氨基酸序列推导

氨基酸序列推导

1.请指出天冬氨酸分别在（1）pH 1.0, (2)pH 3.0 ,(3) pH 6.0 ,(4) pH 11.0 时占优势的净电荷形

式（分别用“+”“-”“0”表示）。

2.将含有Gly, Ala , Glu ,Lys ,Arg , His 的溶液点在滤纸条的中央，用 pH 6的缓冲液浸湿，放入

电场中，请问（1）哪些氨基酸移向正极？（2）哪些氨基酸移向负极？（3）哪些氨基酸停留在原处或接近原处？

3.下述每组混合物分别在正丁醇-醋酸-水系统进行纸层析，指出每组中各组分的相对迁移率（假定水

相的pH 为4.5 ，用“ >”表示）：（1）.Val和Lys,(2).Phe 和Ser,(3).Ala、Val和 Leu, (4).Tyr、Ala 、Ser和 His 。

4.将含有Asp (pI=2.98),Gly (pI=

5.97),Thr (pI=

6.7),Lys (pI=9.74)的pH为3.0 的柠檬酸溶液，

加到预先用相同缓冲液平衡过的阳离子交换树脂柱上，随后用逐渐增加NaCl浓度的相同缓冲液洗脱，问这四种氨基酸的洗脱顺序？

5.将Lys ,Arg ,Asp ,Glu ,Tyr ,Ala的混合溶液在高pH 时，加到阴离子交换树脂柱上，用连续递减

pH值的溶液洗脱，请预测这些氨基酸的洗脱顺序。

6.已知一个八肽的氨基酸组成为：Asp, Ser ,Gly ,Ala ,Met ,Phe 和Lys2 ，又作了一系列分析结果

如下：（1）FDNB反应后可得到DNP-Ala,(2)胰凝乳蛋白酶水解后，得到一个四肽，其组成为：Asp, Gly, Lys, Met，此四肽的FDNB反应后得到DNP-Gly。（3）胰蛋白酶水解该八肽后得到两个三肽和一个二肽，三肽的组成分别为：Lys , Ala ,Ser和Phe , Lys , Gly。二肽经CNBr处理后产生Asp。请写出该八肽的氨基酸顺序。

7.某肽经CNBr处理得到三个肽段，其顺序分别为：Asn-Trp-Gly-Met; Gly-Ala-Leu;

Ala-Arg-Tyr-Asn-Met, 用胰凝乳蛋白酶水解此肽也得到三个片断，其中一个为四肽，用6N的盐酸水解此四肽只得到Asp2和Met,问此肽的氨基酸排列顺序？

8.根据下列数据推导出氨基酸的顺序：（1）完全水解得到Phe, Pro, Glu , Lys2, Met 。（2）用FDNB

处理得到DNP-Phe。（3）CNBr处理得到一个两肽和一个四肽。（4）胰蛋白酶水解得到两个三肽。（5）羧肽酶A或羧肽酶B处理都不能得到阳性结果。

9.一个由Ala, Cys, Lys, Phe和Ser组成的五肽，用TIPC分析，得到PTH-Ser；用胰蛋白酶水解得到

一个N端为Cys的三肽和一个N端为Ser的二肽；用胰凝乳蛋白酶水解上述三肽生成Ala 和一个二肽，写出该五肽的顺序。

10.从以下资料推出五肽的氨基酸序列：（1）含有Phe , Pro , Glu , Lys2（2）Edman 试剂处理得到

PTH-Glu （3）用胰蛋白酶、羧肽酶A和羧肽酶B处理都不能得到阳性结果。

1.（1）pH 1.0, +1；(2)pH 3.0 , 0；(3) pH 6.0, -1 ；

(4) pH 11.0，-2

2. Glu 移向正极；Gly, Ala接近原处；Lys ,Arg , His移向负极

3. Val > Lys, (2).Phe > Ser,(3) Leu > Val > Ala,(4).Tyr > Ala > Ser > His

4. Asp、 Gly 、Thr、 Lys

5. Arg ,Lys , Ala ，Tyr , Glu ,Asp ,

6. Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys- Met-Asp

7. Ala-Arg-Tyr-Asn-Met-Asn-Trp-Gly-Met-Gly-Ala-Leu;

8. 任一答案： Phe-Met-Lys-Glu-Lys-Pro

Phe-Met-Lys-Glu-Pro-Lys

Phe-Glu-Lys-Met-Pro-Lys

Phe-Glu-Lys-Met-Lys-Pro

9. Ser-Lys-Cys-Phe-Ala,

10. Glu-Phe-Lys-Pro-Lys