高效毛细管电泳法--原理
第五章 高效毛细管电泳和电动色谱
1.40 1.60 1.80 2.00 t/min 2.20 2.40 2.60 2.80
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3Leabharlann 101三、毛细管凝胶电泳
毛细管凝胶电泳 CGE）：按照试样中各个组 分相对分子质量的大小进行分离的方法。 用途：常用于蛋白质、寡聚核苷酸、核糖核 酸、DNA片段的分离和测序及聚合酶链反应产 物的分析。CGE能达到CE中最高的柱效。
• 毛细管等电聚焦是基于不同蛋白质或多肽之 间等电点的差异进行分离的电泳技术。 • 毛细管等电聚焦最具特色的应用是测定蛋白 质的等电点。在异构酶鉴定、单克隆抗体、 多克隆抗体、血红蛋白亚基等研究中，经常 用毛细管等电聚焦。
五、亲和毛细管电泳
亲和毛细管电泳是利用配体与受体之间存在特异性 相互作用，可以形成具有不同荷-质比的配合物而达 到分离目的。
梯度升压方式对毛细管电泳分离的影响 A. 2kV至25kV，0min，一步升压；B.2kV至25kV，5min，线性梯度 升压. 样品：β-乳球蛋白A，溶菌酶，细胞色素C，肌红蛋白，微白蛋白
二、毛细管及其温度控制
毛细管电泳柱作为分离分析的载体，其材料、 形状、内径、柱长、温度对分离度和重现性都 有影响。
缓冲液中加入添加剂，并让缓冲液与毛 细管充分平衡.如加入阳离子表面活性剂 十四烷基三甲基溴化铵(tetradecyl trimethyl ammonium bromide ,TTAB)， 能在内壁形成物理吸附层，使EOF反向. 添加剂还有聚乙烯亚胺、甲基纤维素 (MC)、十六烷基溴化铵(CTAB)等。
毛细管电泳-紫外检测法测定
用于清洗毛细管，防止 样品残留。
标记物
用于增强样品在紫外检 测器中的信号，提高检
测灵敏度。
实验设备
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
01
02
03
04
毛细管电泳仪
用于分离样品中的各组分，具 有高分辨率和高灵敏度。
紫外检测器
用于检测样品中特定组分的紫 外吸收光谱，从而确定组分的
性质和浓度。
洗脱泵
用于提供洗脱液，清洗毛细管 内的残留物。
毛细管电泳-紫外检测法的优缺点
高分离效率
毛细管电泳具有高柱效和低扩散 系数，能够实现高效分离。
微量样品需求
只需少量样品即可完成分析，适 用于珍贵样品的分析。
毛细管电泳-紫外检测法的优缺点
快速分析
分析时间短，适合高通量分析。
多种检测模式
可结合多种检测器，如紫外、荧光、质谱等，实现多组分同时检测。
毛细管电泳-紫外检测法的优缺点
图表展示
通过柱状图、折线图等形式展示实验结果，便于直观地比较不同样品之间的差异 。
结果分析
吸光度分析
根据实验数据，分析各样品在检测波长下的吸光度，探讨吸 光度与样品浓度之间的关系。
分离效果评估
对毛细管电泳分离后的各组分进行紫外检测，分析分离效果 ，包括峰形、分离度等。
结果比较与讨论
1 2 3
不同样品比较
05
结论
研究成果总结
毛细管电泳-紫外检测法是一种 高效、灵敏的分离分析方法， 适用于多种化合物的分离和检
测。
在本实验中，成功分离和检测 了多种目标化合物，包括有机 酸、氨基酸、肽类和蛋白质等
。
该方法具有较高的分离效率和 灵敏度，能够满足实际应用的 需求。
说明毛细管电泳特点及应用
说明毛细管电泳特点及应用
毛细管电泳是一种高效液相色谱技术，其基本原理是利用电场将带电粒子在毛细管中的移动速率和荷电量的差异进行分离和富集。
毛细管电泳具有高分离效率、快速分离、小量样品、自动化程度高等特点，已经成为了化学、生物、环境学等领域的一个重要分析工具。
