卵黄抗体作用机理
卵黄抗体在乳仔猪抗腹泻方面的应用
卵黄抗体在乳仔猪抗腹泻方面的应用作者：夏俊钟来源：《国外畜牧学·猪与禽》2016年第05期卵黄抗体（IgY）作用广泛，今天主要介绍IgY在仔猪抗腹泻方面的应用。
卵黄抗体的发现在二十世纪早期，而系统性研究发生在二十世纪七八十年代，这与困扰当时养猪业的仔猪腹泻有关。
抗生素滥用问题和食品药物残留问题逐步受到关注，因此非抗生素保健治疗介质的开发越发受到重视。
1 卵黄抗体粉开发的背景鸡蛋能够孕育生命，因此它含有生命所需的所有营养物质，鸡蛋中蛋黄占 28 %～32 %，蛋清占52 %～56 %，营养丰富，生物利用率高。
鸡蛋中富含的功能性成分，如蛋清中的溶菌酶，蛋黄中的免疫球蛋白和30 %油脂（其中67 %甘油三酯、19 %卵磷脂、5 %脑磷脂）。
卵磷脂是优良的天然乳化剂，可乳化油脂，增强机体对脂肪的消化吸收，能预防动脉硬化，对公猪的性功能有明显的增强作用。
2 蛋黄抗体（EYA）来源和特性禽类的免疫系统包括细胞免疫和体液免疫，分别受胸腺和法氏囊的控制。
当机体受到外来抗原刺激后，法氏囊内的B细胞分化为浆细胞，分泌特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体在卵细胞中逐渐蓄积，形成蛋黄抗体；特异性抗体移行进入卵细胞是受体作用的结果，因而特异性抗体可在卵细胞中大量蓄积，浓度远高于血液中的IgY。
来源于鸡蛋黄中的蛋黄抗体，作为替代抗生素的新型产品正在引起人们的关注。
因无耐药、无残留、无公害、安全高效，被美国FDA列为一般公认安全物质。
IgY的理化特性与哺乳动物的IgG相似。
IgY的分子量约为180 KDa，由两条轻链（2L）和两条重链（2H）组成，分子量分别为60 KDa～70 KDa和22 KDa～30 KDa，其等电点约为5.2。
与一般哺乳动物IgG相比，IgY具有较强的耐压、耐热、耐酸和抗酶降解能力。
耐压试验表明，蛋黄抗体粉在压力16.0 MPa的条件下都很稳定，抗体活性无变化。
蛋黄抗体粉在水溶水浴条件下，70 ℃处理5 min，抗体活性无明显下降。
特异性卵黄抗体作为药效营养品在饲料中应用
２卵黄抗体作用机理
关于ＩｇＹ的抗病机理，目前尚未完全阐明，推测 主要有两种：①可直接黏附于病原菌的细胞壁上，改 变病原菌细胞的完整性，直接抑制病原菌生长（Ｚｈｅｎ 等，２００８；Ｌｅｅ等，２００２）；②可黏附于病原菌的菌毛 上，减少或阻断菌毛对肠黏膜上皮细胞的黏附，抑制 病原菌侵染（Ｙｏｋｏｙａｍａ等，１９９２；Ｊｉｎ等，１９９８），从而减少腹泻的发生，促进仔猪生长。
ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｌｙ－ｆｒｉｅｎｄｌｙ ａｎｄ ｅｌｉｃｉｔｓ ｎｏ ｕｎｄｅｓｉｒａｂｌｅ ｓｉｄｅ ｅｆｆｅｃｔｓ，ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｏｒ ｔｏｘｉｃ ｒｅｓｉｄｕｅｓ．Ｔｈｉｓ ｒｅｖｉｅｗ ｐｒｅｓｅｎｔｓ
ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＩｇＹ ｉｎ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ ａｎｄ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｅｇｇ ｙｏｌｋ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ＩｇＹ）；ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ；ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ａｎｉｍａｌ
犊牛在出生后最初两周最易发生腹泻，主要的 病原体有轮状病毒、冠状病毒、大肠杆菌Ｋ９９和 隐孢子等。Ｅｒｈａｒｄ等（１９９３）和Ｏｚｐｉｎａｒ等（１９９６） 给初生犊牛（０～１４日龄）补充抗大肠杆菌Ｋ９９和 ＨＲＶ的ＩｇＹ鸡蛋粉，从腹泻率、腹泻程度以及腹泻 的时间等几项指标来看，使用ＩｇＹ鸡蛋粉的效果显 著，特别是添加ＩｇＹ组的日增重显著高于对照组（彭 玉耩等，２００２）。
抗猪链球菌卵黄抗体的性质和壳聚糖纳米微粒制备研究
抗猪链球菌卵黄抗体的性质和壳聚糖纳米微粒制备研究抗猪链球菌卵黄抗体的性质和壳聚糖纳米微粒制备研究引言猪链球菌（Streptococcus suis）是一种常见的猪类病原菌，对猪类养殖业造成了严重的经济损失。
猪链球菌感染不仅会导致猪只死亡，还会引起人畜共患病，对人类健康构成威胁。
由于抗生素滥用引发的耐药性问题，抗生素的使用已经受到限制。
因此，研究开发新型的抗菌剂是十分迫切的需求。
方法与结果1. 卵黄抗体的性质卵黄抗体是一种来源于动物卵黄的天然抗体，具有较强的抗原特异性和亲和力。
在先天免疫系统中具有重要的作用，对抗多种细菌感染起到了重要的作用。
卵黄抗体还具有良好的免疫稳定性和热稳定性，能够在较高温度和酸碱环境中保持稳定性能。
因此，卵黄抗体被广泛应用于食品安全、兽药和生物制药等领域。
2. 壳聚糖纳米微粒的制备壳聚糖是一种来源于甲壳动物外壳或菌丝体的天然聚合物。
由于其优异的生物相容性、可再生性和低毒性，壳聚糖成为了制备纳米微粒的理想材料。
壳聚糖纳米微粒可以通过离子凝胶法、乳化法、减缓扩散法等方法制备得到。
其中，离子凝胶法是一种常用的制备壳聚糖纳米微粒的方法，通过与溶液中的对离子反应形成凝胶，进而形成纳米粒子。
3. 抗猪链球菌卵黄抗体与壳聚糖纳米微粒的结合研究表明，抗猪链球菌卵黄抗体可以通过与壳聚糖纳米微粒的静电相互作用和亲和力相结合，形成稳定的复合物。
抗体的吸附效率和复合物的稳定性受到多种因素的影响，包括pH值、温度、盐浓度等。
适当的条件下，可以实现较高的抗体吸附效率和复合物的稳定性。
此外，壳聚糖纳米粒子还可以增加抗体的半衰期，提高其在体内的生物利用度。
讨论与展望目前，抗猪链球菌卵黄抗体与壳聚糖纳米微粒的结合已经在抗猪链球菌感染的防治方面取得了一定的成果。
然而，仍然存在一些问题需要解决。
首先，制备壳聚糖纳米微粒的方法仍然需要进一步优化和改进，以提高纳米粒子的制备效率和产品的稳定性。
其次，抗体的吸附效率和复合物的稳定性需要进一步研究，以确定最佳的操作条件。
卵黄抗体的制作和应用(精)
卵黄杭体是治疗鸡新城疫(ND 和传染性法氏囊病 (IBD的一种特效药。
卵黄抗体的作用诊断作用:卵黄抗体具有沉淀素的特性,当诊断时,若怀疑鸡群发生传染性法氏囊病, 可采取病料 5克,加灭菌生理盐水 10毫升,研磨,加抗菌剂抑菌,置于冰箱过夜,作为未知抗原,制作备用琼脂板,打成梅花状七孔后,同时加入未知病料抗原和已知的卵黄抗体各一份,约 0.5毫升, 25℃放置 24小时~72小时,出现肉眼可见白色沉淀线,为阳性反应。
强阳性反应时 ,24小时后就可见到沉淀线,即可判定试验鸡群发生了传染性法氏囊病。
治疗作用:当鸡群发生新城疫或传染性法氏囊病时, 可立即皮下注射卵黄抗体1~2毫升, 肉鸡可口服卵黄抗体 2毫升/只,能阻止病毒进入细胞,形成再感染,中和病毒数量,经 2小时就可发现鸡群精神好转,食欲增加,粪便恢复正常。
目前,是治疗鸡新城疫、传染性法氏囊病的特效药物。
预防作用:卵黄抗体的使用,在免疫学理论中可成为被动免疫。
当免疫缺陷、疫苗缺乏及免疫失败时,可利用卵黄抗体注射、口服替代主动免疫接种,发挥抗病作用。
制作方法 :将新城疫 I 系苗、传染性法氏囊强毒苗连续注射健康无病产蛋鸡三次, 第一次 1个免疫量,第二次 2个免疫量,第三次 3个免疫量。
待 3周后收集母鸡所产的蛋,无菌术取蛋黄, 加灭菌生理盐水稀释成 1:20的混悬液, 测定效价, 加入抑菌剂, 然后进行分装, 在 0℃以下保存备用。
卵黄抗体成分与效价卵黄抗体也称母源抗体 ,IgG 抗体。
是母体血液中小分子抗体 IgG 通过胎盘、输卵管、滋养层传给后代。
保存入卵的蛋黄中,若孵化出鸡雏,则对新城疫、传染性法氏囊有特异的抵抗作用。
这种抵抗作用称为抗体,其分子结构称为单体 Ig, 由 2条多肽重链和 2条多肽轻链组成。
沉淀系数 7S ,分子量 160000 ~180000,含糖 2.5%。
现已发现有四种 IgGT 型重链同种异型, 也称作四个亚型并含硫的半胱氨酸。
卵黄免疫球蛋白的应用进展
原微生物， 以及激素 、 酶等的卵黄抗体 ， 已在疾病 并
诊断 和防治 等领域 得到 了应用 。
完整性 ，抑制病原的生长 ； Ｙ也能粘附在特定病 Ｉ ｇ
２ 中 国动 物保 健 Ｃ ｉ ｎ ｌ ｅ ｌ ０ ０年 ４月 ０ ｈ ａＡ ｉ ａｈ２ １ ｎ ｍａ Ｈ ｔ
原菌 的菌 毛上 ， 排斥 细菌 粘 附于肠 道粘 膜 的上皮 细
疗 。近作用机理 卵黄抗体预防和治疗疾病的过程是免疫反应 的过程 ， 其作用机理主要是 Ｉ ｇ Ｙ与病原的特定粘附 因子发生特异性结合 ，从而导致病原丧失致病性。
ＩＹ能够粘 附在 特定病 原 的细 胞 壁上 ， ｇ 改变 病原 的
ａ ｄ ｐ ｏ ｐ ｃ ｒ ｅ ｉｗｅ ｕ ｈ ａ ａ ｏ ｉ， ｒ ｖ ｎ ｉ ｎａ ｄ ｔｅ ｔ ｎ ｎ ａ ｍａ ｉａ， ａ ｔ ｒａ ｎ ｒ ｓｔ ｎ ｒｓ ｅ ｔ ｗｅ ｅｒ ｖｅ ｄ ｓ ｃ ｓｄｉｇ ｓｓ ｐ ｅ ｅ ｔｏ ｎ ｒ ａｍｅ ｔｉ ｎｉ ｌ ｖｒ ｌ ｂ ｃｅ ｉ ａ ｄｐａ ａ ｉｉ ｎ ｌ ｃ ｄｓ ａｅ ． ｉｅ ｓ ｓ
卵黄抗体的结构与功能其在人及动物疾病中应用进展
㊀２０１８,３４(１)中国人兽共患病学报C h i n e s e J o u r n a l o f Z o o n o s e sD O I :１０．３９６９/j．i s s n ．１００２－２６９４．２０１７．００．００９ 综㊀述卵黄抗体的结构与功能其在人及动物疾病中应用进展余运运,孙丽娜,孙万邦贵州省特色重点学科项目(Z D X K ２０１４７)通讯作者:孙万邦,E m a i l :s u n w b ７２２４＠s i n a ．c o n作者单位:遵义医学院珠海校区/贵州省免疫学研究生教育创新基地,珠海㊀５１９０４１摘㊀要:鸡卵黄免疫球蛋白(I gY )又称卵黄抗体,是禽类受特定抗原刺激后分泌的特异性抗体.因具有耐热㊁耐酸和抗蛋白酶降解等特性,早期开发产品作为食品或食品添加剂应用受到重视,其产品开发在食品安全㊁生态农业方面有重要社会效益和经济效益,产品由于含针对某病原生物特异性抗体,可抵抗病原生物的感染,因而在动物及人类疾病的防治方面有开发应用价值,在人类健康保健也有十分重要的应用前景.本文就动物和人类抗病毒㊁抗细菌㊁抗寄生虫㊁抗肿瘤等相关的I g Y 生物制剂产品研发及应用进行综述.关键词:卵黄抗体;产品研发;疾病防治中图分类号:R ３９２．１㊀㊀㊀文献标识码:A ㊀㊀㊀文章编号:１００２－２６９４(２０１８)０１－００６７－０６A d v a n c e s i n s t r u c t u r e ,f u n c t i o na n da p p l i c a t i o no f e g g y o l ka n t i b o d yi nh u m a na n da n i m a l d i s e a s e sY U Y u n Ｇy u n ,S U N L i Ｇn a ,S U N W a n Ｇb a n g(Z h u h a iC a m p u s o f Z u n y iM e d i c a lC o l l e g e /E d u c a t i o na n dI n n o v a t i o nB a s e f o r I mm u n o l o g yG r a d u a t eS t u d e n t s i nG u i z h o uP r o v i n c e ,Z h u h a i ５１９０４１,C h i n a )A b s t r a c t :E g gy o l ki mm u n o g l o b u l i n (I g Y ),a l s oc a l l e de g gy o l ka n t i b o d y ,i sas p e c i f i ca n t i b o d y s e c r e t e db y bi r d sa f t e r s t i m u l a t i o nw i t hc e r t a i n a n t i g e n s ．