HIV抗体检测实验操作规程

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HIV抗体检测的标准操作程序

HIV抗体检测的标准操作程序

HIV抗体检测的标准操作程序【目的】保证检测结果准确可靠,为临床诊断提供可靠的参考依据【该SOP变动程序】本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。

【标本的采取和保存】随机静脉血2ml,分离血清备用。

也可使用血浆标本进行检测。

标本宜新鲜,无污染,避免溶血,避免反复冻融,不可用NaN3防腐。

【操作程序】1.实验准备:从冷藏环境中取出试剂盒,在室温下平衡30分钟,同时将浓缩洗涤液作1:20稀释。

2.加待测标本:加入待测标本每孔50微升,并设HIV阳性对照2孔,HIV阴性对照3孔,空白对照1孔,充分混匀,置37C孵育30分钟。

3.洗板:1)手工洗板:弃去反应板条孔内液体拍干;用洗涤液注满每孔,静置5-10秒,弃去孔内洗涤液拍干,如此反复5次,拍干。

2)洗板机洗板:选择洗涤5次的程序洗板,最后拍干。

4.加酶结合物:每孔50微升,空白对照孔不加,充分混匀,置37C孵育20分钟。

5.洗板:1)手工洗板:弃去反应板条孔内液体拍干;用洗涤液注满每孔,静置5-10秒,弃去孔内洗涤液拍干,如此反复5次,拍干。

2)洗板机洗板:选择洗涤5次的程序洗板,最后拍干。

6.加显色剂:先加显色剂A,每孔0.05毫升;再加显色剂B,每孔0.05毫升;充分混匀,放置37C避光孵育15分钟。

7.终止反应:每孔加入终止液0.05毫升,混匀。

8.测定:用酶标仪读数,可选择唯波长450nm(以空白孔校零)或双波长450/630nm,读取各孔OD值。

【结果判断】1、阴性对照的正常范围:正常情况下,阴性对照孔OD值<0.102、阳性对照的正常范围:正常情况下,阴性对照孔OD值》0.803、临界值(Cutoff值)计算:COV=阴性对照平均OD值+0.124、阳性判定:样品即标本OD值》COV为阳性,标本OD值<COV为阴性5、注意:初试阳性标本应重新用不同的试剂和方法进行重测,复试阳性者应按“全国HIV检测管理规范”送HIV确证实验室进行确证实验。

HIV抗体检测操作规范

HIV抗体检测操作规范

HIV抗体检测操作规范1、目的可用于监测、诊断、血液筛查。

本章规定了HIV抗体的检测方法、检测程序、检测报告及检测策略,适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。

可作为对HIV感染者/AIDS病人的诊断、报告和处理的实验室依据2、适用范围可作为对HIV感染者或AIDS病人的诊断、报告和处理的实验室依据。

3、职责3.1实验室工作人员应熟知并遵守本SOP,掌握艾滋病病毒(H1V)检测的方法、检测程序、及检测报告及检测策略。

3.2本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

4、操作程序4.1常规HIV抗体检测的方法和程序。

4.2H1V抗体检测分为筛查试验(包括初筛和复检)和确认试验。

4.3HIV抗体检测筛查试验。

4.3.1筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。

推荐使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。

4.3.2筛查方法4.3.2.1常用的筛查方法是酶联免疫试验(E1ISA)目前国内外主要使用第三代(双抗原夹心法)试剂,少数使用第二代试剂。

血源筛查仍以第三代E11SA为主,国际上有些国家和地区已将线性免疫酶测定(第四代E1ISA试剂)用于血源筛查。

第四代E1ISA试剂是最近发展起来的H1V抗原抗体联合测定试剂,可同时检测P24抗原和抗HIVT/2抗体。

与第三代抗HIV-1/2试剂相比,检出时间提前了4~9.Id。

其优点在于能同时检测抗原抗体,降低血源筛查的残余危险度。

4.3.2.2快速检测(RT)及其它检测随着对HIV感染者和AIDS病人抗逆转录病毒治疗的进展,及对无症状HIV感染者提供自愿咨询检测(VCT)的迫切需求,简便、快速的H1V检测方法被广泛应用。

