白血病患者FLT3基因第二酪氨酸激酶结构域点突变分析
【论文】急性髓系白血病FLT3基因突变
文章编号（Article ID）：1009－2137（2015）02－0322－06·论著·急性髓系白血病FLT3基因突变的研究叶丽1，纪濛濛2，孙自敏2*1安徽医科大学附属六安医院血液科，安徽六安237005；2安徽医科大学附属省立医院血液科，安徽合肥237001摘要目的：检测初发AML患者FLT3基因突变，探讨其在AML疾病特征和预后评估中的意义。
方法：应用聚合酶链反应（PCＲ）检测54例初发成人AML患者的骨髓标本FLT3基因突变。
结果：54例初发成人AML患者中FLT3-ITD突变检出率为22．22%，发生FLT3-ITD基因阳性的AML患者中伴染色体正常核型10例（占83．3%），复杂异常核型2例（占16．7%）。
FLT3-ITD基因突变阳性的AML患者的白细胞及骨髓白血病细胞比例显著高于未发生突变者（P＜0．05），但在性别、年龄、诱导化疗第1疗程CＲ率、生存率等方面两组之间差异无统计学意义。
2例出现FLT3-TKD基因突变的患者与FLT3-TKD阴性AML患者相比，在初诊时性别、年龄、白细胞计数、骨髓原始细胞比例以及第1疗程CＲ率差异均无统计学意义。
结论：FLT3-ITD突变阳性在染色体正常核型AML患者中比例较高；FLT3-ITD突变的阳性组在外周血白细胞数量和骨髓原始细胞数量方面明显高于该突变阴性组患者。
关键词FLT3基因；FLT3基因突变；急性髓细胞白血病中图分类号Ｒ733．71文献标识码A doi：10．7534/j．issn．1009-2137．2015．02．006 FLT3Gene Mutations in Acute Myeloid LeukemiaYE Li1，JI Meng-Meng2，SUN Zi-Min2*1Department of Hematology，Lu'an Hospital Affiliated to Anhui Medical University，Lu'an237005，Anhui Province，China；2Department of Hematology，Provincial Hospital Affiliated to Anhui Medical University，Hefei230001，Anhui Province，China*Corresponding Author：SUN Zi-Min，Senior Physician，Professor．E-mail：zmsun_vip@163．comAbstract Objective：This study was aimed to detect the FLT3gene mutation in patients with de-novo acute myeloid leukemia（AML），and to investigate its prognostic value and clinical significance．Methods：Polymerase chain reaction（PCＲ）was used to detect FLT3gene mutation，in bone marrow samples of54patients with de novo AML．Ｒesults：The incidence of FLT3-ITD mutation in54de-novo AML patients was22．22%，10out of12（83．3%）AML patients were identified with normal karyotype，while16．7%patients were identified as with abnormal karyotype．The peripheral blood white cell count and bone marrow blast cells were significantly higher in the patients with FLT3-ITD mutation than those in patients without FLT3-ITD mutation（P＜0．05），but there was no statistically significant difference in sex，age，CＲrate of the first course induction chemotherapy，survival rate and so on between the two groups．Two cases had FLT3-TKD gene mutation；as compared with FLT3-TKD negative AML patients there was no statistical difference in sex，age，white blood cell count，the percentage of marrow blasts and CＲrate of the first course of treatment at the initial diagnosis．Conclusion：FLT3-ITD mutation positive likely occurs in AML patients with normal karyotype，the FLT3-ITD mutation is associated with higher peripheral white cell count and higher percentage of bone marrow blast cells．Key words FLT3gene；FLT3gene mutation；acute myeloid leukemiaJ Exp Hematol2015；（2）：322－327急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）是一组起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病，基因突变是肿瘤细胞除染色体异常以外的重要遗传学改变的特征。
急性髓系白血病FLT3-ITD基因突变分析
急性髓系白血病FLT3-ITD基因突变分析陈姣;王晓冬;贾永前【摘要】AIM:To investigate the mutation of FLT3-ITD gene in the patients with newly diagnosed acute myeloid leukemia (AML). METHODS:From March 1, 2015 to June 1, 2017, 207 patients with AML admitted to de-partment of hematology, sichuan provincial people′s hospital were enrolled in this study. The bone marrow samples were collected from the patients. PCR was used to detect the mutation of FLT3-ITD gene. After the corresponding chromosome was obtained by R-banding, the cells were made into strips and banding. Twenty karyotypes with relatively cleavage were automatically selected from each specimen to complete karyotyping. By analysis of the clinical data and following-up the prognosis, the FLT3-ITD gene mutation in diagnostic and evaluative values for AML were performed. RESULTS:FLT3-ITD gene mutation was found in 42 cases of 207 AML patients, the positive rate was 20. 