病原微生物检测操作规程
病原微生物实验操作规程
病原微生物实验操作规程病原微生物实验是一项专业的实验，在实验中研究人们生活中常见的疾病的病原微生物，以便更好地了解其特性和途径，进一步探索预防和治疗的方法。
然而，由于病原微生物具有传染性和致病性，操作规程对于保护实验人员和环境的安全显得尤为重要。
本文将介绍一套细致且安全的病原微生物实验操作规程，以确保实验的顺利进行。
1. 实验场所的准备实验场所应具备光线充足、通风良好的条件，并且有灭菌设备、安全柜等必要设备。
在实验室中应准备完善的安全设备和消毒用品，包括手套、面罩、防护眼镜和实验室服装等，以保障实验人员的个人安全。
2. 实验前的准备工作在实验之前，应对实验设备进行消毒和灭菌处理，以杀灭潜在的病原微生物。
同时，实验人员要求穿戴适当的实验服装，确保不会对实验产生污染。
此外，实验人员还需要仔细阅读相关病原微生物的相关资料和研究文献，了解其特性和实验操作的方法。
3. 个人卫生和操作技巧在进行任何实验操作之前，实验人员应确保自己的个人卫生，包括洗手和穿戴规范的实验服装。
接着，要严格遵循操作规程，避免任何不必要的操作，包括摸口、摸眼和展开食物等。
在操作过程中，实验人员要学会正确的手部消毒和无菌技术，以防止病原微生物的交叉感染。
4. 病原微生物的处理在实验过程中，病原微生物的处理是最关键的环节之一。
首先，要将病原微生物培养物从冰箱中取出，放置在已经消毒的实验台上。
接着，进行必要的减菌处理，如用酒精或火焰火烧过的镊子将病原微生物转移到灭菌好的培养皿中。
在处理过程中，要注意避免病原微生物接触到空气或其他非消毒的物体，以免引起感染。
5. 培养基的选择和制备培养基是病原微生物实验中的重要工具，不同的病原微生物对不同的培养基有不同的需求。
因此，实验人员在进行培养基的选择和制备时必须仔细查阅相关资料，确保使用正确的培养基，并且按照制备方法来操作。
在制备培养基的过程中，要注意严格的无菌操作，以防微生物污染。
6. 实验中的存储和处理在病原微生物实验中，实验过程结束后，实验人员要将培养物和实验工具进行妥善存放和处理。
医院微生物室血液感染病原体检验操作规程
医院微生物室血液感染病原体检验操作规程1、标本采集(1)、采集时间和次数血标本一般应在病人发热初期或根据不同的发热情况在未用抗生素前采集做细菌培养，提高阳性率需连续三次采血进行培养。
(2)、采血部位及抽血量一般抽取肘静脉血。
采血量为成人5-10ml，儿童为3～5ml。
(3)、结果观察：培养72小时后若肉眼或自动血液培养仪报告仍未细菌生长，则盲目移种一次，仍未细菌生长，向临床发出一级初级报告：“血液经72小时培养无细菌生长”：为避免漏诊，应在培养5天、7天时再作盲目移种培养。
疑为亚急性细菌性心内膜炎、真菌血症等时，血培养至少连续培养2～3周，仍无细菌生长方可报告为阴性。
2、检验程序血液标本（无菌采集）72小时盲目移种（初级报告）传统方法或自动血液培养仪指示有细菌生长涂片、染色、镜检需氧培养及CO2培养直接药敏试验（血平板、巧克力琼脂）观察菌落涂片、染色、镜检纯培养血清学鉴定ATB Expression报告3、血培养瓶中不同表现为不同细菌生长：浑浊并有凝无块金黄色葡萄球菌均匀浑浊，发酵葡萄糖产气多为革兰阴性菌微浑浊，有绿色变化肺炎链球菌表面有菌膜，培养基清晰，底层容血枯草杆菌表面有菌膜，膜下有绿色浑浊铜绿假单胞菌血细胞层上面有颗粒状生长，自上而下的溶血溶血性链球菌4、血液及骨髓标本中常见病原菌革兰阳性菌革兰阴性菌肺炎链球菌大肠埃希菌金黄色葡萄球菌伤寒及其它沙门菌表皮葡萄球菌变形杆菌溶血性链球菌产气肠杆菌粪肠球菌肺炎克雷伯氏菌铜绿假单胞菌粪产硷杆菌沙雷氏菌流感嗜血杆菌布鲁氏菌5、报告结果5.1、在血液中检出沙门氏菌，必须以血清凝集试验为依据报告血清型。
5.2、血液正常情况下应是无菌的，如培养出细菌即为致病菌，应报细菌的种属及药敏试验结果。
5.3、血培养阳性均作为危急值报告。
微生物限度检查操作规程
微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。
本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤，确保检查结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品，包括食品、医药和化妆品等。
三、操作步骤1. 准备工作：清洁实验室工作台面和仪器设备，准备所需的培养基和试剂，并确保仪器设备的正常运转。
2. 取样：按照产品的取样标准，从不同批次或不同位置进行取样，并确保取样的代表性。
3. 样品制备：将取样的产品进行样品制备，包括稀释、搅拌和过滤等步骤，以便于后续的微生物检查。
4. 培养：将样品接种在适当的培养基上，根据不同的微生物种类和要求进行培养，并进行恒温培养一定时间。
5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数，并按照标准方法进行结果的记录和确认。
6. 结果判定：将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对，根据结果作出是否合格的判定。
7. 结果记录：将微生物限度检查的结果进行记录，包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息，并将结果报告给相关部门或供应商。
四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能，严格按照操作规程执行。
