培养基母液的配置
MS培养基母液的配制与保存
仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签；3、试剂：95%酒精，0.1-1N NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。
方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。
优点：（1）保证各物质成分的准确性。
（2）便于配置时快速移取。
（3）便于低温保藏。
1、MS大量元素母液（10X）称10升量溶解在1升蒸馏水中。
配1升培养基取母液100ml。
化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml（即含0．25 mg的量）加入到母液中。
3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。
配1升培养基取母液10ml。
9.4.植物培养基母液的配置
一、植物组织培养中的培养基
培养基：培养基是植物细 胞、组织和器官离体培养所需 的营养基质，其中含有植物细 胞生长分化所必需的各种营养 成分和生长调节物质。
固体培养
液体培养
培
水
养
基
无机盐
成 分
有机物
植物激素
培养体支持材料
辅助性物质
二、培养基母液的配置
（一） 母液配置的必要性 将配方中的药品一次称量供一段时间使用，
化学式
KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuLeabharlann O4.5H2O CoCL2.6H2O
用量（mg/l)
0.83 6.2 22.3 8.6 0.25 0.025 0.025
1.减少工作量 2.减少误差 3.便于母液的低温贮藏。
（二）大量元素母液的配置
（三）母液配制流程图
确定培养基
称量
贴标签 保存于冰箱
母液分装
溶解 定容
母液分装、贴标签
母液保存
保存
在冰箱内 低温保存
思考题
如何配置培养基母液？
Thank You!
即配成一些浓缩液，用时稀释，这种浓缩液就是浓 缩贮备液（简称母液）。
每种培养基往往需要十多种化合物，配制 起来很不方便，也很难达到准确和精确，特别 是微量元素和植物生长调节物质用量极少，很 难准确秤量。
微量元素（以MS培养基为例）
序号 化学名称
1
碘化钾
2
硼酸
3
硫酸锰
4
硫酸锌
5
钼酸钠
6
硫酸铜
7
氯化钾
培养基母液的制备
配制2升MS+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，阐述母液配制，培养基配制的全过程（1）母液配制：1确定制备的培养基为MS+琼脂0.6%+蔗糖3%为大量元素培养基，应注意溶解和添加顺序，防止沉淀。
2确定各母液的浓缩倍数，大量母液一般为浓缩10倍有机母液浓缩100倍，即所需配制的大量母液为200ml 微量元素20ml，铁盐20ml，有机元素20ml。
3根据公式：药品称取量（mg）=配方用量x浓缩倍数x母液体积计算出各药品的用量，即琼脂12g、蔗糖60g4用普通天平（1/100）称量药品，称号后的药品要分别放置。
5将药品分别放入烧杯中，分别溶解，经充分溶解后再混匀。
6将混合后的溶液移入容量瓶中，进行定容。
7混合均匀后，将母液转入试剂瓶。
8在试剂瓶上贴上标签，注明母液名称，浓缩和配制日期。
9放入冰箱中低温（2~4度）保存。
（2）培养基的配制：1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别为大量：200ml 微量20ml 铁盐20ml 有机20ml 琼脂12g 蔗糖60g。
2在容器内装相当于1/3左右的纯水，加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，最后加入称量的蔗糖并搅拌均匀。
3加水定容至2L，再搅拌均匀。
4调整培养基的pH5将配制好的培养基尽快分装。
6将分装后的培养基进行封口7用高压灭菌锅进行灭菌。
现在需要你配制2升MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，已知大量元素母液10倍，微量元素母液100倍，铁盐50倍，有机物母液50倍，6-BA母液1mg/ml，NAA母液0.1mg/ml，请你阐述培养基的配制及灭菌的全部过程。