其主要应用领域和特点如下：
1.分离生化分子
毛细管电泳可以用于分离和富集DNA、RNA、蛋白质、糖类和小分子有机物等生物分子。
这些生物分子在酸碱性、水解、氧化还原等条件下有不同的化学性质和电荷性质，可以被毛细管电泳技术精确分离和定量。
例如在DNA分离和定量方面，毛细管电泳已经成为PCR扩增产物检测、基因测序、DNA指纹鉴定等分子生物学技术中的重要手段。
2.分析环境污染物
毛细管电泳可以用于环境监测和食品安全检测等领域，可以对水、空气、土壤和食品中的有机和无机污染物进行快速准确定量分析。
例如利用毛细管电泳技术可以分析环境中的氨、硝酸盐、荧光增白剂、PESTICIDE 等有害物质含量，以及酒类中的苯甲酸、乙酸等有害物质。
3.分析药品和代谢产物
毛细管电泳可以快速、灵敏地分离和鉴定药品和代谢产物，具有药动学和毒理学研究的重要意义。
毛细管电泳技术节省反应时间，减少实验操作时间，可对液-液、液-固、固-液等反应进行分离和分析，得到精确的数据和结果。
如利用毛细管电泳技术，可以分析身体内的有机酸、氨基酸、代谢产物等物质。
总之，毛细管电泳技术在化学分析和生物分析中均有广泛应用，且已成为学术研究和工业生产的一种重要分离分析手段。
毛细管电泳测序原理
毛细管电泳测序原理毛细管电泳测序是一种基于DNA片段长度差异的测序技术，其原理是利用毛细管电泳分离DNA片段，并根据片段移动速度的差异确定序列信息。
首先，需要通过PCR扩增得到目标DNA片段。
PCR是一种体外DNA扩增技术，通过DNA聚合酶的作用，将目标DNA序列扩增至足够数量，以便进行下一步的测序分析。
接下来，将PCR产物加入到含有聚合物的毛细管内，并施加电场。
在电场的作用下，DNA片段会被吸附在毛细管内壁上，并形成一个移动带。
然后，施加电场，并在毛细管两端连接电源，使得电场通过毛细管内的DNA移动带。
不同长度的DNA片段根据其分子量不同，会以不同的速度移动，分离出DNA片段。
在这个过程中，由于DNA片段的质荷比不同，所以在电泳过程中会出现DNA 片段的离子机流效应。
DNA片段的离子机流速度与其质量成反比，因此，越长的DNA片段离子机流速度越慢。
当DNA片段离子机流速度相等时，移动速度以及移动距离的大小就取决于DNA 片段的长度。
因此，通过观察移动带的长度，可以确定DNA片段的长度信息。
为了准确测序，通常还需要将目标DNA分成四份，并分别加入四种带有荧光标记的特异性引物。
这些引物会与目标DNA片段互补配对，并在DNA扩增过程中，序列确定位置为反应产物的末端，引物上的荧光标记用于定位。
接下来，将四种标记的引物混合加入PCR反应混合液中，并进行PCR扩增。
在扩增过程中，引物会进行无模板扩增，因此会得到四种不同长度的扩增产物。
随后，将PCR产物经过毛细管电泳分离，根据DNA片段长度的差异，可以将这些扩增产物分离开来，并观察每一带的荧光信号的顺序。
通过分析荧光信号的顺序，可以得到DNA序列的信息。
由于每一个碱基都分别用不同的荧光色标标记，因此可以通过观察荧光信号的顺序获取DNA序列。
毛细管电泳测序的优点是测序速度快、准确度高，可以同时进行多个样品的测序。
毛细管电泳测序仪器相对简单，操作方便，适用于中小型实验室。
毛细管电泳仪的原理
毛细管电泳仪的原理
毛细管电泳仪（capillary electrophoresis，CE）是一种电泳技术，它利用电场对生物分子进行分离和分析。
它是由美国科学家 A.J.P. Martin在20世纪80年代中期发展而来的，已被广泛应用于生物化学，分子生物学，分析化学，环境科学，药物学和其他科学领域。
毛细管电泳仪的基本原理是将样品放入毛细管中，然后把毛细管放置在一个电极板上，当电极板上的电极产生电场时，样品就会沿着电场线移动并分离。
