最新RNA的生物合成和加工
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20
4、转录的终止 RNA聚合酶到达基因转录终点 RNA、RNA聚合酶自DNA脱
终止子:能够使离转录终止的DNA序列 终止因子:协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助蛋白质因子 抗终止因子:能够使转录酶越过终止子继续转录蛋白质因子
3
2、不对称转录
在一个包含许多基因的双链DNA分子中,各个 基因的模板链不一定是同一条,对于某些基因以 某一条链为模板进行转录,而对另一些基因则可 由另一链为模板链。
2020/10/23
4
复制和转录的异同点
相同点:
1.模板:DNA 2.合成方向:5′→ 3′ 3.酶:均依赖DNA 4.碱基互补配对原则 5.产物:多聚核苷酸链
-35序列提供了RNA聚合酶全酶识别的信号;-10序列是酶 的紧密结合位点(富含AT碱基,利于双链打开);第三部 分是RNA合成的起始点。
TTGACA
5’
3’
AACTGT
-35序列
Sextama 框
TATAAT
ATATTA
-10序列 Pribnow框
5’ 3’ +1
转录起始点
2020/10/23
14
α2ββ′(核心酶)
σ:起始因子,识别DNA模板上的转录起始位点前的特异碱基
序列,引导RNA聚合酶结合到DNA的启动子,开始转录
不同菌种σ因子大小差别很大
转录开始后,σ脱离聚合酶,核心酶催化RNA的延长
2020/10/23
8
转录单位: RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定位点, 其上游有特异的碱基序列,为启动子(promoter) 并在另一位点处终止(终止子terminator) 此转录区域称为转录单位(DNA)
RNA的生物合成和加工
DNA复制:以DNA为模板合成DNA,遗传信息自上一代细胞
向下
转录:一以代D细NA胞为传模递板合成RNA,遗传信息自DNA转录至RNA
分翻子译:以mRNA为模板合成蛋白质,遗传信息表达至蛋白质
反转录:以RNA为模板合成DNA(RNA病毒、真核细胞的端
粒R20N2酶0/A10)/复23 制:以RNA为模板合成RNA(RNA病毒)
单独的核心酶 与DNA随机疏松结合(低亲和力),不能区分启动子和一般序 列 全酶:与启动子结合牢固(高亲和力),并开始转录
全酶通过扩散作用与DNA随机结合 与酶结合的DNA迅速被置换 全酶不断改变与DNA的结合部位,直到启动子,转变为紧 密结合
2020/10/23
15
真核生物:转录因子识别启动子 RNA聚合酶在起点处形成起始复合体 -25bp(Hogness盒)
2020/10/23
18
3、转录的延伸
σ因子脱离,核心酶向前移动,RNA链延长
原核、真核生物基本相同,不需要引物 σ因子脱落,核心酶构象变松弛 RNA的5′端伸展在转录空泡之外 模板为A,转录产物相应为U
原核生物:转录、翻译同时进行
2020/10/23
19
2020/10/23
第一个碱基总是G或A
转录起
2020/10/23
始点
9
大肠杆菌的RNA聚合酶
全酶由5种亚基α2ββ’σ 组成,σ因子与其它部分的结 合不是十分紧密,它易于与β’βα2分离,没有σ亚基 的酶称为核心酶——只催化链的延长,对起始无作用。
四种亚基的功能分别为:
α亚基:与启动子结合功能。
β亚基:含催化部位,起催化作用,催化形成磷酸二酯键。
与顺式作用元件结合(反式作用因子)
识别启动子
2020/10/23
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2、转录的起始
在模板链上通过碱基配对合成最初的RNA链 加入的第一个核苷三磷酸常是GTP或ATP。 所形成的启动子、全酶和核苷三磷酸复合 物称为三元起始复合物,第一个核苷三磷 酸一旦掺入到转录起始点, σ亚基就会被 释放脱离核心酶。
2
(一)模板 1、转录模板
两股DNA单链中只有一股可转录 可作为模板转录成RNA的一股DNA链——模板链 对应的一股DNA链——编码链 能转录出mRNA,指导蛋白质合成的部分——结构基因 其余的DNA可能转录(rRNA,tRNA),也可能不转录
5 ′ 3 ′
3 ′ 5 ′
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β’亚基:与DNA模板结合功能。
σ亚基:识别起始位点。
2020/10/23
10
2、真核生物的RNA聚合 酶
RNA聚合酶:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ 专一地转录不同的基因 转录过程、产物不同 对鹅膏蕈碱的敏感性不同
2020/10/23
加工产生5.8S rRNA,18S rRNA 、28S
11
➢ 8~14个亚基,Mw 500KD左右 ➢ 无σ识别亚基 ➢ 转录:起始复合体(转录因子、启动子、RNA聚合酶) ➢ 线粒体、叶绿体RNA聚合酶类似于原核生物 ➢mRNA不稳定,寿命短,RNA聚合酶Ⅱ最重要
