种子生活力测定的原理
实验三 种子生活力测定
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实验方法和步骤
四唑染色 目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的健壮、衰
弱和死亡部分的差异显现出来，判断种子生活力。 染色方法：将经过样品准备或不须准备的规定数量种子分
别放入四唑溶液（0.1%）里染色。 将不同重复的样品分别放在小烧杯中，加入四唑溶液，以
淹没种子为宜； 移置在30℃的黑暗恒温箱内或弱光下进行染色2小时。因
为光线可能使四唑盐类还原而降低其浓度，影响染色效果。
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实验方法和步骤
观察鉴定 凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜
红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。 凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光
泽，并且活营养组织不染色部分已超过1/2，或超过 允许范围，以及组织软化的，为不正常种子。 凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色，且 组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。
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实验方法和步骤
结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复
间最大容许差距不得超过规定值； 平均百分率计算到最近似的整数。
实验三 种子生活力的测定
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一、实验目的和要求
1、实验目的
了解四唑法测定种子生活力的原理 掌握主要农作物种子四唑染色测定种子生
活力的方法步骤和判别有无生活力的鉴定 标准。
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一学独立完成同一材料的生活力 测定。
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二、实验原理
2、四唑染色法测定种子生活力的基本原理 利用四唑的无色溶液作为一种指示剂，以显示活
细胞中所发生的还原反应。 有生活力的种子胚部细胞具有脱氢酶，被种子吸
测定种子生活力的方法
实验 17 种子生活力的快速测定种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
测定种子生活力常采用发芽实验，即在适宜条件下，让种子吸水萌发，在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。
但是常规方法（直接发芽）测定种子生活力所需时间较长，特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定发芽率，遇到休眠种子也无法知道。
而采用以下的化学方法，则能在较短时间内获得结果。
Ⅰ氯化三苯基四氮唑法（ TTC 法）一、原理凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲（ TTF ），而且种子的生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深。
死亡的种子由于没有呼吸作用，因而不会将 TTC 还原为红色。
种胚生活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被染色。
因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料玉米、小麦等种子。
（二）试剂0.5% TTC 溶液：称取 0.5 gTTC 放在烧杯中，加入少许 95% 乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至 100 mL 。
溶液避光保存，若变红色，即不能再用。
（三）仪器设备恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子，天平。
三、实验步骤1. 浸种将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色取吸胀的种子 200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿 100 个半粒，加入适量的 0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。
然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。
观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。
将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。
种子生活力与活力测定
5．观察鉴定 一般鉴定原则是，凡是胚的主要构造及有关活营养
组织染成有光泽的鲜红色，为有生活力种子。禾本 科：观察盾片、胚芽、胚轴、胚根；双子叶：观察 子叶、胚芽、胚轴、胚根。
凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色， 并且活的营养组织不染色部分超过允许范围，以及 组织软化的，为不正常种子。
2.原理
将离体胚在规定的条件下培养5～14 d。有生 活力的胚仍然保持坚硬新鲜的状态，或者吸 水膨胀、子叶展开转绿，或者胚根和侧根伸 长、长出上胚轴和第一叶；而无生活力的胚， 则呈现腐烂的症状。
（二）离体胚测定方法
1．试验样品 需用400粒种子。设定重复次数（如4×100或 8×50）。
a．胚根顶端不染色，花生为三分之一，蚕豆为三分之二， 其他种为二分之一。 b．子叶顶端不染色，花生为四分之一，蚕豆为三分之一， 其他为二分之一。 c．除蚕豆外，胚芽顶部不染色四分之一 。
