细胞生物学之细胞凋亡笔记

细胞凋亡

一．Bcl-2蛋白家族调节细胞凋亡机制

1.Bcl-2蛋白家族与线粒体

Bcl-2、Bcl-X1蛋白阻断了细胞色素C从线粒体释放。

2.Bcl-2蛋白的相互作用

Bcl-2、Bax、Bcl-X形成一个凋亡调控系统：Bax形成同源二聚体，诱导细胞凋亡，Bcl-2增多，与Bax形成异源二聚体，抑制了细胞凋亡。Bcl-X与Bcl-2又形成异源二聚体，使Bax解聚诱导细胞凋亡。

3.Bcl-2蛋白与氧自由基

Bcl-2蛋白有抗氧化作用，组织线粒体膜电位的下降，抑制细胞凋亡。

二．P53基因对细胞凋亡的调控

1.p53基因的特性

p53基因有11个外显子和10个内含子，编码p53蛋白。此蛋白与特异性DNA结合激活转录。

2.p53对外源性凋亡途径的调节

通过激活血浆膜的死亡受体促进细胞凋亡。

三．细胞凋亡的检测

1.ELISA检测法

通过ELISA检测凋亡细胞释放到细胞质中的核小体从而检测细

胞凋亡程度。此方法即可定性又可定量，而且适合检测大批量样本，不需要特殊的仪器。

2.细胞凋亡相关基因的检测

（1）凋亡促进基因表达的检测

Caspases蛋白家族基因

（2）凋亡抑制基因表达的检测

Bcl-2蛋白家族基因

3.细胞凋亡钙离子浓度变化的测定

内质网钙离子丢失会引发内质网压力途径的细胞凋亡发生，压力诱导的钙离子过多负载会导致更多的坏死。调节性钙离子浓度的增加在内源性细胞凋亡途径中提供了重要的信号事件。应用钙离子特异性荧光探针对细胞进行标记后，通过流式细胞术分析，不仅能检测细胞群体异质性，并能对多项生化指标进行测定，具有较高优越性。