常用细菌生化反应试验

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细菌鉴定中常用的九个生化反应

１、糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。

可用指示剂及发酵管检验。

试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。

接种后，置36±1.0°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力、培养物可呈弥散生长。

２、淀粉水解试验某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。

淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。

试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20°培养5天。

然后将碘试剂直接滴浸于培养表面，若为液体培养物，则加数滴碘试剂于试管中。

立即检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。

阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。

淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。

培养基pH必须为中性或微酸性，以pH7.2最适。

淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。

3 、明胶液化试验有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。

试验方法：挑取18~24h待试菌培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。

于20~22℃培养7~14天。

明胶高层亦可培养于36±1℃。

每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化，如确被液化，即为试验阳性。

实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察

实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察一结果观察1.葡萄糖发酵实验直接观察试管,试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌,不变者为阴性菌.左边是恶臭假单胞菌，它有气泡并变黄；右边是大肠杆菌，２v.p.反应和甲基红试验:将培养的液体培养基分成两个干净的小试管，在一个试管中滴入2-3滴甲基红试剂。

溶液变红为甲基红阳性菌，与甲基红阴性菌相同，将V.P.试剂添加到另一个试管中，并在37℃下保持15分钟。

变红的是阳性细菌，保持不变的是阴性细菌vp，图为右边为大肠杆菌，溶液变红，为阳性菌。

3吲哚实验在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌.左边是大肠杆菌，带有红色阳性细菌；右边是铜绿气单胞菌，颜色和阴色相同性菌。

4硝酸盐还原实验在点滴板上滴入革里斯试剂a液和b液，如过溶液变红说明有亚硝酸盐，为硝酸盐还原阳性菌，如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂，如果变蓝，说明此菌为阴性菌；如果不变色，说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌．右下角的假单胞菌为阴性菌，加入科里奥利试剂A和B后不变色，加入二苯胺试剂后变蓝；左上角的大肠杆菌是红色的。

５柠檬酸盐实验那些对柠檬酸细菌呈阳性的人，以及那些使用斜面的人，都会变成阴性左边产生蓝色，产气杆菌阳性；右边为大肠杆菌，阴性。

6明胶水解向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌．左边是大肠杆菌，呈透明圆形，呈阳性；右边是枯草芽孢杆菌，一种阴性细菌。

7淀粉水解实验将碘溶液加入培养的淀粉培养皿中，盖上培养皿。

菌落周围有透明圈的细菌是淀粉水解的阳性细菌，没有透明圈的细菌是阴性细菌左边枯草杆菌，出现透明圈，阳性；右边大肠杆菌，无透明圈，阴形。

8硫化氢生产实验直接观察培养好的培养基，出现黑色沉淀者为阳性菌，不变者为阴性菌．左边是一根变形的杆状物，有黑色沉淀和阳性细菌；右边是大肠杆菌，阴性细菌。

细菌的生化试验

细菌生化反应
一、枸橼酸盐利用实验二、吲哚试验三、硫化氢试验四、脲酶试验细ຫໍສະໝຸດ 的生化实验简介部分细菌生化试验
细菌的生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的细菌，简单来说，就是鉴别细菌。因此细菌生化反应是细菌分类鉴定中的重要依据之一，检验中常用的生化反应有：氧化酶试验，触酶试验，氧化发酵试验等。
吲哚（indole）试验：有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色，是为吲哚试验阳性。
三、硫化氢试验
有些细菌如变形杆菌等能分解胱氨酸，甲硫氨酸等含硫氨基酸，生成硫化氢。若遇醋酸铅或硫酸亚铁，则生成黑色硫化铅或硫化亚铁。
一、枸橼酸盐利用实验
在以枸橼酸钠为唯一碳源的培养基，某些细菌（如产气杆菌）分解枸橼酸钠产生碳酸盐，并分解铵盐生成氨，使培养基由酸性变为碱性，培养基中指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿色变为深蓝色，此为阳性。大肠杆菌因不能利用枸橼酸盐，此试验为阴性反应。
二、吲哚试验
吲哚：
1.其外观呈无色或浅黄色片状结晶。有特殊气味。露置空气中或见光色即变红并树脂化。 2.溶于热水、热乙醇、乙醚、苯。能随水蒸气同时挥发。
四、脲酶试验
脲酶又称尿素酶。某些细菌有脲酶（如变形杆菌）有脲酶，能分解培养基中的尿素产生氨，是其碱性增加，可用酚红指示剂检测，呈红色，为阳性。沙门菌无脲酶，则为阴性。

