马铃薯脱毒种薯生产技术流程图
佳木斯地区脱毒马铃薯原原种生产技术
２ 试 管理苗移栽
２ １ 脱毒 苗移栽 标准 ．
脱毒马铃薯的前提条件 ，因此生产合格 的脱毒 马
铃 薯原原 种尤 为 重 要 ，以往佳 木 斯 地 区总 是 外 购 脱 毒马铃 薯 原 原 种 ，然后 繁 殖 脱 毒 马铃 薯 ，成本 较 高 ，通 过研 究 我 们 摸索 出一套 适 合 于佳 木 斯 地 区脱 毒马铃 薯原 原种 的生产 栽培 技术 。
１ 制 作 苗床
度 为 １７ 平方 米打孔 栽植 ，栽植 时 压 实基 部 的 ６ 株／
珍珠 岩 ，浇 透 定 根水 。移 栽 后 ，苗 床 加 盖 薄 膜 以
１１ 基 质选 用 ．
保温、保水提高成活率 ，８ 天后揭出薄膜。
主 要采用 的 基质 是 珍 珠 岩 ，直径 为 ０５ １５ ． ． 毫 米 ，ｐ Ｈ在 ６— ７之 间 。
次 ，连 续 ２ 次 。 ～３
盖膜 的苗床 ３天 浇 １次水 ，不 盖 膜 的 苗床 每 天 浇水 １ ２次 ；夏季蒸 发量大 ，温 度较 高 ，需多 ～ 浇 ；冬季 温 度 较 低 ，可 少 浇 ；春 秋 季 时 干 时 潮 ， 晴 天多 浇 、雨 天少 浇 ；现 蕾 、开 花 至成 熟 期 ：保 持 基质 湿润 即可 。
４ ２ 温 度 ．
５ 收获及贮藏
５１ 收获及 注意 事项 ． 在生理成 熟 时采 用 人 工 收 获 ，收 获 前 ７天 清 除地 上部 茎 叶 ，及 时运 出 网 室 ，如 遇 雨 天 ，等雨 后 晒干基 质后 再 收 获 ，以保 证 种 薯 干 爽 。收 获 时 注意减少 机械损 伤 ，如 有机 械损 伤 ，应 单独 存放 。
肥 ，加减 尿 素 、过 磷 酸 钙 、硫 酸钾 配 制 成 一定 浓
马铃薯脱毒种薯生产技术
马铃薯脱毒种薯生产技术0引言马铃薯在营养繁殖时易受病毒浸染，并且在植株内增殖、转运和积累于所结块茎中，随着世代传递，病毒危害逐年加重，一般可减产50％以上。
研究发现，大约有30多种病毒感染马铃薯，并引起品种退化。
通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PLKV、PVY、PV A、PAF、PVG、PVM、PSV等病毒，因此采用组培技术，通过良种繁殖体系，能够生产出优质脱毒种薯，保证马铃薯优质、高产、稳产。
1.脱毒种薯生产程序采取微茎尖组织培养的方法，诱导出苗，采用酶联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定马铃薯病毒和类病毒，经鉴定后，无主要病毒及类病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。
试管基础苗在无菌条件下，采用固体、液体培养基相结合方法，进行扩繁基础苗，在防虫网室栽植或封闭温室扦插，生产出原原种(或称脱毒小薯)。
用原原种在一定隔离条件下生产原种1代，以后逐级称为原种2代良种1代、良种2代。
2.茎尖培养脱毒2.1.取材和培养在选定的马铃薯品种田中，选取株型标准且长势较好的植株，直接取其茎尖或取其成熟后的薯块在室内发芽。
芽经热处理(38℃)2周，然后取顶芽或侧芽的1cm的茎尖，在自来水下冲洗1h左右，无菌条件下先用95％酒精迅速浸润组织，再用5％漂白粉溶液浸泡5～10min，然后用无菌水冲洗2～3次。
为了减少污染机会，可将块茎彻底消毒后，放在无菌容器培养，然后再去茎尖。
