初始污染菌检测记录

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初始污染回收率及检测记录

初始污染回收率测定记录生产批号：型号规格：样品数量：培养皿个数样品号培养皿编号空白对照阴性对照平均菌落数（cfu/ml）初始污染菌（cfu/件）（平均菌落数÷SIP）回收率1 2 3 4 51-1 1-2 1-3 1-4 1-5 2-1 2-2 2-3 2-4 2-5 3-1 3-2 3-3 3-4 3-54-14-24-34-44-55-15-25-35-45-5平均回收率修正系数初始污染菌检测原始记录生产批号：型号规格：样品数量：培养皿个数样品号培养皿编号阴性对照空白对照平均菌落数（cfu/SIP）初始污染菌（cfu/件）1 2 3 4 51 2 3 4 5 6 7 8 91011121314151617181920平均初始污染菌各样品平均菌落——————数总和÷样品数校正后初始污染菌————（平均初始污染菌*校正因子）注：1、在对照的平板中，“+”表示长菌，“－”表示不长菌，“±”表示可疑长菌2、阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。

否则，试验无效。

初始污染检测记录文件编号：样品名称：生产批号：型号规格：样品数量：培养皿个数样品号空白对照阳性对照培养皿编号平均菌落数（cfu/SIP）初始污染菌（cfu/件）1 2 3 4 512345678910平均初始污染菌（cfu/件）校正后初始污染菌注：1、在对照的平板中，“+”表示长菌，“－”表示不长菌，“±”表示可疑长菌2、阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。

否则，试验无效。

产品的初级污染菌

产品初始污染菌1、目的检测清洗包装后的产品初始污染菌是否符合要求2、适用范围适用于需灭菌产品清洗、包装后的检验3、检验依据EN1174-1996医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估GB14233。

2-1993医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分：生物试验方法GB15980-1995一次性使用医疗用品卫生标准GB7918。

2-1987化妆品微生物标准检测方法：细菌总数测定4、仪器、设备细菌培养箱、洁净工作台、电子天平、PH计、压力蒸汽灭菌器、4。

C冰箱。

酒精灯、3000ml 的三角烧瓶，无菌棉签，无菌镊子，试管架，9mm细菌养皿，放大镜。

5、检验方法5．1普通肉汤琼脂培养基的制备5．1．1所用试剂胨10g氯化钠5g琼脂15-20g肉浸液1000ml5．1．2制备取牛肉浸膏3 g加水1000 ml，配成肉浸液。

将胨、氯化钠、琼脂加入肉浸液中，加热溶解，调节PH为7。

2，置入压力蒸汽灭菌器内，灭菌后于超净工作台内装在9 mm的细菌培养皿中（15-20ml/每个平皿），于4。

C保存备用。

5．2抽样从每个清洗批次的产品中随机抽样。

同一批次产品数<50件，抽取3件；同一批次产品数为50~100件，抽取5件；同一批次产品数>100件，抽取10件。

5．3取样于微生物实验室超净工作台内，将浸有无菌生理盐水的无菌棉签在检品的外表面依次擦拭，然后用无菌镊子将棉签上的棉球取下，放入含有1ml无菌生理盐水试管内振摇数次，静止5分钟，即获得擦拭棉球浸提液；以同样的方法擦拭检品内表面。

