抗坏血酸(维生素C)的测定方法
滴定法测定维生素C含量
滴定法测定维生素C含量一、本文概述维生素C，也被称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，对人体健康具有多种益处，包括增强免疫力、促进铁质吸收、参与胶原蛋白的合成等。
由于其生理功能和广泛的应用，维生素C的含量测定在食品、药品、化妆品等领域具有重要意义。
滴定法作为一种经典的化学分析方法，因其准确度高、操作简便等优点，被广泛应用于维生素C含量的测定。
本文将详细介绍滴定法测定维生素C含量的原理、实验步骤、注意事项以及结果分析。
通过本文的阅读，读者可以了解滴定法的基本原理和实验操作，掌握维生素C含量测定的基本方法，为实际工作和研究提供有益的参考。
二、滴定法基本原理滴定法是一种常用的化学分析方法，通过测量一种已知浓度的试剂（称为滴定剂）与被测物质发生化学反应所需的量，从而确定被测物质的含量。
在维生素C含量的测定中，滴定法被广泛应用。
滴定法的基本原理是基于化学反应的定量关系。
在滴定过程中，滴定剂与被测物质按照一定的化学计量比进行反应，直到反应完全。
通过测量滴定剂的使用量，可以推算出被测物质的含量。
对于维生素C的滴定测定，通常使用碘作为滴定剂。
维生素C（抗坏血酸）具有还原性，可以与碘发生氧化还原反应。
在滴定过程中，碘逐渐与维生素C反应，直到维生素C完全消耗。
此时，通过测量剩余的碘的量，可以推算出样品中维生素C的含量。
滴定法的优点在于操作简便、准确度高、适用范围广。
然而，滴定法也需要注意一些影响准确度的因素，如滴定剂的纯度、操作误差等。
因此，在进行滴定法测定时，需要严格控制实验条件，确保测量结果的准确性。
通过滴定法，我们可以有效地测定样品中维生素C的含量，为食品、药品等产品的质量控制提供重要依据。
滴定法也为研究维生素C 的生理功能和代谢途径提供了重要的实验手段。
三、实验材料与方法试剂：维生素C标准品，碘酸钾（KIO₃），硫代硫酸钠（Na₂S₂O₃），淀粉指示剂，盐酸（HCl），氢氧化钠（NaOH）等。
标准溶液的制备：精确称取一定量的维生素C标准品，用适量水溶解后，转移到容量瓶中定容，得到标准溶液。
抗坏血酸药品中维生素C含量的测定(碘量法)
抗坏血酸药品中维生素C 含量的测定一、实验目的1.掌握碘标准溶液的配制注意事项；2.通过维生素C 的测定了解直接碘量法和间接碘量法的过程；3.掌握碘量法测定抗坏血酸药品中维生素C 含量的原理和方法。
二、实验用品 1.仪器全自动分析天平；台秤；碘量瓶；玻璃棒；洗瓶；试剂瓶；烧杯；酸式滴定管；量筒；胶头滴管；容量瓶；移液管；洗耳球。
2.试剂分析纯O H O S 23225Na ⋅，分析纯2I ；7221-r mol 017.0O C K L ⋅标准溶液；)s (KI 、KI 溶液100-1L g ⋅，使用前配制；淀粉指示剂1-g 5L ⋅；）（s a 32CO N ；l HC 溶液1-mol 6L ⋅；败坏血酸片。
三、实验原理抗坏血酸又名维生素C ，分子式686O H C 。
由于分子中的烯二醇基具有还原性，能被2I 定量地氧化成二酮基，其反应式为：碱性条件下可使反应向右进行完全，但因维生素C 还原性很强，在碱性溶液中尤其易被空气氧化，在酸性介质中较为稳定，故反应应在稀酸（如稀乙酸、稀硫酸或偏磷酸）溶液中进行，并在样品溶于稀酸后，立即用碘标准溶液进行滴定。
根据滴定消耗的2I 标准溶液的体积，便可计算出抗坏血酸药品中维生素C 的含量。
计算公式：%100m %100m m 68622⨯=⨯=药品药品维生素O H C I I C M V C W2I 标准溶液的配制和标定：由于通常使用的市售2I 试剂纯度不高，故需先配成近似浓度，然后在进行标定。
2I 微溶于水而易溶于KI 溶液中，但在稀的KI 溶液中溶解得很慢，故配制2I 溶液时应先在较浓的KI 溶液中进行，待溶解完全后再稀释到所需浓度。
2I 溶液可以用32s O A 为基准物对I 2溶液进行标定,但32s O A （俗称砒霜）有剧毒，故用322a O S N 标准溶液进行标定。
322a O S N 标准溶液的配制和标定：固体试剂O H O S N 23225a ⋅通常含有一些杂质，且易风化和潮解，因此，322a O S N 标准溶液采用标定法配制。
维生素C片中抗坏血酸的测定
维生素C片中抗坏血酸的测定维生素C，也称抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，具有多种生理功能。
它可以促进铁的吸收和利用，有助于皮肤伤口的愈合、提高人体免疫力，还可以对抗自由基对细胞的损害等等。
由于人体自己无法自行合成维生素C，因此必须通过饮食或补充剂的方式来摄取。
但是，维生素C很容易氧化失去活性，因此在储存过程中需要特别注意。
本文将介绍维生素C片中抗坏血酸的测定方法。
测定原理维生素C是还原型物质，具有还原性，因此可以与氧化剂I2反应，形成色素。
I2在酸性环境下氧化生成I^-，接着I^-离子与维生素C反应成光吸收值较小的I3^-络合物，即维生素C滴定终点。
根据滴定所用的溶液浓度、用量以及生成络合物的光学性质，则可以确定维生素C的含量。
实验药品和设备1.溶液：维生素C浓度为10mg/mL的标准溶液、0.1M硫酸、0.1%淀粉溶液、0.1M碘酸钾溶液、0.1M硫酸铜溶液、0.1M氢氧化钠溶液、0.01M EDTA四钠盐溶液。
2.设备：分析天平、醇灯、10mL锥形瓶、10mL直口瓶、比色皿、可调式电位计、pH 计、定容瓶、移液管等。
实验步骤1.样品准备将维生素C片粉末磨碎，并按照说明书的要求将其溶解在约10mL水中。
磨碎时应避免光照和过度摩擦，以免影响维生素C的稳定性。
溶解后的维生素C片可通过定容转移至10mL锥形瓶内。
2.标准曲线的制备取一定量的维生素C标准溶液，分别置于10mL直口瓶中，通过不同稀释倍数制备不同浓度的标准溶液，计算出维生素C的浓度范围。
然后通过滴定操作得到对应浓度的滴定体积V1。
3.测定未知样品中维生素C的含量将溶解好的维生素C片转移至100mL定容瓶中，配成100mg/L的维生素C溶液。
