线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1 )使用说明
JC 线粒体膜电位的检测方法
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒产品组成：产品编号BB-4105-1 BB-4105-2 BB-4105-3规格20 assays 50 assays 100 assaysJC-1 100ul 250ul 500ul10×孵育缓冲液4ml 10ml 20ml产品简介：线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，488nm激发时的最大发射波长为590nm，可以产生红色荧光，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，488nm激发时最大发射波长为527nm，可以产生绿色荧光，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性。
凋亡细胞则大多为FL1单阳性。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
贝博线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)可以快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化，可以用于早期的细胞凋亡检测。
试剂盒染料与其他的阳离子染料如DiOC6(3)和罗丹明123相比，特异性更高，对线粒体膜电位变化的特异性高于质膜电位变化，对线粒体去极化检测的检测一致性更好；红绿色荧光强度比率只受线粒体膜电位的变化，不受线粒体大小，形状，密度的差异干扰；检测灵敏度强，对细胞应激反应的微小异质性都能辨别；使用方法：悬浮细胞1、孵育缓冲液和JC-1染色工作液的配制：根据样品数按下列比例配制孵育缓冲液和JC-1染色工作液。
取100ul 10×孵育缓冲液加900ul无菌纯水稀释，混匀并预热至37℃，即成1×孵育缓冲液；在500ul 1×孵育缓冲液中加入5ul JC-1，涡旋混匀配成JC-1染色工作液；2、收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式线粒体是细胞内的一个重要器官，它在能量供应和调控细胞代谢方面起着至关重要的作用。
而线粒体膜电位则是线粒体正常功能的关键因素之一。
线粒体膜电位（Mitochondrial Membrane Potential，简称ΔΨm）是线粒体内外膜之间的电势差。
它由细胞内外各种因素的平衡和调节所决定，如质子泵、离子通道和载体蛋白等，它们通过主动转运质子、离子和分子等物质来维持线粒体膜电位的稳定性。
线粒体膜电位的变化会直接影响细胞的能量代谢和功能。
在正常情况下，线粒体膜电位维持在一定的范围内，以保持正常的细胞功能。
当线粒体膜电位过高或过低时，将引起线粒体功能障碍和细胞损伤。
例如，线粒体膜电位过高可能导致产生过多的活性氧自由基，进而引发细胞的氧化应激和凋亡；而线粒体膜电位过低则会降低线粒体内膜的ATP合成效率，影响细胞的能量供应。
如何准确、快速地检测线粒体膜电位是当前研究的热点之一。
目前，流式细胞术是最常用的方法之一。
通过特定的荧光探针，如JC-1（一种可以穿过线粒体膜的荧光染料），结合流式细胞仪的高灵敏度和高通量性能，可以准确地测量线粒体膜电位的变化。
JC-1荧光染料在高线粒体膜电位下会形成聚集态，发出红色荧光信号；而在低线粒体膜电位下，则会分散成单体态，发出绿色荧光信号。
通过测量红/绿荧光强度的比值，可以间接反映线粒体膜电位的高低。
在实际应用中，我们可以利用流式细胞仪的高通量性能，同时检测数千个细胞的线粒体膜电位。
这不仅提高了检测效率，还可以分析细胞群体中线粒体膜电位的分布情况，探究不同细胞类型、疾病状态及药物作用对线粒体膜电位的影响。
总的来说，线粒体膜电位是细胞内能量代谢的关键指标之一，它的变化与细胞的功能和生理状态密切相关。
通过流式细胞术测定线粒体膜电位，我们可以更全面、准确地了解细胞的功能状态。
这对于研究线粒体相关的疾病、寻找新的治疗策略具有重要的指导意义。
未来，随着流式细胞仪技术的进一步发展，我们相信线粒体膜电位的研究将会为细胞生物学和医学科研领域提供更多有价值的信息。
(完整版)线粒体膜电位检测(JC-1).
