小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒使用说明书本
小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶1,3-βD glucosidaseELISA试剂盒 操作步骤
小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶1,3-βD glucosidaseELISA试剂盒操作步骤Mouse 1, 3-1, 3 - glucoside enzyme beta D Portugal beta D glucosidaseELISA kit steps小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶1,3-βD glucosidaseELISA试剂盒操作步骤操作程序:①加抗体包被→ 4℃过夜,洗涤三次、抛干②加待检抗原→ 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③加酶标抗体→ 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④加底物液→ 37℃ 15分钟,加终止液1,3-βD glucosidaseELISA试剂盒操作步骤显色的重要性显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。
反应的温度和时间仍是影响显色的因素。
在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。
适当提高温度有助于加速显色进行。
在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。
定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间,及时判断。
OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值增高。
OPD底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。
OPD产物用酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。
TMB受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。
但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。
TMB经HRP作用后,约40分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至2小时后即可完全消退至无色。
TMB的终止液有多种,叠氮钠和SDS等酶抑制剂均可使反应终止。
这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。
此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒使用说明书本
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中β半乳糖苷酶(βGAL)的含量。
试验原理:βGAL试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知βGAL浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将βGAL和生物素标记的抗体同时温育。
小鼠β半乳糖苷酶ELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中βGAL的浓度呈比例关系。
试剂盒组成:自备材料蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒使用说明书本
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中β葡糖苷酶(β-glucosidase)的含量。
试验原理:β-glucosidase试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知β-glucosidase浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将β-glucosidase和生物素标记的抗体同时温育。
小鼠β葡糖苷酶ELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中β-glucosidase的浓度呈比例关系。
试剂盒组成:自备材料蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
小鼠蛋白激酶 G(PKG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
小鼠蛋白激酶G(PKG)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织等样本中蛋白激酶G(PKG)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠蛋白激酶G(PKG)水平。
用纯化的小鼠蛋白激酶G(PKG)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠蛋白激酶G(PKG),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的小鼠蛋白激酶G(PKG)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠蛋白激酶G(PKG)含量。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
达优 小鼠 TGF-β1 ELISA 试剂盒说明书
产品信息和操作指南Mouse TGF-β1Precoated ELISA kitCat#:1217102本试剂盒专用于科研,而非用于诊断Mouse TGF-β11217102目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒组分 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (6)操作过程 (8)结果分析 (10)试剂盒的保存 (10)操作步骤一览表 (11)参考文献 (12)ELISA测定中可能出现的问题及解决方法 (13)达优®ELISA系列产品 (16)1、产品简介:达优®小鼠TGF-β1ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测小鼠血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的TGF-β1,可同时检测天然的和重组的TGF-β1。
本试剂盒为预包被板,整个过程孵育时间不超过4小时,洗涤12次。
本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与北京行健雅生物技术有限公司联系,E-mail:**********************。
检测范围:1000-15.6pg/mL灵敏度:5pg/mL重复性:板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。
2、知识背景:转化生长因子-β1(TGF-β1)能使正常的成纤维细胞的表型发生转化,具有细胞抑制和促进生长双重作用。
TGF-β1分子量25kDa,非糖基化同型二聚体蛋白,由二硫键连接。
TGF-β1基因结构具有高度保守性,人和小鼠TGF-β1的同源性高达99%(1-4)。
TGF-β1在治疗伤口愈合,促进软骨和骨修复以及通过免疫抑制治疗自身免疫性疾病和移植排斥等方面发挥重要作用(5)。
3、试剂盒组分:4、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P1000 3.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌器6.37℃温箱5、注意事项:1.试剂应按标签说明储存,使用前室温平衡20-30分钟。
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G或β-GD)检测
迪信泰检测平台
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-G或β-GD)检测
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase, β-G或β-GD)是细胞溶酶体中的一种
酸性水解酶,参与机体的生理、病理及药物代谢等过程。
β-GD可水解基底膜中的
主要成分-蛋白多糖,因而参与肿瘤的侵袭和转移过程。
在肝细胞和胃癌组织中含
量丰富。
β葡萄糖醛酸苷酶活性测定,有助于病情观察和预后评价。
迪信泰检测平台采用生化法,可高效、精准的检测β-葡萄糖醛酸苷酶的活性变化。
此外,我们还提供其他糖代谢类检测服务,以满足您的不同需求。
生化法测定β-葡萄糖醛酸苷酶样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)。
2. 相关参数(中英文)。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. β-葡萄糖醛酸苷酶活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。
β-半乳糖苷酶β-galELISA试剂盒使用方法
β-半乳糖苷酶(β-gal)ELISA试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T0.8 pg/ml -35pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定微生物样本中β-半乳糖苷酶(β-gal)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中β-半乳糖苷酶(β-gal)水平。
用纯化的β-半乳糖苷酶(β-gal)体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β-半乳糖苷酶(β-gal),再与HRP标记的β-半乳糖苷酶(β-gal)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β-半乳糖苷酶(β-gal)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中β-半乳糖苷酶(β-gal)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
小鼠葡萄糖醛酸苷酶(GD)酶联免疫吸附测定试剂盒
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中βGD含量。
实验原理用纯化的βGD抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的βGD抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的βGD 呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为20U/ml,将其稀释为10U/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成10U/ml,5 U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml,0.312U/ml,0.156U/ml,样品稀释液直接作为空白孔0U/ml。
如配制5U/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)10U/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液:1×10ml/瓶。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明