1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别：为大量元素母液200ml，微量元素20ml，有机物40ml，6-BA4ml，NAA2ml，琼脂12g，60g.2在容器内装相当于1/3左右的纯水，在依次加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，6-BA，NAA，蔗糖。
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、 MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、 ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、 CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘氨酸。
四、实验步骤1、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备注意：(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
(2)CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。
培养基母液的配制
培养基母液的配制植物在自然状态下生长时，具有完整的营养体，是属于自养型的，很多营养物质可以自制，对外界营养条件的要求比较简单,而在离体条件下生长的植物器官、组织和整体植物不同，属于异养型,要求的营养条件十分复杂,因此在人工合成养基的组成和制备上必须全面考虑，满足供应。
一、实验目的配制培养基母液是植物组织培养的基本技术。
当需要连续和大量配制培养基时,如果每次都称量药品、溶解并定容，工作将十分繁琐，因此需要将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成适当的浓缩液。
要求拿握植物组织培养培养基母液的配制方法。
二、实验材料仪器冰箱、电子天平(0.0001g)容量瓶: 1000 ml, 500ml、250 ml、100 ml、25 ml广口储液瓶: 500 ml、250ml、50 ml、25 ml烧杯: 1000ml、500ml 、250m、100ml 、50 ml.数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺、标签纸、胶水、记号笔药品50%酒精、95%酒精、1N盐酸(1N盐酸(HC1)的配制:取浓盐酸825ml,加入蒸馏水1000ml,即为IN的HCI)、1 N Na0H(1N氢氧化钠(或氢氧化钾)的配制:称40 gNa0H (或氢氧化钾57.1g)加入蒸馏水100ml ,即为1N的Na0H( IN的K0H)几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等药品、蒸馏水三、实验步骤按照培养基配方，把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素分类，每一类中各种药品分别称量。
如Ms培养基各种母液的配制步骤如下:1、大量元素母液:包括用量较大的几种化合物，按表中排列顺序，将每种药品的用量扩大10倍，分别称取，分别溶解,然后按照顺序混合在一-起。
如钙盐等易发生沉淀的药品不能混合，应单位定容。
最后加上蒸馏水，定容至1升或500毫升。
在定容时注意用蒸馏水洗净烧杯和玻璃棒以减少误差。
定容后的溶液为大量元素母液，配制培养基时，每配1 L培养基需吸取该母液100 m或502、微量元素母液:因用量少,为了称量精确和方便,常配成100倍或100倍的母液,即每种药品扩大100倍或者1000倍。
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘氨酸。
四、实验步骤1、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备序号药品名称培养基浓度（mg/L）扩大10称量(mg)1NH4NO31650165002KNO31900190003CaCl2·2H2O44044004MgSO4·7H2O37037005KH2PO41701700注意：(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