毛细管的直径很小，介质的库仑数也比较低，这就使得电泳过程中离子的移动更快，分离效率更高。
毛细管电泳仪还具有众多优点，比如快速、灵敏、准确、简单等。
它能够实现快速、灵敏的分离，分离效率高达99.5%；它可以分离各种大小的生物分子，甚至可以分离蛋白质；它能够检测和分析复杂的样品；它也可以分析有机溶剂中的有机酸，如乙酸和丙酸；它还可以分析有机物的各种复杂分子，如芳烃和芳香族烃。
由于毛细管电泳仪的优势，它在医学、科学研究等领域得到了广泛的应用，在诊断疾病，研究蛋白质，检测抗体等方面都取得了巨大的成功。
它是一种高效、灵敏、准确的技术，也是一种经济而又可靠的方式，能够实现高通量的分析。
毛细管电泳原理
纳米材料
纳米材料具有独特的物理和化学性 质，在毛细管电泳中可提高检测灵 敏度和分离性能。
生物材料
利用生物活性物质如蛋白质、酶等 作为分离介质，实现生物分子间的 分离和检测。
新型分离模式的开发
多维分离
将多种分离模式结合，实现复杂样品的高效分离。
反相毛细管电泳
采用反相介质作为分离介质，实现对极性分子的分离。
亲和毛细管电泳
利用生物分子间的特异性亲和力进行分离和检测。
微型化与集成化的发展趋势
微型化
减小设备体积，提高分析速度和降低试剂消耗。
集成化
将多个分离步骤集成在一个系统中，实现全自动化分析。
微流控芯片
将毛细管电泳与微流控技术相结合，实现高效、快速和便携的分 析。
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检测技术
紫外可见光谱检测
电化学检测
紫外可见光谱检测是毛细管电泳中最 常用的检测方法之一。该方法通过检 测样品在紫外可见光下的吸收光谱来 进行分析。
电化学检测利用电极反应来测量样品 中的离子或分子。该方法具有高选择 性、高灵敏度和低背景干扰等优点。
荧光检测
荧光检测具有高灵敏度和高选择性， 因此在毛细管电泳中也被广泛应用。 该方法通过测量样品在特定波长下的 荧光强度来进行分析。
选择合适的毛细管电泳实验条 件，如分离电压、电解质浓度 和pH值等，可以提高分析准 确性和灵敏度。
通过优化进样方式和洗脱液的 组成和浓度，可以改善实验条 件。
实验条件的标准化和规范化也 是毛细管电泳改进的重要方向 之一。
06
毛细管电泳研究前沿与展 望
新材料在毛细管电泳中的应用
高分子材料
利用高分子材料作为毛细管电泳 的分离介质，提高分离效率和分
高效毛细管电泳法原理
毛细管区带电泳（CZE）
CZE又称毛细管自由电泳，是毛细管电泳中最基本、应用最普遍的一种模式。它在毛细管中 仅填充缓冲液，基于溶质组分在电场中的迁移速度不同而分离。前述的基本原理即是CZE 的基本原理。
毛细管胶束电动色谱（MECC）
毛细管胶束电动色谱是电泳技术和色谱技术巧妙结合的分离新技术，也是毛细管电泳中唯 一能同时分离中性物质和离子型物质的分离模式。
简称毛细管电泳（Capillary Electrophoresis，CE），指以高压电场为驱动力，以毛细管为 分离通道，依据样品中各组分之间淌度和（或）分配行为上的差异而实现分离的一种液相分 配技术。CE是经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物。
基本装置
CE 的基本装置包括一个高压支流电源、一根毛细管、一个检测器及两个供毛细管两端插入 而又可和电源相连的缓冲液贮瓶。
高效毛细管电泳
高效毛细管电泳相对于经典电泳在技术上采取了两项重要改进： 一是采用了0.05mm内径的毛细管, 二是采用了高达数千伏的电压。 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大减小了温度效应，使电场电压可以很高；