2. 实验室应保持清洁、卫生，并进行定期消毒和验证。
3. 实验室设备应定期维护和校准，确保设备的准确性和可靠性。
4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准，存放在干燥、阴凉、避光的环境中。
5. 检查结果应及时报告，并根据结果采取相应的控制措施。
以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容，希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查，确保产品质量和安全。
病原微生物实验室操作规程
病原微生物实验室操作规程一、实验室准入制度病原微生物实验室是进行病原微生物研究和检测的重要场所，为了确保实验室的安全和实验结果的准确性，必须建立严格的准入制度。
1、实验室人员：只有经过专业培训、具备相关知识和技能，并通过考核的人员才能进入实验室工作。
2、培训内容：包括实验室安全知识、微生物操作技术、个人防护措施等。
3、健康状况：进入实验室前，人员需进行健康检查，确保身体状况良好，无感染性疾病。
4、登记制度：进入实验室的人员需进行详细登记，包括姓名、进入时间、工作内容等。
二、实验室布局与设施1、合理分区：实验室应分为清洁区、缓冲区和污染区，各区之间应有明显的分隔和标识，以防止交叉污染。
2、通风系统：具备良好的通风设备，保证空气流通，排出可能存在的有害气体和微生物。
3、消毒设施：配备齐全的消毒设备，如高压灭菌器、紫外线灯等，用于实验器具和环境的消毒。
4、储存设施：有专门的储存空间，用于存放病原微生物样本、试剂和药品，且应符合相应的温度、湿度等条件要求。
三、个人防护装备1、工作服：进入实验室必须穿着专用工作服，离开实验室时应脱下并妥善存放。
2、手套：根据实验操作的需要，选择合适材质和规格的手套，如乳胶手套、丁腈手套等。
3、口罩：佩戴能有效过滤微生物的口罩，如 N95 口罩。
4、护目镜：进行可能产生飞沫或溅出物的操作时，佩戴护目镜保护眼睛。
5、防护鞋：防止污染物接触脚部。
四、样本采集与运输1、采集规范：严格按照相关标准和操作规程采集样本，确保样本的质量和代表性。
2、采集器具：使用无菌、无热原的采集器具，并在使用前进行严格的消毒处理。
3、样本标识：清晰准确地标识样本的来源、种类、采集时间等信息。
4、运输条件：根据样本的特性，选择合适的运输容器和温度条件，保证样本在运输过程中的稳定性和安全性。
5、运输记录：详细记录样本的运输过程，包括运输人员、运输时间、运输路线等。
五、实验操作规范1、无菌操作：在进行微生物培养、分离等操作时，严格遵守无菌操作原则，防止外界微生物的污染。
微生物菌种、毒株和样本标准操作程序与流程
病原微生物菌（毒）种和样本的标准操作规程流程1．目的：对本实验室菌种、毒种的申购、保存、保管、领用、处理等各个环节实行有效的监督控制，防止意外事故发生，确保疾病预防与控制检验业务及科研教学工作。
2．适用范围及菌种、毒种专职管理人员适用于本科微生物实验室菌种、毒株的管理；菌种、毒种专职管理人员：于瑞芳、侯恩言3．职责①微生物实验室负责菌、毒种的出入库保管、保存及处理等日常管理。
②科室指定2名菌种、毒种库管理人员承担菌、毒种日常管理。
③科室负责人负责一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审核。
④技术管理层批准本实验室一、二类菌、毒种的出入库和向上级索取及对下级发送的审批。
4．工作程序⑴报送及入库①当微生物实验室检出菌、毒株应及时报送市疾病预防控制中心。
②新发现的菌、毒种，要做好原始记录，逐级报送进行复核确认，报送时须2人参加。
③一、二类菌、毒种入库前，科室审核，技术管理层批准后入库④个人不得擅自保留菌、毒种，必须由科室进行统一编号、登记入库管理⑤菌、毒种入库时， 2名菌、毒种保管人员须认真做好菌毒种的编号、登记工作。
⑵日常管理①保管人员由于瑞芳、侯恩言2名检验人员组成。
②菌、毒种入库时，保管人员应及时验收，统一编号，填写《菌、毒种登记表》③严禁随意将菌、毒种置于非菌、毒种专用保存场所，应做到三专（专室、专柜、专锁）。
④菌、毒种库由2名保管人员双锁管理，铁门与锁必须牢固有效，发现损坏须及时报修。
未经各科室负责人同意，不得擅自将钥匙委托他人代管。
⑤菌、毒种保管人员应定期对库内温度、湿度、通风及冰箱、冰柜等菌、毒种保藏设备运转情况进行检查，并做好记录。
⑥菌、毒种保管人员根据菌、毒种的保存期限，及时通知分管病种的检验人员进行传代，定期鉴定，并详细记录在《菌、毒种登记表》⑦菌、毒种保管人员发现菌、毒种发生变异和死亡，应及时向科室负责人报告，并填写《菌、毒种登记表》。
科室须将变异及死亡的一、二类菌、毒种通报技术管理层。
微生物限度检查标准操作规程
微生物限度检查标准操作规程《微生物限度检查标准操作规程》一、目的微生物限度检查是药品、食品、化妆品等产品质量的重要指标之一，其目的是为了保障产品的安全性和稳定性。
本标准操作规程旨在规范微生物限度检查的操作流程，确保检查结果的准确性和可靠性。
二、范围本标准操作规程适用于药品、食品、化妆品等产品的微生物限度检查，包括大肠菌群、金黄色葡萄球菌、霉菌和酵母菌等微生物指标的检查。
三、检查设备和试剂1. 培养基：根据不同的微生物指标选择适当的培养基，如大肠培养基、Mannitol盐琼脂、Sabouraud葡萄糖琼脂等。
2. 培养皿：使用符合规定的试验培养皿。
3. 培养箱：保证培养条件的恒温培养箱。
4. 其他常用实验用具：包括无菌采样容器、吸管、移液器、无菌培养皿等。