β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明产品简介:β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associatedβ-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。
在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老状态。
此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。
衰老细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。
衰老细胞通常体积变会大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。
细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
本试剂盒仅染色衰老细胞,对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。
对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。
产品组成:试剂(C):β-半乳糖苷酶染色液A1ml4℃避光试剂(D):β-半乳糖苷酶染色液B1ml4℃避光试剂(E):β-半乳糖苷酶染色液C100ml4℃避光使用说明书1份自备材料:1、PBS或HBSS2、细胞培养器皿3、显微镜操作步骤(仅供参考):(一)贴壁细胞染色:1、对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS或HBSS洗涤1次,加入1ml β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定15min。
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-GD)试剂盒说明书
货号: QS2626 规格:50管/48样β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-GD)试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:β-GD广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。
该酶在肝细胞中含量较高。
此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。
测定原理:β-GD催化苯酚β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入5mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍-20℃保存;试剂三:液体37.5mL×1瓶,4℃保存;试剂四:1μmol/mL标准储备液10mL,4℃保存;样品测定的前处理:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
注意:标准管和空白管只需测一次。
β-GD活性计算:第1页,共2页(1)按样本鲜重计算:单位定义:每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol酚酞的量为一个活力单位。
β-GD(μmol/h/g 鲜重)= (C标准管×V1)×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W(2)按样本蛋白浓度计算:单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol酚酞的量为一个活力单位。
小鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒简介说明
小鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒简介说明小鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被脂联素(ADP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、5、10、20、40、80ng/mL 试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA试剂盒使用说明书本
小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)的含量。
试验原理:β-hexosaminidase A试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知β-hexosaminidase A浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将β-hexosaminidase A和生物素标记的抗体同时温育。
小鼠β氨基己糖苷酶AELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中β-hexosaminidase A的浓度呈比例关系。
试剂盒组成:自备材料蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
小鼠α葡萄糖苷酶ELISAKit,小鼠α-glucosidase试剂盒说明书
小鼠α葡萄糖苷酶ELISAKit,小鼠α-glucosidase试剂盒说明书ELISA试剂盒规格:(1)96T可用做84个标本,12个标准曲线;(2)48T可用做42个标本,6个标准曲线;ELISA试剂盒组成:小鼠α葡萄糖苷酶ELISAKit(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液;(7)酶反应终止液。
保存条件:2-8℃低温保存;保质期:六个月;用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断小鼠α葡萄糖苷酶ELISAKit,小鼠α-glucosidase试剂盒说明书【检测标本】:血清、血浆、细胞上清液、尿液、组织等(标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融)【检测原理】:双抗体夹心法试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(400 U/L) 0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的小鼠α葡萄糖苷酶ELISAKit,小鼠α-glucosidase试剂盒说明书Elisa试剂盒操作步骤:3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶-(NAG)-ELISA试剂盒说明书
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 (NAG)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:E-EL-M0812(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。
适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组NAG浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时了解伊莱瑞特生物科技XXX。
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠NAG抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的NAG会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠NAG抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠NAG抗体与结合在包被抗体上的小鼠NAG结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。
用酶标仪在450nm波长处测OD 值,NAG浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中NAG的浓度。
标本收集:1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。
避免使用溶血,高血脂标本。
3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。
小鼠IgG1抗体亚型(IgG1)酶联免疫分析方法操作步骤
小鼠IgG1抗体亚型(IgG1)酶联免疫分析方法操作步骤编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠IgG1抗体亚型(IgG1)酶联免疫分析方法实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠 IgG1抗体亚型( IgG1)表达。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中 IgG1抗体亚型( IgG1)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中小鼠 IgG1抗体亚型( IgG1)的存在与否。
E-(Mu)(02)-00370 小鼠弹性蛋白酶(Elastase)Elisa试剂盒,英文名:Elastase ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00371 小鼠白细胞弹性蛋白酶(HLE)Elisa试剂盒,英文名:leukocyte exastase,HLE ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00372 小鼠α淀粉酶(AMS/AMY)Elisa试剂盒,英文名:α-Amylase,AMS/AMY ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00373 小鼠碱性磷酸酶(ALP)Elisa试剂盒,英文名:alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00374 小鼠胶原酶II(Collagenase II)Elisa试剂盒,英文名:Collagenase Type II ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00375 小鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)Elisa试剂盒,英文名:Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00376 小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)Elisa试剂盒,英文名:glucose oxidase,GOD ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00377 小鼠透明质酸酶(HAase)Elisa试剂盒,英文名:Hyaluronidase,HAase ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00378 小鼠酸性磷酸酶(ACP)Elisa试剂盒,英文名:Acid Phosphatase,ACP ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00379 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)Elisa试剂盒,英文名:β-glucuronidase,βGD ELISA Kit ,规格:96T/48TE-(Mu)(02)-00380 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)Elisa试剂盒,英文名:β-glucosidase ELISA Kit ,小鼠IgG1抗体亚型(IgG1)酶联免疫分析方法规格:96T/48T E-(Mu)(02)-00381 小鼠β内酰铵酶(β-lactamase)Elisa试剂盒,英文名:β-lactamase ELISA Kit ,规格:96T/48T。
