梅毒实验室诊断方法
梅毒的实验室诊断课件
梅毒的实验室诊断课件一、教学内容本节课主要讲解梅毒的实验室诊断方法。
教材选用的是《临床实验室诊断学》的第10章，内容涵盖了梅毒的病原学、临床表现、实验室检查及诊断。
二、教学目标1. 使学生了解梅毒的病原学特点及其在临床上的重要性。
2. 掌握梅毒的临床表现，能识别不同阶段的梅毒。
3. 学会梅毒的实验室诊断方法，包括暗视野显微镜检查、血清学检测等。
三、教学难点与重点重点：梅毒的病原学特点、临床表现及实验室诊断方法。
难点：暗视野显微镜检查的操作技巧，血清学检测的原理及结果解读。
四、教具与学具准备1. 教具：多媒体课件、实验室诊断学教材、显微镜、玻片等。
2. 学具：笔记本、笔、实验报告单等。
五、教学过程1. 实践情景引入：通过展示梅毒患者的临床图片，让学生了解梅毒的严重性，激发学生的学习兴趣。
2. 病原学特点：讲解梅毒螺旋体的形态、结构及生长条件，引导学生掌握梅毒的病原学特点。
3. 临床表现：分析不同阶段梅毒的临床症状，让学生能识别梅毒的不同阶段。
4. 实验室诊断：详细讲解暗视野显微镜检查的操作步骤，血清学检测的原理及方法。
5. 例题讲解：分析典型梅毒患者的实验室检查结果，让学生学会解读检查结果。
6. 随堂练习：让学生自行分析一些梅毒患者的实验室检查结果，巩固所学知识。
7. 板书设计：将梅毒的病原学特点、临床表现、实验室诊断方法进行系统梳理，便于学生复习。
8. 作业设计：（1）简述梅毒的病原学特点。
（2）列举梅毒的临床表现及诊断方法。
（3）分析一份梅毒患者的实验室检查结果。
六、作业答案1. 梅毒的病原学特点：梅毒螺旋体是一种革兰氏阴性细菌，形态为螺旋状，长度约为0.20.3μm，直径约0.1μm。
它能在人体内长期存活，通过性接触、母婴传播等途径传播。
2. 梅毒的临床表现：早期梅毒表现为硬下疳、梅毒疹等；中期梅毒可侵犯心脏、神经系统等重要器官；晚期梅毒则表现为后天性梅毒，如脊髓痨、主动脉瘤等。
诊断方法包括暗视野显微镜检查、血清学检测等。
性病实验室梅毒SOP
目的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。
适用范围：性病实验室工作人员责任人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。
血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。
一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液，立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。
1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。
1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准梅毒是一种性传播疾病，常常被忽视或者被误诊。
因此，梅毒实验室诊断是非常重要的。
在实验室中，我们必须根据一些特定的标准和指南来确诊患者是否患有梅毒。
下面就是梅毒实验室诊断标准的一些重要信息和要求。
1. 梅毒实验室诊断标准的类型梅毒实验室诊断标准包括两类：直接检测和间接检测。
直接检测包括酸化染色、暗视野显微镜检查和核酸检测等。
间接检测包括梅毒螺旋体抗体检测和梅毒螺旋体结构抗原酶联免疫吸附检测等。
2. 梅毒实验室诊断标准的优点梅毒实验室诊断的优点是能够快速准确地诊断患者是否患有梅毒。
这对于治疗和防止传染病的传播是至关重要的。
实验室检测可以提供比症状检查更准确的结果，特别是在早期诊断中，因为症状往往不明显或没有症状。
3. 梅毒实验室诊断标准的要求在进行实验室测试之前，我们必须注意以下要求：（1）样本的获取必须符合标准。
例如，尿液、血液、脑脊液、皮损等。
（2）样本的储存和运输必须严格按照标准，避免污染或破坏。
（3）操作人员必须具备专业知识和技能，以确保测试结果的准确性。
4. 梅毒实验室诊断标准的解读在进行实验室测试之后，我们必须仔细解读测试结果。
鉴于梅毒是一种非常复杂的疾病，我们需要权衡许多因素，如病人的症状，既往病史等。
不同的测试结果需要不同的解读方法。
结论在人们越来越重视健康的时代，实验室检测成为了诊断疾病的关键手段之一。
梅毒实验室诊断标准的确立，将有助于准确识别和预防梅毒的传播。
我们应该加强对实验室操作、标本采集和处理、测试结果解读等方面的培训，以确保实验室测试的准确性和安全性。
梅毒螺旋体实验室诊断方法及进展
梅毒螺旋体实验室诊断方法及进展摘要】近年来梅毒的发病率正在逐年上升，同时随着免疫学和分子生物学技术的发展，梅毒的实验室检查取得了很大的进展，梅毒螺旋体抗体检测是目前梅毒诊断的主要方法，选快速、准确、特异性及敏感性强的诊断方法，是当前研究的主要热点问题。
【关键词】梅毒检测方法螺旋体分7个属，其中3个属能引起人类的疾病，分别为密螺旋体，疏螺旋体和钩端体。
密螺旋体有三个亚种（1a,1b,1c）1a苍白螺旋体 (subsp.pallidum)即梅毒螺旋体［1］。
引起严重的性传播疾病梅毒的病原体。
1.梅毒螺旋体检查1.1暗视野显微镜检查（D-F），不用染色，在暗视野下观察其形态和活动方式，是一种快速直接方法，但对取材要求高，还要注意操作方法的使用和结果的正确解释［2］其敏感性很低，但特异性高，阳性可早期作出诊断。
1.2 Fontana镀银染色法，可将螺旋体染成棕褐色，在光镜下易于查见。
但与类似梅毒螺旋体的其他物质容易混淆。
1.3 免疫荧光染色法（IFA法），用抗梅毒螺旋体抗血清或单身克隆抗体加非致病性螺旋体培养物进行吸收，再与异硫氰酸荧光素结合（FITC）用此方法来染梅毒螺旋体，在荧光显微镜下观察到绿色荧光螺旋体为阳性［3］。
其优点是区分梅毒螺旋体与其他条件致病性螺旋体。
1.4 家兔感染试验（Rabit Infection Test,RIT）是利用家兔对梅螺旋体注射愧不敢当未成年新西兰白兔睾丸内观察有无感染迹象，但是繁殖慢约30小时才能分裂一次［4］，因此RIT检查时间长，而且费用也高，不适合临床应用，仅适用于科研。
