紫菜多糖提取实验报告

紫菜多糖的提取与理化性质研究

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【摘要】水提法分离纯化了紫菜多糖；采用TLC法分析证明紫菜多糖组成中含有半乳糖、甘露糖和葡萄糖；苯酚-硫酸法显色结果为黄色；溶液酸催化分解后加入氯化钡可产生沉淀。

【关键词】苯酚-硫酸法紫菜多糖TLC

前言：

紫菜属于海藻类主要为红藻门红毛菜科植物甘紫菜的叶状体是一种深受人们喜爱的食物。紫菜多糖一般分为紫菜胶和琼胶两类主要区别在于琼胶中硫酸基含量比紫菜胶中的少,而3,6-内醚-半乳糖含量前者比后者高。紫菜多糖的含量由于种类、生长环境和生长季节等不同而有很大差异各种多糖的单体组成也不同主要由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖和木糖组成是一种含糖醛酸的酸性异多糖。研究表明紫菜多糖具有多种生物学活性及药用价值如降血脂、抗血栓、降血糖、抗炎、抗疲劳、增强免疫、抑制肿瘤生长等作用在保健品和医药中具有广阔的开发前景。

1.材料与方法

1.1原料与试剂

原料：干紫菜粉末（实验指导教师提供）

试剂：苯酚、浓硫酸、氯化钡、氯仿、正丁醇、三氟乙酸、苯胺、二苯胺均为国

产分析纯试剂。

主要仪器：硅胶薄层板、电热恒温水浴锅、DHG-9145型电热恒温鼓风干燥箱、电子天平、烧杯、安瓿瓶、滴管。

1.2 实验方法

1.2.1 紫菜多糖的提取

取1.0g干紫菜粉末于烧杯中，按照液料比20:1加入20ml蒸馏水，搅拌均匀后用保鲜膜封口，置于水浴锅中80℃恒温提取2h，抽滤后得提取液。

1.2.2 紫菜多糖除杂蛋白

将提取液与saveg试剂（氯仿：正丁醇=4:1）按照体积比1:4混合，按照saveg 法除蛋白得上清液。

1.2.3紫菜多糖的分离纯化

取上清液，加入4倍体积的无水乙醇得到沉淀。抽滤分离沉淀后用80%的乙醇及无水丙酮洗涤干净，在干燥箱中烘干3小时得紫菜粗多糖。

1.2.4紫菜多糖的理化性质分析

1.2.4.1苯酚-硫酸法显色反应

配制0.1mg/ml的粗多糖溶液。取1ml多糖溶液于试管中，加入1ml 0.6%苯酚溶液混匀后加入4ml浓硫酸，室温下放置15min观察颜色变化。

1.2.4.2硫酸钡沉淀反应

取紫菜粗多糖溶解于2M的三氟乙酸中，滴入氯化钡溶液观察有无沉淀产生。

1.2.4.3紫菜多糖组成定性分析（TLC法）

取紫菜粗多糖溶解于2M的三氟乙酸中，将溶液转移至安瓿瓶中，封口，在干燥箱中105℃放置3h得多糖分解液。取薄层色谱板分别点上浓度均为5mg/ml的半乳糖、葡萄糖、甘露糖溶液以及多糖分解液。将薄层色谱板于展开剂（正丙醇:

水:三乙胺=60:30:0.7）中展开，用显色剂（苯胺-二苯胺试剂）显色后计算R f值。

2.实验结果

2.1苯酚-硫酸法显色结果为黄色。

2.2 氯化钡沉淀法结果为加入氯化钡溶液后体系出现了白色沉淀。

2.3 TLC结果为样品R f=

3.5/

4.6=0.76提取物R f=3.2/4.6=0.72

3.讨论

3.1.苯酚-硫酸法显色中，体系的颜色深浅是由多糖含量来决定的，多糖含量少时颜色浅就是黄色，含量多就会是棕色。实验中由于在2M的三氟乙酸中溶解的粗多糖量较少，所以该显色反应的显色结果比较淡。

3.2.氯化钡沉淀法分析过程中，安瓿瓶中的溶液变成深色是由于提取液中存在的杂质被碳化造成。

4.结论

紫菜多糖的单糖组成中含有半乳糖、甘露糖和葡萄糖；苯酚-硫酸法显色结果为黄色；溶液分解后加入氯化钡可产生沉淀。