培养基母液配制
培养基母液配制培养基配制通常先根据各组分性质，配制成较浓的母液（母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍），贮存在冰箱中备用，以后配制培养基时根据用量量取。
由于培养基成分较多，如果每配制一次即进行多次称量（不少成分用量较微），不仅会造成较大的误差，而且会增加工作量，因而配制母液可使培养基配制方便准确。
配制大量成分母液通常为原培养基浓度的20、50或100倍，倍数不宜过高。
MS培养基母液及培养基配方法参考表2。
大量成分母液经常将CaCl2·2H2O单独配制保存，以免长期贮存发生沉淀。
若将全部大量成分配在一起时，为防止在混合时发生沉淀，须在各药品充分溶解后，按表1.2中化合物出现顺序混合，氯化钙最后加入，以免与硫酸镁形成沉淀.大量成分称量溶解后，在1000 ml容量瓶中定容，然后移入磨口瓶中，贴上标签，置于普通冰箱（4℃）贮存。
微量元素母液配制时，由于培养基中微量元素用量甚微，浓度为0.l~0.0001mg/l，所以母液浓度宜为原培养基配方中用量的100倍。
一般将微量元素分别称量溶解，定容在1000 ml容量瓶中后贮存在一个细口瓶中，但也有将KI分别配制，单独贮存在棕色瓶中。
配好后，贴上标签，贮存于4℃冰箱。
培养基中的铁盐母液一般单独配制。
目前常用的铁盐为硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二纳的螯合物。
称取Na2-EDTA 3.73 g，FeSO4 ·2H2O 2.78 g，分别溶解（可加热），然后混合定溶于1000 ml容量瓶中。
转入细口瓶，贴上标签，4℃冰箱中保存。
氨基酸和维生素等有机成分母液可配制时，母液浓度通常为原培养基配方的50倍（或100）。
常用氨基酸和维生素为水溶性物质，可用蒸馏水溶解，但叶酸要先用少量稀碱或稀氨水溶解，然后用重蒸馏水定容。
配制好后，转入细口瓶，贴上标签，-20℃（或4℃）冰箱中保存。
植物生长调节物质如生长素类和细胞分裂素类可以根据需要，灵活设计其浓度，一般为 0.01、0.1、0.2、0.5或1 mg/l。
培养基母液的配制
主题二 培养基及其制备
任务二培养基母液配制
知识回顾
水
N、P、K 大量元素
活性物质 （植物激素）
培养基
无机盐
Ca、Mg、S
微量元素 糖 维生素 Fe、Mn、Zn 、B 、Cu 、Mo
支持物质
有机物质
肌醇 氨基酸 有机添加物
任务二培养基母液配制中浓度问题 及相关计算
知识回顾
相当于土壤，提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质 与土壤相比较，培养基缓冲性能很小，所以要求培养基各成分浓度精确
母液
母液1
成分
NH4NO3 KNO3 CaCl.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4.
浓缩倍数
10
浓度g/L
16.5 19 4.4 3.7 1.7
配制母液 毫升数
各成分的质量（g）
1000
母液2
KI H3BO4 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2.MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O
表2-1（P20）大量元素20倍浓缩液NH4NO3 浓度为 33000 mg/L表示1L培养基中质量为33000mg，即33g. CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg，即 10－5 g。
什么是培养基母液？
母液：即贮备液，指培养基配制时欲配制液的 浓缩液，一般母液配成比所需浓度放大10-100 倍。 这样不但可以保证各物质成分称量的精准性及 配制时的快速移取，而且浓缩液体积小便于低 温保藏。 母液配制时比所需浓度放大X倍，在配制培养 基时按配制培养基的体积（V升）的V/X吸取 母液即可。
0.86
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。