线粒体膜电位检测（JC-1)大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△ψ的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)是一种阳离子脂质荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△ψ）具有极性，JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
所需仪器或者试剂流式细胞仪或荧光显微镜、高速离心机、CO2培养箱、微量移液器1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、灭菌去离子水使用注意事项1．微量试剂取用前请离心集液。
2． JC-1避光保存及使用。
3．细胞培养的数量不宜超过1×106，否则细胞会产生自然凋亡影响检测。
4．对PH变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer孵育染色及洗涤，或延长观测时间5．流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响，因诱导剂、细胞株类型，作用时间的不同而荧光强度比例都有不同，因此没有通用标准的补偿设门指南，因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式
"jc1线粒体膜电位流式"可能是指使用JC-1染料进行流式细胞仪分析线粒体膜电位的方法。
JC-1染料是一种用于检测线粒体膜电位的荧光探针。
在线粒体膜电位正常的情况下，JC-1呈现聚集态，形成红色荧光；而在线粒体膜电位丧失或降低时，JC-1分散，形成绿色荧光。
这一性质使得JC-1可以用来评估细胞的线粒体功能。
流式细胞仪是一种广泛用于单个细胞分析的仪器。
通过使用适当的激光和荧光检测器，流式细胞仪可以同时分析成千上万个细胞的多个参数，包括细胞大小、形状、表面标记物和荧光探针的荧光等。
在进行JC-1线粒体膜电位流式分析时，一般的步骤如下：
1.染色：将细胞用JC-1染色，允许染料进入细胞内并与线粒体
结合。
2.洗涤：洗涤细胞，以去除多余的染料。
3.流式细胞仪分析：使用流式细胞仪对染色后的细胞进行分析。
通过设置适当的激光和检测器，可以同时获得JC-1的红色和绿
色荧光信号。
4.数据分析：通过流式细胞仪的软件或其他分析工具，对得到的
数据进行解析和进一步的统计分析。
这种方法可以用于评估细胞的线粒体膜电位，进而了解线粒体的功能状态。
常见的应用包括研究细胞凋亡、药物筛选和疾病研究等。
JC-1 线粒体跨膜电位检测
JC-1线粒体跨膜电位检测MCE JC-1 Kit 资料规格：1T, 1 mL (100 万细胞)用途：早期细胞凋亡检测设备：荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细胞仪通道：FITC 通道看绿色，PI 通道看红色指示：红绿荧光比例变化Phosphate-buffered saline (PBS) (1× )的配制a.将PBS (10×)温浴，直至完全融化。
b.按1:10 的比例，用dH2O 稀释PBS (10×)至PBS (1×)。
■细胞染色1) 悬浮细胞：a.以6 孔板为例，每孔用1 mL 培养基重悬100 万细胞，其他培养器皿以此类推。
b.阳性对照的设置：取适量CCCP (50 mM) 恢复至室温，阳性对照孔培养基中加入1 μL，其终浓度为50 μM，细胞培养箱37℃孵育5 分钟。
c.取适量JC-1 (200 μM) 恢复至室温，每孔培养基中加入10 μL JC-1 (200μM)，其终浓度为2 μM，细胞培养箱37℃孵育15-20 分钟。
d.37℃孵育结束后，400 g 4℃离心3-4 分钟，沉淀细胞。
弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
e.用PBS (1×) 洗涤2 次：加入2 mL PBS (1×) 重悬细胞，400g 4℃离心3-4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
重复洗1 次。
f.再用500 μL 的PBS (1×) 重悬细胞，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计或流式细胞仪分析(绿色荧光：Ex/Em=510/527 nm；红色荧光：Ex/Em=585/590 nm)。
2) 贴壁细胞：注：若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞，可先对贴壁细胞进行消化、收集，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
若用荧光显微镜或共聚焦显微镜检测，方法如下：a.以 6 孔板为例，每孔加入 1m L细胞培养液。
b.阳性对照的设置：取适量CCCP (50 mM) 恢复至室温，阳性对照孔培养基中加入1 μL，其终浓度为50 μM，轻摇混匀，细胞培养箱37℃孵育5 分钟。
jc-1线粒体膜电位染色实验原理
jc-1线粒体膜电位染色实验原理
线粒体膜电位染色实验是一种测定线粒体膜电位的方法。
线粒体膜电位是指线粒体内外膜之间的电位差，是维持线粒体功能的重要参数之一。
线粒体膜电位的高低与线粒体的能量代谢、ATP合成、离子通道的开闭等过程密切相关。
因此，测定线粒体膜电位对于研究线粒体的生物学功能具有重要意义。
线粒体膜电位染色实验是利用荧光染料JC-1来测定线粒体膜电位的方法。
JC-1是一种双荧光染料，它在低电位下形成绿色荧光单体形式，而在高电位下形成红色荧光聚集体形式。
因此，在线粒体膜电位高时，JC-1会形成红色聚集体，而在线粒体膜电位低时，JC-1会形成绿色单体形式。