瓜类： a．胚根顶端不染色二分之一。 b．子叶顶端不染色二分之一。 棉花： a．胚根顶端三分之一不染色。 b．子叶表面有小范围的坏死或子叶顶端三分之一
DPNH2 + TTC (辅酶IH2) (四唑)
DPN + TTCH + HCl (辅酶I) (甲 ) (氯化氢)
依据四唑染成的颜色和部位，即可区分种子红色的有生活力部分和无 色的死亡部分。
注意：四唑染色是一酶促反应，因此反应不仅受酶活性的影响，还受 底物浓度、反应温度、pH值等因素的影响。
平均生活力百分率（%）
最大容许范 围
1
2
3
99
2
5
98
3
6
97
4
7
96
5
植物生理学 实验6__种子生活力的测定
数据记录与处理
不同方法测定种子生活力统计表 方法 TTC 红墨水 有生活力 无生活力 供试粒数 种子粒数 种子粒数 30 30 有生活力种子 占供试粒数的%
BTB
30
注意事项
沿种胚中央准确切开，同粒TTC/红墨水法各一半 TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶 中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。 染色结束后立即进行鉴定，因放久会褪色。
实验六 植物种子生活力的快速测定
实验目的
1. 了解种子生活力快速测定的方法
2. 理解TTC/BTB/染料法测定种子生活力的原理
种子生活力（seed viability）：指种子能够萌发 的潜在能力或种胚具有的生命力。 种子活力（seed vigor）：
实验原理
TTC法
1. 2. 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应， 而无生活力的种胚则无此反应。 当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被NADH或 NADPH还原时，可产生红色的三苯甲腙（TTF），胚便染 成红色。 如种胚死亡便不被染色；如种胚生活力下降，呼吸作用明显 减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，染色较浅；故可根据种胚 染色的部位或深浅来鉴定种子的生活力。
2. 取30粒完好的小麦种子，种胚向下插入胶(不软 不硬)；
3. 将培养皿置于35 ℃下培养 1hr，对光观察，如 种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是 死种子。
TTC/红墨水染色法
1. 2. 3. 4. 5. 将种子用温水（30℃）浸泡2-6h，使种子充分吸胀； 随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，取其一半 TTC备用，另一半红墨水法备用； 将TTC备用的一半种子浸于5 ml TTC 中，于恒温箱（3035℃）中保温30min； 将红墨水法的另一半种子用5 ml红墨水浸5 min（室温）； 染色结束后要立即进行鉴定，因放久会褪色。倒出TTC / 红墨水，再用清水冲洗种子1-2次，观察种胚被染色的情况。
三种常用检测种子生活力方法比较(1)
三种常用检测种子生活力方法比较(1)随着种子在种植中所占的重要地位，各种检测种子生活力的方法也应运而生。
常用的检测种子生活力的方法有三种，分别是发芽率法、荧光法和电导率法。
本文将对这三种方法进行详细介绍，并进行比较。
一、发芽率法发芽率法是最常用的检测种子生活力的方法之一。
其主要原理是把一定数量的种子在一定的条件下进行发芽，然后通过计算发芽率来推断种子的生活力。
条件包括温度、湿度、光照和通风等，不同的作物和品种有不同的最适条件。
发芽率法检测种子主要有以下几个优点：一是操作简单；二是可大批量检测；三是检测结果真实可靠。
但是同时也存在着一些缺点，如检测时间长、结果受环境因素的影响等。
二、荧光法荧光法是一种新兴的检测种子生活力的方法。
荧光法主要利用了种子的细胞色素氧化酶体系在氧化还原体系下发生反应而使荧光物质荧光素产生荧光。
通过测定产生的荧光的强度来判断种子的生活力。
三、电导率法电导率法是一种利用种子中质量和导电能力的变化来测定种子生活力的方法。
其主要原理是将一定数量的种子放入导电液中，通过测定电导率的变化来判断种子的生活力。
导电液可以是盐水、糖水、电导液等。
三种方法比较从上述的介绍可以看出，每种方法都有其优点和缺点，没有一种方法是完美的。
所以在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的方法。
一般来说，发芽率法适用于大批量检测，荧光法适用于单个种子检测，电导率法适用于不同品种间的比较。
除此之外，也可以选择不同的方法相互协作，如发芽率法和荧光法或者电导率法和发芽率法组合使用。
种子活力快速测定
• 【实验步骤】
• TTC法
• 1. 将玉米、小麦种子用温水(30~35℃)浸泡3~6h，使种子 充分吸胀。 • 2. 随机取种子30粒，沿种胚中央准确切开，其中一半置于 培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜，置于30 ℃ 观察培养箱中培养30min ；另30半粒玉米置于沸水中 2min以杀死胚，同样加入0.5%TTC置于30 ℃培养箱中染 色处理作为对照观察。 • 3. 倒出TTC溶液，再用清水将种子冲洗2次，观察种胚被 染色的情况。 • 4.观察：种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的 为死种子。
种子活力是种子发芽和出苗 率、幼苗生长的潜势、植株抗 逆能力和生产潜力的总和，是 种子品质的重要指标。
•
长期以来都 用发芽试验检验 种子的质量，生 产实践表明，实 验室的发芽率与 田间的出苗率之 间往往存在很大 差距。
• 【实验原理】
• TTC法：活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧 化还原反应，而死种子则无此反应。当TTC渗入 活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶 (NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC 转变为红色的三苯基甲腙（TTF）；如果种胚死 亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅， 因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程 度来鉴定种子的生活力。