电压升高，电场推动力大，又可进一步使柱径变小，柱长增加。
基本理论
在电解质溶液中，带电粒子在电场作用 下，以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移。迁 移速度为：
试中Vep为离子电泳迁移速度， μep为电泳淌度，E为电场强度, q为离子电荷量，η为介质粘度， r为离子半径。
Vep=μep ·E=
q
·E 6πηr
基本理论
CE所用的石英毛细管柱，在pH>3时，石英毛细 管壁上的硅醇基(— SiOH）在水溶液中发生电 离，产生的SiOˉ负离子使毛细管壁内表面带负 电，和溶液接触时相应的缓冲液带正电，形成 了双电层。
高效毛细管电泳法原理
高效毛细管电泳法原理
高效毛细管电泳法原理基于带电粒子在电场中运动的原理。
当一个电场被施加到一根毛细管的两端时，带电粒子会向电场的方向移动。
由于毛细管材料的特性，导致表面带有一定的电荷。
因此，带电分子和离子在电场中运动的速度受到毛细管表面电荷的影响，即被阻碍。
高效毛细管电泳法利用了这个原理，将样品通过毛细管进行分离，通过改变电场的强度、毛细管内部的流体速度等因素，使得不同粒子的迁移率随着时间而不同，从而实现对离子、分子混合物的高效、快速分离。
因此，高效毛细管电泳法在分离、检测中的应用十分广泛，如药物研发、环境监测、基因测序、蛋白质分析等。
毛细管电泳原理及分析策略CE
电源系统
电源要求
毛细管电泳仪的电源系统需要提供稳定的直流电，以保证仪器的 正常运行和实验结果的准确性。
电压调节
毛细管电泳仪的电压调节范围通常很宽，可以从几千伏到几十万伏， 以满足不同实验条件的需求。
电流控制
为了保护仪器和保证实验结果的准确性，电源系统通常需要具备电 流控制功能，能够限制电流的大小和方向。
工业废水等。
重金属离子分析
02
毛细管电泳可以用于分离和测定环境中的重金属离子，如铅、
汞、镉等。
营养物质与毒素分析
03
毛细管电泳可以用于分离和测定环境中的营养物质与毒素，如
硝酸盐、亚硝酸盐等。
04 毛细管电泳的优缺点
CHAPTER
优点
高分离效率
毛细管电泳采用微米级别的分离通道， 能够实现高分离效率，尤其适用于复 杂样品的分析。
毛细管电泳可以分为多种类型， 如自由溶液毛细管电泳、凝胶毛 细管电泳、等电聚焦毛细管电泳、
亲和毛细管电泳等。
根据检测方式分类
毛细管电泳也可以分为多种类型， 如紫外可见吸收光谱检测、荧光检 测、质谱检测等。
根据应用领域分类
毛细管电泳还可以分为临床检测、 生物分子分析、环境监测等领域。
02 毛细管电泳仪器
在药物分析中的应用
药物成分分离
毛细管电泳能够快速分离和测定药物中的有效成分和杂质。
药物代谢产物分析
毛细管电泳可以用于药物代谢产物的分离和鉴定，有助于药物代 谢动力学研究。
药物质量控制
毛细管电泳可用于药物质量控制，确保药物的有效性和安全性。
在环境监测中的应用
有机污染物分析
01
毛细管电泳可以用于分离和测定环境中的有机污染物，如农药、
毛细管电泳的基本原理及应用
毛细管电泳的基本原理及应用摘要：毛细管电泳法是以弹性石英毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。
该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。
可用于分析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等，比HPLC 分析高效、快速、微量。
关键词：毛细管电泳原理分离模式应用1概述毛细管电泳(Caillary Electrophoresis)简称CE，是一类以毛细管为分离通道，以高压直流场为驱动力的新型液相分离分析技术。
