生物选修一 微生物培养

1．(2014·全国课标Ⅰ，39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。 (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。

(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR 可与纤维素形成________色复合物。用含有CR 的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。

(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培

据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____________________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________________。 2.(2014·课标Ⅱ，39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_________________；

然后，将1 mL

水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL 稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________________。

(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过________灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是__________。 (3)示意图A 和B 中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

题组二 其他各省市高考选萃 3．(2014·天津理综，5)MRSA 菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H 与青霉素组合使用对MRSA 菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。下列说法正确的是 ( )

A.B ．第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA 菌 C ．实验还需设计用2μg/mL 青霉素做处理的对照组 D ．蛋白质H 有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素 4．(2013·四川卷，10)由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α­淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。

(1)图甲中，过程①需要的酶有________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是___________。

(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________；推测该同学接种时可能的操作失误是________。 (3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是___________________。

(4)用凝胶色谱法分离α­淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。

考点一 微生物的实验室培养

2．为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌，科研人员做了如下实验。请回答问题：

(1)在无菌操作下，使用无菌水对泡菜汁进行________，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO3的乳酸菌培养基(MRS 培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑取有________的菌落，继续在MRS 平板上用________法分离，得到单菌落。

(2)取分离到的乳酸菌分别接种到MRS 液体培养基中，间隔取样测定pH ，目的是筛选出________的乳酸菌。

(3)取上一步筛选出的乳酸菌接种到含有NaNO2的MRS 培养基中，培养一段时间后，用________法测定NaNO2的含量，筛选出________的菌株。 1．(2014·苏、锡、常、镇调研，32)微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问

题：

(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为________，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是A→B→________(用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作________、________(用字母表示)。3．(2014·河北衡水中学二模，39)请回答下列相关问题。

(1)在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用________消毒；在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解________。

(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用________法来分离提取，还可以用________和________等提取植物芳香油的方法。

(3)为了检测某致病菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37 ℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________(填“敏感”或“不敏感”)；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B________(填“敏感”或“不敏感”)；含C滤纸片周围的透明圈比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是________。

(4)用来判断某选择培养基是否起到了选择分解纤维素的细菌的作用，要设置的对照是()

A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基

C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基

4．(2015·陕西长安五校联考)研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC－1，回答以下问题。

(1)为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用________法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于________培养基。

(2)关于制备固体培养基的叙述，错误的是________。

A．制备固体培养基时可以加入琼脂B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置

(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？________。

(4)下表的培养液pH均为4.8，若对MC－1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的________培养液。(多选

)

(5)分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC－1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是________。

(6)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定

其中含有能够分解尿素的菌株；若在以纤维素为唯一碳源的

培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，

就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

5．回答下列有关微生物培养与运用的问题。

(1)上表是筛选异养型细菌的培养基配方。从物理性质上看该

培养基属于________培养基，其中成分X除了为目的菌提供

能源，还能提供________。制备该培养基的一般操作顺序是

计算→称量→______→灭菌→______。对培养基进行灭菌的

常用方法是________。

(2)如图A、B是纯化微生物培养的两种接种方法，C、D是

接种后培养的效果。某同学接种培养后获得图C所示效果，则其采用的接种方法是[]________([]选填“A”“B”)；接种时可能的失误操作是________。

(3)微生物强化采油是利用某些微生物能降解石油、增大石油的乳化度、降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。为筛选和纯化该类微生物，应向培养基中添加________作为唯一碳源；培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取________就可获得高效菌株。