F o r t h a t i t e x h i b i t s g o o d r e s i s t a n c e t o h e a t ,a c i d a n d p r o t e i n a s e Ｇm e d i a t e d d e gr a d a t i o n ,i t s e a r Ｇl y Ｇs t a g e p r o d u c t sw e r e d e v e l o p e d a s f o o d o r f o o d a d d i t i v e s ,a n d t h e y ha v e g a i n e d g r e a t s o c i a l a n d e c o n o m i cb e n e f i t s i nb o t h f o o d s a f e t y a n dec o l o g i c a l a g r i c u l t u r e f i e ld s ．D ue t o t h e s p e c if i c a n t i b o d i e s c o n t a i n e d i n t h e s e p r o d u c t s ,t h e p r o d u c t s c a n h e l p t o r e s i s t p a t h og e n i n f e c t i o n ．Th e r e f o r e e g gy o l ka n ti b o d y s h o w s g r e a t v a l u e f o r d e v e l o p m e n t a n d a p p l i c a t i o n i n t h e p r e v e n t i o n a n d t r e a t Ｇm e n t o f a n i m a l a n d h u m a n d i s e a s e s ,a n d a l s o s h o w s g r e a t po t e n t i a l i n h u m a n h e a l t h c a r e a r e a ．T h i s r e v i e wf o c u s e s o n t h e d e v e l Ｇo p m e n t a n da p p l i c a t i o n s o f I g Yb i o l o g i c s r e l a t e dw i t ha n t i v i r a l ,a n t i b a c t e r i a l ,a n t i pa r a s i t i c a n da n t i t u m o r a c t i v i t i e s ．K e yw o r d s :e g gy o l ka n t i b o d y ;p r o d u c t d e v e l o p m e n t ;p r e v e n t i o na n d t r e a t m e n t o f d i s e a s e s S u p p o r t e db y t h eK e y D i s c i p l i n eP r o j e c t o fG u i z h o uP r o v i n c e (N o ．Z D X K ２０１４)C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :S u n W a n Ｇb a n g,E m a i l :s u n w b ７２２４＠s i n a ．c o m ㊀㊀卵黄抗体(I mm u n o g l o b u l i no fe g gy o l k /e g gy o l ka n t i b o d y ,I g Y )是指特定抗原刺激禽类B 淋巴细胞,由B 细胞分化成浆细胞并由此分泌特异性抗体进入血液循环,当血液流经卵巢时在卵细胞中逐渐蓄积,形成卵黄抗体.卵黄抗体具有性质稳定㊁特异性强㊁制备成本低㊁口服安全等优点在家禽㊁家畜传染病的防治中已得到广泛的应用.产品的开发也在生态农业和食品安全方面产生了良好的经济效益和社会效益.在诊断㊁预防和治疗人类和动物各种疾病中具有良好的应用价值.I g Y 的产品在动物疾病防治应用报道较多,在医学中产品研发与应用报道较少,本文就I g Y 产品研发及应用进行综述.１㊀卵黄抗体结构功能及研发进展１．１㊀I g Y 的分泌㊀禽类的免疫系统包括细胞和体液免疫系统,分别受法氏囊和胸腺的控制.当机体受到外来抗原刺激后,体内主要发生体液免疫,法氏囊内的B 细胞活化㊁分化成为浆细胞,浆细胞分泌７６针对抗原的特异性抗体进入血液循环,特异性抗体(主要是I g G)随着血液流经卵巢,并在卵细胞中逐渐蓄积,形成卵黄抗体.流经输卵管的血液中的特异性抗体(主要是I g M)和I g A进入卵清中,形成卵清抗体.与卵黄抗体相比,卵细胞在输卵管中移行的时间较短,因而卵清抗体含量极微.１．２㊀I g Y的结构㊀I g Y分子结构与哺乳动物的I g G 相似.l g Y是一种７S免疫球蛋白,总分子量约１８０k D,由两条轻链和两重轻链组成,分子量分别是２２Ｇ３０k D㊁６７Ｇ７０k D.I g Y具有典型的免疫球蛋白的空间构象,也可与抗原结合,但其重链上的氨基酸组成与l g G相差很大[１].I g Y的重链由４个恒定区(C v１ＧC v４)和１个可变区组成,没有铰链区,C v２㊁C v３之间存在两个重链间二硫键.而哺乳动物I g G 只有３个恒定区(Cγ１ＧCγ３).最近的研究表明:I g Y 的疏水基团多于I g G,这恰好使它更适于脂类含量丰富的卵黄环境.比较I g Y和I g G的恒定区发现, I g Y的C v３㊁C v４区与I g G的C v２㊁C v３区十分相似,而C v２区可能经 压缩 形成I g G的铰链结构.相对于重链而言,两者轻链结构上差异较小,氨基酸组成的相似性较大.I g Y由于结构中比I g G重链多了一个恒定区,但却没有I g G特有的铰链区,所以I g Y的分子量较大,摆动性㊁柔韧性下降,稳定性较高[２].１．３㊀I g Y的功能优势㊀卵黄抗体与一般哺乳动物来源的抗体相比,具有以下优势:①经济易得:实验动物来源广泛,制备提取纯化过程简单,制备等量的抗体动物成本更低,产量高;②性质稳定:较强的耐酸㊁耐热㊁耐高渗性能和一定的抗酶降解能力.当p H为３．５~１１．０时,I g Y活性比较稳定,高于或低于这个范围时I g Y活性会迅速下降.当温度低于７５ħ条件下,I g Y具有良好的热稳定性.在室温存放６个月或在４ħ条件下存放５年对其活性无明显影响.I g Y对胃蛋白酶也有较好的耐受能力,但对胰蛋白酶十分敏感,I g Y分别与胰凝乳酶和胰蛋白酶温育８h,仍能保持一定的活性[３];③减少假阳性和假阴性:I g Y不与血清中的类风湿因子㊁人抗鼠抗体㊁抗ＧI g G抗体和抗体结合物发生交叉反应,不激活补体系统等,也不与葡萄球菌蛋白A(S P A)和链状球菌蛋白G发生反应,可以明显减少假阳性或假阴性的产生,增强检测特异性[４];④与血清不产生交叉反应:由于禽类和哺乳动物之间存在明显的种系和基因学背景差异,I g Y能识别更多的哺乳动物抗原表位,从而增强免疫信号,提高了I g Y灵敏度;⑤特殊抗体形成率高[５];⑥有诊断㊁预防㊁治疗的作用:可以做为食品或者食品添加剂以口服的方式达到防治疾病的作用,也可以做为诊断试剂检测疾病.因此,I g Y具有的检测特异性强㊁灵敏度高㊁性质稳定㊁安全等优点使其广泛地应用于食品㊁农业和人及动物疾病中.１．４㊀国内外已开发的I g Y专利㊀从１８９３年K l e mＧp e r e r发现I g Y,国外关于I g Y的研究和应用较多.根据初步资料显示I g Y早期专利也集中在动物应用产品方面.国外由最开始禽病防治,到兽类㊁养殖类甚至人类疾病㊁食品工业及农业等各方面均有涉及.国外早期将I g Y作为饲料添加剂用于动物生长繁殖及各种疾病的预防防治,后来研发出制成口服液㊁喷雾剂或作为食品添加剂等用于抗炎㊁抗感染㊁抗肥胖㊁抗胃肠道疾病等各个方面和领域的I g Y,并申请相关专利[６Ｇ９].国内I g Y研发起步比较晚,近年来快速增长,国内很多生物技术公司也开始类似产品研发.如重庆和润实业有限公司申请了制备抗禽类病毒性㊁细菌性疫病㊁抗仔猪黄痢㊁白痢病原菌㊁抗奶牛乳腺炎病原菌复合卵黄抗体的专利并应用于治疗相关疾病药物或饲料添加剂中.中国在抗寄生虫㊁细菌㊁病毒或其他方面关于卵黄抗体的专利有３００多篇,随着科技的发展和进步会有更多的产品研发并投入实际应用中.２㊀卵黄抗体在人及动物疾病诊断的应用禽类与哺乳系动物种系关系较远,卵黄抗体与人和哺乳动物免疫球蛋白有许多不同之处,I g Y不与金色葡萄球菌A蛋白结合㊁哺乳动物F c受体结合,对哺乳动物补体无固定作用等,这使得卵黄抗体在检测诊断上具有更强的特异性和灵敏度,能避免试验假阳性.I g Y制备简单㊁产量高,有望取代传统的多克隆抗体的生产,获取大量更有效的抗体.I g Y可以应用于免疫荧光试验㊁E L I S A试验㊁免疫扩散㊁免疫电泳等.２．１㊀I g Y在病毒感染诊断中的应用㊀赵文思等用纯化的H I VＧ１P１５蛋白免疫产蛋鸡制备鸡卵黄抗体,通过优化组合获得了高纯度的I g Y,纯化的抗体能够与H I VＧ１病毒蛋白P１５特异性结合,为H I V 感染患者的诊断提供了新思路[１０].严重急性呼吸综合征冠状病毒的核衣壳蛋白(S A R SＧC o VＧN P)可用于判断个体是否感染S A R S,A．P a l a n i y a p p a n等用S A R SＧC o VＧN P免疫产蛋鸡制备抗S A R SＧC o VＧN P的多克隆抗体I g Y,S A R SＧC o VＧN P作为包被抗原,单克隆抗S A R SＧC o VＧN P抗体作为捕获抗体, I g Y作为检测抗体,采用E L I S A双抗体夹心法用于８６中国人兽共患病学报２０１８,３４(１)S A R S疑似个体的早期诊断[１１].张小莺等[１２]用三种灭活的天花病毒(痘苗病毒,c a l p o x病毒和牛痘病毒)免疫三组蛋鸡,制备抗v a c c i n i av i r u s I g Y和抗c a l p o xv i r u s I g Y,在高度稀释的情况下,仍可在免疫荧光实验中呈阳性反应,并且特异性卵黄抗体能够与磁珠结合用于天花病毒的P C R检测,研究表明抗痘病毒I g Y有望成为一个痘病毒的检测手段.狂犬病是一种由狂犬病病毒所致的人兽共患病, I g Y可用于狂犬病病毒感染的诊断,用直接荧光抗体检测方法检测狂犬病毒抗原已经在世界范围内得到广泛应用.I g Y作为替代抗体用于检测冰冻肝脏中的甲型肝炎病毒[１３].猪圆环病毒２型(P o r c i n e c i r c o v i r u s２,P C V２)是断奶仔猪多系统衰竭综合征(P MW S)等相关疾病的主要病原体,建立猪圆环病毒２型捕获E L I S A抗体检测方法检测猪圆环病毒２型[１４].乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的急性人兽共患传染病,黄少梅[１５]研制猪乙型脑炎病毒E L I S A抗体检测试剂盒.２．２㊀I g Y在细菌和寄生虫感染诊断中的应用㊀产志贺毒素大肠杆菌能引起一系列疾病,包括腹泻㊁出血性结肠炎和危及生命的溶血性尿毒综合症(HU S)等,将志贺毒素(S T X)作为抗原,制备a n t iＧs t x２b I g Y抗体,采用双抗体夹心E L I S A用于常规快速诊断产志贺毒素大肠杆菌检测的方法[１６].