CE的历史可以追溯到1967年瑞典Hjerten最先提出在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳(Capillary Zone Electro-phoresis，CZE)。
但他没有完全克服传统电泳的弊端[1]。
现在所说的毛细管电泳(CE)是由Jorgenson和Lukacs在1981年首先提出，他们使用了75mm的毛细管柱，用荧光检测器对多种组分实现了分离。
1984年Terabe将胶束引入毛细管电泳，开创了毛细管电泳的重要分支: 胶束电动毛细管色谱(MEKC)。
1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。
同年，Cohen 发表了毛细管凝胶电泳的工作。
近年来，将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中，又发展了电色谱，扩大了电泳的应用范围。
毛细管电泳和高效液相色谱（HPLC）一样，同是液相分离技术，因此在很大程度上HPCE与HPLC可以互为补充，但是无论从效率、速度、样品用量和成本来说，毛细管电泳都显示了一定的优势毛细管电泳（C E）除了比其它色谱分离分析方法具有效率更高、速度更快、样品和试剂耗量更少、应用面同样广泛等优点外，其仪器结构也比高效液相色谱（HPLC）简单。
C E只需高压直流电源、进样装置、毛细管和检测器。
毛细管电泳具有分析速度快、分离效率高、试验成本低、消耗少、操作简便等特点，因此广泛应用于分子生物学、医学、药学、材料学以及与化学有关的化工、环保、食品、饮料等各个领域[2]。
《毛细管电泳原理》课件
分离的程度。
分辨率
02
分辨率是指毛细管电泳谱中相邻两峰之间的分离程度，分辨率
越高，分离效果越好。
检测限
03
指在毛细管电泳谱中能够检测到的最小样品浓度，检测限越低
，灵敏度越高。
定量分析
标准曲线法
通过绘制标准曲线，将毛细管电泳谱中的峰高或峰面积与样品浓度进行线性回归 分析，从而进行定量分析。
内标法
通过在样品中加入内标物，利用内标物与样品中各组分的分离度和响应因子相同 的特点，进行定量分析。
数据分析方法
峰高法
通过测量毛细管电泳谱中各组分的峰高，利用峰高与样品浓 度的线性关系进行定量分析。
峰面积法
通过积分毛细管电泳谱中各组分的峰面积，利用峰面积与样 品浓度的线性关系进行定量分析。
05
毛细管电泳的优缺点与展望
优点与缺点
高分离效能
毛细管电泳具有极高的分离效率，可 实现复杂样品的快速分离。
药物分析
毛细管电泳在药物分析中 可用于药物成分的分离和 检测，以及药物代谢产物 的分析。
食品安全
毛细管电泳可用于食品安 全检测，如食品添加剂、 农药残留等的检测。
02
毛细管电泳的仪器与实验条
件
仪器介绍
毛细管电泳仪的基本构成
检测器的选择
包括高压电源、进样系统、毛细管电 泳柱、检测器和数据采集系统等部分 。
配制电解质溶液
按照所需的浓度和比例，配制 电解质溶液。
数据处理与分析
采集实验数据，进行数据处理 和分析，得出结论。
03
毛细管电泳的分离模式与分
离机制
分离模式
毛细管区带电泳（CZE）
胶束电动色谱（MEKC）
毛细管凝胶电泳（CGE）
高效毛细管电泳法-精选文档
vep
vep ＝μepE
所以淌度不同是电泳分离的内因和前提。
7
3．有效淌度
在实际溶液中，离子活度系数、溶质分子的离解 程度和溶液的酸度等均对离子的淌度有影响，这 时的淌度称为有效淌度，用μef 表示。
ef i i ep
i
二、电渗和电渗流 1．电渗现象
当固体与液体相接触时，如果固体表面因某种原因带一 种电荷，则因静电引力使其周围液体带相反电荷，当液体两 端施加一定电压时，就会发生液体相对于固体表面的移动， 我们把这种液体相对于带电固体表面移动的现象叫做电渗。
