化富集生物碱。由于贝母中生物碱分子量集中在400-450，且空间结构较大，那么阳离子交换树脂的交联度对纯化富集效果具有显著影响：交联度大，交换容量大，但交联网孔小，不利于大离子的进入；交联度小，交换容量小，但交联网孔大，在树脂中离子易于扩散和交换。因而选用下列强酸性阳离子交换树脂（表1）

表1 不同离子交换树脂的主要特征

将15g处理好的阳离子交换树脂装入（1.5×30cm）玻璃柱中，向处理过的药材样品加入100ml 去离子水，用盐酸调pH至3.0，使药材-药液（1∶5），加入到不同型号的阳离子交换树脂中，流速为2BV/h，收集流出液，测定流出液中生物碱含量，计算渗漏率。

1.4上样药液浓度的选择

将15g处理好的阳离子交换树脂装入（1.5×30cm）玻璃柱中，向处理过的药材样品中加入适量去离子水，调节pH3.0，使药材-药液分别达到1∶3，1∶5，1∶7。分别加入到阳离子交换树脂中，流速为2BV/h，收集流出液，测定流出液中生物碱含量，计算渗漏率。

1.5上样药液pH的选择

向处理过的药材样品加入100ml去离子水，用盐酸分别调pH至2.0，3.0，5.0，使药材-药液（1∶X），加入到X型号的阳离子交换树脂中，流速为2BV/h，收集流出液，测定流出液中生物碱含量，分别计算渗漏率。

6阳离子交换柱径高比的选择

将15g处理好的阳离子交换树脂装入不同内径的玻璃柱中，使径高比分别为1∶5，1∶10，1∶15。将药材-药液（1∶X），pH为X，加入到不同径高比的阳离子交换树脂中，流速为2BV/h，收集流出液，测定流出液中生物碱含量，计算渗漏率。

7吸附流速的选择

向处理过的药材样品加入适量去离子水，用盐酸调pH至X，使药材-药液（1∶X），加入到X型号的阳离子交换树脂中(径高比为1∶X），吸附流速分别为1BV/h，2BV/h，3BV/h，收集流出液，测定流出液中生物碱含量，计算渗漏率。

8除杂洗脱剂的选择

向处理过的药材样品加入适量去离子水，用盐酸调pH至X，使药材-药液（1∶X），加入到X型号的阳离子交换树脂中(径高比为1∶X），吸附流速分别为XBV/h，分别用纯化水，20%乙醇，40%乙醇洗脱非生物碱杂质，洗脱流速2BV/h，洗脱体积为4BV。收集杂质洗脱液，测定其中生物碱含量，计算损失率。

9洗脱剂的选择

向处理过的药材样品加入适量去离子水，用盐酸调pH至X，使药材-药液（1∶X），加入到X型号的阳离子交换树脂中(径高比为1∶X），吸附流速分别为XBV/h，用X洗脱非生物碱

杂质，洗脱流速2BV/h，洗脱体积为4BV。分别用1.0mol/L氨水/80%乙醇，2.0mol/L氨水/80%乙醇，1.0mol/L NaCl/80%乙醇，3.0mol/L NaCl/80%乙醇洗脱生物碱，流速为2BV/h，至检测不到生物碱停止洗脱。收集流出液，测定流出液中生物碱含量，计算得率。

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