药品：NH4NO、KNO3CaCI2 •2H2O MgS04・ 7H2Q KH2PO、KI、H3BO3MnSO44H2O ZnSO4•7H2ONa2MoO4?H2O CuSO45H2OCoCI2 •6H2OFeSO4 7H2O Na2-EDTA・ 2H2O肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇（维生素B6）、盐酸硫胺素（维生素B1）、甘氨酸。
四、实验步骤1 、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。
后用蒸馏水定容到1000ml的容量瓶中,即为10倍的大量元素母液。
到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。
配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。
表1 MS培养基大量元素母液制备注意:(1)配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+ SO42-、Mg 2+和H2PO4-等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。
为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。
特别应将Ca2+、SO42—、Mg2十和H2PO4 一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。
(2)CaCI2 • 2H2O 要在最后单独加入，在溶解 CaCI2 • 2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的 CO2以防沉淀。
另外，CaCI2 • 2H2O 放 入沸水中易沸腾，操作时要防止其溢出。
2、微量元素母液的配制MS 培养基的微量元素无机盐由7种化合物(除Fe )组成。
培养基母液配制
培养基母液的配制（一）激素母液由于多数生长调节物质难溶于水，因此配法各不相同，激素母液可以在2~4℃冰箱中保存。
在配制药品前，应准备好一定容积的小烧杯、玻璃棒，用纯净水冲洗干净方可使用：1、IAA、IBA、GA3、ZT可先用少量95%酒精溶解，再加水定容，摇匀后贮于试剂瓶中，贴上标签。
2、2,4-D、KT、可用少量10%的Noah溶解，再加水定容。
3、6-BA可用少量1mol/LHCl溶解后，再加水定容。
4、NAA可溶于热水或少量95%酒精中，再加水定容至一定体积。
5、1mg/ml的2.4-D的配制：称取0.1g2,4-D，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
6、1mg/ml的6BA的配制：称取0.1g6-BA，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
7、1mg/ml的NAA的配制：称取0.1gNAA，用少量95%酒精助溶，然后定容到100ml容量瓶中。
8、1mol/L的HCl的配制：量取83.3ml盐酸加水稀释定容至1L。
（一般、组培室用量少，配制500ml即可，即：称取盐酸41.65ml 稀释定容至500ml。
配制盐酸时。
需要带口罩、戴手套。
）9、10%的NaOH的配制：称取10gNaOH，加少量纯净水溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
10、HgCl2 的配制：称量1g的HgCl2，加热水后进行溶解定容至1L。
二、培养基配制配错培养基造成的危害比组培技术中其他任何失误都大。
因此，配制培养基和称取其他成分必须绝对小心。
为了降低配错培养基的风险，最好准备一张纸，详细地写出配制培养基过程中所需的成分和配置步骤。
每配完一种成分或配完一种母液，划掉相应的记录。
1、一般而言，分化配方的配制：除萱草琼脂为5.5g/L外，其它植物为琼脂5g/L。
白糖为30g/L。
母液粉为4.74g/L。
用自己配制的母液配培养基时，大量母液（1号）50ml/L，微量（2~5号为5 ml/L）。
二植物组织培养培养基母液的配制
