土壤微生物生物量碳测定方法

微生物生物量碳测定方法

（1）试剂配制：

0.5M K2SO4溶液：称取K2SO4174.33g溶解于蒸馏水中，搅拌溶解，（可加热）定容至2L。

去乙醇氯仿的配制：在通风柜中，量取100毫升氯仿至500毫升的分液漏斗中，加入200毫升的蒸馏水，加塞，上下振荡10下，打开塞子放气，而后加塞再振荡10下，反复3次，将分液漏斗置于铁架台上，静止溶液分层，打开分液漏斗下端的阀，将下层溶液（氯仿）放入200毫升的烧杯中，将剩余的溶液倒入水槽，用自来水冲洗。再将烧杯中的氯仿倒入分液漏斗中，反复3次。

将精制后的氯仿倒入棕色瓶中，加入无水分析纯的CaCl2 10g，置于暗处保存。（2）试验步骤：

空白试验：称取湿土20克于100毫升的塑料离心管中，加入50毫升0.5M K2SO4溶液，在25℃下，300rev/min振荡30分钟。在3000rev/min离心5分钟,将上清液过滤。

熏蒸试验：称取湿土20克于25毫升小烧杯中，置于真空干燥器中，同时内放一装有用50毫升精制氯仿的小烧杯，用3号真空油密封。将密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾1-2分钟。将干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。然后将土样转移到100毫升的塑料离心管中，如上提取。

微生物生物量碳测定：用Shimadzu TOC500测定提取液有机碳含量。