通过测定JC-1的荧光强度比值，可以反映线粒体膜电位的高低。
具体实验步骤如下：
1.将细胞或组织块离心，去除上清液，用PBS洗涤一遍，离心。
2.将细胞或组织块加入含有1μM的JC-1的PBS缓冲液中，室温下孵育30分钟。
3.离心洗涤一遍，去除上清液。
4.将细胞或组织块加入含有PBS缓冲液的离心管中，用流式细胞仪或荧光显微镜观察JC-1的荧光强度比值。
通过对JC-1的荧光强度比值的测定，可以反映线粒体膜电位的高低。
若JC-1的荧光强度比值越大，说明线粒体膜电位越高；若JC-1的荧光强度比值越小，说明线粒体膜电位越低。
jc-1共聚焦步骤
jc-1共聚焦步骤
JC-1是一种荧光染料,常用于测定细胞线粒体膜电位。
其共聚焦显微镜观测步骤如下：
1. 将待测细胞接种在共聚焦培养皿中,使其附着并生长至适当的数量。
2. 用PBS缓冲液洗涤细胞1~2次,以去除培养液和细胞碎片等。
3. 将含1µM JC-1的PBS加入共聚焦培养皿中,孵育30分钟至1小时,使JC-1染料进入细胞,并形成线粒体膜电位相关的荧光染色体。
4. 用PBS缓冲液洗涤细胞1~2次,尽可能地去除未结合的JC-1染料。
5. 将培养皿放入共聚焦显微镜中,使用荧光激发光源激发JC-1的红色和绿色荧光。
6. 通过软件调节激发波长和滤镜,使观察到的荧光信号最佳。
7. 通过共聚焦显微镜观察线粒体膜电位的变化。
通常,高线粒体膜电位的细胞会表现出更多的红色荧光,而低线粒体膜电位的细胞会表现出更多的绿色荧光。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式摘要：I.简介- 介绍JC1 线粒体膜电位流式的背景和意义II.JC1 线粒体膜电位流式的原理- 详细解释JC1 的两种存在状态以及它们与线粒体膜电位的关系- 说明JC1 在流式检测中的使用方法和原理III.JC1 线粒体膜电位流式的应用- 介绍JC1 流式检测在哪些研究领域中被广泛应用- 列举一些具体的研究实例IV.结论- 总结JC1 线粒体膜电位流式在生物科学研究中的重要性正文：I.简介JC1 线粒体膜电位流式是一种在生物科学研究中广泛应用的技术手段，能够帮助研究人员深入理解线粒体膜电位的调节机制，进而揭示细胞代谢、生长和分化的奥秘。
II.JC1 线粒体膜电位流式的原理JC1 是一种荧光探针，它有两种存在状态：单体和多聚体。
在低浓度时，JC1 以单体形式存在，可以检测到绿色荧光；而在高浓度时，JC1 以多聚体形式存在，能够检测到红色荧光。
JC1 线粒体膜电位流式的原理是，JC1 探针通过与线粒体的特定部位结合，可以反映线粒体膜电位的变化。
当线粒体膜电位升高时，JC1 探针的单体形式与线粒体结合，使线粒体呈现绿色荧光；而当线粒体膜电位降低时，JC1 探针的多聚体形式与线粒体结合，使线粒体呈现红色荧光。
通过流式检测技术，研究人员可以快速、准确地测量JC1 探针在细胞中的荧光强度，从而间接地测量线粒体膜电位的变化。
III.JC1 线粒体膜电位流式的应用JC1 线粒体膜电位流式在生物学研究中有着广泛的应用，特别是在线粒体功能研究、细胞代谢研究、神经科学研究、肿瘤研究等领域。
例如，研究人员可以通过JC1 线粒体膜电位流式来研究线粒体在细胞代谢和生长中的作用，以及线粒体功能异常与衰老、疾病的关系。
此外，JC1 线粒体膜电位流式还可以用于研究神经递质释放、神经元兴奋性等神经科学研究领域。
IV.结论总的来说，JC1 线粒体膜电位流式是一种重要的生物科学研究手段，能够帮助研究人员深入理解线粒体膜电位的调节机制，进而揭示细胞代谢、生长和分化的奥秘。
如何快速检测分析线粒体膜电位变化？JC-1来助力
如何快速检测分析线粒体膜电位变化？JC-1来助力JC-1 检测线粒体膜电位（Membrane potential）原理：在细胞凋亡的过程中往往伴随着线粒体跨膜电位的破坏，这被广泛认为是细胞凋亡过程中zui早发生的事件之一。
线粒体膜电位的检测有很多方法，JC-1的流式检测是比较常见的一种方法。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，低浓度时，以单体存在，可检测到绿色荧光，用流式检测时，通常为FL-1通道(和FITC同通道）高浓度时，以多聚体存在，可检测到红光，流式检测通常为FL-2通道（和PE同通道)。
因JC-1浓度的变化,在单体和多聚体之间形成一个可逆的转变过程。
正常细胞，膜电位正常时，JC-1通过线粒体膜J性进入线粒体内，并因浓度升高而形成发射红色荧光的多聚体，而凋亡细胞，线粒体跨膜电位去J化，JC-1从线粒体内释放，浓度降低，逆转为发射绿色荧光的单体形式。
故而可以通过检测绿色和红色荧光来定性(细胞群的偏移）定量（细胞群的荧光强度）的检测线粒体膜电位的变化。
近年来研究发现线粒体功能状态和不少疾病的密切相关，多种细胞在不同因子作用下发生凋亡时均伴有MMP的下降，而检测线粒体膜电位(MMP)的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
如何快速检测分析线粒体膜电位变化？我们可以通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
Abbkine线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）#KTA4001 就此提供了一种简单的方法，基于JC-1来检测线粒体跨膜电位的变化，区分健康和凋亡细胞。
在健康细胞中，这种染料在线粒体中积聚并聚集，在线粒体中形成明亮的红色荧光团块。
任何消除线粒体膜电位的事件都会阻止JC-1染料在线粒体中的积累，因此，染料以其单体形式保留在细胞质中，导致红色转变（聚集的JC-1，Ex/Em = 585/590nm）至绿色荧光（JC-1单体，Ex/Em = 510/527nm）。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)