钩端螺旋体病是由钩端螺旋体属的致病性钩端螺旋体引起的传染病,抗钩端螺旋体的单克隆抗体㊁生物素标记的抗钩端螺旋体I g Y抗体采用双抗体夹心E L I S A检测待测血清(疑似含钩端螺旋体)[１７].弓形虫表面抗原(S A G１)可作为弓形虫的检测指标,制备出抗S A G１特异性I g Y抗体,可用于弓形虫的检测[１８].I g Y也为血吸虫病的检测也提供了一种便捷㊁无创伤的新方法[３].２．３㊀在肿瘤标志物检测中的应用㊀人乳头瘤病毒( H P V)１６是高危型H P V,与宫颈癌及宫颈上皮内高度病变有着密切的关系,对人乳头瘤病毒(H P V)的基础和临床诊断研究有重要意义.杨军等[１９]用人乳头瘤病毒１６L１蛋白(H P V１６L１)免疫蛋鸡,制备出纯度高㊁特异强的抗H P V１６L１I g Y抗体,用于检测H P V１６L１.乳腺癌的诊断中最常用的是肿瘤抗原１５Ｇ３(C A１５Ｇ３),制备抗C A１５Ｇ３I g Y,建立双抗体夹心法E L I S A检测C A１５Ｇ３[２０].H E R２和端粒酶是乳腺癌诊断的标志因子,Y X i a o等[２１]制备抗人H E R２和端粒酶单克隆抗体和I g Y,采用一种新的量子成像系统,对特定的细胞和组织进行追踪,与哺乳动物的I g G对比,前者表现出更高的亲和性.Y X i a o等制备抗H E R２I g Y结合纳米技术可用于H E R２的检测和肿瘤的靶向治疗[２２].前列腺特异性抗原(P S A)是一种重要的血清前列腺癌检测㊁监测和分期的标记物,A g n i e s z k aŁu p i c k aＧSło w i k 等[２３]用单克隆抗体夹心/I g Y/P S A检测E L I S A试剂盒,研究结果表明其可能是一个替代哺乳动物抗体诊断前列腺癌的方法.卵黄抗体还可用于卵巢癌和非霍奇金淋巴瘤患者的检测[２４].２．４㊀其他应用㊀PJ i n t a r i d t h等[２５]采用卵黄抗体技术是用来产生抗α血红蛋白I g Y抗体从而建立酶联免疫吸附试验诊断地中海贫血.转铁蛋白是血清中结合并转运铁的β球蛋白,血清转铁蛋白的含量变化可反映多种疾病,以鸡卵黄抗体I g Y代替哺乳动物抗体I g G用于表面等离子体共振技术对人血清中转铁蛋白的实时检测[２６].３㊀卵黄抗体在人及动物疾病防治中的应用３．１㊀在病毒性疾病治疗预防方面的应用㊀轮状病毒(R V)引起的人畜腹泻在全世界范围内是一个重要的公共卫生问题.且特异性I g Y口服给药已报道有利于抗轮状病毒感染,实验结果显示口服抗R VI g Y降低小鼠R V发病率,表明其在防治轮状病毒相关疾病存在潜在意义[２７].HM T h u等[２８]研究口服抗轮状病毒I g Y是治疗新生儿轮状病毒腹泻一种安全有效的方法.甲型流感病毒感染人的呼吸系统,可引起急性和致命的肺部疾病,耐药病毒株的出现凸显替代治疗方法的需要,研究显示高滴度抗甲型H１N１流感病毒I g Y抗体能特异性结合甲型H１N１流感病毒神经氨酸酶和血凝素,采用的模型小鼠肺组织保持正常.此外,相比神经氨酸酶抑制剂奥司他韦,该抗体还具有保护活性,因此I g Y 可以提供一个有效控制流感的替代方法[２９].I g Y 不仅应用于艾滋病病毒(H I V)的诊断,在治疗上也有一定的应用,S r iA g u sS u d j a r w o等[３０]通过模型小鼠研究口服抗H I VI g Y对小鼠急性毒性的影响,总体结果表明口服抗H I VI g Y对小鼠不会产生任何明显的毒性作用,因此,抗H I V抗体可用于对艾滋病患者的辅助免疫治疗.诺如病毒(N o V s)是影响全球数百万患者患流行性急性胃肠炎的主要原因,目前,还没有针对此病毒有效的疫苗或抗病毒药物,Y i n gＧC h u n D a i等[３１]研究中表示特异性抗N o V s I g Y可用于可诺如病毒的诊断和治疗.３．２㊀在寄生虫㊁细菌性疾病治疗预防方面的应用㊀隐孢子虫可引起免疫功能低下的人和新生动物腹泻,P２３是一种属于２３蛋白家族的糖蛋白并表达于９６１期余运运等:卵黄抗体的结构与功能其在人及动物疾病中应用进展寄生虫不同的生活阶段,Z a h r aO m i d i a n等[３２]将小隐孢子虫重组P２３应用于本研究中,制备的抗重组P２３特异性I g Y对隐孢子虫病有抑制作用,可以作为预防动物和免疫功能低下的人感染隐孢子虫的被动疫苗.幽门螺旋杆菌(H p)感染是胃十二指肠疾病包括急性胃㊁十二指肠溃疡㊁慢性胃炎㊁慢性萎缩性胃炎的主要病原菌,B a o n i n g W a n g等[３３]研究表明抗H P I g Y对H p生长㊁H P尿素酶活性具有抑制作用,口服抗H PI g Y治疗感染幽门螺杆菌模型小鼠,治愈率可达到８３．３％,该抗体有望成为治疗H p 感染有针对性的新药物和治疗方法.Y u nＧH u i Y a n g等[３４]组合I g Y和兰索拉唑或者传统药物联合给药治疗H P,其显示了一定的优越性,此外I g Y克服了抗生素的耐药性,I g Y可能是代替抗生素治疗H P引起的胃溃疡的新选择.牙龈卟啉单胞菌(G P)是引起牙周炎重要的原因之一,通过抑制G P 而降低其致病性.K y o s u k eY o k o y a m a等[３５]研究抗牙龈卟啉单胞菌卵黄抗体(I g YＧG P)㊁龈下刮治术㊁根面平整术(S R P)治疗方法与龈下刮治术㊁根面平整术(S R P)治疗方法的比较,证明I g YＧG P对牙周炎患者菌群里的G P生长有抑制作用,临床上使用含I g YＧG P软膏治疗牙周炎进一步证明此结论, I g YＧG P可作为一种有效的免疫治疗牙周炎的药物.I g Y在艰难梭菌相关性腹泻的诊断和治疗也有应用.I g Y口服已经证明是成功的用于各种消化道感染的治疗,如鲁氏耶尔森菌㊁产肠毒素大肠杆菌㊁沙门氏菌㊁金黄色葡萄球菌㊁铜绿假单胞菌㊁迟钝爱德华菌等[３６].３．３㊀在肿瘤治疗预防方面的应用㊀特异性I g Y在肿瘤患者的应用还处于初步研究阶段,但为肿瘤的治疗和预防提供了一种新的思维.早期李庆昌等[３７]从人胃低分化粘液腺癌细胞MG CＧ８０３中分离出一种癌蛋白P１１０,并用其免疫蛋鸡,制备的抗体l g Y再与蓖麻毒蛋白的A链偶联成l g YＧR i c i o A免疫毒(生物导弹),结果表明生物导弹l g YＧR i c i n A治疗上消化道肿瘤有一定的作用.而且刘连瑞等研究显示I g YＧr i c i n A能够选择性的杀伤MG CＧ８０３肿瘤细胞且I g Y只具有特异识别细胞㊁而无诱导细胞凋亡的作用,应用于消化系统肿瘤的靶向治疗有一定的潜能.脑胶质瘤是最常见并且多发的中枢神经系统恶性肿瘤.胶质瘤I g Y抗体能特异㊁选择性的识别脑胶质瘤组织,因此它可以作为一种小型而高效的导向载体,把毒素有定向地运输到肿瘤细胞上,当载体识别肿瘤细胞后,立即与肿瘤细胞结合而释放毒素,从而达到杀死肿瘤细胞而不影响其它正常细胞的目的.通过对人脑胶质瘤细胞系U２５１I g Y抗体的基本特性分析㊁鉴定等研究,为脑肿瘤的诊治提供新的思路[３８].３．４㊀在其他方面的应用㊀乳糜泻(C D)是一种由麸质引起的小肠自身免疫性疾病,口服卵黄抗角蛋白抗体(A G Y)是一种新中和麸质的治疗C D的方法[３９].肿瘤坏死因子１(T N F R１)能调节细胞凋亡,制备的抗T N F R１I g Y纯化后具有较高的特异性,可对某些生物靶标起到快速㊁直接的保护作用[４０].I g Y还可应用于治疗肥胖症,抗脂肪酶I g Y可抑制胰脂肪酶活性增加甘油三酯排泄量,达到抗肥胖的作用[４１].此外,I g Y在抗蛇毒[４２]和抗蝎子毒素[４３]㊁抗生育制品方面都有应用.I g Y研究虽然早,应用广泛,全球专利申请多,但仍存在很多亟待解决的问题,目前卵黄抗体在制备㊁提纯和使用过程中没有统一的质量标准,在实际应用过程中对卵黄抗体的使用也常停留在利用粗制品对相应病原进行防治,且I g Y主要成熟产品是针对动物疾病的,针对人类疾病基本处于制剂研发㊁专利申报,而成熟产品不多.近年来I g Y研发在肿瘤方面也有涉及,但在临床应用上还存在一系列问题,如有效性㊁安全性以及机理研究都比较薄弱.这些均严重阻碍卵黄抗体的开发和利用,因此在如何提高抗体的防治效果㊁降低生产成本以及代替普通抗体发挥作用的问题有必要进一步探讨和研究.由于I g Y具有性质稳定㊁低交叉反应性㊁无耐药性㊁特异性高㊁可口服等优点,随着对I g Y机理深入研究和相关技术的发展,在诊断试剂开发㊁人及动物疾病防治㊁肿瘤靶向治疗以及与食品安全的针对动物疾病的产品研发应用等方面有望取得新进展.参考文献:[１]M i n eY,K o v a c s n o l a nJ．C h i c k e ne g gy o l ka n t i b o d i e sa s t h e r aＧp e u t i c s i ne n t e r i c i n f e c t i o u sd i s e a s e:a r e v i e w[J]．J M e dF o o d,２００２,５(３):１５９Ｇ１６９．D O I:１０．１０８９/１０９６６２００２６０３９８１９８[２]Z h e nY H．P r e p a r a t i o n a n d e f f i c a c y e v a l u a t i o n o f e g g y o l k i mm uＧn o g l o b u l i n(I g Y)a g a i n s t d a i r y c o w m a s t i t i s[D]．D a l i a n:D a l i a n U n i v e r s i t y o fT e c h n o l o g y,２００８．(i nC h i n e s e)甄宇红．抗奶牛乳腺炎特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D]．大连:大连理工大学,２００８．[３]Z h a n g L,L i uZ Z,N i n g C S,e t a l．A p p l i c a t i o n p r o g r e s s o f I g Y i n i mm u n o a s s a y a n d t r e a t m e n t[J]．P r o g rV e tM e d,２０１７,３８(１):７８Ｇ８１．D O I:１０．１６４３７/j．c n k 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o x i nＧp r o d u c i n g E s c h e r i c h i ac o l i b y s a n d w i c he n z y m eＧl i n k e d i mm u n o s o r b e n t a s s a y u s i n g c h i c k e ne g gy o l kI g Ya n t iＧb o d i e s[J]．F r o n tC e l l u l a r I n f ec tM i c r o b i o l,２０１２,２(８４):１Ｇ８．D O I:１０．３３８９/f c i m b．２０１２．０００８４[１７]V a s c o n c e l l o sF A,C o u t i n h oM L,év e r t o nF,e t a l．T e s t i n g d i fＧf e r e n t a n t i g e nc a p t u r eE L I S Af o r m a t s f o rd e t e c t i o no f L e p t oＧs p i r a,s p p．i n h u m a n b l o o ds e r u m[J]．T r a n s a c t R o y a lS o c T r o p M e dH y g,２００９,１０４(４):２５９Ｇ２６４．D O I:１０．１０１６/j．t r s tＧm h．２００９．１０．００５[１８]C a k i rＧK o cR．