四、操作流程1. 样品采集：从产品中采集适量样品，保持无菌状态。
2. 制备稀释液：根据样品的特性，选择适当的稀释液将样品进行适当稀释。
3. 接种培养：将稀释后的样品接种在适当的培养基上，并在符合条件的培养箱中进行培养。
4. 观察和统计：观察培养皿中微生物的生长情况，统计出微生物的数量。
5. 结果判定：根据标准规定的微生物限度标准，判断检测结果是否符合规定。
五、质量控制1. 实验员必须进行严格的无菌操作训练，并使用正确的个人防护用具。
2. 培养基的质量必须符合规定，避免培养基带有细菌污染。
3. 检查设备必须经过定期的检查和校准，保持正常的工作状态。
4. 标本的采集、处理、保存和运送必须符合规定，避免外界的污染和干扰。
六、结果报告根据检测结果和规定的限度标准，出具检测报告，标明产品的微生物限度是否符合规定，以及具体的检测结果数据。
七、总结微生物限度检查是产品质量检验的重要环节，严格按照标准操作规程进行操作，可以保证检测结果的准确性和可靠性。
实验员在操作过程中也需严格遵守规程，做好个人防护措施，确保实验室的安全和卫生。
医院微生物室创伤和外科感染病原体检验操作规程
医院微生物室创伤和外科感染病原体检验操作规程
三、创作和外科感染
1、标本采集
(1)、开放性感染分泌物或脓液先用无菌生理盐水冲洗表面，用2支无菌棉拭子取创伤或溃疡深处及分泌物送检，一支为涂片用，一支为培养用。
(2)、封闭性脓肿常局部消毒后，用注射器抽取脓液置于无菌试管内送检。
(3)、对放线菌标本，常用无菌棉拭子挤压瘘管，选取流出脓液中的“硫磺样颗粒”置于无菌瓶内送检。
胸腔、腹腔、心包腔和滑膜腔等标本采集，应严格按无菌操作程序，由临床医生进行。
检验程序
直接涂片分离培养
革兰染色通平板、Mac
抗酸染色巧克力平板（5%CO2）。
病原微生物实验室安全规程
病原微生物实验室安全规程病原微生物实验室是进行与病原微生物相关研究、检测和诊断的重要场所。
由于病原微生物可能对人类健康和环境造成严重威胁，因此在实验室中必须遵循严格的安全规程，以确保实验操作的安全性和可靠性。
一、实验室设施与布局1、实验室位置病原微生物实验室应远离人员密集区域，如教学楼、办公楼和住宅区等。
同时，应考虑实验室周边的环境因素，如风向、水源等，以避免对周围环境造成污染。
2、布局设计实验室应分为清洁区、半污染区和污染区。
清洁区用于存放实验用品、办公设备等；半污染区用于进行实验前的准备工作；污染区则是进行病原微生物实验操作的区域。
各区之间应有明显的隔离措施，如缓冲区、传递窗等，以防止交叉污染。
3、通风系统良好的通风系统是保证实验室空气质量的关键。
通风系统应能够有效地排出实验过程中产生的有害气体和微生物气溶胶，并保持实验室内部的负压状态，防止病原微生物向外扩散。
4、污水处理实验室产生的污水应经过严格的消毒处理后才能排放。
污水处理设备应定期维护和检测，确保其正常运行。
二、实验人员要求1、培训与资质实验人员必须接受专业的培训，熟悉病原微生物的特性、实验操作流程和安全防护知识。
只有取得相应资质的人员才能进行病原微生物实验。
2、健康状况实验人员应保持良好的健康状况，定期进行体检。
患有传染性疾病或免疫功能低下的人员不应从事病原微生物实验工作。
3、个人防护进入实验室时，实验人员必须穿戴合适的个人防护装备，如工作服、手套、口罩、护目镜等。
在进行高风险实验操作时，还应穿戴防护服和正压呼吸器等。
三、实验操作规范1、标本采集与运输标本采集应遵循严格的操作规程，使用无菌器材，并确保标本的质量和完整性。
标本运输过程中应采取适当的保温、冷藏或冷冻措施，并使用符合要求的运输容器，以防止标本泄漏和污染。
2、实验准备在进行实验前，实验人员应仔细检查实验设备和试剂，确保其完好无损和符合实验要求。
同时，应制定详细的实验方案，并对可能出现的风险进行评估和防范。
病原微生物实验规则和基本实验技术ppt
3、选择培养基selective medium：利用不同细菌对某些化学物质敏感性 不同的性质，在培养基中加入一定量该化学物质，抑制某些细菌的生 长，利于另一些细菌的生长，从而从混杂众多细菌的样品中特异分离 出目的菌。如：分离肠道杆菌的SS培养基。
第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动 物疾病的微生物，如：小鼠白血病病毒。
（二）生物安全实验室分类
生物安全实验室（Biosafety Laboratory，BSL）， 在结构上由一级防护屏障（安全设备）和二级防护屏障 （设施）两部分硬件构成。根据安全设备和设施的不同 组合，构成了四级生物安全防护水平 ：
（第一类和第二类称为高致病性病原微生物。医学微生物学教学实验 中使用的微生物主要为第三类和第四类病原微生物）
第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一 般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险 有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治 疗和预防措施的微生物，如：HBV、登革病毒、破伤风梭 菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。
显微镜按要求维护好，登记并对号放入柜中。 （七）每次实验课后，按排值日。 （八）洗手后离开实验室。
三、实验室生物安全简介
（一）病原微生物分类： 为确保操作人员和环境的安全，2004年国务院发布