取0.5mL溶液，加入10mL0.1M硫酸，并进行预滴定加样，加入0.1M碘酸钾溶液，在淀粉试验液的指导下终点处停止滴定至瓶底，记录滴定体积V2。
然后，按照下列公式计算出维生素C的含量：维生素C mg/kg = (V1 - V2) × C ×50 / ns其中，C为0.1M的碘酸钾溶液浓度，ns为加入样品容积，50为维生素C溶液的稀释倍数。
维生素C的测定
维生素C的测定维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。
新鲜的水果蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。
方法：测定维生素C常用的方法有靛酚滴定法、苯肼比色法、荧光法和高效液相色谱法等。
以下介绍荧光法、2，4-二硝基苯肼光度法。
（1）测定原理总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4 –二硝基苯肼作用生成红色脎，根据脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色定量。
（2）试剂本实验用水均为蒸馏水。
试剂纯度均为分析纯。
①4.5mol/L硫酸：谨慎地加250mL硫酸（比重1.84）于700mL水中，冷却后用水稀释至1000mL。
②85%硫酸：谨慎地加90mL硫酸（比重1.84）于100mL水中。
③2，4 –二硝基苯肼溶液2%：溶解2g 2，4 –二硝基苯肼于100mL 4.5mol/L硫酸内，过滤。
不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。
④草酸溶液2% ：溶解20g草酸（H2C2O4）于700mL水中，稀释至1000mL。
⑤草酸溶液1% ：稀释500mL 2%草酸溶液到1000mL。
⑥硫脲溶液1% ：溶解5g硫脲于500mL 1%草酸溶液中。
⑦硫脲溶液2% ：溶解10g硫脲于500mL 1%草酸溶液中。
⑧盐酸1mol/L ：取100mL盐酸，加入水中，并稀释至1200mL。
⑨抗坏血酸标准溶液：溶解100mg纯抗坏血酸于100mL 1%草酸中，配成每毫升相当于1mg 抗坏血酸。
⑩活性炭：将100g活性炭加到750mL1mol/L盐酸中，回流1～2h，过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子(Fe3+)为止，然后置于110℃烘箱中烘干。
检验铁离子方法：利用普鲁士蓝反应。
将2%亚铁氰化钾与1%盐酸等量混合，将上述洗出滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。
（3）仪器和设备恒温箱：37±0.5℃；可见–紫外分光光度计；捣碎机。
实验四 维生素C的定量测定----2,6-二氯靛酚滴定法
思考题
1、要测得准确的维生素C值，实验过程 中应注意哪些操作步骤，为什么？ 2、在测定过程中，样品的草酸提取液为 什么不能暴露在光下？ 3、试简述维生素C的生理意义。
实验仪器
新鲜水果（苹果、猕猴桃、甜橙） 吸管 容量瓶（50ml） 滴定装置（酸式滴定管） 锥形瓶（50-100ml） 研钵 漏斗 纱布
实验试剂
标准抗坏血酸溶液：准确称取50毫克纯抗坏血酸，溶 于1%的草酸溶液中，并稀释至500毫升，即浓度为 0.1mg/ml，贮棕色瓶，冷藏保存，最好临用时配制。
实验四
维生素C的定量测定----2， 6-二氯靛酚滴定法
一、原理
维生素c又称为抗坏血酸，其还原型能还原染料2， 6-二氯靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。 在酸性溶液中，2，6-二氯靛酚成红色，被还原 后变为无色。因此可用2，6-二氯靛酚滴定样品 中含有的维生素C，当样品中的维生素C被完全还 原后，在滴加过量的2，6-二氯靛酚，溶液变为 淡红色，即为终点。如无其他杂质干扰，则样品 液所还原的2，6-二氯靛酚的量与样品中所含有 维生素C的量成正比。
实验步骤
1 提取
水洗净新鲜的蔬菜（水果），用吸水纸吸干 表面水分，然后称取5克剪碎加2%的草酸5 毫升，置研钵中研成浆，倒入100毫升的容 量瓶内，用2%草酸洗涤数次，最后定容至 刻度，充分混匀后过滤。
实验步骤
2 滴定
1、标定2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度：
量取标准抗坏血酸溶液1ml和9ml 1%草酸于50ml锥形瓶1 中，同时量取10ml草酸加入另一个50ml锥形瓶2中作空白 对照，用已标定的2，6-二氯酚靛酚滴定至粉红色出现， 15秒不退色。记录所用的毫升数，计算每毫升2，6-二氯 酚靛酚所能氧化抗坏血酸的毫克数（K）。 取50ml锥形瓶2个，分别加入滤液10ml（V3），用已标定 的2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至终点，以微红色能保持15 秒不退色为止，整个滴定过程宜迅速，不宜超过2min，记 录两次滴定所得的结果，求平均值V1。空白滴定方法同前 （V2），
抗坏血酸(维生素C)的测定方法
抗坏血酸(维生素 C )的测定方法(1)在测定维生素C 的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素 C 含量的第一标准方法，2、4 —二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法 1 •原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后， 与邻苯二胺(OPDA 反应生 成具有荧光的喹喔啉(quinoxaline ),其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正 比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与 OPDA 反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为 0.022 g/ml 。
