血型鉴定
血型鉴定常用方法
血型鉴定常用方法血型鉴定是通过检测一个人的血液中所含有的特定抗原和抗体来确定其血型的方法。
常见的血型有A型、B型、AB型和O型,它们之间的区别主要在于红细胞表面的抗原类型。
血型鉴定的常用方法主要有以下几种:1. 血型抗体法:这是最常用的血型鉴定方法之一。
通过向待测血液中添加特定的抗血型抗体,观察是否会出现凝集反应来确定血液中所含有的抗原类型。
例如,如果待测血液凝集了A抗体,但不凝集B抗体,那么可以判断为A型血。
通过逐一测试四种抗体,即A抗体、B抗体、AB抗体和O抗体,即可确定一个人的血型。
2. 血凝法:血凝法是通过将待测血液与已知血型的抗血清混合,观察是否会发生凝集反应来确定血型。
这种方法可以用于初步判断一个人的血型,但不够精确。
3. 血型试纸法:这是一种快速、简便的血型鉴定方法。
只需将待测血液滴在特定试纸上,就可以通过试纸上的化学反应来确定血型。
试纸上通常有几种不同的抗体,当待测血液中含有与试纸上的抗体相对应的抗原时,试纸上的颜色会发生变化。
4. DNA分型法:这是一种比较高级的血型鉴定方法,通过检测人体DNA中与血型相关的基因片段来确定血型。
这种方法的精确度非常高,但需要专业的实验室设备和技术。
以上是常见的血型鉴定方法,每种方法在实际应用中都有其优缺点。
选择合适的方法取决于具体情况,如鉴定的目的、样本的数量和设备的可用性等。
无论使用哪种方法,都需要专业的技术人员进行操作,以确保鉴定结果的准确性。
血型鉴定在医学领域具有重要的意义,它不仅可以用于输血配型,还可以用于亲子鉴定、犯罪现场的鉴定等。
同时,血型也与人体健康和疾病的发生有一定的关联,例如O型血的人患有胃癌的风险较高,而AB型血的人则较易患心血管疾病。
总结来说,血型鉴定是通过检测血液中的抗原和抗体来确定血型的方法。
常用的鉴定方法包括血型抗体法、血凝法、血型试纸法和DNA分型法等,它们各有优缺点,选择合适的方法取决于具体情况。
血型鉴定在医学和法医学领域具有重要的应用价值。
血型的鉴定方法及操作全解
血型的鉴定方法及操作全解血型是指人体血液中红细胞表面的抗原特征,主要分为A、B、AB和O四种血型。
了解一个人的血型对献血、输血和婚姻等方面都有重要意义。
下面将详细介绍血型的鉴定方法及操作步骤。
一、血型鉴定的试剂1.抗A血清:含有抗A抗体,加入A型血液会凝集。
2.抗B血清:含有抗B抗体,加入B型血液会凝集。
3.抗AB血清:含有抗A和抗B抗体,加入A型、B型和AB型血液会凝集。
4.抗Rh血清(抗D血清):含有抗Rh抗体,加入Rh阳性的血液会凝集。
二、操作步骤2.涂血滴定法鉴定血型:步骤一:取一根牙签,将其浸入患者或供血者的新鲜封闭伤口、创口或皮肤直至有微量血液,然后将牙签上的血涂于三个试管中的三个凹槽中。
步骤二:加入抗A、抗B和抗Rh血清。
步骤三:用滴管分别向三个试管中加入一滴抗A血清,观察结果。
如果出现凝集反应,则表示該人的血液中有A抗原,血型为A型;如无凝集反应,则表示人的血液中无A抗原,进入下一步鉴定。
步骤四:用滴管分别向三个试管中加入一滴抗B血清,观察结果。
如果出现凝集反应,则表示該人的血液中有B抗原,血型为B型;如无凝集反应,则表示人的血液中无B抗原,进入下一步鉴定。
步骤五:用滴管分别向三个试管中加入一滴抗AB血清,观察结果。
如果出现凝集反应,则表示該人的血液中有A和B抗原,血型为AB型;如无凝集反应,则表示人的血液中无A和B抗原,进入下一步鉴定。
步骤六:用滴管分别向三个试管中加入一滴抗Rh血清,观察结果。
如果出现凝集反应,则表示該人的血液中有Rh抗原,血型为阳性(+);如无凝集反应,则表示人的血液中无Rh抗原,血型为阴性(-)。
3.精确测定法鉴定血型:步骤一:利用滴管取适量血液加入试管中。
步骤二:加入抗A血清滴定至血液凝结。
步骤三:记录滴定的比率,若比率超过1∶3,即滴入的抗A血清多于血液凝集,则表示为A型血液。
步骤四:继续加入抗B血清滴定至血液凝结。
步骤五:记录滴定的比率,若比率超过1∶3,即滴入的抗B血清多于血液凝集,则表示为B型血液。
血型鉴定方法
血型鉴定方法血型鉴定是通过检测血液中的特定抗原和抗体来确定一个人的血型。
血型鉴定对于输血、器官移植以及遗传疾病的诊断都具有重要意义。
下面将介绍几种常见的血型鉴定方法。
一、直接试剂法。
直接试剂法是一种常用的血型鉴定方法,它通过将被检测的血液与特定的抗体试剂进行反应来确定血型。
这种方法简单、快速,通常在临床实验室中使用。
直接试剂法可以准确地确定血液中的ABO血型和Rh血型,是常规输血前的必要检测项目。
二、间接试剂法。
间接试剂法是另一种常见的血型鉴定方法,它主要用于检测血浆中的抗体。
在这种方法中,实验人员将被检测的血浆与已知抗原的红细胞进行反应,从而确定血浆中的抗体种类。
通过间接试剂法可以检测出Rh血型不合的情况,对于孕妇产前筛查和输血前的交叉试验都具有重要意义。
三、分子生物学方法。
随着分子生物学技术的发展,越来越多的血型鉴定方法开始采用分子生物学技术。
例如,PCR技术可以通过扩增特定基因片段来确定一个人的血型。
这种方法不仅可以准确地确定血型,还可以检测一些罕见的血型,对于特殊病例的诊断具有重要意义。
四、流式细胞术。
流式细胞术是一种高通量的血型鉴定方法,它利用流式细胞仪对血液中的细胞进行快速、自动化的分析。
这种方法可以同时检测多种血型抗原,对于大规模的输血筛查和器官移植前的配型具有重要意义。
总结。
血型鉴定是临床医学中非常重要的一项检测项目,它对于输血、器官移植以及遗传疾病的诊断都具有重要意义。
目前,直接试剂法、间接试剂法、分子生物学方法和流式细胞术是常见的血型鉴定方法,它们各有优势,可以根据具体情况选择合适的方法进行血型鉴定。
希望本文介绍的内容对您有所帮助。
检验血型的流程
检测血型的方法一般情况下有三种,包括玻片法、试管离心法、微柱凝胶法等。
1、玻片法:
即在一张玻片上面滴入患者的血液,滴入相应的检测试剂,一种是抗A试剂,另一种抗B试剂,通过手动摇匀,被检验者如果是A型,可迅速跟抗A抗体会凝集,肉眼可以看到红细胞产生凝块,如果看的不是很清楚,可以在显微镜下直接看到红细胞凝集。
2、试管离心法:
检测材料一样,被检测的血液加入抗A或抗B试剂,通过专用的血型鉴定离心机离心好以后,试管底部如果血块沉积,可再摇动后观察,摇不散说明凝集。
如果和抗A凝集是A型,跟抗B凝集是B型,不凝集是O型,如果都凝集是AB 型。
3、微柱凝胶法:
可以在全自动仪器上操作,用凝胶介质替代环境,自动加入血清或红细胞,现在全自动血型鉴定分析仪在各大医院使用的比较常见,由于流程方便,准确性也非常高,操作简便。
血型鉴定注意事项
血型鉴定注意事项以下是 8 条血型鉴定注意事项:1. 嘿,可别小瞧血型鉴定这事儿啊!就像你去参加考试得带好文具一样,做血型鉴定前一定要核对好个人信息呀!比如你得确保名字是你的,可不是别人的哟!比如我有次去医院,医生就反复核对我的信息呢,你说重要不重要?2. 注意哦,采血的时候要放松啊!别紧张得像要上战场似的。
你想想,要是紧张得手都抖了,那还能采好血吗?上次我朋友就特别紧张,护士姐姐还一直安慰他呢。
3. 做血型鉴定的时候可别乱吃东西呀!这就好比跑步比赛前不能吃太多,不然跑不动啊。
要是吃了影响结果的东西,那不就白折腾啦!我就听说有人没注意这个,结果还得重新来一次,多麻烦呀!4. 哎呀呀,一定要配合医生的操作呀!医生让怎么做就怎么做,别自以为是乱搞一通。
就像老师上课讲题,你得跟着老师的节奏走呀,不然能学好吗?上次在医院看到有人不配合,医生都着急了呢。
5. 别忘了问清楚结果哦!你不主动问,医生可不一定主动告诉你哟!这就像你买东西得问清楚价格一样。
我每次做完检查都会马上问医生结果是啥,心里才踏实呢。
6. 不要觉得血型鉴定完就没事啦!后续也要关注一下呀。
好比你种了棵小树苗,不能种完就不管了吧,得时不时看看它长得好不好。
有次我做完血型鉴定,医生还叮嘱我要注意一些相关的事项呢。
7. 要是对结果有疑问,一定要大胆问啊!难道还怕医生吃了你不成?这就像你对一道题的答案有疑问,肯定得找老师弄清楚呀。
我就见过有人不敢问,结果一直纠结,这多傻呀!8. 千万要记得血型鉴定不是一劳永逸的哟!特别是在一些特殊情况下,可能需要重新鉴定呢。
就像你不可能一直穿同一双鞋走所有的路吧。
所以呀,该重新做的时候就得重新做,可别偷懒哦!总之,血型鉴定虽然不是什么大手术,但也得认真对待呀!可别马虎哟!。
血型鉴定实验报告结论
血型鉴定实验报告结论
实验报告结论:血型鉴定
摘要:
本实验通过血型鉴定实验,正确地确定了被测试者的血型类型。
实验结果显示,本实验者的血型为A型。
实验方法:
本实验采用抗凝血试管进行血型鉴定。
首先,需要在试管中加
入一定量的抗凝血液,以避免血液凝固。
接着,通过加入特定的
血型抗体试剂,在试管中观察是否有血型凝集。
实验结果:
本实验分别采用A、B、AB和O型血的抗体试剂进行鉴定。
在A型抗体试剂反应试管中,出现了凝集现象,而在B、AB和O 型血的试剂试管中并没有凝集现象出现。
实验结论:
本实验结果表明,被测试者的血型应为A型。
这是因为,被测试者的血液中含有A型血的表面抗原而没有B型抗原。
在加入A 型抗体试剂的试管中发生了凝集反应,但在其他试管中并未发生凝集反应,进一步确认了被测试者的血型为A型。
结语:
血型鉴定实验是一种常用的医学检验方法,能够确定一个人的血型,为医学研究和治疗提供重要的依据。
本实验通过正确的操作和分析,成功地鉴定出了被测试者的血型为A型,为日后的医学检验提供了有价值的参考。
血型的鉴定方法及操作
血型的鉴定方法及操作血型在医学和生物学中扮演着重要的角色,对于治疗疾病、血液输血以及遗传研究都有着重要意义。
本文将介绍血型的鉴定方法及相关操作。
一、血型的分类与意义人类的血液主要有A、B、O和Rh四种类型,根据红细胞膜表面的抗原的类型和组合,可以将血型分类为A、B、AB和O四种基本类型。
同时,Rh血型分为Rh阳性和Rh阴性两种。
血型的鉴定对于输血安全至关重要,错误的输血可能导致输血反应甚至危及生命。
此外,血型还与各种疾病的易感性以及药物反应等有关,因此了解个体的血型信息对于医疗保健和疾病预防也有一定的指导意义。
二、血型的鉴定方法1. 直接血涂片法直接血涂片法是一种简单有效的鉴定血型的方法。
操作步骤如下:(1)将被测血的一滴滴于玻璃片上,用纤维棒均匀地在玻璃片上涂抹;(2)取相应的抗血清:如A型血的抗A血清、B型血的抗B血清、AB型血的抗A和抗B血清、O型血的抗A和抗B血清以及Rh抗血清等;(3)将抗血清滴于涂片中,与血液充分混合;(4)观察血涂片的凝集反应,如果呈现凝集,即为抗血清与红细胞抗原的配血现象,反应凝结越强,说明抗血清与红细胞抗原之间的亲和力越高。
2. 输血试验为了确保输血安全,一般在输血前需要进行输血试验。
输血试验包括供者血型和受者血型鉴定,以及鉴定受者血浆对供者红细胞抗原的抗体情况。
输血试验的操作步骤如下:(1)进行供者和受者的血型鉴定,使用与直接血涂片法相同的方法;(2)对受者的血浆进行抗体筛查,这是为了查找受者血浆中特异性抗体的存在情况;(3)进行交叉配血试验,将受者血浆与供者红细胞反应,观察有无凝集反应。
若有凝集反应出现,则代表受者血浆中的抗体与供者红细胞的抗原有亲和力,此时该供者的血液不适合输给受者。
三、注意事项在进行血型鉴定和输血试验时,需要注意以下事项:1. 操作前需准备好所需试剂和设备,保持无菌状态;2. 确保工作区域安全,避免交叉污染;3. 操作过程中要仔细,避免误操作导致错误结果;4. 严格遵守操作规范,保证试验的准确性和可靠性;5. 注意个人防护,避免自身接触到血液和试剂。
血型鉴定操作规程
血型鉴定操作规程《血型鉴定操作规程》一、目的血型鉴定是一项重要的医学检验技术,用于确定个体的血型,并在输血、器官移植等临床应用中起到重要作用。