29 % . FLT3-ITD positive patients showed 3 bands. FLT3-ITD gene mutation in 42 patients with positive results showed that FLT3-ITD gene mutations in turn met the end to end, and insert a number of nucleotides, but all the mutations were in-frame mutations. According to the FAB and WHO standard, in 42 cases of FLT3-ITD positive positive patients, M0 accounted for 0.00% , M1 accounted for 2.38% (1/42), M2 accounted for 23.81% (10/42), M3 accounted for 0.00% , M4 accounted for 2.38% (1/42), M5 accounted for 69.05% (29/42), M6 accounted for 0.00% , M7 accounted for 2.38% (1/42). The white blood cell( WBC) level and complete response (CR) rate in FLT3-ITD positive patients were lower than those in FLT3-ITD negative patients (P<0.05). CONCLUSION:The WBC level and CR rate, which are lower in FLT3-ITD positive patients than those in negative patients, are the clinical risk factors. It will be helpful to determine the prognosis evaluation for AML pa-tients.%目的:探讨初发急性髓系白血病(AML)患者FLT3-ITD基因突变情况.方法:选择2015年3月1日~2017年6月1日四川省人民医院血液科收治的初发急性髓系白血病患者207例,取入组患者骨髓标本.采用PCR法检测FLT3-ITD基因的突变情况;采用染色体R显带技术在获得相应染色体后制片、显带,每份标本自动挑选出20个分裂相对清晰的核型完成核型分析,并结合临床资料、随访及预后等进行分析,评价FLT3-ITD基因突变在急性髓系白血病患者中的价值.结果:207 例 AML 患者的标本中42 例存在 FLT3-ITD 基因突变,阳性率为20.29 % . FLT3-ITD阳性患者中有3条显示带;42例FLT3-ITD基因突变阳性患者结果表明FLT3-ITD基因突变多依次首尾相接,并且其中插入多个核苷酸,但是所有的突变均为框内突变;根据FAB标准及WHO标准分级,42例FLT3-ITD阳性患者中M0占0. 00% ,M1 占2. 38%(1/42)、M2 占23. 81% (10/42)、M3 占0. 00% 、M4 占2. 38% (1/42)、M5占69.05%(29/42)、M6占0.00%、M7占2.38%(1/42);FLT3-ITD阳性患者的白细胞(WBC)水平和完全缓解(CR)率均低于FLT3-ITD阴性患者(P<0. 05).结论:FLT3-ITD基因突变阳性患者的WBC水平和CR率低于阴性患者,能作为临床危险因素用于AML患者预后的判断.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2018(034)006【总页数】4页(P1115-1118)【关键词】FLT3-ITD基因;急性髓系白血病;预后评估【作者】陈姣;王晓冬;贾永前【作者单位】四川省人民医院血液科,四川成都610072;四川省人民医院血液科,四川成都610072;四川大学华西医院血液科,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】R557+.2;R363急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是临床上常见的疾病，具有发病率高、死亡率高和治愈率低等特点，而基因突变是AML发生、发展的重要遗传性特性[1]。
白血病的基因突变与药物敏感性关联性
白血病的基因突变与药物敏感性关联性引言白血病是一种由于造血系统中某些细胞发生异常增殖导致的恶性肿瘤。
世界卫生组织（WHO）将白血病分为四大类型：急性淋巴细胞白血病（ALL）、急性髓系白血病（AML）、慢性淋巴细胞性白血病（CLL）、慢性髓系白血病（CML）。
而在治疗方面，个体化医学已成为当今治疗白血病的重要策略之一。
然而，在制定个体化治疗方案时，了解基因突变与药物敏感性关联性显得尤为重要。
一、基因突变与药物敏感性1. 白血病特定基因突变目前已经发现许多与白血病相关的特定基因突变。
例如，在AML中，发现了FLT3、NPM1、DNMT3A、IDH1和IDH2等基因的突变频率较高。
而在ALL中，常见的突变包括IKZF1、EZH2、CREBBP和E2A-PBX1等。
2. 基因突变与药物敏感性关系研究表明，白血病的特定基因突变与患者对某些药物的敏感性存在一定关联。
例如，在AML中，FLT3-ITD（内部重复）突变与对FLT3抑制剂药物敏感性相关。
而在ALL中，IKZF1突变与对糖皮质激素敏感性降低相关。
这些发现为临床上选择合适的靶向治疗提供了指导意义。
二、基因突变通过影响信号通路改变治疗反应1. 白血病细胞信号通路与药物靶点白血病细胞中常见的异常信号通路包括RAS/MAPK、PI3K/AKT、JAK/STAT和Wnt/beta-catenin等。
各种基因突变会导致这些信号通路过度激活或抑制，从而改变细胞生长、增殖及存活。
针对这些异常信号通路的肿瘤靶向药物成为白血病个体化治疗的重要手段。
2. 基因突变调控信号通路影响治疗反应白血病患者在接受化疗或靶向治疗时，治疗效果与基因突变的调控信号通路之间存在密切关系。
通过了解患者的基因突变情况，能够预测其对某些药物的敏感性和耐受性。
例如，在FLT3-ITD突变阳性AML患者中，早期使用FLT3抑制剂可以提高治疗效果。
然而，在FLT3-TKD（酪氨酸激酶结构域）突变案例中，对FLT3抑制剂的耐药性却较高。
NPM1、FLT3、DNMT3A共突变急性髓系白血病的临床特征、预后及生物信息学分析
NPM1、FLT3、DNMT3A共突变急性髓系白血病的临床特征、预后及生物信息学分析NPM1、FLT3、DNMT3A共突变急性髓系白血病的临床特征、预后及生物信息学分析引言：急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）是一种常见的恶性血液病，其发病机制非常复杂。
近年来，随着基因测序技术的发展，人们对于AML的发病机制有了更深入的了解。
NPM1、FLT3、DNMT3A三个基因的突变在AML中非常常见，且其共突变情况较为特殊。
本文将探讨NPM1、FLT3、DNMT3A共突变AML的临床特征、预后和生物信息学分析。
一、NPM1、FLT3、DNMT3A突变的临床特征1.1 NPM1突变特征NPM1基因突变是AML中常见的一种突变类型，该突变表现为NPM1基因的内部搭桥区域发生长度变异。
NPM1突变能够引起NPM1蛋白的定位异常，进而导致细胞核内NPM1蛋白的变化。
临床表现为白细胞计数增高、粗大的原始髓细胞增多、骨髓形态学特征呈现单核细胞或单核细胞/原始髓细胞两种情况。
1.2 FLT3突变特征FLT3基因突变也是AML中常见的一种突变类型，FLT3-ITD是FLT3基因最常见的突变形式。
该突变能使得FLT3蛋白的酪氨酸激酶活性持续地被激活，从而使得细胞无法正常分化。
临床表现为白细胞计数升高、骨髓形态学特征呈现单核细胞/原始髓细胞。
1.3 DNMT3A突变特征DNMT3A基因突变是AML中又一常见的突变类型，DNMT3A突变主要发生在该基因的乙酰转移酶功能区域。
该突变可导致DNA 甲基化障碍，从而使得染色体的稳定性受到破坏。
临床表现为白细胞计数增高、骨髓形态学特征呈现单核细胞。
二、NPM1、FLT3、DNMT3A共突变AML的预后2.1 高危预后NPM1、FLT3、DNMT3A三个基因同时突变的AML患者，其预后通常较差。
这些患者的白细胞计数偏高，可能伴随着严重的骨髓增殖，因此容易出现造血干细胞和造血微环境的功能紊乱，使得治疗难度增大。
急性髓系白血病FLT3-TKD、NPM1双基因阳性突变的预后