仅供科研版本号：161213 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)【产品组成】【保存条件】-20℃,避光,12个月【产品概述】JC-1是一种检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential) 的理想荧光探针。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物，产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1丌能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，产生绿色荧光。
这样就可以通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化，常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，这种转变也可作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的最大激发波长为514nm，最大发射波长为529nm。
JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。
实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的装置即可。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)(Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1)是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测，CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。
该试剂盒仅用于科研领域，丌宜用于临床诊断或其他用途。
【使用方法】1、配制JC-1染色工作液：取适量JC-1 Stain (200×)，按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH2O的比例稀释JC-1，剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。
然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。
6孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml，其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每0.5～1.0×106细胞需0.5ml JC-1染色工作液。
jc-1检测原理
JC-1检测原理及应用一、JC-1染料简介JC-1染料是一种用于检测细胞膜电位变化的荧光染料，也称为5，5′，6，6′-四甲基-2，2′-偶氮吩吩嗪二聚体。
它具有高选择性、高灵敏度和低毒性等优点，被广泛应用于细胞生物学、药物筛选和医学诊断等领域。
二、JC-1检测原理JC-1染料在正常生理状态下，能够以单体形式聚集在细胞膜上，形成聚集体，并发出绿色荧光。
当细胞膜电位降低或膜流动性降低时，JC-1染料变为单体状态，发出红色荧光。
因此，通过观察JC-1染料荧光颜色的变化，可以判断细胞膜电位状态，进而评估线粒体功能和细胞健康状况。
三、JC-1荧光染料应用领域1. 药物筛选：JC-1染料可用于药物筛选过程中线粒体毒性评估，帮助筛选出对线粒体影响较小的药物。
2. 医学诊断：JC-1染料可用于医学诊断，如心肌梗死、脑缺血等疾病的早期诊断。
3. 生物学研究：JC-1染料在细胞生物学研究中广泛应用于研究线粒体功能、细胞凋亡、药物作用机制等方面。
四、JC-1检测操作流程1. 准备细胞样品：将细胞培养在适当的培养基中，待检测。
2. 染色：将JC-1染料按照说明书要求的浓度添加到细胞样品中，孵育一定时间。
3. 洗涤：用磷酸盐缓冲液洗涤细胞样品，去除未结合的染料。
4. 荧光检测：使用荧光显微镜或流式细胞仪检测细胞样品的荧光信号。
5. 结果分析：根据荧光信号的颜色和强度，分析细胞膜电位状态和线粒体功能。
五、JC-1荧光染料安全性评价JC-1染料具有低毒性和良好的生物相容性，但在操作过程中仍需注意安全防护措施。
操作者应佩戴个人防护用品，如化学防护眼镜、实验服和化学防护手套等。
同时，应遵循实验室安全规定，确保实验过程的安全性。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式线粒体是细胞内的重要器官，负责细胞内能量的产生和调控。
线粒体膜电位是线粒体内部膜的电位差，对于维持线粒体功能和活性至关重要。
通过流式细胞术技术，我们可以准确地测定线粒体膜电位的变化，从而研究线粒体功能的调控机制。
本文将探讨在细胞生物学研究中的应用及意义。
线粒体膜电位是线粒体内部膜的电位差，是线粒体功能活性的重要指标之一。
线粒体膜电位的维持和调控受多种因素的影响，包括代谢状态、细胞环境等。
传统的研究方法较为繁琐，无法实时监测线粒体膜电位的变化。
而jc1线粒体膜电位流式技术的出现，为线粒体研究提供了一种全新的途径。
jc1线粒体膜电位流式技术是一种基于流式细胞仪原理的新型技术，通过jc1荧光探针在线粒体内部膜上的应用，可以实时监测线粒体膜电位的变化。
jc1荧光探针可以在高电位时自发聚集形成聚集体，荧光强度增加；而在低电位时则解聚，荧光强度减弱。
通过检测jc1荧光信号的变化，我们可以准确地测定线粒体膜电位的变化情况，进而研究线粒体功能的调控机制。
jc1线粒体膜电位流式技术在细胞生物学研究中具有重要的应用意义。
首先，通过jc1线粒体膜电位流式技术，我们可以准确地监测不同细胞状态下线粒体膜电位的变化，了解线粒体功能的活性和稳定性。