细菌生化实验报告

一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理和实验方法。

2. 掌握常见细菌生理生化反应的检测方法，如糖发酵、吲哚产生、甲基红反应等。

3. 学会通过生理生化反应对细菌进行初步鉴定。

二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长繁殖过程中，利用酶催化底物发生的一系列化学反应。

通过检测细菌对特定底物的利用能力、酶的产生以及代谢产物的生成，可以判断细菌的种类和特性。

三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。

2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、吲哚试剂、甲基红试剂等。

3. 仪器：酒精灯、接种环、培养皿、试管、试管架、滴管等。

四、实验方法1. 糖发酵实验：将待测菌接种于糖发酵培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。

观察菌落周围是否出现透明圈，判断细菌是否能发酵该糖。

2. 吲哚产生实验：将待测菌接种于蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。

取培养液滴加吲哚试剂，观察是否产生红色沉淀，判断细菌是否能产生吲哚。

3. 甲基红反应实验：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。

取培养液滴加甲基红试剂，观察颜色变化，判断细菌是否能产生有机酸。

五、实验结果与分析1. 糖发酵实验结果：- 大肠杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。

- 金黄色葡萄球菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。

- 枯草芽孢杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。

- 变形杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阳性。

2. 吲哚产生实验结果：- 大肠杆菌：吲哚产生阴性。

- 金黄色葡萄球菌：吲哚产生阳性。

- 枯草芽孢杆菌：吲哚产生阴性。

- 变形杆菌：吲哚产生阳性。

3. 甲基红反应实验结果：- 大肠杆菌：甲基红反应阴性。

- 金黄色葡萄球菌：甲基红反应阴性。

- 枯草芽孢杆菌：甲基红反应阳性。

- 变形杆菌：甲基红反应阳性。

根据实验结果，我们可以初步判断：- 大肠杆菌为革兰氏阴性菌，发酵葡萄糖，不产生吲哚和有机酸。

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告一、引言在微生物学中，鉴定细菌的方法有很多种，其中生理生化反应实验是最常用的一种方法之一。

生理生化反应实验可以通过观察细菌对不同物质的代谢情况来确定其种类和特性。

本报告将介绍细菌鉴定中常用的生理生化反应实验。

二、目的本报告旨在介绍常用的生理生化反应实验，包括试剂、操作步骤、结果解释等内容，以帮助读者更好地了解和掌握这些实验。

三、材料与方法1. 大肠杆菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）培养基；2. 硝酸盐还原试剂；3. 糖类试剂：葡萄糖、果糖、半乳糖；4. 氨基酸试剂：天冬氨酸、赖氨酸；5. 酶试剂：淀粉酶、蛋白酶；6. 无水硫酸铜溶液。

