紫外-可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程一、仪器准备1.打开紫外可见分光光度计,等待它进行自检。
2.检查仪器是否正常,包括光源、检测器、单色器等。
如有故障,请及时修复或更换。
3.将样品室清洁干净,并检查透射池是否干净。
如有污染,请用纯水和无尘纸擦拭。
二、仪器校准1.对紫外可见分光光度计进行校准。
校准包括零点校准和波长校准。
2.零点校准:使用纯溶剂(例如纯水或纯乙醇)进行零点校准。
在选定的波长下,将溶剂放入透射池中,点击“零点校准”按钮进行校准。
3.波长校准:使用已知浓度且吸收峰位清晰的标准品进行波长校准。
在选定的波长下,将标准品放入透射池中,点击“波长校准”按钮进行校准。
三、样品测试1.取出已经准备好的样品,在样品室中放入透射池。
2.选择合适的波长范围和波长值。
根据样品的吸收峰位和浓度范围,选择一个适当的波长范围。
四、测量样品吸光度1.点击“开始”按钮进行测量。
仪器将在选定的波长下自动扫描,显示吸光度曲线。
2.观察吸光度曲线,确定样品的吸收峰位和吸光度值。
五、数据处理和结果记录1.根据吸光度曲线,确定样品的吸光度值。
可以选择峰值吸光度或在特定波长下的吸光度值。
2.如果需要,可以进行数据处理,例如计算吸光度差、构建标准曲线等。
3.记录测量结果,包括样品名称、浓度、波长范围、吸光度值等信息。
六、仪器维护1.测量完毕后,及时清洁透射池和样品室,避免样品残留。
2.关闭紫外可见分光光度计,并将仪器盖上,以防尘埃进入。
3.定期维护仪器,例如清洁光源、调整灯泡亮度等。
七、注意事项1.在操作过程中,避免直接接触光源和检测器,以免引起损坏。
2.使用纯净溶剂进行校准,避免杂质对测量结果的影响。
3.在进行波长校准时,选择已知浓度且吸收峰位清晰的标准品,以确保测量结果的准确性。
4.在清洁透射池时,使用纯净水和无尘纸进行擦拭,避免使用有机溶剂和粗糙材质。
5.操作过程中避免碰撞和震动仪器,以免影响测量结果。
6.长时间不使用时,及时关闭仪器,以延长仪器寿命。
紫外可见分光光度计的使用方法
紫外可见分光光度计的使用方法1、电源开关,使仪器预热20分钟;▪仪器接通电源后,仪器即进入自检状态,自检结束后波长自动停在546nm处,测量的方式自动设定在透射比方式(%T),并自动调100%和0%T。
注意:①开机前,先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上。
光路上有东西将影响仪器自检甚至造成仪器故障。
②检查透过率模式下,挡光位置,透过率是否显示00.0%T。
否则要调整暗电流,按“0%T”键,使透过率显示为00.0%T。
返回对光位置时仍能显示100.0%T,否则重新调100%T。
通过“▲”和“▼”键,设定测试波长;按“100%T”键,使透过率显示为100.0%。
如果您要获得被测样品的透射比参数时(透射比方式):T2、按方式键“MODE”将测试方式设置为透射比方式:▪显示器显示“3、按波长设置键“▲”或“▼”设置您想要的分析波长,如340nm;▪按波长设置键“▲”或“▼”直到显示器显示“340nm xxx x%T”▪每当波长被重新设置后,请不要忘记调整“100.0%T”。
4、将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;▪比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米,大约25毫升。
否则,会影响测试参数的精确度。
▪被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。
5、打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。
▪一般情况下,参比样品放在样品架的第一个槽位中。
▪被测样品的测试波长在340nm—1000nm范围内时,建议使用玻璃比色皿,被测样品在190nm—340nm范围内时,建议适用石英比色皿。
▪仪器所附的比色皿,其透射率是经过测试和匹配的,未经匹配处理的,比色皿将影响样品的测试精确度。
▪比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。
否则,将影响样品的测试精确度。
6、将参比溶液推入光路中,按“100%T”键调整零ABS。
▪仪器在自动调整100%T的过程中,显示器显示“ 340nm Blank ...”当100.0%T调整完成后,显示器显示“340nm 100.0%T”7、将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的透射参比数。
紫外可见分光光度计安全操作及保养规程
紫外可见分光光度计安全操作及保养规程一、引言紫外可见分光光度计是一种用于测量液体或溶液样品的吸收或透过率的仪器。
为了确保正确操作和延长设备寿命,本文档将详细介绍紫外可见分光光度计的安全操作和保养规程。
二、安全操作规程1.戴好个人防护装备:在操作紫外可见分光光度计之前,必须戴上安全眼镜和实验室手套,以防止潜在的伤害和化学品对皮肤的损害。
2.确保电源和设备安全:在连接电源之前,确保电源电压和设备要求的电源电压相匹配。
确保电源插头没有损坏,并正确插入到设备插座中。
3.避免操作错误:在操作紫外可见分光光度计时,务必遵循操作手册中的指导和操作步骤。
操作过程中,不要随意调整设备设置或参数,以免对设备造成损害。
4.注意正确存储试剂和标本:在测量之前,确保试剂和标本正确存放并标记清楚。
避免使用已过期的试剂或受损的标本,以免对测试结果造成误差。
5.避免直接接触光源和样品槽:紫外光源会产生辐射,可能对眼睛和皮肤造成损害。
因此,避免直接注视或接触紫外光源。
同时,在操作样品槽时,避免直接接触样品或使用手指触碰,以防止污染和损坏样品槽。
6.正确清洁仪器:定期清洁紫外可见分光光度计以确保准确的测量。