在配制吲哚乙酸（IAA）母液时，先用几滴95%酒精 溶解完全后，加蒸馏水定容，否则会发生沉淀。而配制6BA母液时，要用少量的1 mol/L NaOH溶解；而配制2,4-D 时，可先用少量的95%酒精溶解。
各种母液配制好后，要贴好标签，注明 母液的名称，配制1 L培养基需要的吸取量、 母液配制的日期，然后放入冰箱中储存。 一般无机物质的母液在冰箱中可保存半年 以上，有机物质的母液保存时间在半年以 内，但若发现有沉淀或霉变，应立即重新 配制。
实验二
植物组织培养培养基 母液的配制
简 介
植物在自然状态下生长时，具有完整的营养 体，是属于自养型的，很多营养物质可以 自制，对外界营养条件的要求比较简单， 而在离体条件下生长的植物器官、组织和 整体植物不同，属于异养型，要求的营养 条件十分复杂，因此在人工合成培养基的 组成和制备上必须全面考虑，满足供应。
2、如药品所带结晶水不同，应进行换算。
3、称量必需准确，一般用1-4/万的分析天平称量，特别如微 量元素及激素等，但有些药品不影响基本反应过程的如 蔗糖、琼脂等可用1/100粗天平称取。 4、所用的水必须纯净，一般用全玻璃蒸馏器二次蒸馏的重 蒸水或者达到一定标准的无离子水。
5、制备好的浓缩液应保存于冰箱中，储备液配置量要依据 使用频度而定，一般所制备的储备液最好于1-2个月内使 用完，不宜过长时间保存。
培养基母液配制
培养基母液配制培养基配制通常先根据各组分性质, 配制成较浓的母液（母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍）, 贮存在冰箱中备用, 以后配制培养基时根据用量量取。
由于培养基成分较多, 如果每配制一次即进行多次称量（不少成分用量较微）, 不仅会造成较大的误差, 而且会增加工作量, 因而配制母液可使培养基配制方便准确。
配制大量成分母液通常为原培养基浓度的20、50或100倍, 倍数不宜过高。
MS培养基母液及培养基配方法参考表2。
大量成分母液经常将CaCl2·2H2O单独配制保存, 以免长期贮存发生沉淀。
若将全部大量成分配在一起时, 为防止在混合时发生沉淀, 须在各药品充分溶解后, 按表中化合物出现顺序混合, 氯化钙最后加入, 以免与硫酸镁形成沉淀.大量成分称量溶解后, 在1000 ml容量瓶中定容, 然后移入磨口瓶中, 贴上标签, 置于普通冰箱（4℃）贮存。
微量元素母液配制时, 由于培养基中微量元素用量甚微, 浓度为~l, 所以母液浓度宜为原培养基配方中用量的100倍。
一般将微量元素分别称量溶解, 定容在1000 ml容量瓶中后贮存在一个细口瓶中, 但也有将KI分别配制, 单独贮存在棕色瓶中。
配好后, 贴上标签, 贮存于4℃冰箱。
培养基中的铁盐母液一般单独配制。
目前常用的铁盐为硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二纳的螯合物。
称取Na2-EDTA g, FeSO4 ·2H2O g, 分别溶解（可加热）, 然后混合定溶于1000 ml容量瓶中。
转入细口瓶, 贴上标签, 4℃冰箱中保存。
氨基酸和维生素等有机成分母液可配制时, 母液浓度通常为原培养基配方的50倍（或100）。
常用氨基酸和维生素为水溶性物质, 可用蒸馏水溶解, 但叶酸要先用少量稀碱或稀氨水溶解, 然后用重蒸馏水定容。
配制好后, 转入细口瓶, 贴上标签, -20℃（或4℃）冰箱中保存。
植物生长调节物质如生长素类和细胞分裂素类可以根据需要, 灵活设计其浓度, 一般为、、、或1 mg/l。
培养基母液的配制方法
培养基母液的配制方法培养基是用于细胞培养的基础营养物质，它为细胞提供适当的营养和环境条件，以促进细胞的生长和繁殖。
培养基母液是制备培养基的初始液体，下面是一种常见的培养基母液的配制方法。
配制培养基母液的材料和设备：1.高质量的培养基成分：如氨基酸、维生素、无机盐、糖、有机酸等。
2.纯净的水：可以使用去离子水或高纯水。
3.称量器具：称量天平、量筒等。
4.搅拌装置：磁力搅拌器或振荡器等。
5.固液分离装置：滤纸、滤膜或离心管等。
6.灭菌工具：如高压灭菌锅、紫外线灭菌仪等。
具体步骤如下：步骤1：准备工作-清洗和消毒工作台和必要的玻璃器皿，如量筒、烧杯、磁力搅拌器等。
-检查所需材料和设备是否完整，以防止操作过程中的中断。
步骤2：配制培养基1.按照所需培养基配方中各成分的质量比例，用称量天平准确称量各成分。
2.使用量筒或烧杯，加入适量的纯净水。
3.将已称量的培养基成分加入水中。