获取检品内表面擦拭棉球浸提液。

5．4接种将上述检品内、外表面擦拭棉球浸提液倒入普通肉汤琼脂平板，水平旋摇使之均匀布在培养皿表面，在超净止放置至培养皿表面浸液十后进入下一步操作。

5．5培养接种后的培养皿倒置于细菌培养箱中，以未接种肉汤琼脂培养基为阴性对照，以金黄色葡萄球菌（北京生物制品检定所）作阳对照，37。

C培养48暗时后观察结果。

初始污染菌数检测

1
2
3
4
5
结论
细菌：
标准要求：
产品初始污染菌数：灭菌产品管道类内腔≤10cfu/件次；外部≤100 cfu/件次；非管道类≤100 cfu/件次；敷料类≤100 cfu/g
采样数量：各类产品每批随机抽取10件样品。
计算方法：菌数/件次=平均菌数×稀释倍数/件次
批准：检验：复核：
初始污染菌数检测
QSR-6003-08-2017 No.
样品名称
检测日期/批号
检测数量
报告日期
检测依据
GB15980-1995
培养基
普通琼脂培养基
内腔
外部
标准
≤10cfu/件次
标准
≤100cfu/件次
序号
平皿上菌数
菌数
结果
序号
平皿上菌数
菌数
结果
1#
2#
平均
1#
2#
平均
1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
6
6
7
7
计算方法：菌数/件次=平均菌数×稀释倍数/件次
批准：检验：复核：
批准：检验：复核：
初始污染菌数检测
QSR-6003-08-2017 No.
样品名称
规格型号
进货批号
检验日期
检验依据
GB15980-1995
报告日期
培养基名称
营养琼脂培养基
培养
温度
30℃-35℃
稀释
倍数
1:10
1:100
1:1000
阴性
对照
碟号

1
2
接种量（ml）

初始污染菌实验记录

初始污染菌实验记录实验目的：研究不同初始污染菌数量对环境中细菌生长的影响，并探究污染菌的生长规律。

实验材料和方法：1.实验材料：-不含任何微生物的琼脂平板-紫外灯-细菌培养物-显微镜和高倍镜-实验室用具：针头、培养皿、移液管等2.实验方法：1. 准备不同初始污染菌液：分别取10 ml、20 ml、30 ml、40 ml和50 ml的细菌培养物，加入含有无菌蒸馏水的试管中，并标注不同的初始菌液。

2.每个试管放置在紫外灯下辐照15分钟，以杀灭试管内的细菌。

3.分别将不同初始污染菌液均匀涂布在琼脂平板上，并用铂丝或玻璃杆扩散均匀。

4.将琼脂平板放入恒温箱中，控制温度为30°C，培养时间为24小时。

5.取出培养好的琼脂平板，观察和记录菌落的形态、颜色、大小等特征，并用显微镜观察细菌的形态和结构。

实验记录：1.实验准备：- 依次取10 ml、20 ml、30 ml、40 ml和50 ml的细菌培养物，加入含有无菌蒸馏水的试管中，并标注不同的初始菌液。

-将各试管放置在紫外灯下辐照15分钟，杀灭细菌。

-准备好不含细菌的琼脂平板。

2.实验操作：-将不同初始菌液均匀涂布在琼脂平板上，用铂丝或玻璃杆扩散均匀。

-将琼脂平板放入恒温箱中，控制温度为30°C，培养时间为24小时。

3.实验结果：实验组1（10 ml菌液）：-菌落的形态：圆形，表面平整。

-菌落的颜色：淡黄色。

- 菌落的大小：直径约为1-2 mm。

-细菌的形态和结构：短小的杆菌。

实验组2（20 ml菌液）：-菌落的形态：圆形，表面稍微凹陷。

-菌落的颜色：淡黄色。

- 菌落的大小：直径约为2-3 mm。

-细菌的形态和结构：较长的杆菌。

实验组3（30 ml菌液）：-菌落的形态：不规则形状，表面凹凸不平。

-菌落的颜色：深黄色。

- 菌落的大小：直径约为3-4 mm。

-细菌的形态和结构：较长的杆菌，呈链状排列。

实验组4（40 ml菌液）：-菌落的形态：不规则形状，表面凹凸不平。

产品初始污染菌检验规范.