P r o d u c t i o no fa n t iＧS A G１I g Y a n t i b o d y a g a i n s t T o x o p l a s m a g o n d i i,p a r a s i t e sa n de v a l u a t i o no f a n t i b o d y a cＧt i v i t y b y E L I S A m e t h o d[J]．P a r a s i t o l R e s,２０１６,１１５(８):１Ｇ６．D O I:１０．１００７/s００４３６Ｇ０１６Ｇ５０４７Ｇ９[１９]Y a n g J,Z h a n g M J,Q i a n g L,e t a l．P r e p a r a t i o n a n d a c t i v i t y d eＧt e c t i o n o f c h i c k e n e g g y o l k I g Ya n t i b o d y a g a i n s t h u m a n p a p i l l oＧm a v i r u s１６t y p eL１m a i nc a p s i d p r o t e i n[J]．JS o u t h e r n M e d U n i v,２００８,２８(２８):３２４Ｇ３２７．(i nC h i n e s e)杨军,张明娟,强磊,等．抗H P V１６L１I g Y抗体的制备及活性检测[J]．南方医科大学学报,２００８,２８(３):３２４Ｇ３２７．[２０]G r z y w aR,Łu p i c k aＧSło w i kA,W a l c z a kM,e t a l．H i g h l y s e n s iＧt i v e d e t e c t i o n o f c a n c e r a n t i g e n１５Ｇ３u s i n g n o v e l a v i a n I g Ya n t iＧb o d i e s[J]．A L T E X,２０１４,３１(１):４３Ｇ５２．D O I:１０．１４５７３/a lＧt e x．１３０９１８１[２１]X i a oY,G a oX,G a n n o tG,e t a l．Q u a n t i t a t i o no fH E R２a n d t e l o m e r a s e b i o m a r k e r s i n s o l i d t u m o r sw i t h I g Ya n t i b o d i e s a n d n a n o c r y s t a l d e t e c t i o n[J]．I n t l JC a n c e r,２００８,１２２(１０):２１７８Ｇ２１８６．D O I:１０．１００２/i j c．２３３２０[２２]X i a oY,G a oX,T a r a t u l aO,e t a l．A n t iＧH E R２I g Ya n t i b o d yＧf u n c t i o n a l i z e d s i n g l eＧw a l l e d c a r b o nn a n o t u b e s f o r d e t e c t i o na n d s e l e c t i v e d e s t r u c t i o no fb r e a s tc a n c e rc e l l s[J]．B M C C a n c e r,２００９,９(１):１Ｇ１１．D O I:１０．１１８６/１４７１Ｇ２４０７Ｇ９Ｇ３５１[２３]Łu p i c k aSło w i k A,W a l c z a k M,G r z y w aR,e t a l．G e n e r a t i o n a n da p p l i c a t i o no f p o l y c l o n a l I g Y a n t i b o d i e ss p e c i f i cf o rf u l lＧl e n g t ha n d n i c k e d p r o s t a t eＧs p e c i f i ca n t i g e n[J]．B i o a n a l y s i s,２０１４,６(２３):３１９７Ｇ３２１３．D O I:１０．４１５５/b i o．１４．１７２[２４]K o v a c s n o l a n J,M i n eY,I mm e r s e e l F V,e t a l．U s i n g e g g I g Y a n t i b o d i e s f o rh e a l t h,d i a g n o s t i ca n do t h e r i n d u s t r i a la p p l i c aＧt i o n s[J]．W o o d h e a dP u b l i s h i n g,２０１１,２(１):３４６Ｇ３７３．D O I:１０．１５３３/９７８０８５７０９３９２９．３．３４６[２５]J i n t a r i d t hP,S r i s o m s a p C,V i c h i t t u m a r o sK,e ta l．C h i c k e n e g gy o l ka n t i b o d i e s s p e c i f i c f o r t h eγc h a i no f h u m a nh e m o g l oＧb i n f o r d i a g n o s i s o f t h a l a s s e m i a[J]．I n t l JH e m a t o l,２００６,８３(５):４０８Ｇ４１４．D O I:１０．１５３２/I J H９７．A２０５１５[２６]W a n g C Y,F e n g F,B a iY F,e t a l．D e t e r m i n a t i o no f t r a n s f e rＧr i n g i nh u m a n s e r u ms a m p l e s u s i n g c h i c k e n e g g y o l k a n t i b o d i e s(I g Y)b y s u r f a c e p l a s m o n r e s o n a n c e[J]．C h e m i c a l JC h i nU n iＧv e r s i t i e s,２０１２,３３(６):１１７７Ｇ１１８１．D O I:１０．３９６９/j．i s s n．０２５１Ｇ０７９０．２０１２．０６．０１１[２７]B u r a g o h a i n M,D h a l eG S,G h a l s a s iG R,e ta l．E v a l u a t i o no f１７１期余运运等:卵黄抗体的结构与功能其在人及动物疾病中应用进展h y p e r i mm u n eh e ne g gy o l kd e r i v e da n t iＧh u m a nr o t a v i r u sa n t iＧb o d i e s(a n t iＧH R V I g Y)a g a i n s t r o t a v i r u s i n f ec t i o n[J]．W o r l dJV a c c i n e s,２０１２,０２(２):７３Ｇ８４．D O I:１０．４２３６/w j v．２０１２．２２０１０[２８]T h uHM,M y a tTW,W i n MM,e t a l．C h i c k e ne g gy o l ka n t iＧb o d i e s(I g Y)f o r p r o p h y l a x i sa n dt r e a t m e n to f r o t a v i r u sd i a rＧr h e a i n h u m a n a n d a n i m a l n e o n a t e s:ac o n c i s e r e v i e w[J]．K o r eＧa nJF o o dS c iA n i m R e s o u r c e s,２０１７,３７(１):１Ｇ９．D O I:１０．５８５１/k o s f a．２０１７．３７．１．１[２９]Y a n g Y E,W e nJ,Z h a oS,e t a l．P r o p h y l a x i sa n dt h e r a p y o f p a n d e m i cH１N１v i r u s i n f e c t i o nu s i n g e g gy o l ka n t i b o d y[J]．J V i r o l o g i c a lM e t h o d s,２０１４,２０６(７):１９Ｇ２６．D O I:１０．１０１６/j．j v i r om e t．２０１４．０５．０１６[３０]S u d j a r w o S,I n d r i y a n iW,N a s r o n u d i nN,e t a l．A c u t e o r a l t o xＧi c i t y o f i mm u n o g l o b u l i nY(I g Y)a n t iH I Vi nm i c e[J]．JA p p lP h a r m a c e u t i c a lS c i,２０１５,５(２):１２３Ｇ１２６．D O I:１０．７３２４/ J A P S．２０１５．５０２１８[３１]D a iY C,W a n g Y Y,Z h a n g X F,e t a l．E v a l u a t i o no f a n t iＧn o r oＧv i r u s I g Yf r o me g gy o l ko f c h i c k e n s i mm u n i z e dw i t hn o r o v i r u s P p a r t i c l e s[J]．JV i r o l o g i c a lM e t h o d s,２０１２,１８６(１/２):１２６Ｇ１３１．D O I:１０．１０１６/j．j v i r o m e t．２０１２．０７．００２[３２]O m i d i a nZ,E b r a h i m z a d e hE,S h a h b a z i P,e t a l．A p p l i c a t i o n o f r e c o m b i n a n t C r y p t o s p o r i d i u m p a r v u m P２３f o ri s o l a t i o na n d p r e v e n t i o n[J]．P a r a s i t o lR e s,２０１４,１１３(１):２２９Ｇ２３７．D O I:１０．１００７/s００４３６Ｇ０１３Ｇ３６４８Ｇ０[３３]W a n g B,Y a n g J,C a o S,e t a l．P r e p a r a t i o n o f s p e c i f i c a n t iＧH eＧl i c o b a c t e r p y l o r i y o l ka n t i b o d i e s a n d t h e i r a n t i b a c t e r i a l e f f e c t s [J]．I n t l JC l i nE x p e rP a t h o l,２０１４,７(１０):６４３０Ｇ６４３７．[３４]Y a n g Y H,P a r kD,Y a n g G,e ta l．A n t iＧH e l i c o b a c t e r p y l o r i e f f e c t s o f I g Yf r o me g gy o r ko f i mm u n i z e dh e n s[J]．L a bA n i mR e s,２０１２,２８(１):５５Ｇ６０．D O I:１０．５６２５/l a r．２０１２．２８．１．５５[３５]Y o k o y a m aK,S u g a n oN,S h i m a d aT,e t a l．