其次，jc1线粒体膜电位流式技术可以帮助我们研究线粒体在细胞生理和病理过程中的作用机制，为相关疾病的研究提供重要依据。
此外，jc1线粒体膜电位流式技术还可以用于评估药物对线粒体功能的影响，为新药开发提供参考。
在实际应用中，jc1线粒体膜电位流式技术也存在一些局限性。
首先，jc1荧光探针在应用过程中可能与其他荧光信号产生干扰，影响测试结果的准确性。
其次，jc1线粒体膜电位流式技术对仪器设备和实验操作要求较高，需要专业技术人员进行操作。
因此，在使用jc1线粒体膜电位流式技术时，需要谨慎选择实验条件，确保实验结果的可靠性。
梳理一下本文的重点，我们可以发现，jc1线粒体膜电位流式技术作为一种新型的细胞生物学研究方法，在线粒体功能研究领域具有重要的应用前景。
细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒JC-1.pdf
细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）JC-1 Apoptosis Detection Kit说明书修订日期：2019.7.24 Cat number：KGA601-KGA604Store at -20℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）一、试剂盒说明大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△ψ）的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
本试剂盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一种阳离子脂质荧光染料作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△ψ）具有极性，JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
本试剂盒可应用于细胞、组织或纯化的线粒体膜电位检测。
二、试剂盒组份组份KGA601 KGA602 KGA603 KGA604 储存条件10 assays 20 assays 50 assays 100 assaysJC-1 10µL 20µL 50µL 100µL -20℃,避光10×Incubation Buffer 2mL 4mL 10mL 20mL 2-8℃三、试剂盒以外自备仪器和试剂流式细胞仪或荧光显微镜、高速离心机、CO2培养箱、微量移液器1.5ml Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、灭菌去离子水四、使用注意事项1.微量试剂取用前请离心集液。
细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒JC-1
细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）JC-1 Apoptosis Detection Kit说明书修订日期：2018.10.24 Cat number：KGA601-KGA604Store at -20℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）一、试剂盒说明大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△ψ）的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
本试剂盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一种阳离子脂质荧光染料作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△ψ）具有极性，JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
本试剂盒可应用于细胞、组织或纯化的线粒体膜电位检测。
二、试剂盒组份组份KGA601 KGA602 KGA603 KGA604 储存条件10 assays 20 assays 50 assays 100 assaysJC-1 10µL 20µL 50µL 100µL -20℃,避光10×Incubation Buffer 2mL 4mL 10mL 20mL 2-8℃三、试剂盒以外自备仪器和试剂流式细胞仪或荧光显微镜、高速离心机、CO2培养箱、微量移液器1.5ml Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、灭菌去离子水四、使用注意事项1. 微量试剂取用前请离心集液。
jc 是一种广泛用于检测线粒体膜电位
4. Chen K, Zhang Q, Wang J, Liu F, Mi M, Xu H, Chen F, Zeng K. Taurine protects transformed rat retinal ganglion cells from hypoxia-induced apoptosis by preventing mitochondrial dysfunction. Brain Res. 2009 Jul 7;1279:131-8. Epub 2009 May 7.
JC-1
产品编号 C2005
产品名称 JC-1
包装 1mg
产品简介： JC-1 也 称 CBIC2(3) 或 5,5′,6,6′-Tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide ， 分 子 式 为 C25H27Cl4IN4 ， 分 子 量 为