并实施《病原微生物实验室生物安全管理例》。根据 病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害 程度，将病原微生物分为四类。
五、无菌观念和操作
认识消毒、灭菌、无菌操作的重要意义，学习基本的无菌操作方法。
病原微生物实验室在用的研究及检验程序
病原微生物实验室在用的研究及检验程序下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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1.1 实验室人员应定期接受病原微生物实验室安全操作规程的培训。
病原微生物标本采集、运送
病原微生物检验标本采集、运送操作规程正确地标本采集，运送，保存和处理对于微生物检验工作质量至关重要，为了准确检出病原菌，避免漏检与误诊，临床医护人员和实验室工作人员应掌握微生物标本地选择，采集，运送，保存及处理地一般原则.一、标本采集地一般原则.早期采集采集时间最好在病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药物之前采集，确保病原菌地检出..无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近或皮肤黏膜正常菌群地污染，使病原菌与正常菌群混淆，造成临床误诊.采集地标本应存放在无菌容器内，容器不能使用消毒剂处理，标本中也不能添加防腐剂，以免降低病原菌地检出..适量地标本标本量过少可能导致假阴性结果..适当地采集方法对于厌氧菌，需氧菌或兼性厌氧菌地采集方法是不同地，用于厌氧菌培养地标本应尽量用注射器采集抽取物，室温保存，不能冷藏和冷冻..盛放标本地容器采集标本应存放在无菌，防漏，应带有螺旋盖地容器内.二、标本地运送.标本采集后立即送检，若有延迟也应在小时内送到实验室，否则会影响病原菌地检出，一般性地细菌培养标本若需延迟送检时，应置于度冰箱保存，且不能超过小时..临床标本最佳运送时间取决于标本地量，少量液体（小于）或组织（小于）应在分钟内送到实验室，较多量地标本置于运送培养基中可放小时，厌氧培养标本原则上是床边接种，如延迟送检，需保存在厌氧运送培养基中，室温保存，不得超过小时.三、不同标本地采集，运送（一）血液标本采集，运送.血培养指针征当患者出现：发热（大于度）或低温（小于度），寒战，白细胞增多,皮肤黏膜出血，休克，多器官衰竭，血压降低，反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，具备上述一种或几种体征时，临床怀疑菌血症应采集血液标本进行血培养，对入院危重感染患者应在未使用抗菌药物治疗前，及时做血培养..对怀疑菌血症、真菌血症地患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本.必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本.成年患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本），采血量每瓶不少于;婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本,采血量每瓶不少于.（少于病人总血容量地）.在采取血培养后地—天内，无需重复采取血培养.两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症..血标本采集地量是影响检出率地最重要地因素.检出率与采血量成比例增长，每增加地血液，病原菌地检出率就会相应增加.儿童患者血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人.采用一对（需氧瓶厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶地组合可检出更多地葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌.采血量不能满足推荐地量时，应首先满足需氧瓶地需要.推荐从外周静脉采集血液标本,不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率.如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果地判读..血标本采集地注意事项在采血之前，血培养瓶地橡皮塞需使用酒精消毒并干燥.然后再进行穿刺部位地皮肤消毒.严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”地消毒步骤操作，并等待足够地消毒时间.严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套.不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头;采集后地血培养瓶应在小时之内送往实验室,血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻.(二)痰培养标本采集，运送.痰培养指征上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，会咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子标本培养.下呼吸道感染：凡是咳嗽，咳痰，痰呈脓性，粘稠或血性等都可采集痰标本..