2020/10/23
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不同点:
复制
转录
模板 两股链均作为模板 模板链作为模板
原料 dNTP
NTP
聚合酶 DNA聚合酶
RNA聚合酶
产物 子代DNA双链
mRNA;tRNA;rRNA
配对 A-T;G-C
A-U;T-A;G-C
引物 RNA引物
不需要引物
方式(特点) 半保留复制
不对称转录
2020/10/23
2020/10/23
12
(三)转录过程:起始、延长、终止
1、模板的识别:
σ因子辨认启动子 RNA聚合酶结合到DNA的启动子,开始转录 启动子具有共有的序列——保守序列或一致性序列:在10bp处有-TATAAT-,Pribnow盒;-35bp处有TTGACA-,辨认点
2020/10/23
13
σ识别正确的启动位点,启动子的结构至少由三部分组成:
CAAT GC TATA
增强子,增强启动子 活性,
mRNA转录起始点
增强子序列可以远离启动子几千bp,位于上游或者下游,
位于模板链或编码链,均能发挥作用
2020/10/23
16
启动子和转录因子
启动子:与基因表达相关的特定的DNA序列(顺式作用元件)
RNA聚合酶与之特异结合,基因转录的开始部位 强启动子2秒钟启动依次一次转录 弱启动子10分钟一次 转录因子:RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子(蛋白质)
6
(二)参与转录的酶
1.原Baidu Nhomakorabea细胞的RNA聚合酶 σ因子为起始因子
2.真核细胞的RNA聚合酶Ⅰ(核仁):催化rRNA前 体的合成;Ⅱ:催化mRNA的合成;Ⅲ:催化小分 子RNA的合成
2020/10/23
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1、原核生物的RNA聚合酶(大肠杆菌)
Mw:465~480kD 亚基组成:α2ββ′σ (全酶)
4、转录的终止 RNA聚合酶到达基因转录终点 RNA、RNA聚合酶自DNA脱
终止子:能够使离转录终止的DNA序列 终止因子:协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助蛋白质因子 抗终止因子:能够使转录酶越过终止子继续转录蛋白质因子
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2、不对称转录
在一个包含许多基因的双链DNA分子中,各个 基因的模板链不一定是同一条,对于某些基因以 某一条链为模板进行转录,而对另一些基因则可 由另一链为模板链。
2020/10/23
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复制和转录的异同点
相同点:
1.模板:DNA 2.合成方向:5′→ 3′ 3.酶:均依赖DNA 4.碱基互补配对原则 5.产物:多聚核苷酸链
-35序列提供了RNA聚合酶全酶识别的信号;-10序列是酶 的紧密结合位点(富含AT碱基,利于双链打开);第三部 分是RNA合成的起始点。
TTGACA
5’
3’
AACTGT
-35序列
Sextama 框
TATAAT
ATATTA
-10序列 Pribnow框
5’ 3’ +1
转录起始点
2020/10/23
14
α2ββ′(核心酶)
σ:起始因子,识别DNA模板上的转录起始位点前的特异碱基
序列,引导RNA聚合酶结合到DNA的启动子,开始转录
不同菌种σ因子大小差别很大
转录开始后,σ脱离聚合酶,核心酶催化RNA的延长
2020/10/23
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转录单位: RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定位点, 其上游有特异的碱基序列,为启动子(promoter) 并在另一位点处终止(终止子terminator) 此转录区域称为转录单位(DNA)
RNA的生物合成和加工
DNA复制:以DNA为模板合成DNA,遗传信息自上一代细胞
向下
转录:一以代D细NA胞为传模递板合成RNA,遗传信息自DNA转录至RNA
分翻子译:以mRNA为模板合成蛋白质,遗传信息表达至蛋白质
反转录:以RNA为模板合成DNA(RNA病毒、真核细胞的端
粒R20N2酶0/A10)/复23 制:以RNA为模板合成RNA(RNA病毒)
单独的核心酶 与DNA随机疏松结合(低亲和力),不能区分启动子和一般序 列 全酶:与启动子结合牢固(高亲和力),并开始转录
全酶通过扩散作用与DNA随机结合 与酶结合的DNA迅速被置换 全酶不断改变与DNA的结合部位,直到启动子,转变为紧 密结合
2020/10/23
15
真核生物:转录因子识别启动子 RNA聚合酶在起点处形成起始复合体 -25bp(Hogness盒)