在清洁过程中,使用适当的清洁剂和工具,按照操作手册中的指导进行清洁操作。
避免使用对设备有害的化学物质或工具。
三、保养规程1.定期校准设备:为了确保准确的测量结果,定期校准紫外可见分光光度计是非常重要的。
根据设备的要求,选择适当的校准方法和校准标准,对设备进行定期校准。
2.保持设备通风良好:紫外可见分光光度计在运行过程中会产生一定的热量。
因此,确保设备周围有足够的空间和通风条件,以保持设备正常工作温度并防止过热。
3.保持设备清洁和干燥:避免污染和湿气对设备的影响,定期清洁设备表面和内部。
在关机之前,确保设备彻底干燥,避免积水或污渍对设备造成损害。
4.定期维护和检查:定期检查设备的各个部件和连接。
确保电缆、插头、控制面板等没有损坏或松动。
紫外可见光分光光度计操作规程
1 仪器的使用1.1 将设备平稳地安置在一个通风,无阳光直射,干净整洁的房间内,空压机与设备保持一定的距离,最好分室而放。
1.2 打开箱盖,搁置好漏斗架,将集雾器上的硅胶管分别和对应的漏斗接好。
1.3 连接设备及空压机的电源。
打开仪器电源开关,面板低水位指示灯亮,在底部加蒸馏水至面板左边低水位指示灯灭为止。
1.4 安装喷雾系统,样品架,并将样品放置于样品架上。
1.5 在密封槽内加入适量蒸馏水,盖上箱盖。
在空气饱和器内加入蒸馏水或去离子水,水位高度以液面计上部4/5为准。
1.6 从盐水加入口加入配置好的浓度为5%的盐溶液。
1.7 检查各种管道的连接状况,将排雾管用软管引出使盐雾排出室外或下水道。
1.8 打开运转开关,按标准设定好试验温度及饱和器温度值,设定好试验时间。
1.9 将空压机的出气口与设备第一级调压阀连接,打开空压机电源充气。
打开连续开关,调节压力到规定范围:进气压力0.4~0.5mPa之间;喷雾压力0.07~0.17mPa之间。
(一般情况下无需调节)连续喷雾即开始运行。
.如需“间隙”喷雾时,关闭连续开关,打开间隙开关,分别设定好喷雾时间值、停喷时间值,间隙喷雾即开始运行。
1.10 试验结束设备自动停止,应先切断设备和空压机电源,待取出样品后,将饱和器、箱体及盐水箱中的水全部排掉,并用清洁的水将整个箱体冲洗干净。
1.11 仪器使用开始前和结束后,操作人员应对仪器的状态进行检查,并认真填写使用记录。
2 仪器的维护和保养2.1保持设备外观整洁,干净。
2.2试验完毕后清洗试验室内部,并将加热水槽内水排放使箱内清洁,尽量使试验箱处于干燥环境中。
2.3定期更换饱和器内存水。
若长久不做试验,打开饱和器将水放光。
2.4定期对空气压缩机加润滑油,并定期检查空气调节阀功能。
2.5长期未使用情况下重新开机做试验,应先对全部电气系统进行检查。
2.6控制面板上的的电器元件,如发生故障需要调换,应在厂家的指导下进行,以免造成不必要的麻烦。
紫外分光光度计正确操作流程
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紫外分光光度计正确操作流程
紫外分光光度计正确操作流程
紫外可见分光光度计是一种应用很广泛的分析仪器。
它的应用涉及制药、
yi疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、
计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学,以及生产中的质量控制,
原材料和产品检验等各个方面。
紫外-可见分光光度计可以用于定性分析、纯
度检查、结构分析、络合物组成分析、稳定常数的测定、反应动力学研究等。
紫外分光光度计正确操作流程:
1.接通电源,打开分光光度计开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至"1"档(若零点调节器调不到"0"时,需选用较gao档。
)
3.根据所需波长转动波长选择钮。
4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样
品室内,使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。
6.盖上暗箱盖,调节"100"调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步
拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程
《紫外可见分光光度计操作规程》
一、工作准备
1. 开机前检查:清洁光栅、检查光源和探测器是否正常。
2. 准备标准溶液:根据实验需要准备好待测溶液和标准溶液并进行标定。
3. 准备样品:将待测溶液转移至透明的玻璃试管或石英比色皿中。
二、仪器调节
1. 打开光度计:按照仪器说明书操作,打开光度计,等待仪器预热。
2. 调节参比通道:选择适当的参比波长,并将参比通道调至零点。
3. 调节样品通道:选择待测波长,并将样品通道调至零点。
三、测量操作
1. 测量样品:将待测溶液装入样品比色皿中,放入光度计样品槽内。
2. 执行测量:按照操作说明,进行测量并记录数据。
3. 清洗仪器:测量完成后,及时清洗样品比色皿和样品槽。
四、数据处理
1. 计算浓度:根据测量数据和标定曲线,计算样品的浓度。
2. 记录结果:将浓度及测量数据记录在实验记录表中。
五、仪器关闭
1. 关闭光度计:根据操作说明,正确关闭光度计。
2. 清洁仪器:清洁光度计表面和槽口,保持仪器干净整洁。
通过以上操作规程,能够正确、准确地操作紫外可见分光光度计,为实验数据的获取和分析提供可靠的支持。
同时,也能够保护和延长仪器的使用寿命。
紫外可见分光光度计操作流程及校准方法及操作规程
紫外可见分光光度计操作流程及校准方法及操作规程紫外可见分光光度计操作流程及校准方法紫外分光光度计就是依据物质的吸取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。
