食物中还原型维生素C的测定-2, 6-二氯酚靛酚滴定法课件
维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2, 6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C乂称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2, 6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈 红色。
抗坏血酸具有强还原性, 能使2, 6-二氯酚靛酚还原褪 色，其反应如图：当用2, 6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时， 滴下的2, 6-二氯酚靛酚被还原 成无色；当溶液中的抗坏血酸 全部被氧化成脱氢抗坏血酸 时，滴入的2, 6-一.氯酚靛酚立抗坏血酸 （蓝色） Cl o HO —CH CH 2O H CF 2.6•二氮（•红色）HO —CHO 一CIH —C脫氢抗坏血酸 还原型2,&二氨酚靛蜀（无色）即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1(实验材料：多种蔬果(西红柿、尖椒、绿豆芽等)2(主要仪器：(1)天平(2)研钵1(3)容量瓶(50mL) (7)漏斗(4)刻度吸管(5mL, 10mL) (8)脱脂纱布(9)滤纸(5)锥形瓶(lOOmL)(6)微量滴定管(3mL)3(试剂:(1)2, HC1)标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黃色则不能用)(225mg,溶于25ml 4,HC1中，移入50ml容量瓶中，用蒸憎水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml中含抗坏血酸O.omg, o(3)0. 01M 2, 6,二氯酚靛酚准确称0. 25g氧化型2, 6,二氯酚靛酚、0. 21g碳酸氢钠溶于250ml热蒸镭水中，稀释至1000ml,充分振摇，装入棕色瓶内，置冰箱内过夜，临用前过滤，用标准Vc标定其浓度。
食物中还原型维生素C的测定-26-二氯酚靛酚滴定法
准确性和可靠性。
03
根据测定结果，评估食物中维生素C的含量是否符合
营养学标准。
误差分析
01
分析实验过程中可能产生的误差来源，如试剂质量、 操作方法、环境条件等。
02
评估不同误差来源对测定结果的影响程度。
03
提出减小误差的措施，提高测定方法的准
01
实验原理
26-二氯酚靛酚滴定法是一种常用的测定食物中还原型维生素C的方法。
滴定方法
取一定量的食物样品，加入适量的 26-二氯酚靛酚溶液，在一定温度下 保持一段时间，使还原型维生素C完 全还原26-二氯酚靛酚。
然后用标准氢氧化钠溶液滴定过量的 26-二氯酚靛酚，根据消耗的氢氧化钠 量计算出还原型维生素C的含量。
计算公式
根据滴定过程中消耗的氢氧化钠量，结合反应原理中的化学方程式，可以计算出食物中还原 型维生素C的含量。
04
结果分析
数据对比
1
将实验组与对照组的数据进行对比，观察维生素 C含量的差异。
2
将实验组在不同时间点的数据进行对比，分析维 生素C含量的变化趋势。
3
将实验组与标准值进行对比，判断测定结果的准 确性。
结果解读
01
根据滴定法测定的数据，计算食物中还原型维生素C
的含量。
02
分析测定结果与标准值之间的差异，判断测定方法的
数据记录
详细记录实验过程中所获得的所有数据，包括样品处理过程中提取液的体积、滴定操作中滴定的体积 等。
数据处理
根据实验数据计算还原型维生素C的含量。通过对比滴定终点时所需的26-二氯酚靛酚溶液体积与标定 时的体积，计算出提取液中还原型维生素C的浓度。再根据提取液的体积和样品质量，计算出食物中 还原型维生素C的含量。
水溶C100中还原型抗坏血酸的测定----26-二氯酚靛酚滴定法ppt课件
1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，坚持15秒不褪色为 终点。记录所用染料Aml。
操作流程
2, 6-二氯酚靛酚染液
无色变为淡红色 滴定 15s内不褪色
A: 规范维生素C溶液(5ml)+草酸〔5ml，1%〕
样品中能够有其他杂质也能复原2, 6-二氯酚靛酚，但复原速度比 复原型维生素C慢，故滴定时以15s内粉红色不褪去为止；
维生素C规范品溶液：短期、棕色瓶、冷藏； 滴定终点的判别
结果分析与讨论
配制抗坏血酸运用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸规范母液于50ml容量 瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。
水溶C100稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中参与5ml柠檬汁稀释 液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，坚持15秒不褪 色为终点。记录结果(Bml)。(两次)
