生物实验室常用试剂的配制ppt课件

化能力，要现配现用。
4.甲醛溶液 它常用来杀灭细菌、病毒。通常以2～
5%溶液消毒器具。本品又可作实验室熏蒸消毒。
5.漂白粉 本品含有效氯为25～30%，有强杀菌力，
能消毒、防腐、防臭和溶解坏死组织，但作用时间短。
十二、麻醉剂 它可分挥发性 (如乙醚)和非挥发性 (如
氨基甲酸乙酷)两类。前者作用时间短麻醉深度容易掌握，
等。在用乙醇脱水时，为了避免材料萎缩、僵硬，应从低
到高使用不同的浓度，逐渐脱水，有时还用无水乙醇脱水。
一般组织 (除神经组织，柔软组织外)可从70%乙醇开始经
80%、95%、100%乙醇，使它逐步脱水。对一些柔软组
织如胚胎组织、低等无脊椎动物组织，要从50%或30%或
20%乙醇开始，否则组织收缩较严重。
九、透明剂 材料经脱水后，须经透明剂透明，方能
浸蜡包埋或在树胶中封藏。其目的在于使组织中的乙醇或
丙酮被透明剂所替代，使石蜡能很顺利进进入组织和增强
组织的折光系数，便于显微镜的观察，并能和封藏剂混和
进行封藏。透明剂的种 .
类很多，常用的有二甲苯、甲苯、苯、氯仿和香柏油。
如二甲苯是应用最广的廉价透明剂。易溶于乙醇又能溶解
取2g碘化钾，溶解在10mL蒸馏水中，再加1g碘，
待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。即成碘液。溶液在光亮
处溶容于易水，变当成加氢入碘K酸I，后须可保大存大在增棕加色I2的玻溶瓶解里度。。因为I2，不易 .
3.鉴定蛋白质用的双缩脲试剂 分别配制10%氢氧化钠溶
液和1%硫酸铜溶液，待用。在3毫Байду номын сангаас待测液中加入1mL10%氢
甲醛
.
溶液。甲醛溶液无色透明，有刺激性气味，味灼烈，是良好
的动、植物材料固定液，有强烈的杀菌能力，穿透力大(仅次于
乙酸)，防腐性强，固定速度快，效果好。缺点是固定后可使材
料少许膨胀，有浓度过高，能使材料发硬发脆，因此对于精细
的解剖标本，最好用甲醛与甘油、乙醇、石炭酸等混和使用。
2.乙醇(C2H5OH) 有强烈的杀菌作用，渗透力较大，但固
20mL的蒸馏水中，把氯化钙溶液逐滴加入到上述溶液中，边
滴边搅拌，以免产生不溶性的磷酸钙沉淀。常用于变温动物，
如两栖类。
3.乐氏(Locke's)生理盐水 先把9g氯化钠、0.42g氯化钾、
0.1~0.3g碳酸氢钠分别用少量蒸馏水溶解，混和后加蒸馏水到
980mL。再取0.24g氯化钙溶解在20mL蒸馏水中，逐滴加入
里，用以封片透明度很好，干后坚硬牢固，可长期保存。
2.甘油 临时封片常用的封藏剂，材料先用 10%的甘
油浸润数日，待水分蒸发，浓缩成纯甘油时，再加盖玻片。
3.松香 取纯松香将其磨碎，放入烧杯内，置于80～
100℃处加热1～2h后，待松香熔解时其中挥发性杂质和
气泡外逸，加入约为松香重量一半的二甲苯，搅拌均匀即
上述溶液中，常用于恒温动物，如哺乳类。
七、固定液和保存液 固定液能把有生命的材料迅速杀死，
并尽可能保持它原有的形态和结构，具有防腐和保存和作用。
1.甲醛也叫福尔马林液(Fomalin)，固定材料常用5%甲
醛溶液，保存生物标本常用4一5%的，消毒常用3%的。市售的
是40%甲醛溶液，加7、9、12倍水分别稀释成5%、4%、3%
自配碘酒时，可取5g碘化钾和7g碘溶解在5mL蒸馏水中，
再加无水乙醇到1OOmL。
3.高锰酸钾 强氧化剂，遇到有机物即放出新生态氧
而使有机物氧化，其杀菌作用强于过氧化氢。高浓度时有
刺激及腐蚀作用；0.1%水溶液可作创口或粘膜洗涤剂，使
皮肤消毒;2~5%水溶液能在24h内杀死细菌芽孢。本液在
空气中易分解，失去氧 .
