高效液相色谱在生物制药中的应用
生物制药中的质量评价与控制技术
生物制药中的质量评价与控制技术生物制药在现代医学中扮演着重要的角色。
与化学合成药物不同的是,生物制药是通过生物技术制造出来的药物,具有更好的特异性和生物相容性。
因此,在生产过程中,质量评价和控制技术的应用尤为重要。
一、质量评价技术1. 电泳技术生物制药的质量评价通常涉及蛋白质、多肽、核酸和多糖等生物大分子的检测和定量。
其中,蛋白质电泳是常用的方法之一。
通过将蛋白质样品分离成多个带状物,可以检测出其中的不同蛋白质成分,从而评价其质量。
著名的SDS-PAGE电泳技术就是一种应用广泛的蛋白质电泳技术。
2. 质谱技术生物制药的质量还可以通过质谱技术进行评价。
质谱技术是通过分析样品中的离子质荷比来确定样品的分子质量和结构。
利用质谱技术可以检测生物制药和其原材料中的有害杂质,并检测出药物成分中的不同异构体或半定量结构变化。
3. 酶联免疫吸附测定技术(ELISA)ELISA技术是一种常用的生物制药质量评价方法。
该技术基于免疫反应原理,通过检测特定抗原-抗体相互作用来评价药物质量。
利用ELISA技术可以进行抗体药物的定量、特异性和纯度检测等。
二、质量控制技术生物制药的生产需要遵循严格的质量控制标准,以确保药物的安全和有效性。
以下列举几种主要的质量控制技术:1. 细胞培养技术细胞培养技术被广泛应用于生物制药的生产。
通过调控细胞培养条件、优化培养介质以及控制微生物污染等手段,可以控制生物药物的产量、纯度、稳定性和质量。
2. 高效液相色谱技术(HPLC)HPLC技术是常用的质量控制分析方法之一。
通过在色谱柱中将药物样品分离和纯化,可以检测样品中的杂质、相关物质和成分空间分布等。
3. 高通量筛选法高通量筛选法是一种快速有效的药物发现和改进方法。
它可以在大量候选药物中寻找具有特异性、效价和药代动力学等特点的优质药物,进而加速生物制药的研究和开发。
三、结语在生物制药的生产和质量控制过程中,以现代化手段进行质量评价和控制至关重要。
hplc 化学
hplc 化学HPLC(高效液相色谱法)是一种常用的分析技术,广泛应用于化学、生物、制药等领域。
本文将介绍HPLC的原理、仪器和应用。
一、HPLC的原理HPLC是一种基于液相传质的色谱分析方法。
其基本原理是将待测样品通过高压泵送入色谱柱,样品中的组分在固定相上发生分离,然后通过检测器进行检测。
HPLC的分离效果主要依赖于色谱柱和流动相的性质。
常用的色谱柱有反相柱、离子交换柱、手性柱等,流动相可根据需要选择有机溶剂和缓冲液。
二、HPLC的仪器HPLC的仪器主要包括高压泵、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统。
高压泵用于提供稳定的流速和压力,进样器则用于将样品引入色谱柱。
色谱柱是HPLC的核心部件,不同的色谱柱可实现对不同化合物的分离。
常见的检测器有紫外可见光检测器、荧光检测器、质谱检测器等。
数据处理系统用于记录和分析实验结果。
三、HPLC的应用1. 定性分析:HPLC可用于快速鉴定样品中的化合物,通过与已知标准品的保留时间和峰形进行比对,确定样品中化合物的种类和含量。
2. 定量分析:HPLC可以精确测定样品中化合物的含量,常用于药物分析、环境监测等领域。
3. 分离纯化:HPLC可用于分离和纯化混合物中的目标化合物,广泛应用于制药、天然产物提取等领域。
4. 质量控制:HPLC可用于药品、食品等产品的质量控制,保证产品的安全性和有效性。
5. 新药研发:HPLC在新药研发过程中起到关键作用,通过HPLC分析药物代谢产物、药物稳定性等,评估新药的药代动力学和药效学特性。
HPLC作为一种高效、精确的分析技术,在化学领域有着广泛的应用。
它不仅可以用于定性分析、定量分析和分离纯化,还可以用于质量控制和新药研发。
随着技术的不断发展,HPLC的应用范围将会进一步扩大,为科研和产业提供更多的支持。
高效液相色谱法的应用
在药品分析鉴定的作用
3 在西药鉴别中的应用 在HPLC法中,保留时间与组分的结构和性质有关,是定性的参数,可用于药物的鉴别.如中 国药典收载的药物头孢羟氨苄的鉴别项下规定:在含量测定项下记录的色谱图中,供试品 主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致.头抱拉定,头孢噻酚钠等头孢类药物以 及地西泮注射液,曲安奈德注射液等多种药物均采用HPLC法进行鉴别. 4.在体内药物分析中的应用 HPLC由于测定迅速准确,流动相选择范围广,灵敏度高(10-12 g/mL以上),填充柱种 类多,且可供选择的检测器也多。所以是实验室研究中一种很好的体内分析方法。在 国内外都很受重视.大多数药物都有紫外吸收,所以最常用的检测器是紫外检测器。 多数药物及内源性物质极性均较大,利用其极性差,可以采用RP-HPLC色谱柱,可获 得良好分离效果。
在药品分析鉴定的作用
1.天然药物分析 天然药物的来源有动物、植物和矿物之分,其中以植物类为主。由于天然药物的化学成 分复杂,其有效成分,可能有一个,也可以有多个,这对于控制药品质量,建立质量标 准来说比较困难,HPLC可通过对天然药物的有效成分进行式,可以判定药材的质量高低。 2..天然药物及复方成药分析 复方制剂、杂质或辅料干扰因素多的品种多采用高效液相色谱法。增免扶正片系由当 归、党参、黄芪(图3)等十几味天然药物精制而成,具有益气生津、活血养血、滋 补肝肾、健脾开胃之功效,主要用于抗缺氧、抗疲劳、抗衰老,长期服用可扶正祛邪 ,提高机体免疫功能,健身强体,益寿延年。该药对心、肝、脾、肾虚、纳差、心脑 血管疾病、神经衰弱、慢性肝炎、脂肪肝等都有较好的防治作用。 由于化学药品的开发费用昂贵,而且毒副作用大,近年来人们已把目光转向自然、民 族传统医药、草药、植物药等天然药物,据世界卫生组织统计,当前全世界60多亿人 口中80%的人使用过天然医药。在全世界药品市场中,天然物质制成的药品已占30% ,国际上植物药市场份额已达300亿美元,且每年以20% 以上的速度增长。HPLC分析 必定能为我国传统中医药实现现代化,走向世界提供强有力的技术支持。