分离茎尖时，把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留2个叶原基(约0.1mm)，随即接种于MS液体培养基上，每升加0.1mg IAA、0.1mg GA3、PH5.8。
也可White培养基，附加0.1～1mg／L的NAA和0.05 mg ／L的BA(培养基在培养器皿底部的厚度约1cm左右)。
培养器皿必须进行高温灭菌后在无菌状态下将适量的培养基加入以供接种使用，接种必须在无菌培养室中无菌状态下进行。
培养条件：21-25℃、3000Lx、16h／d。
马铃薯脱毒试管苗高效低成本生产技术
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２ ４・ １
陕
西
农 业
科 学
马铃薯脱毒试管苗高效低成本生产技术
薛志和 ， 张 芳， 郑改平 ， 吴艳莉 ， 吕 军， 王彩 兰 ， 常水 利 ７９０ ） １００ （ 榆林 市农科所 ， 陕西 榆 林
马铃薯是世界上仅次于稻、 玉米的四大粮 麦、 食作物之一。 但马铃薯常规繁殖率低， 病毒性退化 较快 ， 已成为限制马铃薯生产快速发展的主要因 素。马铃薯脱毒试管苗的生产就是利用组织培养 技术去除病毒， 恢复种陛。 在较短的时间内繁殖出 大量高质量的种苗 ， 为马铃薯生产提供高级别脱 毒种薯的一项技术 。 该技术经过我们 ２０ 年以来 ０３ 的应用研 究 ， 已形 成 了一 套 高效低 成本 的快 繁 技 术。具体操作如下：
１ 培养基 的配置
马铃薯脱毒试管苗快繁繁过程中， 为了 降低生产成本， 我们简化了 ＭＳ培养基 ， 去除激素 和部分有机物， 采用分析纯以下级别的试剂配置 母液 ， 食用 白糖代 替蔗糖 ， 煮沸 自来水代替蒸馏 水， 卡拉胶代 替贝利宁、 琼脂等措施， 配置生产用 培养基对马铃薯试管苗进行快速繁殖。
收稿 日期 ：０ ７ ５ ６ ２ ０—Ｏ —１
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薛志和等 ： 马铃薯脱毒试管苗高效低成本 生产技术
・２ １ ５・
起， 用定 植钩使 茎段均 匀地栽 植在培养 基上 。 对 接好茎段的培养瓶及时编号 ， 并注明每次扩繁 日 期、 名、 人 品种 ，ｄ后 调查污 染情况 。 ７
１ １ 母 液的配置 ．
节ｐ Ｈ值至 ５８ ， ． ～６然后分装培养基于培养瓶内， 般培养基高度 ８ ０ ｍ左右。在分装过程 中 ￣１ｍ 注意不要把培养基倒在瓶口上 ， 以防引起污染 。 然 后用聚丙烯专用封 口膜封 口， 也可用塑料瓶盖或 其它材料封 口。 把封好的瓶放入高压灭菌锅消毒， 当压力升至 ０ ５ｇｃ 缓慢打开排气阀排 出 ．ｋ ／ｍ 时， 空气， 当冷 空气 排尽 ， 力表 指 针 回到 ０位 时 ， 压 关 闭排气 阀重 新升 温 ， 当压 力达 到 １１ｇ ｃ ， ．ｋ ／ｍ 温度 升至 １１ ２ ℃时 ， 再保持 １￣ ２ｍｉ， 菌完毕 后 ， ５ ０ ｎ灭 打 开放气阀排出蒸汽。排气时应 由小到大逐步放气 或 自然冷却 ， 以免放气过猛造成封 口纸脱落或瓶 子破裂。待压力下降至 ０ ， 时 打开锅盖取 出培养 基 。每批快繁苗到了快出苗移栽时 ， 为了降低成 本， 提高效率 ， 我们通常采用液体培养基 ， 每瓶培 养基用量是固体 的１３用液体培养试管苗生长既 ／。 快又健壮， 而且还可省去栽苗时清洗苗根部的残 留培养基 ， 既经济又实惠。