C样〔mg/L〕=
〔B － C〕× T 5 ml
× 10 × 1000
复原型抗坏血酸能复原染料2, 6-二氯酚靛酚，本身氧化为脱氢型，在 酸性溶液中， 2, 6-二氯酚靛酚显示红色，复原后变为无色。
维生素C全部被氧化时，滴下的染料立刻便溶液变成粉红色，当溶液 由无色变为微红色时表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即 为滴定终点。
空白实验：在三角烧瓶中参与10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉 红色，坚持15秒不褪色为终点。记录结果C(ml)。〔两次〕
标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中参与5ml抗坏血酸运用液、5ml 1%草 酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，坚持15秒不褪色为终点。记 录所用染料A(ml)。
维生素C的测定 2,6一二氯靛酚滴定法
维生素C的测定 2,6一二氯靛酚滴定法维生素c的测定-2,6一二氯靛酚滴定法实验六、维生素c的测定――2，6一二氯靛酚滴定法（1）原理还原型抗坏血酸可以还原染料2，6一二氯靛酚。
该染料在酸性溶液中就是粉红色（在中性或碱性溶液中呈圆形蓝色），被还原成后颜色消失；还原型抗坏血酸还原染料后，本身被水解成过氧化氢抗坏血酸。
在没杂质阻碍时，一定量的样品提取液还原成标准染料液的量，与样品中抗坏血酸含量成正比。
（2）试剂①1%草酸溶液（m/v）②2%草酸溶液（m/v）③抗坏血酸标准溶液精确称取20mg抗坏血酸，溶1%草酸溶液，并吸收至100ml，复置冰箱中留存。
用时抽出5ml，放在50ml容量瓶中，用1%草酸溶液定容，硝酸锶0.02mg／ml的标准采用液。
标定吸取标准使用液5ml于三角瓶中，加入6%碘化钾溶液0.5ml、1%淀粉溶液3滴，以0.001mol/l碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。
v1?0.088v排序c＝2式中c――抗坏血酸标准溶液的浓度，mg/ml；v1―一滴定时消耗0.001mol/l碘酸钾标准溶液的体积，ml；v2―一滴定时所挑抗坏血酸的体积，ml；0.088―一1ml0.001mol/l碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量，mg/ml④2，6-二氯靛酚溶液称取2，6-二氯靛酚50mg，溶200ml所含52mg碳酸氢钠的热水中，待冷，置于冰箱中过夜。
次日过滤于250ml棕色容量瓶中，定容，在冰箱中保存。
每星期标定一次。
标定挑5ml未知浓度的抗坏血酸标准溶液，重新加入1%草酸溶液5rnl，容器，用2，6-二氯靛酚溶液电解至溶液呈圆形粉红色，在15s不退色为终点。
c?v1计算：t＝v2式中t―一每毫升染料溶液相等于抗坏血酸的毫克数，mg/ml；c―一抗坏血酸的浓度，mg/ml；v1－一抗坏血酸标准溶液的体积，ml；v2――消耗2，6-二氯靛酚的体积，ml。
⑤0.000167mol／l碘酸钾标准溶液准确称取潮湿的碘酸钾0.3567g，用水吸收至100ml，抽出lml，用水吸收至100ml，此溶液lml相等于抗坏血酸0.088mg。
维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2, 6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C乂称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2, 6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈 红色。
抗坏血酸具有强还原性, 能使2, 6-二氯酚靛酚还原褪 色，其反应如图：当用2, 6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时， 滴下的2, 6-二氯酚靛酚被还原 成无色；当溶液中的抗坏血酸 全部被氧化成脱氢抗坏血酸 时，滴入的2, 6-一.氯酚靛酚立抗坏血酸 （蓝色） Cl o HO —CH CH 2O H CF 2.6•二氮（•红色）HO —CHO 一CIH —C脫氢抗坏血酸 还原型2,&二氨酚靛蜀（无色）即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1(实验材料：多种蔬果(西红柿、尖椒、绿豆芽等)2(主要仪器：(1)天平(2)研钵1(3)容量瓶(50mL) (7)漏斗(4)刻度吸管(5mL, 10mL) (8)脱脂纱布(9)滤纸(5)锥形瓶(lOOmL)(6)微量滴定管(3mL)3(试剂:(1)2, HC1)标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黃色则不能用)(225mg,溶于25ml 4,HC1中，移入50ml容量瓶中，用蒸憎水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml中含抗坏血酸O.omg, o(3)0. 01M 2, 6,二氯酚靛酚准确称0. 25g氧化型2, 6,二氯酚靛酚、0. 21g碳酸氢钠溶于250ml热蒸镭水中，稀释至1000ml,充分振摇，装入棕色瓶内，置冰箱内过夜，临用前过滤，用标准Vc标定其浓度。