高效液相色谱在生物制药中的应用
高效液相色谱在生物制药中的应用高效液相色谱法是近35年发展起来的一项高效、快速的分离分析技术,是现代分离测试的重要手段[1]。
高效液相色谱法已经被广泛用在各种领域,它是以经典的液相色谱为基础,引入气相色谱的理论与实验方法,将流动相改为高压输送,并采用高效固定相及在线检测等手段,发展而成的分析、分离方法。
以其灵敏度高、选择性好,可分析微量组成甚至痕量样品等特点,成为医药分析领域发展最快、应用最广的现代分析技术之一。
于此同时,高效液相色谱法成为环境污染物检测技术及化工产品质量检验中的标准方法。
鉴于其简便、快速、灵敏、准确的特点,目前,在医药、卫生、食品、环保等各个领域已得到广泛应用。
随着色谱技术的不断发展,在世界许多科学领域中,色谱法已成为世界许多科学领域中普及的一种分离分析手段,色谱仪也呈多样化、高精化、自动化、联用技术化等方向发展。
高效液相色谱仪具有柱效高、分析速度快、流动相和被测组分的体积流量小等特点,广泛应用于临床工作[2]。
1.高效液相色谱的介绍高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。
高效液相色谱法有以下五个特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱受到的阻力比较大,为了能够快速的通过柱子,必须对流动相加很高的高压。
②高效:分离效能高。
可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在uL数量级。
④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是强极性、热稳定性差、高沸点、大分子化合物的分离分析,显示出优势。
⑤分析速度快、载液流速快:分析所需时间一般小于1小时,和传统经典液体色谱法相比速度快得多。
高效液相色谱有5种类型:1、吸附色谱(Adsorption Chromatography)2、分配色谱(Partition Chromatography)3、离子色谱(Ion Chromatography)4、体积排阻色谱(Size Exclusion Chromatography)5、亲和色谱(Affinity Chromatography)此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点。
高效液相色谱HPLC基本原理
色谱柱的温度控制:优化色谱柱的 温度提高分离效率
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色谱柱的维护:定期清洗和维护色 谱柱保证其性能稳定
色谱柱的填充:优化色谱柱的填充 方式提高分离效果
流动相的组成:有机溶剂和水
流动相的选择原则:根据样品性质和检测器类型选择
流动相的优化方法:通过改变有机溶剂和水的比例、改变有机溶剂的种类、改变有机 溶剂的浓度等方法进行优化
流动相的优化效果:提高分离效果、提高检测灵敏度、降低检测时间等
固定相的选择: 根据样品性质 和分离要求选 择合适的固定
相
固定相的粒径: 粒径越小分离 效果越好但会 增加压力和延
长分析时间
固定相的表面 处理:表面处 理可以提高固 定相的稳定性
和选择性
固定相的填充: 填充方式会影 响柱效和分离 效果常用的填 充方式有轴向 填充、径向填 充和螺旋填充
汇报人:
智能化:I技术在HPLC中的应用提 高分析效率和准确性
高通量:高通量HPLC技术的发展提 高分析速度和通量
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微型绿色环保:环保型HPLC技术的发展 降低对环境的影响和污染
气相色谱-质 谱联用:提高 检测灵敏度和
准确性
样品采集:选择合适的样品采 集方法如抽样、取样等
样品预处理:对样品进行预处 理如过滤、离心、稀释等
样品保存:选择合适的样品保 存方法如冷藏、冷冻等
样品分析:对样品进行分析如 定性、定量等
进样器选择:根据样品性质 和实验要求选择合适的进样 器
样品准备:选择合适的样品 进行适当的处理和稀释
进样操作:将样品注入进样 器确保样品完全进入色谱柱
高效液相色谱分析技术的应用
高效液相色谱分析技术的应用在当今社会中,高效液相色谱分析技术已经成为了化学研究中不可或缺的重要工具。
它可以用来分离、检测和定量各种化合物,是一个通用的分析方法。
在医药、环保、食品和农业等领域,高效液相色谱分析技术都有着广泛的应用,如下所述。
1. 医药研究高效液相色谱分析技术在生物医药领域中有着非常广泛的应用。
例如,它可以用来检测蛋白质、核酸和药物等生物大分子,分析药品的质量和含量,探测药物中残留的有害物质等。
这些都是基础医学、临床医学和制药工业中必不可少的步骤。
2. 环保工程高效液相色谱分析技术也可以应用在环保领域中。
例如,它可以用来检测水、空气和土壤中的重金属、有机化合物和细菌等污染物,帮助人们找到环境污染的原因和来源,进而采取相应的治理措施。
这些工作可以保障人们健康和环境的可持续发展。
3. 食品行业高效液相色谱分析技术在食品行业也有着广泛的应用。
例如,它可以用来分析食品中的营养成分、添加剂、防腐剂、色素等物质,检测食品中的微量有害物质和重金属等。
这些分析结果可以保证食品质量和安全。
4. 农业科技高效液相色谱分析技术不仅可以应用在生物医药、环保和食品等领域,也可以用于农业科技。