物质的吸取光谱就是物质中的分子和原子吸取了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸取光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸取光谱曲线,可依据吸取光谱上的某些特征波优点的吸光度的高处与低处判别或测定该物质的含量。
紫外可见分光光度计认真操作流程及校准方法:一、紫外可见分光光度计光度测量在模式选择屏幕中选择 1.Photometric光度选项,将显示参数配置屏幕;用GOTOWL键设定测量波长;按F2键设定进样掌控;按START/STOP键时,测量开始,显示测量屏幕;如需做空白校正,应在测量前先设置空白样品,然后,按AUTO—ZERO键,将测量值置为OABS(100%);二、紫外可见分光光度计校正开机预热10分钟足矣;放入黑块和标样(没有的本身配),关闭盖子;校0;把灯光对着黑块,把透光度调0;把灯光对标样,将吸光度调到100%;三、参比溶液介绍参比溶液又称空白溶液。
测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相像的溶液。
通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。
有时,基体中,虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必需保证其不影响测试。
常常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必需经过纯化将其除去。
否则将影响测定结果。
四、紫外可见分光光度计使用注意事项1.开机前应先预热15分钟,然后开机自检;2.湿度要掌控在75%左右,温度在5~30度之间;3.仪器要稳压电源,接地要好。
并且避开阳光直接照射;5.常见故障及处理方法:光门不能完全关闭:修复光门部件,使其完全关闭;透过率“100%”旋到底了。
紫外可见分光光度计操作步骤及注意事项简介
紫外可见分光光度计操作步骤及注意事项简介操作步骤操作之前1.1开启电源进行初始化开启主机电源,分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化,如下图所示。
所有项目检测完毕,初始化结束,整个过程大约需要4min(若使用多池检测需5min)。
每个项目进行初始化操作时将被加亮显示,当初始化完成后,该项右边的星标也将加亮显示。
但是,如果检测到任何异常,初始化过程将立即中止,星标也不会加亮显示。
1.2屏幕显示和触摸键盘UV-1700的触摸键盘图可用数字键0~9和功能键F1~F4选择不同屏幕中的模式和设置。
选择时,按下相应的数字键或功能键即可,无需按ENTER键确认。
此外,输入数值时,如波长设置或显示模式等,必须按ENTER键确认输入值。
下面介绍每个键的基本功能,在不同屏幕下有一些键可能被赋予特殊的功能。
①START/STOP键一旦参数设置完成,可用该键开始和停止测量过程。
②AUTO ZERO键按该键,当前波长的吸光度自动调整为0(100%T)。
测量前,必须确保在样品侧和参比侧中都放有盛有空白的比色池。
③GOTOWL键该键可用来改变当前的波长。
④ENTER键输入数值后,按该键确认。
⑤Cursor光标键(<(-),>)这组键可控制液晶显示屏幕中光标的左右移动。
输入数值时,左光标键还可以用来输入负值(-)。
⑥Function功能键(F1~F4)这组键的功能与液晶显示屏幕下方所显示的功能相对应。
⑦RETURN键按下该键可返回当前屏幕的前一屏。
⑧MODE键用该键可从每种测量模式的参数设置屏返回到主模式屏。
⑨Print打印键用该键可输出当前屏幕显示的硬拷贝。
⑩Numeric数字键用该键可输入数值?CE键用该键可清除数值输入错误。
按该键,已输入的数值将被清除,可重新输入正确的数值。
模式选择和共享操作初始化完成后即显示模式选择屏幕各种模式概述:在模式选择屏幕下选择各种测量模式,即显示各自的参数配置屏幕。
①光度模式在固定波长下测量样品的吸光度或%透光率。
紫外可见分光光度计的标准操作规程
制药GMP管理文件一、目的:建立紫外/可见分光光度计的操作规程,保证正确操作。
二、适用范围:适用于紫外/可见分光光度计的操作。
三、职责:质检员对本标准的实施负责。
四、正文:1 操作方法:1.1 打开主机电源开关,在仪器初始化后,按“ENTER”键进入光度测量主界面。
1.2 设定测量模式。
在光度测量主界面下,按下“SET”键进入测量模式选择界面,选定所需测量模式后按“ENTER”键,则“√”移动到相应模式的后面,此时按“ERTURN”键返回上一级界面。
1.3 设定工作波长。
在光度测量主界面下,按“GOTO”键可进入波长设定界面,在界面的底部提示信息处用0—9和小数点输入波长,输入完后按“ENTER”键返回上一级界面。
(注:输入值范围为190—1100nm,否则无效视为无效数据应重新输入。
)1.4 进行自动校零。
在光度测量主界面下,按“ZERO”键对当前工作波长下的的空白液进行调0.000Abs、100%T1.5 进行测量。
在光度测量主界面下,当调零完毕后,把待册试样拉入光路,按“START”键进入测量界面,再次按“START”键可在当前工作波长下对样品进行测量。
1.6 数据清除。
如数据以村满(共50个数据)或者想清除以测量数据,可在测量结果显示界面下按“CLEAR”键,选择“确认”后,即可清除数据,然后选择“ENTER”键,系统返回上一级界面。
1.7数据打印。
在测量结果显示界面下,可直接按“PRINT”键进行打印设定界面,把光标移到“确认打印”上,按“ENTER”键后系统打印,打印后,系统和屏幕数据将自动清除。
1.8 操作完毕关闭电源。
T6紫外可见分光光度计操作规程
T6紫外可见分光光度计操作规程T6紫外可见分光光度计操作规程⼀、开机⾃检:打开仪器主机电源,仪器开始初始化;约3分钟时间初始化完成。