652.23，CAS Number 3520-43-2，纯度>95%。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential) ∆Ψm 的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯
化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生 红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体(monomer)，可以产生绿色荧光。 这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式
摘要：
一、JC1 线粒体膜电位的检测原理
二、JC1 线粒体膜电位检测的流式方法
三、JC1 在低浓度和高浓度时的存在状态及其荧光表现
四、JC1 在线粒体膜电位检测中的应用
正文：
线粒体膜电位的检测是生物科学研究中的一个重要领域。
JC1 是一种常用的荧光染料，可以用于检测线粒体膜电位。
其原理主要基于JC1 在低浓度和高浓度时的存在状态变化及其对应的荧光表现。
JC1 有单体和多聚体两种存在状态。
在低浓度时，JC1 以单体存在，此时可以检测到绿色荧光。
在流式检测中，通常使用FL-1 通道（与FITC 同通道）进行检测。
而在高浓度时，JC1 以多聚体存在，可以检测到红光。
在流式检测中，通常使用FL-2 通道进行检测。
JC1 在线粒体膜电位检测中的应用十分广泛。
通过JC1 的流式检测，可以对线粒体膜电位进行快速、准确和定量的分析。
这对于研究线粒体在生物体内的功能和作用具有重要的意义。
综上所述，JC1 是一种非常有用的荧光染料，可以用于检测线粒体膜电位。
其原理主要基于JC1 在低浓度和高浓度时的存在状态变化及其对应的荧光表现。
含JC-1的ATP检测试剂盒说明书
含JC-1的ATP检测试剂盒说明书
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0300
规格：100T/48S
产品说明：
三磷酸腺苷（ATP）是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。
ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变，会影响许多细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP 水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。
ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。
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线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）使用说明
货号：M8650
规格：100T
内容：
产品名称包装
JC-1（200×）100µL/管，共5管
超纯90mL
JC-1染缓冲液（5×）80mL
CCCP（10mM）20µL
保存条件：
-20℃避光保存，尽量避免反复冻融，有效期一年。
超纯水和JC-1染色缓冲液（5×）也可4℃保存。
产品简介：
线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位Ψm△的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，可以产生绿色荧光。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的最大激发波长为515nm，最大发射波长为529nm；JC-1聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。
实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。
对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
操作步骤：
1、JC-1染色工作液的配制：
六孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1mL，其他培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100万细胞需0.5mL JC-1染色工作液。
取适量JC-1（200×），按照每50µL JC-1（200×）加入8mL超纯水的比例稀释JC-1。
剧烈震荡充分溶解并混匀JC-1。
然后再加入2mL JC-1染色缓冲液（5×），混匀后即为JC-1染色工作液。
2、阳性对照的设置：
把试剂盒中提供的CCCP（10mM）推荐按照11000∶的比例加入到细胞培养液中，稀释至10µM，处理细胞20分钟。
随后按照下述方法装载JC-1，进行线粒体膜电位的检测。
对于大多数细胞，通常10µM CCCP处理20分钟后线粒体的膜电位会完全丧失，JC-1染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1染色后应显示红色荧光。
对于特定的细胞，CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取10～60万细胞，重悬于0.5mL细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚
红。
（2）加入0.5mL JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。
细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