例如,它可以用来检测农产品中的农药残留、重金属含量和污染物等,分析土壤中的养分和微生物等。
这些都可以为农业科技发展提供数据和支持。
总之,高效液相色谱分析技术在各个领域中都有着广泛的应用前景。
但是,同时也需要注意分析技术的精度和可靠性,以及对环境和健康的影响。
在未来的发展中,应该注重提高技术水平、完善检测标准和加强科学技术的应用。
超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用
2020年12月邓博等.超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用49超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用邓博,邓护军,杨飞,门靖西安万隆制药股份有限公司,西安710119摘要超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-M S/MS)是一种高效、迅速、稳定性和精密度高的综合性分析技术,其应用前景十分广阔。
本文着重介绍了近年来UPLC- MS/MS在人体化学药品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三方面的最新应用研究,并展望了其发展前景,以期为医药产品检测与分析、临床药物应用提供参考。
关键词液相色谱串联质谱中西医检测分析应用超高效液相色谱-串联质谱(UPL C - M S/ M S)检测分析技术具有高效分离度和超高灵敏度 的优势,可显著提高数据分析与检测的可靠性与 耐用性,增强目标化合物的分析效率与准确度,是 分析检测领域内的一种综合性的分析手段[3_4]。
近年来,UPLC - M S/M S分析技术在医药[5-6]、化 工[7]、生物工程[84、保健食品[1°]、特种材料"1]等众多领域应用广泛,尤其是化工与医药产品的 检测与残留分析凭借U P L C- M S/M S获得了大幅 度的提升与改进。
本文将重点综述U P L C- M S/M S在中西医药 品检测与分析中的应用研究现状,从人体化学药 品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三 方面归纳U P L C -M S/M S最新应用研究进展。
1 UPLC-M S/M S应用于人体化学药品的检测1.1 UPLC- M S/M S检测抗菌药物泊沙康唑是一种三唑类广谱抗真菌药物,具 有高效、广谱、低毒等特点[U]。
检测该药物在人 体血浆中的浓度对监测药物吸收、指导临床用药 安全尤为重要[1243]。
金鸿宾等[14]建立了一种特 异性强、灵敏度高的U P L C - M S/M S法测定血浆 中泊沙康唑浓度方法。
高效液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用
2、高效液相色谱质谱联用技术 在药物分析中的应用
(1)药品质量检测:高效液相色谱质谱联用技术可用于对新药、仿制药以及 中药的质量进行全面检测,包括对药物中各种成分的定性定量分析、立体构型 测定等。此外,该技术还可用于筛选和优化药物候选物,提高药物研发效率。
(2)药品浓度测量:在临床药物治疗中,准确的药物浓度对于治疗效果至关 重要。高效液相色谱质谱联用技术可实现对患者血清、尿液等生物样本中药物 浓度的精确测定,为临床医生提供准确的药物治疗方案依据。
3、药物代谢研究
液相色谱质谱联用技术可以用于药物代谢的研究。通过对药物在体内的代谢过 程进行监测,可以了解药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄情况,有助于药 物的优化设计和新药研发。
四、结论
液相色谱质谱联用技术在药物分析中具有广泛的应用前景。它不仅可以用于药 物成分的分析、质量控制和代谢研究,还可以为新药研发提供有力的技术支持。 随着技术的不断发展和完善,液相色谱质谱联用技术在药物分析中的应用将会 越来越广泛。
(2)上机分离:将处理后的样品通过输液泵注入色谱柱,利用高压液体流将 样品分离成不同组分;
(3)检测:将分离后的组分进入质谱仪,通过离子化、质量分析和检测器进 行检测。关键技术:高效液相色谱质谱联用技术的关键技术包括色谱分离和质 谱检测。
(1)色谱分离:通过选择合适的色谱柱填料和流动相组成,优化色谱分离条 件,提高目标物与杂质的分离效果;
4、药物代谢产物鉴定:UPLC-MS还可以用于药物代谢产物的鉴定。通过分析 药物在生物体内的代谢产物,可以了解药物的代谢途径和机制,为药物的设计 和优化提供参考。
五、总结
超高效液相色谱质谱联用技术是一种强大的分析工具,它在药物分析领域的应 用已经越来越广泛。随着科技的不断进步,我们有理由相信,这种技术将在未 来的药物分析中发挥更大的作用,为药物研发、质量控制以及临床应用提供更 多的支持。
生物制药技术中的常见实验器材及其用途
生物制药技术中的常见实验器材及其用途生物制药技术是利用生命科学和工程技术,通过在生物系统中进行分离、提纯和转化等方法,制备和开发医药产品的一门学科。
在生物制药技术的实验过程中,常见的实验器材起着至关重要的作用。
本文将介绍几种常见的生物制药技术实验器材及其用途。
1. 培养皿/培养瓶培养皿和培养瓶是生物制药技术中常用的实验器材之一。
它们通常用于培养微生物或动物细胞。
培养皿通常是扁平的,有较大的表面积用于培养微生物,而培养瓶则是圆底的,适合培养悬浮细胞。
培养皿和培养瓶的材料通常是透明的玻璃或塑料,便于观察和收集培养物。
2. 震荡器/摇床震荡器和摇床是在生物制药实验中常用的设备。
它们用来提供平稳而均匀的震动或摇动,以促进细胞生长和增殖。