产品初始污染菌检验规范1 目的本规范规定了产品初始污染菌的检验方法。

2 参考标准GB/T19973.1-2005 《医疗器械的灭菌微生物学方法第一部分：产品上微生物总数的估计》中华人民共和国药典ENISO11737:2006 《医疗器械的灭菌微生物学方法第一部分：产品上微生物总数的测定》3 操作前准备3.1 主要仪器设备数个90mm双蝶平皿、三角烧瓶，电炉、电热恒温鼓风干燥箱、电热恒温培养箱、蒸汽消毒器、0.9%氯化钠溶液、刻度吸管数支、超净工作台3.2 试剂0.9%氯化钠溶液、营养琼脂培养基。

3.3 试验前准备3.3.1 将Ф90mm的培养皿、试管等与试验接触的所有器具，放入棉布袋或用棉布包好，置压力蒸气灭菌器内121℃灭菌30min后备用排出蒸汽，稍微冷却，取出用具。

3.3.2 按脱水营养琼脂培养基说明书上的要求称取培养基，加纯化水加热溶解，加塞，和0.9%氯化钠溶液同置1210C灭菌30min后备用。

3.3.3 将消好的平皿、刻度吸管，放入电热干燥箱内1600C干燥2小时，当温度降低至70ºC以下时进行无菌存放。

3.3.4 打开超净工作台上的电源、照明、风机、紫外线灯30分钟开关。

3.3.5 将实验所需的物品通过传递窗紫外线灯消毒，然后进入洁净室内，开启洁净室紫外线照射30min以上灭菌。

3.3.6 洗手、更衣后，进入无菌室，用消毒液对手进行消毒。

4 试验方法4.1 供试品数量灭菌前样品至少取3个。

4.2 供试液制备和接种4.2.1 把采取的样品送入无菌净化工作台内，用无菌操作法分别在每条产品上剪样5g，取样品至少3个（一份试验、一份留样、一份复测），将5g样品剪碎，放入100 ml灭菌0.9%NaCl的三角烧瓶中振荡80次，形成1次10倍稀释液。

4.2.2 用无菌吸管取上述样品洗脱液混合物2ml，分别注入两个灭菌平皿内，每平皿1ml。

另取1ml 注入到9ml灭菌洗脱液中，用手振荡80次充分混匀，使成1:100稀释液，另取一支吸管吸取2ml，分别注入两个灭菌平皿内，每平皿1ml，如样品含菌量高，还可以再稀释1:1000、1:10000等，每个稀释度应换一支移液管。

初始污染菌校验因子及初始污染菌检测记录

（HY）-ZG-SOP03《初始污染菌检测操作规程》
样品序号
菌落计数（cfu/皿）
样品平均菌落数
（cfu/皿）
取样克重（g）
单片/㎡
样品总克重（g）
细菌
霉菌及酵母菌
菌落总数
1
10
0
10
8
41.6
233.8
2
8
0
8
3
6
0
6
所有样品平均菌落数（cfu/件次）
233.8/41.6*8=44.9
校正后实际值
产品名称
心血管介入包
规格/型号
321C-ⅡB型
批号
1801092
包装日期
2018.01.09
检测日期
2018.01.10
抽样数量
3件
洗脱液体积ml
200ml
报告日期
2018.01.15
培养基
营养琼脂培养基
配制批号
20180105
培养温度
35℃
培养时间
3d
玫瑰红钠琼脂培养基
20180105
25℃
5d
检测依据
44.9*1.22=55
标准要求
≤100cfu/件次
结果判断
符合要求
检测人：李明宇复核人：郑海云
校正后实际值
79.8*1.22=97
标准要求
≤100cfu/件次
结果判断
符合要求
检测人：李明宇复核人：郑海云
产品初始污染菌检测记录
编号：(HY)-JL-8.2-45/A产品名称心血管介入包
规格/型号
321C-ⅡB型
批号
1801091
包装日期

WI-QC-13 初始污染菌检验规程

文件修订记录1.目的建立初始污染菌数检验及分析标准，对未灭菌的物料或产品的初始污染菌进行检验检测分析。

2.适用范围适用于本公司实施初始污染菌的检验。

3.职责质检员负责初始污染菌的测定。

4.工作程序4.1 参照ISO 11737-1:2006方法制订本操作规程。

4.2设备与材料：90mm平皿、天平、玻璃棒、刻度吸管、剪刀、酒精灯、营养琼脂培养基、0.9%无菌氯化钠溶液、三角烧瓶、振荡器、灭菌锅、水浴锅、超净工作台4.3 试验方法：按《抽样检验规范》抽取样品进行检验。