• TTC法：
• 活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒 数/实验种子的总粒数)×100% • 红墨水法： • 活种子百分率（%）=(不着色或着色很浅的 种子粒数占实验种子/实验种子的总粒数) ×100%
• 红墨水染色法：活种子细胞的原生质膜具 有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚 细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进 入死细胞而染色。 • 种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总 数×100%
实验五、种子活力的快速测定
实验五、种子活力的快速测定一、实验目的熟悉种子活力快速测定的方法⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法⏹BTB（溴麝香草酚蓝）法⏹红墨水法⏹纸上荧光法二、实验原理⏹TTC（氯化三苯基四氮唑）法二、实验原理⏹红墨水法⏹活细胞的原生质膜具有选择透性，死亡的种胚细胞原生质膜无选择透性；⏹红墨水中的染色成分大红G不能通过选择透性膜，但能通过非选择透性膜。
三、实验材料、器材及试剂⏹材料：小麦种子⏹仪器及器皿：恒温箱，恒温水浴锅，镊子，刀片，培养皿，小烧杯⏹试剂：⏹0.5% TTC溶液（随配随用，若已变为红色则不能继续使用。
）⏹5%红墨水四、实验步骤⏹1、材料准备：将待测小麦种子用30-35℃温水浸种6~8h。
⏹2、切种子：随机取种子30粒以上,用刀片沿种子胚中心线切成两半。
⏹3、染色处理：取一半的种子放在培养皿中，加入染色溶液（刚好浸没种子），30-35℃恒温箱中保温0.5-1h。
⏹4、对照处理：另一半于沸水中煮死，染色同3。
⏹5、结果观察：倒出染色溶液，TTC处理种子用清水将种子冲洗1-2次，红墨水处理种子则用水冲洗至冲洗液无色为止。
观察种胚着色状况。
⏹6、结果验证：随机取种子30粒以上，25℃保温保湿培养，48h检测发芽率。
五、结果与讨论⏹1、计算两种测定法得到的种子发芽率。
统计分析两种测定方法的结果是否有差异。
⏹讨论两种方法有什么不同？你认为哪一种方法测定的结果较好，为什么？⏹2、统计分析种子活力快速测定结果与实际种子萌发结果的差异性。
⏹讨论可能原因。
比较分析种子活力快速测定与种子直接发芽率测定的优缺点。
注意事项⏹TTC处理染色结束后要立即进行鉴定。
凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。
如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不能染色都属于不能正常发芽的种子。
⏹红墨水处理后要冲洗充分后观察。
凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
第五章___种子生活力与活力测定
色情况。
20 ml乳酸＋20 ml苯酚＋40 ml甘油＋20 ml蒸馏水
注意
该药液有毒性，最好戴塑胶薄膜手套配 制，并在通风橱里操作。在使用时谨防 触及皮肤或衣服等。
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（4） H202 ：加快酶活化和吸胀。一般用0.3%H202溶液 （5）杀菌剂和抗生素：延缓衰弱种子的劣变进程。
第一节 种子生活力测定原理及方法
2)种子预措
目的：采用适当的方法使胚的主要构造和(或)活的营
养组织暴露出来。
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第一节 种子生活力测定原理及方法
方法：
刺穿：对经过预湿的种子或硬实种子，可利用解剖针或解
剖刀，刺穿种子的非主要部位，适用于小粒（牧草等）种子。
加速四唑还原成甲臜的速度；
或在两端横切，打开胚腔，并 切去小部分胚乳(配子体组织) 针叶树种子沿胚旁 边纵切
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第一节 种子生活力测定原理及方法
（3）四唑染色
目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的
健壮、衰弱和死亡部分的差异正确地显现出来。 染色程序： 将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或 烧杯中。 加入适宜浓度的四唑溶液，以淹没种子为度，移置 到一定温度的（黑暗或弱光）恒温箱内进行染色反应。
ISTA Working Sheets on Tetrazolium Testing, Volume I, 1st Edition, 2003 Volume I - Agricultural, Vegetable and Horticultural Species By N. Leist and S. Krämer Illustrated by J. Pfäfflin
实验六 种子生活力的快速测定
实验六种子生活力的快速测定一、实验目的1.加深对种子作用的理解；2.掌握种子生活力的测定方法。
二、实验原理在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。
因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。
种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。
有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H）有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深；死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色；种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色；三、实验材料及用品材料：绿豆种子实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存）四、实验步骤1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。
