如何正确选择色谱柱
色谱柱规格的选择
要选择一根合适的商用毛细管柱,主要需要考虑以下几个因素:固定相、内径、柱长、膜厚。
下面分别就这些因素加以讨论。
1、固定相色谱理论上讲,选择固定相首选遵循相似性原则,即:用非极性固定相分析非极性物质,用极性固定相分析极性物质,用含芳香基团的固定相分析芳香族化合物。
在填充柱时代,这个想法是非常正确的,因为那个时候,分离度是首先需要把握的关键因素,分不开,就没办法想其它。
它的理由在于塔板理论的推论,即:组分在固定相中有越大的溶解度,同样的溶解度差异就会产生越大的分离度。
但是在毛细管色谱时代,分离度不再始终是分析的首选问题。
毛细管具有几十万块塔板,如此大的柱效率,以至于不再需要充分考虑分离问题了。
这个时候,样品兼容性、使用温度、稳定性、柱流失情况等,都可能成为选择的主要理由。
例如分析甲醇乙醇丙醇等低级醇类,正常应选择wax类高极性色谱柱。
但是在杂质较少的情况下,选择DB-1这样的非极性柱具有更高的灵活性和使用寿命。
具体选择主要依据以下规则:1)、因为非极性毛细管柱具有明显的稳定性、高使用温度、良好的色谱峰型等有利因素,因此易分离物质应首先选用极性小的色谱柱。
2)、分析氢键型物质用氢键型PEG柱更佳。
3)、轻烃或永久气体用Plot柱更佳。
4)、高苯基固定相对芳香族物质保留能力更强。
但是分析二甲苯等芳烃异构体,首选Wax类强极性色谱柱。
2、内径毛细管柱理论塔板高度与内径成正比。
因此相同长度的毛细管,内径越小柱效率越高。
但内径越小,通常意味着柱容量的减小,在分析低含量组分时,对检测器灵敏度和进样口分流能力的要求越高。
因此在选择内经的时候,首先考虑的是样品分析难点在于分离还是检测。
对于分离困难的样品,首选较小口径的色谱柱;对于含量过低检测困难的样品,首选较大口径的色谱柱。
在没有分析难点的情况下,选择小口径毛细管柱可以缩短柱长,减小分析时间。
下面一张谱图,可以看到不同口径毛细管柱的分离效果。
下面一张表格,是不同口径毛细管柱理论塔板数的参考数据。
选择和使用色谱柱的正确姿势 色谱柱操作规程
选择和使用色谱柱的正确姿势色谱柱操作规程色谱是一种分别分析手段,分别是核心,所以担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
色谱柱的分别效果取决于所选择的固定相以及色谱柱的制备、操作条件。
那么,关于色谱柱的常识你知道多少呢?又应当如何选择合适的色谱柱?下面就来科普一些色谱柱的小学问。
一、柱子可以分为:加压,常压,减压压力可以加添淋洗剂的流动速度,削减产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率高的,但是时间也长,比如,天然化合物的分别,一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够削减硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是,由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必需同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱仿佛,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的供应可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)。
特别是在简单分解的样品的分别中适用。
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分别效果。
个人觉得加压柱在一般的有机化合物的分别中是比较适用的。
二、关于柱子的尺寸,应当是又粗又长的好柱子长了,相应的塔板数就高。
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分别的难度。
试想假如柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分别的难度可想而知,或许要用很低极性的溶剂渐渐冲了。
而假如样品层只有 0.5 厘米,那么各组分就比较简单得到完全分别了。
当然接受粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说或许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分挥霍)。
现在见到的柱子径高比一般在 1:5~10,书中写硅胶量是样品量的 30~40倍,实在的选择要实在分析。
气相色谱柱的选择
气相色谱柱选择指南1)柱长度的选择分辨率与柱长的平方根成正比。
在其他条件不变的情况下,为取得加倍的分辨率需有4倍的柱长。
较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分组成的样品。
一般来说:15m的短柱用于快速分离较简单的样品,也适于扫描分析;30m的色谱柱是最常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。