4.3.1 用无菌手续取约10g样品，剪碎后放入装有100ml生理盐水的三角烧瓶中，另加入经验证合格的中和剂适量，盖好瓶塞，将三角烧瓶放在振荡器上。

4.3.2 振摇30分钟后，将溶液取1ml接种于90mm平皿。

4.3.3 取出水浴锅中的约45℃营养琼脂，按无菌操作要求倾倒在平皿中。

4.3.4 待琼脂凝固后，放在30℃-35℃的培养箱培养2-5天后，进行活菌计数。

4.3.5 将每个样取5份平行样，每份样倾注2块平板培养计数，按下式计算：菌数/每克=平均菌数×稀释倍数×修正系数/重量4.3.6 到培养时间48小时，报告结果，将结果记录于《初始污染菌检测记录表》中。

4.4 修正系数的确定3.4.1 用无菌手续取约10g样品，放入装有100ml生理盐水的三角烧瓶中，另加入经验证合格的中和剂适量，盖好瓶塞，将三角烧瓶放在振荡器上。

4.4.2 振摇30分钟后，将溶液取1ml接种于90mm平皿。

4.4.3 取出水浴锅中的约45℃营养琼脂，按无菌操作要求倾倒在平皿中。

4.4.4 待琼脂凝固后，放在30℃-35℃的培养箱培养2-5天后，进行活菌计数。

4.4.5 用无菌手续取出4.3.1瓶中的样品，放入装有100ml生理盐水的三角烧瓶中，另加入经验证合格的中和剂适量，盖好瓶塞，将三角烧瓶放在振荡器上。

重复4.3.2-4.3.4的步骤共三遍。

产品初始污染菌数检验方法

有限公司
文件编号
版号
A.0
产品初始污染菌数检验方法
页次
生效日期
2020/01/02
1．目的
制订产品初始污染菌数检验方法，对从事测试的工作人员进行培训指导，规范检验方法及操作。
2．适用范围:
本方法适用于一次性使用无菌医疗器械灭菌前染菌量的检测。
3．职责
质检部对本检验方法实施负责。
4．程序
4.1仪器
分析天平、干燥箱、净化工作台、压力蒸汽消毒器、电热恒温水浴锅、生化低温培养箱
6.5手提式压力蒸汽消毒器操作规程
6.6净化工作台操作规程
7.参考文件
7.1《一次性使用医疗用品卫生标准》GB 15979-2002
编制：
日期：
审核：
日期：
批准：
日期：
菌落总数≤100cfu/g。
4.6.2阴性对照试验平板有菌生长，供试品的检验无效。
5．相关记录及保存：
5.1产品初始污染菌数检验记录QP27-QR-17
5.2质检部保管5年。
6.相关操作规程
6.1电子分析天平操作规程
6.2电热鼓风干燥箱操作规程
6.3电热恒温水浴锅操作规程
6.4生化低温培养箱操作规程
4.5.4.2结果报告
菌落呈片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按式(B1)计算结果：
式中：X1――细菌菌落总数，cfu/g或cfu/mL；
A――5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数；
K――稀释度。
当菌落数在100以内，按实有数报告，大于100时采用二位有效数字。
如果样品菌落总≥20数进行复检和结果报告。
有限公司
文件编号
版号
A.0

初始污染菌检测

初始污染菌检测⼀、⽬的检测产成品初始污染菌是否符合要求⼆、适⽤范围适⽤于⾮灭菌的产成品检验三、职责化验室化验员按标准操作规程检测四、仪器、设备⽣化培养箱、洁净⼯作台、电⼦天平、PH 计、压⼒蒸汽灭菌器、4℃冰箱、酒精灯、250Ml 的三⾓烧瓶、30Ml 试管、⽆菌镊⼦、⽆菌剪⼑、试管架、90mm 玻璃培养⽫、放⼤镜。

五、检验⽅法1.普通⾁汤琼脂培养基的制备 1.1所⽤试剂胨10g 氯化钠5g 琼脂15-20g ⾁浸液1000ml2.产品采集与样品处理于同⼀批号的三个运输包装中⾄少抽取200个最⼩销售包装样品，1/4样品⽤于检测，1/4样品⽤于留样，另1/2样品（可就地封存）必要时⽤于复检。