1
第一节
毛细管电泳的特点和分类
一、电泳和色谱 毛细管电泳和色谱都是一种分离分析方法，两者比较如下： 1.分离原理 电泳是溶液中带电粒子在电场力作用下发生定向运动， 因粒子所带电荷数、形状、大小等不同，导致不同的迁移速 度而分离。色谱是不同组分在流动相的推动下，由于在固定 相流动相中的分配系数不同，导致不同的迁移速度而分离。 但某些毛细管电泳的分离模式也包含了色谱的分离机制。 2.分离过程 电泳和色谱的分离过程都是差速迁移过程，可用相同的 理论来描述。色谱中所用的一些名词概念和基本理论，如 保留值、塔板理论、速率理论等均可借用于毛细管电泳中。 3.仪器流程
11
实际电泳分析，可在实验测定相应参数后，按下式计算
L ef v os t os
Lef—毛细管有效长度； tos—电渗流标记物（中性物质） 的迁移时间。 在一般情况下，电渗流的速度是电泳速度的5～7倍。 电渗流的方向取决于毛细管内壁表面电荷的性质。 一般情况下，石英毛细管内壁表面带负电荷，则电渗流 带正电荷，向负极移动。但如果将毛细管内壁改性，比 如在在内壁表面涂渍或键合一层阳离子表面活性剂，将 使壁表面带正电荷，则电渗流带负电荷，向正极移动。
毛细管电泳在药物分析中的应用
毛细管电泳在药物分析中的应用随着药物研发和制造的进一步发展，药物分析成为保证药物质量和安全性的重要环节之一。
毛细管电泳作为一种高效、快速、高灵敏度的分析技术，逐渐应用于药物分析领域。
本文将介绍毛细管电泳在药物分析中的应用，并探讨其在药物分析中的优势和挑战。
一、毛细管电泳的原理和基本步骤毛细管电泳是利用电流作用下的毛细管中离子迁移行为实现分离的一种分析方法。
它基于毛细管中的电动流动理论，通过施加电场将药物样品带到具有特定填充物的毛细管中进行分离。
毛细管电泳的基本步骤包括：样品进样、电泳分离、检测和数据处理等。
二、毛细管电泳在药物分析中的优势1. 高分离效率：毛细管电泳具有很高的分离效率，能够有效地将复杂的药物样品分离，提高分析的准确性。
2. 速度快：毛细管电泳是一种快速分析技术，通常只需几分钟到几十分钟就可完成分析，大大缩短了分析时间。
3. 灵敏度高：毛细管电泳具有很高的灵敏度，能够检测到微量的药物成分，对于药物分析中需要极低浓度检测的情况非常有优势。
4. 样品消耗少：毛细管电泳的样品消耗非常小，对于宝贵的药物样品的分析非常适用。
5. 环境友好：毛细管电泳是一种无或少有有机溶剂的分析技术，相对于传统的高效液相色谱等技术，对环境的影响更小。
三、毛细管电泳在药物分析中的应用1. 药物成分分析：毛细管电泳可用于药物成分的分析和检测，如对药物中各种成分进行定性和定量分析。
2. 药物质量评价：毛细管电泳可用于药物质量评价，对于分析药物的纯度、杂质等方面具有重要作用。
3. 药物代谢研究：毛细管电泳能够对药物代谢产物进行分析，深入研究药物在体内的转化过程和代谢途径，为药代动力学和药效学提供有力支持。
4. 生物样品分析：毛细管电泳可用于生物样品（如血液、尿液等）中药物的定性和定量分析，为生物体内药物浓度和代谢过程的研究提供便利。
5. 法药品质控制：毛细管电泳在药品质控中的应用越来越广泛，能够对药物中的活性成分进行分析和监测，保证药物的质量和安全性。
高效毛细管电泳的理论基础
01:00:05
2.HPCE中的电渗现象与电渗流
石英毛细管柱，内充液pH>3时，表面电离成-SiO-,管 内壁带负电荷，形成双电层。
在高电场的作用下，带正电荷的溶液表面及扩散层向阴 极移动，由于这些阳离子实际上是溶剂化的，故将引起柱中
• 平流是空气水平方向的运动
01:00:05
5. HPCE中电渗流的作用