1.5 PCR法是较新的方法，现大多数实验室多采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）。
FQ-PCR是一种采用PCR结合荧光探针的体外DNA扩增和检测技术；FQ-PCR除了定量准确、有较高的灵敏度和特异性外，还能实时监测并显示PCR的扩增过程，采用封闭的反应系统，有效地降低了实验室污染所造成的假阳性。
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准诊断标准概述梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病。
实验室诊断是梅毒早期诊断的关键步骤之一。
本文将详细介绍梅毒实验室诊断的标准及相关内容。
血清学检测血清学检测方法在梅毒的实验室诊断中，血清学检测是常用的方法之一。
常见的血清学检测方法包括： 1. 血清梅毒螺旋体特异性抗体检测 2. 血清非特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测梅毒螺旋体特异性抗体检测通常采用补体结合试验（RPR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法。
下面是具体的测试步骤： 1. 准备被测血清和梅毒螺旋体抗原。
2. 将被测血清与梅毒螺旋体抗原混合，并孵育一段时间。
3. 使用特异性试剂与抗原抗体复合物反应。
4. 观察反应结果，通常采用N样本与P样本比较的方法判断阳性与阴性。
非特异性抗体检测非特异性抗体检测包括补体结合试验（RPR）、荧光螺旋体抗体试验（FTA-ABS）等。
这些方法的测试步骤与梅毒螺旋体特异性抗体检测类似，只是检测的抗体种类不同。
碳诺林试验碳诺林试验也是梅毒实验室诊断中常用的方法之一。
这个方法的基本原理是将患者的血清与含有碳诺林颗粒的载玻片接触，通过观察颗粒聚集情况来诊断患者是否感染了梅毒。
其他实验室诊断方法除了血清学检测和碳诺林试验，还有其他实验室诊断方法可用于梅毒的诊断，例如PCR检测、组织培养等。
这些方法在梅毒的早期诊断、治疗及追踪感染情况方面发挥重要作用。
结语梅毒实验室诊断标准是梅毒诊断过程中的关键环节，其中血清学检测和碳诺林试验是常用的方法。
随着技术的不断进步，其他实验室诊断方法也越来越重要。
有关实验室诊断标准的研究仍在进行中，希望未来能有更准确、灵敏的诊断方法出现，为梅毒的早期诊断和治疗提供更好的支持。
梅毒实验室诊断标准
梅毒实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其临床表现多种多样，因此需要依靠实验室检测来进行确诊。
梅毒实验室诊断标准是指在临床诊断中，通过实验室检测方法来确定患者是否感染了梅毒。
本文将介绍梅毒实验室诊断的标准和方法，以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒患者。
1. 血清学检测。
梅毒的血清学检测是目前最常用的实验室诊断方法之一。
常见的血清学检测包括梅毒螺旋体抗体检测和非梅毒螺旋体抗体检测。
梅毒螺旋体抗体检测主要包括梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测，其中梅毒螺旋体特异抗体检测包括梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（MHA-TP）和梅毒螺旋体血清凝集试验（FTA-ABS）等。
非梅毒螺旋体抗体检测则包括非梅毒螺旋体特异抗体检测和非特异抗体检测，如梅毒螺旋体抗原检测和梅毒螺旋体DNA检测等。
2. 直接检测。
除了血清学检测外，梅毒的直接检测也是一种重要的实验室诊断方法。
直接检测包括梅毒螺旋体的显微镜检查、组织培养和核酸检测等。
其中，梅毒螺旋体的显微镜检查是通过显微镜观察患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体，是一种直接而快速的诊断方法。
组织培养则是将患者体液或病变组织进行培养，以寻找梅毒螺旋体的生长。
核酸检测则是通过PCR等方法检测患者体液或病变组织中的梅毒螺旋体DNA，是一种高度敏感和特异的检测方法。
3. 其他检测方法。
除了上述的血清学检测和直接检测外，还有一些其他的实验室诊断方法可用于梅毒的诊断，如梅毒螺旋体的免疫组化检测、蛋白质多肽检测和生物传感器检测等。
这些方法在梅毒的诊断中起着一定的辅助作用，可以提高诊断的准确性和灵敏度。
总结。
梅毒实验室诊断标准是通过血清学检测、直接检测和其他检测方法来确定患者是否感染了梅毒。
这些实验室诊断方法各有优势和局限性，临床医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果综合判断，以提高梅毒的诊断准确性和治疗效果。
希望本文对临床医生在梅毒的实验室诊断方面有所帮助，提高对梅毒的诊断和治疗水平。
梅毒的实验室检查与技术规范
梅毒的实验室检查与技术规范概述梅毒（syphilis）是一种由螺旋体梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。
梅毒的及时检测和确诊对于治疗及防止梅毒的传播至关重要。
本文将探讨梅毒的实验室检查方法和相关的技术规范。
实验室检查方法血清学检测血清学检测是梅毒的首选检测方法，常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体凝集试验（non-treponemal tests）和梅毒螺旋体特异性试验（treponemal tests）。
非梅毒螺旋体凝集试验包括梅毒螺旋体血清检测（VDRL）和荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）。
这些试验通过检测抗体反应来判断是否感染梅毒，并可评估感染程度。