抽样的最⼩销售包装不应有破裂，检验前不得启开。

在100级净化条件下⽤⽆菌⽅法打开⽤于检测的⾄少10个包装，从每个包装中取样，准确称取25g ±1g 样品，剪碎后加⼊到225ml 灭菌⽣理盐⽔中，充分混匀，得到⼀个⽣理盐⽔样液。

液体产品⽤原液直接做样液。

如被检样品含有⼤量吸⽔树脂材料⽽导致不能吸出⾜够样液时，稀释液量可按每次50倍递增，直到能吸出⾜够测试⽤样液。

在计算细菌菌落总数与真菌菌落总数时应调整稀释度。

⽂件号: QS/CKL03B-ZJ-26-A/0 受控状态⽂件名称：初始污染菌检测SOP 版本号编制时间修改状态：审核时间⽣效⽇期批准时间发放号六、细菌菌落总数与初始污染菌检测⽅法本⽅法适⽤于产品初始污染菌与细菌菌落总数（以下统称为细菌菌落总数）检测。

1.操作步骤量取100 Ml的供试液，采⽤滤膜过滤法，⽤供试液冲洗滤膜表⾯，并确保供试液完全覆盖滤膜表⾯。

（滤膜孔径不⼤于0.45um ；直径50mm）取出滤膜，菌⾯朝上贴于营养琼脂培养基上，做两个平⾏对照，同时做⼀个空⽩对照。

倒置于30℃±5℃恒温培养箱内培养3天，观察并记录结果，空⽩应⽆菌⽣长，若空⽩有菌⽣长该试验则视为⽆效。

2.结果报告计算平板上菌落的平均值，再将平均值乘以相应的稀释倍数作为每克（g）/毫升(Ml)样品中平板菌落数。

初始污染菌检验原始记录

2.取营养琼脂培养基_______个加______ml 0.9%f无菌氯化钠溶液做空白对照（阴性对照）。
3.转动平皿，使供试液与培养基充分混匀。将已经凝固的平板倒置于37℃培养箱中，一般培养48±2h。
计算平板上的菌落数。
培养基预培养：营养琼脂培养基：_____月_____日_____时至_____月_____日_____时（16-18h）
紫外线消毒时间：实验前：_____时_____分至_____时_____分（0.5h）
实验后：_____时_____分至_____时_____分（0.5h）
洁净台菌落数
培养皿号
1#
2#
3#
48h菌落数
平均菌落数
检验结果
培养基名称
营养琼脂培养基
培养温度
37℃48h
样
行
平
数
菌
细
号
平
1:10
1:100
空白对照
1#
2#
1#
2#
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
菌落均值
菌落总数（cfu/件）
检验结论
检定标准：菌落技术的报告，菌落在100以内时，按实有数值报告。在报告数为“不可记”时，应表明样品的稀释度。参考标准：菌落总数≤10cfu/件
检定结果：
备注
如果样品菌落总数超过标准的规定，进行复检和撰写结果报告。
初始污染菌检验原始记录
编号：
试样名称
规格型号
生产批号
抽样数量
检验依据
检验日期
供试液制备：取_____________________待测试产品，根据产品物性的大小，分别采用直接浸入法或棉拭子擦洗法或冲洗法收集洗脱液，制取1:10供试液保温于45℃水浴中5~10min，不时阵摇。

初始污染菌检验记录

检验环境：温度样品名称
初始污染菌检验记录
相对湿度
样品数量
批号
样品型号

培养基 TSA、SDA 检验人员
检验日期
校对日期
复核人员
检验依据
检验规程
样品编号 TSA 培养皿
1
1-1
2
2-1
需氧菌数（cfu/皿）
1d
2d
3d
需氧菌数均值（cfu/皿）
3
3-1
1 阳性对照
2
样品编号 SDA 培养皿
1
1-1
霉菌、酵母菌总数（cfu/皿）
氧菌数均
1d
2d
3d
4d
5d 值（cfu/皿）
2
2-1
3
3-1
1 阳性对照
2
结果计算：
（需氧菌数均值+霉菌、酵母菌数均值）*2*修正系数（经回收试验确认为
）
初始污染菌总数（cfu/件）
结果判断：初始污染菌总数不得超过 100cfu/件
结论：符合规定
不符合规定
废弃物处理：废弃物需经 121℃高温灭菌 30min
完成未完成