食物中还原型维生素C的测定26二氯酚靛酚滴定法
随着人们对健康饮食的关注度不断提高，对食物中维生素C含量的测定需求也日益增长。因此，建立一种准确、 可靠的测定方法对于保障食品安全和满足消费者需求具有重要意义。
维生素C的重要性
抗氧化作用
促进胶原蛋白合成
维生素C是一种强大的抗氧化剂，能 够清除体内的自由基，减少氧化应激 反应，有助于预防慢性疾病和衰老。
食物中还原型维生素c的测定 26二氯酚靛酚滴定法
• 引言 • 2，6-二氯酚靛酚滴定法简介 • 实验材料和设备 • 实验过程 • 结果与讨论 • 结论 • 参考文献
01
引言
目的和背景
目的
维生素C是人体必需的维生素之一，具有抗氧化、增强免疫力等多种生理功能。测定食物中还原型维生素C的含量 对于了解食品的营养价值、指导膳食搭配以及评估食品加工过程中维生素C的损失情况具有重要意义。
根据滴定数据和已知的滴定常数，计算出 食物中还原型维生素C的含量。
注意事项
样品处理时需注意去除杂质和干扰物质，以免影响测定结果的准确性。
滴定时需注意控制滴定速度和终点判断的准确性，避免误差的产生。
2，6-二氯酚靛酚滴定法适用于大多数食物中还原型维生素C的测定，但对于某些特 殊食物或含有大量干扰物质的食物，可能需要采用其他测定方法。
结果报告
将实验结果整理成报告形式，包括实验目的、实验原理、实验步骤、 实验数据和结论等部分。
05
结果与讨论
结果分析
准确度
01
通过对比已知浓度的标准品，测定结果的相对误差在可接受范
围内，表明该方法具有较高的准确度。
精密度
02
对同一份样品进行多次重复测定，测定结果的相对标准偏差较
小，表明该方法具有较高的精密度。
维生素C的测定(2-6-二氯酚靛酚滴定法
实验一维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法一、测定原理2,6-二氯酚靛酚滴定法用于测定还原型抗坏血酸。
抗坏血酸分子中存在烯醇式结构（HO —C═C—OH），因而具有很强的还原性，还原型抗坏血酸能还原2,6-二氯酚靛酚染料。
2,6—二氯酚靛酚染料在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。
因此，当用2,6—二氯酚靛酚染料滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，被还原后红色消失成为无色的衍生物，可作为维生素C含量测定的滴定剂和指示剂。
还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化为脱氢抗坏血酸。
当抗坏血酸全部被氧化时，滴下的2,6—二氯酚靛酚溶液则呈红色。
在测定过程中当溶液从无色转变成微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为滴定终点。
根据滴定消耗染料标准溶液的体积，可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。
在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量、与样品中所含抗坏血酸的量成正比。
反应式如下：二、实验仪器与试剂1.仪器组织捣碎机；水果刀；托盘天平；精密天平；称量纸；卷纸；台式离心机；电炉；吸耳球；玻璃棒；蒸馏水，蒸馏水洗瓶；记号笔、标签纸、定性滤纸；20cm镊子；5ml、10ml移液管、(微量)酸式滴定管、漏斗；漏斗架；50ml、250ml、 500ml 、1000ml烧杯；10ml 、500 ml、1000 ml量筒；100ml具塞量筒(或普通量筒)；100mL、250mL棕色容量瓶；50ml或100ml三角烧瓶。
2.原料及试剂本实验材料是，用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯度。
(1)2%草酸溶液：草酸20g溶于700ml蒸馏水中，稀释至1000ml。
(2)1%草酸溶液：取上述2%草酸溶液450ml，稀释至900ml。
(3)抗坏血酸标准溶液：称取抗坏血酸20mg，用适量1%草酸溶液溶解后，移入100mL棕色容量瓶中，并以1%草酸溶液定容，振摇混匀，备用。
(4)0.02% 2,6-二氯酚靛酚溶液：称取碳酸氢钠52.2mg，溶解在200mL沸水中。
维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