震荡器通常通过震动将培养物中的营养物均匀分布,摇床则以平稳的摇动方式提供培养物的氧气和营养物流动,确保细胞生长的优化条件。
3. 离心机离心机是一种用来分离悬浮物与溶解物的设备。
生物制药技术中的离心机通常用于分离发酵液中的细胞或细胞碎屑,或者从培养物中收集纯化的蛋白质。
离心机通过运动使培养物中的颗粒或细胞沉降到离心管底部,形成沉淀。
离心机种类繁多,使用不同类型的离心机可根据实验需求选择不同的离心速度和离心时间。
4. 超声波处理仪超声波处理仪是一种利用超声波在液体中产生机械振荡的设备。
在生物制药技术中,超声波处理仪常用于细胞破碎、DNA或RNA的分离提取、蛋白质的纯化等实验。
超声波的机械振荡作用可以有效地破裂细胞膜和细胞壁,释放细胞内的物质。
5. 冻干机冻干机是一种用来冻结干燥样品的设备。
在生物制药技术中,冻干机常用于制备蛋白质、疫苗、抗生素等的冻干制剂。
冻干机通过将样品冷冻后施加低压,使样品中的水分由固态直接转变为气态,从而快速干燥样品并避免蛋白质或药物的降解。
6. 高效液相色谱仪高效液相色谱仪(HPLC)是一种常用的分析仪器,用于测定生物制药中的化合物的纯度和含量。
在生物制药技术中,HPLC常用于分析蛋白质、核酸、糖类等生物大分子的含量和杂质。
原题目:生物制药学中的药物分析方法
原题目:生物制药学中的药物分析方法1. 背景介绍生物制药学是研究利用生物技术生产药物的学科,药物分析方法是生物制药学中重要的技术手段之一。
药物分析方法的研究和应用可以确保药物的质量、安全和有效性。
2. 常用的药物分析方法在生物制药学中,常用的药物分析方法包括但不限于以下几种:2.1 色谱分析色谱分析是一种基于物质在固定相和流动相之间分配行为而进行分析的方法。
在生物制药学中,常用的色谱分析方法包括气相色谱(GC)、液相色谱(LC)和超高效液相色谱(UHPLC)。
这些方法可以用于药物成分分析、纯度检测、杂质分析等。
2.2 光谱分析光谱分析是利用物质对电磁辐射的吸收、散射、发射等特性进行分析的方法。
在生物制药学中,常用的光谱分析方法包括紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)、红外光谱(IR)和质谱(MS)等。
这些方法可以用于药物结构分析、成分定量、溶液浓度测定等。
2.3 生物学方法生物学方法利用生物体的特定性质和反应进行药物分析。
在生物制药学中,常用的生物学方法包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)、聚合酶链式反应(PCR)和质谱成像等。
这些方法可以用于药物的特定成分检测、生物活性评价等。
3. 药物分析方法的重要性药物分析方法在生物制药学中具有重要的意义。
它们可以确保药物的质量、安全和有效性,为药物研发、生产和监测提供科学依据。
药物分析方法的准确性和可靠性对于保障药物的疗效和安全性至关重要。
4. 结论药物分析方法在生物制药学中起着不可替代的作用。
通过色谱分析、光谱分析和生物学方法等手段,可以对药物进行成分分析、结构分析、纯度检测等。
进一步研究和应用药物分析方法,有助于提高药物的质量和安全性,促进生物制药学的发展和应用。
以上所述,仅为草稿。
根据实际需要,可适当调整文档内容。
参考文献:1. 张三, 李四, 王五. 生物制药学实践指南. 科学出版社, 20XX.2. ABC, XYZ. Analytical Methods in Pharmaceutical Sciences. Wiley, 20XX.。
生物制药工艺学第12章制备型HPLC
使用可再生和可降解的溶剂代替传统有机溶剂,降低对环境的污染。
高效回收和再利用技术
通过高效回收和再利用技术,减少溶剂的浪费和排放,降低对环境 的影响。
06
结论
制备型HPLC在生物制药工艺中的重要性
高效分离
制备型HPLC具有高效分离的特点, 能够快速、准确地分离和纯化生 物药物中的目标组分,提高药物 的纯度和收率。
04
制备型HPLC的挑战与解决方案
生物样品对分离介质的影响
80%
生物样品成分复杂
生物样品中含有多种蛋白质、细 胞、微生物等,对分离介质的稳 定性、选择性及使用寿命产生影 响。
100%
分离介质选择
针对不同生物样品,选择合适的 分离介质,如硅胶、聚合物等, 以提高分离效果和介质的稳定性 。
80%
清洗和维护
制备型HPLC在生物制药工艺 学中的应用
目
CO备型HPLC的基本原理 • 制备型HPLC在生物制药工艺中的应
用 • 制备型HPLC的挑战与解决方案 • 制备型HPLC的未来发展 • 结论
01
引言
生物制药工艺学概述
生物制药工艺学是一门研究利用生物技术生产药物的学科,涉及 微生物发酵、细胞培养、基因工程等领域。
优化色谱柱
通过改进色谱柱填料、粒径和孔径等参数,提高分离效率和通量。
优化流动相
通过选择合适的流动相组成和比例,优化流动相流速和梯度洗脱 程序,提高分离效率和通量。
串联色谱分离
将多个色谱分离单元串联起来,实现多级分离,提高分离效率和 通量。
绿色环保的分离介质和溶剂
生物相容性好的分离介质
选择对生物无毒或低毒的分离介质,降低对环境和人体的危害。
生物制药工艺学 第12章 制备型HPLC
金属螯合色谱:镍、铜等
亲合色谱 :
h
35
第二节 分离方案的设计
❖ What is the intended use of the product?
❖ What kind of starting material is available and how should it be handled?
❖ What are the purity issues in relation to the source material and intended use of the final product?