E f f e c t s o f e g g y o l k a n t i b o d y a g a i n s tP o r p h y r o m o n a s g i n g i v a l i s g i n g i p a i n s i n p e r iＧo d o n t i t i s p a t i e n t s[J]．JO r a l S c i,２００７,４９(３):２０１Ｇ２０６．D O I:１０．２３３４/j o s n u s d．４９．２０１[３６]M i n eY,K o v a c s n o l a nJ．C h i c k e ne g gy o l ka n t i b o d i e s a s t h e r aＧp e u t i c s i ne n t e r i c i n f e c t i o u s d i s e a s e:a r e v i e w[J]．JM e dF o o d,２００２,５(３):１５９Ｇ１６９．D O I:１０．１０８９/１０９６６２００２６０３９８１９８[３７]L iQ C,L i uC X,Y a oX Z,e t a l．T h e t r e a t m e n t o f p a t i e n t sw i t h u p p e r d i g e s t i v e t r a c tm a l i g n a n t t u m o r s o fm i d d l e a n d l a t e s t a g e w i t hB i o l o g i c a lm i s s i l e I g YＧR i C i n[J]．W o r l dC h i nJD i g e s t o l,２０００,８(８):１Ｇ２．D O I:１０．３９６９/j．i s s n．１００９Ｇ３０７９．２０００．z１．００１(i nC h i n e s e)李庆昌,刘朝兴,姚秀珍,等．生物导弹I g YＧR i C i n治疗上消化道中晚期恶性肿瘤[J]．世界华人消化杂志,２０００,８(８):１Ｇ２．[３８]T i a nX．P r e p a r a t i o na n d c h a r a c t e r i z a t i o no f I g Ya g a i n s t h u m a n g l i o m a[D]．D a l i a n:D a l i a n M e d i c a lU n i v e r s i t y,２００７．(i nC h iＧn e s e)田笑．抗人脑胶质瘤I g Y抗体的制备及其特性分析[D]．大连:大连医科大学,２００７．[３９]S a m p l eD A,S u n w o o HH,H u y n h H Q,e t a l．A G Y,an o v e l e g gy o l kＧd e r i v e da n t iＧg l i a d i n a n t i b o d y,i s s a f e f o r p a t i e n t sw i t h c e l i a cd i s e a s e[J]．D i g e s tD i sS c i,２０１６,６２(５):１２７７Ｇ１２８５．D O I１０．１００７/s１０６２０Ｇ０１６Ｇ４４２６Ｇ５[４０]H a s h e m iM,A m i r i j a v i dS,E n t e z a r iM,e t a l．G e n e r a t i o na n d c h a r a c t e r i z a t i o no f c h i c k e ne g gy o l ka n t i b o d i e s(I g Y)a g a i n s tT N F R１[J]．B r a t i s lM e d J,２０１５,１１６(５):３１６Ｇ３２０．D O I:１０．４１４９/B L L_２０１５_０５９[４１]H i r o s eM,A n d oT,S h o f i q u rR,e t a l．A n t iＧo b e s i t y a c t i v i t y o fh e ne g g a n t iＧl i p a s e i mm u n o g l o b u l i n y o l k,a n o v e l p a n c r e a t i c l iＧp a s e i n h i b i t o r[J]．N u t r i tM e t a b o l,２０１３,１０(１):７０Ｇ７５．D O I:１０．１１８６/１７４３Ｇ７０７５Ｇ１０Ｇ７０[４２]L i u J,H eQ,W a n g W,e t a l．P r e p a r a t i o n a n d n e u t r a l i z a t i o n e fＧf i c a c y o f I g Ya n t i b o d i e s r a i s e da g a i n s t D e i n a g k i s t r o d o na c u t u s v e n o m[J]．J V e n o m o u s A n i m T o x i n sI n c l u d i n g T r o p D i s,２０１７,２３(１):２２Ｇ３０．D O I１０．１１８６/s４０４０９Ｇ０１７Ｇ０１１２Ｇ０[４３]A l v a r e zA,M o n t e r oY,P a r r i l l aP,e t a l．P o u l t r y I g Ya l t e r n aＧt i v e s t oa n t i v e n o m p r o d u c t i o n[J]．T o x i n o l o g y,２０１５,４(７):１６１Ｇ１７８．D O I:１０．１００７/９７８Ｇ９４Ｇ００７Ｇ６４０４Ｇ０_１收稿日期:２０１７Ｇ０６Ｇ１４㊀编辑:刘岱伟有关投稿?微我吧!有关录用?微我吧!自荐专家?都请微我吧!２７中国人兽共患病学报２０１８,３４(１)。
卵黄抗体治疗仔猪大肠杆菌感染性腹泻及其机理研究进展
・
疫病防治 ・
养猪 大 视 野
２０ 年第 １ ０６ 期
卵 抗 治 仔 肠 感染 腹 其 理 究 黄 体 疗 猪大 杆菌 性 泻及 机 研 进展
郑根 华 邹 晓庭 浙 江大 学饲 料科 学研 究所 （１０ ９ ３０２）
仔猪腹泻尤其是断奶仔猪的腹泻是造成养猪业 损失的主要原因之一， 而集 约化生产中仔猪大肠杆
ＩＧ发 生 干 扰作 用 。第 三 ，ｇ ｇ ＩＹ的 Ｆ ｃ区 不与 风 湿 因
子 （ｈ ｕ ａ ｏ ｄ ｆ ｃ ｏ ， Ｆ 结 合 （ａ ｓ ｏ ， ９ ８ ， ｒ ｅ ｍ ｔ ｉ ａ ｔ ｒ Ｒ ） Ｌ ｒ ｓ ｎ １ ８ ）
菌病发病率 占新生仔猪 胃肠病的 ５ ％以上 （ Ｏ 于力 等，９８ 。 目前 ， １９） 防治仔猪 大肠杆菌感染性腹泻 的 较有效手段是应用抗生素 ， 随着社会 公众对食品 但
ｌ３ ＩＹ在 功能和 生产 上 的优势 ＿ ｇ
和 ２ 的 Ｃ ｔｗ ｌ 进 行 试 验 。在 对 ３日龄 的小 １ｄ ｏ ｓｏ ｄ猪 猪 试 验 中 ， 照 Ｉ不进 行 人 工 感 染而 添 加 同等剂 量 对 的无 抗 体 卵黄 粉 ， 照 Ｉ进 行 Ｋ ＋Ｔ Ｃ人 工 感 染并 对 Ｉ 鹊 ＥＥ 喂 无 抗 体 卵 黄 粉 ， 试 验 组 人 工 感 染 后 并用 １５ｇ ． １０００滴 度 的 卵黄 抗 体 口服 被 动 免疫 。结 果试 验 ４ ０ 组 的腹泻 率 明显低 于 对照 组 Ｉ， Ｉ 体增 重 明显 高 于对 照 Ｉ但 低 于对 照 Ｉ。在 出 生 ２ Ｉ １ｄ的小猪 试 验 中 ， 试 验 组 的腹泻 率也 明显 降低 ， 增 重 明显高 于对 照组 ， 体 卵黄 抗体 的抗 腹泻 效果 要好 于 ３日龄 的仔 猪 。 Ｒ ｎ ｌ ａ ｑａ ｄ ｏａ ｄ ＲＭ ｒ ｕｒ ｔ对 商 业 养 殖 场 中 的仔 猪 进 行 试验 （ 常规 饲 养 不进 行 人 工 感 染大 肠 杆 菌） 在 ， 饲 料 中分别 添 加 卵黄 抗体 粉 和 抗 生 索 ， 比饲养 结 对
卵黄抗体的名词解释
卵黄抗体的名词解释卵黄抗体是一种存在于动物卵黄中的免疫蛋白质。
具体而言，它是由动物的免疫系统产生的一类抗体，用于保护动物胚胎免受感染和疾病的侵袭。
卵黄抗体的产生与动物胎儿接受到母体免疫系统的影响息息相关。
母体免疫系统通过传递抗体、相关细胞和其他免疫因子到胚胎中，为其提供自身免疫能力的一种形式。
在胚胎发育过程中，这些免疫因子对于保护胎儿免受感染和疾病的侵害起着至关重要的作用。
卵黄抗体在不同物种中具有不同的形式和功能。
它可以是IgG（免疫球蛋白G）或IgY（免疫球蛋白Y）等典型的免疫球蛋白的一种。
这些抗体通过结合和中和病原体，阻止其进入胚胎体内，从而保护胚胎免受感染。
据研究表明，卵黄抗体在胚胎期间的免疫防御作用非常重要。
在胚胎发育的早期阶段，胚胎自身的免疫系统尚未完全形成，因此母体通过卵黄抗体的传递起到了至关重要的作用。
这种传递通常在胚胎形成后的几天内发生，特定的抗体通过卵黄囊、血液和其他组织的连接途径传递给胚胎。
卵黄抗体的传递和功能主要依赖于细胞免疫和体液免疫的相互作用。
细胞免疫主要涉及T细胞和B细胞的相互作用，而体液免疫主要涉及抗体的生成和分泌。
这两个免疫系统的协同作用使得卵黄抗体得以在胚胎期间保护胎儿免受感染。
虽然卵黄抗体的主要功能是保护免疫系统尚未成熟的胚胎，但它们的作用并不仅限于此。
在一些物种中，卵黄抗体还可以通过将母体的免疫力传递给胎儿，起到一定的营养和保护作用。
此外，卵黄抗体还可以在胚胎发育过程中调节细胞增殖和物质交换等重要生理过程。
需要指出的是，卵黄抗体的产生和传递在不同物种中可能存在差异。
一些动物种类在胚胎期间完全依赖于卵黄抗体的传递来维持免疫功能，而其他动物则在出生后自身产生抗体。
而这种差异性也为科学家们提供了研究和探索的方向。
总之，卵黄抗体是一种存在于动物卵黄中的免疫蛋白质，起到保护胚胎免受感染和疾病的重要作用。
它的产生和传递是动物胎儿发育过程中免疫系统的一部分，其功能与免疫系统的细胞和分子相互作用密切相关。
抗生素替代品 卵黄抗体
——卵黄抗体
卵黄抗体的制备
卵黄抗体的作用机理
卵黄抗体的优缺点
卵黄抗体在养殖业中的应用 小结
抗生素替代品的概述
在传统的农业技术中，抗生素是保持动物 健康和提高饲料效率最具成本效益的方法。但 是抗生素的长期使用会导致其在畜产品中的残 留及细菌耐药性的产生（Torey et al.,2012）。所 以寻找既有效又有利于食品安全的新型抗生素 替代品成为当务之急。
（李燕荣等，2014）
卵黄抗体的作用机理
(wilmar et al.,2010)
卵黄抗体的优点
根据卵黄抗体的制备过程以及作用机理， 将卵黄抗体作为抗生素替代品添加到动物日粮 中是一个很好的选择。卵黄抗体不仅有利于预 防许多动物疫病的发生，提高动物的生产性能， 而且在疾病治疗和疾病诊断方面也发挥着很大 的作用。
卵黄抗体的优点
与抗生素相比，卵黄抗体是通过特异性粘附于 特定的病原菌而发挥作用，所以对肠道正常的 菌群无副作用，也可以 避免产生药物残留和耐 药性。
卵黄抗体的优点
从动物福利的方面考虑，从哺乳动物的血清中获得抗体 需要对动物进行长期的采血，这种做法对动物的伤害很 大。而卵黄抗体的收集是非侵入式的，只要每天收集鸡 蛋就可以。 从获得抗体的数量方面考虑，从哺乳动物的血清中获得
卵黄抗体的作用机理
特定病原菌的卵黄抗体能够直接黏附于病原菌的细胞壁上， 破坏病原菌细胞壁的完整性，从而直接抑制病原菌的生长 或者抑制其活性； 卵黄抗体也可以粘附于细菌的菌毛上，使其不能够粘附于 肠道黏膜的上皮细胞，最终使细菌不能增殖和分泌毒素； 有些卵黄抗体能够在肠道消化酶的作用下，降解为可结合 且易于被肠道吸收的片段，这些片段含有抗体的可变小肽 (Fab)部分，其进入血液后能与特定的病原菌粘附因子结合， 使病原菌不能够粘附易感细胞而失去致病性。
预防仔猪大肠杆菌性腹泻卵黄抗体的研究进展_彭健
!"