2. 适用范围 GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3•仪器3. 1 •实验室常用设备。
3. 2.荧光分光光度计或具有 350nm 及430nm 波长的荧光计。
3. 3.打碎机。
4. 试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
(1 )偏磷酸—乙酸液：称取 15g 偏磷酸，加入40ml 冰乙酸及250ml 水，搅拌，放置过夜使 之逐渐溶解，加水至 500ml 。
4C 冰箱可保存 7〜10天。
(2)0.15 mol/L 硫酸：取10ml 硫酸，小心加入水中，再加水稀释至 1200ml 。
(3)偏磷酸—乙酸—硫酸液：以 0.15mol/L 硫酸液为稀释液，其余同 4.1.配制。
(4) 50% 乙酸钠溶液：称取 500g 乙酸钠(CH3COONa3H2O ，加水至1000ml 。
(5) 硼酸-乙酸钠溶液：称取 3g 硼酸，溶于100ml 乙酸钠溶液(4.4 )中。
临用前配制。
(6)邻苯二胺溶液：称取 20mg 邻苯二胺，于临用前用水稀释至 100ml 。
(7)0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取 0.1g 百里酚蓝，加0.02mol/L 氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为 10.75ml ，磨溶后用水稀释至 250ml 。
维生素c的测定原理
维生素c的测定原理
维生素C是一种重要的水溶性维生素，也称作抗坏血酸。
维
生素C的测定方法有多种，其中常用的是间接滴定法和直接
滴定法。
间接滴定法基于维生素C与氧化剂间的反应。
在这个方法中，维生素C首先被氧化成二氧化碳和水，而氧化剂则被还原。
然后，剩余的氧化剂被一种指示剂检测，它会在氧化和还原之间发生颜色变化。
通过测量反应所需的氧化剂体积，可以确定维生素C的含量。
直接滴定法则是利用维生素C的还原性直接与含有已知浓度
氧化剂的溶液反应。
这个方法会产生电流，而该电流的大小与反应中维生素C消耗的数量成比例。
通过测量电流的强度，
可以得到维生素C的浓度。
无论是间接滴定法还是直接滴定法，都需要注意样品的制备和处理，以确保准确度和可重复性。
此外，选择适当的指示剂或电流计也很关键。
维生素C的测定方法广泛应用于食品、药
品和医学领域中，对于掌握维生素C的摄入量和相关疾病的
诊断具有重要意义。
维生素C片中抗坏血酸的测定
维生素C片中抗坏血酸的测定摘要维生素C（又名抗坏血酸，分子式为C6H8O6）通常用于防治坏血病及各种慢性传染病的辅助治疗。
市售维生素C药片含淀粉等添加剂。
具有较强的还原性，在空气中易被氧化，其含量可通过在弱酸性溶液中用已知浓度的I2溶液进行测定。
即取一定量研磨好的样品，加入一定量冰醋酸和一定量新煮沸后冷却的蒸馏水，搅拌溶解。
而后，加入淀粉指示剂，立即用已知浓度的I2标准溶液进行滴定，直至溶液中的蓝色持续不褪为止。
根据消耗I2溶液的体积，算得维生素C片中抗坏血酸的含量。
关键词碘量法维生素C片抗坏血酸1.引言维生素C，分子式为C6H8 O6 , 是具有L系糖型的不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。
是人类营养中最重要的维生素之一，它分布很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂等）、蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为丰富。
它对物质代谢的调节具有重要的作用，缺少它时会产生坏血病。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有对化学致癌物的阻断作用。
维生素C（还原型）纯品为白色无臭结晶，熔点190~192℃，溶于水或乙醇中，不溶于油剂。
在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸（有生理作用）。
如果进一步水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用[5]。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
根据它具有还原性质可测定其金属含量。
经过查阅资料，总结出十种方法测定维生素C片中抗坏血酸的含量：1.1铁铵矾滴定法取一定量研磨好的维生素C片，溶解后，以磺基水杨酸为指示剂，用铁铵矾氧化直接滴定该样品中抗坏血酸的含量。
该法经济可靠，所用铁铵矾标准液无须标定，但因室温下铁(Ⅲ)直接氧化抗坏血酸的速度慢，需控制恒温约55℃。
[1]1.22,6-二氯酚靛酚滴定法取一定量研磨好的样品溶解后，用碱性2,6-二氯酚靛酚溶液滴定含有该样品的草酸溶液，当溶液由蓝色变为无色再变为红色时即为终点。
【精选】维生素C含量的测定
【精选】维生素C含量的测定维生素C，也叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素，对人体健康起着至关重要的作用。
人体无法合成维生素C，必须通过食物或饮料摄取。
维生素C含量的测定，是衡量食品、饮料中维生素C含量的重要方法之一。
本文将介绍两种测定维生素C含量的方法。