泵
泵型:双泵 4 泵头高 效柱塞泵
流速0.001-10ml/min 泵压: 25Mpa 流速精度< ±2μl/min 增量 : 0.001ml/min 粘度: 5 cp
泵型:高效柱塞泵 流速: 0.1-65ml/min 泵压: 3Mpa
h
25
❖ 检测器中的检测池不同 : 体积不同 ❖ 色谱柱不同: 规格主要是直径,粒径的大小
h
63
蛋白质的分离
1.填料:孔径300~500 2.流动相 (1)pH 低pH使蛋白质羧基解离受到抑制,
极性降低,与反相键合相的作用强。对大 多蛋白质而言,使用pH2.5~3.5的流动相 可以得到最好的分离。
❖ 5 在 2-D 电泳, blotting, ELISA 等之前的样 品制备。
h
4
h
5
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6
第一节 高效液相色谱法简介
1.1 液相色谱的发展史 ❖ 1903年,色谱法问世。 俄国植物学家茨维特 1903年3月21日, 大会报告 “一种新型 吸附现象及其在生化 分析上的应用” 1906年 在德国植物学杂志发表 文章,首次命名上述分 离后色带为色谱图,称此方法为色谱法
液相色谱的应用范围
液相色谱的应用范围一、化学领域化学领域是液相色谱应用最为广泛的领域之一。
液相色谱可以快速、准确地分离和测定化合物的成分,例如确定药物、食品添加剂、环境中的污染物等。
在化学领域中,常用的液相色谱技术包括正相高效液相色谱(RP-HPLC)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)。
它们可以分离和测定非极性、半极性和极性化合物,如烷基酚、酰胺、杂环化合物、氨基酸、核酸、蛋白质等。
液相色谱也可以用于物化性质的研究,如表面积、亲疏水性等。
二、生物领域生物学领域中,液相色谱被广泛用于生物大分子的分离、纯化和检测。
在研究蛋白质组学中,RP-HPLC可以分离复杂的混合物,如蛋白质混合物和酸性蛋白质,以及富集靶分子或去除冗余蛋白,实现蛋白的纯化和初步鉴定。
反相高效液相色谱也被广泛应用于核酸的纯化和检测。
三、医药领域在医药领域中,液相色谱被广泛用于药物研究和质量控制。
在新药研发和药品生产中,液相色谱被用于药物的纯化、分离和鉴定,以及药品质量控制中药品杂质和质量指标的分析。
液相色谱在药物代谢研究中也有广泛的应用,能够检测药物和代谢产物之间的相互作用。
四、食品领域在食品领域中,液相色谱被广泛用于食品添加剂、污染物和食品中的天然成分的分析。
可以使用正相高效液相色谱来测定食品中的香料和甜味剂,以及反相高效液相色谱来测定药物或重金属污染物和食品中的营养成分。
液相色谱还可用于鉴定、分离和纯化稀有的食品成分,如海洋生物中的活性成分和食品中的酚类类化合物。
五、环境领域在环境领域中,液相色谱被广泛用于分析和检测环境中的污染物,如有机污染物、微量元素、溶解有机气体和非极性有机物等。
在环境分析中,液相色谱技术被用于检测地下水中的有机污染物、城市空气中的挥发性有机污染物和工业废水中的重金属和痕量元素等。
液相色谱技术在各个领域中都有广泛的应用,可以用于各种不同的化合物分离和检测。
未来随着液相色谱技术的不断发展,其在各个领域中的应用范围也将不断拓展。
微生物制药中的生物活性物质筛选与优化
微生物制药中的生物活性物质筛选与优化微生物制药作为一种重要的药物研发途径,在新药开发和生产方面起着举足轻重的作用。
而在微生物制药的过程中,生物活性物质筛选与优化是一个关键的环节,它涉及到药物的有效性、毒副作用和产量等多个方面。
本文将详细探讨微生物制药中生物活性物质筛选与优化的方法和技术。
一、生物活性物质筛选的方法1.1 传统筛选法传统筛选法是最基本、最常用的筛选方法之一。
它以活性拮抗试验为基础,通过观察微生物产物对目标生物的生长抑制、细胞毒性及抗病毒活性等指标来判断其生物活性。
该方法简单直观,适合初步筛选活性物质。
1.2 高通量筛选法高通量筛选法是一种快速、高效的筛选方法,它基于大规模平行实验与高度自动化设备,可以同时对数千个样品进行筛选。
其中,酵母菌、细菌和真菌等微生物的高通量筛选技术已经相对成熟。
1.3 蛋白质工程筛选法蛋白质工程筛选法是一种通过改造微生物基因并筛选其表达产物的方法。
通过对微生物基因的重组,可以扩大样品的多样性,并利用高效的筛选系统判断其生物活性。
该方法可以针对特定靶标进行筛选,提高药物研发的效率和精确度。
二、生物活性物质筛选与优化的技术2.1 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是一种常用的生物活性物质分离和分析技术。
它可以根据化合物的特性,通过不同的柱分离和检测方法来筛选和分析微生物产物。
HPLC技术可以提高分离纯化的效率,减少杂质的干扰,从而更好地评估生物活性物质的活性和稳定性。
2.2 质谱分析技术质谱分析技术是一种高灵敏度和高分辨率的分析方法,可以用于鉴定和定量微生物产物中的活性成分。
质谱分析技术包括质子化电喷雾质谱(ESI-MS),气相色谱质谱(GC-MS)和液相色谱质谱(LC-MS)等。
通过质谱分析技术,可以准确测定生物活性物质的分子量、成分和结构,为筛选和优化提供有力的指导。
2.3 小分子库筛选技术小分子库筛选技术是一种通过在微生物细胞或体外系统中对小分子化合物进行大规模筛选和评估的方法。
高效液相色谱仪在制药行业中的应用
高效液相色谱仪在制药行业中的应用高效液相色谱仪(HPLC)是一种广泛应用于制药行业的分析仪器,具有高分辨率、高灵敏度、高重复性等优点。
在制药行业中,HPLC 被广泛应用于药物成分分析、药物质量控制、药物代谢研究、药物相互作用研究、药物制剂分析、药物生物利用度研究和药物安全性评估等方面。
一、药物成分分析高效液相色谱仪在药物成分分析中具有重要作用。
药物通常包含多种成分,这些成分的含量和比例直接影响药物的疗效和安全性。
HPLC可以分离和测定这些成分的含量,对于药物的研发、生产和质量控制具有重要意义。
例如,在中药研究中,HPLC可以用于分析中药中的活性成分,进而评估中药的质量和疗效。
二、药物质量控制在药物质量控制方面,高效液相色谱仪是重要的检测手段之一。