常用的主要有以下几种:a.明胶颗粒凝集试验(PA):PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法,是将H1V抗原致敏明胶颗粒作为载体,与待检样品作用,混匀后保温(一般为室温)。

HIV抗体检测标准操作程序(SOP)

HIV抗体检测标准操作程序(SOP)

HIV抗体检测标准操作程序(SOP)——微生物科一、样本的采集和处理二、检测方法和步骤三、质控品的应用方法四、仪器的使用和维护五、结果的记录、解释与报告六、保密程序七、实验室的清理、消毒八、艾滋病检测实验室安全防护九、附表样品的采集和处理1.1血清样品采集:用注射器抽出一定量静脉血,室温下自然放置1-2小时,待血清凝固和血块收缩后在用3000rmp离心15min,吸出血清备用。

1.2抗凝血样品采集:用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。

1.3采样注意事项:1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。

1.3.2采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。

2、样品的保存:2.1用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20摄食度以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8摄食度。

3.样品的运送:3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。

样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类、、采样时间。

3.2将试管放入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒。

在试管的周围垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。

3.3特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以用特快专递形式投寄,但必须将盛有样品的试管包扎好,保证不会破碎和遗漏。

4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。

4.2核对标本与送检单,检查样品管有无破损及遗漏。

如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒,同时还要报告有关领导和专家。

检验方法和步骤1.检验方法:酶联免疫吸附试验(ELISA)2.检验步骤:严格按照试剂说明书操作。

3.注意事项:3.1禁止肉眼判读!3.2保证酶标仪,洗板机正常运转,保证加样器准确,选择高质量的与加样器配套的TIP头3.3使用有效期内的试剂3.4保证样品质量质控品的应用方法1.质控品按临床样本对待,操作应依照实验室安全管理条例执行。

HIV初筛实验室标准操作规程

HIV初筛实验室标准操作规程

HIV初筛实验室标准操作规程人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体酶联免疫原理和方法(上海科华生物)原理:用HIV-1+2型抗原包被酶联板。

待检血清或血浆中的抗-HIV抗体与包被抗原反应,再与酶标HIV-1+2型抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。

加底物(TMB显色,在酶标仪上测定后根据0D值判定有无HIV抗体的存在。

操作步骤:1、取出HIV抗原包被板。

每次试验设空白对照1孑L,阴性对照各1孑L,阳性对照各3孔(其中阳性对照1两孔,阳性对照2 一孔),质控一孔。

分别加入HIV阴、阳性对照质控血清各100微升,其余孔加入待检样本各100微升。

贴上封口胶,置37C温育60分钟。

2、将浓缩洗液用纯化水25倍稀释后洗涤用。

3、弃去各孔中样品、拍干。

每孔加满洗液,静置数秒后弃去,如此重复洗5次,拍干。

4、每孔加入酶标抗原工作液100微升,贴上封口胶。

37E温育30分钟。

5、弃去各孔中酶液,用洗液反复洗涤5次(操作同步骤3)。

&每孔加入底物液A50微升,再加入底物液B50微升,轻拍混匀,置37E 避光显色30分钟。

7、显色完毕后,每孔加入终止液50微升,轻拍混匀,置酶标仪450nm波长处测定OD fi (参考波长为630nm。

结果判定:阴、阳性对照和被检样本的0D值减去空白对照0D值即为计算值。

2、若阴性对照0D均值小于按计算。

3、临界值(cut off 值)的设定:cutoff 值=PCx X 10% (若PCx>按算)4 、被检样本的OD®》临界值应判为HIV抗体阳性反应,<临界值为阴性反应。