方法一：姜饮的测定法所需试剂：1.姜饮：500ml姜饮（制作方法：将姜切片和红枣煮沸，加入糖和红茶，煮20分钟后过滤）2.10% TCA溶液：将10g三氯乙酸溶解于100ml水中3.苯酚：将0.5g苯酚粉末溶解于100ml水中4.硝酸：将2ml浓硝酸注入100ml容量瓶中，加水至刻度线7.淀粉溶液：将2g淀粉加入100ml水中，搅拌均匀实验步骤：1.取100ml姜饮，加入10ml 10% TCA溶液，摇匀，滴加苯酚试剂，使姜饮呈现橙黄色2.取50ml橙黄色液体，加入0.5ml硝酸，摇匀3.用滴定管滴加碘酸钾溶液，直到液体呈现黄色变化，再加入过量淀粉溶液，液体呈现深蓝色4.测定维生素C标准曲线，计算样品中维生素C含量方法二：DCPIP法1. DCPIP指示剂：将0.1g DCPIP粉末溶解在100ml水中2. 测量样品：蔬菜或水果样品3. 去离子水：用于样品淋洗5. 维生素C标准溶液：50mg/L的维生素C溶液1.将约5g的样品放入绞肉机中，加入少量去离子水混合绞碎2. 将绞碎后的样品瓶中，加入5ml 2%硫酸，浸泡1小时3. 用滤纸过滤出液体，取1ml过滤液加入约5ml DCPIP指示剂，立即摇匀5. 观察溶液变化，维生素C样品与标准溶液的指示剂溶液变色速度和色浓度互相比较，计算出样品中维生素C的含量。
总结：以上两种方法都是常用的测定维生素C含量的方法，具有较高的准确性和可靠性。
DCPIP法是一种简单快捷的方法，可以用于日常食品的检测；而姜饮法则是一种相对比较精密的实验方法，可以用于科研领域的实验研究中。
饮食中摄入足量的维生素C，对我们的健康非常重要，因此通过测定食品和饮料中维生素C含量，可以更好地帮助我们制定健康饮食计划。
维生素C的测定
维生素C含量的测定的方法有：滴定法（间接碘量法）、分光光度分析法、高效液相色谱法等。
橙子维生素C含量测定摘要：维生素C（VitC）又名抗坏血酸，可降低毛细血管通透性，降低血脂，增强机体的抵抗能力，并有一定的解毒功能和抗组胺作用。
对于其含量测定，采用碘量法，该方法简便、快速、准确虽然该法对于维生素C原料药的测定结果比较满意。
其化学式为C6H8O6，相对分子量为176.1，由于分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量地氧化成二酮基。
一、研究目的：维生素C属于外源性维生素，人体不能自身合成，必须从食物中摄取。
以了解橙子中的维生素C含量。
二、准备工作：仪器：滴定管、玻璃棒、过滤器、蒸馏水、滴定台、滴定管夹、碘量瓶锥形瓶小刀、烧杯、榨汁器。
药品：0.005mol/L的碘液0.5%淀粉溶液6mol/LHAC溶液标准液配制：称取1.3g碘，置于50ml烧杯中，加入2.5g碘化钾及25毫升蒸馏水，不断搅拌之，使其溶解均匀。
再加0.2ml 浓盐酸(体积质量1.19g/L)，转移到1L容量瓶中，再加蒸馏水稀释到1000ml。
溶液应贮藏在棕色试剂瓶中，储于低温暗橱内。
采样:橙子三、实验1.实验原理往锥形瓶中加入橙子汁、蒸馏水、淀粉溶液、2ml6mol/LHAC 溶液，用滴定管滴加碘液，变成蓝色30秒不退色，通过公式计算出橙子中维生素C的含量。
2.计算公式VitC含量（mg/50g）=0.005×V（橙子加碘量）×176四、实验步骤1.将橙子洗净削皮，用滤纸吸干表面的水，称量50克，用榨汁器将水果榨汁，并进行过滤，用蒸馏水洗涤滤渣。
2.将得到的滤液果汁转移到锥形瓶中，加2mL淀粉溶液，再加少量蒸馏水，用硫酸酸化，使溶液的pH值达到3。
3.用滴定管滴加0.005mol/L的碘液，直到溶液变成蓝色，记下读数。
4.要进行平行三次实验，取平均值。
五、实验结果（一）实验数据记录如下表：橙子:加碘次数（毫升）：第一次：28.4第二次：28.5第三次：28.46平均加碘：28.46（滴入的碘液数量越多，就证明了该水果的维生素C的含量越多）（二）通过计算后，所得橙子的维生素C含量：25（mg/50g）六、实验之中误差1.标准液配制有一定的误差。
抗坏血酸的测定方法
抗坏血酸（Vc）的测定方法测定Vc的国标方法中，荧光法为测定食物中Vc含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3．仪器3．1．实验室常用设备。
3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。
3．3．打碎机。
4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。
4℃冰箱可保存7～10天。
（2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。
（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。
（4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。
（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。
临用前配制。
（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。
（7）0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。
变色范围：pH=1.2 红色pH=2.8 黄色pH＞4.0 兰色（8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。
抗坏血酸(维生素C)的测定
抗坏血酸（维生素C）的测定维生素C（vitaminC）又称为抗坏血酸，一般水果、蔬菜中维生素C的含量均较高，不同的水果、蔬菜品种，以及同一品种在不同栽培条件、不同成熟度等情况下，其维生素C的含量都有所不同。
测定维生素C含量，可以作为果蔬品质指标之一。
Ⅰ.滴定法一、原理维生素C具有很强的还原性，染料2，6-二氯酚靛酚（2，6-dichlorophenolindophenol）具有较强的氧化性，且在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。
因此当用蓝色的碱性2，6-二氯酚靛酚溶液滴定含有抗坏血酸的草酸溶液时，其中的抗坏血酸可以将2，6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型。
但当溶液中的抗坏血酸完全被氧化之后，则再滴2，6-二氯酚靛酚就会使溶液呈红色。