通过HPLC对药物样品进行检测,可以实现对药物质量的全面控制,包括原料药的纯度、中间体的质量控制、成品的含量和杂质分析等。
HPLC的高分辨率和灵敏度使得其在药物质量控制中具有其他方法无法替代的优势。
三、药物代谢研究药物代谢研究是药物研发中的重要环节,而高效液相色谱仪在此环节中发挥着关键作用。
通过HPLC对药物在体内的代谢产物进行分离和鉴定,可以揭示药物的代谢途径和动力学特征,为新药研发提供重要的依据。
例如,在抗肿瘤药物的研究中,HPLC可以用于检测药物在体内的代谢产物,进而评估药物的疗效和安全性。
四、药物相互作用研究药物相互作用是临床用药中需要关注的重要问题,而高效液相色谱仪可以为药物相互作用研究提供技术支持。
通过HPLC对不同药物在体内的浓度进行定量分析,可以研究药物之间的相互作用机制和效果。
例如,在抗生素联合用药的研究中,HPLC可以用于检测联合用药时各抗生素在体内的浓度变化,进而评估联合用药的效果和安全性。
五、药物制剂分析药物制剂分析对于评估药物的质量和稳定性具有重要意义。
高效液相色谱仪可以用于分析药物制剂的有效成分、杂质含量以及药物的释放行为等。
fplc原理 -回复
fplc原理-回复FPLC原理及应用前言:在分子生物学和生物化学研究中,蛋白质的纯化和分离是非常重要的一个环节。
蛋白质纯化最常用的方法之一是色谱技术,其中包括了多种色谱分离方法,如凝胶色谱、离子交换色谱、亲和色谱等。
本文将着重介绍一种高效液相色谱技术,即FPLC(fast protein liquid chromatography)。
一、FPLC的基本原理FPLC是液相色谱技术的一种,它是在高效液相色谱仪器基础上发展起来的一种自动化分离技术。
FPLC基于液相色谱的原理,利用样品分子在固定相(树脂)和移动相(缓冲液)之间的差异,通过溶质在移动相中的分配和迁移速率的不同来实现物质的分离、富集和纯化。
FPLC与传统的液相色谱仪相比,具有更高的分辨率、更快的操作速度和更高的自动化程度。
FPLC使用预包装的色谱柱,通过液相泵将样品直接注入柱中,然后通过流动相使样品分离,并通过检测器实时监测分离过程。
这种自动化的系统可以控制和调节流动相的压力、流速和组分,使操作更加方便高效。
二、FPLC的主要模块1. 液相泵:液相泵是FPLC中最关键的组件之一。
它能够提供稳定的流动相压力和流速,使得系统中的溶剂持续地流动并保持一定的速度。
FPLC 的流动相通常是缓冲液,可以根据需要调节缓冲液的pH、离子强度等参数,以实现样品的分离。
2. 自动采样器:自动采样器是FPLC中的一个重要模块,它能够实现样品的自动进样。
通常情况下,样品需要提前进行预处理和稀释,并通过固定体积的样品环进行进样。
3. 高效液相色谱柱:FPLC使用高质量的色谱柱来实现样品的分离。
色谱柱内部填充有特定的固定相材料,如离子交换树脂、亲和树脂等,根据样品的特性选择不同的柱进行分离。
4. 检测器:检测器是FPLC系统中用于监测分离物的模块。
常用的检测器有紫外-可见吸收光谱检测器、荧光检测器、折射率检测器等。
通过检测器可以获得样品在不同波长下的吸光度或荧光信号,并进一步分析和定量样品的组分。
高效液相色谱法测定多种物质含量
高效液相色谱法测定多种物质含量高效液相色谱法是一种常用的分离和分析方法,其在医药、化工、生物和环境分析等领域都有广泛的应用。
本文将介绍高效液相色谱法测定多种物质含量的原理、方法和应用。
一、高效液相色谱法的原理和方法高效液相色谱法是一种基于样品在移动相中的溶解度和分配系数的分离方法。
其主要分离原理是根据不同物质在移动相中的溶解度和相对亲疏水性进行分离。
在实验中,需要用高效液相色谱仪进行检测,其主要包括进样器、流动相泵、色谱柱、检测器和数据处理系统等几个部分,每个部分都有着不同的作用。
在实验中,样品首先通过进样器装入色谱柱,流动相通过柱子将样品分离出来,随着柱子的分离,样品中不同成分逐渐分离,到达检测器后进行检测,检测器检测后将数据传输到电脑,最后通过软件进行数据处理。
二、高效液相色谱法的应用高效液相色谱法在生物、化工、环境等领域都有着广泛的应用。
特别是在制药领域,高效液相色谱法被广泛应用于药物研究、开发和质量控制等方面。
在制药领域中,高效液相色谱法的应用主要包括以下几个方面:1.药物分析高效液相色谱法能够分离、检测和定量药物和其代谢产物,在药物的分析、研究和质量控制等方面都有广泛的使用。
2.原料药检测原料药是制药的重要组成部分,高效液相色谱法能够准确地检测出原料药中的杂质,保证药品的质量和安全性。
3.无菌药物测定无菌药物对于疾病的治疗有着重要的作用,高效液相色谱法能够对无菌药物中的各种成分进行分离和定量,提高药物的质量和效力。
4.天然药物分析天然药物源源不断地被开发出来,这些药物中包含了许多有效成分和杂质,高效液相色谱法能够对这些药物进行分离和检测,准确地提取优质的成分,发现新的药物引物。
三、高效液相色谱法的优缺点高效液相色谱法作为一种主要的分离和分析方法,有着优异的性能,但在使用时也存在一些缺点。
其主要的优点包括:1.高效:高效液相色谱法能够快速地分离和检测各种物质成分,在时间和效率上有着显著的优势。
高效液相色谱技术在药品检验中的应用分析
高效液相色谱技术在药品检验中的应用分析作者:孟繁浩来源:《西部论丛》2020年第01期摘要:高效液相色谱技术优点主要在于快速、高效。
经过长期的发展,该技术在操作自动化、分析速度、检测灵敏度、分离效率等方面均得到明显提升。
与此同时,还具备经典液相色谱法的优势,如色谱制备方便,样品适用范围广、流动相较多等。
因此,该技术在食品、药品、生物工程、石油化工等领域得到了广泛的应用,特别是在药品检验中的作用日益突显,成为一项重要的药品检验方式。
关键词:药品检验;高效液相色谱技术;应用1 高效液相色谱法的技术原理和特点通过检验这一技术的使用过程可以发现,该项技术的使用主要借助了高压输液系统,并且将高压输液系统之中的液体当成主要的流动相,是色谱法中的重要技术之一,能够借助高压输液泵将不同型号的单一溶剂以及不同比例的成分混合溶剂等具有流动性的液体装入到固定的实验色谱柱之中,对柱中的所有成分进行分析以及分离之后,然后再将其送入到相应的检测仪器中进行检测,从而对化学试样进行分析。
