铁皮石斛总生物碱含量变异规律
铁皮石斛的生物碱研究
铁皮石斛的生物碱研究,铁皮石斛的化学成分
铁皮石斛的生物碱研究,铁皮石斛的化学成分金蓉鸾等采用酸性染料比色法.对11
种石斛的生物碱含量进行测定。
结果表明，金钗石斛总生物碱含量达0.41%-0.64% ，远较其他石斛为高;而铁皮石斛的总生物碱含量为0.018%。
丁亚平等报道了安徽霍山3种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究。
结果表明:
(1) 由于石斛在传统上以其茎作药用，所以考察不同生长期的茎中主要有效成分生
物碱的含量对于确定石斛的最佳采收期等有重要的指导意义。
霍山石斛和铜皮石斛茎
中总生物碱在前3年是逐年递增的，3年以后，霍山石斛含量降低，铜皮石斛含量增
加不显著，基本保持恒定，这与它们在3年以后开始枯萎(且前者快于后者)相一致。
因此霍山石斛和铜皮石斛均以第三年采收为宜。
而铁皮石斛茎中总生物含员则一直保
持递增势头，至第四年仍未见大的衰减，这也与它在第四年时仍留有部分叶子，可继
续进行光合作用和其他代谢的实际情况相吻合，所以铁皮石斛最好在3年以后(第四年左右)采收。
(2) 从各部位来看，3种石斛生物碱含缺都呈现“叶>(成熟期)茎二根”的规律，故此，不能轻易否定石斛叶和根的药用价值。
(3) 从3种石斛茎的比较来看，总生物碱含量大致有如下顺序:霍山石斛>铜皮石斛>铁皮石斛，这与它们的实际价值相符合。
另一方面，3种石斛在各时期产生生物碱的
量不同:铁皮石斛按逐年加倍递增的方式积累生物碱，而霍山石斛和铜皮石斛则在第一年就有较多的生物碱形成，以后各年递增较少。
石斛中总生物碱量的测定
即取溶液于分液漏斗 中 ， 加人 ５ ｍ Ｌ 邻苯二 甲酸氢钾 一 氢氧化 钠缓 冲液 ， ２ ｍ Ｌ溴 甲酚 绿 ， 摇匀， 静置 ３ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 取５ ｍ Ｌ氯仿 液， 加入 ｌ ｍ Ｉ Ｄ ． Ｏ １ Ｎ氢氧 化钠无 水 乙醇 溶液 ， 于６ ｏ ℃热水 中 加热 。２ Ｏ～ ４ ０ ａ ｒ ｉ ｎ内于 ６ ２ ０ ｎ ｍ处 测 紫外 吸收 Ｊ 。以 １ ０ ｍＬ
收率为 ９ ８ ． ６ ％ 。采用 ８ ０ ％ 乙醇索 氏提取较好 ， 测定 总生物碱量为 ０ ． ４ ２ ６ ％。
关键词 ： 石斛 ； 总生物碱 ； 索氏提取
中图分类号 ： ０ ６ ５ ６ ． ３ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ８—０ ２ １ Ｘ（ ２ ０ １ ５ ） ０ ７—０ ０ ８ ９～ ０ ２
Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｔｏ ｍｌ Ａｌ ｋａ ｌ ｏ ｉ ｄ Ｆｒ ｏ ｍ Ｃａ ｕ ｉｓ ｆ Ｄｅ ｎｄｒ ｏ ｂ ｉ ｉ
， ｌ ｇ Ｘ ｉ ａ ｏ ｆ ａ ｎ ， Ｗ ａ ｎ ｇ Ｗ ｅ ｎ ｊ ｉ ａ ｎ
（ Ｂ ｏ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｔ ｅ ａ ｃ ｈ ｅ ｒ ｓ Ｃ ｏ Ｕ ｅ ｇ ｅ ， Ｂ ｏ ｚ ｈ ｏ ｕ ２ ３ ６ ８ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
分别取 ０ ． ４ 、 ０ ． ８ 、 １ ． ２ 、 １ ． ６ 、 ２ ． ０ ｍ Ｌ盐酸金 刚烷胺标储液 于１ ０ ｍ Ｌ容量瓶 中 ， 用氯仿稀 释至刻度 ， 即得 ２ 、 ４ 、 ６ 、 ８ 、 １ ０ １ ￣ ｒ ： ， ／ ｍ Ｌ的盐酸金 刚烷 胺溶 液 ， 用 酸 性染 料 比色法 测定 吸光 度 。
不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱及总黄酮含量的差异
不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱及总黄酮含量的差异唐丽;李菁;龙华;李贵【摘要】采用苯酚硫酸法、酸性染料比色法以及硝酸铝比色法分别测定并比较不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱及总黄酮的含量差异,为铁皮石斛资源的充分合理利用提供科学依据.结果表明,不同生长龄铁皮石斛茎与叶中总多糖、总生物碱、总黄酮的含量均有显著差异,其中总多糖主要集中于茎,总生物碱和总黄酮主要集中于叶;总多糖含量以2年龄茎最高,为35.32％,总生物碱含量以1年龄叶最高,为0.036％,总黄酮含量以半年生叶最佳,为0.104％;总多糖含量随着生长龄的增加而逐渐减少;3年龄以内的总生物碱和总黄酮含量明显较高,且不同龄之间含量差异较小,而当植株生长至4、5年龄时,其总生物碱及总黄酮的含量明显较低.铁皮石斛茎与叶中各含有较高的不同有效成分,茎和叶均可作为药用资源加以充分利用;为获取最佳效益,综合考虑生长周期、生物量及药用成分含量等因素,人工栽培的铁皮石斛以3年龄内采收为宜,不宜栽种4年以上.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2015(042)008【总页数】5页(P17-21)【关键词】铁皮石斛;生长龄;总多糖;总生物碱;总黄酮【作者】唐丽;李菁;龙华;李贵【作者单位】植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000;植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000;植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000;植物资源保护与利用湖南省高校重点实验室/吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南吉首416000【正文语种】中文【中图分类】S567.9铁皮石斛（Dendrobium candidum）为兰科石斛属植物，又名黑节草，为我国传统名贵中药材，兼具医疗与保健养生双重功效，居“九大仙草”之首［1］。