应该注意,柱长增加分析时间也增加。
2)柱内径的选择柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。
小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:具有较高的柱效,柱容量较低。
分离复杂样品较好。
0.32mm:柱效稍低于0.25mm的色谱柱,但柱容量约高60%。
0.53mm:具有类似于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样,当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析),选择大口径毛细管柱较为合适。
3)液膜厚度的选择液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。
厚度增加,保留也增加。
0.1~0.2m :薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快,所需柱温度低,且高温下柱流失较小,适用高沸点的化合物的分析。
0.25~0.5m :常用的液膜厚度。
厚液膜:对分析低沸点的化合物较为有利。
4)固定相的选择不同的固定相对不同的分析物的影响不同,根据相似相溶原理,性质越相近,固定相对其的流动阻力越大,其保留时间越长.色谱柱就是通过这个原理将不同性质的混合物相互分开的.您现在就可以看到其实气相色谱柱的分离效果主要取决于其固定相,柱长度,柱内径,液膜厚度这几个因素,从原理上讲,这几个因素相同的柱子,其分离效果是完全一样的.考虑到这一点,现在您完全根据这个更加本质的依据来选择您的气相色谱柱,而不必一定去购买昂贵的标准指定气相色谱柱.。
如何选择合适的色谱柱
如何选择合适的色谱柱选择合适的色谱柱是进行色谱分析的关键之一、下面将从样品特性、目标分析物、色谱类型、颗粒大小、树脂类型和价格等几个方面来介绍如何选择合适的色谱柱。
首先,了解样品的特性对于选择色谱柱非常重要。
需要考虑样品的溶剂极性、稳定性、蒸汽压、分子量、毒性等因素。
不同的样品特性需要使用不同类型的色谱柱来进行分析。
例如,对于挥发性组分的分析,可以选择毛细管气相色谱(GC)柱;对于溶解度较差的非极性化合物的分析,可以选择反相高效液相色谱(RP-HPLC)柱。
其次,需明确目标分析物的特性。
需要了解目标分析物的极性、分子量、疏水性等性质。
根据目标分析物的特性,选择合适的色谱柱。
例如,对于极性有机物的分析,可以选择亲水性的反相柱;对于非极性物质,可以选择亲油性的正向相柱。
再次,要根据色谱类型来选择色谱柱。
目前常用的色谱类型有气相色谱、液相色谱和离子色谱等。
选择合适的色谱柱需要根据具体的分析要求。
例如,气相色谱常用于挥发性或热稳定的化合物的分析,而液相色谱适用于大多数化合物的分离和分析。
然后,注意颗粒大小对于分离效果的影响。
颗粒大小决定了柱的保留能力和分离能力。
粗颗粒的柱具有较高的保留能力,适用于复杂样品的分离,但分离效果较差;而细颗粒的柱保留能力较低,适用于简单样品的分析,分离效果较好。
根据分析要求,选择合适的颗粒大小。
此外,树脂类型也是选择色谱柱的关键。
常用的树脂类型有聚合物、硅胶、碳氢和聚酰亚胺等。
不同的树脂具有不同的亲水性和亲油性,可以根据分析需求选择适合的树脂类型。
例如,对于极性分子的分析,可以选择亲水性树脂,而对于非极性分子的分析,可以选择亲油性树脂。
最后,还需要考虑价格因素。
不同品牌和型号的色谱柱价格有所不同。
需要根据实验室的预算来选择适合的色谱柱。
同时,还要考虑色谱柱的使用寿命和稳定性等因素,选择性价比较高的色谱柱。
综上所述,选择合适的色谱柱需要考虑样品特性、目标分析物、色谱类型、颗粒大小、树脂类型和价格等因素。
选择气相色谱柱要考虑的性能 色谱柱操作规程
选择气相色谱柱要考虑的性能色谱柱操作规程气相色谱柱除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数,是一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪气相色谱柱除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数,是一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。
广泛应用于石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面。
选择气相色谱柱时要考虑到以下性能:1、柱长气相色谱柱柱长会影响到柱效、保留(分析时间)和载气压力。
假如不知道较佳长度,优先使用25—30米长的色谱柱;10—15米的色谱柱特别适用于分别含有很简单分别溶质的样品或含溶质较少的样品;50—60米长的色谱柱适合分别含有很多组分的多而杂样品,但是长的色谱柱的分析时间较长、费用也较高。