四、实验步骤及结果解释1. 硝酸盐还原试验步骤：（1）取一支细菌液体培养物，加入硝酸盐还原试剂；（2）观察液体颜色变化。

结果解释：若液体变为红色，则表示细菌能够还原硝酸盐为亚硝酸盐，是亚硝化菌。

若无颜色变化，则表示细菌不能还原硝酸盐。

2. 糖类代谢试验步骤：（1）取三个试管，分别加入葡萄糖、果糖、半乳糖；（2）加入相同量的细菌液体培养物；（3）观察试管内气泡产生情况。

结果解释：若在葡萄糖试管内产生了气泡，则表示该细菌能够利用葡萄糖进行发酵代谢；若在果糖或半乳糖试管内产生了气泡，则表示该细菌能够利用果糖或半乳糖进行发酵代谢。

3. 氨基酸代谢试验步骤：（1）取两个试管，分别加入天冬氨酸和赖氨酸；（2）加入相同量的细菌液体培养物；（3）观察试管内气泡产生情况。

结果解释：若在天冬氨酸试管内产生了气泡，则表示该细菌能够利用天冬氨酸进行代谢；若在赖氨酸试管内产生了气泡，则表示该细菌能够利用赖氨酸进行代谢。

4. 酶代谢试验步骤：（1）取两个试管，分别加入淀粉和蛋白质；（2）加入相同量的细菌液体培养物；（3）观察试管内颜色变化情况。

结果解释：若在淀粉试管内出现了透明带，则表示该细菌能够分泌淀粉酶；若在蛋白质试管内出现了变色，则表示该细菌能够分泌蛋白酶。

常用细菌生化反应试验

• 试剂：酚红、溴甲酚紫等 • 结果:培养基呈酸性变色 • 应用：观察细菌对糖度的分解情况，常
用于肠道杆菌的鉴定
糖发酵试验结果判断
反应现象酸性变色、有气泡酸性变色、无气泡
培养基不变色
结果描述
分解××糖产酸、产气分解××糖产酸、不产
气不分解××糖
甲基红试验
• 原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步生成大量混合酸，使培养基pH维持在4.4 以下，加入甲基红后，使甲基红呈现红色反应。此为甲基红试验阳性。
伤寒沙门菌KIA（K A－＋）MIU（＋－－）
大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）
苯丙氨酸脱氨实验
• 原理：细菌的具有的苯丙氨酸脱氨酶，可使培养基中的苯丙氨酸脱氨，形成苯丙酮酸，后者与三氯化铁作用，形成绿色化合物。
• 培养基：苯丙氨酸琼脂 • 试剂：10％三氯化铁 • 结果：加入试剂后培养基呈现绿色为阳性 • 应用：多用于肠道杆菌的鉴定
脱酸乙酰甲基甲醇
V-P试剂二乙酰
培养基变红
葡萄糖发酵形成丙酮酸后的不同代谢途径
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）右侧为对照（－－＋＋）
葡萄糖
V－P试验
丙酮酸
脱酸
乙酰甲基甲醇
V-P试剂
二乙酰
培养基变红
大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）右侧为对照（－－＋＋）
蛋白质类代谢试验
• 靛基质试验 • 硫化氢试验 • 苯丙氨酸脱氨试验 • 尿素酶试验
• 培养基：葡萄糖蛋白胨水 • 结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+
培养基不变色：－
• 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
葡萄糖

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告细菌鉴定是微生物学中的一个重要分支，它是通过对细菌的形态、生理生化反应、生长特性等方面进行分析，来确定细菌种类的过程。

在细菌鉴定中，生理生化反应实验是一种常用的方法，它可以通过观察细菌在不同条件下的生长情况，来确定细菌的种类。

本文将介绍几种常用的生理生化反应实验。

1. 氧气需求实验氧气需求实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的氧气需求量。

在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同氧气浓度的培养基中，然后观察细菌的生长情况。

如果细菌只能在氧气充足的条件下生长，那么它就是一种需氧菌；如果细菌只能在氧气缺乏的条件下生长，那么它就是一种厌氧菌；如果细菌既能在氧气充足的条件下生长，也能在氧气缺乏的条件下生长，那么它就是一种兼性厌氧菌。