铁皮石斛和重唇石斛杂交F_1代总生物碱和多糖含量测定
摘 要 ：用 酸 性 染 料 分 光 光 度 法 和 苯 酚 一 酸 比色 法 测 定 铁 皮石 斛 、重唇 石 斛 及 其 Ｆ 硫 代 石 斛 碱 、石 斛 多糖 含
量 ，杂交 Ｆ 代 各 单 株 的 石 斛 碱 和 石 斛 多 糖 的 含 量 均 介 于 铁 皮 石 斛 和 重 唇 石 斛 之 问 ，其 中 的 ２ ８ ２ ３ ４ 。 、５ 、６ 、６ 、７ 、
陈 海 柳 ． 六 价 铬 抑制 淡 水 绿 藻 生 长对 毒性 效 应 ［ ］ 环 境 Ｊ．
科 学 ，２ ０ ，２ （ ） １— １ ０ ３ ４ ２ ：４ ５ ．
Ｂｒ ｄｏ ｄ Ｍ Ｍ ． Ａ ｒ ｐ ｄ ａ ｄ ｓ ｎ ｉ ｖ ｍ ｅｈ ｄ ｆｒ ｔ ｅ ａ ｆｒ ａ ｉ ｎ ｅ ｓｔ ｅ ｉ ｔｏ ｏ ｈ ｑ ａ ｔ ａ ｉｎ ｆ ｕ ｎ ｉ ｔ ｏ ｍ ｉｒ ｇ ａ ｔ ｏ ｃ ｏ ｒｍ ｑ ａ ｔ ｉ ｓ ｏ ｐ ｏ ｅｎ ｕ ｉ ｚｎ ｔ ｅ ｕ ｎ ｉ ｅ ｆ ｒｔ ｉ ｔ ｉｉ ｇ ｈ ｔ ｌ
Ｒ ｎ ｒ ． Ｇ ｏ ｉｇｃｎｅｎｏｅ ｅｆ ｏｉａｅ ｈｍｃｌ ［ ］ ｅｎ Ｒ ｒｗｎ ｏｃｒ ｖｒ ｒｕ ｒ ｔｄｃ ｅ ｉａ Ｊ ． ｐ ｌ ｎ ｓ
Ｅ ｖ ｏ ｃ Ｔ ｃ ，２ ０ ，３ （ ） ５ ｎ ｉ ｎ Ｓ ｉ ｅ ｈ ０ ｌ ５ ７ ：１ ４—１ Ｏ ｒ ６．
魏 正 贵 ，尹 明 ． 稀 土元 素 在 赣 南 非 稀 土 矿 区 和 不 同 稀 土 矿 区土 壤 一 铁 芒 萁 （ ｉ ａ ｏ ｔ ｉ ｌ ｅ ｒ ） 系 统 中 的分 布 、 累 Ｄ ｃ ｎ ｐｅ ｓ ｉ ａｉ ｒ ｒ ｎ ｓ 积 和 迁 移 ［ ］ 生 态 学 报 ，２ ０ ，２ （ ） ０ Ｊ． ０ １ １ ６ ：９ ０—９ ６ ０．
石斛鲜汁加工方法对总生物碱溶出量影响研究
石斛鲜汁加工方法对总生物碱溶出量影响研究陈敏;陈婧超;黄文璐;刘淑芸;薛青荣;冯英鹏;惠爱玲;张文成【摘要】以铁皮石斛鲜条压榨汁为试验对象,研究不同加工方法对鲜汁中总生物碱溶出量的影响.结果表明:冷冻预处理及超声波辅助浸提对石斛汁中总生物碱溶出量影响较大.石斛鲜条宜切段冷冻处理后加入30倍40℃酸水(pH 4.0)压榨制汁,且辅以400 W超声波处理10 min,此时石斛汁中总生物碱溶出量达到10.24μg/g,较常规榨汁(5.26μg/g)提高94.68％.石斛汁经巴氏杀菌处理(80℃,30 min)后,其总生物碱溶出量降低8.00％,但保存期可延长至6周～7周;冷藏7周的石斛汁中总生物碱溶出量仍高于常规榨汁52.47％.该研究促进了石斛资源合理利用,并为石斛汁保健饮品开发提供技术支持.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2019(040)012【总页数】7页(P103-109)【关键词】铁皮石斛;冷冻预处理;超声波;总生物碱;溶出量;巴氏杀菌【作者】陈敏;陈婧超;黄文璐;刘淑芸;薛青荣;冯英鹏;惠爱玲;张文成【作者单位】农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009;农产品生物化工教育部工程研究中心,合肥工业大学,安徽合肥230009【正文语种】中文铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热等功效，中国药典2010 版、2015 版均有收载。
药效成分分析显示其主要含有多糖、总生物碱等[1]，其中石斛多糖具有增强免疫力、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用[2-3]；总生物碱具有胃肠道保护、神经保护等作用[4-8]。
真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理
真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科石斛属多年生附生草本植物,是一种兼具观赏价值与药用价值的中草药。
本文选用铁皮石斛原球茎为材料(产地为福建连城),对原球茎离体培养条件进行优化,并以此为基础测定不同浓度和处理时间尖孢镰刀菌诱导子处理下铁皮石斛原球茎总生物碱含量的变化。
同时克隆了两个调控生物碱合成途径相关酶的基因——DoHDR基因和DoIspF基因,并进行了基因相对表达量分析。
1铁皮石斛离体培养条件优化以连城铁皮石斛为材料,优化铁皮石斛离体培养条件。
①对比水杨酸、蛋白胨和番茄汁对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果显示,当水杨酸浓度为2 mg/L时原球茎增殖效果最好,但原球茎生长状态不好。
蛋白胨浓度为2 mg/L时最有利原球茎增殖,番茄汁添加量为100 ml/L时原球茎增殖效果最好,且原球茎生长旺盛。
②比较几组不同混合有机添加物对铁皮石斛原球茎增殖的影响,采用的添加物组合分别为香蕉和土豆、苹果和土豆、香蕉和苹果、番茄和土豆。
结果表明添加50g/L土豆增殖效果最好③比较不同容器和培养方式对原球茎增殖的影响,结果表明,采用三角瓶液体振荡培养最有利原球茎增殖。
2真菌诱导子对铁皮石斛总生物碱含量的影响基于优化的离体培养条件下所得到的大量原球茎,比较不同浓度不同处理时间尖孢镰刀菌诱导子对铁皮石斛总生物碱的影响,结果发现当诱导子浓度较低时(100mg/L,200mg/L),总生物碱含量随处理时间增加呈先上升后下降的趋势,当诱导子浓度较高时(500 mg/L),总生物碱含量先下降后上升,而当诱导子浓度过高时(1000 mg/L)总生物碱合成受到抑制,含量都比较低。
而最适宜生物碱合成与积累的条件为200 mg/L诱导子处理3天,总生物碱含量最高。
3铁皮石斛HDR基因和IspF基因的克隆和生物信息学分析以铁皮石斛原球茎为材料采用同源克隆与RACE相结合的方法,得到铁皮石斛MEP途径的2个基因——DoHDR和DoIspF,DoHDR全长1784 bp,包含完整ORF,长度为1382 bp,编码460个氨基酸,生物信息学分析表明该基因编码的蛋白为稳定的酸性亲水蛋白,不具有跨膜结构,不含信号肽,二级结构预测表明,该蛋白主要含有α-螺旋、p-折叠和无规则卷曲。