2、内径0.15和0.18mm内径的色谱柱特别适用于泵容量低的GC/MS系统。
内径较小的色谱柱具有的柱容量最小,并需要最高的柱头压;当需要较高的样品容量时,使用0.32mm内径的色谱柱。
与0.25mm内径的色谱柱相比,它们对于不分流进样或大体积(>2?L)进样时早流出的溶质有更佳的分别度;只有在仪器配备大口径直接进样器并需要较高的柱效时,才使用0.45mm内径的色谱柱。
特别适用于高载气流速的情况,比如吹扫—捕集、顶空进样器和阀进样的应用。
3、膜厚色谱柱液膜厚度影响保留、分别度、流失、惰性和柱容量。
0.18—0.32mm内径的色谱柱平均或标准膜厚为0.18—0.25?m,可用于大多数分析;0.45—0.53mm内径的色谱柱平均或标准膜厚为0.8—1.5?m薄液膜色谱柱用于降低高沸点、高分子量溶质的保留(如,类固醇、甘油三酯)。
厚液膜色谱柱惰性更好,柱容量更大,用于保留和分别挥发性溶质(如,轻质溶剂、气体)。
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正确选购色谱柱需要注意哪些方便
正确选购色谱柱需要注意哪些方便色谱柱是气相色谱、液相色谱等分析仪器的核心部件,其性能直接影响到分析结果的准确性和可靠性。
因此,在选购色谱柱时,需要关注以下几个方面的注意事项:1、确定分析目的和样品类型首先,需要明确分析的目的和样品类型,以便选择合适的色谱柱。
例如,假如需要进行环境监测、食品安全、药物分析等领域的分析,可以选择相应的专用色谱柱;假如需要进行石油、化工、制药等行业的分析,可以选择相应的行业专用色谱柱。
2、选择合适的固定相固定相是色谱柱的核心部分,其性能直接影响到色谱柱的分别效果和稳定性。
常见的固定相有硅胶、氧化铝、聚合物等。
硅胶固定相具有较好的耐高温性和化学稳定性,适用于各种类型的样品分析;氧化铝固定相具有较高的选择性和分别度,适用于多而杂样品的分析;聚合物固定相具有良好的亲水性和选择性,适用于生物样品、食品等亲水性样品的分析。
3、选择合适的柱尺寸和内径色谱柱的尺寸和内径直接影响到色谱柱的分别效果和分析速度。
一般来说,柱尺寸越大,分别效果越好,但分析时间越长;柱内径越小,分别效果越好,但分析时间越长。
因此,需要依据实际需求选择合适的柱尺寸和内径。
4、选择合适的柱温柱温对色谱柱的分别效果和分析速度有很大影响。
一般来说,柱温越高,分别效果越好,但分析时间越长;柱温越低,分别效果越差,但分析时间越短。
因此,需要依据实际需求选择合适的柱温。
同时,还需要考虑色谱柱的热稳定性,以确保在高温下仍能保持良好的分别效果。
5、选择合适的流动相流动相是推动样品在色谱柱中移动的动力,其性能直接影响到色谱柱的分别效果和分析速度。
常见的流动相应有甲醇、乙腈、水等。
在选择流动相时,需要考虑其与固定相的兼容性、极性、粘度等因素,以确保在实际应用中能够获得良好的分别效果。
6、考虑色谱柱的品牌和价格市场上有很多不同品牌和型号的色谱柱,价格差别较大。
在选择色谱柱时,需要综合考虑品牌、价格、性能等因素,选择性价比较高的产品。
如何选择合适的气相色谱柱?
如何选择合适的气相色谱柱?选择合适的气相色谱柱需要考虑以下几个关键因素:1. 固定相类型- 非极性柱:适用于分析非极性和弱极性化合物,如聚二甲基硅氧烷(PDMS)柱。
- 极性柱:适合分离极性化合物,如聚乙二醇(PEG)柱。
- 中等极性柱:用于分析极性适中的物质,如氰丙基苯基聚硅氧烷柱。
2. 柱长- 短柱(10 - 15 米):适用于快速分析简单混合物,分离效果相对较弱。
- 中长柱(25 - 30 米):能提供较好的分离效果,适用于中等复杂的混合物。
- 长柱(50 - 60 米):对于复杂混合物或需要高分离度的情况,如同分异构体的分离。
3. 内径- 小内径(0.1 - 0.25 毫米):适用于样品量少、需要高灵敏度和高分离度的分析。
- 常规内径(0.25 - 0.32 毫米):应用广泛,能满足大多数常规分析需求。
- 大内径(0.53 毫米):适用于大体积进样或分析浓度较高的样品。
4. 膜厚- 薄液膜(0.1 - 0.25 微米):适合分析低沸点、小分子化合物,出峰快。
- 厚液膜(0.5 - 5 微米):用于保留挥发性较差的化合物,提高检测灵敏度。
5. 样品性质- 了解样品的极性、沸点范围、分子量等。
极性样品选择极性柱,高沸点样品选择厚液膜柱。
6. 分析目的- 定性分析:更注重分离度,可能选择长柱和膜厚适中的柱子。
- 定量分析:考虑灵敏度和重复性,选择与样品匹配的柱子。
7. 温度限制- 确保所选柱子能承受分析过程中的最高和最低温度。
8. 预算- 不同类型和规格的柱子价格有所差异,需根据预算进行选择。
例如,分析挥发性有机化合物(VOCs)混合物时,如果需要快速分离且样品较简单,可能会选择短的、小内径、薄液膜的非极性柱;而分析复杂的天然产物提取物时,可能需要长的、常规内径、厚液膜的中等极性柱。
综合考虑以上因素,可以选择到适合具体分析需求的气相色谱柱。
如何选用适合的色谱柱
在气象色谱法分析中,对于不同性质的样品,如何选用适合的色谱柱在气象色谱法分析中,对于不同性质的样品首先考虑的是选择什么样的检测器,其次才考虑选择什么样的色谱柱。