3.溴甲酚紫指示剂 将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的
0.02mol/L氢氧化钠溶液中，加蒸馏水稀释至250mL制得。
当pH值由6.2~6.8时，颜色由淡黄色变为淡紫色，变色点
在pH6.7。
二、定性鉴定某些物质的试剂
1.鉴定葡萄糖的试剂
(1)班氏(Benedict)试剂
a.在600mL蒸馏水中溶解173g柠檬酸钠和100g无
(1)马克凯郎(MaecalIum)氏液 也叫硝酸甘油溶液，
取1份浓硝酸、2份甘油、2份水混合制得。适于分离横纹
肌和心肌组织。
(2)30%氢氧化钾溶液或30%氢氧化钠溶液 肌肉小块
浸泡时间0.5一1小时。
2.用于分离神经细胞的试剂
(1)甲醛－生理盐水溶液 称取58.44g氯化钠，用蒸馏
水溶解，再稀释到1000mL加入2g40%甲醛溶液，可得甲
固，故名冰乙酸。乙酸固定液的常用浓度是0.3~0.5%。乙酸能
凝固细胞核内的蛋白质 (核蛋白)，对染色质或染色体的固定，
染色较好。用乙酸溶液固定材料，可使细胞膨胀和防止收缩，
组织也不会硬化。它常跟乙醇、甲醛、铬酸等易引起硬变的收
缩的液体组成混合固定液，效果较好。
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4、乙酸－乙醇溶液 由冰乙酸1份与纯乙醇3份混和而
醛－生理盐水溶液。这种溶液也是很好的上皮细胞分离液，
既分离迅速，又能保护纤细的上皮细胞纤毛。在上述溶液
里，分离小肠和气管上皮组织需2小时，口腔和皮肤上皮
组织需3天。
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(2)硼酸－生理盐水溶液 在0.75%生埋盐水中加入硼
酸，使成为饱和溶液。可用来分离脊髓灰质或脑灰质部位
的神经组织。
3.用于分离神经纤维的试剂 硝酸银溶液:取0.5G硝酸
生物实验室常用试剂的配制
一、检验酸碱性的试剂
1.酚酞试液 取0.1酚酞，溶解在100mL60~90%的乙
醇溶液里，装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液
中呈红色。
2.麝香草酚酞(百里酚酞)试液 把0.1g白色的麝香草酚
酞溶解在100mL90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时，
颜色为无色至蓝色。
氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色
反应。
4.鉴定脂肪的试剂 苏丹IV溶液的配制：取0.2g苏丹IV，
放入无水乙醇中，加热，使它充分溶解，成为饱和乙醇溶液。
过滤后倒迸试剂瓶内密闭保存备用。苏丹Ⅲ溶液的配制：0.1g
苏丹Ⅲ粉末加入95%乙醇100mL待全部溶解后便可使用。
5.鉴定DNA的二苯胺试剂
菌。且对人毒性小，适用于皮肤及器械等消毒。
95~100%乙醇能引起菌体表层蛋白质凝固，形成保护层，
使乙醇分子不易继续透入，杀菌能力反而减弱。
2.碘酒 它是碘和碘化钾的乙醇溶液，有稀碘酒和浓
碘酒两种。市售的是2%的稀碘酒，在10min内能杀死细
菌及芽抱，可用于消毒皮肤，但对皮肤的刺激性很大，故
用后应以70%乙醇拭净。浓碘酒多用于手术后创面消毒。
四、染色剂 有些动植物组织和大多数细胞及细胞器
是无色透明的，必须经染色剂染色，才能在显微镜下观察
清楚，常用染色剂的制法和适用范围见Ｐ122表。
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五、干燥剂
干燥剂对游离水往往具有化学结合的作用，物理吸附
作用或两种作用兼有。选用干燥剂应注意其本身和被干燥
的物质有无化学作用，以免引起被干燥物质的破坏或吸收。
六、生理盐水
1.各类动物实验常用的生理盐水 两栖类生理盐水是
0.65%的氯化钠溶液;鸟类是0.75%的;哺乳类和人是0.9%。
2.任氏(Ringer's)生理盐水 先把6.5g氯化钠、0.14g氯化
钾、0.2g碳酸氢钠和0.01g磷酸二氢钠分别溶解在少量蒸馏水
中，混和后用蒸馏水稀释到980mL。取0.12g氯化钙溶解在
遇到二氧化碳，也会生成碳酸钡白色沉淀，使溶液浑浊。
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(3)溴代麝香草酚蓝溶液 取0.1溴代麝香草酚蓝，溶
解在100mL蒸馏水里，滴入少量0.1%氢氧化钾溶液，使
它成为碱性溶液而呈蓝色。本溶液pH值变化范围是6.0(黄)
至7.6(蓝)。待测物中如有二氧化碳，会形成碳酸而使溶液
变成黄色。
三、分离液
1.用于分离肌纤维的试剂
a.取35g硫酸铜溶解在400mL蒸馏水里，加蒸馏水到
500mL。
b.取85g氢氧化钾 (或70g氢氧化钠)和175g酒石酸
钾钠，溶解在400mL蒸馏水里，加水馏水到500mL。
上述两种溶液耍分别保存，使用时再等量地混和并搅
拌。如溶液里有葡萄糖，加等量裴林试剂，煮沸，会产生
红色的氧化亚铜沉淀。
2.鉴定淀粉用的碘液
常用干燥有:
1、氧化钙 (cao) 白色固体，碱性氧化物，可干燥
氧、氨、氨、胺等气体，不可用来干燥酸性气体，如二氧
化碳、氯化氢、硫化氢。
2、碱石灰 白色固体，呈碱性。它由氧化钙粉末加
入氢氧化钠溶液，经充分混和后置铁皿中于200～250℃
下干燥而成。可以干燥氨、胺等气体。常用于避免水或二
氧化碳进入反应系统的装置中。
水碳酸钠，冷却后稀释到850mL。
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b.在100mL热蒸馏水中溶解17.4g无水硫酸铜。冷却
后稀释到150mL。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠－碳酸
钠溶液中，边加边搅拌，如产生沉淀。要过滤，班氏试剂
配制后能长期使用。如存放较久而产生沉淀时，可取上层
清液使用，不必重配。
(2)裴林氏(Fehling's Solution)试剂
成松香封藏剂，本品原料易得，效果与加拿大树胶相同。
缺点是材料不纯或调制不好时，易发生结晶和褪色。
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十一、消毒剂 优良的消毒剂应具有杀菌力强、性质
稳定，易于溶解和穿透力大的特性，此外还要求对人和动
物组织的毒性低，对器具衣服没有腐蚀性，且价格低廉。
1.乙醇 它可使蛋白质脱水和变性，故有消毒和防腐
的作用。70%乙醇的杀菌力最强，可在3~5mim内杀死细