为了确保血型鉴定的准确性和可靠性,在进行血型鉴定操作时,必须按照规定的程序和要求进行操作。
二、操作规程1.样本采集:采集新鲜的全血样本,保持样本的完整性,并避免造成血样污染。
2.标本登记:在标本上进行详细的登记,包括病人的姓名、年龄、性别等信息,并核对标本的编号和病人信息的一致性。
3.检测准备:准备好所需的试剂、药品、设备和工具,确保检测环境的清洁和消毒,避免造成交叉感染。
4.试剂配制:根据所用试剂的说明书进行试剂的配制,遵守正确的比例和方法进行操作。
5.血型鉴定:按照标本的编号对照进行血型鉴定,确保标本不被混淆,避免造成错误的结果。
6.结果确认:对血型鉴定的结果进行仔细的确认和核对,确保结果的准确性和可靠性。
7.结果报告:将血型鉴定的结果进行清晰的记录和报告,确保结果的及时性和准确性。
8.标本保存:对已完成血型鉴定的标本进行合适的保存,避免标本的变质和丢失。
三、操作要求1.操作人员必须具备相关专业知识和技能,严格按照操作规程进行操作。
2.操作人员在进行操作前必须仔细阅读和理解所用试剂和设备的说明书,遵守使用方法和注意事项。
3.操作人员在进行操作时必须穿戴好防护用具,避免操作过程中发生事故和污染。
4.操作人员必须加强个人卫生管理,保持手部的清洁和消毒,避免交叉感染的发生。
5.操作环境必须保持干净整洁,避免污染的产生和传播。
以上就是《血型鉴定操作规程》的相关内容,希望大家在进行血型鉴定操作时,严格按照规程进行操作,确保结果的准确性和可靠性。
鉴定血型的实验报告
鉴定血型的实验报告一、实验目的本实验旨在通过血清学方法鉴定一个人的血型,以便了解其红细胞的抗原和抗体特性,以及输血或接受器官移植时的兼容性。
二、实验原理血型鉴定是基于抗原和抗体的特异性反应。
红细胞表面所携带的抗原与血清中的抗体相互作用,通过观察是否发生凝集反应来判断血型。
本实验将采用经典的ABO血型系统进行鉴定。
三、实验步骤1、准备试剂和器材:抗A抗体、抗B抗体、抗D抗体、生理盐水、微量移液器、离心机、试管、滴管等。
2、采集样本:使用微量移液器从受试者静脉中抽取50微升血液。
3、实验操作:a.将50微升血液分别加入抗A抗体和抗B抗体试管中;b.用生理盐水将试管中的血液稀释至100微升;c.用滴管缓慢加入5滴抗D抗体;d.摇匀后,观察凝集反应;e.用离心机分离血清和红细胞,观察结果。
4、结果记录:记录每个试管中的凝集反应情况,包括凝集颗粒的数量、颜色变化等。
5、结果分析:根据记录的凝集反应情况,判断受试者的血型。
四、实验结果与分析1、实验结果:在加入抗A抗体的试管中,受试者血液呈现凝集反应,形成明显的凝集颗粒;而在加入抗B抗体的试管中,血液未发生凝集反应。
2、结果分析:根据ABO血型系统的特点,受试者的红细胞表面可能携带A抗原,而未携带B抗原。
因此,可以初步判断受试者为A型血。
为了进一步确认血型,可以继续进行Rh血型等其他血型系统的鉴定。
五、结论本实验通过血清学方法成功鉴定了受试者的ABO血型为A型。
这一结果对于了解受试者的红细胞抗原和抗体特性,以及输血或接受器官移植时的兼容性具有重要意义。
在实际应用中,鉴定血型是确保医疗安全和有效治疗的关键环节之一。
红细胞血型系统课件一、引言红细胞血型系统是生物学和医学领域中的一个重要概念。
红细胞血型是指红细胞表面抗原的特异性,这些抗原在个体之间存在差异。
了解红细胞血型系统对于临床输血、器官移植、新生儿溶血病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。
本课件将介绍红细胞血型系统的基本概念、分类和应用。
血型鉴定 课件 ppt
抗人球蛋白法
准确度高
抗人球蛋白法是一种间接血型鉴定技术,通过将特异性抗体与红细胞表面抗原结合,观察是否出现凝 集反应来判断血型。该方法准确度高,适用于强抗原的检测,但操作较为繁琐。
微柱凝胶法
自动化程度高
微柱凝胶法是一种基于凝胶技术的血型鉴定方法,通过将红 细胞与抗体在微柱凝胶中分离,观察是否出现凝集反应来判 断血型。该方法自动化程度高,操作简便,准确度较高,是 目前较为常用的血型鉴定方法之一。
案例分析
疑难血型鉴定案例
总结词
复杂、技术要求高
详细描述
疑难血型鉴定通常涉及到一些非常罕见的血型抗原或抗体,需要采用特殊的检测技术和 方法才能准确鉴定。例如,某些人的红细胞上可能存在异常的血型抗原,导致常规血型 检测无法准确判断其血型。这种情况下,需要采用更高级的血型检测技术,如酶法、抗
人球蛋白试验等。
血型鉴定的意义
01
02
03
输血安全
通过血型鉴定可以确保输 血的安全,避免因血型不 匹配导致的溶血反应。
亲子鉴定
血型鉴定可用于亲子关系 的鉴定,但准确度不如 DNA鉴定。
疾病诊断
某些疾病与血型相关,例 如某些免疫性疾病和癌症 ,血型鉴定可以为疾病诊 断提供参考。
血型鉴定的应用场景
医疗输血
在医疗输血前,必须进行 血型鉴定,确保供血者和 受血者血型匹配。
05
血型鉴定的发展趋势与展望
新技术应用与推广
基因检测技术
随着基因检测技术的发展,通过基因检测进 行血型鉴定成为可能,具有更高的准确性和 可靠性。
生物信息学应用
利用生物信息学技术对血型基因进行数据分 析,能够更快速、准确地鉴定血型。
自动化与智能化发展
实验二-血型鉴定与血红蛋白含量测定
随着年龄的增长,血红蛋白含量呈现下降趋势。60岁以上的受 试者血红蛋白含量平均值低于正常范围,提示可能存在贫血风
险。
05
实验总结与讨论
实验总结
实验目的达成情况
通过本实验,我们成功地鉴定了不同个体的血型,并测定了其血红蛋白含量。实验结果与预期目标一致,表明实验目 的已达成。
实验操作规范性
光电比色法
利用光电比色计测量血红蛋白吸光度 值,通过标准曲线计算血红蛋白含量 。
实验操作流程简介
采血与制备样品
采集受试者的血液,分离出血 浆和红细胞,制备成待测样品。
血红蛋白含量测定