一、气相色谱检测器的分类和工作原理及应用范围:通用型检测器:对绝大多数物质够有响应;选择型检测器:只对某些物质有响应;对其它物质无响应或很小。
根据检测器的输出信号与组分含量间的关系不同,可分为:浓度型检测器:测量载气中组分浓度的瞬间变化,检测器的响应值与组分在载气中的浓度成正比,与单位时间内组分进入检测器的质量无关。
质量型检测器:测量载气中某组分进入检测器的质量流速变化,即检测器的响应值与单位时间内进人检测器某组分的质量成正比目前已有几十种检测器,其中最常用的是热导池检测器、电子捕获检测器(浓度型);火焰离子化检测器、火焰光度检测器(质量型)和氮磷检测器等。
二、色谱柱的分类HP-1-二甲基聚硅氧烷柱说明:这是最常用的非极性键合固定相,HP-1(二甲基聚硅氧烷),具有极好的热稳定性并且在高温下流失很小,具有低的检测限相似的固定相:DB-1,Rtx-1,SPB-1,CP Sil 5CB,MDN-1,DB-1h.t.,AT-1 007-1 恒温/程序升温温度范围:-60至325/350℃,-60至300/320℃ 0.53内径,-60至260/280℃>2.0mm液膜应用:胺类、烃类、农药、多氯联苯、酚类、含硫化合物HP-1 25m, 0.20mm, 0.33um HP-1 30m, 0.32mm, 0.25umHP-1 15m, 0.25mm, 0.25um HP-1 30m, 0.32mm, 1.0umHP-1 30m, 0.25mm, 0.25um HP-1 60m, 0.32mm, 0.25umHP-1 60m, 0.25mm, 0.25um HP-1 15m, 0.53mm, 1.5umHP-1 30m, 0.53mm, 2.65umHP-35-二苯基-65%-二甲基硅氧烷共聚物说明:HP-35柱是用苯基取代甲基的聚硅氧烷固定相柱。
安捷伦气相色谱柱选择指南
安捷伦气相色谱柱选择指南安捷伦是一家领先的科学仪器制造商,其生产的气相色谱柱质量优异,被广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。
选择合适的气相色谱柱对于确保分析结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将从三个方面为您介绍安捷伦气相色谱柱的选择指南。
一、样品特性在选择气相色谱柱之前,首先需要了解待分析样品的特性。
常见的样品特性包括:挥发性、极性、化学稳定性等。
根据样品的挥发性,可以选择非极性柱或极性柱;根据样品的极性,可以选择相应极性柱;根据样品的化学稳定性,可以选择耐化合物腐蚀的柱材。
在目标分析物与其他杂质相对较少的情况下,可以选择通用柱进行分析。
如果样品中存在复杂的混合物,可以考虑选择具有更高分辨率和选择性的专用柱。
二、应用领域不同的应用领域对气相色谱柱的要求有所不同。
安捷伦提供了多个系列的气相色谱柱,包括PDMS、PLOT、DB、HT、HP等系列。
PDMS系列适用于挥发性化合物的分析,如石油化工、环境科学等领域;PLOT系列适用于分析气体或液体样品中的极性和非极性化合物,如食品、饮料、环境空气等领域;DB系列适用于一般样品的分析,具有较好的分辨率和选择性;HT系列适用于高温分析,具有优异的耐温性能;HP系列适用于高压气相色谱,适用于复杂样品的分析。
选择适合应用领域的柱系列可以提高分析效率和准确性。
三、操作条件在选择安捷伦气相色谱柱时,还需要考虑操作条件。
常见的操作条件包括柱温、流速、载气选择等。
柱温对于分离效果和分析时间具有重要影响。
一般情况下,分析温度应保持在柱的适用温度范围内,过高或过低的柱温可能导致柱效变差。
流速在一定范围内可以影响分离效果和分析时间。
在选择载气时,需要考虑其惰性和适用范围。
通常使用的载气有氢气、氦气和氮气,其中氢气具有更高的分离效果,但相对较危险,氮气常用于常规分析。
总结来说,选择适合的气相色谱柱需要根据样品特性、应用领域和操作条件来综合考虑。
安捷伦提供了多个系列的气相色谱柱,以满足不同需求。
色谱柱的选择技巧与原则
色谱柱选择
参照标准
各种担体,名目繁多。
在常用硅藻土担体中:
红色担体(如6201、201),可用于非极性或弱极性物质的分离。
白色担体(如101)可用于极性物质或碱性物质。
釉化红色担体(如301)可用于中等极性物质。
硅烷化白色担体可用于强极性氢键型物质如废水测定。
分离酸性物质,如酚类,要用酸洗处理的担体。
分离碱性物质,如乙醇胺,要用碱洗处理的担体。
有些特殊的情况下要用特殊的担体,如氟担体分离异氰酸酯类。
但是在普通的常量分析中,对担体可以不必过份讲究,甚至如耐火砖粉粒,玻璃珠砂和海沙也可以使用。
气相色谱柱的选择 色谱柱解决方案
气相色谱柱的选择色谱柱解决方案气相色谱柱的分别效果紧要取决于其固定相,柱长度,柱内径,液膜厚度这几个因素,从原理上讲,这几个因素相同的柱子,其分别效果是完全一样的。
1)柱长度的选择辨别率与柱长的平方根成正比。
在其他条件不变的情况下,为取得加倍的辨别率需有4倍的柱长。
较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分构成的样品。