检测样本的OD值》临界值判为HIV抗体阳性,应重新取样双孔复试,复试阳性者应按照“全国HIV检测管理规范”送“ HIV确认实验室”进行确认实验。

注意事项:1、本试剂的使用单位必须是当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室。

2、整个HIV检测必须符合《全国艾滋病检测工作规范》严格防止交叉感染。

操作时必须戴手套,穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度。

HIV测定(胶体金法)操作规程

HIV测定(胶体金法)操作规程

HIV测定‎操作规程(胶体金法)1、检验目的用于快速定‎性检测人全‎血、血清或血浆‎样品中的H‎I V 1/2型抗体。

2、原理采用胶体金‎免疫技术和‎层析原理,定性测定全‎血、血清或血浆‎样本中的H‎I V 1/2型抗体。

检测陽性样‎本时,样本中的H‎I V抗体与‎胶体金标记‎抗原结合形‎成复合物,由于层析作‎用复合物沿‎纸条向前移‎动,经过检测线‎时与预包被‎的重组抗原‎结合形成夹‎心物而凝聚‎显色,游离的胶体‎金标记重组‎抗原则在对‎照线处与抗‎H I V单克‎隆抗体结合‎而富集显色‎。

阴性标本则‎仅在对照线‎处显色,30分钟内‎观察结果即‎可。

3、性能参数●用国家参考‎品测定,阳性参考品‎符合率、阴性参考品‎符合率、精密性、最低检出量‎、稳定性能均‎符合要求,测定类风湿‎因子阳性血‎清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝‎炎传染病患‎者等各种类‎型的血清不‎得引起干扰‎。

●本测试条/卡仅用于体‎外诊断试验‎,仅用于人全‎血、血清或血浆‎,其他体液和‎样本可能得‎不到准确的‎结果。

●对于下列物‎质在所给出‎的浓度下对‎测试结果不‎造成影响:测定物质名‎称测定的浓度‎测定物质名‎称测定的浓度‎胆固醇≤200 mg/ml 血红蛋白≤178 g/L甘油三酯≤200 mg/ml 胆红素≤16 mg/L4、标本要求●标本类型:血清或血浆‎,血浆样本对‎临床常用抗‎凝剂(EDTA、肝素、枸橼酸钠)无要求。

●标本采集:见标本采集‎手册。

●标本储存和‎运输:如果血清或‎血浆样品收‎集后7天内‎检测,样品须放在‎2~8℃保存,如果大于7‎天则须冷冻‎保存;全血标本建‎议在3天内‎检测,样品放在2‎~8℃保存,不得冻存。

●标本拒收状‎态:细菌污染,严重溶血或‎严重脂血标‎本不能作测‎定。

5、容器和添加‎剂类型使用一般干‎燥管(不添加任何‎东西),或EDTA‎、柠檬酸钠、肝素抗凝管‎盛放血液。

6、贮存条件及‎有效期储存条件:4--30℃密封干燥处‎保存,有效期为1‎6个月。

2、HIV抗体检测(胶体金法)

2、HIV抗体检测(胶体金法)

sop 版本号:第五版标准操作规程(SOP)编号:DZJY/ZY450-02题目:HIV抗体检测(胶体金法)版本:第五版作者:曲文才、张庆玲日期:2010/05/21页数:3修订历史:联系人:曲文才SOP: 1 版本号:第五版sop 版本号:第五版一、目的本SOP规定了艾滋病实验室,HIV抗体胶体金法检测方法、检测程序、检测报告。