利用比色法或光电比色法测定 待测样品中血红蛋白的含量。
准备试剂和器材
根据实验需要准备红细胞、血 清、缓冲液等试剂,以及显微 镜、离心机、试管等器材。
血型鉴定
将待测样品与标准血清进行反 应,观察红细胞是否发生凝集, 判断血型。
结果分析与报告
根据实验数据进行分析,得出 实验结论,并撰写实验报告。
03
实验步骤
血型鉴定实验步骤
准备试剂与器材
准备抗A、抗B标准血清、生理盐水、微量 吸管、玻片、离心机等。
抗原抗体反应
将标记好的血液分别滴加到抗A、抗B标准 血清中,观察是否出现凝集反应。
在实验过程中,我们严格遵循了操作规程,确保了实验结果的准确性和可靠性。每一步操作都经过仔细核对和确认, 避免了误差的产生。
实验数据可靠性
我们采用了可靠的检测方法和试剂,并对实验数据进行了多次测量和校准。通过这些措施,我们确保了 实验数据的准确性和可靠性,为后续的分析和讨论提供了有力支持。
实验讨论与思考
血型鉴定在临床上的意 义
血红蛋白含量与健康的 关系
血型鉴定原理
血型鉴定原理血型鉴定是通过检测人体血液中的特定抗原和抗体来确定个体的血型类型。
人类的血液主要分为A、B、AB和O四种类型,这些血型类型是由红细胞表面的抗原决定的。
在进行血型鉴定时,需要了解血型鉴定的原理和方法,以确保准确性和可靠性。
首先,我们需要了解血型的基本知识。
人体的红细胞表面具有不同的抗原,包括A抗原和B抗原。
根据红细胞表面的抗原的不同组合,可以确定个体的血型类型。
例如,如果一个人的红细胞表面有A抗原,但没有B抗原,那么他的血型就是A型;如果一个人的红细胞表面有B抗原,但没有A抗原,那么他的血型就是B型;如果一个人的红细胞表面同时具有A抗原和B抗原,那么他的血型就是AB型;如果一个人的红细胞表面既没有A抗原也没有B抗原,那么他的血型就是O型。
其次,血型鉴定的原理是通过血清中的抗体与红细胞表面的抗原发生凝集反应来确定血型。
在进行血型鉴定时,会使用不同类型的抗血清,这些抗血清中含有特定的抗体。
例如,对于A型血液,会使用含有B抗体的抗血清,如果加入这种抗血清后出现凝集反应,就说明血液中含有B抗原,从而可以确定血型为A型。
类似地,对于B型血液,会使用含有A抗体的抗血清,对于AB型血液,会使用同时含有A抗体和B抗体的抗血清,而对于O型血液,不会出现凝集反应。
最后,血型鉴定的方法主要包括直接试验法和间接试验法。
直接试验法是将待测血液滴于玻片上,加入相应的抗血清,观察是否出现凝集反应来确定血型。
而间接试验法是通过检测血清中的抗体来确定血型,例如通过凝集素试验或间接抗人球蛋白试验来检测血清中的抗体类型,从而推断出血型。
综上所述,血型鉴定的原理是通过检测血液中的特定抗原和抗体来确定个体的血型类型。
在进行血型鉴定时,需要了解血型的基本知识,掌握血型鉴定的原理和方法,以确保准确性和可靠性。
血型鉴定在医学和法医学领域有着重要的应用价值,对于输血、器官移植、亲子鉴定等方面具有重要意义。
因此,对血型鉴定原理的深入了解对于相关领域的专业人士来说至关重要。
abo血型鉴定步骤
abo血型鉴定步骤
鉴定一个人的ABO血型可以通过以下步骤进行:
1. 采集血样:从被测者的指尖或静脉抽血,通常使用采血针或血管针进行。
2. 加入试剂:将被测者的血样分别与A、B、O型血清试剂接触。
A型血清试剂中含有抗A抗体,B型血清试剂中含有抗B 抗体,O型血清试剂中不含有抗A或抗B抗体。
3. 观察凝集反应:如果被测者的血样与A型血清试剂接触后
发生凝集反应,表示被测者的血型为A型;如果与B型血清
试剂接触后发生凝集反应,表示血型为B型;如果与O型血
清试剂接触后发生凝集反应,表示血型为O型;如果与A、B、O型血清试剂都不发生凝集反应,表示血型为AB型。
4. 确定血型:根据血清试剂与血样的凝集反应结果,确定被测者的A、B、O或AB型血型。
需要注意的是,ABO血型鉴定是一种常见的血型鉴定方法,
但并不能完全确定一个人的具体血型,因为还可能存在其他的Rh血型和其他血型抗原系统。
血型鉴定
ABO血型试验(正反定型)一原理利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定ABO血型。
二试剂和材料1.抗-A(B型血),抗-B(A型血)及抗-A+B(O型血)分型血清。
2.5%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液。
3.受检者血清。
4.受检者5%红细胞盐水悬液。
三操作(玻片法)1.取清洁玻片一张,用蜡笔划成方格,标明抗-A、抗-B和抗-A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A+B分型血清1滴于方格内,再加受检者2%红细胞悬液1滴,混合。
2.另取清洁玻片一张,用蜡笔划成方格,标明A细胞、B细胞和O细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。
3.将玻片轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连续约15min,以肉眼观察有无凝集反应。
也可用低倍镜观察结果。
四结果判定:见表1表1 ABO血型正反定型结果五注意事项1.试管、滴管和玻片必需清洁干燥,防止溶血。
2.操作中应先加血清后加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。
3.为防止冷凝集现象的干扰,一般在室温内进行试验。
4.标准抗血清必须符合标准,不要长期放在室温,以免污染和孳长细菌,等渗生理盐水必须等渗、新鲜、无微生物孳生。
5.观察结果要仔细,微弱凝集、或肉眼观察未凝集的标本,要用显微镜观察。
注意特异性凝集与继发性血液凝固、串钱状形成和异物的区别。
六血型鉴定中常见的假阳性反应1.红细胞串钱形成:红细胞相互重叠,连接成串,象一串重叠的钱币,称为串钱形成,又称假凝集。