梅毒螺旋体特异性试验主要包括T. pallidum颗粒凝集试验（TP-PA）和ELISA试验。
这些试验可以进一步证实梅毒感染，并对阳性样本进行确认。
分子生物学检测分子生物学检测方法可以直接检测梅毒螺旋体的基因组或其特异性基因片段。
常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应（PCR）和DNA杂交试验。
PCR技术可在早期感染时检测到梅毒螺旋体的DNA，具有高度敏感性和特异性。
DNA杂交试验主要用于检测神经梅毒，可检测到T. pallidum在脑脊髓液中的存在。
细菌学检测细菌学检测是直接观察样本中是否存在活动的梅毒螺旋体。
常用的细菌学检测方法有暗视野显微镜检查、苏木精-伊红染色和螺旋体培养。
在显微镜下观察暗视野试验时，活动的梅毒螺旋体会显示出旋转的运动。
苏木精-伊红染色可以染出梅毒螺旋体的形态。
螺旋体培养可以将梅毒螺旋体培养出来，但是需要较长的培养周期，并且并非常规检测方法。
技术规范为确保梅毒实验室检查结果的准确性和可靠性，以下是一些常见的技术规范：1.实验室人员需接受充分的培训，熟悉各项检测方法和技术操作流程，并按照操作规程执行。
2.所有试剂和材料必须符合质量管理规范，并保持良好的保存和标识。
3.实验室必须建立完善的质量控制体系，包括使用标准品进行日常质控、参加外部质控项目以及进行内部质量评估。
梅毒检测PPT
排除梅毒感染
实验室梅毒检验结果分析
新生儿血清RPR和TPPA检测为阳性，不能 诊断为胎传梅毒。
实验室梅毒检验结果分析
胎传梅毒的实验诊断
具有下列实验室四个指标之一，可确诊为胎 传梅毒： 暗视野检查梅毒螺旋体阳性； 患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升； 患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母 亲高2个稀释度（4倍），(低于或等于该值 并不排除胎传梅毒)； 患儿检出19（s）-IgM
仪器材料
1.试剂：梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）试 剂盒（日本富士100人份），内有： “A”溶解用液； “B”血清稀释液； “C”致敏颗粒（冻干）； “D” 非致敏颗粒（冻干）； “E”阳性质控血清（液体）。
仪器材料
“C”致敏颗粒（冻干） “D” 非致敏颗粒（冻干) 试验前30分钟按说明书规定量加“A”溶液混匀。
操作步骤
加“D” 非致敏颗粒：第3孔加D液25uL，第4
孔加“C” 致敏颗粒25uL。
混合：将反应板置震荡器震荡30秒。 反应：放湿盒内，室温孵育2小时后观察结果。
结果判定：
试验结果未致敏颗粒不出现凝集者， 才可做出结果判定。如果孔内标本非致 敏和致敏颗粒均产生凝集者，标本需做 重吸收试验。
做最后确定。
实验室梅毒检验结果分析
梅毒的诊断：必须依靠病史、临床症状、实 验检查进行综合分析。
实验室检查结果对诊断梅毒起决定性意义。
实验室梅毒检验结果分析
RPR＋、 TPPA-
RPR假阳性
RPR＋、 TPPA + 现症梅毒
RPR－、 TPPA+ 既往感染，极早期梅毒
RPR－、 TPPA-
加样：吸取50ul血清(浆)分别与各圈中盐水作 稀释度后，然后涂布整个圈内。
梅毒实验室诊断(刘利洪)
暗视野检查法
临床意义 1、检测阳性，在临床上可确证梅毒； 2、如未能发现梅毒螺旋体，不能排除诊断； 3、无论暗视野显微镜检查的结果如何，都应进一步 进行血清学检测。
镀银染色检查
检测原理 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色， 可以从普通高倍显微镜下观察到梅毒螺旋体。
镀银染色检查
仪器器材 1、普通显微镜 2、加拿大树胶 3、罗吉固定液 4、鞣酸媒染剂 5、Fontana银溶液 6、无水乙醇 7、无菌纱布等取材用品
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定性试验 （1）试剂准备：复室温30分钟 （2）加标本：样本量50ul； （3）加抗原：抗原量（60±1滴/ml，约17ul/滴） （4）反应：反应时间8min （5）读取结果
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定量试验
抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴
如何就目前高发的性病，尤其是对梅毒进行有效监测 和控制？ 如何对高危人群及潜在易感人群进行筛查，主动发现 无症状的性病感染者？ 如何确定感染的病原体种类？
——需要完善的实验室检测工作，包括检测能力建设 和质量控制
性病防治工作的重点 两个系统 疫情监测系统 实验室检测系统-实验室检测能力和质量控制 一个服务 规范化医疗服务
注意：应把每一份样本当作强阳性样本来处置和对待！！
பைடு நூலகம்
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
仪器：水平旋转仪（要求？） 试剂盒： （1）含有活性碳的抗原悬液； （2）一个标定的9号针头（0.9mm）； （3）压印有18mm直径圆圈的封塑环状卡 片； （4）内部对照； 为了保证试验结果的可靠性，以及 每批试剂间的可比性，应制备外部对照 血清 （5）50ul量程移液器和吸头 （6）0.9%无菌生理盐水
梅毒的实验室诊断
梅毒的实验室诊断引言：梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(TP)感染所引起的一种慢性全身性性传播疾病，在中国，梅毒在大约50年前已经基本被消灭[1]。
同其他国家一样，近年来中国梅毒螺旋体感染的发病率呈逐年上升趋势，是目前中国主要的性传播疾病之一。
[2]。
早期主要表现为皮肤黏膜损伤，晚期将累及心血管中枢神经骨骼及眼部等重要脏器。
