第九章临床病原体检测优秀课件
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临床病原体检查
方法：免疫荧光、酶免、化学发光等。 排除交叉抗原的影响，病原体抗原检测可明确感染的病原体
HIV抗原检测实验原理示意图
24
（三）血清学实验
特异性 IgM可作为感染性疾病 早期诊断指标，且可区分原 发与复发感染。
特异性 IgG，尤其双份血清的 滴度呈4倍或4倍以上升高，考 虑病原体感染。
无菌部位标本 存在正常菌群标本
致病菌 结合细菌的量考虑
培养阴性
临床表现支持感染 镜检找到病原体
标本不合格 培养不恰当 ……等
L细菌 厌氧菌 苛养菌
31
第二节 病原体耐药性检测
32
抗生素耐受的起点：盘尼西林
１９２８年
弗莱明 Fleming
１９４０年
弗洛里 Florey
&
钱恩 Chain
33
耐药性的历史
了解本地区或本医院内常见病原菌的种类及耐药性， 有助于临床经验性治疗时合理选药。
定期对病原菌种类和耐药谱分析，有助于发现医院感 染暴发或流行。
管镜下采集法；（3）气管 穿刺法。
13
要求：≤10个鳞状上皮细胞/低倍 ≥25个WBC /低倍
14
（五）脑脊液与其他无菌体液标本
无菌注射器穿刺采集，置于无菌容器中立即送检。 脑脊液标本应立即保温送检，不能暂时保存于冰箱中。 第一管用于微生物学检查。 胸腹水等体液标本应抽取2-5ml送检。
15
（六）泌尿生殖道标本的采集
常取生殖道分泌物 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 女性：用无菌棉签采集阴道或宫颈分泌物。 生殖道疱疹常穿刺取疱疹液
16
（七）脓液及创伤感染分泌物标本
开放性脓肿及脓性分泌物 封闭性脓肿 大面积烧伤的创面分泌物
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（三）血清学实验
特异性 IgM可作为感染性疾病 早期诊断指标，且可区分原 发与复发感染。
特异性 IgG，尤其双份血清的 滴度呈4倍或4倍以上升高，考 虑病原体感染。
无菌部位标本 存在正常菌群标本
致病菌 结合细菌的量考虑
培养阴性
临床表现支持感染 镜检找到病原体
标本不合格 培养不恰当 ……等
L细菌 厌氧菌 苛养菌
31
第二节 病原体耐药性检测
32
抗生素耐受的起点：盘尼西林
１９２８年
弗莱明 Fleming
１９４０年
弗洛里 Florey
&
钱恩 Chain
33
耐药性的历史
了解本地区或本医院内常见病原菌的种类及耐药性， 有助于临床经验性治疗时合理选药。
定期对病原菌种类和耐药谱分析，有助于发现医院感 染暴发或流行。
管镜下采集法；（3）气管 穿刺法。
13
要求：≤10个鳞状上皮细胞/低倍 ≥25个WBC /低倍
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（五）脑脊液与其他无菌体液标本
无菌注射器穿刺采集，置于无菌容器中立即送检。 脑脊液标本应立即保温送检，不能暂时保存于冰箱中。 第一管用于微生物学检查。 胸腹水等体液标本应抽取2-5ml送检。
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（六）泌尿生殖道标本的采集
常取生殖道分泌物 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 女性：用无菌棉签采集阴道或宫颈分泌物。 生殖道疱疹常穿刺取疱疹液
16
（七）脓液及创伤感染分泌物标本
开放性脓肿及脓性分泌物 封闭性脓肿 大面积烧伤的创面分泌物
临床病原学检查知识PPT课件
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那些有正常菌群寄居的腔道分泌物，涂片镜检虽不 能确定诊断，但对进一步检出的步骤、采用的方法 和分离鉴定病原体所需培养基有重要提示作用，如 在米泔水样便的悬滴片动力检查，发现有运动活泼 的鱼群样弧菌，常提示弧菌科细菌感(thiosulfatecitrate-bile saltssucrose，TCBS)选择培养基。组织标本和疱疹分泌 物涂片经瑞特染色后，查见多核巨细胞和核内嗜酸 性包涵体可早期诊断疱疹病毒感染。临床上不常规 应用电镜检查，但对某些病毒感染有确诊价值，如 婴幼儿急性胃肠炎腹泻粪便电镜下查见车轮状的双 层衣壳病毒颗粒即可诊断为轮状病毒感染。常用的 电镜技术有超薄切片标本电镜观察、负染标本电镜 观察和免疫电镜技术。
临床病原学检查
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1
不同病原体(细菌、螺旋体、支原体、放线菌、
衣原体、立克次体、病毒、真菌、原虫、蠕虫)
所致感染性疾病的实验诊断方法各有其特点，
但几乎都遵循以下基本原则：①正确、规范采
集和运送标本；②通过直接显微镜查见病原体
或检出病原体抗原成分；③借助分子生物学的
方法检测病原体核酸；④利用免疫学方法检测
机体对病原体抗原成分产生的免疫产物；⑤对
病原体进行分离与鉴定。在完成病原体的检出
和鉴定任务后，结合病人的病史、症状或体征，
快速作出诊断。并积极参与临床选择抗微生物
药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免耐
药菌株的产生。
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标本采集和运送 ：
根据各种病原体所致感染性疾病的病程确定 标本采集的时间、部位和种类。所有采集的 标本均置于无菌或清洁容器中，不能接触消 毒剂和抗菌药物。 标本必须注明姓名、年 龄、性别、采集日期、临床诊断、检验项目 等。标本采集后应按要求处理，立即送往病 原学实验室，对于烈性传染病材料的运送需 专人护送。
临床常见病原体检查ppt课件
第九章 临床病原体 检测
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1
提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查
方法
药敏检测
第二节：病原体耐药性检测
第三节：临床感染常见病原体检测 病原体检测
第四节：病毒性肝炎检测
第五节：性传播疾病病原体检测
第六节：医院感染常见病原体检测
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教学目的与要求：