二、适用范围艾滋病病毒1+2抗体检测。

三、责任实验室操作人员严格按要求执行。

四、原理:检测板采用基因工程制备的gp41、gp120、gp36抗原为包被抗原和金标抗原,双抗原夹心法检测HIV抗体。

当被检测标本中含有HIV抗体时,先于金标抗原反应,形成抗体-金标抗原复合物,在虹吸作用下向前移动,遇到包被抗原形成抗原-抗体-金标抗原复合物,并出现红色沉淀线。

包被膜上同时带有一条质控包被线作为对照,故出现一条红色质控线和一条(或两条)红色反应线时判为阳性。

当检测样本中无HIV抗体时,只出现一条红色质控线判为阴性。

作为质控,不管结果阳性或阴性,都会出现一条红色质控线。

若无红色(或只有反应线)出现,则试验无效,样本须重检。

五、程序1、撕开一装有HIV1/2抗体检测板的包装袋,取出检测板水平放置于实验台上。

2、用塑料吸管加2滴血清/血浆样本于样本孔中。

3、15-30分钟内观察并记录实验结果。

六、结果判断阳性结果:在试验板的检测线和质控线位置上,出现一条或二条红色线,试验结果均为阳性。

阴性结果:仅在试验板的质控线位置上出现一条红色线,则试验结果为阴性。

无效结果:在试验板的检测线和质控线位置上均未出现红色线。

SOP: 2 版本号:第五版sop 版本号:第五版七、注意事项1、被检样品、试剂应在室温(20℃左右)平衡并在室温不超过30℃条件下检测。

2、铝箔复合物包装袋破损受潮后检测板不能使用。

八、保存条件4-30℃避光保存、不得冻存。

九、有效期18个月十、参考文件《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版),中国疾病预防控制中心SOP: 3 版本号:第五版。

HIV实验室标准操作规程

HIV实验室标准操作规程

沙洋县人民医院艾滋病筛查实验室作业指导书编制人:王笑石审核人:王笑石批准人:李克华批准日期:2016/1/1实施日期:2016/1/1G受控编号:输血科修订页CHEMCLIN 600全自动化学发光仪标准化操作规程(SOP)一.工作环境温度:10℃—30℃湿度:小于70%电源:220V,50Hz二.开机前的的准备工作1.确保废液桶已清空;2.配制洗针液,确保洗针液的量足够做完一批试验;配置方法见附录1;3.配制洗板液,并装入洗板液桶中,确保洗板液的量足够做完一批试验(每整板微孔板实验需准备洗板液500ml左右);配置方法见附录2;4.准备好试剂和标本。

三.开机1.打开仪器电源开关(仪器正面左侧)2.打开打印机电源3.打开显示器及电脑主机电源,待电脑启动后双击桌面图标,即可启动仪器. 四.开机维护在运行实验之前,需要对仪器做一次日常维护,具体步骤如下:1.点击主界面中的“维护”按钮,就进入到维护界面,如下图所示:图1 维护界面2.准备好洗针液、洗板液及酒精等系统液体,确保洗板液管路在洗板液桶中,点击“开机维护”按钮,仪器开始执行开机维护动作;3.开机维护完成后,点击窗口右上角“关闭"按钮,即可退出维护界面;4.将酒精溶液收好并盖好瓶盖。

五.选择项目和样本在仪器进行完日常维护后,就可以编制工作列表,具体流程如下:1.点击主界面中的“项目”按钮,进入“项目选择”界面中选择此次试验需要做的项目,点击“确认”返回到主界面;2.在主界面的样本输入框中输入此次试验需要做的样本数,点击按钮,就能将所需做样本添加到项目中;3.预选择样本对应的项目。

在样本和项目对应表中可通过点击或拖住鼠标左键来选择,被选中的样本列表变为黄色;也可通过再次点击左键来取消预选的样本;可通过点击按钮选定所有的样本,同样可通过点击按钮取消所有的选择;4.确认样本和项目对应表.检查无误后点击对应表中项目的名称栏,被选中的项目列表则变为深绿色。

HIV抗体检测的标准操作程序(ELISA法和快速法)

HIV抗体检测的标准操作程序(ELISA法和快速法)

HIV测定(ELISA法)标准操作规程1、检验目的应用双抗原夹心酶联免疫法原理(ELISA)定性检测人血清、血浆标本中的HIV(1+2)型抗体的测定,用于HIV感染的辅助诊断,抗HIV药物治疗的效果的监测。