2. 糖类发酵实验糖类发酵实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌对不同糖类的发酵能力。

在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同糖类的培养基中，然后观察培养基的酸碱度变化。

如果培养基的酸碱度发生了变化，那么说明细菌对这种糖类进行了发酵。

通过这个实验，我们可以确定细菌对哪些糖类具有发酵能力，从而进一步确定细菌的种类。

3. 氧化还原实验氧化还原实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的氧化还原能力。

在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同氧化还原剂的培养基中，然后观察培养基的颜色变化。

如果培养基的颜色发生了变化，那么说明细菌对这种氧化还原剂具有反应能力。

通过这个实验，我们可以确定细菌的氧化还原能力，从而进一步确定细菌的种类。

4. 酶活性实验酶活性实验是一种常用的生理生化反应实验，它可以用来确定细菌的酶活性。

在这个实验中，我们需要将细菌接种到含有不同底物的培养基中，然后观察底物的变化情况。

如果底物发生了变化，那么说明细菌对这种底物具有酶活性。

通过这个实验，我们可以确定细菌的酶活性，从而进一步确定细菌的种类。

细菌鉴定中常用的生化反应实验

实验结果糖发酵实验carbohydratefermentationimvic试验?吲哚试验?甲基红试验?伏普vp试验?柠檬酸盐利用试验?iindoltest?methylredtest?vvogesprokauertest?cciratetest甲基红methylred试验简称mr试验?很多细菌如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸丙酮酸再被分解产生甲酸乙酸乳酸等使培养基的ph降低到42以下这时若加甲基红指示剂呈现红色
将已接种好的培养基置37℃温箱中培养24h。
观察结果：被检细菌若能发酵培养基中的糖时，则使培养基的 pH降低，这时培养基中的指示剂呈酸性反应(为黄色)，若发酵培养基中的糖产酸产气，则培养基不仅显酸色反应，并且在培养基中倒置的小玻璃管(杜氏小管)中有气体。气体占整个倒置小玻管的10％以上。若被检细菌不分解培养基中的糖，则培养基不发生变化。
实验结果
糖发酵实验 Carbohydrate fermentation
IMViC试验
吲哚试验
(Indol test)
甲基红试验
(Methyl red test)
伏-普（V.P）试验 (Voges-Prokauer test)
柠檬酸盐利用试验 (Cirate test）
Voges-Proskauer Test
实验原理－－有机酸盐及氨盐利用试验
柠檬酸盐利用试验
柠檬酸盐培养基系一综合性培养基，其中柠檬酸钠为碳的唯一来源。而磷酸二氢铵是氮的唯一来源。有的细菌如产气杆菌，能利用柠檬酸钠为碳源，因此能在柠檬酸盐培养基上生长，并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐，使培养基变为碱性。此时培养基中的溴麝香草酚蓝指示剂（PH＜6.0时呈黄色，PH在6.0~7.0时为绿色，PH ＞7.6时呈蓝色）由绿色变为深蓝色。不能利用柠檬酸盐为碳源的细菌，在该培养基上不生长，培养基不变色。

细菌鉴定中常用的生理生化反应

透明圈的大小可说明该菌水解淀粉能力的强弱。标记：取明胶培养基试管3支，分别标记大肠杆菌、枯草杆菌。明胶液化试验某些细菌能分泌明胶酶分解明胶产生小分子物质，使培养基由凝固状态变成液态。淀粉水解后遇碘不再显蓝色。标记：取淀粉培养基平板1块，在其左右两边分加标记大肠杆菌、枯草杆菌。明胶液化试验某些细菌能分泌明胶酶分解明胶产生小分子物质，使培养基由凝固状态变成液态。淀粉水解后遇碘不再显蓝色。明胶液化试验某些细菌能分泌明胶酶分解明胶产生小分子物质，使培养基由凝固状态变成液态。接种：以无菌操作分别接种大肠杆菌、枯草杆菌于以上平板的各相应部位。掌握细菌生化反应试验的基本方法。培养：倒置于37℃培养48 h后观察结果。
菌于以上平板的各相应部位。 3. 培养：倒置于37℃培养48 h后观察结果。
淀粉水解试验示意图
淀粉水解后遇碘不再显蓝色。培养：置28℃培养48～120 h后观察结果。淀粉水解后遇碘不再显蓝色。掌握细菌生化反应试验的基本方法。
（二）明胶液化试验明胶液化试验结果观察观察试管明胶培养基是否液化及液化的形态。
枯草杆菌。器材 : 试管、小套管、培养皿、接种环、酒精灯、恒温培养箱
淀粉水解试验某些细菌能产生淀粉酶将淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，再吸收利用。
2. 接种：以无菌操作分别穿剌接种大肠杆菌、枯草杆标记：取淀粉培养基平板1块，在其左右两边分加标记大肠杆菌、枯草杆菌。
coli）、变形杆菌、枯草杆菌了解几种细菌鉴定中常用的生化反应及其原理。
菌至以上各相应试管中。明胶液化试验某些细菌能分泌明胶酶分解明胶产生小分子物质，使培养基由凝固状态变成液态。
掌握细菌生化反应试验的基本方法。了解几种细菌鉴定中常用的生化反应及其原理。
3. 培养：置28℃培养48～120 h后观察结果。培养基灭菌时要尽量排尽锅内冷空气，灭菌后要等锅内压力降到零再打开排气阀。