借此可以指示滴定终点，根据滴定用去的标准2，6-二氯酚靛酚溶液的量，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量二、材料、设备及试剂（一）材料：水果或蔬菜（二）设备：1.蒸发皿；2. 研钵一套；3. 移液管；4. 漏斗；5. 滤纸；6. 容量瓶；7. 微量滴定管。
（三）试剂：1. 2％草酸。
2. 2，6-二氯酚靛酚（NaOC6H4NC6H2OCL,M=290.09)将50mg2，6-二氯酚靛酚燃料溶于200ml 含有52mgNaHCO3的热水中，冷却后，稀释至250ml,装入棕色瓶内，放在冰箱里保存（因该染料性质不稳定，配制后超过一周必须重新配制）。
3.0.1mg/ml标准抗坏血酸溶液将50mg纯抗坏血酸溶于少量2%草酸溶液中，然后用2%草酸溶液定容至500ml(使用前临时配置）。
三、实验步骤（一）称取水果和蔬菜样品10g，放在研钵中加入2％草酸溶液约5ml研碎。
通过漏斗将研碎的样品倒入一只100ml的容量瓶中，研钵及杵用2％草酸冲洗，并将洗液一并倒入该容量瓶中，最后用2％草酸定容到刻度，过滤，滤液备用。
（二）空白滴定取2%草酸溶液10ml至蒸发皿中，以2，6二氯酚靛酚溶液滴定呈粉红色，并在30s内不褪色为终点，耗用的染色体积（ml）作为空白。
维生素c的鉴别方法
维生素c的鉴别方法维生素C，也称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。
它在人体内具有多种重要的生理功能，如促进胶原蛋白的合成、增强免疫力、抗氧化等。
因此，维生素C在医药、保健品、食品等领域都有广泛的应用。
然而，由于其易氧化、易失活等特性，维生素C的鉴别方法也显得尤为重要。
一、化学鉴别法1. 碘滴定法碘滴定法是一种常用的维生素C定量方法。
其原理是利用碘与维生素C的氧化反应，测定维生素C的含量。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的水中，加入淀粉溶液作指示剂。
（2）用标准碘液滴定至淀粉溶液变蓝色，记录所需的碘滴定量。
（3）用同样的方法对标准维生素C溶液进行滴定，记录所需的碘滴定量。
（4）根据标准曲线计算出待测样品中维生素C的含量。
2. 氧化还原滴定法氧化还原滴定法是一种常用的维生素C定量方法。
其原理是利用维生素C的还原性与氧化剂的氧化性进行反应，测定维生素C的含量。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的水中，加入氧化剂溶液。
（2）用标准还原剂溶液滴定至溶液颜色变化，记录所需的还原剂滴定量。
（3）用同样的方法对标准维生素C溶液进行滴定，记录所需的还原剂滴定量。
（4）根据标准曲线计算出待测样品中维生素C的含量。
二、生物鉴别法1. 酵母发酵法酵母发酵法是一种常用的维生素C定性方法。
其原理是利用维生素C对酵母发酵的促进作用，判断样品中是否含有维生素C。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的水中，加入酵母溶液。
（2）在恒温条件下，观察酵母发酵的速度和强度。
（3）将同样的方法对标准维生素C溶液进行测试，比较两者的发酵速度和强度。
（4）根据比较结果判断待测样品中是否含有维生素C。
2. 色谱法色谱法是一种常用的维生素C定量方法。
其原理是利用色谱柱对维生素C进行分离和检测，测定维生素C的含量。
具体操作步骤如下：（1）将待测样品溶解于适量的溶剂中，注入色谱柱。
（2）在适当的条件下，利用色谱柱对维生素C进行分离和检测。
抗坏血酸(维生素C)的测定方法
抗坏血酸（维生素 C ）的测定方法（ 1）在测定维生素C 的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素 C 含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法 1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后， 与邻苯二胺（OPDA 反应生 成具有荧光的喹喔啉 （ quinoxaline ）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正 比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与 OPDA 反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为 0.022 g/ml 。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器 3．1．实验室常用设备。
3. 2.荧光分光光度计或具有 350nm 及430nm 波长的荧光计。
3． 3．打碎机。
4. 试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（ 1）偏磷酸－乙酸液：称取 15g 偏磷酸，加入 40ml 冰乙酸及 250ml 水，搅拌，放置过夜使 之逐渐溶解，加水至 500ml 。
4C 冰箱可保存 7〜10天。
（2）0.15 mol/L 硫酸：取 10ml 硫酸，小心加入水中，再加水稀释至 1200ml 。
（ 3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以 0.15mol/L 硫酸液为稀释液，其余同 4.1. 配制。
（4） 50% 乙酸钠溶液：称取 500g 乙酸钠（CH3COONS3H2O ，加水至1000ml 。
（5） 硼酸-乙酸钠溶液：称取 3g 硼酸，溶于100ml 乙酸钠溶液（4.4 ）中。
临用前配制。
（6） 邻苯二胺溶液：称取 20mg 邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml 。
