临床检验实验报告 第十三周

年级：2009 专业：医学检验班级：1班姓名：赵富海学号：2009221792 脑脊液理学检查、显微镜检查、蛋白质定性检查&浆膜腔积液粘蛋白定性试验【实验目的】

1.掌握脑脊液理学检查的方法。

2.掌握脑脊液显微镜检查，包括细胞总数计数、白细胞计数和白细胞分类计数的方法。

3.掌握脑脊液蛋白质定性潘迪试验的方法

4.掌握浆膜腔积液蛋白定性（李凡他试验）的方法

【实验原理】

1.脑脊液中球蛋白与苯酚结合，形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀，浑浊的程度与球蛋白含量相关。

2. 浆膜腔积液漏出液中，只有微量的粘蛋白，李凡他试验为阴性。当炎症时，浆膜腔上皮细胞被刺激，分泌黏蛋白增多。黏蛋白是一种酸性糖蛋白，等电点pH为3~5，因此，可在稀乙酸中出现白色沉淀。

【实验步骤】

（一）脑脊液理学检查

1.观察颜色：肉眼观察脑脊液的颜色

2.观察透明度：在黑色背景下肉眼观察脑脊液透明度变化

3.观察凝块或薄膜：轻轻倾斜试管，肉眼仔细观察有无凝块或薄膜。

（二）脑脊液显微镜检查

1．细胞总数计数：

直接计数法：充池——计数——计算

2．白细胞计数：

直接计数法：除去红细胞——充池——计数——计算

3．白细胞分类计数：

直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜转换为高倍镜，根据细胞形态和细胞核形态进行直接分类，分别计数单个核细胞和多个核细胞，共计100个，并以百分率表示。如白细胞不足100个，应直接写出单个核细胞和多个核细胞的具体个数。

（三）脑脊液蛋白质定性检查

1.加试剂：取试剂1ml于小试管中

2.加标本：用尖滴管垂直滴加脑脊液标本1~2滴。

3.观察结果：在黑暗背景下立即用肉眼观察结果。

4.判断结果：

（四）浆膜腔积液蛋白定性（李凡他试验）

1.加试剂：在100ml量筒加入2~3滴冰乙酸，再加100ml蒸馏水，充分混匀（pH 3~5），静置数分钟。

2.加标本：将浆膜腔积液靠近量筒液面垂直轻轻滴下，滴加量1~3滴。

3.观察结果：立即在黑色背景下观察有无白色云雾状沉淀生成及其下降程度。

4.判断结果

【实验结果】

（一）脑脊液理学检查

乳白色、微混、无凝块

（二）脑脊液显微镜检查

1．细胞总数计数：

直接计数法：

细胞总数=（76+77+70+78+73+73+69+75+74+75）/2×106/L= 370×106/L

2．白细胞计数：

直接计数法：

白细胞数=（37+41+43+46+44+40+39+38+40+42）/2×106/L=200×106/L

3．白细胞分类计数：

单个核细胞：95个；多个核细胞5个

单个核细胞：95%

多个核细胞：5%

（三）脑脊液蛋白质定性检查

呈微白色雾状，对光不易看见，黑色背景下才能见到

（四）浆膜腔积液蛋白定性（李凡他试验）

加入标本即出现白雾状

【实验讨论】

1.标本收集后要立即送检，一般不能超过1h。将CSF非别收集于3个无菌试管中，每管1~2ml。第一管做细菌培养，必须留于无菌小试管中；第二管做生化或免疫学检查；第三管做一般性状检查和显微镜检查。

2.若标本陈旧、细胞变形时，白细胞直接分类法计数误差大，应改用涂片染色分类法分类计数。陈旧性标本不宜应用血液分析仪计数法。病理性、陈旧性标本中的组织和细胞碎片以及细胞变形等可影响细胞分类，结果重复性、可靠性欠佳；蛋白质含量高，尤其有凝块的脑脊液标本容易使仪器堵孔，故不宜应用。

3.观察时间和方法：

①怀疑为结核性脑膜炎时，标本应在2~4℃环境中静置12~14h，再观察脑脊液表面有无薄膜形成。

②对颜色和透明度改变不明显的标本，应在灯光下衬以白色或黑色背景仔细观察。

4.充池时须充分混匀标本，避免断续充池在计数板中产生气泡、充液不足、液体外溢、充液后移动盖玻片等，均会使细胞分布不均匀，影响结果准确性。

5.试验中所用的试管应选择小口径的试管，内径一般为12mm左右，加入试剂后立即观察，所用的试管和滴管必须洁净，否则易出现假阳性。

6.浆膜强积液蛋白质定性实验结果判断：

①加入标本后立即在黑色背景下仔细观察结果。如浑浊明显，下沉缓慢，中途消失为阴性。

②标本中球蛋白含量增高时试验可呈假阳性，必要时可进行鉴别试验，方法是先将标本滴入未加蒸馏水中观察，如有白色云雾状沉淀，此乃球蛋白不溶于水所致。

××医院报告单

姓名：张三性别：男年龄：22 科室：神经内科标本号：12345 临床诊断：×××送检标本：脑脊液送检目的：脑脊液常规

送检医生：李四送检时间：2012年12月5日

项目结果

颜色乳白色

透明度微混

细胞总数370 ×106/L

白细胞数200 ×106/L

单个核细胞95 %

多个核细胞 5 %

蛋白（潘氏）±

检验医师：王二检验时间：2012年12月5日

实验室声明：本报告仅对该样本负责！

××医院报告单

姓名：张三性别：男年龄：22 科室：神经内科标本号：12345 临床诊断：×××送检标本：浆膜腔积液送检目的：黏蛋白定性送检医生：李四送检时间：2012年12月5日

项目结果

蛋白（李凡他）阳性

检验医师：王二检验时间：2012年12月5日

实验室声明：本报告仅对该样本负责！