测生理指标的方法
测量生命体征的方法
测量生命体征的方法测量生命体征(也称为生理参数)是评估人体健康状况和监测疾病进展的重要手段。
常见的生命体征包括体温、脉搏、呼吸、血压和心电图等。
1. 体温测量:体温是衡量人体热量与能量平衡的一种生理参数。
常用的体温测量方法包括口腔测温、腋下测温、耳膜测温和额温测温等。
例如,耳膜测温利用耳温计将传感器放置在耳道内测量耳膜的温度,并据此推测全身体温。
2. 脉搏测量:脉搏是心脏收缩和舒张的结果,反映了心脏泵血功能和血管弹性状态。
常见的脉搏测量方法包括手动测量和自动测量。
手动测量通常通过轻触动脉(如颈动脉、桡动脉或股动脉)来计算每分钟的搏动次数,自动测量则通过脉搏传感器和计时装置来测量脉搏频率。
3. 呼吸测量:呼吸频率是人体每分钟呼吸的次数,反映了肺活量和呼吸系统功能。
常见的呼吸测量方法包括手动计数和使用呼吸传感器。
手动计数需要观察胸部或腹部的起伏,并计算每分钟呼吸次数;而呼吸传感器则利用压力传感器或流速传感器来监测呼吸频率和呼吸深度。
4. 血压测量:血压是衡量动脉血液对血管壁产生的压力。
常见的血压测量方法包括非侵入式和侵入式测量。
非侵入式测量常用的方法是袖带式血压计,通过压力传感器检测动脉的压力变化。
侵入式测量通常需要在动脉内插入导管,并通过监测导管内的压力来测量血压。
5. 心电图:心电图是记录心脏电活动的图像,可以用于评估心脏功能和检测心脏疾病。
心电图测量通常通过将多个电极粘贴在胸部和四肢上,将心脏电活动转化为图形化的电压信号。
除了上述常见的生命体征测量方法,还有一些新的技术正在不断发展,例如呼吸音分析、脑电图、眼底成像等。
这些非侵入性的测量方法有助于提高测量的舒适性以及准确性,为医生和患者提供更准确的诊断和治疗信息。
在现代医疗中,生命体征的测量方法得到了广泛应用,并且不断发展和改进。
它们为评估身体健康、监测疾病进展以及进行有效治疗提供了重要的依据。
需要注意的是,准确的测量方法和设备是保证生命体征测量可靠性和一致性的关键因素,因此,专业人员在选择和使用测量设备时应当具备相关的知识和技能。
植物生理指标测定
植物生理指标测定1.叶绿素含量测定叶绿素是植物进行光合作用的关键分子,它的含量可以反映植物的光合能力和叶片的健康状况。
叶绿素含量的测定可以通过光谱分析或色度法进行。
其中,光谱分析通过测量叶片吸收和反射的可见光波段来计算叶绿素含量;色度法则是通过提取叶片中的叶绿素,然后用乙醇或乙酸乙酯进行溶解,最后通过比色法来测定其含量。
2.蒸腾速率测定蒸腾是植物通过叶片气孔释放水分的过程,蒸腾速率可以反映植物水分的利用和调节能力。
蒸腾速率的测定方法有多种,常用的有质量法和热法。
质量法是通过称量植物在不同时间段内的重量变化来计算蒸腾速率;热法则是利用蒸腾过程中产生的热量来测定蒸腾速率。
3.气孔导度测定气孔是植物调节气体交换的关键结构,气孔导度可以反映植物对环境中各种因素的响应和适应能力。
气孔导度的测定可以通过气体交换技术进行,常用的方法有蒸腾流速法和扩散阻力法。
蒸腾流速法通过测定气孔腔中水蒸气和二氧化碳的浓度来计算气孔导度;扩散阻力法则是通过测定气孔腔中水蒸气的扩散阻力来计算气孔导度。
4.抗氧化酶活性测定氧化应激是植物面临的常见环境胁迫,而抗氧化酶是植物对抗氧化应激的主要防御系统。
抗氧化酶活性的测定可以通过比色法、荧光法和电化学法等进行。
比色法是基于酶催化反应产生的物质的颜色变化来测定酶活性;荧光法是通过检测酶催化反应产生的荧光信号来测定酶活性;电化学法则是通过测量酶催化反应中释放或吸收的电荷来测定酶活性。
这些测定方法可以用于研究植物对不同环境因子的响应和适应能力,也可以用于评估植物的生长和发育状态。
通过测定植物生理指标,研究人员可以更好地了解植物的生理机制和适应策略,为植物的种植和管理提供科学依据。
测生理指标的方法
实验路线及安排:项目主要在晋西北地区展开区域化试验,供试品种4个,均为当年生扦插苗,每个品种15株,采用完全随机区组设计进行,其中包括4个处理,3个重复。
所测定内容包括12项生理指标在相应部位(根、茎、叶)的年变化规律,并从形态、生理和生物化学方面对其抗寒抗旱性机理进行研究探讨。
在每个小区分别选健康植株2株,每株取其中上部位叶片1-2片,组成混合样,编号,带回实验室用一部分样品进行抗旱指标测定,其余样品放入冰箱低温处理,处理温度为0℃、-10℃,-20℃,然后进行抗寒指标测定,每月采样一次。
根的取样方法为每个小区分别选健康植株10株,挖出其部分根系组成混合样,处理方法同叶片;茎的取样方法为选健康植株10株,取其上部嫩茎组成混合样,处理方法同上。
2009年10月-2010年3月对所选材料进行人工低温干旱处理,完成相关实验指标的测定工作。
低温处理通过相对电导率及相关指标评价其抗寒性;干旱处理是通过对所栽品种进行适宜土壤水分、中度干旱、严重干旱条件的人为处理,测定杨树的蒸腾速率和相应指标,评价其抗旱性。
实验方法一.光合效率、气孔导度、蒸腾速率三项指标用光合仪直接测定;二.水势(小液流法)1.取10个干净的试管,分成A组和B组,都贴上0.05mol/L、0.1 mol/L、0.15 mol/L、0.2 mol/L、0.3 mol/L 6个不同浓度标签,并向这两组试管中分别移取相应浓度的CaCl2溶液4mL。
2.取待测叶子数片,用打孔器在其上均匀打孔,混匀,将其分别装入A组试管(每支试管装10片),摇匀,滴入一滴相同浓度的甲烯蓝溶液,再摇匀。
3.用干净的毛细移液管,吸取1~2滴蓝色溶液,小心的插入装着相同浓度的B组试管中部,轻轻的挤出一滴蓝色溶液,观察蓝色液滴流动方向。
按下公式计算植物组织水势:Ψ=-iRTC式中:Ψ为植物组织水势(MPa);C为CaCl2溶液的摩尔浓度(mol/L);R为摩尔气体常数,0.008314MPa·L/mol·K;T为热力学温度(K),即273+t(t为当时摄氏温度);I解离常数(CaCl2=2.6)三.叶绿素含量(直接浸提法)80%的丙酮液的配制:4L丙酮 + 1L蒸馏水。
植物生理指标测定方法
植物生理指标测定方法植物生理指标是指用来衡量植物生理状况的具体参数或指标,在植物生理研究中起到了非常重要的作用。
植物生理指标测定方法主要包括以下几个方面:光合作用指标、呼吸作用指标、蒸腾作用指标、叶绿素指标、产量指标和抗逆性指标等。