快速测定铁皮石斛总生物碱含量方法的优化
舱 ） 总 生物 碱在 ０ ． ０ １ ９％ 一 ０ ． ０ ４ ３％ ， 生 物碱含 量 因种 质和 种植 年 限的 不 同 而异 ， 其 中云 南 产铁 皮 石斛总生物碱明显高于浙江产铁皮石斛 。１ ９ ６ ４年 ，
收稿 日期 ： ２ ｏ １ ３— ０ ９ — ２ ８ 基金项 目： 云南省 自然科学基金项 目（ ２ ０ １ ２ Ｆ Ｂ １ ９ ３ ） 作者简介 ： 刘 莉（ １ ９ ８ ２一 ） ， 女， 云南 昆明人 ， 助研 ， 硕士， 主要 从事 中药农业研究 ， ・ 为通讯作者 ， Ｅ ． ｍ ａ ｉ ｌ ： ｗ ｙ ｌ ￣ ０ １ ２ ＠１ ２ ６ ． ｅ ｏ ｍ。
要： 通过取样 量、 超 声时间、 漫提剂量 、 粒径等 ４ 个石斛 生物碱 的超声提取 影响 因素的正交和 单 因素试验 。结果表 明， 石斛 生
物碱含 量超声提 取测定 的最佳参数 ： ０ ． ０ ５ ０ ｇ 的取样 量、 ６ ｏ目的粒径、 ５ ０ ｒ ａ ｉ ｎ的超 声时间、 ６ ｏ的漫提试 剂用量 与取样 量比。该方 法
具 有样 品前期处理时间短， 测定仪器操作 简便 ， 测定速度快、 样 品用 量少的特点 ， 能在较 短时 间内对 大量单株个 体进行 检测鉴定 ， 为石斛的 品质育种提供 了有效途径和 手段。
关键词 ： 石斛 ； 超声提取 ； 总生物碱含量
中图分类号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． ９ 文献标识码 ： Ａ
应， 且每种石斛 的生物碱含量变化很大。铁皮石斛 具有抗衰老 、 抗肿瘤 、 降低血糖、 提高免疫功能等作 用， 对 恶 性肿 瘤 、 胃肠 道 疾病 、 糖尿病、 白 内障 、 关 节
炎、 血栓 闭塞性 脉管 炎 及 慢 性 咽炎 等 疾 病 具 有 很 好 的疗 超声 ３ 种不同方 式及甲醇 、 乙醇、 氯仿、 丙酮等不同溶剂对铁皮石斛
安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究
安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究
丁亚平;杨道麒;吴庆生;于力文;徐云
【期刊名称】《安徽农业大学学报》
【年(卷),期】1994(21)4
【摘要】研究了用溴甲酚绿测定石斛碱的条件和方法，并用该法对安徽省霍山县
产的三种石斛不同生长期的不同部位中总生物碱含量进行了测定，结果表明：霍山石斛、铜皮石斛和铁皮石斛茎部总生物碱含量分别为０．０２９１％、０．０２８０％和０．０２４０％。
霍山石斛总生物碱含量１年茎＜２年茎＜３年茎＞４年茎，宜３年采收；铁皮石斛１年茎＜２年茎＜３年茎＜４年茎，宜４年采收；铜皮石斛３年茎与４年茎含量差异不显著，也宜３年采收。
３种石斛总生物碱含量均为叶＞茎≈根，建议重新考查根、叶的药用价值及其综合开发利用的可行性。
【总页数】4页(P503-506)
【关键词】石料;生物碱;测定;霍山;安徽
【作者】丁亚平;杨道麒;吴庆生;于力文;徐云
【作者单位】安徽农业大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.不同来源铁皮石斛不同部位生物碱的分布规律研究 [J], 尚喜雨
2.安徽霍山3种石斛营养成分分析及其分布规律 [J], 于力文;蔡永萍
3.三种川产石斛有效成分的测定及其分布规律研究 [J], 陈蕤;崔盛;陶宗娅
4.石斛中总生物碱的含量测定方法研究 [J], 徐宁
5.霍山三种石斛与其栽培土壤中微量元素分布关系研究 [J], 吴庆生;杨道麒;毕守东;丁亚平;于力文;徐云
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铁皮石斛化学成分及其药理作用研究进展
尚喜雨 通过对铁皮石斛 的不 同部位 、 不 同采收 阶段 的生物
碱进行 比较分析 ， 结 果表 明生物 碱含 量基 本都 呈现 “ 茎 上段
２ ． １ 对免疫系统的影响 植 物多糖是一类 重要 的天然药 物， 它能显著提高 巨噬细胞 的吞 噬功能 ， 增强 Ｎ Ｋ细胞的活性 ， 促
为 １ 年 比较 恰 当 。
１ ． ５ 其他成分
铁 皮石 斛还 含有 一些 其它 联苄类 、 倍 半萜
类、 香 豆 素等 化 学 成 分 ， 其 中有 些 成 分 是 首次 发 现 的。王
涵 从 云南普洱铁 皮石 斛首 次提 取得 到具有 一定 的抗炎 与 抗肿瘤功效铁皮石 斛素 Ｓ这一 新组分 。据 罗镭 “ 等人通过
需氨基酸 的平均 质量 分数 为 ０ ． ２ ８— ２ ． ９ ６ ａ ｒ ｇ・ｇ ～， 其 含量随 着铁皮石斛生长周期 的延长而增加 。 １ ． ４ 微量元素 药材 中的微量 元素含量 往往会对 药效会造 成 一定的影 响， 同时药材 中的重金属 的微量超标会影 响药材 的品质。黎万奎 等对铁 皮石斛 中 １ ０种微量元素进行研究 表 明除铜外 ， 铁 皮石斛组 织培养物 中其他微量元素均高于其
＞叶 一根 ＞茎中段 茎下段” 的大体趋势 ； １ 年 生石斛的生物
碱含量 １ １２年 生 ≥野 生 型 。 ＞
津益胃、 润肺止 咳等功 效 。在诸 多 经典 的 医学古籍 如 《 本草 纲 目》、 《 道藏》、 《 神农 本草经》 等 中里均有记 载 ， 并 被录入 于 ２ ０ １ ０版中国药典。铁 皮石 斛常 以新鲜或 干燥茎作 为药用 ， 铁
的功效。高建平 ｕ 等人 的试验研 究表明 ， 灌 胃给予铁皮 石斛
不同来源铁皮石斛中多糖_氨基酸和生物碱含量比较
·773·
在一定程度上解决这一问题。近年来，研究人员已 经构建了棉花、番茄、铁皮石斛和橡胶树的全长均一 化 cDNA 文 库，并 成 功 用 于 功 能 基 因 的 筛 选 和 克 隆用改良的 TＲIzol 方法获得 了足够量的丹参根部总 ＲNA，并进一步制备了丹参 根部全长均一化 cDNA，为后续丹参功能基因克隆 及丹参 ＲNA 干涉突变体库的构建奠定了基础。
［3］ 王维婷，单成钢，倪大鹏，等 . 丹参有效成分代谢生理生 化及分子生物学研究进展［J］． 中药材，2009，32 （ 9 ） ： 1472-1476.