急性髓系白血病FLT3-TKD、NPM1双基因阳性突变的预后蒋雷;陆晓雅;袁武锋;彭也【摘要】目的探讨急性髓系白血病 (AML) 患者FMS样酪氨酸激酶-3基因第二酪氨酸激酶结构域 (FLT3-TKD) 、核仁磷酸蛋白基因 (NPM1) 和FLT3-TKD+/NPM1+双阳性基因突变与预后的关系.方法回顾性分析本院198例AML 患者的临床资料, 检测其FLT3-TKD和NPM1基因, 进行标准方案诱导缓解及缓解后巩固强化化疗.随访1～40个月, 观察预后并进行疗效分析及生存分析.结果 (1) 疗效分析:与FLT3-TKD-/NPM1-组、FLT3-TKD+/NPM1-组比较, FLT3-TKD+/NPM1+组一个疗程CR率、总CR率明显升高, 复发率显著降低, 差异均有统计学意义 (P＜0.05);与FLT3-TKD-/NPM1+组比较, FLT3-TKD+/NPM1+组一个疗程CR率、总CR率及复发率差异无统计学意义 (P＞0.05). (2) 生存分析:四组的总体生存时间和无复发生存时间差异均无统计学意义 (均P＞0.05);生存曲线提示, 与FLT3-TKD+/NPM1-组比较, FLT3-TKD+/NPM1+组总体生存率、80％总体生存率、无复发生存率、80％无复发生存率明显升高, 差异均有统计学意义 (均P＜0.05);与FLT3-TKD-/NPM1+组和FLT3-TKD-/NPM1-组比较, FLT3-TKD+/NPM1+组总体生存率、80％总体生存率、无复发生存率、80％无复发生存率差异均无统计学意义 (均P＞0.05).结论 FLT3-TKD+/NPM1-基因的AML患者预后较差, 而FLT3-TKD+/NPM1+基因预后良好, 具有低复发率, 治疗高反应性特点;检测分析AML患者FLT3-TKD及NPM1基因可以指导临床治疗及判断预后.【期刊名称】《浙江实用医学》【年(卷),期】2018(023)006【总页数】3页(P398-400)【关键词】急性髓系白血病;双基因突变;FLT3-TKD;NPM1;预后【作者】蒋雷;陆晓雅;袁武锋;彭也【作者单位】浙江省人民医院, 浙江杭州 310014;浙江省人民医院, 浙江杭州310014;浙江省人民医院, 浙江杭州 310014;浙江省人民医院, 浙江杭州 310014【正文语种】中文急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）是成人中最常见的一种血液系统恶性肿瘤，来源于髓系造血干/祖细胞的恶性克隆性、增殖性疾病。
急性白血病FLT3基因突变及其靶向抑制的研究进展
急性白血病FLT3基因突变及其靶向抑制的研究进展
孙雪梅
【期刊名称】《江苏医药》
【年(卷),期】2004(30)10
【摘要】FLT3(Fms-like tyrosine kinase 3)又称作FLK-2(fetal liver kinase-2)和STK1(human stem cell kinase-1)，是一种受体型酪氨酸激酶，与c-KIT和PDGFR同属Ⅲ型受体型PTK家族，在造血干细胞、树突状细胞、B前体细胞和自然杀伤细胞的增殖和分化中起着重要的调节作用。
FLT3基因突变与急性髓性白血病(AML)的发病密切相关，且为
【总页数】2页(P774-775)
【作者】孙雪梅
【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院,210008
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.急性髓细胞白血病FLT3基因突变及靶向治疗研究进展 [J], 彭玲;罗军
2.FLT3在急性白血病靶向治疗中的研究进展 [J], 刘涛;刘珍珍;朱平;程克棣;Lars Ronnstrand
3.PCR结合DNA测序技术检测急性白血病FLT3与NPM1基因突变及其临床意义[J], 崔丽娟;许飞;马荣;刘娟;白晓川
4.FLT3-ITD基因突变与急性白血病的临床研究 [J], 徐玉秀;张勇刚;许春玲
5.急性白血病FLT3/ITD、C-Kit基因突变预后相关性的研究 [J], 刘宁;赖永榕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
白血病患者FLT3基因和NPM1基因突变的临床分析
白血病患者 FLT3基因和 NPM1基因突变的临床分析【摘要】目的：探讨白血病患者的NPMI（核仁磷酸蛋白）和FLT3（FMS样的酪氨酸激酶3）基因突变的临床特征。
方法：选取2014年6月~2020年6月本院血液科收治的80例成人白血病（AML）患者为本次研究对象，初次治疗时收集骨髓单个核细胞并采用DNA-聚合酶链反应方法将其各自扩增为FLT3和NPMI基因，并用毛细管电池方法扩增NPM1基因第12外显子，FLT3基因突变：在5 ul 聚合酶链反应产物于20 g/L琼脂糖凝胶上进行电泳，观察患者基因突变特征。
结果：80例患者中，其中初诊白血病患者中FLT3+共检测出56例（70.0%），中正常核型白血病患者有41例（82.0%）高于异常核型白血病患者15例（P<0.05），而NPM1+共检测出52例（65.0%），其中正常核型白血病患者占39例高于异常核型13例，（P<0.05）。
FLT3+白血病患者中的总生存率占80.4%，FLT3-白血病患者的总生存率45.8%，差异显著（P<0.05）；NPM1+白血病患者的总生存率占78.8%显著较高于NPM1-总生存率48.2%（P<0.05）。
结论：临床造成髓系白血病中的NPMI和FLT3属于最常见的基因突变类型，并且与患者的临床特征和预后均存在一定的相关性。
【关键词】AML;FLT3基因;NPMI;基因突变1资料与方法1.1临床资料选取2014年6月~2020年6月本院血液科收治的80例成人白血病（AML）患者为本次研究对象，并依据白血病（FAB）等血细胞形态学分型诊断标准，将其分成M1、M2、M3、M4、M5、M6，分别占17例、17例、11例、9例、4例、4例，其中正常核型白血病患者占50例、异常核型白血病患者占30例，男性患者占35例、女性患者占45例，年龄为19~54岁，平均年龄为（32.52±10.68）岁，所有白血病患者及家属均自愿参与该项研究，并签署知情同意书，试验前，经本院伦理委员会批准。
急性髓系白血病FLT3抑制剂及耐药机制的研究进展
◇综述与讲座◇摘要FMS 样酪氨酸激酶3（FMS-like tyrosine ki-nase 3，FLT3）基因突变在急性髓系白血病（AML ）中发生率最高，且与不良预后相关。
针对FLT3突变已经开发了多种靶向抑制剂，且取得了较好的临床疗效。
但随之出现的耐药为FLT3靶向治疗AML 带来新的挑战。
本文将对FLT3突变在AML 中的病理和预后作用、目前常用FLT3抑制剂（Ⅰ型和Ⅱ型）的研究进展、FLT3抑制剂耐药的机制及如何克服作一综述。
关键词急性髓系白血病；FLT 3抑制剂；耐药中图分类号：R733.71文献标志码：A文章编号：1009-2501(2024)01-0090-09doi ：10.12092/j.issn.1009-2501.2024.01.010急性髓系白血病（acute myeloid leukemia ，AML ）是一类生存期短，预后较差的血液系统恶性肿瘤。
在过去40年间，阿糖胞苷（Ara-C ）和蒽环类药物组成的“3+7方案”是AML 初始诱导治疗的标准方案，可治愈30%～40%的年轻AML 患者，但60岁以上老年患者的5年生存率仅10%～15%［1］。
近年来，AML 的分子机制研究取得了显著进展，细胞遗传及分子生物学特点成为靶向治疗选择及预后判断的重要依据。
新诊断AML 患者约30%携带FMS 样酪氨酸激酶3（FMS-like tyro-sine kinase 3，FLT3）基因突变，基于此，目前已有多种FLT3的小分子抑制剂上市，从而改变了FLT3突变AML 的治疗模式。
1FLT3突变与AML1.1FLT3结构与激活FLT3属于受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase ，RTKs ）的Ⅲ类家族，该家族参与造血细胞的增殖、分化和存活。
FLT3通常在CD34+造血干细胞、髓系祖细胞、淋巴祖细胞表面选择性表达［2］。
FLT3包含4个区域：免疫球蛋白样细胞外结构域、跨膜结构域、近膜结构域（JM ）、细胞内C 端酪氨酸激酶结构域（TKD ）。
急性髓系白血病FLT3基因突变的研究
ＡＭＬ的发生、进展存在较密切关系，已被公认是 ＡＭＬ发生率最高的系白血病ＦＬＴ３基因突变的研究
ｋｉｎａｓｅ
・３２３・
构域（ｔｙｒｏｓｉｎｅ 进行研究。
物长度３２９
ｂｐ；Ｄ８３５－Ｆ：５ ７一ＧＣＴＣＧＧＡＡＴＣＴＧ． ５’一ＣＡＣＣＡＣＡＧＴＧＡＧＴＧ—
资料采用ｔ检验：计数资料采用卡方检验，Ｐ＜０．０５ 为差异有统计学意义。
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ＣＡＧＴＩ＇Ｇ－３’，ＰＣＲ产物长度４８０
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ｂｕｆｆｅｒ ２．５斗ｌ
・３２２・
中国实验血液学杂志Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ
Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２０１５；２３（２）：３２２—３２７
文章编号（Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ）：１００９—２１３７（２０１５）０２—０３２２—０６
・论著・
急性髓系白血病ＦＬＴ３基因突变的研究
叶丽１，纪淳濠２，孙自敏２＋