1.光合作用指标的测定方法:(1)净光合速率的测定方法:通过光合速率仪测定植物叶片在光照条件下的净光合速率;(2)光饱和点和CO2抗饱和点的测定方法:通过对光合速率与光照强度或CO2浓度的关系进行测定,确定光饱和点和CO2抗饱和点;(3)光合色素含量的测定方法:通过分光光度计或高效液相色谱法测定叶片中的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等光合色素的含量;(4)光合机构有效光能利用率的测定方法:通过光合色素荧光分析仪测定叶片的光能利用效率。
2.呼吸作用指标的测定方法:(1)总呼吸速率的测定方法:通过呼吸速率仪或气体分析仪测定植物组织在不同温度条件下的总呼吸速率;(2)细胞内呼吸速率的测定方法:通过氧和二氧化碳分压差法或氧电极法测定细胞内的呼吸速率。
3.蒸腾作用指标的测定方法:(1)蒸腾速率的测定方法:通过蒸腾速率仪测定植物叶片在不同光照和湿度条件下的蒸腾速率;(2)水分利用效率的测定方法:通过测量蒸腾速率和光合速率的比值来反映植物对水分的利用效率。
4.叶绿素指标的测定方法:(1)叶绿素含量的测定方法:通过叶绿素荧光分析仪或高效液相色谱法测定叶片中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量;(2)叶绿素荧光动力学特性的测定方法:通过荧光指数、叶绿素荧光参数和叶绿素荧光成像等技术来评估叶绿素在光抑制和光保护状态下的变化。
5.产量指标的测定方法:(1)单株产量的测定方法:通过对植株生物量、籽粒数或实际产量的测定来计算出单株产量;(2)单穗产量的测定方法:通过对穗长、穗粒数和粒重的测定来计算出单穗产量;(3)单粒产量的测定方法:通过对单穗粒数和粒重的测定来计算出单粒产量。
6.抗逆性指标的测定方法:(1)抗氧化酶活性的测定方法:通过测定植物组织中抗氧化酶活性,如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶等的活性来反映植物的抗氧化能力;(2)渗透调节物质含量的测定方法:通过测定植物组织中渗透调节物质(如脯氨酸、脯氨酸激酶等)的含量来评估植物的胁迫适应能力;(3)膜脂过氧化程度的测定方法:通过测定植物组织中膜脂过氧化程度的指标,如丙二醛和过氧化氢含量来评估植物膜的稳定性。
生理指标测定方法
选取生长6周的印度芥菜及生长8周的遏蓝菜和烟草水培幼苗,转移至含有200、400或800 μM CdCl2的1/2 Hoagland营养液中生长4天,分别选取相同叶位的植物叶片进行以下生理指标测定。
每个实验设3次重复。
(1)光合系统指标测定用光合仪(LCpro+,ADC,UK)测定光合速率(Pn)、蒸腾速率(E)和气孔导度(Gs)。
测定时间为11:00~13:00。
(2)过氧化氢含量测定取0.5g植物叶片加0.1%(w/v)冰预冷的TCA研磨匀浆,4℃ 15000g离心25 min。
3 ml 反应混合液含有0.5 ml样品提取上清液、0.5 ml 100 mM磷酸缓冲液(PH6.8)和2 ml 1M KI。
将反应混合液置于黑暗处放置1h后,于390 nm处测定反应液吸光度。
根据过氧化氢标准曲线查得样品中H2O2浓度C(μM),按下式计算过氧化氢含量:H2O2含量(μMol/g)=(C×V t)/(W×V1)式中:C-标准曲线上查得样品中H2O2浓度(μM);V t:样品提取液总体积(ml);V1:测定时用样品提取液体积(ml);W:样品鲜重(g)。
(3)相对电导率测定取样品0.5g,放入试管中,加10ml去离子水,置25℃下10h。
用玻璃棒搅拌均匀,然后用电导仪测电导值C1。
再将试管放入沸水中10min,待其冷却至25℃时,测得处理和对照得电导值为C2,按下式计算电解质渗出率和伤害度:电解质渗出率(%)=(浸泡液电导值/煮沸液电导值)×100%(4)MDA含量测定取0.5g植物叶片加5%(w/v)冰预冷的TCA研磨匀浆,4℃1500g离心10min,取上清液2ml于10ml的试管中,再加入0.67% TBA2ml,混合后在95℃水浴上煮沸30min,冰浴冷却,再1500g离心10min,分别在450nm、532nm、600nm测定吸光度值,按:C(μmol/L)=6.45×(A532-A600)-0.56×A450计算MDA的浓度,进而计算含量。
植物生理指标测定方法
植物生理指标测定方法本文介绍了植物生理指标的测定方法,包括叶片持水率、植物暂时萎蔫率、叶片相对含水量、相对电导率和可溶性糖的测定。
首先介绍叶片持水率的测定方法。
选择植株上部枝条健康完整的定型叶,摘取后混均匀分成三份即时称量鲜重,然后置入40℃恒温烘箱中烘40 min,取出称重,再置入85℃烘箱中恒温烘至恒重。
失水率的大小可以反映叶片持水能力的高低,计算公式为失水率=[(鲜重-40℃烘40 min重)÷(鲜重-85℃烘至恒重)]×100%。
其次介绍植物暂时萎蔫率的测定方法。
观察植株叶片萎蔫下垂、翌日晨不能恢复正常者,即取盆中土壤测定。
将植株连土团倒出,用小刮铲从根的周围取土,剔除杂物后称重,带回室内置于105℃烘箱内烘至恒重。
每种植物每次测试一盆,按公式计算暂时萎蔫率:暂时萎蔫率=[(土壤湿重-土壤干重)÷土壤干重]×100%。
接下来介绍叶片相对含水量的测定方法。
取各植株相同部位叶片,测定叶片的鲜重M1,然后将叶片浸入蒸馏水中使其吸水达到饱和状态,再取出擦干叶片至表面无水分残留,称重得到叶片的饱和鲜重M2,最后将叶片放进烘箱,105℃杀青半小时,再于85℃环境下烘至恒重,得到叶片干重M3.按公式计算叶片相对含水量。
然后介绍相对电导率的测定方法。
取各植株相同部位叶片,用蒸馏水拭净叶片表面和背面,去除叶片中脉,剩下部分剪成大小为5mm×5mm的叶片。
取0.20g各3份放入锥形瓶中并加入30ml蒸馏水,放于真空干燥器中,用真空泵抽气10min,以抽出细胞间隙空气。
缓慢放入空气,水即渗入细胞间隙,叶片变成透明状,细胞内溶质易于渗出。
取出锥形瓶,在室温下保持30min后用电导仪测定电导率L1,然后将加塞锥形瓶转入沸水中,水浴20 mins,取出冷却至室温后测定电导率L2.按公式计算细胞膜相对透性(相对电导率)。
最后介绍可溶性糖的测定方法。
取各植株相同部位叶片,用90%乙醇浸泡2h,过滤后将滤液置于水浴中加热至乙醇挥发完毕,再用蒸馏水补足至定容,最后用显色剂显色后测定吸光度,按公式计算可溶性糖的含量。
基本生理指标测量
基本生理指标测量1.体温测量:体温是人体内环境稳定性的重要指示器。