了解掌握临床病原体检查的主要内容（标本采集、 标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病 原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染） 、检测原理以及临床实际应用的重要意义。
三、检查方法
（一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原检查 （三）病原体核酸检查 （四）病原体的分离培养和鉴定 （五）血清学试验
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（一）直接显微镜检查——不染色 标本
• 不染色标本：适用于检
查生活状态下病原体的 动力及运动状况。
• 方法：压滴法、悬滴法。
• 意义：在不染色状态下
借助暗视野显微镜或相 差显微镜观察病原菌的 动力、活动方式。部分 病原体可借此初步诊断， 如梅毒螺旋体。
4.荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检 出某些病原微生物
5.电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感 染却有确诊的价值。
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(二)病原体特异性抗原检查
• 利用抗原抗体之间的特异性反应，用已知抗体检
测患者血清及其他体液中的待测抗原，借助免疫 荧光技术、酶联免疫技术、化学发光技术、胶乳 凝集试验、对流免疫电泳等技术检测标本中未知 的病原体抗原，其诊断价值常以标本不同而各异。
• 酒精棉球消毒，防止污染。
静脉采血后，将血液注入培 养瓶内 。
• 采集时间：一般在抗生素使
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提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查
方法
药敏检测
第二节：病原体耐药性检测
第三节：临床感染常见病原体检测 病原体检测
第四节：病毒性肝炎检测
第五节：性传播疾病病原体检测
第六节：医院感染常见病原体检测
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教学目的与要求：
了解掌握临床病原体检查的主要内容（标本采集、 标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病 原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染） 、检测原理以及临床实际应用的重要意义。
三、检查方法
（一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原检查 （三）病原体核酸检查 （四）病原体的分离培养和鉴定 （五）血清学试验
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（一）直接显微镜检查——不染色 标本
• 不染色标本：适用于检
查生活状态下病原体的 动力及运动状况。
• 方法：压滴法、悬滴法。
• 意义：在不染色状态下
借助暗视野显微镜或相 差显微镜观察病原菌的 动力、活动方式。部分 病原体可借此初步诊断， 如梅毒螺旋体。
4.荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检 出某些病原微生物
5.电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感 染却有确诊的价值。
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(二)病原体特异性抗原检查
• 利用抗原抗体之间的特异性反应，用已知抗体检
测患者血清及其他体液中的待测抗原，借助免疫 荧光技术、酶联免疫技术、化学发光技术、胶乳 凝集试验、对流免疫电泳等技术检测标本中未知 的病原体抗原，其诊断价值常以标本不同而各异。
• 酒精棉球消毒，防止污染。
静脉采血后，将血液注入培 养瓶内 。
• 采集时间：一般在抗生素使
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精品医学
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第二节 临床常见病原体检查
• 临床常见病原体为：细菌、病毒、支原 体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等。
精品医学
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细菌感染检查项目的选择
• 普通细菌：常采用直接镜检、分离培养 与鉴定明确病原体。
• 难培养或培养要求高的细菌：综合运用 免疫学或分子生物学检测，如结核分枝 杆菌感染以及幽门螺杆菌感染等。
• 上呼吸道存在正常菌 群，在采集标本与结 果分析时应予考虑。
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痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且 在取痰前用清水反复 漱口。
• 方法：（1）自然咳 痰法：（2）气管镜 下采集法；（3）气 管穿刺法。
精品医学
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尿标本的采集
• 无菌采集中段尿 • 如考虑厌氧菌感染，
采取膀胱穿刺法采集 标本。 • 排尿困难者考虑导尿 采集标本。
Westerblot为确诊实验。
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单纯疱疹病毒
• 分离培养；阳性可确诊。 • 目前临床常检测HSV-DNA与HSV抗原，
用于早期快速诊断。
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• The specimen has been transported at the improper temperature or in improper medium.