安徽医科大学附属六安医院血液科，安徽六安２３７００５； ２安徽医科大学附属省立医院血液科，安徽合肥２３７００１
ｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｌｕ’ａｎ ＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＡｎｈｕｉＭｅｄｉｃａｌ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｕ’ａｎ ２３７００５，ＡｎｈｕｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ；２Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
１Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ
Ａｂｓｔｒａｃｔ ｍｙｅｌｏｉｄ
Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ．Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｎＫＦ／／ｎ—ｖ／ｐ＠１６３．ｃｏｒｎ
白血病的基因突变与靶向治疗
白血病的基因突变与靶向治疗引言：白血病是一种由于异常增殖和发育的幼稚白细胞引起的血液系统恶性肿瘤。
随着分子生物学和遗传学的发展，揭示了白血病发生和发展中涉及的基因突变。
这些突变在特定靶点上导致异常信号传导，进而推动白血病细胞的生长和增殖。
针对这些基因突变设计和开发靶向治疗药物已成为当前白血病治疗策略的关键。
一、白血病常见的基因突变1. FLT3 基因突变FLT3 (FMS样酪氨酸激酶3) 是一种受体型酪氨酸激酶，它参与调节正常造血以及对抗感染。
在部分急性髓系或淋巴系白血病患者中，FLT3 基因出现内含子重复或点突变导致蛋白质活化区域改变，使其持续被激活，并促进细胞增殖和存活。
针对 FLT3 基因突变的靶向治疗药物已经成功开发，如 FLT3 抑制剂。
2. RAS 基因家族突变RAS 基因家族包括 KRAS、NRAS 和 HRAS。
这些基因编码一类关键调节细胞生长和分化的蛋白质 GTP酶，参与多种信号通路。
在某些白血病患者中，RAS 基因发生突变会使其过度活化，导致细胞无限增殖和转移。
针对 RAS 突变的药物研究仍处于探索阶段，但相关的靶向抑制剂已成为白血病治疗的重要方向。
二、基于基因突变的靶向治疗策略1. 静态单靶标药物针对特定突变蛋白静态单一目标的药物是当前最常用的基于基因突变的靶向治疗策略之一。
通过抑制异常克隆细胞特定受体或酶活性，这些药物可以有效地抑制肿瘤生长和扩散，并改善患者预后。
2. 多靶点联合治疗白血病细胞往往存在多个基因突变，一种突变可能只是诱导生长的冰山一角。
因此，采用多种针对不同靶点的药物联合治疗可以提高疗效。
通过抑制多条信号通路上的关键分子活性，可以更全面地干预白血病细胞增殖和存活。
三、基于基因突变的靶向药物在临床中的应用1. Imatinib 治疗慢性髓性白血病作为第一个成功应用于临床的靶向治疗药物，Imatinib 针对慢性髓系白血病(CML) 患者中 BCR-ABL 基因融合产生的BCR-ABL 蛋白质活性展现出极高的选择性和有效性。
急性髓系白血病细胞Flt_3表达及Flt_3_ITD突变分析_汪亚伦
文章编号(A rticle I D):1009-2137(2006)03-0446-04论著急性髓系白血病细胞F lt-3表达及F lt-3/I TD突变分析汪亚伦,王彤,许凤1,冮岩,王杰沈阳医学院生化及分子生物学教研室,沈阳110034;1东京大学医学院血液研究室,东京摘要 本研究探讨急性白血病(acute leuke m ia,AL)细胞株F lt-3基因表达和F lt-3/IT D突变与急性白血病特别是急性髓系白血病(acut e m yeloid leuke m ia,AM L)发病的关系。
采用R T-PCR分析联合测序的方法检测82例白血病细胞株,其中包括20例AM L细胞株和57例急性淋巴细胞白血病细胞株(ALL),5株CM L细胞株的F lt-3表达和F lt-3/IT D突变。
结果表明:77例AL细胞株中有48例F lt-3表达阳性,阳性表达率为62%,其中20例A M L 细胞株中有12例阳性,阳性表达率为60%;57例ALL细胞株中有33例阳性,阳性表达率为58%。
5例CM L细胞株中有3例阳性,阳性表达率为60%。
12例F lt-3表达阳性的AM L中有1例A M OL细胞株存在有异常表达(阳性率为8.3%),测序显示存在有29bp的两个编码重复序列,其余F lt-3表达阳性的细胞株未检出重复序列。
未分化B细胞系F lt-3基因表达阳性率明显高于成熟B细胞ALL(P<0.05)。
结论:F lt-3基因在不同种类的白血病细胞中存在着不同程度的表达,在其中1例AM L中发现有F lt-3/ITD重复序列。
F lt-3基因及F lt-3/ITD突变检测可能有助于ALL特别是AM L的诊断。
关键词 AM L;F lt-3基因;F lt-3/ITD突变中图分类号 R733.71文献标识码 AAnalysis of F lt-3E xpression and Flt-3/I TD M utati on i n A cute M yeloi d Leuke m i a CellsW ANG Ya-Lun,W ANG Tong,XU Feng1,G A NG Yan,W ANG JieDepart men t o f B i ochem i s tr y and M olecu l ar B i o l ogy,Shenyang M ed i ca l Coll ege,Shenyang110034,China;1D i vision of H e m atology, M ed ica lCo ll ege,Tokyo U niversity,Tokyo JapanAbstract This study was a i m ed t o exp l ore t he relati onsh i p bet w een F lt-3expression,F lt-3/IT D m u t a tion i n acut e leukem ia(AL)ce ll line and pathogenes i s of AL,espec i a lly A M L.The F lt-3expressi on and F lt-3/ITD m u t a tion w ere detec t ed by RT-PCR and sequenc i ng m e t hod i n82leukem i a ce ll li nes i nclud i ng20A M L,57ALL and5CM L cell li nes.The resu lts i ndicated t ha t positive result s of F lt-3expression w ere obta i ned i n48out of77AL cell li ne,t he pos itive ra t e w as62%;12ce ll li nes were positi ve i n20AM L cell li nes,t he pos iti ve ra te was60%;33ce ll li nes w as positi ve i n57 ALL ce ll li nes,the positive ra te w as58%;3cell li nes were positive i n5CM L cell li nes,t he pos itive rate w as60%.There was abnor m al gene produc t i n1AM OL ce ll line ou t of12AM L ce ll li nes w it h F lt-3positive expressi on(pos iti ve ra te8.3%).DNA sequenc i ng of abnor m al gene product sho wed t wo codi ng duplicati on sequence w ith29bp long.The positive ra te of F lt-3expressi on i n und ifferenti a t ed ce ll line w as pro m i nen tly h i gher than tha t in m a t ure B ce ll ALL(P<0.05).I t is concluded that the F lt-3expressi on i s d ifferen t i n var i ous leuke m i a cells.F lt-3/ITD dupli ca tion w as found inone AM L cell li ne.The detecti on of F lt-3gene and F lt-3/ITD m uta tion m ay con tribute to the d iagnos i s of ALL,espe-c iall y t o A M L.K ey w ords AM L;F lt-3gene;F lt-3/ITD m uta tionJ Exp H ematol2006;14(3):446-449 近年来的研究表明,Fm s样酪氨酸激酶3(Fm s-li k e tyrosine k i n ase3,Flt-3)在正常的造血分化过程中具有重要的作用[1]。