可见于血浆蛋白紊乱、血沉加快的各种病例或实验中温度过高,作用时间过长,致水分蒸发,血清浓缩。
可在观察结果前,再加等渗盐水1滴,彻底混匀,串钱状红细胞因血液稀释而散开。
也可用高倍镜仔细观察凝集块的形态和用洗涤后和红细胞配制悬液。
2.寒冷凝集:在较低温度出现的凝集称为寒冷凝集。
多数正常人的血清在0~2ºC 时能凝集本人的红细胞,又称自家凝集。
这种凝集是可逆的,在0-2ºC时作用最强,20ºC时可消失。
血型鉴定
血型鉴定操作规程玻片法(仅适用于正定型)1.原理:1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A型,B型、AB 型和0 型。
根据抗-A 和抗B抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO 血型。
1.2 根据抗-D 抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分RhD 阳性和RhD阳性。
2 标本采集:用EDTA 抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。
紧急情况下可以使用抗凝动脉血。
婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可采集末稍血。
3. 标本运送与储存:采集好的标本与申请单同期尽快(一般2 小时内)送往输血科。
标本采集后和检测后,应置于2~8℃环境下,检测后的标本应至少保存?天,以备结果查对。
4.仪器与材料:抗-A/B 血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM) 血型定型试剂(单克隆抗体)、载玻片、试管架、次性塑料滴管, 记号笔。
5. 操作步骤:5.1 用标记笔在载玻片上划分成斗、B、D三个区域:5.2 在标记好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B 和抗-D 血型定型试剂:5.3 再各加1 滴10%患者红细胞悬液(该红细胞悬液可以是盐水悬液,也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞);5.4 用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混合,并把混合物均匀涂开,使其覆盖大约直径20mm 的面积:5.5 缓慢连频斜推动玻片1-2min, 观察结果并记录。
6.结果判定:6.1 减集或发生酒血为阳性结采;6.2 细胞混句2min 后仍呈悬液状态的为阴性结果;6.3 对结果有怀疑,应用试晋法或徽柱准胶法重复实验。
二、纸板法1.原理:1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A型、B 型、AB 型和0 型。
根据抗-A 和抗-B 抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO血型正定型。
A1细胞上含有A和A1 抗原,B细胞上含有B抗原。
用已知的A、B 细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A 或抗-B 抗体,即反定型。
血型鉴定操作流程及评分标准
血型鉴定操作流程及评分标准血型鉴定是一项重要的医学测试,用于确定一个人的血型类型,包括A型、B型、AB型和O型。
正确的血型鉴定可以在医疗紧急情况下提供准确的输血和器官移植指导。
本文将介绍血型鉴定的操作流程以及评分标准。
一、血型鉴定操作流程1.样本采集:首先,需要从被测试者身体的静脉或指尖采集血液样本。
采集血液时需注意卫生和安全。
2.血液分离:将采集到的血液样本置于离心机中进行离心分离,分离出血浆和红细胞。
3.试剂准备:准备好与血型鉴定相关的试剂。
常用试剂包括抗A血清、抗B血清和抗Rh(D)血清。
4.贴片试验:取一张标有A、B和Rh(D)符号的血型贴片,将贴片的相应孔洞分别滴入待测血液的血清,静置片刻。
5.观察反应:观察血型贴片上的孔洞发生的凝集反应。
如果血型样本与抗A血清发生凝集反应,则表示血型为A型;如果与抗B血清发生凝集反应,则表示血型为B型;如果与抗Rh(D)血清发生凝集反应,则表示血型为Rh(D)阳性。
6.结果判读:根据血型贴片上的凝集反应情况,判断被测试者的血型类型。
二、血型鉴定评分标准血型鉴定一般采用的是视觉判断方法,通过观察血型贴片上的反应凝集情况来判读血型。
评分标准主要包括以下几项:1.凝集明显程度:根据贴片上凝集的形状、大小和数量,评估凝集的明显程度。
凝集明显、清晰的得分高,凝集不明显的得分低。
2.凝集均匀性:评估凝集的均匀性,即凝集是否均匀分布在孔洞内。
凝集均匀的得分高,凝集不均匀的得分低。
3.样本处理技巧:评估操作者对样本的处理技巧,如血液采集、分离和滴入的准确性。
技巧熟练且准确的得分高,技巧不熟练或操作不准确的得分低。
评分一般以数字表示,根据不同的评分标准和实验室的要求,可设定不同的分值范围,总分数越高表示操作者的实验操作技能越好。
总结:血型鉴定是一项重要的医学测试,对于保障患者的输血和器官移植安全至关重要。
正确的操作流程和准确的评分标准能够保证血型鉴定的准确性和可靠性。
血型鉴定方法
血型鉴定方法血型是指人体血液中存在的特定抗原和抗体的组合。
目前已知的人类血型系统有ABO、Rh、Kidd、Duffy、MNSs等。
血型鉴定是医学、法医学和生物学等领域中常用的一种检测方法,可以用于疾病诊断、输血配型、亲子鉴定、犯罪侦查等方面。
1. ABO血型鉴定方法ABO血型系统是最常见的血型系统,分为A、B、AB、O四种血型。