2,6-二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C一、目的和要求掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。
二、原理维生素C (Vc)又称抗坏血酸(ascorbic acid)。
最初于1928年从牛的肾上腺皮质中提取出结晶物，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效。
维生素C能够还原染料2,6-二氯酚靛酚，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉红色，被还原后成无色。
当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有Vc的酸性溶液时，在Vc未全部氧化前，滴下的染料立即被还原成无色；一旦溶淀中的Vc全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液显示粉红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的Vc刚刚被氧化完全。
因此，从滴定时2,6一二氯酚靛酚标准液的消耗量，可以计算出被检物质中Vc的含量。
三、试剂和器材（一）试剂2%草酸溶液：2g草酸溶于100ml蒸馏水中1%草酸溶液：1g草酸溶于100ml蒸馏水中标准抗坏血酸溶液（0.1mg/mL）: 准确称取50mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至500mL，贮于棕色瓶中，冷藏。
最好临用前配制。
存，冷藏(最好临用时配置)；5. 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液，棕色瓶贮存，冷藏(4℃下可保存一周)，临用时以标准抗坏血酸液标定。
0.1%2.6―二氯靛酚溶液称取2.6―二氯靛酚钠盐500mg，溶于300ml热水中，冷后加水稀释至500ml，过滤后盛于棕色药瓶内，保存在冰箱中。
（二）器材1. 新鲜蔬菜(辣椒、青菜、西红柿等)、新鲜水果(橘子、柑子、橙、苹果等)；2. 吸管1.0ml、10.0ml；3. 容量瓶25ml, 100ml；4. 微量滴定管5ml；5. 天平；6. 研钵；7. 漏斗Φ8cm.。
四、操作步骤1. 样液制备适量称取青椒一份10g，分别加少量2%草酸(1%草酸因浓度太低而不能抑制抗坏血酸氧化酶作用)用研钵磨成浆，抽滤（或四层纱布过滤，纱布再用少量2%草酸洗几次，合并滤液），滤液转入50ml容量瓶后用2%草酸定容，若不易过滤研磨后以2%草酸洗涤，离心(4000r/min，10min)2—3次，合并上清液于50mL 容量瓶中，定容至刻度。
实验七-维生素C的定量测定-2-6-二氯酚靛酚法ppt课件
2,6－二氯靛酚(2,6－二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取 碳酸氢钠52mg溶解在200ml 热蒸馏水中,然后称取2,6 －二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定 容至 250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。每次使用 前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。
本实验结果为:0.088 mg/ml
1、为了测得准确的维生素C浓度，实验过 程中应注意哪些操作步骤？为什么？
（1）在操作过程中某些步骤一定要快，避免Vc的氧化，因 为Vc具有还原性，还要向样品中加入草酸溶液，保护Vc；
(2)对于Vc标准溶液要现用现配，尽量精确，避免Vc氧化， 避免因为标准溶液的误差造成的误差； (3) 整个操作过程 要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超 过2min。滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样 品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提 取液稀释度。
用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸 性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色, 当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则 表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗 坏血酸的含量。
当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液 呈淡红色，即为终点。
VC 还原型
脱氢VC 氧化型
OC
C OH