一般来说:15m的短柱用于快速分别较简单的样品,也适于扫描分析;30m的色谱柱是常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;50m、60m或更长的色谱柱用于分别比较多而杂的样品。
应当注意,柱长加添分析时间也加添。
2)柱内径的选择柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。
小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:具有较高的柱效,柱容量较低。
分别多而杂样品较好。
0.32mm:柱效稍低于0.25mm的色谱柱,但柱容量约高60%。
0.53mm:具有仿佛于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样,当柱容量是紧要考虑因素时(如痕量分析),选择大口径毛细管柱较为合适。
3)液膜厚度的选择液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。
厚度加添,保留也加添。
0.1~0.2m :薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快,所需柱温度低,且高温下柱流失较小,适用高沸点的化合物的分析。
0.25~0.5m :常用的液膜厚度。
厚液膜:对分析低沸点的化合物较为有利。
4)固定相的选择不同的固定相对不同的分析物的影响不同,依据相像相溶原理,性质越相近,固定相对其的流动阻力越大,其保留时间越长.色谱柱就是通过这个原理将不同性质的混合物相互分开的。
固定相等同产品应用使用温度BP1AC1 100%二甲基聚硅氧烷OV—1,OV101,SE—30DB—1,HP—1,Rtx—1,Ultra—1SPB—1,CP—SiL5CB常规使用,碳氢化合物,芳香化合物,农药,酚类,除草剂,胺脂肪酸甲酯,GC/MS应用0.1μm—1.0μm—60℃—340℃/360℃>1.0μm,—60℃—280℃/300℃ BP5AC5 5%苯基95%二甲基聚硅氧烷SE—54,DB—5,Rtx—5,CP—Sil8CB,SPB—5,HP—5,Ultra—2,PTE—5 芳香化合物,农药,除草剂,滥用药物,碳氢化合物0.1μm—1.0μm—60℃—340℃/360℃>1.0μm,—60℃—280℃/300℃BP10AC10 14%氰丙苯基聚硅氧烷OV17,OV1701,DB—1701,Rtx—1701,SPB—1701,HP1701,CP—Sill9CB 农药,除草剂,药物,环境样品0.25μm—1.0μm—20℃—280℃/300℃BP20AC20 聚乙二醇DB—Wax,HP20M,StabilwaxSupelcowax—10,AT—WaxNakol,CP Wax52CB 醇类,游离酸,脂肪酸甲酯,芳香化合物,溶剂,香精油0.25μm—1.0μm20℃—280℃/300℃>1.0μm,20℃—240℃/260℃BP21聚乙二醇(TPA处理)FFAP,DB—FFAP,HP—FFAP,Stabilax—DA,Cpwax—DA,Cpwax—58CB挥发性游离酸,脂肪酸甲酯,醇,醛,丙烯酸酯,酮类0.25μm—0.5μm20℃—240℃/260℃BP22550%氰丙苯基聚硅氧烷HP—225,DB—225,Rtx—225 脂肪酸甲酯,碳水化合物,中性固醇0.25μm—0.5μm40℃—220℃/240℃BPX608DB—608,Rtx—35,SPB—608有机氯农药/除草剂0.4μm0℃—360℃/370℃BP624DB—624,Rtx—VolatilesVOCOLEPA方法624,饮用水中的挥发物卤代烃,溶剂 1.2μm—1.3μm30℃—260℃/280℃CYDEX—BCyclodex—B,Rt—BDEXm天然产物的对映异构体0.25μm—0.5μm0℃—230℃/240℃HT5—模拟蒸馏MXT—1,SimDist,DistCBHT—Sim模拟蒸馏聚亚酰胺涂层柱0.5μm—20℃—380℃/400℃2.0μm,—20℃—370℃/380℃镀铝涂层柱0.75μm—0.15μm,—20℃—460℃/480℃ BP1—PONAPetrocolDH,DB—Petro1100石油烃,汔油等组份,MTBE0.5μm,—60℃—280℃/300℃ BP—Xylene二甲苯异构体拆分—20℃—240℃/260℃ OV1701—MTBEMTBE分析—10℃—120℃/140℃离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。
何选择适合的色谱柱
何选择适合的色谱柱何选择适合的色谱柱选择色谱柱时需要首先考虑的是分离规模1、根据分离规模确定色谱柱大致的规格表1按分离规模分类的高效液相色谱柱微型柱毛细管柱纳米柱柱径/mm>105~102~50.8~2.00.05~0.52、从分析物的物理化学性质抓起,找到大致的色谱柱类型选柱前应当详尽掌控分析物的分子量(或分子量范围)、溶解性、与否离解等信息,然后根据这些性质找出最合适的色谱柱类型。