目前为了控制梅毒的医院感染，现已规定凡是手术、输血( 供、受血者) 及各种创伤性检查的患者，均进行梅毒螺旋体的相关血清学检查。
[3]一，梅毒螺旋体梅毒的病原体为梅毒螺旋体苍白密螺旋体苍白亚种，属于螺旋体体目、螺旋体科、密螺旋体属。
本属包括４种人的病原体和至少６种对人不致病的密螺旋体［4］。
其形态呈柔软纤细的螺旋状，体长６～２０μｍ，宽０．１５～０．２５μｍ，螺旋有８～２０个，运动特征为弯曲移动、绕轴转动和前后伸缩运动［5］。
其外膜厚４６ｎｍ，具有抗原性，抗外膜抗体在补体参与的条件下能杀灭梅毒螺旋体或使梅毒螺旋体制动。
梅毒螺旋体抗原还包括特异性耐热的多糖抗原（多糖－ＲＮＡ复合物）、特异性不耐热蛋白质、非特异性心磷脂抗原和类脂抗原。
梅毒的诊断要依据患者有无疾病接触史、实验室结果、症状和体征等综合判断。
二、梅毒流行病学据世界卫生组织估测，全世界每年新发梅毒感染者大约有1200万。
近年来，在淋病等性病的发病率有所下降的情况下，各期各类梅毒在许多发达和发展中国家出现不断上升的趋势，甚至在部分人群中发生暴发现象，其中特别是男性同性性行为者。
大部分发生在那些缺少有效检测手段的国家和地区。
在发展中国家，孕妇感染梅毒是造成不良妊娠的主要原因，其中大约30%为死胎，30%左右为先天性梅毒[3]。
近年来许多国家，特别是发展中国家，先天梅毒的报告发病率不断上升，是不容忽视的公共卫生问题。
近年来，世界各地梅毒发病率呈上升趋势，我国梅毒发患者数也快速增长，据报道，２０１０年全国报告梅毒病例３５８５３４例，２０１０年发病率２６．８６／１０万，比２００９年增加１７．０２％，居全国乙类传染病的第３位。
梅毒的实验室诊断及临床应用
性 。但这些疾病的抗体滴度多较低 ， 一般＜ ：， １ 常在 ６个月 内 ８
转 为阴性 。一些 自身免 疫性疾病 ， 如系统性 红斑狼疮 、 干燥 综合征 、 盘状红斑狼疮 、 自身免 疫性 溶血性贫血 、 桥本 甲状腺 炎、 慢性 肾炎 、 麻风 、 类风 湿关 节炎 、 湿性 心脏病 、 风 系统 性 硬化征 、 醉品成瘾 ； 麻 孕妇 和老年人 ；％～ ％的一般人 群 ， １ ２ 可
增： 常采用 Ｔ 外 噤抗原设计弓 物 ， Ｐ Ｉ 检测样本中 Ｔ 。 Ｐ
Hale Waihona Puke 假 阳性 反应 ， 即生 物学假阳性 。一些感染性疾 病 ， 如麻疹 、 风 疹、 水痘 、 牛痘疹 、 病毒 性肝炎 、 上呼吸道感染 、 传染性单核细 胞增 多症 、 肺炎链球 菌肺炎 、 亚急性细菌性心 内膜炎 、 活动性
动活跃 的 Ｔ 。③镀银染色或 墨汁染色镜检 ： Ｐ 同暗视野显微镜 观察取材 ， 经镀银 染色或墨 汁染色后 ， 普通光学 显微镜 镜 用 检， 可见固定的 Ｔ 。 Ｐ ④多功能显微镜诊 断仪 ： 可直接观察 ｒ ， ｒ Ｐ 但仪器较贵 ， 以普及 。⑤直接荧光试验 ： 难 用异硫氰酸荧光素 标记 １ ’ Ｐ外膜 蛋自制备的单 克隆抗体 ，用荧光 显微镜 观察抗 原抗体复合物 ， 出现黄绿色荧光 ， 表明样本中含 ｒ 。 Ｉ ⑥基 因扩 ’ Ｐ
清学检测。 １ 梅毒病原体检测
梅毒病原体检测适宜诊断早期梅毒 ，特别是在一期梅毒 早期 ，当 ｒ ｆ Ｐ非特异性抗体和特异性抗体还 未产生或量较少
时 ， 断梅毒不可或缺 的方法 。常用 的方法如下 ： Ｔ 培 是诊 ① Ｐ
养： 虽然实验室培养可 以取得成 功 ， 但培 养条件要求较高 ， 难
梅毒实验室诊断金标准
梅毒实验室诊断金标准
梅毒是一种由螺旋体属细菌梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。
实验室诊断梅毒的金标准包括以下几种方法：
1. 直接检测：通过显微镜观察梅毒螺旋体的存在。
常用的方法包括暗视场显微镜检查（dark-field microscopy）和免疫荧光染
色（immunofluorescence staining）。
2. 血清学检测：主要包括非特异性反应和特异性反应两个层次的检测。
- 非特异性反应：通过检测体液中的非特异性抗体来提供梅
毒感染的线索。
最常用的是非梅毒螺旋体抗原卡（Non-Treponemal Antigen Test），主要有梅毒假阳性试验（Rapid Plasma Reagin，RPR）和梅毒螺旋体试验（Venereal Disease Research Laboratory，VDRL）等。
- 特异性反应：通过检测体液中的特异性抗体来确认梅毒感
染的诊断。
最常用的是梅毒螺旋体抗原检测（Treponemal Antigen Test），主要有梅毒螺旋体颗粒血清试验（Treponema Pallidum Particle Agglutination Assay，TPPA）和梅毒螺旋体酶
联免疫吸附试验（Treponema Pallidum Enzyme Immunoassay，TP-EIA）等。
这些实验室诊断方法可以互相配合，提供梅毒感染的准确诊断
结果。
综合上述的非特异性反应和特异性反应的检测结果，并结合临床表现和流行病学史，可以得出梅毒的确诊结论。
梅毒的实验室诊断
VDRL阴性（×100）
VDRL弱阳性（×100）
VDRL阳性（×100）
RPห้องสมุดไป่ตู้凝集图像
TRUST凝集图像
非特异性梅毒血清学试验（二）
非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷 1、特异性：在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、 结缔组织病、肿瘤、静脉吸毒者、老年人以及怀孕妇女中均 可出现反应素，所以此类试验有时会出现假阳性反应
非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验阳性的患者往往是梅毒现症感染 者，临床上即可开展治疗 2、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随成功的治疗而逐渐 下降，故可以作为疗效观察的指标 3、此类方法价格低廉
非特异性梅毒血清学试验（三）