根据配方要求的顺序，加入各成分并充分搅拌混合。
4.搅拌速度和时间根据配方要求进行调整，使各成分充分溶解并均匀分布。
步骤3：过滤和灭菌1.准备好合适的滤纸或滤膜，并放置在过滤装置中。
可以根据需要使用多次过滤或组合过滤器设备以获得更好的过滤效果。
2.调整过滤装置的设置，使培养基缓慢通过过滤器，以避免气泡的产生。
可以使用真空过滤或重力过滤方法，根据实际情况进行选择。
3.检查过滤结果，确保培养基没有异物或沉淀物。
4.准备好灭菌容器，如离心管或高压灭菌锅。
将过滤后的培养基倒入容器中，并盖好盖子。
5.使用适当的灭菌设备对培养基进行灭菌处理。
可以使用高压灭菌锅、摇床灭菌、紫外线灭菌等方法。
步骤4：保存和使用1.灭菌后的培养基母液应存放在适当的条件下，如低温、阴凉和无光照的环境中，以保持其质量。
2.在使用前，应对培养基进行适当的质量控制，如pH值检测、无菌条件下培养等。
总结：以上是一个常见的培养基母液的配制方法。
在实际操作中还要根据所需培养基的种类和配方进行合理选择和调整。
实验一 培养基母液和培养基的配制
实验一 MS培养基母液和培养基的配制一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能；2、通过MS培养基的配制、分装和灭菌，掌握配制培养基的基本技能；3、掌握培养基各种母液的保存方法。
二、仪器与用具1、仪器：电子分析天平、磁力搅拌器、冰箱、高压灭菌锅2、用具：三角瓶、烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签、移液管、记号笔、注射器、封口塑料、电磁炉、酸度计3、试剂：95%酒精，0.5mol ∕L NaOH，0.5mol∕ L HCL，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水，琼脂，蔗糖三、方法步骤（一）培养基母液的配制（MS培养基）配制培养基前先要配制母液。
母液分大量元素、微量元素、铁盐及有机物质四类。
MS培养基母液配制（单位：mg）分别称取10倍用量的各种大量无机盐，依次溶解于大约800mL热的（60～80℃）蒸馏水中。
（一种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容至1000mL后装入试剂瓶中，存放冰箱内备用。
）2. 微量元素母液（100倍液）分别称取100倍用量的微量无机盐，依次溶解于800mL重蒸水中，加水定容到1000mL。
3. 铁盐母液（100倍液）称取100倍用量的Na2-EDTA（乙二胺四乙酸钠）和FeSO4·7H2O，溶于800mL重蒸水中，最后定溶到1000mL。
4. 钙盐母液(10倍): 称取10倍用量的CaCl2·2H2O溶于80mL重蒸水中，最后定溶到100mL。
5. 有机物质母液（50倍液）分别称取50倍用量的各种有机物质，依次溶解于400mL重蒸水中，定容至500mL装入棕色试剂瓶中，存放在冰箱中备用。
6. 生长素如2，4-D、IAA、NAA等。
准确称取20mg，先用2mL95％乙醇溶解，然后加水，定容至20mL，浓度为1mg/mL,放在冰箱内备用。
6.细胞分裂素如激动素（Kt）、6-BA.准确称取20mg，先用2mL的1mol/L的NaOH或HCl溶解，然后加水，定容至20mL，浓度为1mg/mL，再放置冰箱内备用。
培养基母液配制
一.大量元素(10倍液)：称取下列药品分别溶解定容到1升后，加到5升存储瓶中。
KNO3 95gNH4NO3 82.5gKH2PO4 8.5gMgSO4•7H2O 18.5gCaCl2•2H2O 22.0g注意事项：1配置母液前要仔细清洗存储容器2.应按照顺序分别彻底溶解后混合，每加完一种药品，摇动存储瓶使其混合均匀；3.溶解时最好加热，以便充分溶解，避免沉淀的产生；4.夏季要用新制的蒸馏水，并加热，这样可以避免因为水中带菌量过大而产生沉淀，同时可以减缓绿藻的生成；5.沉淀的产生一是由于溶解不充分就混合造成的（浑浊型沉淀），所以配置时一定不要急；二是由于长菌而产生絮状沉淀，所以要用新制的蒸馏水并加热。