电渗流的速度约等于一般离子电泳速度的5～7倍；
各种电性离子在毛细管柱中的迁移速度为：
ν+ =ν电渗流 + ν+ef 阳离子运动方向与电渗流一致；
ν- =ν电渗流 - ν-ef 阴离子运动方向与电渗流相反；
ν0 =ν电渗流
中性粒子运动方向与电渗流一致；
q E 6π
01:00:05
二、电渗现象与电渗流
electroosmosis and electroosmotic flow
1.电渗流现象
当固体与液体接触时，固体表面由于某种原因带一种电 荷，则因静电引力使其周围液体带有相反电荷，在液-固界 面形成双电层，二者之间存在电位差。
当液体两端施加电压时， 就会发生液体相对于固体表面 的移动，这种液体相对于固体 表面的移动的现象叫电渗现象。
（2）阴离子的影响
在其他条件相同，浓度相同而阴离子不同时，毛细管中 的电流有较大差别，产生的焦耳热不同。
缓冲溶液离子强度，影响双电层的厚度、溶液黏度和工 作电流，明显影响电渗流大小。缓冲溶液离子强度增加，电 渗流下降。
01:00:05
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4. 温度的影响
毛细管内温度的升高，使溶液的黏度下降，电渗流增大。 温度变化来自于“焦耳热”；
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界面化学电化学理论
1.扩散双电层理论 电动电泳现象：
在外加电场作用下，溶胶中固液两相相对运 动；或者在外加力作用下，迫使固液两相进行 相对移动，又可以产生电势差及两相相对运动。 这两种相反的现象均与界面电势差及相对运动有 关。
固液两相产生的原因
1.固体表面从溶液有选择吸附某种离子而带电 2.固体表面上的物质粒子，在溶液发生电离。
分离原理
MECC是在缓冲液中加入表面活性剂，当 其浓度高于临界浓度时形成胶束。在电场 力的作用下，毛细管水相可看作流动相， 胶ห้องสมุดไป่ตู้相可看作“准固定相”，溶质由其在 胶束相和水相中的分配系数不同而在不同 时间流出。
仪器
特点
与HPLC相比，CE的特点是： （1）分析速度快，柱效高； （2）几乎不消耗溶剂，样品用量小； （3）前处理简单，甚至无需前处理； （4）可自由选择被分离物质的类型，使
分离原理
毛细管柱
毛细管柱是CE的核心部件，目前多为 25~75μm之间，材料为聚四氟乙烯、玻璃 和弹性石英，以石英居多。 选择细内径毛细管柱有利于最大散热，但 比表面积大，会增加溶质的吸附作用。
分离模式
毛细管电泳根据分离机理不同，具有多种 分离模式，能够提供互不相关而又互相补 充的信息。
毛细管区带电泳（CZE） 毛细管胶束电动色谱（MECC） 毛细管电泳 毛细管凝胶电泳（CGE） 毛细管等电聚焦（CIEF） 毛细管等速电泳（CITP） 毛细管电色谱（CEC）
1 具平面流型
其电渗驱动力沿毛细管均匀分布，电渗速 度的径向分布几乎是均匀的，它使整个流 体像一个“塞子”一样以均匀的速度向前 运动，不会直接引起样品组分区带扩散。
但在HPLC中，采用的压力驱动方式使柱 中流体呈抛物线型，其中心处速度是平均 速度的两倍，导致溶质区带本身扩张，引 起柱效下降，使其分离效果不如CE。
结语
综上所述，CE技术在药物分析领域已显示 出强大的实力，具有广阔的发展前景，相 信经过科学工作者的不懈努力及深入研究， CE技术将得到不断发展和完善，随着商品 化仪器的不断改进，CE将成为药物分析的 重要工具。
高效毛细管电泳
（High Performance Capillary Electrophoresis，HPCE）