初始化完成后,仪器进⼊主菜单界⾯。
⼆、进⼊光度测量状态:按键,进⼊光度测量界⾯。
三、进⼊测量界⾯:按键进⼊样品测定界⾯。
四、设置测量波长:按键,输⼊测量的波长,按键确认,仪器将⾃动调整波长。
五、进⼊设置参数:按键进⼊参数设定界⾯,按键使光标移动到“试样设定”,按键确认,进⼊设定界⾯。
六、设定使⽤样品池个数:按键使光标移动到“使⽤样池数”,按键循环选择需要使⽤的样品池个数。
七、样品测量:按键返回到参数设定界⾯,再按键返回到光度测量界⾯。
在1号样品池内放⼊空⽩溶液,2号池内放⼊待测样品。
关闭好样品池盖后按键进⾏空⽩校正,再按键进⾏样品测量。
如果需要测量下⼀个样品,取出⽐⾊⽫,更换为下⼀个测量的样品按键既可读数。
如果需要更换波长,可以直接按键,调整波长。
如果每次使⽤的⽐⾊⽫数量是固定个数,下⼀次使⽤仪器时可以跳过第五、六步骤直接进⼊样品测量。
注意:更换波长后必须重新按进⾏空⽩校正。
⼋、结束测量:测量完成后记录数据, 退出程序或关闭仪器后测量数据将消失。
确保已从样品池中取出所有⽐⾊⽫,清洗⼲净以便下⼀次使⽤。
按键直到返回到仪器主菜单界⾯后再关闭仪器电源.【引⼊】⽔杨酸(2-羟基苯甲酸;2-Hydroxybenzoic acid):存在于⾃然界的柳树⽪、⽩珠树叶及甜桦树中,为⽩⾊结晶性粉末,⽆臭,味先微苦后转⾟。
熔点157-159℃。
⽔杨酸⽔溶液的pH值为2.4。
⽔杨酸与三氯化铁⽔溶液⽣成特殊的紫⾊。
紫外分光光度法测定⽔杨酸的含量1.仪器1.1紫外分光光度计(T6)1.2⽯英⽐⾊⽫(1cm):2个1.3容量瓶(100mL):7只1.4吸量管(1 mL、2 mL、5 mL、10mL):各1只2.试剂2.1⽔杨酸标准溶液(1mg/mL);2.2未知液:浓度约为50~55。
3.实验操作3.1吸收池配套性检查⽯英吸收池在220nm装蒸馏⽔,以⼀个吸收池为参⽐,调节为100%,测定另⼀吸收池的透射⽐,其偏差应⼩于0.5%,可配成⼀套使⽤,记录第⼆⽐⾊⽫的吸光度值作为校正值。
紫外-可见分光光度计的正确使用方法
紫外-可见分光光度计的正确使用方法
紫外-可见分光光度计是一种常见的实验室仪器,用于测量化学物质在紫外和可见光区域的吸收光谱。
正确使用该仪器需要以下步骤:
一、仪器准备
1. 打开仪器电源,等待仪器自检完成。
2. 打开仪器软件,选择合适的测量模式。
3. 准备好样品,将其转移到透明的石英或玻璃比色皿中。
二、样品测量
1. 将比色皿放入样品室中,调整样品室的位置,使其与光路对齐。
2. 选择合适的波长范围和波长,调整仪器的光路,使其与样品室中的样品对齐。
3. 点击“开始测量”按钮,仪器会自动扫描样品的吸收光谱,并将结果显示在屏幕上。
4. 根据需要,可以保存测量结果或者进行数据处理。
三、仪器维护
1. 每次使用后,应该清洗样品室和比色皿,以防止样品残留影响下次测量。
2. 定期校准仪器,以保证测量结果的准确性。
3. 保持仪器干燥、清洁和安全,防止损坏和事故发生。
以上是紫外-可见分光光度计的正确使用方法,希望对您有所帮助。
紫外可见分光光度计的操作规程
紫外可见分光光度计的操作规程一、仪器及试剂准备1.确保仪器所在的工作台或使用环境整洁干净,确保工作台上无烟灰、灰尘等对结果产生干扰的物质。
2.检查仪器各个部分的连接是否牢固,仪器表面是否有损坏或污损情况。
3.检查紫外可见分光光度计所需的试剂是否充足,试剂是否过期。
二、做样品前的准备1.根据实验要求,选取适当的溶剂,将待测试样品溶解或稀释至适当浓度。
如果有特殊要求,还需要进行滤液作业。
2.确保样品容器干净,没有异物或杂质。
三、仪器开机及预热1.确认紫外可见分光光度计与电源连接正常,开启电源开关。
2.打开仪器电源后,等待其自检完成,确保各个部分的功能正常。
3.操作前预热,大多数仪器需要预热一段时间,以确保仪器能够达到工作温度,并保持稳定。
四、波长设置及基线调整1.根据实验要求,在键盘上设置所需的波长。
2.将试剂添加至样品池中,调节“调零”钮,使仪器显示为零吸光度。
五、样品测定1.将校准好的样品注入样品池中,确保样品池干净、无气泡。
2.调整仪器使其显示所需波长,并进行基线调整。
3.测量前,用空白试剂进行零点矫正,将试剂加入样品池中,点击“零位调整”按钮。
4.加入待测试样品后,点击“测量”按钮,以获取样品的吸光度值。
5.如需多次测量,应按要求将样品室清洗干净,然后重复上述步骤。
六、数据处理1.根据实验要求,对所得的吸光度数据进行计算,如浓度计算等。
2.准确记录实验所得数据,包括吸光度值、浓度等。
七、仪器关闭及清洁1.测量结束后,关闭仪器电源开关。
2.清除样品池中的试剂,用洁净的纸巾或棉签擦拭样品池。
3.用干净的棉布或纸巾清洁仪器表面,以确保仪器干净整洁。
4.如有需要,关闭其他仪器配件,如电源、冷光源等。
八、故障排除总结:紫外可见分光光度计的操作规程包括仪器及试剂准备、做样品前的准备、仪器开机及预热、波长设置及基线调整、样品测定、数据处理、仪器关闭及清洁和故障排除等步骤。
在操作过程中需要注意仪器的正确使用和维护,以确保实验的准确性和仪器的正常运行。
紫外-可见分光光度计操作规程
紫外-可见分光光度计操作规程(TU1810)1.目的:制订本标准的目的是为规范检验人员在质量检验过程中的操作,保证检验结果的正确性。
2.适用范围:本标准适用于二厂检验员对产品质量的检验。
3.职责:QC检验员对本标准的实施负责。
4.程序:4.1简述紫外-可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁,它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯—比耳定律(Lambert—Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时,溶液的吸光度是吸光物质的浓度及吸收介质厚度(吸收光程)的函数。