血型的鉴定方法主要有血凝法、血清学法、血红蛋白电泳法、DNA分型法等。
血凝法是最早被使用的血型鉴定方法,其原理是利用不同血型的血清与红细胞混合后引起的凝集反应来确定血型。
该方法简便易行,但有一定误差。
血清学法是一种常用的血型鉴定方法,其原理是将患者血清和已知血型的红细胞反应,通过观察凝集情况来确定血型。
该方法准确性较高,但需要较长的反应时间。
血红蛋白电泳法是利用不同血型的血红蛋白在电泳时的迁移率不同来进行鉴定的方法。
该方法操作简单,但需要专门设备和技术。
DNA分型法是目前最准确的血型鉴定方法之一,其原理是通过PCR扩增目标基因,然后利用凝胶电泳等技术进行检测。
该方法准确性极高,但需要专门设备和技术。
2. Rh血型鉴定方法Rh血型系统是指人体血液中存在的Rh抗原的不同组合。
Rh血型的鉴定方法主要有血清学法、血凝法、DNA分型法等。
血清学法是利用不同血型的血清与红细胞混合后引起的凝集反应来确定Rh血型。
该方法简单易行,但需要较长的反应时间。
血凝法是一种常用的Rh血型鉴定方法,其原理与ABO血型鉴定方法类似。
该方法准确性较高,但有一定误差。
DNA分型法是目前最准确的Rh血型鉴定方法之一,其原理与ABO 血型鉴定方法类似。
该方法准确性极高,但需要专门设备和技术。
3. 亲子鉴定方法亲子鉴定是通过比较亲属间的DNA序列来确定亲子关系的一种方法。
亲子鉴定的方法主要有PCR-STR分型法、DNA指纹法等。
PCR-STR分型法是目前亲子鉴定中最常用的方法之一,其原理是通过PCR扩增目标基因的特定区段,然后利用凝胶电泳等技术进行检测。
血型检测方法学
血型检测方法学引言:血型检测是一种常见的临床检验方法,用于确定一个人的血型类型。
血型检测方法学主要包括血型抗原与抗体的检测、凝集反应和血型鉴定等。
本文将详细介绍血型检测的方法学,包括血型抗原与抗体的检测、凝集反应和血型鉴定的原理、步骤和注意事项。
一、血型抗原与抗体的检测血型抗原与抗体的检测是确定一个人的血型类型的首要步骤。
血型抗原是存在于红细胞表面的蛋白质或糖类物质,根据其存在与否,可将人类血型分为A型、B型、AB型和O型。
血型抗体则是存在于血浆中的特定抗体,与相应的血型抗原发生特异性反应。
血型抗原与抗体的检测方法主要有凝集试验、溶血试验和免疫荧光染色法。
1. 凝集试验:凝集试验是一种常用的血型抗原与抗体检测方法。
它通过将被测血液与特定的抗体或抗原混合,观察是否发生血凝集反应来确定血型。
例如,将被测血液滴在含有A抗体的试剂中,如果血液中含有A抗原,就会发生凝集反应。
凝集试验可以直接在玻片上进行,也可以使用特定的试剂盒进行。
2. 溶血试验:溶血试验是一种通过观察溶血现象来确定血型的方法。
溶血试验主要用于检测不同血型之间的抗体和抗原反应。
例如,将被测血液与特定的抗体混合,如果发生溶血现象,则说明血液中含有相应的抗原。
溶血试验可以在试管中进行,也可以使用特定的试剂盒进行。
3. 免疫荧光染色法:免疫荧光染色法是一种通过标记荧光物质来检测血型抗原和抗体的方法。
该方法利用特异性抗体与抗原发生特异性反应,然后用荧光素标记的二抗与抗体结合,观察标记物的荧光信号来确定血型。
免疫荧光染色法具有高灵敏度和高特异性的优点,常用于血型抗原的检测。
二、凝集反应凝集反应是血型检测中常用的方法之一,用于观察血细胞与抗体或抗原之间的凝集现象。
凝集反应主要有直接凝集试验和间接凝集试验两种。
1. 直接凝集试验:直接凝集试验是一种将被测血液与含有特定抗体的试剂混合,观察是否发生血凝集现象的方法。
如果被测血液中含有相应抗原,就会与试剂中的抗体发生反应,导致血细胞之间的凝集现象。
简述血型鉴定方法
简述血型鉴定方法
血型鉴定方法是通过检测人体中的血液样本来确定个体的血型类型。
主要的血型鉴定方法包括以下几种:
1. ABO血型鉴定:这是最常见的血型鉴定方法,通过检测红细胞表面的抗原来确定血型。
常见的有A型、B型、AB型和O型。
通常使用血清型抗原试剂与患者的红细胞相互反应,根据凝集的情况来确定血型。
2. Rh血型鉴定:Rh血型是指红细胞表面的Rh抗原。
根据是否具有Rh抗原可分为Rh阳性和Rh阴性血型。
Rh血型鉴定同样可以通过血清型抗原试剂与患者的红细胞反应来确定。
3. Kell血型鉴定:Kell血型是指Kell抗原,也是红细胞表面的抗原之一。
Kell血型鉴定通常使用特定的抗体试剂反应来确定。
4. Lewis血型鉴定:Lewis血型是指受体器官和体液的特定酶所表达的血型抗原。
鉴定方法主要基于特定抗体的反应性。
5. MN血型鉴定:MN血型是指地贫素和金伯利金抗原。
通过特定抗体的作用来进行鉴定。
这些血型鉴定方法主要通过血清型抗体试剂与患者血液样本中的红细胞进行反应来确定。
根据反应的凝集情况和试剂的反应性,可以确定个体的血型类型。
这些方法在血液供应和输血匹配以及遗传学研究中起着重要的作用。
鉴定血型的方法
鉴定血型的方法血型是指人体血液中红细胞上的抗原和抗体的类型,分为A、B、AB、O四种。
了解自己的血型对于日常生活和医疗护理都有一定的重要性。
那么,如何准确地鉴定血型呢?下面将介绍几种常见的鉴定血型的方法。
1. 血型试纸法血型试纸法是一种简单、快速、经济的血型鉴定方法。
这种方法是通过血型试纸上的抗原和抗体与被测血液中的抗原和抗体发生特异性反应来确定血型。
具体操作是将试纸按指示蘸取被测血液,根据试纸上的颜色变化判断血型。
2. 血凝法血凝法是一种常用的血型鉴定方法,它是通过观察血浆与抗血清的凝集反应来确定血型。
在实验室中,将被测血液与已知血型的抗血清混合,观察是否发生凝集现象,从而确定血型。
3. 血细胞凝集法血细胞凝集法是一种更加精确的血型鉴定方法。
它是通过观察被测血液中红细胞与特异性抗体的凝集反应来确定血型。
这种方法可以确定血型的具体亚型,如A型血分为A1、A2两个亚型。
4. DNA分型法DNA分型法是一种高度准确的血型鉴定方法。