细菌生化反应实验报告

一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理。

2. 掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。

3. 熟悉生理生化反应在细菌鉴别中的实际应用。

二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长代谢过程中，通过酶催化作用，将底物转化为产物的化学反应。

这些反应能够反映细菌的代谢类型和生理特性，从而用于细菌的鉴定。

常见的细菌生理生化反应包括吲哚试验、甲基红试验、V-P试验、糖发酵试验等。

三、实验材料与仪器1. 菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌、枯草芽孢杆菌。

2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、V-P试剂、甲基红试剂、吲哚试剂。

3. 仪器：酒精灯、接种环、超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液枪、滴管。

四、实验步骤1. 接种：将菌种接种于相应的培养基中，37℃恒温培养箱中培养24小时。

2. 吲哚试验：取少量培养液，加入吲哚试剂，观察颜色变化。

3. 甲基红试验：取少量培养液，加入甲基红试剂，观察颜色变化。

4. V-P试验：取少量培养液，加入V-P试剂，观察颜色变化。

5. 糖发酵试验：将不同糖类培养基分别接种菌种，观察颜色变化。

五、实验结果与分析1. 吲哚试验：大肠杆菌和产气肠杆菌呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌呈现阴性反应。

2. 甲基红试验：大肠杆菌和产气肠杆菌呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌呈现阴性反应。

3. V-P试验：大肠杆菌和产气肠杆菌呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌呈现阴性反应。

4. 糖发酵试验：大肠杆菌和产气肠杆菌对葡萄糖、乳糖和蔗糖均呈现阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌对葡萄糖和乳糖呈现阴性反应。

六、实验结论通过本次实验，我们掌握了细菌生理生化反应的基本原理和实验方法。

通过对吲哚试验、甲基红试验、V-P试验和糖发酵试验的结果分析，我们可以初步判断出大肠杆菌和产气肠杆菌为阳性反应，普通变形菌和枯草芽孢杆菌为阴性反应。

这表明生理生化反应在细菌鉴别中具有重要的实际应用价值。

细菌的生化反应

• 应用：主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠杆菌科中沙门菌属，志贺军属，枸橼酸杆菌属，变形杆菌属等均为阳性，肠杆菌属，哈夫尼亚菌属为阴性。
6.V-P试验
• 结果：数分钟内出现红色为阴性，如无红色且35℃4h后仍不变为阴性。
• 应用：常与甲基红试验一起使用，因为前者为阴性，后者通常为阴性。
2、氧化-发酵试验（O/F试验）
• 结果：均无变化为产碱型或不分解糖型，均产酸为发酵型，仅不加石蜡的培养基产酸为氧化型。
• 应用：主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别，前者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。也可用于葡萄球菌与微球菌的鉴别。
3、β-半乳糖苷酶（ONPG试验）
• 结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20-30分钟内显色。
• 应用：主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。变形杆菌属，肺炎克雷伯菌属，摩根菌属，普罗威登斯菌属，幽门螺杆菌和结肠耶尔森菌阳性，而斯氏和产碱普罗威登菌阴性。
苯丙氨酸脱氨酶试验
• 结果：出现绿色为阳性。应立即观察结果，反应时间过长会褪色。
• 应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属，普罗威登斯菌属和摩根菌属为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。
细菌的生化反应
1、糖（醇，苷）类发酵试验
• 结果：若能分解糖（醇，苷）类产酸时，培养基的指示剂呈酸性反应。若产气可使液体培养基中倒管内或半固体培养基内出现气泡，固体培养基内有裂隙等现象。若不分解，培养基中除有细菌生长外，无任何其他生长变化。
• 应用：鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
1、明胶液化试验
• 结果：培养基呈液化状态为阳性。 • 应用：肠杆菌科细菌的鉴别，如普通变形

