土壤 有机碳 方法学验证

分析方法验证文件

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标题：土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法仪器：紫外可见分光光度计

文件编号：

参考方法/标准：土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法

HJ615-2011

本次方法验证时间：

编制：日期：审核：日期：批准：日期：

目录

1.目的 (1)

2.试样处理 (1)

2.1试样的制备 (1)

3.仪器试剂条件参数 (1)

3.1仪器参数条件 (1)

3.2试剂 (1)

4.绘制标准曲线 (1)

4.1原理 (1)

4.2标准曲线线性分析 (2)

5.最低检出限 (2)

6.精密度和回收率 (2)

7.方法验证结果判定 (2)

1.目的

依据检验检测机构资质认定评审准则和CNAS-CL01-2006准则的要求，确认开展《HJ 615-2011土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》的检测能力，通过反复试验和应用统计技术进行分析总结，编制此方法确认文件。

2.试样处理

2.1试样的制备

将土壤样品置于洁净白搪瓷托盘中，平摊成2~3cm厚的薄层。先剔除植物、昆虫、石块等残块，用木槌压碎土块，自然风干，风干时每天翻动几次、充分混匀风干土壤，采用四分法，取其两份，一份留存，一份通过2mm土壤筛用于干物质含量的测定。在过2mm 筛的样品中取出10~20g进一步细磨，并通过60目土筛，装入棕色具塞玻璃瓶中待测。3.仪器试剂条件参数

3.1仪器参数条件

仪器名称紫外可见分光光度计

仪器型号UV-1800

波长585nm

3.2试剂

葡萄糖标准使用液(10.00g/L)：吸取1.000g葡萄糖标准物质(纯度：99.6%；批号：15002)于100mL容量瓶中，稀释至刻度。

其他试剂及处理方法参照《HJ615-2011土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》。

4.绘制标准曲线

4.1原理

分别取0.00、0.50、1.00、2.00、4.00和6.00mL葡萄糖标准使用液移入100mL消解管，其对应有机碳质量分别为0.00、2.00、4.00、8.00、16.0和24.0mg。分别加入0.1g硫酸汞和5.00mL重铬酸钾溶液，摇匀。再缓慢加入7.5mL硫酸，轻轻摇匀。开启恒温加热器，设置温度为135℃。当温度升至接近100℃时，将上述具塞消解管开塞放入恒温加热器中，以仪器温度显示135℃时开始计时，加热30min。关掉恒温加热器，取出具塞消解管水浴冷却至室温。向每个消解管中加入50mL水，继续冷却至室温。再用水定容至100mL，摇

1

2

匀。于585nm 处，用10mm 比色皿，以水为参比，分别测量吸光度。以零浓度校正吸光度为纵坐标，以对应的有机碳质量(mg)为横坐标，绘制校准曲线。

4.2标准曲线线性分析

采用上述仪器试验条件，对配制好的不同浓度的葡萄糖标准系列溶液进行分析，并对其吸光度(y)与有机碳质量(mg)(x)进行回归分析，得工作曲线回归方程。

标准工作液体积(mL)0.000.50 1.00 2.00 4.00 6.00有机碳含量(mg)0.00 2.00 4.008.0016.024.0吸光度A 0.02270.07410.12390.22450.32210.5126

线性方程y=0.02059x+0.00281线性系数0.9997

由曲线可知，有机碳在配制浓度范围内具有良好的线性关系。

5.最低检出限

以扣除空白的吸光度为0.0107相对应的有机碳浓度值为检出限，当样品量为0.5g 时，测得检测限为0.05%(以干重计)。

6.精密度和回收率

以上实验条件下，样品中分别加10.0μg/mL 葡萄糖标准使用液1.00mL 和5.00mL ，加标量分别为4.00mg 和20.0mg ，每个样品平行测定6次。

项目有机碳

加标量/mg

序号(样品+标准品)测定含量/mg 样品测定含量

/mg 回收率/%RSD

4.001 6.01 2.1696.3 2.13

2 6.0898.0

3 5.9494.5

4 5.7389.3

5 5.7990.8

6 5.8191.320.0121.998.

7 2.75

220.792.7320.491.2420.189.7520.993.76

20.5

91.7

7.方法验证结果判定

重铬酸钾氧化-分光光度法测定土壤中有机碳对方法的性能指标和方法验证所涉及的评定参数结果如下：

测试项目检出限精密度准确度%%%

标准要求0.06 4.00——

验证结果0.05 2.7589.3~98.7

此次方法验证所涉及的评定参数结果符合我实验室开展重铬酸钾氧化-分光光度法测定土壤中有机碳的标准要求。

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