• The quantity of specimen is insufficient for testing .
• The specimen is leaking .
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寄生虫感染检查项目的选择与 应用评价
• 直接显微镜检查：观 察寄生虫生活史的各 阶段，是寄生虫感染 的主要诊断依据。
• 寄生虫抗体检测：辅 助诊断。
临床病原体检查
• 上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结 果分析时应予考虑。
-
8
痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复 漱口。
• 方法： （1）自然咳痰法 （2）气管镜下采集法 （3）气管穿刺法
-
9
尿标本的采集
• 无菌采集中段尿
• 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集 标本。
• 排尿困难者考虑导尿采集标本。
• 采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
• 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
-
5
拒收标本
• 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不 符合。
• 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 • 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过
长。 • 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 • 5.样本的检验项目申请不适合进行。 • 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 • 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 • 8.被正常厌养菌污染的标本,要求检测。
• 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检 测、病原体分离培养鉴定、药敏实验—— 报告结果。
• 医生：明确诊断、合理用药。
-
3
一、标本采集和运送
-
4
标本采集的基本原则
• 无菌、及时、按照要求、标注清晰
• 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
• 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素使 用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
临床病原体检查
-
1
临床病原体检查目的
• 明确感染是否发生以及病原体的类型。 • 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 • 密切监视烈性传染病与新的传病的发生，
-
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痰标本的采集
• 采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复 漱口。
• 方法： （1）自然咳痰法 （2）气管镜下采集法 （3）气管穿刺法
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尿标本的采集
• 无菌采集中段尿
• 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集 标本。
• 排尿困难者考虑导尿采集标本。
• 采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
• 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
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5
拒收标本
• 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不 符合。
• 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 • 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过
长。 • 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 • 5.样本的检验项目申请不适合进行。 • 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 • 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 • 8.被正常厌养菌污染的标本,要求检测。
• 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检 测、病原体分离培养鉴定、药敏实验—— 报告结果。
• 医生：明确诊断、合理用药。
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一、标本采集和运送
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标本采集的基本原则
• 无菌、及时、按照要求、标注清晰
• 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
• 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素使 用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