（7） 0 . 04%百里酚蓝指示剂溶液：称取 0.1g 百里酚蓝，加 0.02mol/L 氢氧化钠溶液，在玻 璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为 10.75ml ，磨溶后用水稀释至 250ml 。
vc的测定方法
一．碘量法碘量法是以I2的氧化性和I－的还原性为基础的滴定分析方法。
在一定条件下，用碘离子来还原，定量的析出碘单质，然后用Na2S2O3标准溶液来滴定析出的I2。
这种方法叫做间接碘量法。
本实验采用间接碘量法测碘的浓度。
以淀粉为指示剂，Na2S2O3标准溶液来滴定析出的I2，以蓝色消失为终点，即可算出碘的浓度。
维生素C又称抗坏血酸Vc，分子式C6H8O6。
Vc具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。
其滴定反应式：二．2，4—二硝基苯肼比色法总抗坏血酸包括还原型Vc、脱氢型Vc 和二酮古龙糖酸。
样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4 —二硝基苯肼作用生成红色脎。
脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比，由此通过比色可对样品中总坏血酸进行定量，于500nm 波长测吸光值。
三．分光光度法在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。
在最大吸收波长420nm处测定吸光度，与标准系列比较定量。
四．荧光法于10mL比色管中依次加入1.00mLVc工作液，2.5mL buffer，1.5mL苯甲酸，去离子水稀释定容至刻度, 测定荧光光谱。
同时在λex /λem =310nm/410nm处，测定荧光强度F。
同时测定试剂空白（2.5mL buffer，1.5mL苯甲酸）的荧光强度F0,F1=F-F0。
五．近红外漫反射光谱分析法维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其含量测定方法为碘量法。
我们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可靠。
这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息。
由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计算机技术与化学计量学方法。
维生素c的检测方法
维生素c的检测方法
维生素C（也称为抗坏血酸）的检测方法有多种，下面列举了常用的几种方法：
1. 碘滴定法：该方法是通过测定维生素C与碘溶液反应的滴定终点来确定维生素C的含量。
维生素C可还原碘，从而溶液的颜色由棕红色转变为无色。
通过滴定碘溶液直至溶液不再呈现颜色的点，可以计算维生素C的含量。
2. 色谱法：色谱法是通过将样品分离成不同组分，然后通过检测器来测量维生素C的含量。
常用的色谱方法包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。
3. 比色法：维生素C可以与特定试剂发生比色反应，通过测量吸光度来确定维生素C的含量。
常用的试剂包括二苯基胺（即蓝封胺）和二唑甲醇（DCPIP）。
4. 电化学法：电化学法是通过测量维生素C溶液的电位来确定其含量。
常用的电化学方法有循环伏安法和差分脉冲伏安法。
以上是常用的几种维生素C的检测方法，具体选择哪种方法取决于实验的需求和条件。
vc片中维生素c的测定
VC片中维生素C的测定1. 引言维生素C，也称为抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素。
它在人体内具有多种生理功能，包括抗氧化、免疫调节和胶原蛋白合成等。
因此，准确测定VC片中维生素C的含量对于保证产品质量以及人体健康具有重要意义。
本文将介绍一种常用的方法——碘滴定法来测定VC片中维生素C的含量。
该方法简单、快速且准确度较高，在实际应用中被广泛采用。
2. 实验原理碘滴定法是通过VC片中的维生素C与标准碘溶液反应来测定其含量。
具体原理如下：1.维生素C在酸性条件下可以被氧化成二价离子态。
2.碘溶液（I2）可以与二价离子态的维生素C发生反应生成双碘化物离子（I3-）。
3.双碘化物离子与淀粉试剂反应生成蓝紫色络合物。
4.反应过程中，维生素C与碘溶液的摩尔比为1:1，因此可以通过滴定过程中消耗的碘溶液体积来确定维生素C的含量。
3. 实验步骤3.1 准备工作•将所需试剂（包括标准碘溶液、硫酸、淀粉试剂等）准备好，并按照实验室安全规范操作。
•使用天平称取一定质量的VC片样品。
3.2 碘滴定法测定VC片中维生素C的含量1.将称取好的VC片样品放入锥形瓶中，加入适量硫酸溶液使其完全溶解。
2.在反应瓶中加入适量蒸馏水稀释样品，使其成为合适浓度。
3.加入几滴淀粉试剂，使其呈现蓝紫色。
4.使用标准碘溶液进行滴定。
开始滴定时，刚开始出现蓝紫色络合物，然后随着滴定过程逐渐变为无色。
5.记录标准碘溶液滴定的体积（V1）。
4. 数据处理与结果分析4.1 数据处理1.计算标准碘溶液的浓度（C2）：根据标准碘溶液的质量和体积，计算其浓度。
2.计算维生素C样品中维生素C的质量（m）：m = C2 * V1。
3.根据样品中维生素C的质量和样品质量，计算维生素C的含量。
4.2 结果分析通过上述实验步骤和数据处理，我们可以得到VC片中维生素C的含量。
根据实验结果，我们可以评估VC片产品的质量，并与标准值进行比较。
5. 实验注意事项•在操作过程中要注意安全，避免接触到有毒试剂。
维生素c测定实验报告
维生素c测定实验报告
实验目的：通过实验测定某种水果汁中维生素C的含量。
实验原理：维生素C（化学名为抗坏血酸）是一种水溶性维生素，对人体具有重要的生理功能。
维生素C的含量可以通过滴定法进行测定。
滴定是一种定量分析方法，根据反应物的摩尔比例关系来测定物质的含量。
实验所需材料和试剂：
1. 某种水果汁样品
2. 0.1% 的碘化钾溶液
3. 10% 的硫酸溶液
4. 去离子水
5. 淀粉溶液