急性髓系白血病患者 FLT3基因 ITD、TKD 突变观察及其临床分析
急性髓系白血病患者 FLT3基因 ITD、TKD 突变观察及其临床分析唐克晶;魏辉;林冬;刘云涛;周春林;王迎;秘营昌;王建祥;王敏【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2015(55)15【摘要】目的：观察急性髓系白血病（AML）患者Fms样酪氨酸激酶3（FLT3）基因内部串联重复（ITD）突变、酪氨酸激酶结构域（ TKD）点突变的发生情况，分析并比较双突变患者与单突变患者的临床资料。
方法 AML患者432例，取新鲜骨髓分离单个核细胞，提取DNA，采用PCR法对FLT3基因第14、15外显子多发突变区及第20外显子突变区进行扩增，经琼脂糖凝胶电泳，分析ITD、TKD突变情况。
收集并比较FLT3基因ITD、TKD双突变AML患者与单突变患者的性别、年龄、白细胞、血红蛋白、血小板、外周血原始细胞比例、骨髓原始细胞比例、治疗缓解情况等资料。
结果432例AML患者中共检出FLT3基因突变102例。
TKD、ITD双突变11例；FLT3基因单突变91例，其中ITD突变60例，TKD突变31例。
FLT3基因ITD、TKD双突变与单突变患者的性别、年龄、白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓原始细胞比例、外周血原始细胞比例及治疗缓解情况差异均无统计学意义。
结论少数AML患者可同时发生FLT3基因ITD、TKD突变，FLT3基因双突变患者与单突变患者临床特征无明显差异。
%Objective To observe the concurrence of acute myeloid leukemia ( AML) patients with FLT3 mutation-in-ternal tandem duplication ( FLT3-ITD) mutation and point mutation in the tyrosine kinase domain ( FLT3-TKD) , and then to analyze and compare the clinical characteristics between patients with the doublemutations and patients with single muta-tion.Methods A total of 432 patients with AML were selected.We obtained the fresh bone marrow to separate the mono-nuclear cells and extract DNA.The amplifications of FLT3 gene exons 14, 15 multiple mutation domains and exon 20 muta-tion domain was conducted by PCR.ITD and TKD mutations were analyzed by agarose gel electrophoresis (AGE).The clinical data of patient′s gender, age, white blood cells, hemoglobin, platelets, primitive cell percentages of peripheral blood and bone marrow, and remission in AML patients with both FLT3-ITD and FLT3-TKD mutations and patients with single mutation were collected and compared.Results Among 432 AML patients, 102 patients with FLT3 mutation were found, and 11 AML patients with concurrence of both FLT3-ITD and FLT3-TKD mutations;and the other 91 AML patients with only one type of FLT3 mutation, including 60 with FLT3-ITD and 31 with FLT3-TKD.There were no significant differ-ences in the gender, age, white blood cells, hemoglobin, platelets, primitive cell percentages of peripheral blood and bone marrow, and complete remission between AML patients with both FLT3-ITD and FLT3-TKD mutations and AML patients with only one mutation.Conclusions There are a few AML patients with both FLT3-ITD and FLT3-TKD mutations.No significant differences are found in the clinical feathers between patients with both types of FLT3 mutations and patients car-rying only one kind of FLT3 mutation.【总页数】3页(P1-3)【作者】唐克晶;魏辉;林冬;刘云涛;周春林;王迎;秘营昌;王建祥;王敏【作者单位】中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020; 实验血液学国家重点实验室;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020; 实验血液学国家重点实验室;中国医学科学院血液病医院血液学研究所，天津300020; 实验血液学国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R733.7【相关文献】1.急性髓系白血病 FLT3基因 ITD、TKD突变的临床特征及预后比较 [J], 邱桥成;沈宏杰;丁子轩;何军;薛胜利2.PCR-SSCP检测急性髓系白血病患者FLT3 基因及FLT3/ITD基因突变 [J], 黄晶;刘力华;张玲;刘民;谭岩3.急性髓系白血病患者外周血细胞中FLT3基因表达与FLT3/ITD突变的关系及其意义 [J], 徐兵;史鹏程;宋小燕;唐家宏;周淑芸4.FLT3-TKD基因突变对急性髓系白血病预后影响的Meta分析 [J], 戴纬;王燕;农卫霞;潘歆;龙珍珠玛;章大谦;张红霞;吴广胜5.急性髓系白血病FLT3-TKD、NPM1双基因阳性突变的预后 [J], 蒋雷;陆晓雅;袁武锋;彭也因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
FLT3—ITD基因突变与急性白血病的临床研究
FLT3—ITD基因突变与急性白血病的临床研究【摘要】目的探讨人Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复基因突变（FLT3ITD）检测对急性白血病的诊断价值。
方法通过聚合酶链反应变性高效液相色谱法，检测本院35例急性白血病患者（观察组）和35例健康体检者（对照组）骨髓FLT3ITD 基因突变情况。
结果与对照组相比，观察组阳性率明显升高，P＜005；与阴性患者相比，观察组阳性患者外周血白细胞计数、白细胞比例均明显升高，完全缓解率显著降低，P＜005。
结论FLT3ITD基因突变可作为急性白血病诊断和治疗的参考指标。
【关键词】FLT3；ITD；基因突变；急性白血病人FLT3作为Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族成员中的原癌基因，存在于细胞膜上，正常情况下，FLT3表达仅限于CD34+干/祖细胞[1]。