常用细菌生化反应试验

不发酵的V-P试验
总结词
详细描述
不发酵的V-P试验表示细菌不能发酵葡萄糖，不产生乙酰甲基甲醇，在试验中表现为无色。
有些细菌不能发酵葡萄糖，因此不产生乙酰甲基甲醇属、不动杆菌属等。不发酵的V-P试验有助于鉴别非发酵菌与肠杆菌科细菌。
临床意义
非发酵菌为医院感染的重要病原菌，可引起呼吸道、泌尿道、伤口等感染。
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感谢您的观看
检测细菌对酸性环境的适应能力，用于鉴别肠
道菌属。
试验原理
糖发酵试验
氧化酶试验
不同细菌含有不同的酶系，能够分解糖类产生酸性或碱性产物，通过指示剂变色反应判断细菌对糖类的代谢能力。
氧化酶催化过氧化氢分解为水和氧气，过氧化氢在铁离子存在下形成棕色沉淀，通过观察沉淀判断氧化酶活性。
触酶试验
甲基红试验
V-P试验阴性
总结词
V-P试验阴性表示细菌不能利用葡萄糖，不产生乙酰甲基甲醇，在试验中表现为无色。
详细描述
当细菌不能利用葡萄糖或不产生乙酰甲基甲醇时，V-P试验呈阴性。这通常表明该细菌不属于肠杆菌科，因为肠杆菌科细菌通常能够发酵葡萄糖并产生乙酰甲基甲醇。V-P试
验阴性有助于排除某些肠道细菌感染的可能性。
过氧化氢酶能催化过氧化氢分解为水和氧气，氧气在硫酸中形成白色沉淀，通过观察沉淀判断过氧化氢酶活性。
肠道菌属能够代谢糖类产生酸性产物，使培养基pH降低，加入甲基红指示剂后呈红色，通过观察颜色变化判断肠道菌属。
02 糖发酵试验
葡萄糖发酵试验
总结词
葡萄糖发酵试验是细菌生化反应试验中的一种，用于鉴别细菌对葡萄糖的代谢能力。
04 Voges-Proskauer试验

细菌常见的生化反应试验

细菌常见的⽣化反应试验细菌常见的⽣化反应试验（⼀）什么是⽣化试验?指通过利⽤⽣物化学的⽅法来测定微⽣物的代谢产物、代谢⽅式和条件等来鉴别细菌的类别、属种的试验。

⽣化试验或称⽣化反应：细菌的酶不完全相同，对营养物质的分解能⼒不⼀致，因此其代谢产物各异。

在培养基中加⼊可与被测终产物反应的指⽰剂，产⽣⾁眼可见的变化，如颜⾊的改变等，利⽤⽣化⽅法来鉴定细菌的试验，统称为细菌的⽣化试验或称⽣化反应（⼆）⽣化试验的⽅法：1在培养物中加⼊某种底物与指⽰剂,经接种、培养后,观察培养基的pH值变化。

