类风湿因子液体试剂盒(免疫透射比浊法)使用指南

本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆类风湿因子。

【产品信息】

货号试剂盒规格

170229910021 试剂1 5×25ml＋试剂2 1×25ml 170229910730 试剂1 4×20ml＋试剂2 2×8ml 170209910059 5×1ml TruCal RF (类风湿因子校准品)

5个不同浓度水平的校准品

【摘要】

类风湿因子(RF)是一类自身抗体，包括所有类型的免疫球蛋白。它们是抗变性或聚合IgG分子Fc片段的抗体[1]。诊断所检测的RF主要是IgM类RF，用来检出各种类风湿疾病，是炎症的起源[2]。

大约70％～80%的类风湿性关节炎(RA)患者RF为阳性，但是并不特异，因为RF浓度的升高还出现在非类风湿疾病中。在无RA临床症状的高龄人群中，阳性率达到大约10%[3]。检测RF为鉴别诊断风湿疾病提供了重要的信息[4]。另外，RA中的高浓度RF值常和疾病的进行性临床发展有关。但是RF的阳性结果必须结合临床或其他检验结果予以证实。

【方法】

免疫透射比浊终点测定法。

【原理】

使用热聚合IgG和样品中的类风湿因子进行抗原-抗体反应，形成抗原-抗体复合物，进行透射比浊终点测定。

【试剂】

在测定时的各组分和浓度

试剂1（R1）：

磷酸缓冲液pH 7.4 40 mmol/L

试剂2（R2）：

热聚合人IgG 适量

试剂稳定性与贮存

试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻！

注意事项

1. 试剂中含叠氮钠（0.95g/L），不可入口，避免接触皮肤及粘膜。

2. 应采取必要的预防措施使用试剂。

废液处理

参照各地方法规要求。

试剂准备

试剂为即用式。

未提供的实验所需物品

9 g/L氯化钠溶液

一般的实验室仪器设备

【标本】

血清，肝素或EDTA血浆。不要使用含氟化钠的血样收集瓶。稳定性：20-25℃保存可稳定1天

2-8℃保存可稳定3天

-20℃保存可稳定4周

不可使用已被污染的标本。

【测定程序】

若需要自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。

测定条件

波长340 nm，Hg 334nm

比色杯光径 1.0 cm

温度37℃

分析类型终点法

检测扣除试剂空白

操作步骤

R1（试剂1）

R2（试剂2）

A1，然后加R2: 50 μl

: 15 μl

〃R1: 250 μl

ΔA=[(A2－A1) 校准品管或样品管] – [(A2－A1)空白管]

【计算】

按照公司配套校准品使用要求，用5个不同水平的校准液，连同9g/L氯化钠溶液为空白。经测定后，由仪器自动对校准品响应量通过合适的数学模型如Logit/Log，拟合成校准曲线，校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。

校准稳定期：4周

【校准品和控制品】

建议使用DiaSys公司提供的TruCal RF 校准品系列对自动分析仪进行校准。

每批样品检测时，建议使用DiaSys公司提供的TruLab 【性能特性】

病人结果可报告范围

本公司对内含RF浓度水平低于某商品化试剂检测限的10份血清进行了检测，这10份血清的检测均值为5 IU/ml，均值加3倍标准差为12 IU/ml，因此认为只有当样品中RF浓度≥ 12 IU/ml时，本试剂才可以将其和不含RF的样品加以区分。

本法对RF的检测上限为700 IU/ml。当样品测定值超过上限时，应将样品用9 g/L氯化钠溶液作1+ 1稀释，重新测定，结果乘以2。

前带限制

血清RF值≤ 3000 IU/ml时，没有观察到前带效应。

特异性/干扰

当样品中抗坏血酸浓度≤1704 μmol/L，胆红素浓度≤684 μmol/L，血红蛋白浓度≤ 5 g/L，甘油三酯浓度≤22.6 mmol/L时没有观察到干扰。

灵敏度/检测限

记录吸光度A2

1

对9 g/L氯化钠溶液用本试剂进行重复测定，以均值加3倍

标准差的方式计算RF检测限为1 IU/ml。

方法学比较

本公司的试剂盒(y)与某商品化采用免疫透射比浊法原理的

试剂盒(x)，同时对75个样品进行RF检测，将检测结果作

方法学比较，其统计结果如下：y=1.23x -0.31 IU/ml；r = 0.949。

本公司的试剂盒(y)与某商品化采用免疫散射浊度法原理的

试剂盒(x)，同时对22个样品进行RF检测，将检测结果作

方法学比较，其统计结果如下：y=0.83x+6.82 IU/ml；r = 0.888。

【参考范围】[5]

健康人群RF浓度预期值为< 10 IU/ml

（注：各实验室应有自己的参考范围。）

【参考文献】

1. Winchester RJ. Characterization of IgG complexes in

patients with rheumatoid arthritis. Ann N Y Acad Sci 1975;256:73-81.

2. Moore TL, Dorner RW. Rheumatoid factors. Clin

Biochem 1993;26:75-84.

3. Shmerling RH, Delbanco TL. The rheumatoid factor: an

analysis of clinical utility. Am J Med 1991;91:528-34.

4. Mannik M. Rheumatoid factors in the pathogenesis of

rheumatoid arthritis. J Rheumatol Suppl 1992;32:46-9. 5. Mierau R, Genth E.. Autoantibodies in rheumatoid

arthritis. In: Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics.

1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft;

1998.p.810-3.

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