标本地采集采集前嘱咐病人先用清水漱口，摘去牙托，因唾液中口咽部定植菌地浓度可达，去除表面地菌群.教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出地痰液.在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后～内送往实验室进行处理，采集标本过程中要有专业地医务人员指导;无痰可用％～％雾吸约导痰；也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等方法取痰..正常地痰标本低倍视野下鳞状上皮细胞小于个，白细胞大于个.如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于个，白细胞小于个应不做或仅在特殊要求时做培养，如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”.痰培养方法地局限性多数引起肺炎地病原菌不能培养出，如病毒，军团菌，衣原体等.影响因素很多：如黏液包裹、定植菌污染.建议痰培养同时做血培养和痰涂片镜检..注意事项常规地痰培养需在小时内送检，若怀疑嗜血杆菌，肺炎链球菌感染时必需随留随送;标本中不能混入唾液与鼻咽分泌物等.（三）尿培养标本采集，运送.尿培养指征尿路感染，肾结核，泌尿系结石，膀胱排空功能受损或前列腺增生等患者，出现尿频，尿急，尿痛等膀胱刺激症状，肉眼脓尿或血尿，尿常规检查有白细胞或亚硝酸盐阳性，，不明原因地发热，尿道口有脓性分泌物等症状，需采集尿培养标本送检..标本地采集清洁中段尿液，嘱咐患者用肥皂水清洗，弃去开始流出地尿液，以冲刷尿道口地细菌，取能代表膀胱部位病原菌地中段尿；导尿管尿液，留置导管尿液标本常通过专门地采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液，采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中.膀胱穿刺尿，无菌操作，用无菌注射器刺入膀胱抽取—尿液送检，主要用于厌氧菌地培养或留取标本困难地婴幼儿标本地采集，此法可避免尿液标本地污染..标本地采集量一般成人采集,婴幼儿不得少于.诊断症状明显地病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗小时后再采集第二份标本.对于症状不明显地病人，需采集份标本.怀疑肾结核时，应连续天采集晨尿..室温都有利于病原菌和污染菌生长繁殖，标本采集后立即送检和接种，室温下存放不能超过小时，（夏季保存时间应适当缩短或冷藏），度冷藏保存时间也不能超过小时，冷藏地尿液不能用于淋球菌地培养.．注意事项必须无菌操作，采用带盖防渗漏地无菌杯收集，多次收集或小时尿不能用作培养.集尿袋内地尿液不能用作培养.导尿管末端地尿液也不能用于培养，很难避免没有尿道菌群污染.在使用抗菌药物前留取标本，尿液中不能加任何防腐剂或消毒剂，抑制细菌地生长.（四）粪便标本采集，运送.送检指征当患者出现腹泻，大便每天大于或等于次，粪便地性状异常，可为稀便，水样便，粘液便，脓血便或血便，伴有恶心，呕吐，食欲不振，发热，腹痛及全身不适等，大便镜检白细胞大于等于个每高倍视野，抗菌药物治疗后地腹泻等..标本地采集方法，时间与量尽可能在发病早期（急性期）或应用抗菌药物治疗之前，采集新鲜地粪便，怀疑沙门菌感染时，应在发病周以后采集.自然排便法，排便后，挑取有脓血或粘液部位地大便，液状粪便取絮状物盛于无菌地容器内；直肠拭子采集法，用于排便困难地患者或婴幼儿.一般用拭子采集大于地标本送检，若标本为水样，采集大于地标本于无菌容器中送检.．标本地运送与保存标本采集后应尽快送检，室温条件下不能超过小时，如不能及时送检可加入磷酸盐甘油缓冲保存液中或专门地大便运送培养基中置度冰箱保存，但不能超过小时.高度怀疑霍乱弧菌感染地标本必须符合特殊标本地安全要求..注意事项最好在用药前，采集新鲜地标本盛装在无菌容器内，立即送检，提高阳性检测结果.厌氧菌地培养尽量避免与空气接触和正常地菌群污染.(五)脓液及创伤感染分泌物标本地采集及运送.送检指征凡是当患者有外伤感染，术后切口感染，导管感染，脐带残端感染，有脓液和分泌物时，应采集标本培养..标本地采集时间和方法在使用抗生素前或停用药—天以后，或使用下一次抗生素前采集，对脓肿性分泌物应先用生理盐水或地酒精冲洗溃疡表面渗出物，尽可能抽取脓液于无菌杯内送检.对于封闭性脓肿时，应无菌操作抽取脓液—于无菌试管内或血培养瓶内送检，怀疑厌氧菌感染时，应做床旁接种或注入厌氧瓶内（—）送检，最佳方法是采集组织送检..标本地运送标本采集后应于小时内送微生物实验室进行处理，若不能及时送检，需氧培养地标本除对环境敏感地淋病奈瑟菌，脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌外，可保存在度冰箱中，但保存时间不能超过小时;厌氧培养时，需用厌氧瓶或厌氧袋在室温下保存，但不能超过小时..注意事项尽可能在用抗生素前采集，若患者也用药，应在检验单上注明抗菌药名，并在下次用药前采集；对于开放性地伤口，采集前应先除去表面污染菌，以防带入与感染无关地皮肤定值菌.干燥结痂地标本一般不做培养，除非有渗出物.采集标本时应无菌操作.（六）穿刺液标本地采集与运送穿刺液主要包括脑脊液，胸腹水，心包液，胆汁，关节液及鞘膜液，在正常标本中，上述液体是无菌地，在排除污染地情况下，一旦检出细菌均视为病原菌.在相关地部位有相应地临床症状时，应无菌操作采集相应地标本于无菌容器内送检，标本采集后应立即送往实验室处理.脑脊液采集后应在分钟内送到实验室，若不能，应室温保存，不得超过小时，不能冷冻或冷藏注意事项：标本地采集严格执行无菌操作，最好在用抗菌药物前采集.防止标本凝固，可事先在容器内加入抗凝剂，（脑脊液标本时不需加抗凝剂），也可直接加入血培养瓶内.。