2在培养物中加⼊试剂，观察它们同细菌代谢产物所⽣成的颜⾊反应。

3根据酶作⽤的反应特性，测定酶的存在。

4根据细菌对理化条件和药品的敏感性，观察细菌的⽣长情况。

（三）⽣化试验的注意事项1.待检菌应是新鲜培养物，培养18~24h。

2.待检菌应是纯种培养物。

3.遵守观察反应的时间。

观察结果的时间，多为24或48⼩时。

4.应做必要的对照试验。

5.提⾼阳性检出率，⾄少挑取2~3待检的疑似菌落分别进⾏试验。

（四）检验细菌的⽣化试验范围:1、糖（醇）类代谢试验 2、氨基酸和蛋⽩质代谢试验3、有机酸盐和铵盐的利⽤试验 4、呼吸酶类试验 5、毒性酶类试验⼆、糖醇类代谢试验（⼀）糖醇类发酵试验（⼆）葡萄糖氧化发酵（O/F）试验（三）V-P试验（四）甲基红（Methyl Red）试验MR（五）七叶苷⽔解试验（六）⽢油品红试验（⼀）糖醇类发酵试验1、原理：不同的细菌对各种糖醇的分解能⼒及所产⽣的代谢产物各不同，有的能分解多种糖(醇)，有的只能分解1~2种糖(醇)，有的分解糖(醇)能产酸产⽓，有的分解糖(醇)只产酸不产⽓，根据这些特点，可鉴别细菌。

常⽤的糖醇单糖：葡萄糖、⽢露糖醇、⽊糖、半乳糖⿏李糖双糖：乳糖、蔗糖、麦芽糖、蕈糖三糖：棉⼦糖多糖：菊糖、肝糖、淀粉醇类：⽢露醇、⼭梨醇、肌醇、卫茅醇2试验⽅法：⽤接种针或环移取纯培养物少许，接种于糖发酵管中，若为半固体培养基，则⽤接种针作穿刺接种。

微生物学检验细菌的生物化学实验

检测对象：特异性抗原
方法：直接凝集试验（玻片法）、荚膜肿
胀伤寒试杆验菌诊断血清 + 待检测细菌
（含抗伤寒杆菌抗体）
细菌凝集
玻片凝集试验：阳性
报告：检出伤寒杆菌
血清学诊断
试剂：含已知抗原应用：检测待检者血清中有无相应的抗体以及抗体的效价
球菌
种类: 革兰阳性葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎链球菌）、肠球菌属、微球菌属等革兰阴性奈瑟菌属、布兰汉菌属
四种革兰阳性菌的比较
葡萄球菌属微球属链球菌属气球菌属
排列方式葡萄串状、四联或成对链状成双或四联
触酶试验
+
+
-
弱+
氧化/发酵
厌氧生长
发酵 +氧化源自生长发酵 +发酵弱
葡萄球菌属
最常见的化脓性球菌医务人员的葡萄球菌带菌率高革兰阳性、葡萄串状排列产生不同的脂溶性色素触酶试验阳性发酵葡萄糖金黄色葡萄球菌是主要致病菌
培养基不变色：－应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
伏－普试验（V-P试验）
原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化合物。
培养基：葡萄糖蛋白胨水
结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色：－
应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
葡萄糖
甲基红试验
丙酮酸大量混合酸
pH降至4.4以下
甲基红试剂
培养基变红
葡萄糖
V－P试验