测量体温的方法主要有三种:口腔测温、腋窝测温和直肠测温。
其中口腔测温是最常用的方法。
使用电子体温计或者红外线体温计,将测温器放置在舌下,等待一段时间后,读取温度显示器上的数值,即可得到体温。
2.血压测量:血压是衡量心血管功能和全身循环状态的重要指标。
测量血压时,常用的方法是用血压计和听诊器。
测量时,将血压计的袖带绕在被测者的上臂上,充气使袖带膨胀,然后逐渐放气,听诊器贴在被测者的动脉点上,当听到心音的时候,记录下此时的血压。
3.心率测量:心率是指心脏收缩和舒张的频率,是心血管健康的重要指标。
测量心率的方法主要有手动计算心跳数和使用心率监测仪。
手动计算的方法是在静息状态下,感受到心脏的搏动,用计时器记录30秒内的心跳数,并乘以2得到每分钟的心跳数。
使用心率监测仪时,将传感器带在胸前或手腕上,设备会自动记录心跳数。
4.呼吸频率测量:呼吸频率是指单位时间内的呼吸次数,反映了呼吸系统的状态。
可以通过观察胸部或腹部的起伏来计算呼吸频率,也可以使用呼吸监测仪来自动测量。
在静息状态下,计算单位时间内呼吸的次数,并记录下数值。
5.体重测量:体重是反映人体健康状况的重要指标之一、使用体重秤来测量体重,将被测者放置在秤上,读取显示器上的数值即可。
在测量体重时,应注意测量的时间和基准(比如空腹、同一时间、同一秤等)。
6.身高测量:身高是称量身体的垂直尺寸,对于评估人体生长和发育状态非常重要。
可以使用身高尺或墙上的垂直标尺来测量。
站直并贴近测量仪器,使肩胛骨、头部、臀部和脚跟紧贴测量仪器,读取身高尺上与顶部垂直线对齐的数值。
除了上述基本的生理指标测量,还有其他一些指标也是非常重要的,比如心电图、血氧饱和度、脑电图等。
这些指标一般需要专业设备和专业人员来进行测量和解读。
通过定期测量这些指标,可以及时发现异常情况,采取相应的干预措施,从而保障人体健康。
测定各生理指标的试验方法
测定各生理指标的试验方法测定各生理指标的试验方法1.4.1 电导率的测量(浸泡法)[5]取大小相当的植物叶片(尽量保证叶片的完整性,少含茎节),用自来水洗净后再用蒸馏水冲洗3次,用滤纸吸干表面水分,将叶片剪成适宜长度的长条(避开主脉),快速称取鲜样,每份0.1g,分别置于10ml去离子水的刻度试管中,盖上玻璃塞置于室温下浸泡处理12h,用电导仪测定浸提液电导(R1),然后沸水浴加热30min,冷却至室温后摇匀,再次测定浸提液电导(R2)。
根据公式:相对电导率=R1/R2×100% 算出电导率。
1.4.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定(氮蓝四唑法)[5]取各株植物相同部位的叶片(去叶脉)0.5g于预冷的研钵中,加1ml预冷的磷酸缓冲液在冰浴上研磨成浆,加缓冲液使最终体积为5ml。
取1.5~2ml于4000r/min下离心10min,上清液即为SOD粗提取液。
取32支试管(30支测定管,2支对照管),分别加入1.5ml0.05mol/l磷酸缓冲液、0.3ml130nmolMet溶液、0.3ml750μmol/l NBT溶液、0.3mol100μmol/l EDTA液、0.3ml20μmol/l核黄素、0.05ml酶液(其中2支对照管以缓冲液代替酶液)、0.25ml蒸馏水,混匀,将一支对照管置于暗处,其他各管于4000lx日光下反应20min(要求各管受光情况一致,温度高时缩短,低时延长)。
反应结束后,以不照光的对照管做空白,分别测定其他各管的吸光度。
计算公式:SOD总活性(U/g)=[(ACK-AE)×V]/(0.5×ACK×W×Vt)注:SOD总活性以每克样品鲜质量的酶单位表示(U/g);ACK为照光对照管的吸光度;AE为样品管的吸光度;V为样品液总体积(ml);Vt为测定时样品用量(ml);W为样品鲜质量(g)。
1.4.3 过氧化物酶(POD)活性的测定(愈创木酚法) [5]酶液提取:取5.0g植物叶片,洗净,剪碎,放入研钵中。
植物生理学中各项生理指标的测定方法
植物⽣理学中各项⽣理指标的测定⽅法⼀.实验内容实验1 MDA(丙⼆醛)含量测定所需试剂:10%三氯⼄酸(TCA)(纯) 0.25%硫代巴妥酸 (纯)实验2:可溶性蛋⽩含量测定所需试剂:考马斯亮蓝G-250 95%⼄醇 85%磷酸实验3:SOD(超氧化物歧化酶)酶活性测定所需试剂:dl-甲硫氨酸(Met) NBT EDTA-Na2 核黄素实验4:CAT(过氧化氢酶)活性(过氧化氢酶)测定所需试剂:PBS(PH=7.0) 30% H2O2实验五:Apx(抗坏⾎酸过氧化物酶)活性(即ASA—POD活性)测定所需试剂:ASA(分⼦量167.12) (⼄=胺四⼄酸=钠)EDTA—Na2 PBS (pH7.0) 30%H2O实验6: ASA(维⽣素C)含量测定偏磷酸 95%⼄醇磷酸 4% 2,2-⼆联吡啶 FeCl3(或FeCl3·6H2O)实验7:GSH(⾕胱⽢肽, 媚⼒肽GSH GSH是由⾕氨酸、半胱氨酸和⽢氨酸结合⽽成的三肽化合物)含量测定所需试剂:NaH2PO4·2H2O DTNB(⼆硫代硝基苯甲酸) PBS (PH6.8)实验8:脯氨酸测定所需试剂:磺基⽔杨酸甲苯茚三酮冰⼄酸 85%磷酸试验9:叶绿素含量测定。
80%丙酮试验9:GR活性测定试验10:过氧化氢含量测定。
三氯⼄酸试验11:超氧阴离⼦含量测定⼆.酶液和母液提取1. 酶液提取所需试剂:50mmol/L磷酸缓冲液(PH=7.8)(内含1% (m/v) 聚⼄烯吡哆烷酮PVP),0.1mmol/L EDTANa2或EDTA),也可为(内含2% (m/v)PVP),0.2mmol/L EDTA Na2或EDTA)(先配制后⽤缓冲液定容)2. ASA . GSH母液提取所需试剂:5%偏磷酸1.