微生物限度检查操作规程(中国药典2015版四部通则)
一、范围：本标准规定了微生物限度的检查方法和操作要求；适用于检品需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、控制菌的检查。
二、引用标准：《中国药典》2015年版(通则1105-1106)三、目录1．微生物限度标准2．设备、仪器及用具3．消毒液、稀释剂、试液及培养基4．检查总则（通则1105：非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法，通则1106 非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法）5．微生物计数法检查6．控制菌检查法7．实验技术8. 附件1．微生物限度标准非无菌药用原料及辅料的微生物限度标准*未做统一规定。
(1)．“—”为不得检出。
(2)．目测霉变者以不合格论。
说明：1．“—”为每100 cm中不得检出。
2．目测霉变者以不合格论。
3．“无”为标准依据或无相应规定。
2．设施、仪器及用具2.1、设施：2.1.1．微生物限度检查室及相关设施：微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。
检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。
单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。
2.1.2．其他设备：高压蒸汽灭菌器；细菌培养箱（30~35℃）；霉菌培养箱（25~28℃）；电炉（或其他适宜的加热装置）；恒温水浴；电热干燥箱（250~300℃）；电冰箱。
生化试剂储存箱。
2.2仪器及器皿2.2.1．菌落计数器；显微镜（1500X）；电子天平或药物天平（感量0.1g）；pH系列比色计。
2.2.2．玻璃器皿：锥形瓶（250~300ml，内装玻璃珠若干）、研钵（玻璃或陶瓷制，∮10~12cm）、培养皿（∮9 cm）、量筒（100 ml）、试管（18×180mm）及塞、吸管（1ml分度0.01，10 ml分度0.1）、载玻片、盖玻片、玻璃消毒缸（带盖）。
2.2.3新购的玻璃器皿的清洁：先用流水冲洗，浸泡于1%~2%盐酸（工业用）液中约2~6小时，除去游离碱质，再用流水冲洗。
用于化学分析的玻璃仪器，需用重铬酸钾清洁液浸泡数分钟后，再用流水冲洗，最后以纯化水涮洗2~3次，晾干备用。
医院微生物室尿路感染病原体检验操作规程
医院微生物室尿路感染病原体检验操作规程1．尿液培养常见病原菌革兰阳性菌革兰阴性菌金黄色葡萄球菌淋病奈瑟菌肠球菌大肠埃希菌A群链球菌变形杆菌腐生葡萄球菌肺炎克雷伯菌表皮葡萄球菌产气肠杆菌结核分支杆菌沙门菌种铜绿假单胞菌沙雷菌2、标本收集2.1、尿液标本的采集可采用多种方法：有中段尿采集法、膀胱穿刺法、肾盂尿采集法，而常规是取中段尿作细菌培养。
2.2、取中段尿作培养时先要进行前尿道的清洗消毒，以免前尿道寄生菌群污染标本。
2.3、如采用其他方法收集标本，必须由临床医生根据临床诊断需要而执行收集术，并在检验单上写明。
3、检验步骤：3.1、涂片检查3.1.1、一般细菌及淋病奈瑟菌涂片：以无菌操作吸取尿液10ml，3000r/min离心15min，去上清液，取沉淀涂片，革兰氏染色镜检，作初步报告。
如查见革兰氏阴性双球菌，呈肾形位于细胞内或细胞外，报告“找到革兰阴性双球菌，存在于细胞内外，形似淋病奈瑟菌”。
如未查见上述细菌可报告“未发现革兰阴性双球菌”。
3.1.2、念珠菌涂片：取尿液沉淀物放于清洁玻片上，覆以盖玻片，制成涂片，用高倍镜检查。
革兰染色后，如发现发亮的芽生孢子和假菌丝，就可报告“霉菌孢子及菌丝”。
3.1.3、结核分枝杆菌：取尿液10ml，4000r/min离心沉淀30min，取沉淀物涂片，抗酸染色，镜检。
如找到红色杆菌，可报告“发现抗酸杆菌”。
3.2、一般细菌培养(细菌计数)：用定量接种环取尿液10 u l 接种血平板，35℃培养18～24小时，观察有无细菌生长，并计数菌落数，乘以1000，求出每毫升尿液的菌落数。
根据菌落特征、涂片染色结果，选择相应的鉴定试条及药敏试条进行鉴定和药敏试验，如培养48小时无菌生长，即报告“无菌生长”。
3.3、特殊菌培养：淋病奈瑟菌培养，选用专用巧克力琼脂平板，接种后放入二氧化碳环境中培养。
4、结果报告：4.1、尿液细菌培养检查必须报告细菌的种属、菌落计数(cfu/m1)及药敏结果。
病原微生物实验室生物安全通用准则
病原微生物实验室生物安全通用准则病原微生物实验室生物安全通用准则》的引言部分将简要介绍该准则的背景和目的。
该准则的目的是确保病原微生物实验室内的工作能够最大程度地降低生物安全风险并保护实验室工作人员、环境以及公共健康安全。
准则的内容旨在提供一个通用的框架，为病原微生物实验室的运营和管理提供指导。
实验室中使用的病原微生物具有潜在的危险性，因此需要采取适当的生物安全措施来防止事故和意外的发生。
该准则的制定是为了确保实验室工作人员具备必要的知识和技能，并促进实验室设施的安全性和可持续性。
该准则适用于所有从事病原微生物实验室的工作人员，包括实验室主任、研究人员、技术人员以及其他相关人员。
同时，准则也适用于病原微生物实验室的设施、设备和管理。