临床病原体检查
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临床病原体检查目的
• 明确感染是否发生以及病原体的类型。 • 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 • 密切监视烈性传染病与新的传病的发生，
临床常见病原体检查ppt课件
疾病， 8%左右的AIDS患者伴有隐球菌
性脑膜炎，预后极差。
•中枢神经系统存活与脑脊液中缺乏抗体
和补体激活系统有关
•抗真菌治疗:两性霉素B,氟康唑
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抗酸染色
荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检出某些病原微生物， 用形态学和免疫学相结合的可最特新版异整理地ppt 家侧某些病原微生物的存2在4 。
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（一）直接显微镜检查——不染色标本
不染色标本：适用于检查 生活状态下病原体的动力 及运动状况。
方法：压滴法、悬滴法。 意义：在不染色状态下借
助暗视野显微镜或相差显 微镜观察病原菌的动力、 活动方式。部分病原体可 借此初步诊断，如梅毒螺 旋体。
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（一）直接显微镜检查——染色标本
2．仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本，一般情况 下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。而 病毒检测的标本可于4℃存放2～3天。
3．检查送检容器是否完整，有无破损或渗漏等情况，若有则不 予接收。
4．标本储存、运送方式不当，不予接收。
65．．标标明本本显量被是明污否显染不合的足标格的本，标不本以予，接保不收证予。接检收测。结果的准确性！
电镜检查不常规用于临床最，新版对整理p某pt 些病毒感染却有确诊的价27值
意义
1. 无菌体液的直接镜检对病原体诊断具有一定意 义。
2. 对正常菌群寄居腔道的分泌物图片镜检可提示 进一步检查的步骤、采取的方法和确定分离鉴 定病原体所需的培养基。
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意义
3.由于临床标本中常含有一定的抗菌物质， 以致分离培养可为阴性，此时的镜检往 往可能在诊断是起作用。
11级本科-临床病原体检查
※三、丙型肝炎病毒标志物测定
Determination of Hepatitis C virus markers
【参考值】 ELISA法：抗HCV-IgM阴性 【临床意义】 1.抗HCV-IgM阳性：是早期诊断指标。
也是丙肝活动传染的敏感指标。 2.抗HCV-IgG阳性：既往感染。 输血后肝炎（80-90%） 抗HCV-IgG阴性
见于输血后肝炎、使用血液制品后与HCV同时存在
2.抗HDV-IgG阳性：既往感染。
5型病毒性肝炎病原体、流行病学和临床特征
甲型肝炎 病毒直径 核酸 种属
传播途径 流行性 季节性 潜伏期 发病 黄疸
乙型肝炎 42nm 双链DNA 嗜肝DNA病 毒科
血液、母婴 散发 无 2~6月 缓慢多见 较少见
丙型肝炎
一、甲型肝炎病毒抗体测定
Determination of Hepatitis A virus antibody
【参考值】 ELISA法：抗HAV-IgM为阴性； 感染过HAV,抗HAV-IgG终生阳性 【临床意义】 1.抗HAV-IgM发病后2周升高，6月后转阴。 阳性为正在感染，早期诊断敏感特异指标。 2.抗HAV-IgG阳性提示既往感染。 3.RT-PCR:HAV-RNA阳性早期诊断，监测预防甲肝
Chapter 9 临床常见病原体检测
第一节 标本采集运送、评价和检查方法 第二节 病原体耐药性检测 第三节 临床感染常见病原体检查
第四节 病毒性肝炎检测
第四节
病毒肝炎检测查
一、甲型肝炎病毒标志物检测 二、乙型肝炎病毒标志物检测 三、丙型肝炎病毒标志物检测 四、丁型肝炎病毒标志物检测 五、戊型肝炎病毒标志物检测 六、庚型肝炎病毒标志物检测 七、输血传播病毒肝炎标志物检测
临床病原学检查ppt详解.
DNA/RNA——PCR、DNA探针杂交技术
第18页，共48页。
第二节 细菌耐药性检查
第19页，共48页。
一.抗微生物药物敏感性试验（AST）
1.定义：对敏感性不能预测的临床分离菌 株进行药敏试验，以指导临床选择治疗 药物和了解区域或医院内常见病原菌耐 药性变迁，有助于临床经验性治疗选药。
第20页，共48页。
医院感染检查
7.医院感染常见病原菌监测
尿液标本
病原菌——大肠埃希菌，变形杆菌，肺
炎克雷伯氏菌，肠球菌，金黄色葡萄球 菌，铜绿色假单胞菌
菌落计数>104/ml以上——尿路感染
第41页，共48页。
医院感染检查
7. 医院感染常见病原菌监测
痰（咽拭子）培养 病原菌——肺炎链球菌，肺炎克雷伯氏
菌，大肠埃希菌，肠球菌，金黄色葡萄 球菌，铜绿色假单胞菌等
• 封闭性脓肿：无菌注射器穿刺抽取
第12页，共48页。
二.病原体检查的基本方法
1.临床标本细菌检验一般程序
第13页，共48页。
一般程序
标本
直接涂片，染色镜检 分离培养
需氧培养
二氧化碳培养
观察菌落形态
单个菌落
血清学鉴定
生化鉴定
确定致病菌发出报告
增菌培养 厌氧培养
涂片、染色镜检 药敏试验
第14页，共48页。
（优选）临床病原学检查课件
第1页，共48页。
掌握：感染性疾病的诊断和治疗原则 熟悉：感染性疾病病原学实验诊断及抗
生素治疗的主要实验室监测方法 了解：病原学诊断的重要性，现代感染的
类型和病原微生物的变迁
第2页，共48页。
病原体检查的作用
1.感染性疾病的明确诊断 2.通过药敏试验指导临床合理用药 3.病原体监控和耐药性监控
第18页，共48页。
第二节 细菌耐药性检查
第19页，共48页。
一.抗微生物药物敏感性试验（AST）
1.定义：对敏感性不能预测的临床分离菌 株进行药敏试验，以指导临床选择治疗 药物和了解区域或医院内常见病原菌耐 药性变迁，有助于临床经验性治疗选药。