它通过提取被测血液中的DNA,利用PCR扩增特定基因区域,然后进行基因分型。
这种方法可以准确地确定血型,同时还可以确定人的基因型。
5. 免疫电泳法免疫电泳法是一种常用的血型鉴定方法,它是通过将被测血液中的抗原和抗体与特定抗血清进行电泳分离,从而确定血型。
这种方法可以准确地鉴定各种血型,同时还可以检测出一些罕见的血型。
在进行血型鉴定时,需要注意以下几点:1. 使用无菌操作,避免交叉感染。
2. 选择合适的试剂和试纸,确保结果的准确性。
3. 严格遵守实验室的操作规程,确保实验过程的安全。
4. 注意对被测血液的储存和保存,避免血型鉴定结果的误差。
总结起来,鉴定血型的方法有血型试纸法、血凝法、血细胞凝集法、DNA分型法和免疫电泳法等。
不同的方法适用于不同的场景和需求,选择合适的方法进行血型鉴定是十分重要的。
在进行血型鉴定时,需要注意操作的准确性和安全性,避免结果的误差。
通过准确地鉴定血型,可以为个人的健康管理和医疗护理提供有益的参考。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
ABO、Rh及MNSs血型鉴定用抗体研究进展来源:本站原创作者:陈琦1张嘉敏2李厚达1朱自严2(1.扬州大学医学院生理教研室,江苏扬州 225001; 2.上…发布时间:2009-12-2红细胞血型系统非常复杂,ABO血型之后,目前已发现了29个血型系统,700余种血型抗原。
血型抗原的正确鉴别在保证输血安全、调查人种分布、建立稀有血型库及许多疾病的诊断、分型甚至治疗方面都有极其重要的作用[1]。
抗原的鉴别有赖于相应抗体的获得。
血型鉴定用抗体的制备也经历了多克隆、单克隆及基因工程抗体3个发展阶段。
现将ABO、Rh及MNSs血型鉴定用抗体研究进展综述如下。
1 ABO血型鉴定用抗体1.1ABO抗血清人源抗血清即多克隆抗体是人体内天然存在的或免疫反应检测到的抗体,ABO血型抗血清属于天然抗体,于出生后2—8个月开始产生,8—10岁达高峰。
将通过全血制备的抗血清用于ABO血型的鉴定,方法简单、血凝明显、特异性强,长期以来一直是国内外血型检测机构及医院使用的ABO定型试剂。
但它们存在的突出问题是:需耗费大量血液、不能做到标准化、难以规模化生产[2]。
基于以上原因,科学家们一直希望找到可代替人抗血清用于ABO血型鉴定的理想试剂。
杂交瘤技术问世,使这一愿望成为现实。
1.2ABO mAbs 1975年杂交瘤技术发明以后,Voak(1980)和Sachs (1981)等先后建立了能分泌抗 A和抗 B mAbs的杂交瘤细胞株,并将其成功用于ABO系统的血型鉴定。
此后,其发展十分迅速,各国均建成了多株能稳定分泌抗 A、抗 B mAbs的瘤株细胞,为保证不同来源的ABO血型mAbs定型试剂质量的稳定性、结果判断的统一性及使用有效性,1987年,国际输血协会(ISBT)在第一届“红细胞及相关抗原单克隆抗体国际专题会议”中,对ABO 血型mAbs制品的生产、使用提出了明确的质量标准和规范[3]。
2000年,我国也出台了相应的政策法规,加强了质量管理与监督。
目前高效价、质量稳定的ABO血型mAbs定型试剂,已完全取代抗血清,广泛用于ABO血型的临床鉴定[4]。
值得注意的是:用mAbs 进行ABO血型鉴定时会有漏检、假阳性、假阴性现象的发生,对此,国内外文献均有报道。
1996年,Garatty等[5]报道了1例使用mAbs定型试剂,误将含获得性B抗原的A型患者错定为AB型,导致患者因错输AB型血死亡的病例;国内孙爱农等[6]也有类似发现。
究其原因,主要是因为不同个体的红细胞A、B抗原,尤其是亚型决定簇的结构和数量存在不均一性,1个mAb只识别1个抗原结合位点,因此用单一mAb制品进行复杂血型鉴定时,可能导致误判。
因此专家建议:可将抗原结合部位不同的mAbs混合组成检测试剂盒,进行复杂血型的鉴定,以确保输血治疗的安全性。
1.3基因工程抗体近年来,基因工程抗体的制备成为抗体工程的重要发展方向。
Siegel 等[7]用噬菌体抗体库技术获得了针对ABO血型抗原的Fab和ScFv抗体,国内王长军等[8]也制备出A抗原的ScFv抗体。
与mAbs相比,这些基因工程抗 A、抗 B在反应亲合力和效价等方面均未达到临床使用的要求,因此,有关这方面的研究进展不大。
2 Rh血型鉴定用抗体在Rh血型系统中,常见的有D、C、E、c、e5种抗原,其中D抗原性最强,因此,一般制备的Rh抗体以抗 D为主。
2.1Rh抗血清与ABO血型系统不同,Rh阴性个体血清中没有天然的Rh抗体。
只有在接受了Rh阳性血后,Rh抗体才能产生。
传统的Rh抗体以Rh阴性志愿者为主要来源,即通过反复注射Rh阳性红细胞以获得高效价的抗血清。
此方法有悖于伦理道德,且获得的抗体来源极其有限,因此,人源Rh抗血清在绝大多数国家已被禁止使用。
2.2Rh mAbs 1975年杂交瘤技术的建立,为Rh抗体的研制带来了极大的希望,但小鼠免疫系统并不识别Rh抗原,这使用传统的杂交瘤技术制备Rh mAbs的种种努力均以失败告终。
经过对单克隆技术的改进,20世纪80年代末,研究人员终于通过3条途径获得了Rh mAbs。
1)人 人、人 鼠杂交瘤技术:将分泌Rh抗体的人B细胞,用杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞或人淋巴母细胞融合,可获得人 鼠或人 人杂交瘤细胞。
人 鼠杂交瘤比人 人杂交瘤的融合率高,细胞生长快,可在裸鼠腹腔内得到高滴度抗体的腹水;但人 人杂交瘤细胞是纯正的人源性mAbs,更适于进行人体治疗。
Boucher等[9]建立的人 鼠杂交瘤细胞系分泌Rh抗体,可用于Rh血型的鉴定。
2)EB病毒转化: 20世纪70年代,Bruggemann等[10]发现EB病毒能感染人B淋巴细胞,使其转化为B淋巴母细胞,并无限期传代。