2020/10/23
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3、转录的延伸
σ因子脱离,核心酶向前移动,RNA链延长
原核、真核生物基本相同,不需要引物 σ因子脱落,核心酶构象变松弛 RNA的5′端伸展在转录空泡之外 模板为A,转录产物相应为U
原核生物:转录、翻译同时进行
2020/10/23
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2020/10/23
第一个碱基总是G或A
转录起
2020/10/23
始点
9
大肠杆菌的RNA聚合酶
全酶由5种亚基α2ββ’σ 组成,σ因子与其它部分的结 合不是十分紧密,它易于与β’βα2分离,没有σ亚基 的酶称为核心酶——只催化链的延长,对起始无作用。
四种亚基的功能分别为:
α亚基:与启动子结合功能。
β亚基:含催化部位,起催化作用,催化形成磷酸二酯键。
与顺式作用元件结合(反式作用因子)
识别启动子
2020/10/23
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2、转录的起始
在模板链上通过碱基配对合成最初的RNA链 加入的第一个核苷三磷酸常是GTP或ATP。 所形成的启动子、全酶和核苷三磷酸复合 物称为三元起始复合物,第一个核苷三磷 酸一旦掺入到转录起始点, σ亚基就会被 释放脱离核心酶。
2
(一)模板 1、转录模板
两股DNA单链中只有一股可转录 可作为模板转录成RNA的一股DNA链——模板链 对应的一股DNA链——编码链 能转录出mRNA,指导蛋白质合成的部分——结构基因 其余的DNA可能转录(rRNA,tRNA),也可能不转录
5 ′ 3 ′
3 ′ 5 ′
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β’亚基:与DNA模板结合功能。
σ亚基:识别起始位点。
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2、真核生物的RNA聚合 酶
RNA聚合酶:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ 专一地转录不同的基因 转录过程、产物不同 对鹅膏蕈碱的敏感性不同
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加工产生5.8S rRNA,18S rRNA 、28S
11
➢ 8~14个亚基,Mw 500KD左右 ➢ 无σ识别亚基 ➢ 转录:起始复合体(转录因子、启动子、RNA聚合酶) ➢ 线粒体、叶绿体RNA聚合酶类似于原核生物 ➢mRNA不稳定,寿命短,RNA聚合酶Ⅱ最重要
2020/10/23
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不同点:
复制
转录
模板 两股链均作为模板 模板链作为模板
原料 dNTP
NTP
聚合酶 DNA聚合酶
RNA聚合酶
产物 子代DNA双链
mRNA;tRNA;rRNA
配对 A-T;G-C
A-U;T-A;G-C
引物 RNA引物
不需要引物
方式(特点) 半保留复制
不对称转录
2020/10/23
2020/10/23
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(三)转录过程:起始、延长、终止
1、模板的识别:
σ因子辨认启动子 RNA聚合酶结合到DNA的启动子,开始转录 启动子具有共有的序列——保守序列或一致性序列:在10bp处有-TATAAT-,Pribnow盒;-35bp处有TTGACA-,辨认点
2020/10/23
13
σ识别正确的启动位点,启动子的结构至少由三部分组成:
CAAT GC TATA
增强子,增强启动子 活性,
mRNA转录起始点
增强子序列可以远离启动子几千bp,位于上游或者下游,
位于模板链或编码链,均能发挥作用
2020/10/23
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启动子和转录因子
启动子:与基因表达相关的特定的DNA序列(顺式作用元件)
RNA聚合酶与之特异结合,基因转录的开始部位 强启动子2秒钟启动依次一次转录 弱启动子10分钟一次 转录因子:RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子(蛋白质)
6
(二)参与转录的酶
1.原Baidu Nhomakorabea细胞的RNA聚合酶 σ因子为起始因子
2.真核细胞的RNA聚合酶Ⅰ(核仁):催化rRNA前 体的合成;Ⅱ:催化mRNA的合成;Ⅲ:催化小分 子RNA的合成
2020/10/23
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1、原核生物的RNA聚合酶(大肠杆菌)
Mw:465~480kD 亚基组成:α2ββ′σ (全酶)