［4］ 李滢，孙超，罗红梅，等 . 基于高通量测序 454 GS FLX 的丹参转录组学研究［J］． 药学学报，2010，45（ 4） ： 524-
人工栽培品 4. 7 3. 1 3. 9 11. 8 4. 6 8. 5 8. 5 7. 6 6. 9 9. 3 3. 6 6. 3 － 3. 6 9. 5 2. 1
2. 3 铁皮石斛总生物碱含量的测定 用碱性氯仿 提取生物碱，溴甲酚绿酸性染料比色法测定其含量。 铁皮石斛样品在 60 ℃ 烘箱中烘干，粉碎，过 60 目 筛。取各种样品粗粉 0. 1 g，用适量的氨水润湿密塞 30 min，精密加入氯仿 10 mL 称重，水浴加热回流 2 h，冷却后，氯仿补足失重，过滤，以酸性染料比色法 测定含量〔5〕。结果表明，不同来源铁皮石斛中氨基 酸生物碱含量顺序为： 组培品 ＞ 野生品 ＞ 人工栽培
表 3 不同来源铁皮石斛的总生物碱含量（ n =3）
材料来源 野生品 组培品 人工栽培品
总生物碱含量 /% 0. 085 0. 091 0. 043
石斛中总生物碱和多糖的含量测定
品种 金钗石斛
铁皮石斛
# 427 #
表 2 样品测 定结果
批号
1 2 3 1 2 3
平均百分含量( % )
014566 014528 014672 01 02649 01 02557 01 02579
RSD ( % )
310 215 217 414 315 312
212 多糖的含量测定 21211 多糖的提取精制
省力, 且提取结果与药典方法一致。 412 采用高效液相色谱法测定六味木香散中荜茇 的含量, 其结果的精密度, 重现性较好。结果准确 可靠。
参考文献
1 中国药典 1 一部, 2000: 414 2 中国药典 1 一部, 2000: 188
石斛中总生物碱和多糖的含量测定
李亚芳 张晓华 孙国明 ( 浙江省杭州市第一人民医院 310006)
52162
951 6 1031 3 51 2
龙陵县不同时期栽培铁皮石斛多糖及生物碱含量比较分析
龙陵县不同时期栽培铁皮石斛多糖及生物碱含量比较分析作者：文美琼李璐杨申明等来源：《中国民族民间医药·下半月》2015年第05期【摘要】目的：比较3年生铁皮石斛3月枝条的及8月枝条多糖及生物碱含量。
方法：采用溶剂提取法提取多糖及生物碱，用分光光度法测定多糖及生物碱含量。
结果：茎部各部位、不同时期的铁皮石斛多糖含量在15.66%～26.63%之间，生物碱含量在0.016%-0.021%之间。
结论：多糖含量茎中部最高，其次是茎上部，茎下部含量最低；多糖含量随生长时间增长而增加，且在不同生长时期、不同部位，多糖含量差别较大。
生物碱为茎上部含量最高，其次是茎中部，含量最低为茎下部；不同生长时期除茎下部外，生物碱含量随生长时间增长反而减小，但不同部位的铁皮石斛生物碱含量差别较小。
【关键词】铁皮石斛；生物碱；多糖；含量；不同时期【中图分类号】【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2015）10-0015-03Comparative Analysis on Contents of Polysaccharides and Alkaloids in Dendrobium officinale Collected in Various Periods at LonglingWEN MeiqiongLI LuYANG ShenmingXU ChengdongDUAN RuicaiXU XiaolinDepartment of Chemistry and Life Science， Chuxiong Normal University， Chuxiong 675000， Yunnan， P.R .ChinaAbstract：[WTHZ]Objective[WTBZ] The branches of Dendrobium Officinale with threeyear growth period have been collected in 3 or 8， and their contents of polysaccharides as well as alkaloids have been analyzed and compared. [WTHZ]Method[WTBZ] The branches were processed with solvent extraction， their contents of polysaccharides and alkaloids were determined by spectro- photometry. [WTHZ]Results[WTBZ] The contents of polysaccharide in various parts of stems ranged from 15.66% to 26.63%， while the contents of alkaloid ranged from 0.016% to 0.021%. [WTHZ]Conclusion[WTBZ] The polysaccharide content at middle section was the largest， then the upside， and finally the downside， the content increased with the growth period of the branch， and varied greatly according to the growth period as well as section； the alkaloids content at upside section was the largest， then the middle， and finally the downside， but the content decreased with the growth period， and varied little according to the growth period or section.Keywords：Dendrobium candidum；alkaloid；polysaccharide；content铁皮石斛为兰科石斛属植物铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的干燥茎，是我国传统的滋阴名贵中药，其保健功效日愈为人们所重视。