其常用表达式为,式中为系数:A=ε·ι·C式中A为吸光度;ε为吸收系数;C为溶液浓度;ι为光路长度。
如溶液的浓度(C)为1%(g/ml),光路长度(L)为1cm,相应的吸光度即为吸收系数以E cm%11表示。
如溶液的浓度(C)的摩尔浓度(mol/L),光路长度为1cm时,则相应有吸收系数为摩尔吸收系数,以ε表示。
4.2 仪器紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。
根据光路设计的不同,紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
4.2.1 仪器测量条件选择1.测量波长的选择通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长,称为最大吸收原则,以获得最高的分析灵敏度。
而且在λmax附近,吸光度随波长的变化一般较小,波长的稍许偏移引起吸光度的测量偏差较小,可得到较好的测定精密度。
但在测量高浓度组分时,宁可选用灵敏度低一些的吸收峰波长(ε较小)作为测量波长,以保证校正曲线有足够的线性范围。
如果λmax所处吸收峰太尖锐,则在满足分析灵敏度前提下,可选用灵敏度低一些的波长进行测量,以减少比耳定律的偏差。
紫外_可见分光光度计操作规程完整
紫外-可见分光光度计操作规程(TU1810)1.目的:制订本标准的目的是为规检验人员在质量检验过程中的操作,保证检验结果的正确性。
2.适用围:本标准适用于二厂检验员对产品质量的检验。
3.职责:QC检验员对本标准的实施负责。
4.程序:4.1简述紫外-可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁,它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯—比耳定律(Lambert—Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时,溶液的吸光度是吸光物质的浓度及吸收介质厚度(吸收光程)的函数。
其常用表达式为,式中为系数:A=ε·ι·C式中A为吸光度;ε为吸收系数;C为溶液浓度;ι为光路长度。
如溶液的浓度(C)为1%(g/ml),光路长度(L)为1cm,相应的吸光度即为吸收系数以E cm%11表示。
如溶液的浓度(C)的摩尔浓度(mol/L),光路长度为1cm时,则相应有吸收系数为摩尔吸收系数,以ε表示。
4.2 仪器紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。
根据光路设计的不同,紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
4.2.1 仪器测量条件选择1.测量波长的选择通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长,称为最大吸收原则,以获得最高的分析灵敏度。
而且在λmax附近,吸光度随波长的变化一般较小,波长的稍许偏移引起吸光度的测量偏差较小,可得到较好的测定精密度。
但在测量高浓度组分时,宁可选用灵敏度低一些的吸收峰波长(ε较小)作为测量波长,以保证校正曲线有足够的线性围。
如果λmax所处吸收峰太尖锐,则在满足分析灵敏度前提下,可选用灵敏度低一些的波长进行测量,以减少比耳定律的偏差。
紫外-可见分光光度计操作规程
操作规程
紫外-可见分光光度计操作规程
一、调试
判定。
(一)打开电源开关,预热30m式:透射比(T),吸光度
(A),已知标准样品浓度值方式(C)和已知标准样品斜
率方式(F)
(三)转动波长旋钮,观察波长显示窗,调节至需要的测
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谢谢
量波长。
紫外-可见分光光度计操作规程
一、调试
判定。
(四)将参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中,
打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,
盖上样品室盖。一般情况下,参比样品放在第一个槽位中。
比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹,被测溶液中
不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品测试的精度。
紫外-可见分光光度计操作规程
二、测量
判定。 用待测溶液洗涤比色皿2-3次,将待测溶液倒入比色皿, 溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透面擦拭干净, 按一定方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动 样品架拉杆使其进入光路。读取测量数据。
紫外-可见分光光度计操作规程
三、测量完毕
判定。 (一)测量完毕,清理样品室,将比色皿清洗干净,倒置 晾干后收起。 (二)关闭电源,盖好防尘罩,结束实验。
紫外-可见分光光度计操作规程
一、调试
判定。
(五)调节100%T/A
先用空白溶液洗涤比色皿2-3次,将空白溶液倒入比色皿, 溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透面擦拭干净, 按一定方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动 样品架拉杆使其进入光路。
按下调100.0%键,屏幕显示“BLA”延时数秒出现 “100.0”(T模式)或 “000.0”、“-000.0”。(A模 式)调节100%T/A完成
紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程1、目的:建立TU-1810PC紫外可见分光光度计的操作规程,使检测员正确使用TU-1810PC紫外可见分光光度计。