二.微量元素母液的配制(100倍)：取少量(200-300ml)温水依次加入下列药品，每加一种药品后搅拌溶解，最后定容到1L：KI 0.083gH3BO3 0.62gZnSO4*7H2O 0.86gNaMoO4*2H2O 0.025gCuSO4*5H2O 0.0025gCoCl2*6H2O 0.0025gMnSO4*4H2O 2.23g (MnSO4*H2O 1.69g)注意：配好后在室温下放置10 h以上再放入冰箱保存，即刻放入冰箱易产生结晶沉淀。
配制过程中产生沉淀的原因有：1. 前一个没彻底溶解就加入了后一个药品；2. 蒸馏水pH 值过高，可加几滴盐酸校正。
三.甘氨酸和肌醇的配制(100倍):甘氨酸: 0.2g溶解定容到一升; 肌醇: 10g溶解定容到一升。
四.铁盐的配制（100倍）:称取EDTA 3.73 g , FeSO4·7H2O 2.78 g , 分别溶解后混合定容到1L,放入棕色细口瓶中,室温放置10 h以上（防止结晶沉淀），然后放入4℃冰箱。
五.维生素B的配制（100倍）：改良MT：VB1（盐酸硫氨素）1g, MS： 10mgVB6 (盐酸吡哆素) 1g , 50mgVB5 (烟酸) 0.5g, 50mg分别称取顺序溶解在温热的蒸馏水中，定容到1升。
ms基本培养基母液的配制方法
ms基本培养基母液的配制方法一、准备所需材料1. 酸性植物激素溶液：包括吲哚乙酸（IAA）、纯度较高的激素（如6-苄基腺嘌呤，BA）等。
2. 碱性植物激素溶液：如生长素（GA3）等。
3. 无机盐溶液：包括硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钾、硼酸、锌硫酸、硼酸等。
4. 维生素溶液：如次黄嘌呤核苷酸（NAA）等。
5. 蔗糖溶液：用于提供能量和碳源。
6. 琼脂：用于凝固培养基。
二、配制步骤1. 称取适量的无机盐溶液成分，按照MS基本培养基的配方比例将各种盐溶解在蒸馏水中，常用的浓度为1/2或1/4的MS培养基。
2. 将酸性植物激素溶液和碱性植物激素溶液分别加入到溶液中，注意控制激素的浓度。
3. 加入维生素溶液，按照配方比例加入到溶液中。
4. 加入适量的蔗糖溶液，用来提供能量和碳源。
5. 最后将琼脂加入到溶液中，搅拌均匀。
6. 调节溶液的pH值，通常为5.8左右。
7. 用蒸馏水补充溶液至总体积，并充分搅拌均匀。
8. 将配制好的培养基溶液进行高温高压灭菌处理，一般条件下为121摄氏度，压力为0.1MPa，持续20分钟。
三、注意事项1. 在配制过程中，要保持实验室卫生，使用无菌操作。
2. 使用高质量的试剂和蒸馏水，避免杂质的干扰。
3. 激素的浓度要根据实验需要进行调整。
4. 配制过程中要注意酸碱度的调节，尽量控制在5.8左右。
5. 琼脂的加入要充分搅拌均匀，避免结块。
6. 灭菌处理要按照规定的条件进行，确保培养基的无菌性。
通过以上步骤，我们可以成功地配制出MS基本培养基的母液。
这种培养基在植物组织培养、植物细胞和胚胎发生研究中起着重要的作用。
根据实验的需要，可以在母液的基础上进一步调整培养基的成分和浓度，以满足不同植物材料的培养要求。
希望以上内容对您有所帮助。
实验1 培养基母液的配制
如肌醇用量较大，可配制成10—20吨／mL的母液浓度。这类物质的称量，必
须用感量为0．0001 g的电光分析天平。
咖5m栅I船1m
96 4 3 1
溶解各种有机化合物所用的溶剂不同，必须注意。例如配制生长素类，如
2,4-D、萘乙酸、吲哚乙酸等，应先用少量1—2mL95％酒精溶解，然后用重
泛酸钙
蔗糖
NH4N03(硝酸铵)
KN03(硝酸钾)
KH2P04(磷酸二氢钾)
MgS04·7H20(硫酸镁)
CaCl2(氯化钙)
xFeS04·7H20(硫酸亚铁)
xNq皿U＼(乙二胺四乙酸牛内)
MnS04·4H20(硫酸锰)
ZnS04．9H20(硫酸锌)
HaB03(硼酸)
Ⅺ(碘化钾)
Na2M004·2H20(钼酸钠)
KCl(氯化钠)
MgS04·7H20(硫酸镁)
NaaS04(硫酸钠)
NaH2P04·21420(磷酸二氢钠)
MnS04·4H20(硫酸锰)
Na2M004·2H20(钼酸钠)
CuS04·5U20(硫酸铜)
Pe(C6U507)·3H20(柠檬酸铁)
烟酸
甘氨酸
盐酸吡哆素(维生素B6)
盐酸硫铵素(维生素B1)
2,4-D
盯
蔗糖
琼脂
0．4 nag／L
0．5 mg／L
0．S mg／L
2 mg／L
100 mg／L
0．5 mg／L
1 mg／L
20 g／L
8 g／L
10倍液
100倍液
5 mL／L
1 mg／mL
MS培养基母液配方