不同季节及部位流苏石斛总生物碱含量的测定
取滤 液 ５ ｍ Ｌ加 ０ ． ０ １ ｍｏ ｌ ・ Ｌ 的氢 氧化钠 乙醇溶液
１ ． ０ ｍ Ｌ ，摇 匀 ，于 ６ ２ ０ ｒ ｉ ｍ 处 测 得 吸 光 度值 ，计 算
准 溶 液 。取 标 准 溶 液 １ ． ０ ，２ ． ０ ，３ ． ０ ，４ ． ０ ，５ ． ０ ｍ Ｌ分 别 置 于 ６ ０ ｍ Ｌ分 液 漏 斗 中 ，用 氯 仿 稀 释 至
１ ０ ｍ Ｌ ，加 入 ｐ Ｈ值 ４ ． ５缓 冲液 ５ ． ０ ｍ Ｌ和 ０ ． ０ ４ ％ 溴
摘
要 ：采 用 酸 性 染 料 比色 法 测 定 贵 州 流 苏 石 斛 药 材 中 总 生 物 碱 含 量 。结 果 表 明 ，野 生 流 苏 石 斛 药 材 在 不
同 部位 及 不 同 季 节 总 生 物 碱 含 量 差 异 明显 。 夏 季 茎 中 生 物 碱 含 量 最 高 ，根 、 叶部 位 也 能 检 测 出 生 物 碱 。 比 较 分
不 同季 节 及 部 位 流 苏石 斛 总生 物 碱 含 量 的测定
敖 茂 宏 ， 宋 智 琴 ，吴 明开。
（ １ ．贵州省亚热带作物研究 所 ，贵州 兴义 ５ ６ ２ ４ ０ ０ ；２ ．黔西南民族 职业技术学 院，贵州 兴 义
５ ５ ０ ０ ０ ６ ）
５ ６ ２ ４ ０ ０
３ ．贵 州 省 现 代 中 药 材研 究 所 ，贵 州 贵 阳
１ ． ３ 方 法
１ ． ３ ． １ 缓 冲 液 的 配 制
ｐ Ｈ值 ４ ． ５缓 冲 液 。将 ｐ Ｈ 值 为 ４的邻 苯 二
甲酸氢 钾用 ０ ． ２ ｏ ｔ ｏ ｌ ・ Ｌ 氢氧化钠调至 ｐ Ｈ值 ４ ． ５ 备用。
铁皮石斛的化学成分、药理作用和临床应用
ｔｕｇｕｏｃｈａｎｇ＠ｙａｈｏｏ．ｏ哪．∞
・７０・
２．４对消化系统的作用铁皮斛味甘、性微寒．既可养阴．又
万方数据
Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ ２２ Ｎｏ．２ ２０１０
能清热。对阴虚胃火盛型的胃病，服用铁皮石斛更是大有益 处。用浸膏灌胃对家兔进行观察．铁皮石斛能对抗阿托品对 唾液分泌的抑制作用，与西洋参有协同作用，合用后还能促进 正常家兔的唾液分泌【２２】。 ３临床应用 现代临床和药理研究证明，铁皮石斛具有滋阴润肺、养胃 生津、清热明目、补五脏虚劳的功效。在恶性肿瘤的辅助治 疗、慢性胃炎、糖尿病、慢性咽炎、久病体虚免疫功能低下、眼‘ 科保健等方面都有广泛的应用。铁皮石斛在恶性肿瘤的治疗 中，一方面因其所含的菲类物质鼓槌菲（ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｅｎｅ）和毛兰 素（ｅｒｉａｎｉｎ）有明显的抗癌活性；另一方面因其多糖类成分能 显著增加细胞免疫功能和体液免疫功能。增强单核一巨噬细胞 吞噬功能。因而对临床肿瘤放、化疗患者及各种原因造成的 免疫低下患者可以起到很有效的辅助治疗作用。陈晓萍（２３） 等通过８０例肺癌放、化疗患者结合铁皮枫斗制剂的治疗，表 明铁皮枫斗制剂对气阴两虚证及肺癌患者症状改善效果显 著。以铁皮石斛为主制成的铁皮枫斗颗粒和铁皮枫斗胶囊有 效改善慢性萎缩性胃炎气阴两虚证，临床未发现任何副作 用【２４】。实验研究证明铁皮石斛还具有很好降血糖效果。因 铁皮的抗氧化和免疫调节功能，故对中老年人群具有增强机 体免疫力、抗衰老的保健的功效。 ４结语 铁皮石斛是石斛属植物中的名贵品种，在治疗和日常保 健中都有广泛的应用，而且通过实验研究，对小鼠无急性毒性
（２２】徐建华，李莉，陈立钻．铁皮石斛与西洋参的养阴生津作用研究 （Ｊ］．中草药．１９９５。２６（２）：７９． ［２３】陈晓萍．张沂平，朱婀如，等．铁皮枫斗颗粒（胶囊）治疗肺癌放化
3种不同石斛的化学成分及相关药理学研究进展
［12］郑悦亮，周辉，赵万军，等.和胃接骨胶囊对家兔骨折愈合中转化生长因子-β表达的影响［J ］.中国中西医结合急救杂志，2006，13（4）：231-233.［13］梁文，陈丽纯，陈灿儿，等.接骨宝对骨折愈合过程中转化生长因子-β1表达的影响［J ］.国际医药卫生导报，2008，14（23）：6-7.［14］侯晓峰，李朝旭，刘景生.鹿茸对实验型骨折愈合过程中TGF-β1的表达影响［J ］.中医药学刊，2005，23（5）：890-891.［15］史达，许潇，李振宇，等.生骨紫金丹在骨折愈合过程中对TGF-β1和bFGF 影响的实验研究［J ］.中医药学刊，2006，24（10）：1875-1876.［16］彭锐，程杰，邹阳.生骨注射液对大鼠骨折愈合过程中bFGF 表达的影响［J ］.湖北中医杂志，2007，29（7）：5-6.［17］刘英杰，翁风泉，李强，等．活血驳骨丸对骨折早期骨痂质量的影响［J ］.中医研究，2005，18（1）：35-36.［18］李强，王希平，李鄂，等.活血驳骨丸对内源性bFGF 分泌影响的探讨［J ］.放射免疫学杂志，2006，（1）：39-40.（责任编辑：姜付平）收稿日期：2010－01－12作者简介：徐琼（1981－），女，浙江普陀人，浙江中医药大学硕士研究生，研究方向为心血管药理；吕圭源（1956－），男，浙江新昌人，浙江中医药大学教授、博士生导师，研究方向为心血管药理。