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告

细菌鉴定中常用的生理生化反应实验报告背景细菌鉴定是微生物学中的一项重要任务，通过对细菌的形态、生理特征和生化反应进行分析，可以确定细菌的种属和特性。

生理生化反应实验是其中的关键步骤，通过观察细菌对不同物质的代谢情况，可以获取有关其代谢能力、营养需求和产物生成等信息。

本报告旨在介绍常用的细菌生理生化反应实验方法，并分析实验结果以提供准确的鉴定和分类建议。

分析1. 嗜热/嗜冷性嗜热/嗜冷性是指细菌对温度的适应能力。

常用实验方法包括在不同温度条件下进行培养观察，并记录生长情况。

根据结果可将细菌分为嗜热菌（适宜高温）、嗜冷菌（适宜低温）或中温菌（适宜中等温度）。

2. 好氧/厌氧性好氧/厌氧性是指细菌对氧气需求的差异。

常用实验方法包括在含氧和不含氧的培养条件下观察细菌生长情况。

根据结果可将细菌分为好氧菌（需氧）、厌氧菌（不需氧）或兼性厌氧菌（能在有或无氧的条件下生长）。

3. 革兰氏染色革兰氏染色是观察细菌壁结构的常用方法。

该实验通过处理细菌样品，并使用革兰染色剂将其染色，然后观察其颜色变化。

根据结果可将细菌分为革兰阳性（蓝紫色）或革兰阴性（红粉色）。

4. 淀粉酶活性淀粉酶活性实验用于检测细菌对淀粉的降解能力。

该实验将待测细菌培养于含淀粉的琼脂平板上，经过一段时间后，用碘液滴定并观察是否出现透明圈。

透明圈表示淀粉被降解且产生了淀粉酶。

5. 水解酪蛋白活性水解酪蛋白活性实验用于检测细菌对酪蛋白的降解能力。

该实验将待测细菌培养于含酪蛋白的琼脂平板上，经过一段时间后，用盖有硫酸铜的试管放置在平板上，观察是否出现由蓝色转变为紫色的反应。

颜色变化表示细菌产生了水解酪蛋白酶。

6. 氧化/发酵代谢氧化/发酵代谢实验用于检测细菌在代谢过程中产生的产物。

该实验将待测细菌接种于含有碳源的培养基中，并根据pH指示剂颜色变化观察细菌是通过氧化代谢还是发酵代谢产生能量。

氧化代谢通常伴随着pH值升高，培养基呈碱性；而发酵代谢则通常伴随着pH值降低，培养基呈酸性。

细菌的生化反应

1. 葡萄糖酸盐试验1)原理：某些细菌可氧化葡萄糖酸钾，生成α-酮基葡萄糖酸。

α-酮基葡萄糖酸是一种还原性物质，可与班氏试剂起反应，出现棕色或砖红色的氧化亚铜沉淀。

(2)方法：将待检菌接种于葡萄糖酸盐培养基中(1ml)，置35℃孵育48h,加入班氏试剂1ml，于水浴中煮沸10min并迅速冷却，观察结果。

(3)结果：出现黄到砖红色沉淀为阳性。

不变或仍为蓝色为阴性。

(4)应用：主要用于假单胞菌的鉴定和肠杆菌科菌分群。

帮助属间鉴别、种间鉴别和沙雷菌属菌种的鉴定。

取待检菌大量接种培养基，35 ℃培养24-48h ，加斑氏试剂1ml，充分混匀，隔水加热煮沸10min ，观察结果。

产生黄-橙色沉淀为阳性，蓝色沉淀为阴性（5）质量控制肺炎克雷伯菌A TCC 27236阳性；大肠埃希菌A TCC 25922 阴性2 粘液酸利用试验培养基用于无动力不产气不发酵乳糖的大肠埃希菌与志贺菌属的鉴别。

前者多数为阳性，后者均为阴性取试验菌株18-24h 肉汤培养物1 环接种培养基。

35 ℃孵育1-2 周，每天观察结果。

培养基呈黄色为阳性表明细菌能利用粘液酸盐；若培养基不变色则为阴性[质量控制]大肠埃希菌A TCC 25922 阳性；痢疾志贺I 型A TCC 13313阴性3. 醋酸钠利用试验(1)原理：细菌利用铵盐作为唯一氮源，同时，利用醋酸盐作为唯一碳源时，可在醋酸盐培养上生长，分解醋酸盐生成碳酸钠，使培养基变为碱性。

（2)方法：将被检菌接种于醋酸盐培养基中，置35℃孵育2~7d，逐日观察结果。

(3)结果：培养基上有细菌生长，并变为蓝色为阳性。

（4）应用：主要用于大肠埃希菌和志贺菌属的鉴别，前者为阳性，而后者为阴性。

4. 葡葡糖铵培养基（1）成分：氯化钠5g硫酸镁（MgSO4•7H2O）0.2g磷酸二氢铵1g 磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000ml0.2%溴麝香草酚蓝溶液40ml pH6.8（2）制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。

常用细菌生化反应试验

细菌鉴定中常用的九个生化反应

实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察

细菌的生化试验

细菌生化实验报告

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常用细菌生化反应试验

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细菌鉴定中常用的生化反应实验

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细菌 的生化反应

常用细菌生化反应试验

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微生物学检验细菌的生物化学实验

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细菌的生化反应

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