从技术的角度来说,该方法和经典的液相色谱法相比较而言并没有什么实质上的区别,主要是由于高效液相色谱法借助了高灵敏的检测器材、新型的高压输液泵以及高效的微粒固定相,因此活力特点更加明显。
2 高效液相色谱技术在药品检验领域中的应用2.1 高效液相色谱技术在测定药品含量中的应用在开展药品质量的检验时,应对原材料和新药中所含的各个组分和各种杂质的含量进行检测,在该工作中,采取高效液相色谱技术能够显著的提高检测的速率,增强检测结果的准确度,从而保证药品的质量。
例如,当进行毗罗昔康的定量检测中,因该药为酞胺类的化合物,非常容易受到氧化与水解,因此该物质的水溶液的化学特性缺乏一定的稳定性,而应用高效液相色谱技术,将盐酸甲醇溶液作为检测溶剂实施检测能够有效地提高其稳定性,保证检验结果的可靠性。
当检测四环素类的抗生素时,由于该物质存在立体异构体,使用其他的方法容易影响检测结果的准确度,因此能够采取高效液相色谱技术能够快速地实现对该类抗生素与立体异构体的有效分离和分析。
高效液相色谱串联质谱在药物分析中的应用
高效液相色谱串联质谱在药物分析中的应用摘要:高效液相色谱是利用物质的理化特性,让其在固定相和流动相之间相互作用,从而达到分离和分析的目的,具有简便、灵敏、快速、重复性好、准确等特点,被广泛应用在各个领域。
本文综述了高效液相色谱串联质谱在药物有关物质分析中的应用和重要作用。
关键词:高效液相色谱;高效液相色谱串联质谱;药物分析1.引言俄国植物学家茨维特早在1906年研究叶绿素的分离时发现了色谱法,时至今日,色谱法有了巨大的进步,比如常用的有气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC),高效液相色谱又可以分为正相和反相液相色谱、离子交换液相色谱、体积排阻液相色谱等等。
高效液相色谱具有操作简便、分析速度快、重复性好等优点,常用的检测器有紫外检测器(UV)、二极管阵列检测器(DAD)、荧光检测器(FLD)、质谱检测器(MS)、飞行时间质谱检测器(Q-TOF)等,其中质谱检测器和和飞行时间质谱检测器具有高灵敏度、高分辨率的特点。
在制药领域中,高效液相色谱法得到了广泛的应用[1]。
在化学药品的分析中,由于成分含量低,检测较困难,高效液相色谱则很好的解决了这个问题;在中药的分析中,由于其成分复杂,含量不高,且相似物多,给分析检测带来了一定难度,运用高效液相色谱法则突破了这个限制;在生物制药中,高效液相色谱法,尤其是液质联用技术对药物的分析、质量控制等方面发挥着重要的作用,如用Qda质谱检测器(Waters公司)检测单抗中N糖[2],对单克隆抗体质控方法的建立[3]等。
此外高效液相色谱法对于在职业病的发现方面也提供了很好的助力[4]。
2.高效液相色谱串联质谱的特点和在药物分析中的应用早在1921年就诞生了第一台质谱仪,到现在有了将近百年的发展,在质谱技术发展初期,主要是对物质中的同位素进行测定,随着色谱质谱联用技术的不断发展,其应用领域不断扩大,在生物学、医药等领域都有着很好的应用,成为了必不可少的分析技术手段之一。
生物制药中的质量控制与批次一致性评估方法
生物制药中的质量控制与批次一致性评估方法在生物制药领域,质量控制和批次一致性评估是确保生物制药产品质量和安全性的重要环节。
这些方法旨在评估生物制药产品的各项质量参数,以确保每个生产批次具有一致的质量特性,同时满足法规要求和患者的治疗需求。
质量控制是生物制药生产中的关键步骤,通过一系列的物理、化学和生物学分析方法,以及质量标准的制定和执行,确保生产的产品符合规定的质量规范。
质量控制的过程中涉及到许多参数的监测和评估,如药物的纯度、含量、有关的微生物检测等。
批次一致性评估是衡量不同生产批次之间质量一致性的方法。
由于生物制药产品的复杂性,其生产过程受到许多因素的影响,如细胞培养条件、操作技术、材料来源等。
因此,评估批次一致性的目的在于确保不同批次的产品质量在一定范围内保持稳定,并且满足法规和产品质量相关要求。
在生物制药中,质量控制和批次一致性评估方法需要结合专业的分析技术和科学的原理,以下是常用的几种方法:1. 高效液相色谱(HPLC):HPLC是一种广泛应用于药物分析的方法,可以用于分析生物制药产品中的成分含量、杂质和相关物质。
通过与标准品进行比较,可以准确测定生物制药产品的含量,并评估不同批次之间的一致性。
2. 气相色谱(GC):GC主要用于分析生物制药产品中的挥发性成分和有机溶剂残留。
通过测定不同批次之间的挥发性成分含量差异,可以评估产品的一致性,并确保安全性和有效性。
3. 质谱分析:质谱分析是一种高灵敏度的分析技术,可以用于检测生物制药产品中微量的化学物质和蛋白质多肽序列。
质谱分析的结果可以用于评估不同批次之间的一致性,并揭示可能的质量偏差。
4. 生物学活性分析:生物学活性分析是评估生物制药产品功效和效能的重要手段。
通过对生物制药产品在细胞或动物模型中的生物学活性进行测定,可以评估不同批次之间的一致性,并确保产品的疗效。
除了上述方法,还有许多其他的质量控制和批次一致性评估方法,根据不同的产品特性和需求选择合适的方法进行评估。
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高效液相色谱在生物制药中的应用高效液相色谱法是近35年发展起来的一项高效、快速的分离分析技术,是现代分离测试的重要手段[1]。
高效液相色谱法已经被广泛用在各种领域,它是以经典的液相色谱为基础,引入气相色谱的理论与实验方法,将流动相改为高压输送,并采用高效固定相及在线检测等手段,发展而成的分析、分离方法。
以其灵敏度高、选择性好,可分析微量组成甚至痕量样品等特点,成为医药分析领域发展最快、应用最广的现代分析技术之一。
于此同时,高效液相色谱法成为环境污染物检测技术及化工产品质量检验中的标准方法。
鉴于其简便、快速、灵敏、准确的特点,目前,在医药、卫生、食品、环保等各个领域已得到广泛应用。
随着色谱技术的不断发展,在世界许多科学领域中,色谱法已成为世界许多科学领域中普及的一种分离分析手段,色谱仪也呈多样化、高精化、自动化、联用技术化等方向发展。
高效液相色谱仪具有柱效高、分析速度快、流动相和被测组分的体积流量小等特点,广泛应用于临床工作[2]。
