PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法PDA（Potato Dextrose Agar）是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基，广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
下面是PDA培养基的精确配制方法：原料准备：-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备：-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤：1.清洁工具：将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净，并用自来水冲洗干净。
2.马铃薯的制备：先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮，然后切成均匀的小块。
3.煮马铃薯：将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中，并加入足够的自来水，使其覆盖马铃薯。
然后将容器放入灭菌器或压力锅中，煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。
4.过滤溶液：将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来，以去除固体残渣。
5.加入琼脂：将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中，随后加入15克的琼脂。
将容器放入微波炉中，加热溶解至琼脂完全溶解为止。
6.加入葡萄糖：将20克葡萄糖加入琼脂溶液中，搅拌均匀。
7.均匀分配：将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。
每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整，一般为20-25毫升。
8.pH调节：使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。
PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值，则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节，直到达到理想的pH值。
9. 灭菌：将装有培养基的瓶或皿盖好，然后放入灭菌器或压力锅，进行高温高压灭菌。
通常在121℃下压力为15磅（或1.05kg/cm²）下灭菌20分钟。
10.存储：在灭菌后的培养基冷却到接近室温后，将其存储在冰箱中，以防止微生物生长。
注意事项：-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。
-在煮马铃薯时，要确保马铃薯块完全煮熟，以确保有效杀灭微生物。
-在加入琼脂和葡萄糖时，要确保琼脂完全溶解，葡萄糖均匀分散。
-在调节pH时要小心，因为pH调节对微生物的生长有重要影响。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法一、目的要求1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH 值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不同微生物对pH 值的要求，将培养基调到合适的pH 值范围。
三、实训材料和用具琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH ，10﹪ HCl ， 1mol／ L NaOH ， lmol ／ L HCl ，KNO 3， NaCl ， K 2HPO4· 3H 20， MgSO4 · 7H 20 ， FeSO4· 7H2 O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH 试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，四、操作方法与步骤(一 )培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～ 20g，水1000mL ，pH值自然。
(1) 称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml ，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min ，用可用 2 层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂 15～ 20g（提前搞碎），然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml 三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／ 5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／ 3 为宜，灭菌后垂直待凝。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法一、目的要求1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。
(1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
pda培养基的配制方法流程
PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pHo 如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH 或lmol/LHCL 溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3. 培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4. 培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为L 培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。
15:49:27太珥日2016-4-26 15:49:27PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15〜20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3 为宜，灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞（或泡沫塑料塞或试管帽等），以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
培养基配方
培养基配方1、PDA培养基（用于分离、培养植物内生真菌）：马铃薯（去皮）200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml，用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基（用于分离、培养植物内生细菌）：牛肉膏3g，蛋白胨5g，葡萄糖2.5g，琼脂粉15g，蒸馏水1000ml，pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml，用于抑制真菌生长。
115℃，20min 灭菌。
3、LB培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；4、DSM1培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl 5 g，胰蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL，pH=7.0；5、DSM2培养基：磷酸三钾26.631 g（pH=7.0)，二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，牛肉膏3 g，NaCl5 g，细菌学蛋白胨10 g，葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0；6、Msgg培养基：磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0)，MOPs 100 mmoL/L（pH7.0），MgCl2 2 mmoL/L，CaCl2 700 mmoL/L，MnCl2 50 μM，FeCl3 50 μM，ZnCl2 1 μM，VB1 2 μM，甘油0.5 %，谷氨酸0.5 %，色氨酸50 μg/mL，苯丙氨酸50 μg/mL，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
7、N%NA培养基：牛肉膏3.0 g，细菌学蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂粉N*10 g，8、BGM1培养基：牛肉膏3 g，胰蛋白胨10 g，NaCl 5 g，磷酸三钾26.631 g（pH7.0），二水柠檬酸三钠9.999 g，硫酸镁0.2465 g，硫酸铵19.821 g，葡萄糖1 g，蒸馏水1000 mL，pH 7.0。
pda培养基配方
PDA培养基配方及配制方法PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称。
宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
下面就详细介绍了pda培养基的配方及配制方法及步骤。
1.PDA培养基的配方：马铃薯200克葡萄糖20克琼脂20克蛋白胨5克磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克水1000ml PH自然。
2.PDA培养基的制作工艺流程：设计培养基配方→材料煮汁→补水→琼脂溶解→再次补水→药品溶解→调PH值→分装→灭菌→摆斜面3.PDA培养基的制作步骤a 材料煮汁：1000ml水置于锅中，待烧开后加入200克去皮、切片的马铃薯煮20到30分钟，至薯片软而不烂，用八层纱布过滤，取滤液。
b 琼脂溶解和补水：将马铃薯滤液重新加入到锅中，补水至1000ml，继续加热沸腾而后加入琼脂，继续文火煮沸至琼脂完全溶解，再次补水至1000ml。
c 药品溶解：在琼脂溶解后加入葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁1.5克，蛋白胨5克。
4 分装：a.试管培养基的分装分装所用的容器事先一定要清洗干燥，新购的试管内一般都残留烧碱，应先用稀硫酸在烧杯中煮沸，然后用清水洗干净，口朝下晾干后备用。
不能现洗现用，以免因管壁附有水膜导致培养基在试管口滑动。
分装试管时尽量避免培养液黏附试管口，以免培养基粘附棉塞，增加污染几率。
试管装量：制斜面培养基一般为试管高度的1/4—1/3。
b.平板培养基的分装将配制好的培养基倒入三角瓶，（三角瓶也一定要清洗干净），体积不要超过三角瓶的1/3（否则加热时液体沸腾易把棉塞冲开）5 加棉塞：棉塞要用普通棉花制作，不能用脱脂棉。