2、适用范围:在190-900nm范围内对溶液进行比色分析。
3、责任人:检测员。
4、正文:4.1操作步骤4.1.1开机:依次打开计算机,打印机, 主机电源。
4.1.2仪器初始化:打开软件,仪器进行自检,大约需要三分钟。
如果自检各项都显示“正确”,预热半小时后,便可进入以下操作。
4.1.3光度测量4.1.3.1 参数设置:进入光度测量,设置光度测量参数:1、相应的波长值(从长波到短波);2、测量方式(一般为Abs);3、重复测量几次,是否取平均株,单击确认键退出设置参数。
4.1.3.2校零:单击校零,将第一个样品池放入参比溶液,单击确认。
校完后,取出参比溶液。
4.1.3.3 测量:倒掉取出的参比溶液,放入样品溶液,单击开始;即可测出样品的Abs值。
4.1.4光谱扫描4.1.4.1 参数设置:单击光谱扫描,并设置光谱扫描参数,1、波长范围(先输长波再输短波);2、测量方式(一般为Abs);3、扫描速度(一般为中速);4、采样间隔(一般为1nm或0.5nm);5、记录范围(一般为0-1)。
单击确认退出参数设置。
4.1.4.2 基线校正:单击基线,将一个样品池放入参比溶液,单击确认,校完后单击保存存入基线,取出参比溶液。
4.1.4.3 扫描:倒掉取出的参比溶液,放入样品单击开始,进行扫描,当扫描完毕后,查看检出图谱的峰、谷波长值及Abs值。
4.1.5 定量测量4.1.5.1参数设置:单击定量测量,设置具体参数:1、测量模式(一般为单波长);2、输入测量波长;3、单击校正曲线:①选择曲线方程;②选择浓度单位;③选择方程次数(一般为一次方程);④选择是否插入零点;单击确认退出参数设置。
4.1.5.2 校零:单击校零,将一个样品池放入参比溶液,单击确认,校完后,取出参比溶液。
UV紫外可见分光光度计操作说明
UV1801紫外-可见分光光度计操作一、打开仪器主机右侧电源开关稍等约十几秒钟,在仪器的屏幕上出现一个提示“请按键”,说明仪器可以进行自检或连接计算机自检。
二、仪器操作(1)、仪器所有操作不联接计算机1、仪器操作不连接计算机按仪器面板键盘上除“”的其他任意键,仪器进行自检(大约时间2分钟)。
蓝色液晶显示大屏幕上会出现下列图示情况仪器使用之前保证有一个平的工作台、稳定的电压,仪器后边离墙约20cm左右,开机后等仪器蓝色液晶大屏幕上五项都显示“OK”后,最好预热时间20分钟以上使用。
按任意键进入仪器操作主菜单。
2、光度测量用指垛按数字键1,进入“波长扫描”;按数字键2,进入“光度测量”;按数字键3,进入“定量分析”……依次,按数字键6,进入“系统设置”。
按仪器面板上参数设置键“F1”,进入“参数设置”比色皿校正,一般看测定要求高低,如果不高的话,可以关着,如果需要则打开。
当手形指示位置按左右键可以更改。
输入你所用除参比溶液比色皿的个数,如是1,则说明是一套2只比色皿,直接按面板上“F2”,进行比色皿套性测量;如共是4只,则按面板上“3”,再按“F2”进行比色皿套性测量;最后测完,如图显示。
继续按F2进行后边的样品测定。
(注:要求每一个比色皿都要装上相同的溶液,以第一个做参比,按照面板提示进行操作,特别提醒的是比色皿的顺序和方向在测定的过程中都不能再改变。
)其实其他的功能操作同上面的基本相似,只要按“上下”方向键可使手形指示图标到相应的位置,打开对应的标签,按照面板提示,选择或输入所需波长及其他参数,按“Enter”键进行编辑确认。
(2、仪器所有操作联接计算机打开计算机桌面上的,会出现下面的界面。
点击界面上的“设置”,选择端口、输入仪器后边编号(序列号)进行计算机和仪器的测试联接(一般仪器会自动选择连接端口,如不能连接,可检查端口连接线的联接状况、人为选择端口或重新启动计算机进行连接)。
确定后,在计算机屏幕右下方会出现一个信息窗口(如下图),会显示仪器编号(序列号),说明计算机和仪器联接已经建立。
TU-1901紫外可见分光光度计操作规程
TU-1901/1900操作规程一、开机1.1 依次打开打印机、计算机,Windows完全启动后,打开主机电源。
二、仪器初始化2.1在计算机窗口上双击图标,仪器进行自检,大约需要四分钟。
如果自检各项都“”,软件自动进入工作界面,预热半小时后,可以进行测量工作。
三、测量A:光度测量参数设置:单击按钮(上方或左侧),进入光度测量。
单击设置光度测量的参数:具体输入:1.清除以有的波长点,输入要测量的波长值(从长波到短波)添加到测量波长点内;2.重复测量次数,是否计算平均值,SD,RSD,等要求;3.选择光度模式(一般为T%或Abs);4.单击退出参数设置,进行测量。
校零和测量:单击,将两个样品池中都放入参比溶液,单击。
仪器自动完成校零,校零完成后,取出外池的参比溶液。
倒掉取出的参比溶液,放入样品溶液,单击;即可测出样品的Abs 或T%值。
测量完成后,可以随时进行打印或保存。
B:光谱扫描参数设置:单击,(上方或左侧)进入光谱扫描。
单击,设置光谱扫描参数,具体输入:1.波长范围(先输长波再输短波);2.测光方式(一般为T%或Abs);3.扫描速度(一般为中速);4.采样间隔(一般为1nm或0.5nm);5.显示范围(一般为0--1)。
6.单击退出参数设置。
基线校正:单击,将两个样品池中都放入参比溶液单击,校零完成后单击存入基线,取出外池的参比溶液。
样品的光谱扫描:倒掉取出的参比溶液,放入样品单击进行扫描,当扫描完毕后,单击查看检出图谱的峰、谷相对应的波长值及Abs值。
可以根据需要,调整阈值增加或减少检出的峰和谷数量测量完成后,可以随时进行打印或保存。
C:定量测量参数设置单击(上方或左侧),进入定量测量;单击,设置具体参数:1、测量方法(一般为单波长);输入要测量的波长点;2、重复测量次数3、在校正曲线菜单下:选择曲线方式(一般为C =K0A+K1…)方程次数;浓度单位,校正方法。
一般为浓度法。