MS培养基母液配方1、大量元素母液（10倍，1 L）NH4NO316.5 g KH2PO4 1.7 g（单独溶解后混匀）KNO319 g CaCl2·2H2O 4.4 g（单独溶解后混匀）MgSO4·7H2O 3.7 g（单独溶解后混匀）2、微量元素母液（200倍，1 L）KI 0.166 g Na2MoO4·2H2O 0.05 gH3BO3 1.24 g CuSO4·5H2O 0.005 gMnSO4·4H2O 4.46 g CoCl2·6H2O 0.005 gZnSO4·7H2O 1.72 g3、铁盐母液（200倍，500 mL；定容后调pH至5.5，加热至90℃左右螯合15~30 min）EDTA二钠（Na2·EDTA·7H2O） 3.73 gFeSO4·7H2O 2.78 g4、有机母液①（200倍，500 mL）盐酸硫胺素（VB1）0.01 g烟酸0.05 g盐酸吡哆醇（VB6）0.05 g5、有机母液②（200倍，500 mL）肌醇10.0 g6、有机母液③（200倍，500 mL）甘氨酸0.2 g7、植物激素1)0.1mg/mL 的6-BA溶液：取25mg的6-BA，用少量1N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250mL。
2)0.1mg/mL NAA：取25mg的NAA可溶于热水中或用少量95%乙醇或少量1N的NaOH溶解后，再加水定容至250mL。
3)2,4-D：2,4-二氯苯氧乙酸，相对分子量为221.0，用乙醇做助溶剂，cas号为94-75-7，分子式为，C8H6Cl2O30.2mg/mL 的2,4-D溶液：40mg 2,4-D，用少量95%乙醇溶解后，再用蒸馏水定容至200ml。
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培养基母液与培养基的配置
摘要：配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
关键词：培养基母液常用培养基植物激素
1.常用培养基种类，培养基母液的各种成分的量以及配置过程
1.1常用培养基：
MS培养基
MS培养基是目前使用最普遍的培养基。
其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。
由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。
MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。
MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。
因此，一般情况下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。
和其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的显著特点。
B5培养基
与其他培养基相比，它的主要特点是含有较低的铵，而铵这一营养成分可能对有些培养基有抑制生长的作用。
当愈伤组织和悬浮培养中对B5培养基与MS培养基进行对比培养试验时，发现有些植物的愈伤组织和细胞培养物在MS培养基上
平内的脏物清理干净。
3.3在配制铁盐时，如果加热搅拌时间过短，会造成FeS04和Na2-EDTA鳌合不彻底，此时若将其冷藏，FeSO4会结晶析出。
为避免此现象发生，配制铁盐母液时，FeSO4和Na2-EDTA应分别加热溶解后混合，并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20 - 30 min)，调pH值至5 .5，室温放置冷却后，再冷藏。
3.4由于维生素母液营养丰富，因此贮藏时极易染菌。
被菌类污染的维生素母液，有效浓度降低，并且易给后期培养造成伤害，不宜再用。
避免此现象发生的方法是:配制母液时用无菌重蒸馏水溶解维生素，并贮存在棕色无菌瓶中，或缩短贮藏时间。
3.5所有的母液都应保存好，若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。
3.6计算时，要考虑周全，无论是配置母液时的计算还是配置培养基时吸取量的计算，都要考虑周全，尤其是母液配置时的计算，因为贯穿以后的实验，必须准确制备。