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ定
吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中,加入10ml浸提剂,摇匀,用 2 ,6－二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时,另取 10ml浸提剂做空白试验。
滴定度(mg/ml)＝cv/V1－V2 s─每毫升2,6－二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数; C—抗坏血酸的浓度,mg/ml; V—吸取抗坏血酸的体积, ml; V1—滴定抗坏血酸溶液所用2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml; V2—滴定空白所用2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml。 白陶土(或称高岭土),对维生素C无吸附性。
实验三 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)ppt课件
（2）样液滴定：准确吸取样品液三份，每份10.0ml分别放 入三个50ml 锥形瓶中，同标准液液、标准抗坏血酸 溶液为何要在棕色瓶冰箱内保存？ 2、为何整个滴定过程不要超过2分钟？ 3、该法测定抗坏血酸有何不足？
维生素C是无毒的营养素，但每天摄入量超过 8g会有害，症状包括：恶心，腹部痉挛，腹泻， 铁的过量吸收，红血球破坏，骨骼矿物质代谢增 强，防碍抗凝剂的治疗，血浆胆固醇升高，并可 能对大剂量维生素Ｃ形成依赖。
实验原理
Vc具有很强的还原性。它可分为还原型和 脱氢型。金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以 催化Vc氧化为脱氢型。根据它具有的还原性质 可测定其含量。
说明： １、滴定速度应迅速，一般不超过２分钟； ２、如样品中Vc含量过高，则取1ml样液加9ml草
酸然后进行滴定,最后计算时W为1ml样液中所含样品的 克数。
计算
V×T/W×100=100g样品中含抗坏血酸mg数；
V=滴定时所用去的染料ml数； T=1ml染料能氧化抗坏血酸mg数； W=10ml样液相当于含样品的克数。
实验三 蔬菜水果中维生素C含量测定 （2，6-二氯酚靛酚滴定法）
实验目的
1）学习和掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测 定植物材料中抗坏血酸含量的原理与方法。
2）学习和掌握滴定法的基本操作过程； 3）了解不同植物中维生素C的含量。
功效： 1、胶原是人体组织细胞、牙龈、血管等发育修复的 重要物质，羟脯氨酸占胶原蛋白的12%。维生素C参与 体内羟化反应,是脯氨酸及赖氨酸羟化酶的辅因子,促 进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合。 维生素C缺乏则导致胶原蛋白的合成障碍—坏血病。 2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体 寿命。 3、改善铁、钙和叶酸的利用。 4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血 管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血。 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
二、原理及步骤
1、实验原理
该染料在酸性溶液中 呈现红色，被还原后 为无色。在没有杂质 干扰时，一定量的食 物溶液还原标准染料 的量与其中的抗坏血酸 成正比。
2、实验步骤
用2, 6-二氯酚靛酚染料滴定标准维生素C溶液 （计算1ml二氯酚靛酚相当于多少mg抗坏血酸）
用2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原 型维生素C的浓度。
食物中还原型维生素C的测定 ----2, 6-二氯酚靛酚滴定法
一、目的
了解营养评价中实验室检查的意义 了解食物中还原型VitC测定方法
营养调查
目的: 了解不同生理状况、生活环境、劳动条件
下各种人群营养是否合理，针对具体情况对个 人（包括各种疾病患者）、家庭和集体按照合 理营养要求，提出改善措施以确保人群健康。
操作步骤
配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准液于50ml容 量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。（1mg/50ml）
空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定 至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次）