棉塞的大小，松紧要适度，过松达不到滤菌的目的，过紧妨碍空气流通，松紧度以于抓棉塞整个试管提起为宜。
标准的棉塞应是塞头略大，不易变形，一般塞入试管口2—3厘米。
占塞总长的2/3—1/3裸露在试管口外，比管口略大。
三角瓶棉塞同样松紧适中，一般塞入三角瓶3~4cm.6 装锅灭菌：将塞好棉塞的试管或三角瓶装进置物桶内，桶未装满用空试管填满以免试管倾倒，即可放入手提式高压灭菌锅中，盖好报纸，防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿，扭紧锅盖，排净锅内冷空气，待温度升至122—124℃之间开始计时30min，灭菌结束。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，广泛用于真菌和霉菌的培养及鉴定。
以下是用于制备PDA培养基的配制方法。
1.准备所需材料和设备-马铃薯：5个中等大小的马铃薯-葡萄糖：20克-洁净水：1升- 环境灭菌器（autoclave）-秤和容器-酸性pH试纸-移液管-培养皿或试管-实验室纸2.前期准备-将马铃薯洗净并削去外皮。
然后切成薄片，约0.5-1厘米的厚度。
-将锅中的水煮沸，将准备好的马铃薯片放入沸水中煮10分钟。
煮熟的马铃薯要输送到室温。
-将煮熟的马铃薯捣碎，以去除固体残渣。
3.配制PDA培养基-在一个用适量的水洗净和灭菌的容器中称取适量的煮熟马铃薯制得的马铃薯糊。
-摄取10%的葡萄糖。
-将容器放在烧杯中，并在烧杯中添加适量的洁净水，直到容器中的总容积为1升。
-使用酸性pH试纸检查pH值，并将其调整至5.6-5.8的范围内，通过加入少量的1MHCl或1MNaOH。
-用实验室纸过滤培养基，以去除留在溶液中的固体残渣碎片。
-用环境灭菌器将培养基装在培养皿或试管中。
对于培养皿，约20-25毫升的培养基足够；对于试管，约为10毫升。
4.灭菌-将装有培养基的容器放入环境灭菌器中。
-设置灭菌温度为121°C，灭菌时间为15分钟。
-等待完全冷却后，取出培养基容器。
5.储存-将已灭菌和冷却的培养基存放在冰箱中，以避免细菌和真菌的污染。
-培养基通常可以储存在2-4°C的冰箱中，可保持约1-2个月。
注意事项：-在配制PDA培养基的过程中，需要严格遵守无菌技术和操作规范，以避免污染。
-培养基pH值的准确控制对于真菌和霉菌的生长至关重要。
-灭菌温度和时间需要根据实验室设备的不同进行调整，以确保完全灭菌。
-培养基的储存条件是保证其质量和无菌性的关键，需要避免高温、阳光暴露以及其他潜在的污染源。
总结：配制PDA培养基需要用到马铃薯、葡萄糖和水，通过煮马铃薯、制取马铃薯糊、加入葡萄糖并调整pH值，最后经过灭菌和储存，制得一种适用于真菌和霉菌培养的PDA培养基。
PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15～20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
液体pda培养基的制备
方法/步骤
1这里按1L配制：先用刀将土豆去皮，称取200g，然后切成条状2将锅和漏勺刷干净，并用去离子水清洗一遍，并在锅中加入1L去离子水
3然后放在电磁炉上煮，等到土豆丝差不多煮烂时（用漏勺很容易碰断），关电磁炉；将纱布叠8层，然后放在烧杯上，将锅里的东西倒在上面过滤
4将烧杯补充到1L，倒入已清洗的锅中（去离子水），打开电磁炉（900W左右即可）然后放入20g葡萄糖和18g琼脂粉，并用玻璃棒不断搅拌至完成溶解
5将上述液体倒入1L烧杯中，补充不足水分（去离子水），然后装入500ml的锥形瓶中，用封口膜封上，用橡皮筋缠下，外面再用报纸包一层
6放入高压灭菌锅中，121°C 30min
7整理实验器材，清洗仪器。
PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基的配方及配制方法
PDA（Potato Dextrose Agar）培养基是一种常用的微生物培养基，广泛用于真菌和霉菌的分离和培养。
它由马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂组成，营养丰富，pH较为中性，适合各种真菌和霉菌的生长。
以下是PDA 培养基的配方及配制方法。
配方：
1.马铃薯提取物：200克
2.葡萄糖：20克
3.琼脂：20克
4.蒸馏水：1000毫升
配制方法：
1.将200克马铃薯削皮并切成块。
2.将马铃薯块加入1000毫升蒸馏水中，煮沸30分钟。
3.将马铃薯块滤除，保留煮沸后的马铃薯水。
4.将200克煮沸后的马铃薯水搅拌均匀，加入20克葡萄糖和20克琼脂。
5.将培养基混合物加热至化解琼脂，并搅拌均匀。
6.将培养基装入培养瓶中。
7.用适当装置和工具对装有培养基的瓶子进行高压灭菌，常压培养2小时。
8.灭菌完成后，将培养基倒入培养皿中，密封。
以上是PDA培养基的配方及配制方法。
使用培养基时要注意，避免交叉污染和外界污染。
同时，根据需要可以调整配方中的成分浓度，以适应不同微生物的要求。
PDA培养基
PDA培养基制作PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基) 马铃薯（去皮）200 g 、葡萄糖20 g、琼脂15～20g、蒸馏水1000 ml ，自然pH。
在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖，这样配制的培养基也称为PSA培养基。
(1) 称量称量去皮马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15～20 g。
提示：琼脂加入的量取决于琼脂的质量，质量好的15 g就够了，质量差的应适当增加。
另外，在夏天气温较高时，适当增加用量。
(2) 将马铃薯切成小块，放入锅中，加水1000 ml，煮沸30 min。
用纱布滤去马铃薯残渣。