测定非梅毒螺旋体抗原血清试验的滴度进行疗效观察 1、治疗成功：早期梅毒患者在治疗后6个月内症状消失且 非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度有至少4倍的下降。晚 期梅毒或隐性梅毒患者在治疗后12~24个月内非梅毒螺 旋体抗原血清试验滴度有至少4倍的下降 2、治疗失败：治疗后症状持续或重新出现；治疗后非梅毒 螺旋体抗原血清试验滴度反而上升了4倍或以上；非梅 毒螺旋体抗原血清试验初始滴度较高（1:32或以上）但 在六个月内没有达到4倍的下降。抗梅毒治疗失败的病 人应考虑合并HIV感染及神经梅毒的可能性 3、血清固定：经正规治疗后，梅毒患者非梅毒螺旋体抗原 血清试验一般都会转为阴性，但有1~3%的病人即使经 足量抗梅治疗，非梅毒螺旋体抗原血清试验滴度仍持续 呈低滴度阳性，这种现象称为血清固定，其原因尚不明 了。血清固定患者的滴度重又上升则提示再次感染梅毒
TPHA凝集图像
特异性梅毒血清学试验（四）
梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA） 原理： TPPA的原理与TPHA基本相同，但它以人工合 成的惰性明胶颗粒代替TPHA中的红细胞作为载 体，是TPHA的升级产品 优点： 1、试剂稳定，批间差小 2、结果判读更为清晰明确 3、敏感性和特异性较TPHA进一步提高 不足：结果判定主观，较难实现自动化
梅毒的实验室诊断标准
梅毒的实验室诊断标准梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其诊断对于预防和治疗具有重要意义。
实验室诊断是梅毒诊断的重要手段之一，本文将介绍梅毒的实验室诊断标准，以帮助临床医生更准确地诊断和治疗梅毒。
一、血清学检测。
血清学检测是梅毒诊断的金标准之一。
包括非梅毒螺旋体抗体（非梅毒螺旋体特异性抗体）和梅毒螺旋体抗体（梅毒螺旋体特异性抗体）两种检测方法。
非梅毒螺旋体抗体包括非梅毒螺旋体血凝试验（Nontreponemal serologic test，如RPR试验）和梅毒螺旋体抗体包括梅毒螺旋体血凝试验（Treponemal serologic test，如TPPA试验）。
在实验室诊断中，通常要求首先进行非梅毒螺旋体抗体检测，如RPR试验，若结果阳性，则需进行梅毒螺旋体抗体检测，如TPPA试验，以确认诊断。
二、直接检测。
直接检测是指在患者临床症状出现后，通过镜检或PCR等方法直接检测患者体液中的梅毒螺旋体。
常用的直接检测方法包括血清暗视野显微镜检查、梅毒螺旋体DNA检测等。
直接检测方法能够更快速地确定患者是否感染了梅毒，对于早期感染的患者具有重要意义。
三、其他实验室检测。
除了血清学检测和直接检测外，还有一些其他实验室检测方法可辅助梅毒的诊断，如梅毒螺旋体培养、梅毒螺旋体分子生物学检测、梅毒螺旋体抗原检测等。
这些方法在实验室诊断中起着重要的辅助作用，能够提高梅毒诊断的准确性和灵敏度。
综上所述，梅毒的实验室诊断标准主要包括血清学检测、直接检测和其他实验室检测方法。
在临床实践中，医生应根据患者的临床表现和实验室检测结果，综合判断患者是否感染了梅毒，以便及时进行治疗和干预。
希望本文能够帮助临床医生更好地理解梅毒的实验室诊断标准，提高梅毒的诊断水平，为患者的健康保驾护航。
梅毒的实验室检查
梅毒血清反应的假阴性
• 1． 一期梅毒硬下疳：一般硬下疳 出现2-3周，机体才出现反应素，故 早期血清反应常呈阴性。
• 2． 感染梅毒立即治疗或晚期梅毒： 由于血清反应素低，出现阴性。
• 3． 二期梅毒假阴性；不到1%的二 期梅毒患者其未稀释的血清VDRL试 验呈阴性或弱阳性反应，而在高度 稀释后反而为阳性，即前带现象 （Prozone phenomenon），这是血 清中抗心磷脂抗体过多，抑制阳性 反应的结果。 • 4． 技术操作或抗原敏感性低出现 血清试验阴性。
• TP-ELISA利用酶的放大系统，提高 了检测灵敏度，甚至可以比TPPA能 更早地检测出梅毒螺旋体特异性抗 体。在梅毒螺旋体特异性抗体和非 特异性抗体中，特异性IgM抗体最早 出现，感染梅毒螺旋体后，机体启 动体液免疫即可产生；抗心磷脂抗 体是当组织被破坏释放心磷脂后才 产生。
• 梅毒螺旋体特异性IgG抗体出现时间 较晚，可终身存在，因此，TPELISA或TPPA阳性无法判断是初次感 染还是既往感染。抗心磷脂抗体可 在梅毒治愈后消失，用TRUST能判断 是新近感染还是既往感染。
• 感染梅毒后，心磷脂抗体出现晚于 特异性螺旋体抗体，晚期梅毒时此 类抗体又部分转阴。有报道，三期 梅毒病人非梅毒螺旋体抗原试验仅 有71%仍为阳性，而梅毒螺旋体抗体 检测几乎均为阳性。 • 因此，非梅毒螺旋体抗原试验不适 于诊断一、三期梅毒，潜伏期梅毒 也不敏感，而且有急慢性的生物学 假阳性和假阴性反应。
• 血清学试验用作先天性梅毒的辅助诊 断，其首要问题是将无症状感染婴儿 从非感染婴儿区别开来，这些婴儿的 母亲梅毒血清试验阳性，困难在于不 能将母亲体液免疫反应同婴儿的抗体 反应相区别，因为母亲的IgG可传递 给胎儿。另外由于IgG终身存在，所 以很难评价治疗结果。血清学诊断常 常又存在着假阳性。
梅毒螺旋体的几种实验室检测方法
梅毒螺旋体的几种实验室检测方法摘要] 梅毒是一种严重危害人类健康的性传播疾病，临床上主要依靠实验室检测进行诊断。
当前，有多种实验室检测方法被使用。
本文主要对直接检测法、血清学检测法及PCR检测法进行综述。
[关键词] 梅毒；检测方法；血清学；分子生物学梅毒（Syphilis）是由苍白螺旋体（又称为梅毒螺旋体）引起的慢性、系统性性传播疾病。
它主要通过性途径传播，临床上表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒（胎传梅毒）等[1]。
本文综述了目前应用于梅毒实验室检测的三类方法，一是病原体直接检测，二是血清学方法，三是分子生物学技术。
1. 病原体直接检测梅毒螺旋体直接检测适用于一期梅毒。
一期梅毒仅在接触部位发病，主要表现为皮肤黏膜的损害，标志性特征为硬下疳。