动物免疫
彭健等!预防仔猪大肠杆菌性腹泻卵黄抗体的研究进展
越受到人们的注意!并有潜力开发为一类可替代抗生 素的高效生物防治制剂" 近年来国内外的研究结果也 证明! 应用卵黄抗体防治由 !"!# 引起的仔猪腹泻! 能够取得比较满意的效果"
根据抗原的制备方式! 预防仔猪大肠杆菌性腹泻 卵黄抗体的生产方式可以分为两类# 一类是直接用 !"!# 的菌体蛋白作为免疫原! 而另一类则是将经分 离纯化后的菌毛蛋白作为免疫原" 有研究证明!后者免 疫 获 得 的 卵 黄 抗 体 的 应 用 效 果 优 于 前 者 $$%& 等 ! ’()*%肖驰等!+)),%-./01./23 等!+)))&" 然而!由分离 纯化后的菌毛抗原制备的卵黄抗体!其成本较高" 通过 基因工程技术!构建高量表达菌毛蛋白的大肠杆菌!为 解决这一问题提供了有效的手段" 本文拟对预防仔猪 大肠杆菌性腹泻卵黄抗体的研究进展进行综述" ! 卵黄抗体的特性及作用机理
卵黄抗体的研究进展
文献综述卵黄抗体的研究进展郑译西南大学荣昌校区动物医学系，重庆，荣昌402460摘要：抗体（免疫球蛋白，Ig）是指机体受到外来抗原物质刺激后，B细胞识别抗原后活化、增殖分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的能与相应抗原特异性识别和结合的一类球蛋白。
关键词：卵黄抗体；免疫程序；研究进展卵黄抗体（Immunoglobulin of yolk，IgY）经特定抗原免疫后的母鸡可产生相应的特异性抗体，有研究证实[1]，产蛋鸡的卵黄对抗体有浓集作用，使其不断储存于卵黄中，这种抗体称为卵黄抗体。
1 卵黄抗体的概念卵黄抗体，英文名（vitelline antibody）定义：从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，是一种具有较强免疫功能的蛋白质，多为IgG。
禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度IgG，其对某些禽类疫病具有明显治疗和紧急预防作用。
卵黄抗体是用特定抗原多次免疫产蛋母鸡，使机体产生相应的特异性抗体，并转移、贮存在卵黄中，经提取纯化的免疫球蛋白卵黄抗体（Egg yolk antibodies eyAb），也称卵黄免疫球蛋白(Egg yolkimmunogbhin，IgY)。
科学家在鸟类的血液循环壁发现三种免疫球蛋白(IgG、IgA 与IgM)，母鸡在细胞分裂产蛋的过程中，会将其免疫球蛋白转移至鸡蛋，母鸡血浆中之IgA与IgM，会在输卵管中与其他的蛋白质结合而构成鸡蛋蛋白的部分。
IgG：免疫球蛋白G (Immunoglobulin G，IgG)的缩写。
IgG是血清主要的抗体成分，约占血清Ig的75%。
其中40～50％分布于血清中，其余分布在组织中。
IGA：一种免疫球蛋白。
异常情况下，在肾脏受到各种炎症反应刺激等因素下，导致IGA过度沉积在肾脏肾小球系膜区等部位，与抗原一起形成免疫复合物，造成肾脏结构病理损害，引起的一系列临床症状，称为IGA肾病。
IGM：免疫球蛋白M(Immunoglobulin M，IgM)的缩写。
卵黄抗体在猪病防治中的应用
2023年第10期牛自身免疫力也有明显提高,可降低养殖户因动物疾病造成的损失,进而提高养殖收益。
4我国微生态制剂的发展前景我国是畜牧养殖大国,微生态制剂在反刍动物饲养中的应用仍在研究中,微生态制剂具有广阔的市场前景,为了满足养殖户提高养殖效率的需求和公众对食品绿色安全的要求,近些年来,微生态制剂在反刍动物饲养中的应用越来越受到重视,但和单胃动物的应用、研究、发展相比仍存在一些差距,故此,使我国的微生态制剂研究应重点关注以下方面:(1)使复合菌的协同作用更加突出,更能适应特定的生态环境。
在新菌种的开发中,益生菌很容易发展成复合菌。
此外,益生菌可以与其他物质,如酶、草药和酸化剂组合使用,以提高其有效性;(2)优势微生物群落的使用,及其在不同畜种的有效性差异,许多与动物生理代谢密切相关的优势植物区系尚未得到开发和应用;(3)应进一步研究益生菌与瘤胃微生物的相互作用,以及微生物代谢与营养代谢的关系;(4)应加强对微生态制剂作用吉利德研究,目前的研究大多是关于微生态制剂的应用效果,对微生态制剂的作用机理的研究相对较少,应从分子生物学和细胞学层面进行深入研究。
参考文献[1]杨英超,昝林森.非常规饲料在反刍动物生产中的应用进展[J ].中国牛业科学,2020,46(1):6.[2]庄一民,刁其玉,张乃锋.幼龄反刍动物瘤胃上皮细胞β-羟基丁酸代谢与调控机制[J ].畜牧兽医学报,2020,51(4):10.[3]张振威,朱明霞,王长法.异位酸影响反刍动物瘤胃代谢和生产性能的研究进展[J ].动物营养学报,2022,34:(3).[4]赵林森,刘正懿,张士成,等.一种适用于畜禽粪便低温快速发酵的复合微生态制剂,CN 112375714A [P].2021.[5]王云爽,易敢峰,王亚如,等.含有枯草芽孢杆菌的复合微生态制剂及其应用,CN 112251370A [P].2021.随着人们生活水平的提高,对猪肉和猪肉制品提出了更高的要求,推动了我国养猪业的规模化和集约化发展,但疫病的出现概率也明显增多。
免疫鸡卵黄抗体的形成
通过遗传育种技术，培育出产卵量大、抗体产量高的免疫鸡品种， 提高抗体提取的产量。
免疫方案优化
研究最佳的免疫方案，包括抗原剂量、免疫途径、免疫次数等，以 提高卵黄抗体的产生效率。
卵黄抗体稳定性与保存的研究
01
卵黄抗体稳定性机 制研究
深入探讨卵黄抗体在鸡卵中的稳 定性机制，为提高抗体稳定性提 供理论依据。
亲和层析
利用抗原与抗体之间的特异性结合，通过亲和层析柱分离纯化抗体。
凝胶过滤层析
将卵黄抗体通过凝胶过滤层析柱，根据抗体的大小进行分离纯化。
卵黄抗体的质量检测
免疫电泳
将卵黄抗体进行电泳分离，观察其迁移率，判断抗体 的纯度和类型。
蛋白质浓度测定
通过测定卵黄抗体的蛋白质浓度，评估其浓度和纯度 。
生物活性检测
特性
卵黄抗体具有高度的特异性，能 够与相应的抗原结合，具有治疗 和预防疾病的作用。
卵黄抗体的应用领域
疾病治疗
卵黄抗体可用于治疗某些感染性 疾病和自身免疫性疾病，如霍乱 、沙门氏菌感染等。
疫苗佐剂
卵黄抗体可以作为疫苗佐剂，增 强疫苗的免疫效果，提高接种人 群的免疫保护水平。
食品安全
卵黄抗体可用于检测食品中的病 原微生物，保障食品安全和消费 者健康。
抗体运输
分泌的抗体通过血液循环系统运输到全身各处，发挥免疫效应。
03
免疫鸡卵黄抗体的提取与纯化
卵黄抗体的提取
离心法
将免疫鸡的卵黄进行离心处理，分离出 上清液和蛋黄膜，取上清液进行抗体提 取。
VS
酶解法
使用特定的酶处理卵黄，使抗体从蛋黄膜 中释放出来，再通过离心分离得到抗体。
卵黄抗体的分离与纯化
被激活的B淋巴细胞进行快速有丝分 裂，形成大量具有相同抗体基因型的 B淋巴细胞克隆。
氯仿法、水解法、卡拉胶法提取鸡蛋中卵黄抗体
氯仿法、水解法、卡拉胶法提取鸡蛋中卵黄抗体【摘要】卵黄抗体（egg-yolk antibody，IgY）具有一些IgG所没有的优良特性，与哺乳动物的IgG相比，IgY 的提取具有方法简单，提取率高且方法多样等优点。
本文旨在对当前条件下卵黄抗体的提取方法进行比较。
选取水溶法（Water Dilution，WD）、氯仿法（Chloroform，CHL）和卡拉胶法（Carrageenan，CAR）制备IgY，根据电泳结果，比较三种方法得率高低。
SDS-PAGE结果表明，氯仿法的得率较其他两种方法高一些。
【关键词】卵黄抗体；提取；电泳1.1 卵黄抗体的发现和命名1893年，Klemperer首次报道了鸡蛋中存在抗体，发现蛋黄中抗体以IgG占优势，而IgM和IgA的含量很少，现已证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG抗体最方便，最廉价的来源[1]。
由于鸡蛋黄的英文名称是“Yolk”，故将鸡蛋黄中的免疫球蛋白IgG称为IgY。
1.2 卵黄抗体的一般性质卵黄抗体相对分子量约为180kDa，有两条轻链和两条重链组成（2H+2L）。
其中轻链（L）相对分子量约为22～30kDa，重链（H）相对分子量约为67～70kDa，等电点接近5.2，含氮量为14.8%，IgY的氨基酸组成与鸡血清IgG和牛IgG不同。
此外，还具有以下优点：（1）鸡卵黄中IgY纯度高，含量大。
（2）特异性高。
（3）稳定性好。
在室温保存半年，其抗体活性不变，在4℃冰箱贮存6-7年，经免疫扩散法测定其活性降低不超过5%[2]。
（4）产量高。
（5）IgY不激活补体。
（6）IgY能耐酸耐热。
（7）安全。
服用安全可靠，王泽中等用治疗剂量（80-300mg/kg）的10-40倍进行试验，没有发现毒性反应。