抗氧化酶酶液提取(SOD.POD.CAT):1g(根据样品的量,少的可以适当减少)叶⽚加⼊预冷5ml. 50mmol/L磷酸缓冲液(PH=7.8)↓4℃冷冻15000g离⼼20分钟↓上清液即为酶液(5℃下保存⼀两天内备⽤,中短期⽤-20℃保存)2.ASA . GSH母液提取:0.1g叶⽚加⼊3ml预冷5%偏磷酸溶液↓4℃冷冻14000g离⼼10分钟↓上清液即为母液(5℃下保存备⽤)(偏磷酸可显著沉淀蛋⽩质和保护ASA)酶液提取所需试剂:PVP(聚⼄烯吡哆烷酮):1%(1g溶于100ml⽔),1000ml需称取10g,此处⽤PBSEDTA-Na 2 : 0.1mmol/L (37.2mg EDTA-Na2溶于1000ml蒸馏⽔),此处⽤PBSPBS(缓冲液)配制⽅法:① Na2HPO4·12H2O ② NaH2PO4·2H2O取① 71.64g,蒸馏⽔定容⾄1L,取② 31.21g定容⾄1L,放置4℃冰箱备⽤PH=7.8 取① 91.5ml+② 8.5ml=100ml (浓度0.2mol/L)需要0.05mol/L→将上述溶液烯释⾄400ml (0.2mol/L*0.1=0.05mol/L*V)母液提取所需试剂:5%偏磷酸:称5g纯偏磷酸,定容⾄100 ml蒸馏⽔(需加热溶解,温度在50-60℃)偏磷酸有剧毒(偏磷酸难溶解,先得⽤研钵提前研碎,后⽤磁⼒搅拌器溶解⼀到两天后再定容)(现所⽤为38%HPO3,所以需称65.7895g,定容⾄500ml)三.实验步骤实验1:MDA含量测定1.1所需试剂:10%三氯⼄酸(TCA)(纯)称10g定容⾄100ml0.25%硫代巴妥酸 (纯) 称0.25g⽤10%TCA定容⾄100ml(配制时,可⼀次完成,先配TCA,不要定容,再加⼊硫代巴⽐妥酸,然后定容,若难溶解,可以在磁⼒搅拌器上微热)1.2步骤:取0.3g叶⽚,加4ml磷酸缓冲液研磨,加⼊ 4ml 0.25%的硫代巴⽐妥酸(溶于10%的三氯⼄酸)溶液↓摇匀95℃加热15分钟↓快速冷却3000g离⼼15分钟↓取上清测定 OD532,OD600,OD450值↓按公式求 MDA浓度=6.45×(OD532-OD600)-0.56OD450 (µmol/L)可溶性糖浓度=11.71×OD450 (mmol/L)最后计算 MDA含量(µmol/g FW)= [4×(MDA浓度x)×10-3/0.1]同时,可测得可溶性糖含量(m mol/g FW)= 4×(可溶性糖浓度χ)×10-3/0.1(⽤多波长测定,在测定之前⼀定要矫正基线,公式中的参数可以直接在分光光度计上输⼊)注意:以0.25%的硫代巴妥酸溶液作空⽩调零MDA含量测定的改进1.可以⽤做酶活性时提取的酶液来直接测定MDA含量,⽤量可以定为1.0、1.5或2.0(较好)ml。
基本生理指标测量
基本生理指标测量生理指标是评估一个人身体状况的重要指标,通过对这些指标的测量与监控,可以及时发现身体的异常状况,并进行相应的干预和治疗。
下面将介绍一些常见的基本生理指标及其测量方法。
1.体温测量:体温是反映人体体内热量的指标,正常体温范围为36.5°C-37.5°C。
常见的测量方法有口腔温度计、耳温计、额温计等。
在测量体温时应注意环境温度、测量部位的选择和测量时间的规律性。
2.心率测量:心率是人体每分钟心脏跳动的次数,通常在60-100次/分钟之间。
能够测量心率的设备有心电图仪、手环、智能手表等。
测量心率时应让被测者安静休息,避免运动、吸烟、饮食等干扰。
3.血压测量:血压是心脏收缩和舒张时对血液施加的压力,主要分为收缩压和舒张压。
通常正常血压的范围为收缩压120毫米汞柱以下,舒张压80毫米汞柱以下。
常用的测量方法为使用血压计、听诊器进行直接测量。
在测量血压时要注意袖带的尺寸和位置的选择,被测者应安静坐立或平躺。
4.呼吸频率测量:呼吸频率是单位时间内呼吸的次数,正常成年人的呼吸频率为12-20次/分钟。
可以通过观察胸腹部的升降运动来测量呼吸频率,也可以使用呼吸带、呼吸计或电子设备测量。
5.身高测量:身高是人体垂直方向上的线性距离,是衡量人体生长发育情况的一个重要指标。
常用的测量方法是使用身高尺测量直立身高,被测者应保持笔直站立,头部、臀部和脚跟同时接触墙壁或测量仪器。
6.体重测量:体重是人体质量的指标,能够反映体内的能量储备和营养状况。
常见的体重测量方式有体重秤、电子秤等。
在测量体重时应注意测量前后的饮食和排尿情况,尽量选择同一时间、同一地点和同一测量仪器进行测量。
7.血糖测量:血糖是人体血液中的葡萄糖含量,是评估糖代谢情况的重要指标。
常见的测量方法有血糖仪、血糖试纸等。
在测量血糖时应注意测量仪器的质量和使用方法的正确性,以及采血部位和时间的选择。
以上是一些常见的基本生理指标测量方法,对于正常人群的生理监测和健康管理起着重要的作用。
生命体征的测量方法
生命体征的测量方法生命体征是用于评估人体生理状况的指标,包括心率、呼吸频率、体温和血压等。
这些体征的测量方法对于医学诊断和监护具有重要意义。
下面将详细介绍每个生命体征的测量方法。
一、心率测量方法:心率是指心脏每分钟跳动的次数,一般以次/分钟表示。
心率的测量可以通过脉搏触诊或心电图(ECG)记录来实现。
1. 脉搏触诊法:将两指放在患者的动脉血管上,如颈动脉、桡动脉或颈动脉等,通过计算30秒内的脉搏跳动次数,再乘以2即可得到心率。
2. 心电图法:心电图记录心脏肌肉收缩和舒张的电位变化,可通过粘贴电极到患者胸部和四肢上,然后将电极连接到心电图机上,通过机器分析和记录心电图图形,根据波形的频率和持续时间来计算心率。
二、呼吸频率测量方法:呼吸频率是指每分钟呼吸的次数。
呼吸频率的测量可以通过观察胸部的上下运动或观察鼻孔的开合来实现。
1. 观察胸部运动法:观察患者胸部的上下运动,计算30秒内的呼吸次数,再乘以2即可得到呼吸频率。
2. 观察鼻孔开合法:观察患者的鼻孔开合情况,计算每分钟开合的次数即可得到呼吸频率。
三、体温测量方法:体温是人体内部温度与外界环境的热交换后的结果。
测量体温的方法有多种,包括口腔、腋下、耳朵和肛门等部位。
1. 口腔测温法:将温度计放置在舌下,闭口定位1-2分钟,然后读取温度计的数值。
2. 腋下测温法:将温度计放置在腋窝下方,密封腋窝,等待1-2分钟后读取温度计的数值。
3. 耳温测量法:使用额温计或红外线耳温计,将温度计插入患者耳道,等待几秒钟即可读取温度计的数值。
4. 肛门测温法:应在温度计上涂抹润滑剂,小心地将温度计插入患者肛门1-2厘米,等待几秒钟后读取温度计的数值。
四、血压测量方法:血压是指心脏收缩和舒张时对血管壁施加的压力。
血压的测量通常使用血压计来实现。
1. 手臂血压测量法:使用袖带将血压计固定在患者的上臂上,紧密包裹在皮肤上,然后将手臂抬高到与心脏平齐,通气保持放松状态。
然后按下血压计上的气球,放出气体,并同时观察压力计上的数值。
常见生理指标的测定方法