此时血清中抗原抗体还未达到可测水平，因此梅毒螺旋体检测对梅毒的早期诊断尤为重要。
1.1 暗视野显微镜检查（DFM）可直接观察病灶分泌物中的梅毒螺旋体，是诊断早期梅毒的主要方法。
用暗视野显微镜观察，可根据典型的形态、大小和运动方式，结合临床症状进行诊断，特异性较高。
但由于病程、取材、实验人员计术水平等多种因素的影响，敏感性较低。
1.2 镀银染色法（Warthin-starry）由于梅毒螺旋体具有亲银性，镀银染色法能将梅毒螺旋体染成棕褐色或黑褐色，形态清晰易辨，且标本可永久保存。
缺点是镀银染液需新鲜配制，且存在其他类似的干扰物质，故临床应用较少。
1.3 直接免疫荧光抗体染色（DFAT）用荧光素标记的抗梅毒螺旋体抗体直接染色标本，利用抗原抗体特异性反应，通过暗视野显微镜观察，从免疫学和形态学两方面检测梅毒螺旋体，敏感性和特异性均较高。
但同时，对显微镜设备和技术条件要求也较高，目前还没有被实验室广泛使用。
1.4 多功能显微镜诊断仪（MDI）是美国科学家布拉德福博士历经20年发明的一种屏幕线性放大40-20000倍的高清晰度显微镜，集现代光学、光电学、电子学、医学影像和多媒体计算机技术于一体的医学显微设备。
梅毒实验室诊断方法
梅毒实文验档素材室诊断梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。
一、显微镜检查法〔一〕暗视野显微镜检查【根本原理】梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可依据其特别形态和运动方法进行检测。
【仪器材料】1．暗视野显微镜。
2．钝刀〔刮勺〕、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。
【标本采集】1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损外表的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。
2.淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2〜3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。
【操作步骤】1.加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。
2.聚光：将标本玻片置载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。
3.镜检：在镜下观察，寻觅有特征形态和运动方法的梅毒螺旋体。
【结果判读】梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5〜20p m，直径小于0.2p m，有6〜12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方法。
暗视野显微镜下发觉有上述特征的螺旋体为阳性结果。
【结果汇报】1.阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。
2.阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。
【临床意义】1.暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。
2.螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备工程之一。
3.如未见到梅毒螺旋体，并不能排解患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。
【考前须知】1.取材时尽量防止出血，以免影响镜下观察。
2.取材后应马上置暗视野显微镜下观察。
3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。
〔二〕镀银染色检查【根本原理】梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。
【仪器材料】1.显微镜。
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梅毒实验室诊断梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。
一、显微镜检查法（一）暗视野显微镜检查【基本原理】梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。
【仪器材料】1．暗视野显微镜。
2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。
【标本采集】1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。
2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。
【操作步骤】1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。
2．聚光：将标本玻片置载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。
3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。
【结果判读】【结果报告】1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。
【临床意义】1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。
2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。