简称毛细管电泳（Capillary Electrophoresis， CE），指以高压电场为驱动力，以毛细管为分离 通道，依据样品中各组分之间淌度和（或）分配 行为上的差异而实现分离的一种液相分配技术。 CE是经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的 产物。
毛细管区带电泳（CZE）
CZE又称毛细管自由电泳，是毛细管电泳 中最基本、应用最普遍的一种模式。它在 毛细管中仅填充缓冲液，基于溶质组分在 电场中的迁移速度不同而分离。前述的基 本原理即是CZE的基本原理。
毛细管胶束电动色谱（MECC）
毛细管胶束电动色谱是电泳技术和色谱 技术巧妙结合的分离新技术，也是毛细管 电泳中唯一能同时分离中性物质和离子型 物质的分离模式。
高效毛细管 电泳技术
电泳，及其电泳技术
在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在 电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相 反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。
由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移 速率不同，可实现分离。利用电泳现象对某些化 学或生物物质进行分离分析的方法和技术叫电泳 法或电泳技术。
基本理论
在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引
起流体整体朝负极方向移动，该现象称为电渗 流（electro-osmotic flow, EOF）。
电渗流速度可表示为：
Veo= μeo ·E=
εξ η
·E
其中Veo为电渗流速度，
μeo 为电渗淌度，
ξ为双电层的Zeta电位，
ε为分离介质的介电常数
电渗流的特点
基本理论
在电解质溶液中，带电粒子在电场作 用 下，以不同的速度向其所带电荷相反方 向迁移。迁移速度为：
Vep=μep ·E=
q 6πηr
·E
试中Vep为离子电泳迁移速度， μep为电泳
淌度，E为电场强度, q为离子电荷量，η为 介质粘度，r为离子半径。
基本理论
CE所用的石英毛细管 柱，在pH>3时，石英 毛细管壁上的硅醇基 (— SiOH）在水溶液 中发生电离，产生的 SiOˉ负离子使毛细管 壁内表面带负电，和 溶液接触时相应的缓 冲液带正电，形成了 双电层。
图谱清晰 （5）毛细管容易清洗，不容易产生柱污染
当然CE也存在许多不足之处： （1）灵敏度和线性范围不如HPLC （2）仅能够实现微量制备 （3）定量精密度稍低于HPLC
应用
◆ 离子分析 ◆ 体内药物分析 ◆ 中药分析 ◆ 手性拆分 ◆ 蛋白质、多肽、氨基酸分析 ◆ DNA、RNA分析 ◆ 抗生素、维生素、糖类、单细胞分析
分离原理
粒子在电解质溶液中的迁移速度等于 电泳和电渗流两种速度的矢量和,即
V=Vep+Veo=(μep + μeo ) ·E
正离子的运动方向和电渗流一致，故最先 流出；中性粒子的电泳速度为0，故其迁 移速度相当于电渗流速度；负离子的运动 方向和电渗流方向相反，但因电渗流速度 一般都大于电泳流速度，故它将在中性粒 子之后流出。这样，各种粒子因迁移速度 不同而实现了分离。
基本装置
CE 的基本装置包括一个高压支流电源、 一根毛细管、一个检测器及两个供毛细管 两端插入而又可和电源相连的缓冲液贮瓶。
高效毛细管电泳
高效毛细管电泳相对于经典电泳在技术 上采取了两项重要改进：
一是采用了0.05mm内径的毛细管, 二是采用了高达数千伏的电压。
毛细管的采用使产生的热量能够较快散 发，大大减小了温度效应，使电场电压 可以很高；电压升高，电场推动力大， 又可进一步使柱径变小，柱长增加。