常见生理指标的测定方法一、SOD1、称0.2g叶片(去叶脉)——研钵(加1mLPBS7.8)——定容至2mL离心管——离心(15000r,15min)——得上清液2、取1.5mLPBS7.8,Met、NBT、核黄素溶液EDTA-Na2各0.3mL,上清液0.1mL(对照管用0.1mLPBS7.8替代,2支)ddH2O0.5mL(温控25℃-35℃,光强4000Lx)——560nm处比色——计算二、POD、CAT称0.2g叶片(去叶脉)——研钵(加1mLPBS7.8)——定容至2mL离心管——离心(15000r,15min)——得上清液1、POD:加1mLH2O2,愈创木酚0.95mL,PBS7.0 1mL,上清液0.05mL——于470nm处比色——分析计算2、CA T:加1mL,H2O1.95mL,上清液0.05mL——于240处比色——计算三、MDA×1+1、外加离心管×11、0.5g——研钵(加2mL10%TCA)——研磨(8mL10%TCA)——定容至10mL离心管——离心(5000r,-min)——得上清液2、取2mL上清液(加2mLTBA,对照以水代替)——沸水浴15min——于450、532、600nm 处比色——计算四、叶绿素0.2g——25mL试管(加20mL提取液,丙醇:乙醇=2:1)——放置24h——于645、663nm处比色——计算五、蛋白质含量测定×2+1,外加离心管×11、标准曲线的制作取6支具塞试管按下表加入试剂,配制0--1000µg/mL牛血清蛋白液各1mL编号0 1 2 3 4 5蛋白标液mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0ddH2O 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0蛋白含量µg0 200 400 600 800 1000。
生理指标测定方法
生理指标测定方法生理指标是指人体在不同状态下的各种生理参数,例如体温、血压、心率等。
测定这些生理指标对于健康管理以及疾病诊断和治疗至关重要。
本文将介绍几种常见的生理指标测定方法以及其原理和应用。
一、体温测定方法体温是人体表征温度状态的重要指标,正常体温范围在36.5℃至37.5℃之间。
体温的测定方法有多种,常见的方法包括口腔测温、腋下测温、耳温计测温和额温计测温。
口腔测温是最常用的方法之一,使用普通温度计将温度计柄放入舌下,保持2-3分钟后读取温度。
腋下测温则是将温度计放置在腋下,保持5分钟后读取温度。
耳温计测温是使用电子耳温计通过耳朵来进行测温,这种方法快速、准确。
额温计测温则是通过额头部位进行测温,非接触式,速度快且卫生。
二、血压测定方法血压是血液在心脏收缩和舒张时对血管壁的压力。
血压的测定一般使用血压计进行,常见的血压计分为卧式血压计和电子血压计。
在进行血压测定时,被测者需要坐下或平躺,将袖带套在上臂上,然后用听诊器听取心脏的心音,并逐渐放气来测量收缩压和舒张压。
电子血压计则是通过袖带上的传感器自动测量,并在数值显示屏上显示结果,操作更加简便。
三、心率测定方法心率是指心脏每分钟跳动的次数,是评估心脏健康状况的重要指标。
常见的心率测定方法包括手触法和心率监测仪。
手触法是指将食指、中指与无名指放在颈动脉或腕动脉上,感受心脏跳动的脉搏,然后计数30秒内的跳动次数并乘以2即可得到心率。
心率监测仪则是通过佩戴在手腕上或胸部的传感器来自动监测心率,并以数值的形式显示在屏幕上。
四、呼吸频率测定方法呼吸频率是指每分钟呼吸的次数,通常以静息状态下的呼吸频率来评估健康状态。
测定呼吸频率可以通过观察胸部起伏、计数30秒内的呼吸次数并乘以2,或者使用呼吸频率计进行测量。
呼吸频率计是一种便携式仪器,通常佩戴在胸部或腹部,通过感应呼吸运动并记录频率,并以数值形式显示在显示屏上。
综上所述,生理指标的测定方法多种多样,选择合适的测定方法取决于具体的指标以及测量准确性和便携性的需求。
常用作物生理指标测定方法
常用作物生理指标测定方法作物生理指标是衡量作物生长发育和生理功能的重要参数,对于研究作物生理特性、生长速度、抗逆性能以及优化农业管理具有重要价值。
下面是一些常用的作物生理指标测定方法:1.叶绿素含量测定:叶绿素是作物光合作用的重要生化指标,常用的方法包括醋酸镁法、乙醇法和非破坏性叶绿素测定仪等。
2.叶片相对含水量测定:叶片相对含水量是反映植物水分状况的指标,常用的方法包括重量法、酒精浸泡法等。
3.叶片相对电导率测定:叶片相对电导率是反映作物膜系统完整性的指标,常用的方法包括浸泡法和浸渍法。
4. 叶片蛋白质含量测定:叶片蛋白质含量是反映植物生长和抗逆性的指标,常用的方法包括Lowry法、Bradford法和Biuret法等。
5.叶片活性氧含量测定:活性氧对植物生长和逆境抗性具有重要影响,常用的方法包括过氧化氢测定法、超氧化物歧化酶测定法和丙二醛含量测定法等。
6.叶片抗氧化酶活性测定:抗氧化酶是植物抵御氧化应激的重要酶系,常用的方法包括超氧化物歧化酶活性测定法、过氧化氢酶活性测定法和过氧化物酶活性测定法等。
7.土壤水分含量测定:土壤水分含量是影响作物生长和产量的重要因素,常用的方法包括烘干法、容量法和驻挠仪测定法等。
8.根系活力测定:根系活力是作物吸收水分和养分的重要指标,常用的方法包括三苯四氮唑蓝法和碘化钠法等。
9.气孔导度测定:气孔导度是作物水分调节和碳代谢的重要参数,常用的方法包括气体交换仪测定法和树脂浸泡法等。
10.叶盘蒸腾速率测定:叶盘蒸腾速率是反映作物水分蒸腾能力的指标,常用的方法包括测定叶盘失重法和石蜡浸渍法等。
以上是一些常用的作物生理指标测定方法,这些方法提供了了解作物生长发育和生理功能的重要信息,为作物生理机制的深入研究和农业管理的优化提供了依据。
同时,为提高作物抗逆性能和增加农业产量提供了重要的支持。
生命体征的测量方法
生命体征的测量方法生命体征是测量人体生理状态的指标,包括体温、脉搏、呼吸和血压。
它们是评估个体健康状况的重要依据,同时也是监测疾病和病情变化的重要手段。
下面将详细介绍这些生命体征的测量方法。
首先是体温的测量。
体温是评估人体新陈代谢状态的重要指标,正常体温范围在36.5到37.5之间。
目前常用的体温测量方法有口温、腋温、耳温、额温和肛温。
其中,腋温和口温是最常见的测量方法。
在测量体温之前,应选择合适的温度计,并保持它们的清洁和消毒。
在测量过程中,应将温度计插入测量部位,保持几分钟直至测量完成。
测量体温时,需要注意将温度计与皮肤接触良好,避免外界因素对测量结果的影响。
其次是脉搏的测量。