脱毒马铃薯种薯扩繁实验示范栽培
马铃薯脱毒技术能够培育出不被病毒感染的马铃薯产品，而种薯扩繁技术的应用则能够提高马铃薯的品质，实现增产增益，促进当地农业经济的发展。
一、脱毒马铃薯介绍对于传统种植技术的马铃薯来说，其一般都是直接从泥土中挖出进行售卖与食用，这的种植方法会导致马铃薯体内出现大量的细菌和病毒，影响食品安全。
为了解决以上问题，农业技术人员开发了脱毒马铃薯技术，即使用物理、生物化学等技术对马铃薯进行净化处理，最终脱去马铃薯体内的病毒与细菌，提高食品安全性。
经过脱毒技术处理之后的马铃薯就能够减少体内病毒，这样的马铃薯经过种植之后甚至能够达到零病毒。
二、脱毒马铃薯种薯扩繁存在的问题经过技术推广与实践之后能够发现，当地很多示范农户对于脱毒马铃薯的认知不足，并不能够很好的区分种薯和商品薯，在种植过程中往往采取相同的种植技术与方法，这样就导致脱毒种薯在切块种植的过程中因切口而感染病毒，难以保持脱毒效果。
其次，对于我国很多贫困偏远的山区，相关部门并未建立严格的检测体系，这样就会影响种薯引种试验的结果。
即使已经使用科学的手段彻底脱毒，但最终种植出来的马铃薯品质与产量都有所下降，严重影响农户的经济效益。
三、脱毒马铃薯种薯扩繁技术实验示范1、种薯扩繁实验体系要想开展脱毒马铃薯种薯扩繁试验，首先应该明确扩繁试验体系的结构，该体系主要由“脱毒中心”和“制种示范户”构成。
经过实践探究能够知道，这样的实验中心体系能够有效降低中间环节的费用，进而节省种植成本，吸引更多的农户参与示范种植体验。
通常情况下，“脱毒中心”是由当地农业科研单位以及农技推广中心成员构成的，主要的工作职责为马铃薯的引种、鉴选、脱毒、检测和快繁。
而“制种示范户”则是通过合理补贴农户的方法，使农户按照脱毒马铃薯种薯扩繁的要求进行马铃薯重视，培育出优良的种薯，同时使用“循环曲剪快繁技术”生产出大量的满足市场需求的商品薯用种。
2、实验示范内容①脱毒马铃薯获取在种植试验过程中，试验人员首先需要根据网棚与地膜的规模建立防虫网棚床，同时使用药剂处理苗床，往其中填充经过灭菌处理的基质，之后再将其进行推平，最后进行浇水处理。
马铃薯脱毒与快繁技术
67《农机市场》 2024年第2期马铃薯是泸水市片马镇的主要粮食作物之一。
2023年，全镇马铃薯种植面积813.3亩，占全镇粮食作物播种面积4435.59亩的18%，实现总产886700 kg，平均单产1090.3 kg/亩。
主要种植品种是中甸红、合作88。
为实现马铃薯高产稳产，增加马铃薯种植收益，近年来，片马镇积极推行马铃薯的脱毒与快繁技术，以促进当地马铃薯种植产业的良好可持续健康发展。
1. 马铃薯脱毒技术1.1 建立无菌体系1.1.1 材料选择与处理马铃薯外植体材料的来源可分为三种；一是将大田中处于生长季节的马铃薯植株移植至温室内，并将新生长出的嫩芽收集为外植体。
二是从大田中的马铃薯植株上切取一部分的茎段，扦插于营养液中培植一段时间后，将新生长出的嫩芽收集为外植体备用。
三是将马铃薯块茎放置在室内使其自然发芽，在收集嫩芽为外植体时先将室内温度提升至38℃处理15d后再进行。
马铃薯脱毒与快繁技术胡伍军云南省泸水市片马镇人民政府农业农村综合服务中心，云南 泸水 673207作者简介：胡伍军（1977—），男，汉族，云南泸水人，本科，高级农艺师，研究方向：农业技术推广。
在培养外植体时，可使用72%多菌灵可湿性粉剂2000倍液、农用链霉素1500倍液混合均匀喷施外植体，可起到杀菌效果。