实验步骤：
1. 取适量的水果汁样品，并用去离子水稀释至适宜浓度。
2. 将 10ml 的稀释后的水果汁样品倒入一个洗净的烧杯中。
3. 加入几滴淀粉溶液，使水果汁样品呈现出蓝色。
4. 取一滴 0.1% 的碘化钾溶液，连续滴入水果汁样品中，并轻轻搅拌溶液。
5. 当溶液从蓝色转变为无色时，停止滴定，并记录滴加的碘化钾溶液滴数。
6. 重复实验至滴加的碘化钾溶液滴数相近。
7. 根据滴加的碘化钾溶液滴数，计算出维生素C的含量。
实验结果和分析：
根据实验测定，滴加的碘化钾溶液滴数为 15 滴。
通过计算，可得出水果汁样品中维生素C的含量为 15mg/100ml。
实验结论：
通过本实验的测定，得出某种水果汁中维生素C的含量为15mg/100ml。
维生素C对人体具有重要的生理功能，因此适量摄入维生素C对保持身体健康非常重要。
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抗坏血酸（维生素C）的测定方法（1）在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。
一、荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。
本方法的最小检出限为0.022 g/ml。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定3．仪器3．1．实验室常用设备。
3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。
3．3．打碎机。
4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。
（1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。
4℃冰箱可保存7～10天。
（2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。
（3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。
（4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。
（5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。
临用前配制。
（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。
（7） 0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。
变色范围：pH=1.2 红色 pH=2.8 黄色 pH＞4.0 兰色（8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。
（9）标准抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：准确称取50mg抗坏血酸，用溶液（4.1）溶于50ml容量瓶中，并稀释至刻度。
抗坏血酸标准使用液（100μg/ml）: 取10ml抗坏血酸标准液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml。
定容前试pH值，如其pH＞2.2时，则应用溶液（4.3）稀释。
标准曲线的制备：取下述"标准"溶液（抗坏血酸含量10μg/ml）0.5、1.0、1.5和2.0ml 标准系列，取双份分别置于10ml带盖试管中，再用水补充至2.0ml。
5.操作步骤5.1 样品制备全部实验过程应避光。
称取100g鲜样，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。
如呈红色，即可用偏磷酸-乙酸溶液稀释，若呈黄色或兰色，则用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液稀释，使其pH为1.2。
匀浆的取量需根据样品中抗坏血酸的含量而定。
当样品液含量在40~100μg/ml之间，一般取20g匀浆，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml，过滤，滤液备用。
5.2 氧化处理：分别取样品滤液及标准使用液各100ml于带盖三角瓶中，加2g活性炭，用力振摇1min，过滤，弃去最初数毫升滤液，分别收集其余全部滤液，即样品氧化液和标准氧化液，待测定。
5.3 各取5ml标准氧化液于2个50ml容量瓶中，分别标明"标准"及"标准空白"。
5.4 各取5ml样品氧化液于2个50ml容量瓶中，分别标明"样品"及"样品空白"。
5.5 于"标准空白"及"样品空白"溶液中各加5ml硼酸-乙酸钠溶液，混合摇动15min，用水稀释至50ml，在4℃冰箱中放置2h，取出备用。
5.6 于"样品"及"标准"溶液中各加入5ml50%乙酸钠溶液，用水稀释至50ml，备用。
5.7 荧光反应取"标准空白"溶液，"样品空白"溶液及（5.6）中"样品"溶液各2ml，分别置于10ml带盖试管中。
在暗室中迅速向各管中加入5ml邻苯二胺，振摇混合，在室温下反应35min，用激发光波长338nm、发射光波长420nm测定荧光强度。
标准系列荧光强度分别减去标准空白荧光强度为纵坐标，对应的抗坏血酸含量为横坐标，绘制标准曲线或进行相关计算，其直线回归方程供计算时使用。
6. 计算X=（c×V/m）×F×(100/1000)式中：X-----样品中抗坏血酸及脱氢抗坏血酸总含量，mg/100g；c------由标准曲线查得或由回归方程算得样品溶液浓度，μg/ml；m-----试样质量，g；F------样品溶液的稀释倍数；V------荧光反应所用试样体积，ml。
例：测定每一制备溶液的荧光强度。
用标准溶液每ml含2.5μg、5.0μg、7.5μg及10.0μg，各标准浓度管读数减去相应的标准空白读数的各平均值做标准曲线。