有报道称，急性白血病的发生、发展，与FLT3基因异常表达有关[2]。
人Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复基因突变（Fmslike tyrosine kinase 3 intenal tandem duplication，FLT3ITD）是FLT3近膜区的突变形式[3]。
本研究中，通过聚合酶链反应变性高效液相色谱法，检测驻马店市中心医院35例急性白血病患者和35例健康体检者骨髓FLT3ITD基因突变情况，现将结果报告如下。
1资料与方法11一般资料选取本院治疗的35例急性白血病患者为观察组和35例同期健康体检者为对照组，35例对照组中，男18例，女17例，年龄190～740岁；35例观察组中，男19例，女16例，年龄180～730岁。
在年龄、性别方面，两组没有明显差异，具有可比性。
12检测方法通过聚合酶链反应变性高效液相色谱法，检测骨髓FLT3ITD基因突变情况。
取骨髓液大约2 ml，采用promega公司DNA提取试剂盒，提取总DNA，应用primer express V20软件，进行PCR扩增，分析PCR产物的异常图谱形态，纯化后进行测序，分析FLT3ITD序列。
联合抑制PI3Kδ、FLT3或BCL-2抗急性髓细胞白血病作用及机理研究
联合抑制PI3Kδ、FLT3或BCL-2抗急性髓细胞白血病作用及机理研究急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)是血液系统的恶性肿瘤,是成年人急性白血病中最常见的类型。
现阶段AML治疗仍以化疗为主,已持续近四十年,治愈率低且容易复发。
AML患者常存在基因突变,这些基因异常与AML的发生以及预后不良密切相关。
因此,急需寻找针对AML新的治疗策略。
研究表明,AML细胞常存在磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)信号通路异常激活。
本论文从PI3K展开研究,检测一系列AML 细胞株内各种PI3K亚型的表达情况,发现AML细胞普遍高表达PI3Kδ,而PI3K 其他的亚型则有不同程度的表达,提示PI3Kδ可能是AML的潜在治疗靶点。
然而,目前被FDA批准上市的PI3Kδ抑制剂CAL101仅对淋巴瘤有较好的治疗效果,对AML的疗效较弱,因此,本论文研究重点在于找寻其他分子靶点与PI3K δ进行联合抑制来治疗AML。
约30%的AML成年患者中存在FMS样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase 3,FLT3)突变,这是AML患者中最常见的基因突变类型,所以FLT3已经成为治疗AML的重要分子靶点。
然而,FLT3抑制剂单用一段时间后容易产生获得性耐药,因此,FLT3抑制剂同样需要联合用药策略来维持其治疗效果。
于是,本论文首先研究联合抑制PI3K δ和FLT3抗AML的作用。
结果显示,PI3Kδ抑制剂与FLT3抑制剂联合用药,在FLT3激活的AML细胞株MV-4-11和EOL-1中存在协同增殖抑制作用,而对于不依赖FLT3信号通路存活的RS4;11和HEL细胞则没有协同抑制作用。
在MV-4-11细胞中,进行PI3Kδ和FLT3的RNA水平共干扰实验,同样可以观察到这种协同增殖抑制作用。
PI3Kδ抑制剂和FLT3抑制剂联合应用协同下调FLT3激活的AML细胞内AKT 和ERK的磷酸化水平,并且协同诱导细胞凋亡。
白血病患者FLT3基因第二酪氨酸激酶结构域点突变分析
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·论著 ·
白血病患者 FLT3基因第二酪氨酸激酶 结构域点突变分析
王莉红 王敏 周春林 陈森 张新伟 邢海燕 王建祥
【摘要 】 目的 研究 FLT3基因酪氨酸激酶结构域 ( TKD )点突变与急性白血病的关系及临床意 义 。方法 采用 PCR结合限制性内切酶酶切及序列测定 ,检测 143例急性髓系白血病 (AML ) 、25例 急性淋巴细胞白血病 (ALL ) 、2例急性杂合细胞白血病 (AHL ) 、17例骨髓增生异常综合征 (MDS)和 7 例慢性粒细胞白血病 2急变期 (CML 2BC)患者骨髓单个核细胞中 FLT3 基因外显子 20 中的 TKD 点突 变 ,分析其临床相关性 。结果 143例 AML患者中 9例 (6. 3% )存在 FLT32TKD 点突变 ( FLT32TKD + ) , 阳性率显著低于 FLT3基因内部串联重复 ( ITD )突变 ( 25. 9% , P < 0. 01) 。 FLT32TKD +存在于 AML 2 M2 (3 /53) 、M3 (3 /40) 、M5 ( 2 /23 ) 、M6 ( 1 /2 )亚型中 。 2 例 FL T32TKD + 患者同时存在 FLT32ITD 突变 , M2、M3 各 1例 。在 25例 ALL、2例 AHL、17例 MDS和 7例 CML 2BC患者中未检测到 FLT32TKD + 。测 序分析显示 TKD 点突变累及密码子 D835,未改变 FLT3的开放式阅读框架 ,为错义突变 。D835的第 1 个核苷酸 G被 T替换 ,即 D835Y。 FLT32TKD +组和 FLT32TKD - 组在性别 、年龄组成 、白细胞计数 、骨髓 原始细胞比例及化疗缓解率方面差异无统计学意义 。结论 AML 患者中 FLT32TKD 点突变的阳性率 显著低于 FLT32ITD。 TKD 点突变累及密码子 D835,为错义突变 。 TKD 点突变可单独存在 ,也可与 ITD 同时存在 。与 FLT32ITD 相比 , TKD点突变与高白细胞无关 。 【关键词 】 基因 , FLT3 ; DNA突变分析 ; 白血病
急性白血病FLT3／ITD、C-Kit基因突变预后相关性的研究
急性白血病FLT3／ITD、C-Kit基因突变预后相关性的研究目的探讨FLT3内部串联重复(internal tandem duplication,ITD)与C-Kit基因突变与急性白血病突变预后相关性。
方法利用PCR扩增技术结合DNA测序技术分析33例急性髓系白血病(AML)，13例急性淋巴细胞白血病(ALL)，急性混合细胞白血病6例患者骨髓单个核细胞中FLT3/ITD基因与C-Kit基因突变率，分析FLT3/ITD基因与C-Kit基因突变阳性患者的表达水平及疗效。
结果急性髓系白血病(AML)患者的FLT3/ITD基因及C-Kit基因平均表达水平高于急性淋巴细胞白血病患者(P＜0.05)。
33例初治急性白血病FLT3/ITD阳性及C-Kit阳性的患者治疗后缓解率低于阴性患者。
结论FLT3/ITD及C-Kit基因是急性白血病中常见的基因突变类型，均属于III型受体酪氨酸激酶家族成员，与白血病的发生及预后有相关性。
标签：急性髓系白血病；FLT3/ITD基因;C-Kit基因急性髓系白血病(AML)是成人急性白血病的一种主要类型，其在临床上及细胞遗传学上均具有异质性。
基因突变可导致细胞增殖、分化及凋亡途径的改变，是AML的发病基础。
基因改变可表现为染色体的缺失、易位、重复和倒位等，但有些基因异常如重排、点突变等不能反映在染色体上，所以有相当一部分AML 患者的染色体核型是正常的。
近年来，随着对髓系肿瘤生物学遗传因素认识的不断深化，发现遗传学特征(细胞遗传学和分子遗传学)是影响AML患者预后最重要的独立因素［1］。
到目前为止，染色体诊断为成人AML的预后提供了最重要的评估信息，利用细胞遗传学特征给患者的预后分层并调整治疗方案可提高患者的治疗效果［2~5］。
但是，大约50%的AML患者在常规染色体显带分析中缺乏克隆染色体畸变［3，4］，因此对预后不同的亚群患者主要是利用分子遗传学的方法［9~16］进行区分。
FLT3基因及其与白血病的关系
FLT3基因及其与白血病的关系发表时间：2009-07-20T14:21:31.623Z 来源：《中外健康文摘》2009年第15期供稿作者：刘培清赵雪芸 (包头市中心医院血内科内蒙古包头 01 [导读] FLT3基因突变与急性髓系白血病（AML）的发生、预后有关，本文就FLT3基因及其与白血病的关系作一综述。
FLT3 基因即FMS样酪氨酸激酶3（Fms-like tyrosine kinase 3）也称为胎肝激酶2（fetal liver kinase-2）或人干细胞激酶1（human stem cell kinase-1 , STK-1），与集落刺激因子1受体（CSF1R或 FMS）、血小板衍化生长因子（PDGFR）、干细胞因子受体（KIT）等同属于Ⅲ型受体酪氨酸激酶 (class Ⅲ receptor tyrosine kinase , RTKⅢ)家族。
近年研究发现，FLT3基因突变与急性髓系白血病（AML）的发生、预后有关，本文就FLT3基因及其与白血病的关系作一综述。
1 FLT3的结构与表达人FLT3基因位于染色体13q12上，全长约100kb，共包含24个外显子。