脉搏是血液在心脏收缩时由动脉中传导而成的一种周期性的搏动,其频率和规律程度是评估心脏功能和血液循环状态的重要指标。
常用的脉搏测量部位有颈动脉、桡动脉、肱动脉和足背动脉等。
在测量脉搏时,应选择一个舒适的环境,并确保测量者的身体和情绪状态处于放松和休息的状态。
在测量过程中,可以用手指轻轻触摸动脉,然后用计数器计算每分钟脉搏的数目。
然后是呼吸的测量。
呼吸是人体的生命活动之一,是供氧、排出二氧化碳的重要过程,通过测量呼吸频率和深度可以评估人体的呼吸功能和胸腔活动的情况。
常用的呼吸测量方法有手动计数、观察胸廓运动和胸部X线片等。
在测量呼吸时,应告知被测者呼吸测量的目的,并选择一个安静、平稳的环境。
被测者应保持坐位或仰卧位,并用手指轻轻触摸或观察胸廓的运动,计算每分钟的呼吸频率。
最后是血压的测量。
血压是血液在动脉血管内对血管壁施加的压力,是评估心血管健康状况和血液循环机能的重要指标。
常用的血压测量方法有直接测压法和间接测压法。
间接测压法是目前常用的方法,包括经上臂测量和经腕测量两种方式。
在测量血压时,应选择一个安静、舒适的环境,并让被测者放松,避免饮食和运动等干扰。
被测者应采取坐位或卧位姿势,并将袖带正确地安装在上臂或腕部,然后通过听诊器或自动测量仪器进行测量。
各生理指标测定方法要点
各生理指标的测定方法一、脯氨酸含量的测定1.茚三酮法1.1原理在正常环境条件下,植物体内游离脯氨酸含量较低,但在逆境(干旱、低温、高温、盐渍等)及植物衰老时,植物体内游离脯氨酸含量可增加10-100倍,并且游离脯氨酸积累量与逆境程度、植物的抗逆性有关。
用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸游离于磺基水杨酸的溶液中,然后用酸性茚三酮加热处理后,溶液即成红色,再用甲苯处理,则色素全部转移至甲苯中,色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。
在520nm波长下比色,从标准曲线上查出(或用回归方程计算)脯氨酸的含量。
1.2步骤试剂:(1)25%茚三酮:茚三酮------------0.625g冰乙酸------------15ml6mol/L磷酸--------10ml70°C水浴助溶;(2)6mol/L磷酸:85%磷酸稀释至原体积的2.3倍;(3)3%磺基水杨酸:磺基水杨酸------3g加蒸馏水至------100ml实验步骤:(1)称取0.1g样品放入研钵,加5ml 3%磺基水杨酸研磨成匀浆,100°C沸水浴15min;(2)冰上冷却,4000rpm离心10min;(3)提取液2ml+冰醋酸2ml+25%茚三酮2ml混合均匀,100°C沸水浴30min,冰上冷却;(4)加4ml甲苯混合均匀,震荡30s,静置30min;(5)以甲苯为空白对照,再520nm下测定吸光值。
1.3计算方法脯氨酸含量(μg/gFW)= X * 提取液总量(ml)/样品鲜重(g)*测定时提取液用量(ml)*10^6公式中:X-----从标准曲线中查得的脯氨酸含量(μg)提取液总量---------------------------5ml测定时提取液用量---------------------2ml问题及质疑:1.酸性体系下,脯氨酸与茚三酮加热反应后的最终产物为红色,再实验过程中,仅有少数时候能发现红色产物。
生理指标测定方案
一氮蓝四唑(NBT)法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力一、原理超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶,它催化下列反应: 2O2-+ 2H →H2O2+O2。
本反应产物H2O2可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。
本实验依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。
在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基,超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。
而SOD可清除超氧阴离子自由基,从而抑制了甲腙的形成。
于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。
据此可以计算出酶活性大小。
(一个酶活单位定义为将NBT的还原抑制到对照的一半(50%)时所需的酶量。
)二、材料、仪器设备及试剂(一)材料水稻或小麦叶片。
(二)仪器设备高速冷冻离心机,紫外分光光度计,日光灯(反应试管处照度为4000lx),试管数支。
(三)试剂(1)0.05mol/L(pH7.8)磷酸缓冲液 (PBS)。
配制方法:①母液A(0.2mol/L Na2HPO4):称取71.64g Na2HPO4·12H2O,用蒸馏水定容至1000ml 。
(配置溶液时需要用磁力搅拌器搅拌才能溶解。
)②母液B(0.2mol/L NaH2PO4):称取31.21g NaH2PO4·2H2O,用蒸馏水定容至1000ml 。
③配0.05mol/L(pH7.8)磷酸缓冲液:取91.5mlA母液+8.5mlB母液+蒸馏水定容到400ml (2)提取介质0.05mol/L(pH7.8)磷酸缓冲液,内含1%聚乙烯吡咯烷酮(PVP): 称取1g PVP用0.05mol/L(pH7.8)磷酸缓冲液 (PBS)定容到100ml(3)130mmol/L甲硫氨酸(Met)溶液:称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100ml。
一般医学生理指标检查方法
一般医学生理指标检查方法宝子们,今天咱们来唠唠医学生理指标检查方法那些事儿。
先说说体温检查吧。
这可简单啦,最常见的就是用体温计啦。
水银体温计现在还在用呢,往胳肢窝一夹,等个几分钟就成。
不过现在电子体温计也很流行,往额头或者耳朵里一放,“滴”一声就出结果,超级方便,就像给身体来了个小扫描。
再聊聊血压检查。
这时候就轮到血压计上场啦。
医生会把袖带缠在咱胳膊上,然后打气,再慢慢放气。
那感觉就像胳膊被轻轻捏了一下又松开。
电子血压计就更省事,自己在家都能测,按个按钮,血压数值就出来啦。
正常血压有个范围,要是高了或者低了都得注意呢。