2、原理采用夹心ELISA方法检测血清或血浆标本中人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体,预包被高纯度基因重组HIV(1+2)型抗原,可与标本中的抗-HIV抗体反应,加入HRP标记HIV (1+2)型抗体抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,然后加入TMB底物产生显色反应。

通过酶标仪检测吸光度(OD值),根据OD值判断HIV抗体的存在与否。

3、性能参数灵敏度高(0.5ng/ml)4、标本要求(1)标本类型:血清,血浆。

(2)标本采集:见标本采集手册(3)标本储存和运输:室温放置不超过8小时,2-8℃不超过72小时,-20℃可长期保存,应避免反复冻融(4)标本拒收状态:细菌污染,严重溶血或脂血标本不能作测定。

本文来自检验地带网5、容器和添加剂类型6、试剂(1)试剂名称:人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体诊断试剂盒。

(2)试剂生产厂家:上海科华生物工程股份有限公司(3)包装规格:96T/Kit(4)试剂盒组成:①、HIV酶标板;②、HIV酶标试剂;③、HIV(1+2)型阳性及阴性对照血清;④、显色剂A液和B液;⑤、此外还有浓缩洗涤液、终止液、自封袋、封板膜、说明书等。

7、仪器设备:酶标仪:ZS板式,北京普朗生物技术有限公司,每年由计量单位进行一次校准。

洗板机:DNM-9620型,北京普朗生物技术有限公司,每年由国家计量单位进行一次校准。

移液器:上海求精,每年由国家计量单位进行一次校准。

8、校准程序9、操作步骤①、配液:将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水25倍稀释至1000ml备用。

②、编号:将样品对应微孔按序编号,每板设阴性对照2孔、阳性对照3孔,空白对照2孔。

③、加样:分别在相应孔加入待检标本、阴性、阳性对照100μl,用封板膜封板后置37℃温育60min。

HIV抗体检测(胶体硒法)操作程序

HIV抗体检测(胶体硒法)操作程序

HIV抗体检测(胶体硒法)标准操作程序1.目的:用于体外、肉眼观察、定性的免疫分析,监测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助检测受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。

本品检测阳性者,需进一步确证。

2.原理:利用免疫层析法原理,加样本入反应条,样品迁移通过结合物包被处,与硒胶体-抗原结合物混合重组结合,此混合物继续迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的病人结果窗口。

若样品含HIV-1/2抗体,抗体将会与硒胶体-抗原结合,并在病人窗口处被固相包被的合成肽和重组抗原所捕捉规定,形成一条红线;若样品不含HIV-1/2抗体,抗体将会通过病人窗口而不与被固相包被的合成肽和重组抗原结合,没有一条红线形成。

反应条带中含质控条带。

3.标本要求:3.1标本类型:血清3.2标本采集:见标本采集手册3.3标本储存和运输:新鲜血清2~8℃贮存时间不超过72小时3.4标本拒收状态:细菌污染,严重溶血或脂血标本不能作测定。

4.试剂:4.1试剂名称:HIV-1/2抗体诊断试剂盒。

4.2试剂生产厂家:Japan .Matsudo-shi, Chiba-ken DainabotCo .Ltd4.3包装规格:100个测试/包装袋;10个测试/板4.4试剂盒组成:雅培DETERMINE HIV-1/2 血清/血浆分析试剂盒(List No7D23-18)100个测试雅培DETERMINE HIV-1/2测试板,10板合成肽和重组抗原包被5.校准程序:(送黑龙江省质量技术监督局校准)6.操作步骤:HIV-1/2抗体诊断试剂盒操作流程7.质量控制:阴性对照显示为阴性;阳性对照显示为阳性。

8.干扰和交叉反应:其他体液或混合样品可干扰反应,不可用EDTA 抗凝的全血血浆。

9.生物参考区间:正常人为阴性10.患者检验结果的可报告区间阴性;阳性11.临床意义:监测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助检测受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。