表2液相色谱分离模式的选择量溶解性拆分模式色谱柱附注溶于正己正相吸附色呋喃gpcsilica2000正相键合色氰基柱、氨基柱谱溶于甲醇/水c18、c8、ph或plrp(反填料孔径通反相色谱常为100å二者聚合物色谱柱)非离子型反相色谱c18、c8、ph或plrp水溶性离子遏制色c18、c8、ph或plrp五音离子型离子对色谱c18、c8、ph或plrp色谱法色ax、cx脂溶性gpcgfc反华相色谱c18、c8、c4或plrp填料孔径通在反相色谱c18、c8、c4或plrp常为300å色谱法ax、cx大于蛋白2000水溶性多肽、质离子型对于色谱柱类型的选择有一些特殊说明:1.反相柱是使用最广泛的色谱柱,而ods又是反相柱中使用最广泛的,据统计目前使用的色谱柱中超过一半是ods柱;由于ods柱的技术最成熟,所以具有高性能、长寿命等特点,所以选择时优先选择ods柱;2.对于反相柱,通常来讲,碳链越长,对化合物的保留越强,分离效果也越好,但选择短碳链的键合相可以节约分析时间;3.反华相色谱柱可以对非极性、强极性、中等极性以及部分弱极性化合物展开拆分,就是应用领域最广泛的色谱柱;反相色谱柱以“分配促进作用”留存分析物,主要以分析物在两看中的溶解性展开挑选,有时无法对同分异构体和结构类似物展开拆分;4.部分离解性较差的化合物,可以通过向流动二者重新加入酸、碱、盐的形式并使分子以某种平衡并且留存性弱的形式存有,然后用反相柱展开分析,这种分析方法包含“离子遏制色谱”和“离子对色谱”;5.plrp就是以聚苯乙烯-二乙烯基苯为填料的色谱柱,为反相柱,奏水性与c18相似,但不具备次级相互作用,分析碱性化合物时不能出现甩尾。
液相色谱柱的选择
液相色谱柱的选择、使用、维护和常见故障及排除液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。
正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。
另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。
本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用:一、反相色谱柱的选择1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。
但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。
一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。
一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷。
同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。
如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时,建议选择PH范围大的柱子,例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-11. 5的柱子。
2.填料的端基封尾(或称封口)把填料的残余硅羟基采用封口技术进行端基封尾,可改善对极性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了,有利于不易保留化合物的分离;填料稳定性好了,组分的保留时间重现性就好。
如果待分析的样品属酸性或碱性的化合物,最好选用填料经端基封尾的色谱柱。
3.戴安公司Acclaim柱子介绍—极性封尾C16固定相柱戴安公司有28种类型的柱子,Acclaim反相柱填料高纯,金属含量极低,完全封尾。
PH 2-9范围内兼容,低流失,高柱效。
尤其是2003年推出的Acclaim极性封尾C16柱,是最先商品化的磺酰氨-O链接键的色谱柱,具极低的硅羟基活性,能在极性溶剂甚至100%水的条件下长期使用。
对酸性和碱性化合物有极为尖锐的好的色谱峰形,与现有的一流色谱柱相比有更好的立体选择性。
(下图是Acclaim极性封尾C16柱和市售极性封尾一流色谱柱分离酸性化合物谱图的比较)二、液相色谱柱的使用色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
色谱柱的分类与选择
色谱柱的分类与选择色谱柱是色谱仪器中最为重要的部分,它能够将被测物质分离、纯化、鉴定。
而色谱柱的分类与选择也会影响色谱仪器的精准性与效率。
一般来说,色谱柱可以分为活性柱、吸附柱、固相提取柱和超声波分离柱四大类。
活性柱:活性柱是最常用的一种色谱柱,也叫作有机柱,它以有机亲水性的润湿剂为填充物,如:C18、SiO2等。
活性柱的填充物表面在水中具有正电荷,能够将非电荷的水溶性物质吸附,使其分离出来。
吸附柱:吸附柱是活性柱的衍生品,它以无机粒子或有机亲水性润湿剂为填充物。
与活性柱相比,吸附柱的填充物表面不具有电荷,而是通过“吸附”的原理将有机溶液中的物质进行分离。