3种不同石斛的化学成分及相关药理学研究进展徐琼1，陈素红2，吕圭源1*（1.浙江中医药大学，浙江杭州310053；2.温州医学院，浙江温州325035）摘要：目的：对2005版《中国药典》所收载的3种石斛（金钗石斛、铁皮石斛、马鞭石斛）的化学成分及药理作用作一比较分析，为临床用药提供一定的帮助。
方法：通过查阅中国期刊全文数据库（CNKI ）、中国生物医学文献数据库（CBM ）、万方数据库和维普全文数据库1990—2008的相关文献，对这3种石斛已有报道的化学成分、药理作用研究进行较系统的综述并比较分析。
211225205_石斛生物碱类成分药理活性及其作用机制研究进展
研究ꎬ 可为开发石斛相关新药及保健食品提供科学依据ꎮ
关键词: 生物碱ꎻ 石斛碱ꎻ 药理活性ꎻ 神经保护ꎻ 改善记忆ꎻ 糖脂代谢
石斛是兰科石斛属植物的总称ꎬ 主要生长于秦岭￣
位、 栽培条件、 采收期、 生长地区和加工方式等也会影
酸甲基酯酶基因 (ＣＬ８０６７)、 乙酰辅酶 Ａ 酰基转移酶基
因、 焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶 (ＭＶＤ) 基因、 磷酸甲羟戊
酸激酶基因、 萜烯合酶 ( ＴＰＳ２１) 基因、 托品酮还原酶
基因 Ｄｎ ＴＲＩ、 Ｄｎ ＴＲＩＩ [１０] ꎬ 通过对这些关键酶基因表达
调控、 转基因等手段实现生物碱在石斛中的高效合成ꎬ
表达和活化有关ꎮ α￣、 β￣、 γ￣分泌酶是 ＡＰＰ 水解形成的
发现ꎬ ＤＮＬＡ 能通过上调 ｖ￣ＡＴＰ 酶 Ａ１ 的蛋白质水平ꎬ
改善自溶体酸化和蛋白水解ꎬ 进而恢复正常溶酶体蛋白
水解和自噬效率ꎮ ＤＮＬＡ 可通过保护神经元和突触丧失
来减轻小鼠的空间学习和记忆损伤ꎮ Ｎｉｅ 等[３７] 研究表
明ꎬ ＤＮＬＡ 可通过增加脑源性神经营养因子 ( ＢＤＮＦ)、
毒性较大ꎻ 醇提法具有成本低、 毒性较低等优点ꎬ 缺点
草” 之首ꎮ «中国药典» 中对石斛的记载为性甘ꎬ 味微
质[１１￣１２] ꎮ 酶提取法在保证生物碱类活性成分完整率和高
表明ꎬ 石斛主要活性成分包含多糖类、 生物碱类、 联苄
法[１３￣１４] ꎬ 值得进一步研究ꎮ 通过酶提取方法与有机溶剂
类、 菲类、 酚类等ꎮ 其中ꎬ 石斛生物碱类成分具有神经
物碱类成分药理活性相关文献ꎬ 根据活性及机制的不同进行总结归纳ꎮ 结果: 目前石斛生物碱类成分的药理活性研
铁皮石斛总生物碱含量变异规律
[ 摘要 ] 目的: 全面了解不同种质、不同采收年限铁皮石斛 药材总生 物碱含 量及其变 异规律, 为 铁皮石斛 真伪鉴 别与优 质药材培育提供依据。方法: 采集铁皮石斛人工栽培骨干基地一至三年 生铁皮石 斛 17个 种质 41 个样品, 以及市售 不同价位 枫斗药材 11个样品; 采用酸性染料比色法测定总生物碱含 量。结果 : 人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总 生物 碱在 0 019 0% ~ 0 043 0% ; 浙江省 11个铁皮石斛 种质一 年生、二年 生、三年生 样品 平均 总生物 碱为 0 025 3% , 0 027 0% , 0 032 6% , 云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为 0 034 3% 。结论: 不同种 质、年龄的铁 皮石斛 总生物 碱含量 差异很 大, 并 且总生物碱含量随着 生长年限的增加而增加, 云南产铁皮石斛总生物碱明 显高于浙江 产铁皮石斛 , 但正 宗的铁皮石 斛总生物 碱含量具有明显限量 范围, 总生物碱含量明显偏离限量范围的样品可以基 本确定为非 铁皮石斛, 总生物 碱含量在此 范围的样 品必须结合多糖含量 与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。
10 0 mL, 加入 pH 4 5缓冲液 5 0 mL 和 0 04% 溴 甲酚绿溶液 1 0 mL, 剧烈振摇 3 m in, 静置 30 m in, 氯仿层经氯仿浸泡处理并干燥后的药棉滤过, 取续 滤液 5 0 mL 加 0 01 m o l L- 1氢氧化钠无水乙醇液 1 0 mL 摇匀, 以氯仿 10 0 mL 为空白, 同法操作, 于 波长 620 nm 处测得吸收度。吸光度与浓度的回归 方程 为 C = 9 542 9A - 0 038, r = 0 999 8。在 0 01~ 0 05 m g, 浓度 ( C )与吸光度 (A ) 具有良好的 线性关系。
石斛碱
石斛(Dendrobium nobile Lindl)为兰科石斛属多种药用植 物的总称，具有调节机体免疫作用、生津益胃、抗白内障、 抗肿瘤等功能。生物碱是一类含氮有机化合物，大多数具 有较复杂的氮杂环结构，并具有生理活性和碱性。从广义 上讲，生物界除去生物体必须的有机化合物，如氨基酸、 多肽、蛋白质和 B 族维生素等外，其他所有的含氮有机化 合物都可视为生物碱。生物碱是中药材中众多有效化学成 分种类之一，其药理作用甚为广泛，石斛碱是从金钗石斛 中获得的主要生物碱类，它的生物活性与木防己毒素 (Picrotoxin)相似，通过化学与光谱方法检测确定石斛碱 具有一种木防己毒烷(Picrotoxane)的骨架。石斛碱是第一 种被检测到的 Picrotoxane-type 的生物碱。
1972年，Yamada等人报道了完整的石斛碱的合成途径。 Yamada等人以四氢萘酮9为初始料，经Ac2O-p-TsOH回 流处理转变为烯醇乙酸酯类物质10(图3)，随后将10 臭氧化得到一种醛类物质11，利用Corey-Chaykovsky 条件然后冷凝使链伸长，再经含草酸水溶液的甲基酮 水解处理得到一种烯醇醚类物质12，通过酮体保护形 成环状缩酮13，随后经过如图3所示的一系列反应顺 序生成酮酯类混合物质24和25，然后分离得到25后在 NaBH4、Glyme存在时环化得到②，之后还原得到 Dendrobine①，从9到获得石斛碱①总共需要23步， 只有1.2%的获得率。除此之外还可以将25溴化后水解 得到26，然后经一系列反应得到③，再经 Eschweiler–Clark甲基化反应得到石斛酮碱④。