当外植体植株上携带有病毒，可采取热处理或茎尖培养的方式进行消毒。
马铃薯外植体新芽多为2cm左右，收集后用清水冲洗干净后，运用75%酒精对外植体表面灭菌处理30～60s。
随后使用0.1%升汞灭菌5～8min，最后使用无菌水冲洗3～10次，单次冲洗时间为5min，完成处理 [1]。
1.1.2 茎尖剥离与接种马铃薯外植体茎尖较小，将茎尖组织灭菌后，放置在10～40倍解剖镜下使用专用镊子剥离嫩叶组织，裸露出半圆形生长点。
保留1～2个马铃薯叶原基，并接种至空白培养基。
1.1.3 初代培养茎尖初代培养以液体培养基为主，配方为MS+IAA0.1mg/L+GA30.1mg/L，pH值为5.8。
山区马铃薯脱毒种薯繁殖技术
３ ４ 不 同贮 藏 温 度 对 马 铃 薯 淀 粉 和 干 物 质 含 ．
・
量 的 影 响 高 低 温贮 藏 种薯 种 植 后 ，淀 粉 、干物 质 含量 差 异不 显 著 （ 表 ４ 。 见 ）
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表 ４ 不 同贮 藏 温度 对 马铃 薯 淀粉 和
干 物 质 含 量 的影 响
３ ３ 不 同贮 藏 温 度 对 乌铃 薯 产量 的 影 响 ．
表 ３ 不 同贮藏 温 度对 马 铃 薯产 量 的影 响
４ 讨 论
高 温刺 激 芽 眼 提 早 萌 动 、并 滋 生 大 量 的 纤 细 芽 ，不 仅 消耗 了大 量水 分 和 养 分 ，还 破 坏 了顶 芽优 势 。随 着 芽 眼 的提 早 萌动 ，积 累在 块 茎 内的 病毒 开
吸减 弱 ，养 分 、水 分 消 耗 少 。 因 此 ，１ ～２℃ 的 贮 藏 条 件 可 以保 证 种薯 不 过 多 消耗 养 分 ，保证 了种 薯 的质 量 。根 据 本项 试 验 的 结果 ，我 们认 为 马铃 薯 种 薯 适宜 的贮 藏条 件 为 ：贮 藏 温 度 为 １ １ ５℃ ，相 ～ ．
大 ，通 过 多 方 考察 ，广 泛 收集 资 料 ，深 入 研究 ，结 合 本 市 生 态 条 件 和 多 年 生 产 实 践经 济 ，于 １ ９ ９ ２年
物 定期 喷药 防蚜 ，有 效地 抑 制 了蚜 虫迁 飞传 毒 。 ３ ３ 严格 消 毒 ，防止 人 畜 传毒 ．
渡地 带 ，最 高 海 拔 ３ ７ ０ １ ｍ，最 低 海 拔 ３ １２ ｍ， ７ ． 川 、丘 、山层 次 较 为 明显 ，而 马 铃 薯 种植 则 以丘 陵
术 ，取得 了显著 成 效 。
第13章 植物脱毒技术 - 副本
2.4 综合脱毒方法
2.4.1茎尖培养结合热疗/冷疗脱毒法
某些病毒，如TMV、PVX和CMV等能侵染正 在生长中的茎尖分生区域，在这种情况下， 需将茎尖培养与热疗法相结合。热处理可在 脱毒之前的母株上或在茎尖培养期间进行。
例子：草莓温性黄边病菌
、马铃薯S病毒和X
病毒、大蒜鳞茎
茎尖培养亦可结合低温处理脱毒（菊花p235）
第13章 植物脱毒技术
引言
主要作物品种的病毒病防治和种质资源的安
全保存是科研和生产上亟待解决的问题。
对病毒病防治存在一些困难：？ 应用组织培养技术获得无毒植株，进一步扩
繁应用于生产，是目前最有效的防治病毒病 的方法。
1 植物脱毒的意义
应用植物脱毒技术可使品种复壮，明显提高
作物的产量、品质
3.5 电镜鉴定法
（1）超薄切片技术
（2）负染色技术 （3）免疫电镜技术
：免疫学和电镜技
术的结合
4 脱病毒植株的保存