血常规也是很常见的检查。
这就需要扎个小针,抽点血啦。
别看扎针有点小害怕,其实就像小蚂蚁咬了一口。
抽完血,这血就会被送去检查各种细胞的数量,像红细胞、白细胞、血小板啥的。
红细胞要是少了,可能就会贫血,人就会没劲儿。
白细胞要是不正常,可能身体有炎症啦。
尿常规也不能少。
这个就更简单啦,找个小杯子,接一点尿就好啦。
可别小看这尿,它能反映很多问题呢。
尿的颜色、透明度,还有里面的成分,要是有蛋白或者红细胞啥的,可能肾脏就有点小毛病啦。
还有心电图检查。
这时候就像身上贴了好多小贴纸一样,那些小电线连着仪器。
然后仪器就会画出心脏的电活动曲线。
这就像给心脏做个小记录,看看它跳得规不规律,有没有啥异常的电波。
要是心电图不正常,医生就会进一步检查,看看心脏到底咋回事。
血糖检查也很重要。
现在有扎手指就能测血糖的血糖仪,对于糖尿病患者来说,这可是个好帮手。
就像个小小的侦探,随时能发现血糖的小秘密。
要是血糖高了,就得控制饮食,多运动,严重的话还得吃药打针呢。
这些医学生理指标检查方法虽然看起来有点小复杂,但都是为了咱的健康着想。
就像给身体做个全面的小体检,及时发现小问题,这样咱们就能健健康康、快快乐乐地生活啦。
宝子们,可不要害怕这些检查哦,它们都是咱们健康的小卫士呢。
生理指标测定
•脯氨酸:酸式茚三酮显色法测定
•丙二醛:硫代巴比妥酸法测定
•可溶性糖:硫酸-蒽酮法
•可溶性蛋白:G-250考马斯亮蓝法测定
•α-淀粉酶活力:采用3.5-二硝基水杨酸测定法
•过氧化物酶:愈创木酚测定法
•过氧化氢酶:过氧化氢还原法
•超氧化物歧化酶:氮蓝四唑(NBT)法测定
脯氨酸是一种小分子的渗透物质,是水溶性最大的氨基酸,许多植物在受到逆境胁迫时都能积累高水平的脯氨酸[10]。
它不仅是生物大分子的保护剂和羟基的清除剂,还是植物从胁迫条件恢复正常过程中迅速、有效的氮源、碳源和还原剂。
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实验路线及安排:项目主要在晋西北地区展开区域化试验,供试品种4个,均为当年生扦插苗,每个品种15株,采用完全随机区组设计进行,其中包括4个处理,3个重复。
所测定内容包括12项生理指标在相应部位(根、茎、叶)的年变化规律,并从形态、生理和生物化学方面对其抗寒抗旱性机理进行研究探讨。
在每个小区分别选健康植株2株,每株取其中上部位叶片1-2片,组成混合样,编号,带回实验室用一部分样品进行抗旱指标测定,其余样品放入冰箱低温处理,处理温度为0℃、-10℃,-20℃,然后进行抗寒指标测定,每月采样一次。
根的取样方法为每个小区分别选健康植株10株,挖出其部分根系组成混合样,处理方法同叶片;茎的取样方法为选健康植株10株,取其上部嫩茎组成混合样,处理方法同上。
2009年10月-2010年3月对所选材料进行人工低温干旱处理,完成相关实验指标的测定工作。
低温处理通过相对电导率及相关指标评价其抗寒性;干旱处理是通过对所栽品种进行适宜土壤水分、中度干旱、严重干旱条件的人为处理,测定杨树的蒸腾速率和相应指标,评价其抗旱性。
实验方法一.光合效率、气孔导度、蒸腾速率三项指标用光合仪直接测定;二.水势(小液流法)1.取10个干净的试管,分成A组和B组,都贴上0.05mol/L、0.1 mol/L、0.15 mol/L、0.2 mol/L、0.3 mol/L 6个不同浓度标签,并向这两组试管中分别移取相应浓度的CaCl2溶液4mL。
2.取待测叶子数片,用打孔器在其上均匀打孔,混匀,将其分别装入A组试管(每支试管装10片),摇匀,滴入一滴相同浓度的甲烯蓝溶液,再摇匀。
3.用干净的毛细移液管,吸取1~2滴蓝色溶液,小心的插入装着相同浓度的B组试管中部,轻轻的挤出一滴蓝色溶液,观察蓝色液滴流动方向。
按下公式计算植物组织水势:Ψ=-iRTC式中:Ψ为植物组织水势(MPa);C为CaCl2溶液的摩尔浓度(mol/L);R为摩尔气体常数,0.008314MPa·L/mol·K;T为热力学温度(K),即273+t(t为当时摄氏温度);I解离常数(CaCl2=2.6)三.叶绿素含量(直接浸提法)80%的丙酮液的配制:4L丙酮 + 1L蒸馏水。
称0.5g左右的叶片放在50ml的离心管(做三个重复),加入25ml浓度为80%的丙酮液,放在黑暗处浸提大约36小时后取出,稀释4倍后分别在波长663nm、645nm、652nm下测定光密度,以80%的丙酮液为空白。
按下列公式计算样品中叶绿素含量。
CA =12.72A663-2.59A645(1)CB =22.88A645-4.67A663(2)CT =CA+CB=A652×1000/34.5 (3)在652nm时可一次测出叶绿素总含量mg/g FW)=(CVT/FW×1000)n (4)以上公式中,CA 、CB、CA+B分别为叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b的浓度(mg/L);FW为鲜重(g);C:叶绿体色素的浓度;VT为提取液总体积(mL);n为稀释倍数。
四.丙二醛(MDA)含量测定试剂:20%三氯乙酸(TCA)溶液:20g三氯乙酸,加水80ml溶解;0.1%的TCA溶液:取250ul20%TCA稀释至50ml;0.5%硫代巴比妥酸溶液:0.25g硫代巴比妥酸溶解于50ml20%的TCA中。
1.取植株上一定叶位的叶片,剪成小段,混匀,称取0.3g;2.放入冰浴的砚钵中,加少许石英砂和2ml0.05mol/LPH为7.8的磷酸缓冲液,研磨成匀浆。
将匀浆转移到试管中,再用2-3 ml0.05mol/L磷酸缓冲液分两次冲洗,合并提取液;3.在提取液中加入5 ml 0.5%硫代巴比妥酸溶液,摇匀;4.将试管放入沸水中煮沸10分钟(自试管内溶液中出现小气泡开始计时),到时间后立即将试管取出并放入冷水浴中;5.带试管内溶液冷却后,3000g离心15min,取上清液并量其体积。
以0.5%硫代巴比妥酸溶液为空白测532nm、600nm、450nm处的吸光度;6.结果计算:MDA(mmol.g-1FW)=〔6.452*(A652-A600)-0.559*A450〕*Vt/Vs*FW式中,Vt:提取液总体积(ml),Vs:测定用提取液体积(ml),FW:样品鲜重(g)五.SOD酶活性的测定1、NBT反应液的制备(a)配置50mmol/l pH=7.8磷酸缓冲液:A:取NaHPO4·12H2O 8.95g定容于500ml;B:取KH2PO4 3.4g定容于500ml;(A:B=9:1)(b)13mmol/l甲硫氨酸:在180ml50mmol/l pH=7.8磷酸缓冲液中加入348mg甲硫氨酸,待完全溶解后加入后面的试剂。