第20页，共48页。
医院感染检查
7.医院感染常见病原菌监测
尿液标本
病原菌——大肠埃希菌，变形杆菌，肺
炎克雷伯氏菌，肠球菌，金黄色葡萄球 菌，铜绿色假单胞菌
菌落计数>104/ml以上——尿路感染
第41页，共48页。
医院感染检查
7. 医院感染常见病原菌监测
痰（咽拭子）培养 病原菌——肺炎链球菌，肺炎克雷伯氏
菌，大肠埃希菌，肠球菌，金黄色葡萄 球菌，铜绿色假单胞菌等
• 封闭性脓肿：无菌注射器穿刺抽取
第12页，共48页。
二.病原体检查的基本方法
1.临床标本细菌检验一般程序
第13页，共48页。
一般程序
标本
直接涂片，染色镜检 分离培养
需氧培养
二氧化碳培养
观察菌落形态
单个菌落
血清学鉴定
生化鉴定
确定致病菌发出报告
增菌培养 厌氧培养
涂片、染色镜检 药敏试验
第14页，共48页。
（优选）临床病原学检查课件
第1页，共48页。
掌握：感染性疾病的诊断和治疗原则 熟悉：感染性疾病病原学实验诊断及抗
生素治疗的主要实验室监测方法 了解：病原学诊断的重要性，现代感染的
类型和病原微生物的变迁
第2页，共48页。
病原体检查的作用
1.感染性疾病的明确诊断 2.通过药敏试验指导临床合理用药 3.病原体监控和耐药性监控
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第九章临床病原体检测
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
临床病原体检查的基本程序 1.医生、护士、病人、检验师：正确采集
运送标本。 2.检验科：直接镜检、免疫学和分子生物
检测、病原体分离培养鉴定、药敏实 验——报告结果。 3.医生：明确诊断、合理用药。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
第三节 临床感染常见病原体检查
PCR是检测病原体微生物最灵敏的方法，但具 有一定的假阳性与假阴性。阳性只表明存在某 种病原体的核酸，是否正被感染应结合临床具 体分析。 血清学试验是目前应用最广泛的感染性疾病检 测方法，特异性IgM可作为感染性疾病的早期 诊断指标，且可区分原发与复发感染。特异性 IgG，尤其双份血清的滴度呈4倍或4倍以上升 高，考虑病原体感染。
第三节 临床感染常见病原体检查
（三）真菌感染：直接显微镜检查、分离 培养、免疫学试验和动物试验、核酸杂 交和PCR技术 形态学检查是真菌检测的重要手段
第三节 临床感染常见病原体检查
（四）寄生虫病： 直接显微镜检查 是寄生虫感染的 主要诊断依据
第三节 临床感染常见病原体检查
（五）其它病原体感染 1.支原体：分离培养是支原体感染的确诊依据。 目前临床多检测支原体抗原与核酸，用于早期快速诊断。 2.螺旋体：血清学 3.立克次体：血清学、分离培养、核酸检测 4.衣原体：直接显微镜检查、分离培养、DNA探针技术
一、标本采集和运送 标本采集的基本原则
1.无菌、及时、按照要求、标注清晰
2.根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
3. 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素 使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
4.采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（四）呼吸道标本 1.类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本。 2.上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结
果分析时应予考虑。 3.痰标本：⑴采集时间：晨痰，且在取痰前
用清水反复漱口。⑵方法：①自然咳痰② 气管镜下采集法③气管穿刺法
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
5.标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（一）血液 1.适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症的
病人。 2.一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰期
采血，已用过抗菌药物治疗者，在下次用药 前采集。 3. 血液与培养基的比例为1：10，一般成人血 量10-20ml，婴儿1-5ml，最好在床边接种。
墨汁染色找 新型隐球菌
抗酸染色
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
不染色标本：用于观 察病原体的大小、形 态与运动等特性。 结果评价：部分病原 体可借此初步诊断， 如暗视野显微镜下见 弹簧状螺旋体，应怀 疑梅毒螺旋体的感染。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
明确感染病原体。 为临床提供体外抗微 生物药物敏感试验结 果。
（九）血清
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
三、检查方法 （一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原的检测 （三）病原体核酸的检测 （四）病原体的分离培养与鉴定 （五）血清学实验
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
革兰氏阳性球菌 革兰氏阴性杆菌
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
第三节 临床感染常见病原体检查
二、检查项目和临床应用 （一）细菌感染：⑴检测细菌或其抗原---直接涂
片镜检、培养、抗原检测⑵检测抗体⑶检测细 菌遗传物质---基因探针技术、PCR技术
细菌培养是最重要的确诊方法 （二）病毒感染：病毒分离与鉴定、病毒核酸与
抗原检测、特异性抗体 细胞培养是最常用的病毒分离方法