4、单击退出参数设置,校零将两个样品池中都放入参比溶液,单击校零,校零完成后,取出外池参比溶液。
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紫外-可见分光光度计操作规程(TU1810)1.目的:制订本标准的目的是为规范检验人员在质量检验过程中的操作,保证检验结果的正确性。
2.适用范围:本标准适用于二厂检验员对产品质量的检验。
3.职责:QC检验员对本标准的实施负责。
4.程序:4.1 简述紫外-可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁,它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯—比耳定律(Lambert—Beer)是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法定量分析的依据和基础。
当入射光波长一定时,溶液的吸光度是吸光物质的浓度及吸收介质厚度(吸收光程)的函数。
其常用表达式为,式中为系数:A=ε·ι·C式中A为吸光度;ε为吸收系数;C为溶液浓度;ι为光路长度。
如溶液的浓度(C)为1%(g/ml),光路长度(L)为1cm,相应的吸光度即为吸收系数以E cm%11表示。
如溶液的浓度(C)的摩尔浓度(mol/L),光路长度为1cm时,则相应有吸收系数为摩尔吸收系数,以ε表示。
4.2 仪器紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。
根据光路设计的不同,紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
4.2.1 仪器测量条件选择1.测量波长的选择通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长,称为最大吸收原则,以获得最高的分析灵敏度。
而且在λmax附近,吸光度随波长的变化一般较小,波长的稍许偏移引起吸光度的测量偏差较小,可得到较好的测定精密度。
但在测量高浓度组分时,宁可选用灵敏度低一些的吸收峰波长(ε较小)作为测量波长,以保证校正曲线有足够的线性范围。
如果λmax所处吸收峰太尖锐,则在满足分析灵敏度前提下,可选用灵敏度低一些的波长进行测量,以减少比耳定律的偏差。
2.适宜吸光度范围的选择任何光度计都有一定的测量误差,这是由于测量过程中光源的不稳定、读数的不准确或实验条件的偶然变动等因素造成的。
由于吸收定律中透射比T与浓度C是负对数的关系,从负对数的关系曲线可以看出,相同的透射比读数误差在不同的浓度范围中,所引起的浓度相对误差不同,当浓度较大或浓度较小时,相对误差都比较大。
因此,要选择适宜的吸光度范围进行测量,以降低测定结果的相对误差。
在实际工作中,可通过调节待测溶液的浓度或选用适当厚度的吸收池的方法,使测得的吸光度落在所要求的范围内。
3.仪器狭缝宽度的选择狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性范围。
狭缝宽度过大时,入射光的单色光降低,校准曲线偏离比耳定律,灵敏度降低;狭缝宽度过窄时,光强变弱,势必要提高仪器的增益,随之而来的是仪器噪声增大,于测量不利。
选择狭缝宽度的方法是:测量吸光度随狭缝宽度的变化。
狭缝的宽度在一个范围内,吸光度是不变的,当狭缝宽度大到某一程度时,吸光度开始减小。
因此,在不减小吸光度时的最大狭缝宽度,即是所欲选取的合适的狭缝宽度。
4.3 紫外-可见分光光度计的检定4.3.1 波长示值误差与重复性仪器波长示值误差指标为±0.3nm,波长重复性指标为0.2nm,您可以用仪器氘灯的两条特征谱线检验,具体检验方法如下:①确认仪器光谱宽带为“2.0nm”。
开机初始化完成后,按数字5键进入系统应用界面,在系统应用界面中按数字键2强狭缝设定为“2.0nm”。
②在系统应用界面按RETURN键返回仪器主界面,按2键选择光谱测量功能。
③按F1键选择参数设定功能,按相应数字键设定采样间隔为0.2nm、扫描速度为中速、波长范围为660nm~480nm、纵坐标范围0-100、测光方式Es、光源选择氘灯④按RETURN键返回光谱扫描界面。
⑤按START/STOP键并输入增益值为6,按ENTER键确认,开始扫描。
⑥扫描结束后,按F2键并输入阈值(1~100)后,按ENTER键进行峰值检出(如果检出峰波长为0.000nm,则需要按键返回,然后重新按F2键输入比前次输入小的数值作为阈值,重新进行峰值检出)⑦按F4键打印输出重复扫描三次,并做峰值检出,氘灯的两个峰标准值为656.1nm和486.0nm。
4.3.2基线平直度样品池中不放任何遮挡物,以空气为空白进行测量,用波长扫描功能测量全波段的吸光度值,其具体测量方法如下①首先确认仪器光谱宽带为2.0nm②在仪器主界面俺2键选择光谱测量模式③按F1键进入参数设置界面,按相应的数字键设置测光方式Abs、采样间隔为1nm、扫描速度为中速、波长范围为1100~190nm、纵坐标范围为-0.01Abs~.0.01Abs④按RETURN键,返回光谱测量主界面,按AUTOZERO键进行基线校正。
⑤按START/STOP键进行扫描⑥按F4键打印输出。
读取曲线的吸光度值,在1090nm~200nm波长,测量扫描图谱中起始点与最大偏移之差即为仪器的基线平直度。
分光光度法允差范围测定透光率,应符合下表中规定。
4.4.1 计算分光光度法按《中国药典》规定,计算分光光度法一般不宜用于含量测定,对于少数采用计算分光光度法的品种,应严格按各品种项下规定的方法进行。
用本法时应注意:有一些吸光度是在待测成分吸收曲线的上升或下降陡坡处测定,影响精度的因素较多,故应仔细操作,尽量使供试品和对照品的测定条件一致。
若该品种不用对照品,如维生素A测定,则应在测定前对仪器作仔细的校正和检定。