通过遵循该准则，病原微生物实验室将能够降低生物安全风险，保护工作人员的身体健康，保护环境和公共健康安全。
该准则将在以下几个方面提供指导：病原微生物实验室基本要求病原微生物实验室的安全管理和操作措施病原微生物实验室事故应急响应和处理病原微生物实验室的监督和评估本准则的制定是根据国际生物安全标准和最佳实践进行的，并考虑了各个国家和地区的法规和指南。
实验室应根据国家和地区的具体要求，结合该准则进行适当的调整和实施。
通过制定和贯彻该准则，我们将能够建立更安全、更可靠的病原微生物实验室，确保实验室工作的生物安全性。
本准则适用于病原微生物实验室，包括但不限于以下活动和实验类型：病原微生物的培养和保存；病原微生物相关实验室研究；病原微生物相关药物和疫苗研发；病原微生物相关临床实验；病原微生物的传播和传染预防控制。
此准则适用于各种类型的病原微生物实验室，无论其规模大小，包括生物安全实验室、医疗机构实验室、学术研究实验室等。
病原微生物实验室包括但不限于病原微生物菌种库、病原微生物诊断实验室、病原微生物分子生物学实验室等。
本准则旨在确保病原微生物实验室的生物安全，保护实验室工作人员、环境和公众免受病原微生物的威胁。
病原微生物实验室操作规程
病原微生物实验室操作规程病原微生物实验室是进行病原微生物研究、检测和诊断的重要场所。
为了确保实验室工作的安全、准确和有效，特制定以下操作规程。
一、实验室准入制度1、只有经过专门培训并获得授权的人员才能进入病原微生物实验室。
2、进入实验室前，人员必须了解实验室的安全规定和操作流程，并签署相关的知情同意书。
3、穿着符合要求的个人防护装备，包括实验服、手套、口罩、护目镜等。
二、实验前准备1、制定详细的实验计划，包括实验目的、方法、步骤和预期结果。
2、对所需的仪器设备进行检查和校准，确保其正常运行。
3、准备好所需的试剂和材料，并检查其有效期和质量。
三、样本采集与处理1、样本采集应遵循相关的标准操作程序，确保样本的代表性和质量。
2、采集后的样本应尽快运输到实验室，并在规定的条件下保存。
3、处理样本时应在生物安全柜内进行，防止样本的泄漏和污染。
四、实验操作1、在生物安全柜内进行病原微生物的接种、培养和分离等操作。
2、严格遵守无菌操作原则，避免交叉污染。
3、操作过程中要小心谨慎，防止样本溅出或气溶胶的产生。
五、仪器设备使用1、熟悉各种仪器设备的操作规程，按照说明书正确使用。
2、定期对仪器设备进行维护和保养，记录维护情况。
3、仪器设备出现故障时，应及时停止使用，并报告相关负责人进行维修。
六、废弃物处理1、实验过程中产生的废弃物应分类收集，包括感染性废弃物、化学废弃物和一般废弃物等。
2、感染性废弃物应进行高压灭菌或化学消毒处理后，再按照相关规定进行处置。
3、化学废弃物应按照其性质进行相应的处理，防止对环境造成污染。
七、个人防护1、进入实验室必须穿戴适当的个人防护装备，如手套、口罩、护目镜、实验服等。
2、手套应定期更换，如有破损应立即更换。
3、离开实验室前，应脱下个人防护装备，并进行消毒处理。
八、意外事故处理1、若发生样本泄漏、人员受伤或感染等意外事故，应立即启动应急预案。
2、受伤人员应及时进行处理和治疗，并报告相关部门。
医院微生物室下呼吸道感染病原体检验操作规程
医院微生物室下呼吸道感染病原体检验操作规程
1、标本的采集
有自然咳痰法、咽拭子采集法、支气管镜下采集法及分泌物标本
2、标本的直接检查
(1)、将痰标本涂片后待干，固定、染色，或直接湿片镜检，对病原学早期、初步诊断有重要意义。
并向临床发出初级报告。
(2)、一般认为合格的痰标本为：以白细胞>25个/低倍镜视野，而上皮细胞＜10个/低倍镜视野。
采集合格标本对细菌的诊断尤为重要。
3、分离培养与鉴定
(1)、一般要求下呼吸道感染培养的细菌浓度应>107CFU/ml，可视为病原菌，<104CFU/ml可视为污染菌。
若介于两者之间105--106CFU／ml时，要连续分离培养两次以上仍为105～106CFU／ml时，亦认为是病原菌。
(2)、检验程序
痰及呼吸道分泌物标本
涂片、染色、镜检分离培养药敏试验
血平板、巧克力琼脂、Mac
菌落观察
涂片、染色、镜检纯培养细菌
珠海迪尔鉴定、药敏试条
报告
最终报告(三级报告)。
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病原微生物检测操作规程
一、打开标本及处理
接受和打开标本的人员应当了解标本对身体健康的潜在危害，并接受过如何采用标准防护方法的培训，尤其是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。
标本的内层容器要在生物安全柜内打开，并准备好消毒剂。
标本打开处理时：
1．应当在生物安全柜内打开标本管。
2．必须戴手套，并建议对眼睛和黏膜进行保护（护目镜或面罩）。
3．打开标本管时，应用纸或纱布抓住塞子以防止喷溅。
二、避免感染性物质的注入
1．通过认真练习和仔细操作，可以避免破损玻璃器皿的刺伤所引起的接种感染。
应尽可能用塑料制品代替玻璃制品。
2．锐器损伤（如通过皮下注射针头、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入感染性物质。
3．以下两点可以减少针刺损伤：（a）减少注射器和针头的使用（可用一些简单的工具来打开瓶塞，然后使用吸管取样而不用注射器和针头）；（b）在必须使用注射器和针头时，采取锐器安全装置。
4．不要重新给用过的注射器针头戴护套。
一次性物品应丢弃在防/耐穿透的带盖容器中。
三、血清的分离