和PCR技术，目前临床多检测衣原体抗原与核酸，用 于早期快速诊断。 5.SARS病毒：免疫学方法检测抗体、基因检测、细胞培 养
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第三节 临床感染常见病原体检查
（六）实验结果分析和临床应用 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为 感染的病原体。 存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量 考虑是否为致病菌。 如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本 不合格、培养不恰当、病原体为难培养菌或已使用 抗生素等因素，尤其是直接镜检找到病原体，而培 养阴性，应考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。
第三节 临床感染常见病原体检查
一、流行病学和临床类型 （一）流行病学 流行病学的特点： （1）疾病谱发生变迁 （2）多重耐药株出现 （3）器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展
第三节 临床感染常见病原体检查
（二）临床类型 临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、 衣原体、立克次体 、真菌、螺旋体以及寄 生虫等 细菌感染是发病率较高的感染性疾病，病 原体种类以革兰氏阴性条件致病菌、凝固 酶阴性葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌和 耐药的白色念珠菌为主。 病毒感染是人群发病率最高的感染类型
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（七）泌尿生殖道标本 1.男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 2.女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（八）创面、组织和脓肿标本 1.大面积创伤的创面分泌物：首先清除采集部位的污
物，以碘酒、酒精消毒皮肤，再用无菌棉纤多点采 取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检。 2.开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取脓液或 病灶深部分泌物 3.封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取，怀疑厌 氧菌感染，应隔绝空气采集
（五）脑脊液与其它无菌体液 1.脑脊液由临床医生采用腰椎穿刺，抽取
2-3ml，置于无菌容器中立即保温送检 或床边接种。 2.胸水、腹水和心包液等标本宜采集较大 量标本送检，标本接种于血培养瓶。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（六）眼、耳部标本 用拭子采样，也可在局部麻醉后取角膜刮 屑。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（二）尿液 1.无菌采集中段尿 2.如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采
集标本、无菌厌氧小瓶运送。 3.排尿困难者考虑导尿采集标本。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（三）粪便 1.自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容
器中送检。 2. 排便困难者，采用直肠拭子采集。 3.根据细菌种类不同选用合适的运送培养液。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
临床病原体检查的基本程序 1.医生、护士、病人、检验师：正确采集
运送标本。 2.检验科：直接镜检、免疫学和分子生物
检测、病原体分离培养鉴定、药敏实 验——报告结果。 3.医生：明确诊断、合理用药。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
第三节 临床感染常见病原体检查
PCR是检测病原体微生物最灵敏的方法，但具 有一定的假阳性与假阴性。阳性只表明存在某 种病原体的核酸，是否正被感染应结合临床具 体分析。 血清学试验是目前应用最广泛的感染性疾病检 测方法，特异性IgM可作为感染性疾病的早期 诊断指标，且可区分原发与复发感染。特异性 IgG，尤其双份血清的滴度呈4倍或4倍以上升 高，考虑病原体感染。
第三节 临床感染常见病原体检查
（三）真菌感染：直接显微镜检查、分离 培养、免疫学试验和动物试验、核酸杂 交和PCR技术 形态学检查是真菌检测的重要手段
第三节 临床感染常见病原体检查
（四）寄生虫病： 直接显微镜检查 是寄生虫感染的 主要诊断依据
第三节 临床感染常见病原体检查
（五）其它病原体感染 1.支原体：分离培养是支原体感染的确诊依据。 目前临床多检测支原体抗原与核酸，用于早期快速诊断。 2.螺旋体：血清学 3.立克次体：血清学、分离培养、核酸检测 4.衣原体：直接显微镜检查、分离培养、DNA探针技术
一、标本采集和运送 标本采集的基本原则
1.无菌、及时、按照要求、标注清晰
2.根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
3. 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素 使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
4.采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（四）呼吸道标本 1.类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本。 2.上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结