3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。
【注意事项】1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。
2.取材后应立即置暗视野显微镜下观察。
3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。
（二）镀银染色检查【基本原理】梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。
【仪器材料】1．显微镜。
2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。
【标本采集】1. 皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液涂片。
2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上。
【操作步骤】1．涂片干燥：将标本涂于干净载玻片作一薄片，于空气中自然干燥。
2．固定：用固定液将涂片固定2～3分钟。
3．洗涤：用无水乙醇洗涤玻片上的油污。
4．媒染：加媒染剂于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。
5．银染：水洗，加银染液于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。
6．镜检：水洗、待干，用油镜检查。
【结果判读】显微镜下见到染成棕褐色的梅毒螺旋体为阳性结果。
【结果报告】1．阳性：见到染成棕褐色梅毒螺旋体。
2．阴性：未见到染成棕褐色的梅毒螺旋体。
【临床意义】同暗视野显微镜检查法。
【注意事项】应注意与其他螺旋体加以鉴别。
二、血清学检测法（一）非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验，包括性病研究实验室（VDRL）试验、快速血浆反应素（RPR）环状卡片试验、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等。
VDRL试验【基本原理】梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体（反应素），与一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物抗原反应，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。
【仪器材料】1. 水平旋转仪、显微镜。
2. 试剂盒：VDRL抗原原液、VDRL缓冲液、抗原滴管及针头、带直径14mm 漆圈的玻璃反应板、VDRL试验结果参照图片。
3. 30mL平底玻璃小瓶、生理盐水。
【标本采集】1.血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。
也可采用冻存的血清。
2.脑脊液：采用腰椎穿刺术获得，应由相关专业人员操作。
【操作步骤】1.VDRL抗原配制。
2.VDRL玻片定性试验（1）灭活：血清标本56℃灭活30分钟。
（2）吸样：吸取血清放入反应板圈中，将血清涂布到整个圈内。
（3）加抗原：用标准针头加入1滴抗原。
（4）反应：将反应板置水平旋转仪上旋转4分钟，〔(180±5)次/分钟〕，立即置低倍显微镜下观察。
定量试验（1）加稀释液：在圈内加入生理盐水（根据需要确定稀释度）。
（2）样本稀释：吸取样本与各圈中盐水作系列稀释并涂布整个圈内。
（3）以下步骤同定性试验（2）～（4）。
【结果判读】凝集反应强度分级：3＋～ 4＋：大的或中等大小的絮状物，液体清亮2＋：絮状物较小，液体较清亮1＋：絮状物较小，均匀分布，液体混浊±：抗原复合物颗粒稍粗－：抗原颗粒均匀、细小【结果报告】1．定性试验：（1）阳性：镜下可见1＋～4＋的絮状凝集物。
（2）阴性：不产生凝集反应。
2．定量试验：滴度：镜下可见絮状凝集物的血清最高稀释倍数。
【临床意义】对一期、二期、潜伏期和晚期梅毒患者的敏感性分别为78%、100%、96%和71%。
脑脊液VDRL阳性对神经梅毒有诊断意义。
【注意事项】1．VDRL用抗原需当天配制。
2．试验反应完毕，应立即观察结果。
RPR试验【基本原理】RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。
该法在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭颗粒，与待检血清（浆）中的反应素结合，形成肉眼可见的黑色絮状物。
【仪器材料】1．水平旋转仪。
2．RPR试剂盒：RPR抗原、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原滴管、针头。
【标本采集】1．血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。
也可采用冻存的血清。
2．血浆：各种抗凝剂制备的血浆。
【操作步骤】1．定性试验（1）加样：吸取血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内。
（2）加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头[每毫升（60±1）滴]加1滴抗原。
（3）反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟[（100±5）转/分钟]。
立即在亮光下观察结果。
2．定量试验（1）稀释液准备：在圈内加入生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。
（2）加样：吸取血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。