脱毒植株并不具备额外的抗病性，可被重新
感染，一般应种在温室或防虫罩内的灭菌土 壤中。
经检验的无毒植株也可通过离体培养扩繁和
保存。
由茎尖培养得到的植株一般很少或没有遗传
马铃薯脱毒种薯的生产程序：
①脱毒苗的培育
a.植物材料的选取 b.材料的处理 c.茎尖剥离 d.培养 e.病毒检测 f.无病毒苗的扩繁
②原原种的生产
③原种生产
④一级种薯生产
⑤二级种薯生产
6 通过茎尖培养消除病毒的注意事项
要想得到和繁殖一个品种的脱毒植株，首先
中呈梯度分布。在受侵染的植株中，顶端分 生组织无毒或含毒量极低，较老组织的含毒 量随着与茎尖距离的加大而增加。因此采用 茎尖培养的方法可以消除植物体内的病毒。
马铃薯种薯的茎尖脱毒培养技术.
作物生产技术专业 / 教学资源库
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5．茎尖培养与病毒检测
5．2 培养 5.2.1外植体培养
从已催出芽（芽长一般2—4cm）的干净健康马铃薯块茎上掰下芽， 用自来水冲洗干净，放入0.1—0.15%的升汞溶液中浸泡8—10分钟，在超 净工作台上消毒完后，放入无菌水中浸泡6次，每次5分钟，然后接种到 MS＋6－BA1.5mg/L（毫克/升）＋GA3 0.5mg/L＋IBA0.5mg/L＋琼脂8g/L ＋蔗糖30g/L（PH值为5.8）的培养基上，每个培养瓶接种1—5个外植体。
任务二马铃薯种薯的茎尖 脱毒培养技术
作物生产技术专业 / 教学资源库
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1．材料的选择
选择具有 该品种典型特 性、生长健壮 的单株（或无 性系），结合 产量情况，选 择高产、大薯 率高、无病斑 的单株作为茎 尖脱毒的基础 材料，以提高 脱毒效果。
马铃薯种薯
作物生产技术专业 / 教学资源库
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4．剥离茎尖和接种
在超净工作台上，将消毒过的芽置于40X的解剖镜下，一手用一把眼 科镊子将芽按住，一手用灭过菌的解剖针将叶片一层一层仔细剥掉，直 至露出圆亮的生长点，用锋利的无菌解剖针小心切取0.3毫米以下的带12个叶原基的茎尖，随即将茎尖接种于已准备好的马铃薯茎尖培养基上， 以切面接触琼脂。
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5．茎尖培养与病毒检测
5．3病毒检测
病毒检测的目的，是鉴定所获得的试管苗是否完全脱除所有病毒。
病毒检测方法一般采用指示植物鉴定法、电镜检测法或抗血清鉴定法。
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浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方
浅谈马铃薯脱毒快繁流程步奏及配方马铃薯：(Solanumtuberosum)为茄科茄属作物．是全球重要的粮菜兼用作物。
马铃薯具有生长期短、产量高、适应性强、营养丰富、耐储运的特点，因此深受生产和消费者的喜爱。
但在马铃薯生产中普遍存在种性退化的问题，而病毒侵染是马铃薯退化的根源。
由于马铃薯是无性繁殖作物，所以病毒侵染后会世代相传，危害逐年加重。
目前，世界上公认的解决马铃薯病毒危害，防止品种退化的有效途径是茎尖离体培养。