其结构由胞外区、跨膜区和胞内区三部分组成，胞外区有5个免疫球蛋白样功能区，跨膜区有不连续的激酶作用位点，胞内区为氨基酸激酶催化域。
正常情况下FLT3表达于肝、脾、淋巴结、胸腺、性腺、脑等各种组织。
FLT3表达于多种人和鼠髓系及B 淋系细胞株。
在骨髓中，FLT3表达限于CD34+干/祖细胞。
小鼠骨髓移植实验显示缺乏FLT3干细胞重建T淋系及髓系的功能降低,说明FLT3在多能干细胞发生分化过程中起重要作用。
FLT3配体（FLT3 ligand,FL）为Ⅰ型跨膜蛋白,并可自膜释出成为可溶性同二聚体蛋白,表达于骨髓造血微环境组织,以及髓系、B淋系、T淋系造血细胞。
FLT3与FL在造血干/祖细胞的增殖和分化中起重要的调节作用。
当FL与FLT3的细胞外结构域结合时,FLT3二聚体化,使激酶结构域的活化环(activation loop,A loop)构象发生改变,酪氨酸残基磷酸化,从而与多种胞浆蛋白作用，介导一系列细胞内信号传导，导致细胞增殖和活化。
白血病Flt3基因近膜区突变的检测和分析
白血病Flt3基因近膜区突变的检测和分析赵敏;王小华;李铁臣;赵跃华【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2011(023)004【摘要】目的:检测白血病Flt3基因近膜区突变,探讨与白血病发生、发展的关系.方法:采用PCR、PCR-SSCP和DNA测序方法,对60例白血病患者骨髓标本Flt3基因外显子14、15进行检测,以20名健康志愿者骨髓标本作为对照.结果:在60例白血病患者中,发现8例Flt3-ITD突变,3例Flt3-L576P点突变,其中1例合并有Flt3基因内含子14缺失突变.结论:白血病Flt3-L567P点突变是近膜区新发现的点突变,可能与白血病的发生、发展相关.%OBJECTIVE:To identify the relationship between the pathogenesis of leukemia and Flt3 gene by detecting the mutations in juxtamembrane domain coded by Flt3.METHODS:We tested exons14,15 of Flt3 gene using PCR,PCR-SSCP and gene sequence in 60 leukeamia patients' bone marrow samples.RESULTS:8 Flt3-ITD mutations,another 3 Flt3-L576P point mutations were found in juxtamembrane domain in 60 patients,including 1 patient with a deletion of intron 14.CONCLUSION:Flt3-L576P is a new point mutation site,which might be associated with the pathogenesis and development of leukemia.【总页数】4页(P294-297)【作者】赵敏;王小华;李铁臣;赵跃华【作者单位】皖南医学院附属芜湖市第二人民医院血液内科，安徽芜湖241001;皖南医学院附属芜湖市第二人民医院血液内科，安徽芜湖241001;皖南医学院遗传研究室，安徽芜湖241001;皖南医学院遗传研究室，安徽芜湖241001【正文语种】中文【中图分类】Q754【相关文献】1.PCR-SSCP检测急性髓系白血病患者FLT3 基因及FLT3/ITD基因突变 [J], 黄晶;刘力华;张玲;刘民;谭岩2.急性髓系白血病患者 FLT3-ITD 基因突变检测的意义 [J], 谢伟成;程淑琴;林翠芳;谢碧霞3.慢性粒细胞性白血病FLT3基因及FLT3/ITD基因突变的检测及意义 [J], 徐兵;田红;周淑芸4.PCR-SSCP分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变及意义 [J], 徐兵;李琳;唐家宏;周淑芸5.急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变的检测及临床意义 [J], 徐兵;李冰;唐家宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
白血病患者外周血FLT_3基因突变的研究
白血病患者外周血FLT_3基因突变的研究赵敏;赵丽;李铁臣;汪兴洪【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》【年(卷),期】2008(16)2【摘要】目的本实验通过对不同类型白血病患者外周血Flt3基因突变的研究,探讨Flt3基因与白血病发生的相关性,以骨髓标本对照,确定外周血Flt3基因检测白血病的新方法。
方法从34例白血病患者和10名健康人外周血标本中提取基因组DNA,聚合酶反应(PCR)扩增Flt3基因外显子14-15,PCR产物经电泳纯化后进行DNA 测序分析。
结果对34例血样标本均扩增出Flt3基因的外显子14-15的靶基因片段经琼脂糖电泳显示3例阳性带。
选择11例特征性标本测定外显子14-15的DNA序列,发现5例突变,其中2例为ITD,内串联复制重复序列分别为30bp和33bp,编码10和11个氨基酸;3例均在近膜区(JM)外显子14、L576P发生点突变,其中1例伴有内含子14缺失,长度90bp。
10名健康者标本均为阴性。
结论Flt3基因突变和白血病发生、发展相关,外周血可以替代骨髓检测FLT3突变;FLT3-ITD 阳性患者化疗缓解率低、易复发、预后差;外显子14、L567突变点是否为FLT3一个新的突变热点需进一步研究。
【总页数】4页(P20-23)【关键词】Flt3突变;聚合酶链反应;DNA测序;白血病;外周血【作者】赵敏;赵丽;李铁臣;汪兴洪【作者单位】兰州大学第一医院血液科;皖南医学院遗传研究室;皖南医学院附属弋矶山医院血液科【正文语种】中文【中图分类】R733.7【相关文献】1.43例白血病患者FLT3基因和NPM1基因突变的临床研究 [J], 杨晓哲2.慢性淋巴细胞白血病患者外周血p53基因突变观察 [J], 朱家斌;周立涛;王晓炜;徐卫;于亮;李建勇3.初诊慢性粒细胞白血病患者ABL激酶区基因突变的研究 [J], 邢宏运;卞铁荣;李晓明;吴鹏强;胡敏;李攀;陈燕4.DNA甲基转移酶3A基因突变急性髓系白血病患者临床特征及预后研究 [J], 齐悦;李薇;高素君;林海;谭业辉;刘秋菊;孙京男;梁新悦;苏龙;胡瑞萍5.慢性粒细胞白血病患者血液肿瘤相关基因突变研究进展 [J], 杨岚;曹丽霞;任慧娟;韩艳秋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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D etection of po in t m uta tion a t second tyrosine k ina se doma in of FL T3 gene in acute m yelo id leukem ia WAN G L i2hong, WAN G M in, ZHOU Chun2lin, CHEN S en, ZHAN G X in2w ei, X IN G Ha i2yan, WAN G J ian2 x iang. S ta te Key L abora tory of Experim en ta l Hem a tology, D epa rtm en t of C lin ica l Hem a tology, Institu te of He2 m a tology and B lood D iseases Hospita l, CAM S and PUM C, T ian jin 300020, Ch ina
Correspond ing au thor: WAN G J ian2xiang 【Abstract】 O bjective To evaluate the p revalence of a novel FLT3 activating mutation in tyrosine kinase domain ( TDK) in acute leukem ia patients and its clinical imp lication. M ethods Genom ic DNA
4 Huang G, Shigesada K, Ito K, et al. D imerization w ith PEBP2β p ro2 tects RUNX1 /AML1 from ubiquitin2p roteasome2mediated degradation. EMBO J, 2001, 20: 7232733.