1.高效液相色谱的介绍高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。
高效液相色谱法有以下五个特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱受到的阻力比较大,为了能够快速的通过柱子,必须对流动相加很高的高压。
②高效:分离效能高。
可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在uL数量级。
④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是强极性、热稳定性差、高沸点、大分子化合物的分离分析,显示出优势。
⑤分析速度快、载液流速快:分析所需时间一般小于1小时,和传统经典液体色谱法相比速度快得多。
高效液相色谱有5种类型:1、吸附色谱(Adsorption Chromatography)2、分配色谱(Partition Chromatography)3、离子色谱(Ion Chromatography)4、体积排阻色谱(Size Exclusion Chromatography)5、亲和色谱(Affinity Chromatography)此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点。
高效液相色谱的缺点就是有柱外效应,在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。
高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。
2.高效液相色谱在生物制药中的应用2.1高效液相色谱在检测药物含量方面的应用药物与人类的健康,生活质量的提高关系极大,许多药品由于受到纯度的影响,药效不能充分发挥,甚至产生毒副作用;有时服用前需作各种试验,带来很多麻烦,高效液相色谱的测定就比较简单。
高效液相色谱是分离与纯化药物的最佳选择。
在药物分析中,由于有灵敏度高,快速简便,专一性的特点,广泛的应用于药物分析中,主要是定量分析,特别在干扰较多的时候表现得比其他方法好。
色谱柱,以高效液相色谱法可以用来测定毗虫琳原药的含量:选择ODS-C18甲醇和水为流动相,采用反相高效液相色谱法测定毗虫琳原药的含量。
该方法快速简便,准确度高[3]。
高效液相色谱法测定氨咖黄敏胶囊的含量:色谱柱为Aglient c s柱(250 mm×4.6 mm,5 m),流动相为l%醋酸溶液(用乙二胺调pH 至3.7)一甲醇(60:40),流速为1.0 mL/min-1,检测波长272 nm,柱温30℃。
结果对乙酰氨基酚、咖啡因进样量分别在0.1222~3.0555 g和0.007 482~0.1871 g范围内与峰面积呈良好线性关系,r分别为1.0000和1.0000(n=6),平均加样回收率分别为99.54% (RSD=0.66% )和100.43%(RSD=0.92% )[4]。
高效液相色谱法测定复方乳酸左氧氟沙星缓释滴鼻液中两组分含量:采用柱(4.6 mm~250 mm,5μm),以乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氢钾溶液(17:Dionex C1883,含0.2%三乙胺,磷酸调pH 3.5)为流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长为217 nm[5]。
高效液相色谱法测定复方痛风定颗粒中秋水仙碱含量:色谱柱:AgilentHC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇一水(45:55);检测波长:245 nm;柱温:25℃,流速1.0 mL·min-1;进样量l0 L;分离度不低于2.0,理论塔板数以秋水仙碱峰面积计算不低于3 000[6]。
高效液相色谱法测定狼疮灵颗粒中芍药苷的含量:采用高效液相色谱法,色谱柱:Hypersil ODS-2(150 mm X 4.6 mm,5.0μm);流动相:乙腈一0.4%的磷酸水溶液(10:90);检测波长:230 nm;流速:1.0 mL/min,柱温:25℃[7]。
除了以上这些例子意外,高效液相色谱还可应用于其他各种药品中有机物或无机物浓度的检测,如:高效液相色谱法测定排石利胆片中芍药苷的含量,高效液相色谱法测定小儿清解冲剂中连翘苷含量,高效液相色谱法检查骨筋丸胶囊中非法添加的松香酸等[8-10]。
高效液相色谱检测的方法重复性好、快速可行、操作简单、简捷准确、结果准确并且可靠,可用于控制各种药品中有效成分的质量。
并且可以广泛应用。
2.2高效液相色谱在检测制药废水中的应用制药废水中的残留药物成分对环境造成的污染越来越严重, 制药废水的治理已成为环境保护工作中相当重要的方面。
所以检测制药废水也是生物制药工业下游技术中很重要的一个组成部分。
高效液相色谱也可应用于测定制药废水中相关物质的含量,如:高效液相色谱法同时测定制药废水中的交沙霉素、茶碱及扑热息痛。
同时测定制药废水中残留的茶碱、扑热息痛、交沙霉素3种药物的高效液相色谱方法。
样品经固相萃取处理后进行色谱分析。
采用的色谱条件:色谱柱为Hypersil ODS柱( 4.6 mm i d X 200 mm) ;流动相A 液为0.025 mol/ L KH2PO4-H3PO4缓冲液( pH 2.75),流动相B液为甲醇;梯度洗脱;紫外检测波长为230 nm(交沙霉素)、272 nm(茶碱)、243 nm(扑热息痛) 。
制药废水中3 种药物的加标回收率均高于93%, 相对标准偏差(n = 6) 小于2.1% , 检测下限( S / N = 3) 不高于1.0μg/ L。
可以通过检测制药废水,寻找合适的方法去除在制药废水中对环境有害的物质,对环境保护,清洁生产具有比较重要的意义。
3.结论高效液相色谱简便、快速、灵敏、准确,在医药、卫生、食品、环保等各个领域已得到广泛应用。
今后会在更多领域有着更多的应用,高效液相色谱分析法在生物制药方面有着广泛的应用前景。
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