1．只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。
2．操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。
3．规范的实验操作技术可以避免或尽量减少喷溅和气溶胶的产生。
血液和血清应当小心吸取，而不能倾倒。
严禁用口吸液。
4．移液管使用后应完全浸入消毒液中。
移液管应在消毒液中浸泡适当的时间，然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。
5．带有血凝块的废弃标本管，在加盖后应放在适当的防漏容器内高压灭菌和/或焚烧。
6．应备有适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出标本。
四、对血液和其他体液、组织及排泄物的标准防护方法
设计标准防护方法（其中包括“常规预防措施”）以降低从已知或未知感染源的微生物传播危险。
五、玻璃器皿和“锐器”
1．尽可能用塑料制品代替玻璃制品。
只能用实验室级别（硼硅酸盐）的玻璃，任何破碎或有裂痕的玻璃制品均应丢弃。
2．不能将皮下注射针作为移液管使用。
六、用于显微镜观察的盖玻片和涂片
用于显微镜观察的血液、唾液和粪便标本在固定和染色时，不必杀死涂片上的所有微生物和病毒。
应当用镊子拿取这些东西，妥善储存，并经清除污染和/或高压灭菌后再丢弃。
七、一次性接种环
一次性接种环的优点是无需灭菌，因此可以在生物安全柜中使用。
否则，使用明火会扰乱气流。
一次性接种环使用后应置于消毒剂中，并按污染性废弃物处理。
八、培养皿、试管和试剂瓶
由于没有明确的事故发生及明显的溢出物，因此不能确定打开的平板、试管及试剂瓶里的一些微生物体是否会引起实验室感染。
然而，这些很高的传染因子中很有可能有一些传染病会发生。
当打开存在真菌类的平板、试管及瓶子时需格外小心，因为在操作中可能会释放出大量孢子。
一些培养物应该在生物安全柜内进行操作。
在吸取液体培养物前，为确保它成为均一的悬液，应给予振动混匀。
剧烈的摇动将产生大量的气溶胶。
轻微的打旋可以成为均一的悬液，但仍伴有微量的气溶胶产生。
当液体培养物恢复原状停留片刻后再打开容器时，气溶胶产生减少。
将消毒后热的金属接种环或针插入液体或斜面培养物会产生飞溅并产生气溶胶。
为减少气溶胶的产生，金属接种环应在空气中冷却，或在容器内壁，或在繁殖物培养的琼脂表面没有物体生长的地方接触一下进行冷却。
用特定设计的电或气体烧灼装置消毒的接种环或针，比用开口火焰加热的更可取。
这种小型的烧灼装置有一个筒，可以包容从接种环或针上飞溅出的任何物质。
通常可任意使用的接种环是有用的。
加热使用过后为了能够立即消毒，丢弃首先放入消毒剂的容器中。
在粗糙不平整的培养基上用接种环或针划线接种培养物会导致
气溶胶的产生。
如果培养基表面光滑整洁，通常是不会产生气溶胶的。
丢弃粗糙不平整的培养基是好的安全技术。
有盖培养皿内的培养物脱出的水里通常存在活的细小微生物，并且在倒转平板的盖子和边缘之间形成一层膜。
当打开平板时这层膜破裂，释放出气溶胶。
对于盖子与边缘只有三个接触点的塑料有盖培养皿可能减少危害物。
使用完全干燥的平板也能减少这种风险，但是从厌氧罐内取出的孵育平板（进行厌氧孵育）很容易变湿。
在盖子内装上过滤膜虽能减少危害物的产生，但不能防止扩散。
如果平板明显潮湿，则应在生物安全柜内打开。
打开有螺旋帽的瓶子和带塞的试管时会产生看不见的气溶胶。
这是因为在打开塞子或盖时，感染性液体在塞子边缘处形成的那层膜被破坏，产生了气溶胶。
振动或离心后立即取下长颈瓶、瓶子、离心管的棉花塞子或塞盖，产生气溶胶导致环境污染。
长颈瓶或离心管不处于垂直状态，去除湿的瓶塞也会产生危害。
此外，离心时会产生微量的泡沫，瓶塞很可能会被少许弄湿。
由于这些可能性，因此应在生物安全柜内打开液体感染性培养物及危害物质，同时穿戴手套、长袖实验室工作服，这是很好的安全措施。
干缩的、有感染性的培养物可聚集在盖子边缘或培养管/长颈瓶的壁上，当受到干扰时会扩散到空气里。
装有干粉状危害物的容器应在生物安全柜内打开。
九、安瓿
打开装有冻干或液体培养物的密封安瓿会产生气溶胶。
为防止或减少气溶胶的产生，应在生物安全柜内打开安瓿。
在复苏安瓿内容物时，要小心仔细以防割破手套和手，防止碎玻璃嘣入眼、脸及实验环境里。
此外，生物产品本身不能因外界生物体或消毒剂而受到污染。
应戴手套在生物安全柜内进行操作。
用砂轮在安瓿的颈部划痕，消毒的湿酒精棉球包裹住安瓿，在安瓿的颈部用力折断，确保安瓿处于垂直状态。
另一种方法，在安瓿的颈部做一标记，用热的金属环或棒接触使之产生裂缝，然后用消毒的湿酒精棉球包裹住安瓿，折断颈部打开。
将棉球和安瓿顶端丢进消毒剂中。
缓慢加入液体使安瓿内的内容物复苏，避免干燥浓缩状的内容物呈烟雾状扩散。
混匀但无气泡产生，取出内容物放入干净容器内。
一些实验人员想使用已有划痕的安瓿便于开口。
但是，这样很可能使安瓿变得不坚固，在操作或贮存期间发生破裂。
装有液体培养物的安瓿用同样的方法打开。
为确保装有有害的、可流动的培养物及有活性的、粉状物质的玻璃器皿便于运输、孵育、贮存，应使用不易破碎的、防漏的外层容器应，体积足够的大以防玻璃容器渗漏或破损时可容纳所有的液体和粉末。
外层容器必需贴上生物危害标识，包括感染性物质的名称。
（注：专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分
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