标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪 色为终点。记录所用染料Aml (两次)。
5 C样
=
1ml染料
B-C
A: 滴定标准维生素C溶液(5ml)+草酸（5ml，1%）的染料量
C: 滴定空白组为草酸（10ml，1%）的染料量
B: 滴定稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%）的染料量
四、注意事项
测定过程要迅速，因还原型维生素C易被氧化，一般 不超过2min;
样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚，但 还原速度比还原型维生素C慢，故滴定时以15s内粉红 色不褪去为止；
配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容 量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。
空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉 红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次）
标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草 酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。 记录所用染料Aml。1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg，T=0.1/（A－ C）。（两次）
果汁（水溶VitC100）稀释液制备：市售果汁饮料冰箱待用。使用前 用草酸溶液稀释N倍（已制备）。
果汁稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml果汁稀释液、 5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不 褪色为终点。记录结果B ml。（两次）
操作流程图
2, 6-二氯酚靛酚染液 无色变为淡红色 滴定（两次）
果汁稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml果汁稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为 终点。记录结果Bml。VitC=T×(B-C) ×N/5（两次）
维生素C标准品粉末：棕色干燥皿内保存；
维生素C标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏；
2热, 6溶-二液氯中酚，靛冷酚却溶后液4℃：过50夜m，g溶过解滤于后N用aH蒸C馏O水3(0定.2容g/ml) 250ml，然后短期、棕色瓶、冷藏；
所用到的试剂
0.1%抗坏血酸标准储备液（1mg/ml） 抗坏血酸标准应用液（1mg/50ml） 1%的草酸溶液 0.02%的2, 6-二氯酚靛酚溶液 N倍稀释的果汁样品（N=20)
各种蔬菜水果中的vic的含量
No.1 樱桃 50g 12粒 500mg No.2 番石榴 80g 1 个 216mg No.3 红椒 80g 1/3个 136mg No.4 黄椒 80g 1/3个 120mg No.5 柿子 150g 1 个 105mg
No.6 青花菜 60g 1/4株 96mg No.7 草莓 100g 6粒 80mg No.8 橘子 130g 1 个 78mg No.9 芥蓝 60g 1/3株 72mg No.10 猕猴桃 100g 1个 68mg
C: 空白组为草酸（10ml，1%） A: 标准维生素C溶液(5ml)+草酸（5ml，1%） B: 稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%）
三、结果计算
（1）1ml染料相当于还原型维生素C的mg
（2）样品中原型维生素C浓度
C样（mg/L）=
（B － C）× T 5 ml来自× N× 1000T mg
和孕晚期妇女每天维生素C摄入量标准应为130毫克。哺乳期妇女每 天维生素C摄入量标准也应为130毫克。
—— 《中国居民膳食指南》
五、评价与讨论
该水溶性C100中VitC含量是否符合标准？若 含量超过标准，又该如何解释？
该如何建议不同人群每天这种饮料摄入量，过 多摄入会有影响吗？
针对VitC缺乏或不足的病人，可以采取哪些治 疗措施？
人体每天维生素C摄入标准
0岁婴儿宝宝每天维生素C摄入量为40毫克。 半岁婴儿每天维生素C摄入量为50毫克。 1岁儿童每天维生素C摄入量为60毫克。 4岁以上儿童每天维生素C摄入量为70毫克。 7岁以上儿童每天维生素C摄入量为80毫克。 11岁以上儿童每天维生素C摄入量为90毫克。 18岁以上成年人每天维生素C摄入量为100毫克。 孕妇人群，在孕早期每天维生素C摄入量标准应为100毫克，孕中期