HIV筛查实验室检测操作规程

HIV筛查实验室检测操作规程

HIV筛查实验室检测操作规程
1、样品应按《全国艾滋病检测规范》要求采集,并做好标记,填好送检表格。

采样时一定要注意安全,谨慎操作。

防止发生刺伤和外界污染。

采样完毕后应尽快送往实验室。

2、实验室收到样品后及时登记、编号、校对、分离血清。

如短期内检测可冷藏保存,否则放-20。

C冰柜低温保存。

3、检测操作应严格按厂家的试剂说明书及仪器操作程序进行准确操作,并做好质量控制,不能擅自更改,操作时要注意移液咀与本酶标板之间交叉污染。

所用的试剂必须是经过国家药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。

4、筛查阳性标本须再用同一种试剂和不同厂家或不同检测原理的试剂进行复检,如复检均呈阳性或一阴一阳,须填好筛查阳性复检单和送检单送往复查中心实验室复检。

筛查阴性的填好HIV抗体筛查报告。

5、可疑阳性或阳性样品的转送,必须按照规定的运送程序,将血清盛于有标签的螺旋管内,防止样品流出,标签上注明姓名、唯一编号。

然后置于标有HIV检测专用字样的塑料容器内运送,保持2—4。

C冷藏运送。

送检单和复检单与样品分开放置。

6、实验结后应对实验室环境和实验废弃物进行消毒。

7、实验原始记录即时填写,实验后应认真填写实验记录和各种报表,做好质控。

HIV测定操作规程

HIV测定操作规程

HIV测定操作规程1.引言HIV(人类免疫缺陷病毒)是一种通过血液、乳汁、精液和阴道分泌物等体液传播的病毒,可以引发艾滋病。

为了及时发现和诊断感染HIV的人群,保障公众健康和人类生命安全,建议建立专业的HIV测定操作规程。

2.目的3.适用范围4.测定方法4.1初筛方法:初筛采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法进行,检测适用于全血、血浆和血清。

4.2 辅助确认方法:初筛阳性样本需进行辅助确认测试,如Western blot法和免疫荧光法等。

4.3PCR(聚合酶链反应)方法:PCR方法对于早期感染者的检测准确性更高,可以用于初筛阳性样本的二次确认。

5.检测前准备5.1检测前应对检测仪器和试剂进行检查和校准。

5.3检测人员应穿戴好防护用品,包括实验服、手套、护目镜等。

6.标本采集6.1标本采集要使用一次性采血器,避免交叉感染。

6.2标本采集需要标记好个人信息和采集时间,以避免混淆。

7.样本处理7.1样本处理的过程中要注意避免外界污染和交叉感染。

7.2样本离心后要准确定量取用,避免过多或过少。

8.试剂添加8.1操作人员须按照试剂说明书要求添加试剂。

8.2添加试剂的过程中要避免污染和交叉感染。

9.检测过程9.1检测过程中要按照试剂说明书的要求操作,遵循正常的操作步骤和流程。

9.2检测中如发现异常,应及时记录并报告相关人员。

10.结果判断10.1根据试剂说明书的要求,判断样本的检测结果。

10.2结果判断要进行复核,确保准确性。

11.结果记录与报告11.1将检测结果记录在指定的表格中,确保结果的准确和可追溯性。

11.2检测结果应及时报告给相关人员或机构,确保及时采取相应措施。

12.质量控制12.1进行质量控制是确保检测结果准确性的重要手段,应定期进行质量控制测试。

12.2检测结果与质量控制结果的差异超出规定范围时,应及时进行排查和修正。

13.安全注意事项13.1操作人员须穿戴好防护用品,避免感染风险。

13.2操作过程中要注意操作规范,避免交叉污染。

艾滋病检测点标准操作规程(胶体金法)