4.4.2 比色法供试品本身在紫外-可见光区没有强吸收,或在紫外光区虽有吸收但为了避免干扰或提高灵敏度,加入适当的显色剂,使反应产物的最大吸收移至可见光区。
用比色法测定时,由于显色是影响显色深浅的因素较多,应取供试品与对照品或标准品同时操作。
除另有规定外,比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供试品溶液,然后依次加入等量的相应试剂,并用同样方法处理。
当吸光度和浓度关系不呈良好线性时,应取数份梯度量对照品溶液,用溶剂补充至同一体积,显色后测定各份溶液的吸光度,然后以吸光度与相应的浓度绘制标准曲线,再根据供试品的吸光度在标准曲线上查得其相应的浓度,并求出其含量。
4.5 注意事项4.5.1 试验中所用的量瓶和移液管均应经检定校正、洗净后使用。
4.5.2 使用的石英吸收池必须洁净。
当吸收池中装入同一溶剂,在规定波长测定各吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配对使用,否则必须加以校正。
4.5.3 取吸收池时,手指拿毛玻璃面的两侧。
装样品溶液的体积以池体积的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无残留溶剂,为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面,可先用醮有空白溶剂的擦镜纸擦拭,然后再用干擦镜纸拭净。
吸收池放人样品室时应注意每次放入方向相同。
使用后用溶剂及水冲洗干净,晾干,防尘保存,吸收池如污染不易洗净时可用硫酸发烟硝酸(3:1 v/v)混合液稍加浸泡后,洗净备用。
如用铬酸钾清洁液清洗时,吸收池不宜在清洁液中长时间浸泡,否则清洁液中的铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面,并应充分用水冲洗,以防铬酸钾吸附于吸收池表面。
4.5.4 含有杂原子的有机溶剂,通常均具有很强的末瑞吸收。
因此,当作溶剂使用时,它们的范围均不能小于截止使用波长。
例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。
另外,当溶剂不纯时,也可能增加干扰吸收。
因此,在检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求,即将溶剂置1cm石英吸收池中,以空气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定吸光度,溶剂和吸收池的吸光度应符合下表规定。
以空气为空白测定溶剂在不同波长处的吸光度的规定4.5.5 称量应按药典规定要求。
配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少,转移稀释时所取容积一般应不少于5ml。
含量测定时供试品应称取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应称取2份。
吸收系数检查也应称取供试品2份,平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。
作鉴别或检查可取样品1份。
4.5.6 供试品溶液的浓度,除各品种项下已有注明者外,供试品溶液的吸光度以在0.3~0.7之间为宜,吸光度读数在此范围误差较小,并应结合所用仪器吸光度线性范围,配制合适的读数浓度。
4.5.7 选用仪器的狭缝谱带宽度应小于供试品吸收带半高宽的10%,否则测得的吸光度值会偏低,或以减小狭缝宽度时供试品溶液的吸光度不再增加为准,对于中国药典紫外分光光法测定的大部分品种,可以使用2nm缝宽,但当吸收带的半高宽小于20nm时,则应使用较窄的狭缝,例如青霉素钾及钠的吸光度检查需用1nm缝宽或更窄,否则其264nm 的吸光度会偏低。
4.5.8 测定时除另有规定者外,应在规定的吸收峰±2nm 处,再测几点的吸光度,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸光度最大的波长作为测定波长,除另有规定外吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内,否则应考虑试样的同一性、纯度以及仪器波长的准确度。
4.5.9 用于制剂含量测定时,应注意供试液与对照液的pH 值是否一致,如pH 值对吸收有影响,则应调溶液的pH 值一致后再测定吸光度。
4.6 结果计算4.6.1 对照品比较法 可根据供试品溶液及对照品溶液的吸光度与对照品溶液的浓度以正比法算出供试品溶液的浓度,再计算含量。
C 样品=A 样品×C 对照/A 对照式中 A 为吸光度值;C 为测试液浓度(以mg/ml 计)。
4.6.2 吸收系数法 规定的吸收系数,系指E cm %11,即在指定波长时,光路长度为1cm ,试样浓度换算为1%(g/ml )时的吸光度值,故应先求被测样品的E cm %11值,再与规定的E cm %11值比较,可计算出供试样品的含量。
E cm %11(样品)= LC A 式中 A 为供试品溶液测得的吸光度值;C 为供试品溶液的百分浓度,即100ml 中所含溶质的克数(g/ml );L 为吸收池的光路长度(cm )。
供试品的含量%=(标准)样品%11%11)(cm cm E E ×100 式中E cm %11(样品)为根据前式计算出的供试品吸收系数; E cm %11(标准)为药典或药品标准中规定的吸收系数。
4.7 吸收系数测定法本法主要用于新品种的吸收系数测定。
4.7.1 测定方法 取精制样品精密称取一定量,使样品溶液配成吸光度读数在0.6~0.8之间,置1cm 吸收池中,在规定波长处按5.5.8项的规定测出吸光度读数,然后再用同批溶剂将溶液稀释1倍,使吸光度在0.3~0.4之间,再按上述方法测定。
样品应同时测定2份,同一台仪器测定的2份结果,对平均值的偏差应不超过±0.3%,否则应重新测定。