1987年Dominique等[11]利用此方法获得分泌Rh mAbs的分泌细胞系;Kumper[12]用EB 病毒转化人B淋巴细胞获得了BRAD 3、BRAD 5 2株人源性Rh mAbs,可用于新生儿溶血病的预防。
3)EB病毒转化联合杂交瘤技术:用上述方法制备Rh mAbs的共同缺陷是:瘤株不稳定,易丧失抗体分泌能力。
为此,人们尝试将这2种技术结合,用经EB病毒转化的B 细胞与人或小鼠骨髓瘤细胞系融合,建立可稳定分泌mAbs的瘤株细胞。
Prasad等[13]用该方法获得的1株杂交瘤细胞可稳定分泌Rh mAb,将该抗体注射Rh阴性怀孕妇女用于预防新生儿溶血病时,抗体在体内维持时间较长,疗效稳定,有较大的应用价值。
以上Rh mAbs 制剂必须通过改良技术获得,瘤株的稳定性和效价均较低,这导致其生产成本昂贵,产量有限,远远不能满足临床使用的需要,尤其在我国,目前所用试剂全部依赖进口,输血前无法进行Rh血型的常规检测,这是导致目前临床严重输血反应及新生儿溶血病发生的主要原因。
因此,寻找新途径、新方法制备Rh抗体对保障生命安全十分重要。
基因工程抗体技术的出现为低成本、大规模生产Rh抗体提供了可能。
2.3Rh基因工程抗体技术上,Rh基因工程抗体的制备绕过了单抗制备中动物免疫这一环节,只需Rh抗体阳性人提供少量白细胞,通过单纯的分子生物学技术即可获得。
而在实际应用方面,此类抗体一般为Fab或ScFv形式,它们比mAbs分子量小,能更好地与Rh 抗原结合,因而作为检测试剂它们比mAbs更优越;此外,基因工程抗体的制备周期短、成本低,可实现大规模、标准化生产,以上种种优势促使欧美等国自20世纪90年代起开始投入大量人力、物力开展此项研究,并取得了较大的进展。
在国外,Chang 等[14]先后研制出可溶性RhD的Fab抗体;Miescher等[15]通过筛选,挑出2个表达Fab的高亲和性噬菌体克隆,它们能识别D抗原的变异体,表现出新的抗 D反应形式,并首次在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达,此技术可中试规模生产,有效缓解了Rh抗体极为短缺的压力。
为增强Rh基因工程抗体对红细胞的亲和力,提高其凝集效价,Furuta等[16]利用细菌碱性磷酸酶(BAP)与获得的RhD scFv分子聚合构建(ScFv)2 BAP分子,在BAP抗体存在下, 该分子比带有C myc肽标签的ScFv更易于与红细胞表面的D抗原结合。
Asvadi等[15]则将Rh scFv中的连接肽缩短, 使不同scFv分子间VH 和VL 配对, 在大肠杆菌中表达出的RhD双链抗体能特异结合D抗原, 在交联抗体存在下,它们能凝集木瓜蛋白酶处理过的Rh(+)红细胞, 其结合性能优于ScFv抗体。
在国内:岳建华等[16]获得了1株RhD的ScFv抗体,该抗体用免疫斑点实验证实其与Rh抗原的结合,未做进一步序列分析、可溶性抗体表达和纯化研究。
本实验室则与上海市血液中心血型参比室合作,首次从5个Rh抗体强阳性人的白细胞中,通过噬菌体抗体库技术获得了1株Rh Fab抗体,该抗体与Rh阳性红细胞的凝集活性达2+,其VH属VH3 23亚群家族,Vκ属VκⅢ亚群Ⅸ家族,此抗体可经过基因改造,进一步提高其特异性和亲和力,为最终将Rh基因工程抗体用于临床打下基础。
综上所述,经过近20年的努力,目前文献报道的Rh基因工程抗体已达200余种,其中,一些亲和力高、特异性强的品种已在临床使用。
需要指出的是,Rh基因工程抗体因缺乏Fc段,不能有效参与机体免疫反应,只能用于Rh血型检测,而不能输入母体预防新生儿溶血病的发生。
3 其它血型鉴定用抗体除上述ABO及Rh血型系统外,对其它27个血型系统的mAbs及基因工程抗体的制备多集中在MNSs、Diego、kell、Duffy、Gerbich、cromer等几个系统,它们制备方法及手段相似,这里简单介绍MNSs血型抗体的制备。
MNSs血型系统涉及GPA、GPB 2种蛋白,它们是人红细胞膜上的主要糖蛋白,两者有60%的同源性。
GPA根据其第1和第5位氨基酸的差异分别形成M和N抗原,而GPB则根据其第48位氨基酸的不同形成S和s抗原,故该血型系统被称为MNSs血型系统[17]。
GPA、GPB是红细胞膜上数量最多,抗原性最强的蛋白,据报道:在用红细胞直接免疫小鼠获得的血型mAbs中,70%以上属于此血型mAbs,其中获得的GPA mAbs数量远多于GPB,但没有作用于GPA、GPB蛋白同源部分的GPA/GPB mAbs的报道[18]。
本实验室[19]在前期工作中获得了1株GPA/GPB mAb,它与红细胞凝集反应达4+、小鼠腹水效价为1×2-12,其特异性强、效价高,有很好的临床使用及进一步研究的价值。
MNSs血型mAbs的应用虽然在临床输血方面意义不大(由该血型不合引起输血反应及新生儿溶血病的发生率远小于ABO及Rh血型系统),但它们在鉴别MNSs稀有血型、判断辐射损伤、基因突变监测及法医鉴定等方面则有很重要的应用价值。
此外,获得了MNSs血型mAbs后,还可通过分子生物学技术进一步构建双功能分子,用血凝反应进行病原或抗体的快速检测,其原理为:通过对表达MNSs血型mAb的杂交瘤细胞进行RNA抽提测序,获得其重、轻链基因,将其组装成ScFv后与某个抗原或抗体分子基因融合表达双功能蛋白,因GPA、GPB存在于所有红细胞膜上,这样,可通过简单的血凝反应实现病原体或抗体的快速检测。
Lilley等[20]将GPA的ScFv基因与HIV抗原基因融合表达,产生的双功能蛋白能通过红细胞凝集实验快速进行HIV的临床诊断。
陈宇萍等[21]根据此原理构建的抗红细胞 抗HBsAg双功能分子,可使红细胞在与HBsAg 混合时产生肉眼可见的血凝现象。
本实验室在前期工作中用GPA/GPB mAb的ScFv抗体与人乳头瘤病毒基因片段(HPV16 E7)拼接获得了具有红细胞凝集活性的双功能分子,为HPV 病毒的检测提供了一条新途径。