金钗石斛多糖和生物碱均能降低肾上腺素所致的小鼠血糖升高。其生物总碱 可改善脂多糖诱导的大鼠学习记忆功能减退。2009 年，Q.Wang 等人通过将 新生大鼠原代培养神经元 OGD/RP损伤后测定乳酸脱氢酶(LDH)释放和噻唑蓝 (MTT)液比色吸光度，评价神经元活性，观察不同浓度的石斛碱对于离体脑 损伤的保护作用，发现石斛碱可有效减轻 OGD/RP 对脑片的缺血性损伤，并 对于 OGD/RP 原代神经元具有显著的保护作用。2011 年，Yanfei Li 等人 发现石斛碱能够抑制由于脂多糖引起的记忆损伤问题。2012 年 L.Fitria 等人发现石斛碱对生育力增强起着重要的作用，实验材料是提取野生植物鸽 子兰（D.crumenatum）的假鳞茎汁，其研究目的是用与女性生殖功能类似的 Wistar 大鼠作为动物模型来研究鸽子兰假鳞茎汁的作用效果。结果表明口 服的鸽子兰假鳞茎果汁能显著提高 Wistar 大鼠雌激素水平，增加三级卵泡 的数量。此外金钗石斛对眼科疾病有明显的治疗作用，其生物碱具有较好的 抗糖性白内障作用，可下调 iNOS 基因的表达，显著抑制 NOS 的活性，减 少 NO 的产生，从而减轻氧化损伤作用，达到抗白内障作用。体外研究表明 金钗石斛的总生物碱和粗多糖均有一定的抗白内障作用，而总生物碱的作用 优于粗多糖。
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上均为国产分析试剂 ) 。石斛碱对照品自制 [ 4] , 面 积归一法检测含量达 99% 。 1 2 供试药材
2008年 11月至 2009月 2 月, 采集浙江省铁皮 石斛人工栽培基地 11 个种质一至三年生 ( 铁皮石 斛萌蘖生理年龄 ) 样品 33个, 云南省铁皮石斛人工 栽培基地 6 个种 质一年 生 ( 铁皮 石斛萌 蘖生 理年 龄 ) 样品 6个、齿瓣石斛 D devoninum 样品 2个, 其 中铁皮石斛样品采集地产量占全国 90% 以 上。购 买杭州胡庆余堂、杭州青 藏奇珍铁皮枫斗 ( 药材基 原为铁皮石斛 ) 样品 2个, 杭州吴山广场、杭州胡庆 余堂、杭州青藏奇珍等枫 斗 ( 药材 基原为非铁皮石 斛 ) 样品 9个。浙江省人工栽培基地铁皮石斛药材 样品详见文献 [ 5]。 1 3 铁皮石斛总生物碱含量的测定 1 3 1 样品处理 样品在 60 烘箱中烘干, 粉碎, 过 60目筛。取各种样品粗粉 0 1 g, 用适量的氨水 润湿密塞 30 m in, 精密加入氯仿 10 mL 称重, 水浴加 热回流 2 h, 冷却后, 氯仿补足失重, 过滤, 以酸性染 料比色法测定含量 [ 6] , 试验平行 3次。部分样品氯 仿稀释后再进行测定。
10 0 mL, 加入 pH 4 5缓冲液 5 0 mL 和 0 04% 溴 甲酚绿溶液 1 0 mL, 剧烈振摇 3 m in, 静置 30 m in, 氯仿层经氯仿浸泡处理并干燥后的药棉滤过, 取续 滤液 5 0 mL 加 0 01 m o l L- 1氢氧化钠无水乙醇液 1 0 mL 摇匀, 以氯仿 10 0 mL 为空白, 同法操作, 于 波长 620 nm 处测得吸收度。吸光度与浓度的回归 方程 为 C = 9 542 9A - 0 038, r = 0 999 8。在 0 01~ 0 05 m g, 浓度 ( C )与吸光度 (A ) 具有良好的 线性关系。
元 /g
药材 基原
总生物碱 /%
S1 杭州吴山广场 0. 4 枫斗
非铁皮石斛 0. 060 0
S2 杭州吴山广场 1. 2 枫斗
非铁皮石斛 0. 027 5
S3 杭州吴山广场 2. 2 枫斗
非铁皮石斛 0. 087 5
S4 杭州吴山广场 4. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 022 5
S5 杭州吴山广场 5. 0 枫斗
0. 033 7
12
0. 036 0
0. 039 0
0. 042 5
0. 039 2
13
0. 033 0
0. 028 5
0. 020 5
0. 027 3
表 2 云南省人工栽培石斛总生物碱质量分数
种质
14 15 16 17 18 19 20 21
产地
德宏 德宏 景洪 德康 景洪 勐海 德宏 德宏
药材基原
0 027 5% ~ 0 043 0% , 市场购买铁皮枫斗 (药材基 原为铁皮石斛, 年龄未知 ) 为 0 032 5% , 0 039 0% , 齿瓣石斛总生物碱为 0 023 0% , 0 024 5% , 其他枫 斗 ( 非 铁皮 石斛 ) 样 品总 生物 碱 为 0 022 50% ~ 0 087 5% 。目前, 浙江铁皮石斛骨干基地一般都在 二至三年生采收, 云南铁皮石斛骨干基地一般都在 一年生采收, 根据上述结果可以基本确定总生物碱 明显偏离 0 019 0% ~ 0 043 0% 的样品为非铁皮石
浙江人工栽培不同种质铁皮石斛总生物碱含量
见表 1, 云南省人工栽培铁皮石斛、齿瓣石斛和市售 枫斗药材总生物碱含量见表 2, 3, 供试铁皮石斛其 生物碱质量分数为 0 019 0% ~ 0 043 0% , 其中浙 江人工栽培骨干基地生产的铁皮石斛一至三年生药 材总生物碱质量分数为 0 019 0% ~ 0 042 5% , 云 南一年 生 铁 皮 石斛 总 生 物 碱 质 量 分 数为
非铁皮石斛 0. 031 5
S10 青藏奇珍
66. 0 铁皮枫斗 铁皮石斛 0. 039 0
23 89
第 35卷第 18 期 2010年 9 月
V ol 35, Issu e 18 Sep tember, 2010
2 2 种质、年龄、产地与铁皮石斛总生物碱含量的 关系