通过茎尖离体培养培育脱毒基础苗，再通过建立合理的良种繁育体系生产优良种薯是马铃薯高产、稳产、优质的可靠保证。
一脱毒种薯繁育工艺流程马铃薯脱毒种薯繁育工艺流程如图所示。
二脱毒技术2.1 脱毒方法2.1.1 外植体选择及处理外植体的选择途径一般有3条：①在生长季节从田间挖取植株种植在无菌的盆土中，温室内栽培，取其新长成枝条的芽；②从田间切取枝条，插入营养液中生长，取新抽生枝条上的芽；③块茎在室内发芽，芽经热处理(38℃)2周后再取芽。
另外，定期给植株喷施内吸杀菌剂，如0.1％多菌灵和0.1％链霉素的混合液，可以有效提高灭菌效果。
经过上述处理之后，要比直接取自田间枝条污染少得多。
再加上茎尖分生组织又被彼此重叠的叶原基保护．只要仔细剥取，无须再进行消毒，就能得到无菌的外植体。
但为保险起见，在切取外植体之前，可以先进行简单的表面消毒，一般在5％次氯酸钠中处理8～10min即可。
虽然顶芽和腋芽都能作为外植体，但顶芽的茎尖生长要比腋芽的快，成活率也高，所以一般取顶芽作为外植体。
2.1.2 剥离茎尖和接种在超净台上的解剖镜(8～40倍)下进行茎尖剥离。
解剖时必须注意使茎尖暴露的时间越短越好．以免超净台的气流风干茎尖。
在材料下垫上一块湿润的无菌滤纸也可达到保持茎尖新鲜的目的。
在解剖镜下用解剖针将叶片和叶原基剥掉，直到露出圆亮的茎尖生长点。
将带有l～2个叶原基的茎尖切下．接种到培养基上。
要注意防止交叉污染，尤其是当芽未曾进行过表面灭菌时更要谨慎。
地瓜脱毒苗的生产流程
第一步：选种催芽，剪取壮苗。
在决定进行某个或某几个甘薯品种的脱毒组培后，我们会提前一个半月左右，选取完全符合该品种特性的薯块，在光照培养箱里进行催芽。
本步骤最重要的是选取品种特性优秀的薯块，甘薯脱毒组培属于人工干预下的无性繁殖，如果原始材料品种特性就不好的话，那“上梁不正下梁歪”的道理，大家都懂的.在种薯出芽后，我们就会选取其中粗壮的茎芽，进行后续作业！第二步：剥取茎尖，培养成苗。
我们把剪取下来的健壮茎芽，在超净台上使用显微镜，将只含1-2个叶原基的0.1-0.3mm大小的茎尖分生组织剥取出来，放到诱导培养基中进行成苗培养。
剥取茎尖分生组织的大小要“越小越好”。
尺寸大小等同于包含叶原基数量的多少，虽然剥取的茎尖分生组织尺寸小了，包含的叶原基少了，后期成苗机率会大大降低。
但是，因为我们剥尖的根本目的是要去除病毒，而病毒携带率和剥取的茎尖分生组织大小是呈正比关系，即茎尖分生组织越大，包含的叶原基越多，携带病毒几率越高；茎尖分生组织越小，包含的叶原基越少，携带病毒几率越低，加之后续工作要花费的人力和物力远远大于茎尖分生组织不成苗所带来的损失，所以我们宁愿一个品种剥取几十个“越小越好”的茎尖组织，成苗率只有百分之五十左右，也不愿尺寸“剥大了”，后期淘汰率居高不下。
品系(株系)的数量要“越多越好”。
剥取的茎尖分生组织诱导长成的组培苗，每株都称为一个独立株系。
龙生九子各有不同，他们中间有原种性好的，也有变异较大的；有病毒携带者，也有无病毒、洁净的植株。
而我们增加品系的数量，既是为了更好的确保种群遗传基因的完整性，也是为了降低病毒检测层层筛选后“全军覆没”的可能性。
第三步：切段繁育，扩增数量。
在剥取的茎尖分生组织诱导成苗后，需要用一种快速的方法，成倍的扩增组培苗的数量，我们会将完整的组培苗植株，两至三个茎节分切为一段，栽种至快繁培养基中，进行培养，然后再将长成的新植株，两至三个茎节为一段……以此类推，一般在首次移栽之前，要进行三至四次切段扩繁。