初始污染菌数检测记录表

采样数量：各类产品每批随机抽取10件样品。
计算方法：菌数/件次=平均菌数×稀释倍数/件次
批准：检验：复核：
批准：检验：复核：
样品名称
规格型号
进货批号
检验日期
检验依据
GB15980-1995
报告日期
培养基名称
营养琼脂培养基
培养
温度
30℃-35℃
稀释
倍数
1:10
1:100
1:1000
阴性
对照
碟号
1
2
1
2
1
2
1
2
接种量（ml）
1
1
1
1
1
1
1
1
培养天数及结果
1
2
3
4
5
结论
细菌：
标准要求：
产品初始污染菌数：灭菌产品管道类内腔≤10cfu/件次；外部≤100 cfu/件次；非管道类≤100 cfu/件次；敷料类≤100 cfu/g
初始污染菌数检测
样品名称
一次性使用输液器带针
检测日期
检测数量
报告日期
检测依据
GB15980-1995
培养基
普通琼脂培养基
内腔
外部
标准
≤10cfu/件次
标准
≤100cfu/件次
序号
平皿上菌数菌数结果序号平皿上菌数菌数
结果
1#
2#
平均
1#
2#
平均
1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
6
6
7
7
8
8
9
9
计算方法：菌数/件次=平均菌数×稀释倍数/件次

初始污染菌实验记录

初始污染菌实验记录实验目的：本实验旨在研究初始污染菌的生长情况，通过观察和记录不同条件下的菌落形态、数量和生长速率等指标，探讨污染菌的污染源和传播途径，以及对污染菌的控制手段。

实验材料与方法：材料：含有初始污染菌的培养基，包括琼脂、蔗糖、氨基酸等。

方法：1.初始污染菌的制备：从实际环境样品中采集可能存在的污染菌，并进行相应的培养与筛选，获取具有代表性的初始污染菌。

2.实验组设定：设定不同的培养条件，如温度、湿度、氧气浓度等，以探究其对初始污染菌生长的影响。

3.菌落形态观察：分别在培养基上接种不同培养条件下的初始污染菌，并在一定时间后观察不同培养条件下菌落的形态特征，如大小、颜色、边缘等。

4.菌落数量统计：在一定时间后，用细丝环法或平板计数法进行初始污染菌的数量统计，并记录不同培养条件下污染菌的数量变化。

5.生长速率计算：根据菌落数量变化的统计结果，计算不同培养条件下初始污染菌的生长速率，并进行对比分析。

实验结果：根据实验方法所述步骤，进行了一系列实验，记录了大量的数据。

以下是其中一组实验结果的记录：实验组设定：温度分别为25℃、30℃、35℃；湿度为80%；氧气浓度为正常空气中的含量。

菌落形态观察：在不同培养条件下，初始污染菌的菌落形态发生了一定的变化。

在25℃时，菌落大小较小，呈圆形，边缘较光滑；30℃时，菌落变大，呈不规则形状，边缘呈分支状；35℃时，菌落较大，形状更为不规则，边缘呈分叉状。

菌落数量统计：在培养一周后，使用平板计数法统计菌落数量。

结果显示，在25℃时，菌落数量为6个/平板；30℃时，菌落数量为12个/平板；35℃时，菌落数量为18个/平板。

生长速率计算：根据菌落数量统计结果，计算出不同培养条件下初始污染菌的生长速率。

结果显示，在25℃时，生长速率为0.86个/天；30℃时，生长速率为1.71个/天；35℃时，生长速率为2.57个/天。

讨论与结论：根据实验结果的数据统计与对比分析，可以得出以下结论：1.温度对初始污染菌的生长有明显影响。