吸附柱可以用来分离非电荷的水溶性物质,也可以用来分离有机物质。
固相提取柱:固相提取柱是一种新型的色谱柱,它采用固体萃取剂作为填充物,它能够将有机物质从固态物质中分离出来,如石油类、脂肪类、树脂类、植物油类等。
超声波分离柱:超声波分离柱是最新开发的一种色谱柱,它利用超声波的能量进行物质的分离,是一种高效的色谱技术。
一般来说,不同的色谱柱都有各自的特点,根据实际情况,应根据所测物质的性质和分离难度,选择合适的色谱柱。
首先,应根据被测物质的性质,确定所需要的类型,如果是有机物质,则应选择活性柱或者吸附柱;如果是固体物质,则可以采用固相提取柱;如果是水溶性物质,可以采用超声波分离柱。
其次,应根据所测物质的分离难度,选择合适的色谱柱。
对于有机物质,可以采用活性柱或者吸附柱,但在活性柱和吸附柱之间,应根据所测物质的分离难度,选择合适的色谱柱,如果分离难度较高,则应采用吸附柱,如果分离难度较低,则可以采用活性柱。
最后,在选择色谱柱时,应注意其尺寸、粒径、表面积、抗氧化能力等方面,以保证色谱柱的使用性能。
总之,色谱柱的分类与选择是影响色谱仪器的精准性与效率的重要因素,应根据所测物质的性质与分离难度,选择合适的色谱柱,并在选择时,注意色谱柱的尺寸、粒径、表面积、抗氧化能力等方面,以保证色谱柱的使用性能。
选择液相色谱柱要考虑哪些因素?
选择液相色谱柱要考虑哪些因素?色谱柱是运用于色谱仪系统中起着分离作用的仪器,是色谱仪分析系统的核心部件,色谱柱柱效的高低影响着检测速率的快慢以及检测结果的准确性。
因此,为了提高色谱柱的柱效,保证液相色谱仪分析检测的灵敏性,了解液相色谱柱的选购技巧尤为重要。
选择液相色谱柱时需要考虑的主要因素包括:键合相、粒径、孔径、碳载量,下面来一一介绍:1、键合相:确定了正反相后基本就简单了,正相很简单,我们重点讨论下反相,C18主要分离非极性和弱极性物质,因为是键合硅胶,所以C18也分好几种有常规的如C18-A,耐纯水的OLAppleC18-AQ、耐酸碱的OLAppleC18-EX等,如果发现C18保留很弱,调整流动相也不行,这个时候可以考虑C8甚至C4等。
2、粒径:色谱法追求的是高效、高分辨、高速等。
目前来说亚2um填料或者2UM核壳填料是很理想的模型,基本具备“三高”特征尤其是高速,线速度不在影响分离度,不过附带的缺点就是高压,要升级相应的硬件,成本高昂,需要谨慎考虑。
5um填料普遍,目前来说完全可以胜任各种日常检测,即使有特殊要求,3um色谱填料基本上也能全覆盖,不过该模型下线速度和分离度是成反比的。
3、孔径:目前很多60~300A都有,甚至更高或者更低的。
开孔的填料多了个类似分子筛功能,所以选择孔径一定要关注分子量,蛋白(分子量5000以上)一般都需要在160A 以上,多肽(分子量上限在3000左右)在120A左右,一般快速柱孔径都很小,可以缩短样品路径。
所以国际上还有无孔硅胶柱子,也很适合蛋白分离,彻底解决蛋白分子量大和太粘稠堵住孔径问题。
4、碳载量:快速柱碳载量很低,如A家等,省时间,省溶剂,但分析部分复杂样品如中药等有点力不从心,这个时候可以考虑英国OLApple色谱柱,碳载量15~23%,碳载量数值就像河床的水草,越高代表越密集,保留样品能力越强,越有可能分离开难分离物质。
液相色谱柱。
高效液相色谱柱的选择
高效液相色谱柱的选择液相色谱柱的选择、使用、维护和常见故障的排除液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。
正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。
另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。
本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用:一、反相色谱柱的选择1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。
但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。
一般的C18柱PH值范围都在2~8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。
一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷。
同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。
如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时,建议选择PH范围大的柱子,例如戴安公司的Acclaim柱PH 2-9或Zorbax的PH 2-11. 5的柱子。
2.填料的端基封尾(或称封口)把填料的残余硅羟基采用封口技术进行端基封尾,可改善对极性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了,有利于不易保留化合物的分离;填料稳定性好了,组分的保留时间重现性就好。