表 1 同时可见, 产地环境差异不大的浙江人工 栽培铁皮石斛, 不同种质总生物碱含量均存在极显 著的差异。 11个种质一至三年药材平均总生物碱 质量分数 1号种质最低, 为 0 022 5% , 12号种质最 高, 达到 0 039 2% , 两者相差 0 016 7% 。其中 1 ~ 6号种质药材样品采自同一产地, 栽培环境、栽培基 质与基地管理完全一致, 不同种质间总生物碱含量 同样存在极显著差异, 一至三年生样品平均值变幅 为 0 022 5% ~ 0 030 5% 。因此, 人工栽培铁皮石 斛其总生物碱含量的差异主要来自遗传差异。
1 3 2 线性试验 精密称取石斛碱 1 00 m g置 100 mL 量瓶中加氯仿至刻度。精密量取 1 0, 2 0, 3 0, 4 0, 5 0 mL 分别置分液漏斗中, 用氯仿准确稀释至
第 35卷第 18 期 2010年 9 月
V ol 35, Issu e 18 Sep tember, 2010
非铁皮石斛 0. 032 5
S6 杭州吴山广场 8. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 025 0
S6 杭州胡庆余堂 4. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 023 5
S7 杭州胡庆余堂 10. 0 枫斗
非铁皮石斛 0. 035 0
S8 杭州胡庆余堂 20. 0 铁皮枫斗 铁皮石斛 0. 032 5
S9 青藏奇珍
15. 0 枫斗
斛, 但总生物碱含量在此范围的样品也可能不是铁 皮石斛。因此, 总生物碱含量是鉴别铁皮石斛药材真 伪与优劣的一个重要指标, 但尚不能根据总生物碱单 一指标辨别铁皮石斛药材真伪与优劣, 必须结合多糖 含量与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药 材的真伪与优劣。
表 1 浙江人工栽培铁皮石斛总生物 碱质量分数 %
第 35卷第 18 期 2010年 9 月
V ol 35, Issu e 18 Sep tember, 2010
铁皮石斛总生物碱含量变异规律
诸燕1, 张爱莲 1, 何伯伟2, 张新凤 1, 俞巧仙3, 斯金平 1*
( 1 浙江农林大学 亚热带森林培育国家重点实验室培育基地 天然药物研发中心, 浙江 临安 311300; 2 浙江省中药材产业协会, 浙江 杭州 310020; 3 浙江森宇药业有限公司, 浙江 义乌 322000)
种质
一年生
二年生
三年生
平均值
1
0. 020 5
0. 021 0
0. 026 0
0. 022 5
2
0. 022 5
0. 026 5
0. 037 5
0. 028 8
3
0. 024 0
0. 032 0
0. 035 5
0. 030 5
5
0. 024 0
0. 027 5
0. 035 5
0. 029 0
6
0. 026 5
[ 摘要 ] 目的: 全面了解不同种质、不同采收年限铁皮石斛 药材总生 物碱含 量及其变 异规律, 为 铁皮石斛 真伪鉴 别与优 质药材培育提供依据。方法: 采集铁皮石斛人工栽培骨干基地一至三年 生铁皮石 斛 17个 种质 41 个样品, 以及市售 不同价位 枫斗药材 11个样品; 采用酸性染料比色法测定总生物碱含 量。结果 : 人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总 生物 碱在 0 019 0% ~ 0 043 0% ; 浙江省 11个铁皮石斛 种质一 年生、二年 生、三年生 样品 平均 总生物 碱为 0 025 3% , 0 027 0% , 0 032 6% , 云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为 0 034 3% 。结论: 不同种 质、年龄的铁 皮石斛 总生物 碱含量 差异很 大, 并 且总生物碱含量随着 生长年限的增加而增加, 云南产铁皮石斛总生物碱明 显高于浙江 产铁皮石斛 , 但正 宗的铁皮石 斛总生物 碱含量具有明显限量 范围, 总生物碱含量明显偏离限量范围的样品可以基 本确定为非 铁皮石斛, 总生物 碱含量在此 范围的样 品必须结合多糖含量 与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。
1 3 3 稳定性试验 精取某一样品溶液 10 m L, 另 以氯仿 10 0 mL 为空白, 按 线性试验 项上操作, 分别在 0, 10, 20, 30, 40 m in测定吸光度。结果显示 该显色在 20 m in内稳定。 1 3 4 精密度试验 精取 0 001 g L- 1的石斛碱 溶液 10 m L, 另以氯仿 10 0 mL 为空白, 其余操作同 上, 测定 5次。结果显示, RSD 1 7% 。 1 3 5 重复性试验 取同一样品 5份, 按照样品中 总生物碱提取步骤提取样品溶液, 精取样品溶液 10 mL, 另以氯仿 10 0 mL 为空白, 其余操作同上, 测定 吸光度。结果显示, RSD 4 7% 。 1 3 6 加样回收率试验 取某一已知含量样品 5 份, 精密加入石斛碱对照品溶液, 按照样品中石斛碱 提取步骤提取样品溶液, 精取样品溶液 10 0 m L, 另 以氯仿 10 0 mL 为空白, 其余操作同上, 测定吸光 度。平均回收率 101% , RSD 4 9% 。 2 结果与分析 2 1 铁皮石斛总生物碱含量
铁皮石斛 铁皮石斛 铁皮石斛 铁皮石斛 铁皮石斛 铁皮石斛 齿瓣石斛 齿瓣石斛
总生物碱 /%
0. 028 0 0. 043 0 0. 035 0 0. 040 0 0. 027 5 0. 032 0 0. 023 0 0. 024 5
表 3 市售枫斗药材总生物碱质 量分数
样品号 购买点
单价 / 商品名
0. 025 0