艾滋病检测点标准操作规程(胶体金法)

艾滋病检测点标准操作规程(胶体金法)HIV抗体检测标准操作规程(SOP文件)目的:为规范本卫生院艾滋病检测点的正常运行,保证艾滋病抗体检测的准确性,确保实验室生物安全,特制定本操作规程。

适用范围:本操作规程适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。

职责:各检测工作人员应按照标准操作规程进行艾滋病抗体检测。

本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。

标准操作程序:样品的采集和处理血清样品采集:用真空采血管抽取5mL静脉血,室温下自然放置1-2小时,待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min,吸出血清备用。

抗凝血样品采集:用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。

采样注意事项:采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。

采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。

样品的保存:用于抗体检测的血清或血浆样品应存放在-20℃以下。

短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8℃。

样品的运送:实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。

样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类、采样时间。

将试管放入专用带盖的内,的材料易于消毒,在试管的周围垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。

样品的接收:含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。

核对标本与送检单,检查样品管有无破损及遗漏。

如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒,同时还要报告有关领导和专家。

检验方法和步骤快速检测法(胶体金法)原理:采用胶体金免疫技术和层析原理,定性测定血清样本中的HIV-1+2抗体。

操作步骤:将标本平衡至室温。

将所需数量的测试卡从包装盒中拿出平衡至室温,打开铝箔包装袋,平置于台面上并编号(与样本编号相对应)。

hiv抗体检测标准操作流程

hiv抗体检测标准操作流程

hiv抗体检测标准操作流程
HIV抗体检测是一种常见的临床实验室检测方法,用于检测人
体内是否存在艾滋病病毒(HIV)的抗体。

以下是HIV抗体检测的标
准操作流程:
1. 采集标本,通常使用静脉血作为检测标本。

在采集血液样本
之前,医务人员应该进行充分的消毒,并确保采集器具的无菌。

2. 标本处理,采集的血液标本需要进行离心分离,将血浆与细
胞分离开来。

血浆通常是用于HIV抗体检测的样本。

3. 试剂准备,准备好用于HIV抗体检测的试剂盒,包括酶联免
疫吸附试验(ELISA)试剂盒、免疫层析试纸或其他相应的检测试剂。

4. 检测操作,根据试剂盒的说明书,将标本和试剂按照指定的
比例混合,进行反应。

通常包括加入标本、洗涤、加入检测试剂、
洗涤等步骤。

5. 检测结果读取,根据试剂盒的说明书,进行反应时间的控制,然后通过目测或者仪器读取结果。

6. 结果判读,根据试剂盒的说明书,对检测结果进行判读。

通常根据试剂盒的设定标准,阳性、阴性和可疑结果会有相应的判读标准。

7. 结果确认,对于初步阳性的样本,需要进行复测或者进行其他方法的确认,以确保结果的准确性。

8. 结果报告,将检测结果进行记录和报告,确保结果能够被医生和患者及时获取。

总的来说,HIV抗体检测的标准操作流程包括标本采集、标本处理、试剂准备、检测操作、结果读取、结果判读、结果确认和结果报告等步骤。

在整个流程中,严格遵循操作规程和质量控制标准非常重要,以确保检测结果的准确性和可靠性。

艾滋病检测点标准操作规程

艾滋病检测点标准操作规程

HIV抗体检测标准操作规程(SOP文件)1、目的:为了规范本卫生院艾滋病检测点的正常运行,保证艾滋病抗体检测的准确,确保实验室生物安全,特制定本操作规程。

2、适用范围:适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。

3、职责:各检测工作人员按标准操作规程进行艾滋病抗体检测,本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。

4、标准操作程序:样品的采集和处理4.1.1样品的采集:4.1.1.1血清样品采集:用真空采血管抽取5mL静脉血,室温下自然放置1-2小时,待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min,吸出血清备用。

4.1.1.2抗凝血样品采集:用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管,反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。