(c)63umol/l硝基四唑蓝(NBT):在180ml溶液(b)中加入8.4mgNBT;(d)1.3umol/l核黄素:在(c)中加入1.2ml核黄素母液(0.14g/30ml:0.14g 核黄素加入30ml水中);(e)0.1mmol/lEDTA:在(d)中加入6.6mgEDTA。
将上述步骤配置的NBT反应液避光保存。
2、活性测定(1)酶液提取:同过氧化物酶液的提取(2)超氧化物歧化酶活性的测定:取6mlNBT反应液,加入50ul酶液混合均匀,将试管放于荧光灯架上,光强3000lx 照光10min,到时间后关灯,在722分光光度计560nm处测吸光度值,以内装NBT反应液的试管进行光照的作为对照,以内装NBT反应液但置于暗处的作为参比。
(3)超氧化物歧化酶酶活计算:酶活性= ()Ack A VAck W VtE-⨯⨯⨯⨯12Ack:照光对照管在560nm处的吸光度值Ae:样品管的吸光度值V:酶提取液总体积Vt:测定时所用的酶液体积W:提取酶液的材料鲜重六.PPO酶活性测定用尔茶酚法。
酶液提取过程同POD的方法。
反应体系:于10毫升试管中加入3.9毫升磷酸缓冲液(PH=6)和0.1ml酶待测液混合均匀,在30℃条件下放 1min,立即加1ml 0.1mol/L儿茶酚反应介质摇匀,用721分光光度计在λ=420 处测吸光度值变化。
放好后立即读数并记录,60s读一次,共读5次。
多酚氧化酶的活性按下式计算:活性(u/g)=ΔA*D/(0.01W*t)以每分钟吸光值改变0.01为一个多酚氧化酶单位。
ΔA---反应时间内吸光值的变化;W----鲜样品的质量(g)t----反应时间(min);D----总酶液为反应系统内酶液的倍数七.POD酶活性的测定(用愈创木酚法)0.05mol/l愈创木酚:用烧杯称取6.207g愈创木酚,用少许酒精溶解,然后定容至1000ml。
(按需求不同照比例增缩); 2%H2O2:取30% H2O267ml,加水至1000ml;(1)酶液提取分别称取各待测样品0.500克,加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.25克及少量石英沙和5ml磷酸缓冲液(pH=6)冰浴下充分研磨成匀浆,放入离心管,在10000r/min条件下冷冻离心10min,取上清液为酶提取液。
(2)过氧化物酶活性的测定取10ml试管,一只加入:2.9ml0.05M pH=6的磷酸缓冲液 + 1ml 0.05M的愈创木酚 + 1ml酶液,立即在37℃水浴条件下保温3min,然后加入1ml2%的H2O2继续保温1min,取出立即用721型分光光度计于波长470nm 处测定吸光度值变化,每隔60s 读一次数,共读五次。
以每克鲜重材料每分钟吸光度变化值表示酶活性大小(其计算公式同PPO)。
空白对照不加H2O 2八、脯氨酸含量测定1、原理:当植物缺水时体内的脯氨酸含量增加。
植株体内脯氨酸含量在—定程度上反映了植株体内的水分情况,因而可以作为植物缺水情况的参考性生理指标。
用人造沸石在 pH 1~7 范围内振荡溶液,可除去干扰的氨基酸或使不与茚三酮反应(如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸、精氨酸等),脯氨酸与茚三酮试剂呈显色反应,其含量与颜色深浅成正相关,可用分光光度计测定。
此法有专一性。
2、试剂与仪器设备·茚三酮试剂:将 2.50 g 茚三酮于 60 mL 冰醋酸和 40 mL 6 mol/L 磷酸中,加热( 70 ℃)溶解。
试剂至少在 24 小时内稳定。
.脯氨酸标准液:准确称取 25 mg 脯氨酸溶于少量 80 % 乙醇中,再用蒸馏水定容至 250 mL ,其浓度为 100 μg/mL 。
再取此液 10 mL ,用蒸馏水稀释至 100 mL ,即成 10 μg/mL 的脯氨酸标准液。
分光光度计,水浴锅,移液管,容量瓶,冰醋酸,仪器药品,离心机,烧杯,研钵,试管,恒温水浴3.实验步骤1、绘制标准曲线分别吸取脯氨酸标准母液 0 、 0.2 、 0.4 、 0.8 、 1.2 、1.6 、 2.0 mL放入 7 支具塞刻度试管,分别加入蒸馏水至 2.0 mL, 其脯氨酸含量分别为 0 、 2.0 、 4.0 、 8.0 、 12.0 、 16.0 、 20.0 μg 。
分别吸取上述标准溶液 2 mL ,加冰醋酸 2 mL, 茚三酮试剂 2 mL 加入试管中,混匀后加玻璃球塞,在沸水浴中加热 15 min 。
用分光光度计于波长 515 nm 下进行比色测定,以零浓度为空白对照。
将测定结果以脯氨酸浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标作标准曲线。
2. 植株样品液的提取选取植株功能叶片 2 g ,用 3 mL 80 % 乙醇研磨(放少许石英砂)成浆状。
用 80 % 乙醇洗研钵,将提取物和洗液置于试管中。
80 % 乙醇总量为 10 mL 。
加盖置于黑暗中室温下提取 24 h ,或 80 ℃恒温水浴中提取 20 min 。
将提取液在放有活性炭的滤纸上进行过滤,重复过滤一次,除去色素和残渣。
将滤液置于试管中,加其重量 1/5 的人造沸石强烈振荡 5 min 。
将上层液在离心机上离心 10 min ,上清液备用。
3. 样品溶液的测定取 2 mL 上清液置于试管中,再加入 2 mL 冰醋酸和 2 mL 茚三酮试剂,加盖密封,在沸水浴上加热 15 min 。
用 3 mL 80% 乙醇代替样品液作为对照。
在分光光度计上测 515 nm 处各样品的吸光度,从标准曲线上求出样品溶液中脯氨酸含量。
4、结果计算样品中脯氨酸含量的计算:脯氨酸含量(μg/g ) = C* V T*100%/ W* V 1*106式中:C ——由标准曲线上查得的脯氨酸的质量,μg。
V T ——提取液总体积, mL 。
V 1 ——测定液体积, mL 。
W ——样品质量, g 。
0.5ml酶液(对照用0.5ml 80%乙醇代替)(做三个重复) + 1ml冰乙酸 + 1.5ml 显色液―――混匀,沸水浴15min,冷却后测OD520。