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3 van Dongen JJM , Macintyre EA , Gabert JA , et al. Standardized RT2 PCR analysis of fusion gene transcrip ts from chromosome aberrations in acute leukem ia for detection of m inimal residual disease. Leukem ia, 1999, 13: 190121928.
acute myeloid leukem ia 1 transcrip tional corep ressor. Proc Natl Acad Sci U S A , 1999, 96: 12822212827. 8 Castilla LH , Garrett L, Adya N , et al. The fusion gene Cbfb2MYH11 blocks myeloid differentiation and p redisposes m ice to acute my2 elomonocytic leukem ia. Nature Genetics, 1999, 23: 1442146.
中华血液学杂志 2005年 6月第 26卷第 6期 Chin J Hematol, June 2005, Vol 26, No. 6
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·论著 ·
白血病患者 FLT3基因第二酪氨酸激建祥
【摘要 】 目的 研究 FLT3基因酪氨酸激酶结构域 ( TKD )点突变与急性白血病的关系及临床意 义 。方法 采用 PCR结合限制性内切酶酶切及序列测定 ,检测 143例急性髓系白血病 (AML ) 、25例 急性淋巴细胞白血病 (ALL ) 、2例急性杂合细胞白血病 (AHL ) 、17例骨髓增生异常综合征 (MDS)和 7 例慢性粒细胞白血病 2急变期 (CML 2BC)患者骨髓单个核细胞中 FLT3 基因外显子 20 中的 TKD 点突 变 ,分析其临床相关性 。结果 143例 AML患者中 9例 (6. 3% )存在 FLT32TKD 点突变 ( FLT32TKD + ) , 阳性率显著低于 FLT3基因内部串联重复 ( ITD )突变 ( 25. 9% , P < 0. 01) 。 FLT32TKD +存在于 AML 2 M2 (3 /53) 、M3 (3 /40) 、M5 ( 2 /23 ) 、M6 ( 1 /2 )亚型中 。 2 例 FL T32TKD + 患者同时存在 FLT32ITD 突变 , M2、M3 各 1例 。在 25例 ALL、2例 AHL、17例 MDS和 7例 CML 2BC患者中未检测到 FLT32TKD + 。测 序分析显示 TKD 点突变累及密码子 D835,未改变 FLT3的开放式阅读框架 ,为错义突变 。D835的第 1 个核苷酸 G被 T替换 ,即 D835Y。 FLT32TKD +组和 FLT32TKD - 组在性别 、年龄组成 、白细胞计数 、骨髓 原始细胞比例及化疗缓解率方面差异无统计学意义 。结论 AML 患者中 FLT32TKD 点突变的阳性率 显著低于 FLT32ITD。 TKD 点突变累及密码子 D835,为错义突变 。 TKD 点突变可单独存在 ,也可与 ITD 同时存在 。与 FLT32ITD 相比 , TKD点突变与高白细胞无关 。 【关键词 】 基因 , FLT3 ; DNA突变分析 ; 白血病
from bone marrow mononuclear cells of 143 cases of acute myeloid leukem ia (AML ) , 25 acute lymphocytic
基金项目 :国家杰出青年基金资助项目 (30025019) ;国家自然科学基金资助项目 (30370593) 作者单位 : 300020 天津 ,中国医学科学院 、中国协和医科大学血液学研究所 、血液病医院 实验血液学国家重点实验室 通信作者 :王建祥
5 Castill LH, W ijmenga C, W ang Q , et al. Failure of embryonic hema2
topoiesis and lethal hemorrhages in mouse embryos heterozygous for a knocked2in leukem ia gene CBFβ2MYH11. Cell, 1996, 87: 6872696. 6 Kanno Y, Kanno T, Sakakura C, et al. Cytop lasm ic sequestration of the polyomavirus enhancer binding p rotein 2 related PEBP2 /CBFβ2 SMMHC fusion p rotein inhibits PEBP2 /CBF2mediated transactivation. Mol Cell B iol, 1998, 18: 425224261. 7 Lutterbach B , Hou Y, Durst KL , et al. The inv ( 16 ) encodes an
(收稿日期 : 2004207209)
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中华血液学杂志 2005年 6月第 26卷第 6期 Chin J Hematol, June 2005, Vol 26, No. 6
leukem ia (ALL ) , 2 acute hybrid leukem ia (AHL ) , 17 myelodysp lastic syndrom s (MDS) and 7 chronic my2 elogenous leukem ia in blast crisis (CML 2BC) was screened by polymerase chain reaction ( PCR ) and gel e2 lectrophoresis for FLT32TKD point mutations. Results Among AML patients, FLT32TKD point mutation ( FLT32TKD + ) rate was 6. 3% (9 /143) , an incidence significantly lower than that of internal tandem dup li2 cation ( ITD ) mutation (37 /143, 25. 9% , P < 0. 01). According to the FAB classification, FLT32TKD point mutation was found in 3 /53 of M2 , 3 /40 of M3 , 2 /23 of M5 and 1 /2 of M6 subtypes. Two patients showed both ITD and TKD mutations. No FLT3 2TDK mutation was found in 25 ALL , 2 AHL , 17 MDS and 7 CML 2BC patients. Sequence analysis showed that one of the mutations occurred at codon 835 of FLT3. The substitution of the first nucleotide T for G of D835, resulted in D835Y, a m issense mutation. The p resence of TKD muta2 tions was related neither to age, sex, nor to WBC counts, the marrow blast percentages, and CR rates for in2 duction therapy. Conclusion The incidence of FLT32TKD + is significantly lower than that of ITD mutation. FLT32TKD mutations may occur alone or together w ith ITD mutation. In contrast to FLT32ITD mutation, TKD mutations were not associated with leukocytosis or low comp lete rem ission rate. 【Key words】 Gene, FLT3 ; DNA mutation analysis; Leukem ia