果分析时应予考虑。 3.痰标本：⑴采集时间：晨痰，且在取痰前
用清水反复漱口。⑵方法：①自然咳痰② 气管镜下采集法③气管穿刺法
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
5.标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（一）血液 1.适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症的
病人。 2.一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰期
采血，已用过抗菌药物治疗者，在下次用药 前采集。 3. 血液与培养基的比例为1：10，一般成人血 量10-20ml，婴儿1-5ml，最好在床边接种。
墨汁染色找 新型隐球菌
抗酸染色
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
不染色标本：用于观 察病原体的大小、形 态与运动等特性。 结果评价：部分病原 体可借此初步诊断， 如暗视野显微镜下见 弹簧状螺旋体，应怀 疑梅毒螺旋体的感染。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
明确感染病原体。 为临床提供体外抗微 生物药物敏感试验结 果。
（九）血清
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
三、检查方法 （一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原的检测 （三）病原体核酸的检测 （四）病原体的分离培养与鉴定 （五）血清学实验
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
革兰氏阳性球菌 革兰氏阴性杆菌
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
第三节 临床感染常见病原体检查
二、检查项目和临床应用 （一）细菌感染：⑴检测细菌或其抗原---直接涂
片镜检、培养、抗原检测⑵检测抗体⑶检测细 菌遗传物质---基因探针技术、PCR技术
细菌培养是最重要的确诊方法 （二）病毒感染：病毒分离与鉴定、病毒核酸与
抗原检测、特异性抗体 细胞培养是最常用的病毒分离方法
和PCR技术，目前临床多检测衣原体抗原与核酸，用 于早期快速诊断。 5.SARS病毒：免疫学方法检测抗体、基因检测、细胞培 养
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第三节 临床感染常见病原体检查
（六）实验结果分析和临床应用 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为 感染的病原体。 存在正常菌群的标本检测到细菌，应结合细菌的量 考虑是否为致病菌。 如临床表现支持感染，但培养阴性，应考虑为标本 不合格、培养不恰当、病原体为难培养菌或已使用 抗生素等因素，尤其是直接镜检找到病原体，而培 养阴性，应考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染。
第三节 临床感染常见病原体检查
一、流行病学和临床类型 （一）流行病学 流行病学的特点： （1）疾病谱发生变迁 （2）多重耐药株出现 （3）器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展
第三节 临床感染常见病原体检查
（二）临床类型 临床常见病原体为：细菌、病毒、支原体、 衣原体、立克次体 、真菌、螺旋体以及寄 生虫等 细菌感染是发病率较高的感染性疾病，病 原体种类以革兰氏阴性条件致病菌、凝固 酶阴性葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌和 耐药的白色念珠菌为主。 病毒感染是人群发病率最高的感染类型
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（七）泌尿生殖道标本 1.男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 2.女性：用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（八）创面、组织和脓肿标本 1.大面积创伤的创面分泌物：首先清除采集部位的污
物，以碘酒、酒精消毒皮肤，再用无菌棉纤多点采 取脓液或分泌物，置于无菌试管中送检。 2.开放性脓肿及脓性分泌物：用无菌棉纤采取脓液或 病灶深部分泌物 3.封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取，怀疑厌 氧菌感染，应隔绝空气采集
（五）脑脊液与其它无菌体液 1.脑脊液由临床医生采用腰椎穿刺，抽取
2-3ml，置于无菌容器中立即保温送检 或床边接种。 2.胸水、腹水和心包液等标本宜采集较大 量标本送检，标本接种于血培养瓶。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（六）眼、耳部标本 用拭子采样，也可在局部麻醉后取角膜刮 屑。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（二）尿液 1.无菌采集中段尿 2.如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采
集标本、无菌厌氧小瓶运送。 3.排尿困难者考虑导尿采集标本。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（三）粪便 1.自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容
器中送检。 2. 排便困难者，采用直肠拭子采集。 3.根据细菌种类不同选用合适的运送培养液。