由样品液读数减去样品液空白读数之值，从标准曲线上查得相应的抗坏血酸（μg/ml），按取样量及稀释率计算样品中抗坏血酸的含量。
如：取制备好的辣椒样品2.138g，稀释到100ml，氧化后分别取10ml滤液稀释到50ml样品读数为23.34，样品空白读数为3.188，样品读数减去样品空白读数为20.152，查荧光标准曲线相当标准抗坏血酸的2.23μg。
2.23×100× 50× 100---------------- --------= 52（mg/100g）2.138× 10 ×10007. 注意事项7.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生素C。
7.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。
7.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。
我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。
二、2，4-二硝基苯肼法1．原理总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。
样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。
2．适用范围GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。
3. 仪器3.1恒温箱：37±0.5℃3.2可见-紫外分光光度计3.3打碎机4．试剂本实验用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯。
4.1 4.5mol/L硫酸：谨慎地加250ml硫酸（比重1.84）于700ml水中，冷却后用水稀释至1000ml。
4.2 85%硫酸：谨慎地加900ml硫酸（比重1.84）于100ml水中。
4.3 2%2，4-二硝基苯肼溶液：溶解2g 2，4-二硝基苯肼于100ml4.5mol/L硫酸内，过滤。
不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。
4.4 2%草酸溶液：溶解20g草酸于700ml水中，稀释至1000ml。
4.5 1%草酸溶液：稀释500ml 2%草酸溶液到1000ml。
4.6 1%硫脲溶液：溶解5g硫脲于500ml 1%草酸溶液中。
4.7 2%硫脲溶液：溶解10g硫脲于500ml1%草酸溶液中。
4.8 1mol/L盐酸：取100ml盐酸，加入水中，并稀释至1200ml。
4.9 活性炭：将100g活性炭加到750ml 1mol/L盐酸中，回流1~2h，过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子（Fe3+）为止，然后置于110℃烘箱中烘干。
4.10 标准（1）抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：溶解100mg纯抗坏血酸于100ml 1%草酸溶液中。
（2）标准曲线绘制加1g活性炭于50ml标准溶液中，摇动1min，过滤。
取10ml滤液放入500ml容量瓶中，加5.0g硫脲，用1%草酸溶液稀释至刻度。
抗坏血酸浓度为20μg/ml。
取5，10，20，25，40，50，60ml稀释液，分别放入7个100ml容量瓶中，用1%硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1，2，4，5，8，10及12μg/ml。
按样品测定步骤形成脎并比色。
以吸光值为纵坐标，以抗坏血酸浓度（μg/ml）为横坐标绘制标准曲线。
5. 操作步骤5.1样品制备全部实验过程应避光。
5.1.1鲜样制备：称100g鲜样和100g2%草酸溶液，倒入打碎机中打成匀浆，取10-40g匀浆（含1-2mg抗坏血酸）倒入100ml容量瓶中，用1%草酸溶液稀释至刻度，混匀。
5.1.2干样制备：称1-4g干样（含1-2mg抗坏血酸）放入乳钵内，加入1%草酸溶液磨成匀浆，倒入100ml容量瓶中，用1%草酸溶液稀释至刻度，混匀。
5.1.3将上述两液过滤，滤液备用。
不易过滤的样品可用离心机沉淀后，倾出上清液，过滤，备用。
5.2氧化处理：取25ml上述滤液，加入0.5g活性炭，振摇1min，过滤，弃去最初数毫升滤液。
取10ml此氧化提取液，加入10ml 2%硫脲溶液，混匀。
5.3呈色反应5.3.1于三个试管中各加入4ml稀释液。
一个试管作为空白，在其余试管中加入1.0ml 2%2，4-二硝基苯肼溶液，将所有试管放入37±0.5℃恒温箱或水浴中，保温3h。
5.3.2 3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。
空白管取出后使其冷到室温，然后加入1.0ml 2%2，4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10~15min后放入冰水内。
其余步骤同样品。
5.3.3 85%硫酸处理：当试管放入冰水后，向每一试管中加入5ml85%硫酸，滴加时间至少需要1min，需边加边摇动试管。
将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色。
5.3.4 比色：用1cm比色杯，以空白液调零点，于500nm波长测吸光值。
6. 计算同荧光法。
7. 注意事项7.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用2%草酸溶液制成匀浆以保存维生素C。
7.2 若溶液中含有糖，硫酸加得太快，溶解热会使溶液变黑。
7.3 试管自冰水中取出后，颜色会继续变深，所以，加入硫酸后30分钟应准时比色。
V C测定1.原理：在有硫酸、偏磷酸存在的条件下，钼酸铵和V C反应生成蓝色络合物。
在一定浓度（2-32ug/ml）内服从比耳定律。