如果待分析的样品属酸性或碱性的化合物,最好选用填料经端基封尾的色谱柱。
3.戴安公司Acclaim柱子介绍—极性封尾C16固定相柱戴安公司有28种类型的柱子,Acclaim反相柱填料高纯,金属含量极低,完全封尾。
PH 2-9范围内兼容,低流失,高柱效。
尤其是2003年推出的Acclaim极性封尾C16柱,是最先商品化的磺酰氨-O 链接键的色谱柱,具极低的硅羟基活性,能在极性溶剂甚至100%水的条件下长期使用。
对酸性和碱性化合物有极为尖锐的好的色谱峰形,与现有的一流色谱柱相比有更好的立体选择性。
(下图是Acclaim极性封尾C16柱和市售极性封尾一流色谱柱分离酸性化合物谱图的比较)二、液相色谱柱的使用色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
如何选择液相色谱柱
首先,要选择合适的色谱填料,就必须对此有一定的认识和了解,因为色谱填料的选择范围太宽了,分别为聚合物填料、硅胶基质填料和其它无机填料。
一、聚合物填料,聚合物填料多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等,其优点是在PH值为1—14均可使用。
这类填料具有较强的疏水性,而且大孔的聚合物对蛋白质等样品的分离非常有效。
其缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
二、硅胶基质填料1、正相色谱,正相色谱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷,氯仿,二氯甲烷等。
2、反向色谱,反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
三、其它无机填料,其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。
上面教了大家如何选择色谱填料,其实光选好色谱填料是不够的,我们还要选择填料粒度,下面就教大家如何选择填料粒度。
如何选择填料粒度?目前,高效液相色谱柱厂家色谱填料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3和5um填料进行。
填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。
粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3um的填料应用。
在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是唯一的因素。
如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小的粒度的填料是很有用的。
3um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。
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如何正确选择色谱柱
色谱分析技术主要是应用在化学医药实验室或研究所等领域内,主要是用来分析液体或气体样品的内部成分情况。
色谱柱是色谱分析系统中非常的关键的核心部件,它的作用是使得样品内部成分以不同的速率通过色谱柱,而让检测器检测通过色谱柱成分的各个不同色谱峰,最终确定其成分。
下面我们来了解一下如何正确选择色谱柱:
一、选择色谱柱时,首先根据其所需要进行成分含量分析的样品进行大致的类型分类,例如可以根据分离规模来进行选择色谱柱的类别,如色谱柱根据其直径的大小尺寸不同具有非常多的型号。
如直径较大的是制备柱,它的尺寸一般大于10mm,还有分析柱的直径尺寸大概是2-5mm,一些微型柱,包括有纳米柱毛细管管柱等。
二、其次,可以从需要分析样品的物理和化学性质入手,如在选柱前提前找好关于该物质的资料,包括其分子量、溶解性、是否会出现解离现象等等详细的信息,然后根据这些找出合适的色谱柱类型。
如脂溶性的样品适合的色谱柱是调料式的孔径,而水溶性非离子型的则比较适合反向色谱柱法等。
三、当具体到选择哪一款色谱柱时,应当保证填料所能耐受的ph范围符合分析条件的要求。
因为如果其硅胶材质不与需要测量的样品的酸碱值不能够相适应,就会发生键合相水解或者是硅胶溶解的多种现象,当然其填料的孔径也要选择与色谱柱相适应的,不然很可能会导致分析结果不准确。
四、色谱柱的规格情况:色谱柱的规格包括它的长度,内外径等,细内经色谱柱的优点是比较节约溶剂、且灵敏度较高,成分测量测量也比较准确,但是它对整个色谱系统的分析精度也要求较高;如果是组分较多的色普柱,则就适合长度较长的色谱柱,才能达到更好的分离和分析的效果。
综上所述,在众多型号和尺寸的色谱柱中选择一款合适的色谱柱来使用,进行分析相应样品的成分是需要一定的技巧的。
不仅要考虑考虑到该样品可能具有哪些物理和化学性质,还要考虑到色谱柱的规格尺寸以及它的填料材质和直径尺寸等,当然色谱柱售后有保障也是需要考虑的,只有考虑到多方面相关的知识和注意要点才能选到合适的评价高的色谱柱。