(3) 将马铃薯滤液放回锅中，加入琼脂，加热熔化。
提示：在琼脂熔化的过程中，需要用玻璃棒不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
(4) 加入葡萄糖葡萄糖溶解后，加入适量的水以补充加热过程中损失的水分，定容至1000 ml。
提示：通常在制作培养基的锅内用红蓝铅笔标记出不同体积的刻度，如1 000 ml、2000 ml 等，在定容时直接将水加至已标记的刻度即可。
(5) 分装根据不同的实验目的，可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。
分装试管，其量为管高的1／5，灭菌后制成斜面。
分装三角瓶的容量以不超过三角瓶容积之一半为宜。
(6) 加塞在管口或瓶口塞上棉塞。
棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花，棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，故在植物病理学研究工作中普遍使用。
正确的棉塞是形状、划、、松紧与管口或瓶口完全适合，过紧时妨碍空气流通，操作不便；过松则达不到滤菌的目的，且棉塞过小往往容易掉进试管内。
正确的棉塞头较大，约有1／3在外，2／3在试管内。
分装过程中注意不要使培养基沾染在管(瓶)口上以免浸湿棉塞，引起污染。
(7) 包扎加塞后，将试管用线绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等。
(8) 灭菌将上述培养基以0.1MPa，121℃，高压蒸气灭菌20 min。
PDA培养基的配制方法和注意事项
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的真菌培养基，适用于培养和生长多种真菌菌株。
下面将介绍PDA培养基的配制方法以及注意事项。
配制方法：1. 准备所需材料：马铃薯（200g）、葡萄糖（20g）、琼脂（15g）、蒸馏水（1000ml）。
2.将马铃薯洗净，并切成块状。
3.将切好的马铃薯放入一个大锅中，加入足够的蒸馏水，使其完全浸泡。
4.使用中小火煮沸约30分钟，直到马铃薯变得软烂。
5.用纱布过滤掉马铃薯块，收集到的液体称为马铃薯提取液。
6.将马铃薯提取液加热到煮沸，并添加葡萄糖，搅拌使其充分溶解。
7.加入琼脂，搅拌溶解。
8.继续加热并保持搅拌，直到琼脂完全溶解。
9.关火冷却到40-45°C，搅拌均匀。
10.倒入培养皿或试管中，使其充分凝固。
11.将培养基容器包装好，使用锡箔纸和胶带封口，避免杂菌污染。
12.PDA培养基可以根据需要分装成适当大小的琼脂平板或斜面管，以供后续使用。
注意事项：1.所有试剂和仪器应尽可能消毒和无菌处理，以确保制备的PDA培养基无菌。
2.马铃薯切成块状是为了加速煮沸的过程，但切的过小可能导致提取液中的杂质过多，影响培养基质量。
3.煮沸的时间不宜过短，马铃薯需要彻底煮熟才能提取足够的营养物质。
4.搅拌是为了使葡萄糖和琼脂均匀溶解，并避免极度热区出现。
5.琼脂的溶解需要一定的时间和温度，不可急于冷却和使用。
6.冷却到40-45°C是为了防止高温对培养基中微生物的损害，也是为了避免由于过度冷却导致琼脂凝固太快。
7.封装培养基容器是为了防止杂菌和空气中的孢子进入培养基，避免细菌和真菌污染。
8.在分装培养基前，应将工作台面和器皿用酒精消毒，防止培养基受到外界污染。
9.PDA培养基在20-25°C的常温下可保存2-4周，或在4°C冰箱中保存2-3个月。
保存时不可直接暴露在光线下，避免褪色和干燥。
pda培养基的配制方法流程
p d a培养基的配制方法流程-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)马铃薯(去皮)200g葡萄糖20g琼脂20g水1000mLpH值自然PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。
15:49:27太珥日 2016-4-26 15:49:27PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
PDA培养基的配制方法和注意事项
PDA培养基的配制方法和注意事项PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potat o Dextro se Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基。
PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。
PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节p H的培养基，一般用pH试纸测定其p H。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法PDA培养基的配制方法一、目的要求1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，（三）斜面与平板培养基的制作斜面与平面培养基是常用的琼脂固体培养基。
将熬制好的琼脂培养基趁热装入试管灭菌后摆鞋面，凝固后即成斜面培养基。
斜面培养基常用于菌种培养、菌种保藏等工作。
将灭菌后的琼脂培养基倾注于无菌培养皿中，凝固后即成平板培养基。
平板培养基常用于分离菌种、菌落计数、菌落形态观察及菌种鉴定等。
斜面与平板培养基的制作过程大致为：溶解原料、融化琼脂、调PH、分装、灭菌和制斜面或平板。
1、溶解原料为加速原料的溶解，最好用热水。
先将原料依次加入到占配制量一半的水中，待全部溶解后在加足水量。
如配方中有马铃薯、麸皮、胡罗卜、豆芽等天然原料，需将其熬制约30min，取出定量滤液，在将所需的其他原料加入滤液中。