4.1.1.3采样注意事项:4.1.1.采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。

4.1.1.采集标本时应注意安全,直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。

4.1.2样品的保存:用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2-8℃。

4.1.3样品的运送:4.1.3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。

样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类、采样时间。

4.1.3.2将试管放入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒。

在试管的周围垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。

4.1.4样品的接收:4.1.4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。

4.1.4.2核对标本与送检单,检查样品管有无破损及遗漏。

如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒,同时还要报告有关领导和专家。

检验方法和步骤4.2.2快速检测法(胶体金法)4.2.2.1原理采用胶体金免疫技术和层析原理,定性测定血清样本中的HIV1+2抗体。

HIV测定操作规程

HIV测定操作规程

HIV测定操作规程一、实验目的1.掌握胶体金法进行HIV测定的基本操作流程。

2.熟悉HIV测定胶体金法的原理和操作技巧。

3.提高实验人员的操作规范性和技术水平。

二、实验仪器和试剂1.试验仪器:胶体金检测试纸、显微镜。

2.试剂:样品稀释液、底物稀释液、反应缓冲液、底片稀释液、酶联底片。

三、实验步骤1.准备样品:将待测样品稀释至适当浓度,以确保后续反应的准确性。

2.添加样品稀释液:取一滴已稀释好的样品滴入胶体金试纸的样品孔中。

3.加入反应缓冲液:用专用吸管将反应缓冲液加到反应孔中。

4.加入底片稀释液:用专用吸管将底片稀释液加到底片孔中。

5.拍摄底片:将反应后的试纸放入显微镜下,使用相机拍摄底片图像。

6.解读底片:通过显微镜观察底片图像,根据底片上金颗粒的分布情况判断结果。

7.结果判定:根据金颗粒的数量和分布情况,参照标准结果判定是否阳性或阴性。

四、注意事项1.实验操作时,需佩戴手套,防止污染样品和试剂。

2.操作前应检查试纸是否过期,以免影响实验结果。

3.对于阳性结果的样品,应进行二次确认,以确保结果的准确性。

4.操作过程中需注意卫生,避免交叉感染。

5.实验结束后,将废弃的试纸和底片以及使用过的吸管进行正确的处置。

五、实验结果分析根据底片上金颗粒的分布情况和数量,结合标准结果,判定样品是阳性还是阴性。

金颗粒呈蓝色或者紫红色,且聚集于样品孔中,代表阳性结果。

金颗粒呈均匀一致的分布,且没有聚集现象,代表阴性结果。

六、实验总结通过胶体金法进行HIV测定,可以准确、快速地判断样品是否感染HIV。

本实验操作规程详细介绍了胶体金法的基本步骤和注意事项,希望能够帮助实验人员顺利完成实验任务,并提高实验的准确性和可靠性。

实验人员需严格按照规程进行操作,确保实验的科学性和安全性。

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HIV抗体检测实验操作规程
1.检测试剂:初筛用的HIV抗体检测试剂,必须是HIV-1/2混合型,经卫生部批
准或注册,经过批检合格,并在有效期内。

常用的检测方法有固相酶联免疫吸附实验,颗粒凝集和其他快速诊断等方法。

2.检测要点
严格按照试剂说明书操作,不得擅自更改。

注意防止交叉感染。

严格遵守实验室操作规程。

1.初筛检测程序
(1)血液标本验收合格后,用初筛检测试剂进行检测,如呈阴性反应,则做
HIV抗体阴性报告。

(2)初筛检测结果呈阳性反应的标本,需进行重复检测。

复检时用原有试剂
和不同原理的另外一种试剂或不同厂家的初筛检测试剂复检。

(3)如两种试剂复检均呈阴性反应,则作HIV抗体阴性报告;如均呈阳性反
应,或有一份阳性,该标本需送上级实验室加以进一步证实。

送检时应准确填报复检单,重新抽血连同原血专人送省疾控做HIV-Ab确证实验。

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