（3）在孵育期间，按照每1mL JC-1染色缓冲液（5×）加入4mL蒸馏水的比例，配制适量的JC-1染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g4℃离心3～4分钟，沉淀细胞。
弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤2次：加入1mL JC-1染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g4℃离心3～4分钟，沉淀细胞，弃上清。
再加入1mL JC-1染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g4℃离心3～4分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量JC-1染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
4、对于贴壁细胞：
注意：对于贴壁细胞，如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测，可以先收集细胞，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
（1）对于六孔板的一个孔，吸除培养液，根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次，加入1mL细胞培养液。
细胞培养液中可以含有血清和酚红。
（2）加入1mL JC-1染色工作液，充分混匀。
细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
（3）在孵育期间，按照每1mL JC-1染色缓冲液（5×）加入4mL蒸馏水的比例，配制适量的JC-1染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，吸除上清，用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤2次。
（5）加入2mL细胞培养液，培养液中可以含有血清和酚红。
（6）荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。
5、对于纯化的线粒体：
（1）把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1染色缓冲液（1×）稀释5倍。
（2）0.9mL5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1mL总蛋白量为10～100µg纯化的线粒体。
（3）用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测：混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描（time scan），激发波长为485nm，发射波长为590nm。
如果使用荧光酶标仪，激发波长不能设置为485nm时，可以在475～520nm范围内设置激发波长。
另外，也可以参考下面步骤6中的波长设置进行荧光检测。
（4）用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察：方法同下面的步骤6。
6、荧光观测和结果分析：
检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，可以把激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。
注意：此处测定荧光时不必把激发光和发射光设置在最大激发波长和最大发射波长。
如使用荧光显微镜观察，检测JC-1单体时可以参考观察其它绿色荧光时的设置，如观察GFP或FITC时的设置；检测JC-1聚合物时可以参考观察其它红色荧光，如碘化丙啶或Cy3时的设置。
出现绿色荧光说明线粒体膜电位下降，并且该细胞很可能处于细胞凋亡早期。
出现红色荧光说明线粒体膜电位比较正常，细胞的状态也比较正常。
注意事项：
1.JC-1（200×）在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管
壁或管盖内，可以20～25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2.必须先把JC-1（200×）用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后，才可以加入JC-1染色缓冲液（5×）。
不可先配制JC-1染色缓冲液（1×）再加入JC-1（200×），这样JC-1会很难充分溶解，会严重影响后续的检测。
3.装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤时，使JC-1染色缓冲液（1×）保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4.JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。
在检测前需冰浴保存。
5.请勿把JC-1染色缓冲液（5×）全部配制成JC-1染色缓冲液（1×），本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液（5×）。
6.如果发现JC-1染色缓冲液（5×）中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
CP为线粒体电子传递链抑制剂，有毒，请注意小心防护。
8.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。