2、融化琼脂琼脂的用量可灵活掌握。
用作保藏菌种的培养基，琼脂用量可提高至2.5%，以增加持水性。
冬季的气温低，琼脂用量可适当减少。
琼脂用前可剪成小段，以利于融化。
待溶液煮沸是再加入，不断搅拌至完全无琼脂块状物时再停止加热。
3、调整PH用洁净干燥的玻璃棒沾一点培养基滴在试纸上，立即与比色板比较。
一般用10%NaOH或HCl调节。
4、分装将培养基趁热倒入垫有纱布的漏斗中，使培养基直接滤至试管或三角瓶中，试管装量一般为管高的1/4左右，三角瓶的装量约为其容量的一半。
[讲稿]PDALB培养基
![[讲稿]PDALB培养基](https://img.taocdn.com/s3/m/209ab30f2379168884868762caaedd3383c4b50b.png)
PDA培养基马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基是分离菌物和细菌的常用培养基，其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），15磅蒸气（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
PDA培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
小技巧：1、做PDA培养基用土豆应去皮，避免带入杂质，产生泡沫，影响通气。
PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
一种常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
分装于试管按物理性状划分：固体培养基按培养基成分划分：半合成培养基配方马铃薯200克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20~30分钟，能被玻璃棒戳破即可），用四层纱布过滤，再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂，继续加热搅拌混匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用。
其他事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH 试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.1g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性LB培养基LB一般被解释为Luria-Bertani培养基，其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)，这个名字来源於英语的lysogeny b roth，即溶菌肉汤。
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PDA培养基的配制方法
一、目的要求
1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。
2．学习并掌握棉塞的制作方法。
二、培养基的配制原理
培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训
和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。
不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不
同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。
三、实训材料和用具
琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布，
四、操作方法与步骤
(一) 培养基的配制
PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。
(1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小
块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁
热在量杯上过滤，滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放
在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再
补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用
三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超
过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4) 加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试
管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防
止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
(二) 棉塞的制作
棉塞的作用有二：一是防止杂菌污染；二是可过滤空气，保证通气良好，并可减缓培养基
水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。
正确的棉塞是形状、大小，松紧应与试管口(或三角烧瓶)完全适合。
过紧则妨碍空气流通，操作不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中，达不到灭菌的目的。