1.3 IgY的分离、提纯方法卵黄中的主要成分是蛋白质和脂肪，比例为1：2。
大部分蛋白质都是脂蛋白，存在于卵黄颗粒中，不溶于水，只有卵黄球蛋白（α、β、γ）是水溶性的，而IgY是γ卵黄球蛋白。
卵黄抗体在动物疾病防治中的应用
卵黄抗体在动物疾病防治中的应用作者：孙芳来源：《乡村科技》2017年第26期[摘要] 卵黄抗体是一种特异性免疫球蛋白，本文结合相关文献研究及多年工作经验，主要就卵黄抗体在动物疾病防治中的应用展开探讨，以供广大从业者参考。
[关键词] 卵黄抗体；动物疾病；防治[中图分类号] S851.3 [文献标识码] A [文章编号] 1674-7909（2017）26-81-11 卵黄抗体概述抗体指的是受到抗原作用，激活了机体内的免疫细胞，并且和已经成熟分化的B细胞相互合成，从而分泌出一种特殊的球蛋白，而其特异性地和抗原相结合就可以让机体产生免疫功能。
该种免疫功能能够有效清除侵入机体的异物，如微生物、寄生虫等，或是对其产生的毒素进行中和，以维持机体健康。
卵黄抗体的形成就是运用该种原理。
其本质在于受到特定抗原刺激后，母鸡机体内形成的，被转移并储存于卵黄中的特异性免疫球蛋白。
大量研究表明，在防治动物疾病时使用卵黄抗体具有如下优点：①卵黄抗体具有耐热性好、抵抗力强、pH值稳定以及耐反复冻融性的优点，所以即便是处在巴氏灭菌温度下，此药物也不会失去活性；②因为饲养母鸡简单、成本小，在不用采血的前提下便能够得到卵黄抗体，所以，获取卵黄抗体价格较低且资源丰富，并且在采集卵黄抗体时不会受到时间、地域等方面的影响。
2 卵黄抗体在动物疾病防治中的应用2.1 动物疾病诊断中卵黄抗体应用在以往的动物疾病诊断上，只需采取流行病检查即可，这主要是由于当时的疾病主要是典型性病变。
然而，现阶段受到环境污染日渐加剧、病菌变化等多方因素的影响，复杂性、多病原等疾病不断增多，在这种情况下单凭流行性疾病检查难以有效诊断动物疾病。
而卵黄抗体凭借其抢特异性及高灵敏度而被有效地应用到诊断动物疾病工作中，利用卵黄抗体来开展免疫扩散、免疫电泳、免疫荧光及ELISA等试验，可以快速发现动物患上的疾病情况，并且省去了采血环节。
当前有报道显示，应用卵黄抗体能够用于对由红细胞抗原、寄生虫、激素、免疫球蛋白、细菌和病毒等引起的疾病检测。
卵黄抗体的特性和应用
生产量
可 测量 性
单克隆抗体
免 疫 抑 制
诊 断
治 疗
小鼠或 家兔产量有 限 可长期大量高产 ’相对 困难 容 易并实用 已被 制 备 还须发展 ， 仅有 ２例报告
几 个 产 品 正 在 开发 对 异 种 移 植 可 能 是 有 用 的
约 只 有 １ ５ｄ 远 低 于 初 乳 抗 体 的 ｌ ． ， ８ ２～ １ 。此 ４ｄ
免 疫 沉 淀
蛋 白 Ａ或 Ｇ， 抗原基质 抗原基质 纯化不易 ｐ —Ｏ７。稳 定 Ｈ３ １ ，０Ｃ ｐ ，５Ｃ 定 Ｈ４ ９ ６ 。 稳 较Ｉ ｇ Ｙ疏 水性弱 Ｆ ｃ片断是疏水的 由于铰链 区结构
良好 而 不 沉 淀
以有 效 的 降低 仔 猪 腹 泻 的 发 生 ， 仔 猪 的 成 活 率 使
交反 蒌薯 釜差 妻 器鏊差 果 。 对 引 起 仔 猪 腹 泻 的 大 肠 菌 的 高 免 卵 黄 抗 体 叉应 耆 鏊爰 曹葬曩爰球 非和离 菩案暴 亲分 釜主 舂羹去黄 研 究 结 果 表 明 ，用 高 免 卵 黄 抗 体 给 仔 猪 服 用 ， 善除卵 中 可
亲和纯化 稳定性 疏水性
免 答 抗 的望 不 竺 源 因 系 生 同 营 应 原 而 影 性 种 发 不 而 强 物 疫 有 冀 利响 同 ” 增
亲和力成熟机 制 体 细胞 高变 假一 ｖ基 因转 变 亲 和 力 良好 （Ｏ～～ Ｏ 。 ） 良好 １ １ Ｍ 产量 数微克 １ ｌ％特异性 数克 ２ ～Ｏ ％～ ｌ％ Ｏ （ 月产量／ 只动物） 抗体 （ 小鼠获 家兔） 特异性抗体
将 其 称 为 免 疫 球 蛋 白 Ｙ（ ｕ ｏ ｌ ｕｉＹＩＹ） 间 还 是 有 区 别 的 。 先 是 分 子 量 不 同 ，ｇ 的 分 Ｉ ｍｍ ｎ ｇ ｂ ｌ ｏ ｎ ｇ 。 首 ＩＹ
卵黄抗体及其在动物疾病中的应用
结语
ＩｇＹ是一种易于生产、安全、均一的特异性抗体，且性质稳 定，安全无毒副作用，无药物残留、耐药性等问题。可部分替代 抗生素，又能弥补传统疫苗的不足，提供及时有效的保护，在动 物疾病的预防、检测、治疗中有良好的前景 。 ［９］
刘文鑫等用重组大肠杆菌 Ｋ８８ａｂ和 Ｋ９９原核表达蛋白制 备的鸡 ＩｇＹ对仔猪黄痢和仔猪白痢的预防有效率为 １００％，保 护率为 ９１％；治疗有效率为 １００％，治愈率为 ８７％，表明对仔猪 腹泻有很好的疗效 ［６］。王 林 会 等 联 合 使 用 金 黄 色 葡 萄 球 菌 外 毒素及荚膜特异 性 卵 黄 抗 体，可 有 效 中 和 外 毒 素，有 效 保 护 ＭＡＣ－Ｔ细胞，阻断金黄色葡萄球菌 ＲＮ６３９０对 ＭＡＣ－Ｔ细胞 的侵袭，显著改善细胞的生长形态［７］。
疫病防治
ＬＩＶＥＳＴＯＣＫ ＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹ
Ｎｏ．７，２０１８
卵黄抗体及其在动物疾病中的应用
王 刚，杨旭东，杨淑萍
（黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江 齐齐哈尔 １６１００５）
摘 要：卵黄抗体（Ｅｇｇｙｏｌｋａｎｔｉｂｏｄｙ）又称卵黄免疫球蛋白（Ｅｇｇｙｏｌｋｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ，ＩｇＹ）指用特定抗原对产蛋禽进行免 疫，机体刺激法氏囊 Ｂ细胞分化成浆细胞，分泌特异性的抗体进入血液，血液流经卵巢时特异性抗体主要是 ＩｇＹ在卵细 胞中逐渐累积，为胚胎和幼雏提供被动免疫保护。卵黄抗体效价稳定、提取工艺简单方便、成本低、安全高效，在动物疾 病防治中有广阔的应用前景。 关键词：卵黄抗体；动物疾病；应用 中图分类号：Ｓ８５２．４ 文献标识码：Ｂ ＤＯＩ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０１８．０７．１００
卵黄抗体的作用机理
（ 牵秉鸿 副研 究 员 编译 自 Ａ ｃ ．Ｖｒ１ ０ １ １６ ｒｈ ｉ ． ０ ， ４ ｏ ，２
行栽 培 。最 后从 水稻 的叶子 中成 功 地获取 了 乙肝病
体． 室温保存备用。
２ 羟丙 基 甲基 纤维 素 （ Ｐ Ｐ 提取法 ： 、 Ｈ Ｍｃ ） 卵黄 用 ７倍体积 蒸馏水 稀 释 ， 加人 ５ Ｉ ＭＣ ％－ Ｌ Ｐ悬 液 ， Ｐ 使其 成 为 ０ ５ （ Ｖ） ．％ Ｖ／ 混合 物 用于沉 淀脂类 。１％ （ 室 ０ 或 温 ） 止 １ 小 时 ， 获水溶 性 、 静 ８ 收 富含 ｋ蛋 白的上 清 液． 上清 液用 ０４ １ ．５ ｍ微 孔 滤膜过 滤 ， ￣ 滤液在 １０ ； ４ Ｔ
美 国 的 Ｍ Ｍ． ｏ ｅ 用 两种 疫 苗 控制 传 染 性 ． Ｃ ｄｙ等 法 氏囊病一 ＩＤ Ｂ ｖ免疫 复合 体 （Ｃ 和 ＩＤ ＩＸ） Ｂ Ｖ一２ １ ５２
株对 １ ｌ ８ Ｅ龄的 Ｓ Ｆ鸡经 卵接 种 （ Ｉ Ｖ ． Ｐ ＰＯ ） 接种后 ３ 、
种。经检测 ，该疫苗对 Ｃ Ｆ Ｓ Ｖ的 口服和皮下攻击易 感。 免疫猪群皮下途径攻击时 ．０ ￣受到保护 ： １０ｏ ／ 如果 是 口服或皮 下接 种免疫 而用 口服攻 击 ， ６ ％受 到 则 ｏ 保护 。攻击 前 ，６ ％皮下 接种 的猪可检测 到 中和抗 ０
体 ， 口服 接种 猪则无 中和抗体 。 而 口服接种 存活猪 的 脾 内可 发现 ｃ Ｆ ｓ Ｖ抗原 ，而皮 下接 种则 在 受攻击 的 存 活猪 的脾 内不 存 在 Ｃ Ｆ Ｓ Ｖ抗 原 。他们 认 为单一 口 服或 皮 下接 种这 种疫 苗 只能 部分 保护 猪受 Ｃ Ｆ Ｓ Ｖ强 烈 的 口服 攻击 ．如果 这两 种途 径 接种时加 大剂 量或
卵黄抗体的特性及在兔病防治上的应用
2020.4卵黄抗体的特性及在兔病防治上的应用李高冰(甘肃省景泰县一条山镇畜牧兽医工作站730400)摘要:卵黄抗体是通过禽类特定性抗原来刺激B 淋巴细胞产生并移动到卵黄中的带有特异性质的抗体。
而且卵黄抗体有制作流程简单、生化性质较为稳定、产量高等优点,在动物的疾病防治上的应用极为广泛。
本文着重就卵黄抗体的特性及其在兔病防治上的应用进行探讨,希望能给卵黄抗体科研以及兔病防治带来帮助。
关键词:卵黄抗体;兔病;防治;应用作者简介:李高冰(1982.11-),男,甘肃省景泰县人,本科,助理畜牧师,主要从事畜牧兽医技术等方面的相关工作。
卵黄抗体,又可称为卵黄免疫球蛋白。
经过长期的研究发现,卵黄中卵黄抗体的浓度是极高的,而其他免疫球蛋白却在卵黄中的含量极少。
而卵黄蛋白凭借自身稳定性强、制作价格低廉,能够进行大规模生产等优势,能够很好的起到防治各种禽类的疾病的效果,并且这种治疗方式与我国大陆地区的禽类养殖条件与环境状况相契合,并且其发展趋势也是极好的。