（3）同定性试验（2）～（4）。
【结果判读】凝集反应强度分级：3＋～ 4＋：圆圈内出现中到大的黑色絮状物，液体清亮2＋：圆圈内出现小到中的黑色絮状物，液体较清亮1＋：圆圈内出现小的黑色絮状物，液体混浊－：圆圈内仅见碳颗粒集于中央一点或均匀分散【结果报告】1．定性试验：（1）阳性：出现1＋～4＋强度的凝集反应。
（2）阴性：不产生凝集反应。
2．定量试验：滴度：出现凝集反应的血清最高稀释倍数。
【临床意义】1．RPR试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查。
2．对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为86%、100%和98%。
【注意事项】试验应在23～29℃环境中进行。
TRUST试验TRUST试验是用甲苯胺红颗粒代替RPR试验中的碳颗粒作为指示物，所以阳性结果为红色絮状物。
其基本原理、仪器材料、标本采集、操作步骤、结果判读、结果报告、临床意义及注意事项等与RPR试验基本相同。
（二）梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验是以梅毒螺旋体为抗原的特异性的抗原抗体反应，用以检测梅毒抗体，常用的方法有梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB）等方法。
TPPA试验【基本原理】TPPA试验是用超声裂解梅毒螺旋体制备的抗原，致敏明胶粒子，其致敏粒子与待检血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集。
【仪器材料】1. 微量震荡器。
2. 试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。
3．U型反应板。
【标本采集】同RPR试验。
【操作步骤】1．试剂准备：试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。
2．加稀释液：每份样本做4孔，加B液至反应孔内，第1孔100μL，第2～4孔各25μL。
3．样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后取25μL至第2孔，连续倍比稀释至第4孔，最后1孔混匀后弃去25μL。
4．加对照液：第3孔加D液25μL，第4孔加C液25μL。
5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。
6．反应：置湿盒内，孵育2小时后，或放4℃冰箱过夜观察结果。
【结果判读】观察凝集反应强度，分级如下：4＋：粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠3＋：粒子光滑覆盖大部分孔底2＋：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环1＋：粒子光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显细胞环±：粒子沉集孔底，中央形成一小点－：粒子紧密沉积孔底中央【结果报告】1．阳性：未致敏粒子不出现凝集（第3孔），血清1︰80以上稀释与致敏粒子产生1＋～4＋凝集反应。
2. 阴性：未致敏粒子和致敏粒子均不产生凝集反应。
【临床意义】1. TPPA可作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。
2．梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA试验仍可阳性，故TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。
3．TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
【注意事项】1. 试验结果为“可疑”时，应选用其他的试验方法进行复验。
2. 如未致敏粒子出现凝集反应，样本进行吸收后再进行试验，或改用其他试验方法。
TPHA试验【基本原理】TPHA试验用超声裂解的梅毒螺旋体菌体为抗原，致敏经醛化、鞣化的羊或禽类红细胞，与抗梅毒螺旋体抗体反应，产生肉眼可见的抗原抗体凝集。
【仪器材料】1. 微量震荡器。
2．TPHA试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。
3. U型反应板。
【标本采集】同RPR试验。
【操作步骤】1．试剂准备：试验前试剂恢复到15～25℃。
2．加稀释液：加B液至反应板，第1孔25?L，第2孔100?L，第3～5孔各加25?L。
3．样本稀释：取血清25?L加至第1孔，混匀后取25?L至第2孔，混匀后取25?L至第3孔，混匀后弃去25?L，再从第2孔取25?L至第4孔，混匀后取25?L至第5孔，混匀后弃去25?L。
4．加对照液：第3孔加D液（未致敏细胞）75μL，第4、5孔加C液（致敏细胞）各75?L 。
5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。
6．反应：置湿盒内，15～25℃孵育4小时，或放4℃冰箱过夜观察结果。
【结果判读】同TPPA试验。
【结果报告】同TPPA试验。
【临床意义】同TPPA试验。
【注意事项】有些采用禽类红细胞为载体的TPHA试验，血清不用吸收，可直接进行试验。
FTA-ABS试验【基本原理】以完整的梅毒螺旋体作为抗原，与经吸收剂吸收的梅毒血清抗体反应形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FITC）标记的抗人免疫球蛋白，形成带有荧光的抗原抗体复合物，在荧光显微镜下螺旋体显出苹果绿色荧光。
【仪器材料】1．荧光显微镜。
2．试剂盒：梅毒螺旋体抗原片、吸收剂、荧光素标记抗体、阳性对照血清、PBS缓冲液、固定剂。