棉塞过小往往易掉进试管内，因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。
正确的棉塞头较大，加塞时，应使棉塞长度的1／3留在试管口外，2／3在试管口内（见实训图6-4）。
目前，有条件的实训室已使用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，制作棉塞要选纤维较长的棉花，一般不选用脱脂棉。
因为它容易吸水变湿，造成污染，而且价格也贵。
棉塞制作方法见图6-5
实图6-4棉塞实图6-5 棉塞的制作方法（三）斜面与平板培养基的制作
斜面与平面培养基是常用的琼脂固体培养基。
将熬制好的琼脂培养基趁热装入试管灭菌
后摆鞋面，凝固后即成斜面培养基。
斜面培养基常用于菌种培养、菌种保藏等工作。
将灭菌
后的琼脂培养基倾注于无菌培养皿中，凝固后即成平板培养基。
平板培养基常用于分离菌种、菌落计数、菌落形态观察及菌种鉴定等。
斜面与平板培养基的制作过程大致为：溶解原料、
融化琼脂、调PH、分装、灭菌和制斜面或平板。
1、溶解原料
为加速原料的溶解，最好用热水。
先将原料依次加入到占配制量一半的水中，待全部
溶解后在加足水量。
如配方中有马铃薯、麸皮、胡罗卜、豆芽等天然原料，需将其熬制约
30min，取出定量滤液，在将所需的其他原料加入滤液中。
2、融化琼脂
琼脂的用量可灵活掌握。
用作保藏菌种的培养基，琼脂用量可提高至 2.5%，以增加
持水性。
冬季的气温低，琼脂用量可适当减少。
琼脂用前可剪成小段，以利于融化。
待溶
液煮沸是再加入，不断搅拌至完全无琼脂块状物时再停止加热。
3、调整PH
用洁净干燥的玻璃棒沾一点培养基滴在试纸上，立即与比色板比较。
一般用10%NaOH
或HCl调节。
4、分装
将培养基趁热倒入垫有纱布的漏斗中，使培养基直接滤至试管或三角瓶中，试管装量一般
为管高的1/4左右，三角瓶的装量约为其容量的一半。
勿使培养基玷污容器口部。
口部塞有棉塞，试管每7或9 支扎一捆，棉塞外面包牛皮纸，以防在灭菌过程中被水汽打湿。
5、灭菌
分装后的培养基应随即灭菌。
除特殊情况外，一般培养基均用高压蒸汽灭菌，在104kPa 压力下，灭菌20-30min 。
6、制作斜面或平板
将灭菌后的试管趁热斜置于棍条上，倾斜度以试管中的培养基约占试管长度的1/2为宜，凝固后即成斜面培养基。
待灭菌后三角瓶内的培养基冷却至45~50时，以无菌操作法向无菌培养皿中倒入培养基，装置以刚覆盖整个培养皿底部为宜（约15ml）,凝固后即成平板培养基。
五、高压蒸汽灭菌法
该法使用高压灭菌锅，在121℃，O．105MPa压力下灭菌15～30min。
微生物实训所需的一切器皿、器具、培养基(不耐高温者除外)、无菌水、工作服等物品都可用此法灭菌。
高压蒸汽灭菌锅是能耐一定压力的密闭金属锅，有立式或卧式(实图8-1、2 )两种。
灭菌锅上附有压力表、排气阀、安全阀、加水口、排水口等。
卧式灭菌锅还附有温度计。
有的还有蒸汽人口。
灭菌锅的加热源有电、煤气和蒸汽三种。
高压蒸汽灭菌的操作过程
(1) 加水将灭菌锅内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，以水面与三角架相平为宜。
立式锅是直接加水至锅内底部隔板以下1／3处。
有加水口者由加水口加入至止水线处。
(2) 装料将装料桶放回锅内，装入待灭菌的物品。
放置装有培养基的容器时要防止液体溢出，瓶塞不要紧贴桶壁，以防冷凝水沾湿棉塞。
(3) 加盖摆正锅盖，对齐螺口，然后以同时旋紧相对的两个螺栓的方式拧紧所有螺栓，打开排气阀。
(4) 排气用电炉或煤气加热，待水煮沸后，水蒸气和空气一起从排气孔排出。
一般认为，当排气流很强并有嘘声时，表明锅内空气已排净(沸后约5min)。
(5) 升压当锅内空气排净时，即可关闭排气阀，压力开始上升。
实图7-1 立式灭菌锅实图7-2 卧式灭菌锅
1．安全阀2．压力表3．放气阀
4．软管5．紧固螺栓6．灭菌桶
7．筛架8．水
(6)保压当压力表指针达到所需压力刻度时，控制热源，开始计时并维持压力至所需时间。
本实训用121℃、20rnin灭菌。
(7)降压达到所需灭菌时间后，关闭热源，让压力自然下降到零后，打开排气阀。
放净余下的蒸汽后，再打开锅盖，取出灭菌物品，排掉锅内剩余水。
(8)无菌检查将已灭菌培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h，若无菌生长，则放人冰箱或阴凉处保存备用。
4．化学药品灭菌化学药品消毒灭菌法是用能抑制或杀死微生物的化学制剂进行消毒灭菌的方法。
能破坏细菌代谢机能并有致死作用的化学药剂为杀菌剂，如重金属离子等；仅阻抑细菌代谢机能，使细菌不能增殖的化学药剂为抑菌剂，如磺胺类及大多抗生素等。
化学药品对微生物的作用是抑菌还是杀菌以及作用效果，还与化学药品浓度的高低、处理微生物的时间长短、微生物的种类及微生物所处的环境等有关。
微生物实训室中常用的化学药品有2％煤酚皂溶液(来苏尔)、O．25％新洁尔灭、0．1％升汞、3％～5％的甲醛溶液和75％乙醇溶液等。
5．注意事项
(1)使用高压灭菌锅应严格按照操作程序进行，避免发生事故；灭菌时，操作者切勿擅自离开；务必待压力降到零后，才可打开锅盖。
(2)干热灭菌时电烘箱中物品不要摆得太拥挤，以免阻碍空气流通而影响灭菌效果；灭菌物品不要与电烘箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦。
(3)记述高压蒸汽灭菌的操作过程及注意事项。
六、实验报告（思考题）
1．培养基根据什么原理配制成？牛肉膏蛋白胨培养基中不同成分各起什么作用？
2．配制培养基有哪几个步骤?在制备培养基的过程中应注意些什么问题？为什么？
3．记录本实训配制培养基的名称、数量，并图解说明其配制过程，指明要点。
4．培养基配制完成后，为什么必须立即灭菌?已灭菌的培养基如何进行灭菌检查？。