而运用卵黄抗体来对兔病进行防治,就是一种极好的卵黄抗体的应用方向。
1卵黄抗体的特性1.1卵黄抗体的结构特点卵黄抗体分值量180kD,其结构与血清免疫球蛋白类似,都是由两条重链与两条轻链构成。
而且卵黄抗体与血清免疫球蛋白比较,前者没有铰链结构,因此结构会更加稳定,同时卵黄抗体比血清免疫球蛋白疏水性也更强,这是因为卵黄抗体中有着含量很高的脂类[1]。
另外,卵黄抗体的pH 在5.4~7.8之间,因此其有着耐酸的特性。
1.2卵黄抗体的作用机理卵黄抗体抗菌的作用机理是由于卵黄抗体能很好的依附在细菌细胞壁上,从而使细菌细胞壁受到破坏,阻碍细菌滋生与繁殖。
并且卵黄抗体还能与细菌毒素进行中和,从而缓解细菌毒素对动物机体的损伤。
与此同时,有一些卵黄抗体能被肠道消化酶降解成以易被肠胃吸收的肽类物质,而这些肽类物质能进入血液后与相应的病原因子融合,使得病原致病性丧失,进而防止易感染细胞遭受到病毒入侵[2]。
卵黄抗体作用机理
卵黄抗体科技名词定义中文名称：卵黄抗体英文名称：vitelline antibody定义：从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，是一种具有较强免疫功能的蛋白质，多为IgG。
禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度IgG，其对某些禽类疫病具有明显治疗和紧急预防作用。
所属学科：免疫学（一级学科）；畜牧免疫（二级学科）概述卵黄抗体（yolk antibody, IgY）：通过免疫注射产蛋鸡，即可由其生产的蛋黄中提取相应的抗体，并可用于相应疾病的预防和治疗，这类制剂称为卵黄抗体。
IgY的性质IgY的性质与哺乳动物的IgG相似。
正常鸡IgY的分子量约为180KDa，由两条轻链(2L)和两条重链(2H)组成，分子量分别为60-70KDa和22-30KDa。
其等电点约为5.2。
IgY 与一般哺乳动物IgG相比，IgY具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶降解能力。
在低于75℃条件下，IgY具有良好的热稳定性。
IgY制剂在4℃贮存5年或在室温贮存6个月其活性仍无明显变化或下降，65℃时可保持24h以上，70℃时加热90min后其活性才明显下降60℃，30min条件下巴氏消毒不影响IgY；高于80℃，大部分IgY失去活性。
IgY 在pH4.0-11.0时比较稳定，pH3.0-3.5时活性迅速下降，pH12时活性亦有所下降。
IgY 对胃蛋白酶有较高的抵抗力，但对胰蛋白酶十分敏感。
将胃蛋白酶和IgY在pH2.0温育1h 后，几乎所有活性丧失，但在pH4.0时1h后可保持91%的活性，甚至温育10h后仍有63%活性。
IgY分别与胰蛋白酶和胰凝乳酶温育8h，活性分别保持39%和41%。
IgY的作用机理特定病原菌的卵黄抗体能直接黏附于病原菌的细胞壁上，改变病原细胞的完整性，直接抑制病原菌的生长；卵黄抗体可黏附于细菌的菌毛上，使之不能黏附于肠道黏膜上皮细胞；一部分卵黄抗体在肠道消化酶作用下，降解为可结合片段，这些片段含有抗体的可变小肽(Fab)部分，这些小肽很容易被肠道吸收，进入血液后能与特定的病原菌黏附因子结合，使病原菌不能黏附易感细胞而失去致病性，而IgY的稳定区(Fe部分)留在肠内。
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卵黄抗体
科技名词定义
中文名称：卵黄抗体
英文名称：vitelline antibody
定义：从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，是一种具有较强免疫功能的蛋白质，多为IgG。
禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度IgG，其对某些禽类疫病具有明显治疗和紧急预防作用。
所属学科：免疫学（一级学科）；畜牧免疫（二级学科）
概述
卵黄抗体（yolk antibody, IgY）：通过免疫注射产蛋鸡，即可由其生产的蛋黄中提取相应的抗体，并可用于相应疾病的预防和治疗，这类制剂称为卵黄抗体。
IgY的性质
IgY的性质与哺乳动物的IgG相似。
正常鸡IgY的分子量约为180KDa，由两条轻链(2L)和两条重链(2H)组成，分子量分别为60-70KDa和22-30KDa。
其等电点约为5.2。
IgY 与一般哺乳动物IgG相比，IgY具有较强的耐热、耐酸、抗离子强度和一定的抗酶降解能力。
在低于75℃条件下，IgY具有良好的热稳定性。
IgY制剂在4℃贮存5年或在室温贮存6个月其活性仍无明显变化或下降，65℃时可保持24h以上，70℃时加热90min后其活性才明显下降60℃，30min条件下巴氏消毒不影响IgY；高于80℃，大部分IgY失去活性。
IgY 在pH4.0-11.0时比较稳定，pH3.0-3.5时活性迅速下降，pH12时活性亦有所下降。
IgY 对胃蛋白酶有较高的抵抗力，但对胰蛋白酶十分敏感。
将胃蛋白酶和IgY在pH2.0温育1h 后，几乎所有活性丧失，但在pH4.0时1h后可保持91%的活性，甚至温育10h后仍有63%活性。
IgY分别与胰蛋白酶和胰凝乳酶温育8h，活性分别保持39%和41%。
IgY的作用机理
特定病原菌的卵黄抗体能直接黏附于病原菌的细胞壁上，改变病原细胞的完整性，直接抑制病原菌的生长；卵黄抗体可黏附于细菌的菌毛上，使之不能黏附于肠道黏膜上皮细胞；一部分卵黄抗体在肠道消化酶作用下，降解为可结合片段，这些片段含有抗体的可变小肽(Fab)部分，这些小肽很容易被肠道吸收，进入血液后能与特定的病原菌黏附因子结合，使病原菌不能黏附易感细胞而失去致病性，而IgY的稳定区(Fe部分)留在肠内。
IgY在动物疾病防治方面的应用
研究表明，IgY能抵抗幼龄动物肠道中胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的消化。
故常在幼畜饲料或添加剂中加入一定量的针对某些特定疾病的IgY，以使其获得有效的被动免疫。
何月英等利用小鹅瘟强毒制备的卵黄抗体，对2-3日龄雏鹅进行预防，其保护率高达100%。
杨晓梅等用鸭病毒性肝炎I型鸡胚毒免疫鸡，制备的鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体，经实际应用于预防时，雏鸭的平均成活率为96.9%。
IgY在动物疾病治疗方面的应用
目前，卵黄抗体己被广泛应用于许多疾病的防治。
汪铭书应用抗鸭病毒性肝炎(DHV)的卵黄抗体治疗人工感染的鸭时，当用1万倍LD50强毒时保护率可达到100%。
张英等用抗小鹅瘟的卵黄抗体治疗发病鹅群，治愈率为95.2%。
此外，应用多种病原菌免疫制备的卵黄抗体还可以防治多种病原菌的感染。
詹丽娥等用IBD、ND和EDS-76三联高免卵黄抗体治疗上述三种疾病，总有效率可达50%以上。
日本成功地从鸡蛋中提取出能够杀死幽门螺旋杆菌的抗体，并以这种抗体为原料制成了能杀死人体内幽门螺旋杆菌的酸奶。
用卵黄抗体治疗疾病，安全、高效且无公害，我国已有商品化的卵黄抗体供应。
IgY在动物疾病诊断方面的应用
卵黄抗体和哺乳动物免疫球蛋白有许多不同之处，如它不与金色葡萄球菌A蛋白结合，不与哺乳动物Fc受体结合，对哺乳动物补体无固定作用等，这使得卵黄抗体在检测诊断上具有更强的特异性和灵敏度，所以卵黄抗体可以应用于免疫荧光试验、ELISA试验、免疫扩散、免疫电泳等。
郑厚旌等用卵黄琼扩实验检验卵黄中的IBD抗体水平，结果表明用卵黄琼扩试验替代血清琼扩试验检测IBD抗体水平是可行的，并且具有经济、省力、省时的特点。
此外卵黄抗体有望取代传统的多克隆抗体的生产，获取大量更有效的抗体，同时也可减少对动物的副反应，提高动物的福利。
IgY开发前景
IgY作为替代抗生素的新型饲料添加剂正在引起人们的关注，IgY取代抗生素用作生长促进剂，不会产生药物残留，是一种安全的绿色添加剂。
生产技术较为成熟：用鸡卵黄大量生产、制备多克隆抗体是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。
IgY产量高，价格低廉。
使用IgY技术生产免疫球蛋白，可以减少对动物的应激，提高动物的福利。
年龄较大的动物会导致IgY分解失活，然而通过包埋处理可避免这一问题。
Shimizu等(1993)用脂质体包埋IgY，在pH2.8的胃蛋白酶中37℃温育1h，包埋的IgY仍可保存80%的活性。
综上所述，鸡卵黄免疫球蛋白是一种高产、优质的多克隆抗体，而且鸡大规模工业化饲养成本低，经济方便，同时制备IgY的工艺相对简单。
因此，IgY在生物制品的开发和疾病的防治方面具有广阔的前景。