β-葡萄糖苷酶试剂盒使用说明
β-葡萄糖苷酶试剂盒使用说明分光光度法50管/24样货号:G8830-100产品简介:β-GC(EC3.2.1.21)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化β-糖苷键水解,具有多方面生理作用:在纤维素的糖化作用中,β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯类香气前驱体,使糖苷键合态变成游离态。
从而产生香味;β-GC能够水解植物体内野黑樱苷,释放HCN,从而防止昆虫取食。
β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。
试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容:提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10mL双蒸水,充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体50mL×1瓶,4℃保存。
操作步骤:一、样品的前处理:1.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。
15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤:1.分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2.加样表试剂名称(μL)对照管测定管试剂一400试剂二500500样本100100迅速混匀,放入37℃准确水浴30min后,立即放入沸水浴中煮沸5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变)试剂一400充分混匀,8000g,4℃,离心5min,取上清液上清液500500试剂三10001000充分混匀,室温静置2min后,用对照管调零,400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。
β-半乳糖苷酶检测试剂盒使用说明
β-半乳糖苷酶检测试剂盒使用说明分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC2580规格:50管/24样产品内容:提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入5mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体80mL×1瓶,4℃保存。
标准液:液体1ml×1支,4℃保存,10μmol/ml对硝基苯酚溶液。
产品说明:β-GAL(EC3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。
β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。
β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。
自备用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、粗酶液提取:1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
15000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、标准液的处理:用试剂二将标准液稀释至200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/ml.二、测定步骤:1、分光光度计预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit
小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit产品规格:96T/48T。
保存条件:2-8℃低温保存保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
供应商:上海乔羽生物有限公司上海乔羽有限公司,有elisa试剂盒,抗体,培养基小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit Reagent preparationThe kit is removed from the cold storage environment and can be used at room temperature.1 standard solution: the kit provides 6 tube standard, each tube has been calibrated concentration, and freeze dry. Before the experiment in each standard tube added 0.5ml sample dilution and cover after standing for 10 minutes or more, then repeatedly reversed / rubbing its dissolution, restore the complex for each standard tube body labeling concentration.2.20 * washing buffer dilution: distilled water diluted by 1:20, that is, 20 copies of 1 x wash buffer plus 19 copies of distilled water.Kit performance:1 sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is above 0.990.The 2 batch and the batch should be less than 9% and 11% respectively.小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit Elisa kit test rules:1, to ensure the accuracy of the gun, the error can not be more than 2%. Available water and electronic balances are determined. But it's better to have professional personnel to correct it.2, to be equipped with 20ul, 50ul, 100ul, 1000ul and a volley. Draw different liquids, to replace the gun head. Even when the standard is drawn.1, 3 hours before the experiment to remove the kit from the refrigerator, so that a variety of reagents are restored to room temperature, in order to make the results more stable.4, the experiment, to make the substrate to avoid light storage.5, with the gun to draw the liquid speed can not be too fast, so as not to produce bubbles and to absorb the amount is not accurate.6, when the liquid, to use the range and the need to close the gun to suck, reduce the error.7, when the liquid is added to the enzyme standard hole, the liquid contact of the liquid drop and the hole wall of the gun head can be avoided by avoiding the contact of the liquid drop and the hole wall in the gun head.8, after all the liquid added, the enzyme labeled plate on the table in parallel to gently shake 30 seconds, mixed with liquid. Can also use the shaking function of the enzyme standard instrument.9, should try to do two experiments, so as to ensure the accuracy of the data. 10, the results have questions about the sample to be confirmed by other methods.小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit,猪促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒,促生长激素释放激素elisakit,猪elisa试剂盒,GHRHelisakit上海乔羽生物供应!小鼠Pentosidineelisa试剂盒,戊糖素ELISAkit产品特点:1.专一性强,灵敏度高2.免费提供产品最新报价,实验原理,产品用途及中英文说明书。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒使用说明书本
本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)的含量。
试验原理:
βGD试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知βGD浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将βGD和生物素标记的抗体同时温育。
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶ELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中βGD的浓度呈比例关系。
试剂盒组成:
自备材料
蒸馏水。
加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶ELISA试剂盒不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。
避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果判断与分析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的βGD标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的βGD含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-80ng/ml
4、敏感度: 0.1 ng/ml。