2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。
b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。
c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保温1h。
3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染色情况。
有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染色。
生活力的种子数计算种子生活力的比率= ————————X 100%实验组测定种子数五、实验现象与结果保温1h后种子染色情况：被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6煮沸的种子 0 20表一种子染色情况记录表图1 未煮沸的种子染色情况图2 煮沸的种子染色情况生活力的种子数未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%实验组测定种子数生活力的种子数煮沸的种子生活力的比率= ———————X 100% =0/20 X 100% = 0实验组测定种子数六、分析和讨论1.在实验中，去种皮时要小心防止伤及种胚，因为胚是种子中的活细胞，若损失可能使实验无法进行反应，造成实验的误差。
实验3种子生活力的测定
实验3 种子生活力的测定目的要求用化学试剂测定种子生活力，可以在短时间内评定种子质量。
特别是对于有些树种种子的休眠期长，难于进行发芽测定，采用此法测定种子的生活力就具有明显的优越性。
通过实验要求了解测定种子生活力的基本原理，并学会其操作程序。
一、 氯化三苯基四氮唑（TTC ）法【原理】凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH 或NADPH ）还原时，可产生红色的三苯基甲 （TTF ），胚便染成红色。
当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。
TTC 还原反应如下：TTC（无色） TTF（红色）【仪器与用具】培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH 试纸。
【试剂】TTC 溶液的配制：取1g TTC 溶于１L 蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC 溶液。
药液p Ｈ应在6.5～7.5，以pH 试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。
【方法】1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h ，使种子充分吸胀。
2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。
3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC 溶液，以浸没种子为度。
4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。
表32-1 染色法测定种子生活力记载表+Cl+CN N NN +2HCN N NNHHCl【注意事项】1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。
(精品)种子生活力测定的原理
(精品)种子生活力测定的原理种子生活力测定是种子品质检测的重要方法之一。
其原理是利用种子的代谢活动作为生活力的指标，通过测定种子的呼吸率、发芽率、抽胚率等参数来评价种子的生活力。
下面将详细介绍种子生活力测定的原理。
一、种子呼吸率的测定原理呼吸作为种子的代谢过程之一，可反映种子的生物化学活性。
种子呼吸率是指在单位时间内种子的氧气消耗量或二氧化碳产生量，即呼吸强度。
呼吸率的大小直接关系到种子的能量来源和消耗。
种子在用氧进行呼吸作用时，主要的代谢物质是葡萄糖和氨基酸，产生 ATP 等能量分子和二氧化碳、水等代谢产物。
利用呼吸量，可以评价种子存活度和质量。
测定种子呼吸率的方法有很多种，如使用光谱法、显微镜熔点计、低温燃烧法、气体检测法等。
其中，气体检测法是应用最广泛的一种方法。
方法是将种子装在呼吸率仪中，通过不断加入氧气和排出二氧化碳实现测定。
常用的仪器有 WSTE-1、WTmod1-1 等。
种子发芽率是种子生活力测定中最基本的参数之一。
它是指单位时间内种子的发芽数，反映种子生长发育的潜力和种子质量的优劣。
种子发芽过程主要涉及种子萌发、根和胚芽的形成和生长等，需要有充足的水分、适温、氧气和光照等条件。
种子发芽率受多种因素影响，如种子保存条件、处理方式、种子来源、品种特性等。
测定种子发芽率，常用的方法有常规温室法、纸巾培养法、挂网法等。
其中，常规温室法是最常用的一种方法。
其原理是将一定数量的种子放置在经过灭菌处理的仿土或营养物质充足的培养土壤中，在一定的温度和湿度条件下观察种子发芽情况，测定发芽率。
一般情况下，种子发芽率可以在 7-14 天内达到稳定。
种子抽胚率是指在不同水分和温度条件下，种子实现一定程度的萌发至抽胚的百分比。
它是种子品质的重要指标之一，同样受到多种因素影响，如种类、存储条件、处理方式等。
抽胚率的测定，常用的方法是室内拟真鉴别法和高温处理法。
室内拟真鉴别法是将种子放置在一定温度和湿度条件下，观察其抽胚情况；高温处理法是将种子暴露在高温环境中，观察其能否抽胚。
ttc测定种子生活力的原理方法和效果
TTC测定（Tetrazolium Chloride测定法）是一种用于测定种子生活力的方法。
它通过将TTC溶液加入种子样品，测定种子内的脱氧酶活性，从而评估种子的生活力。
TTC测定的原理是：种子中含有脱氧酶，当种子受到刺激时，脱氧酶会将TTC转化为红色染料，用红色染料的含量来反映种子的生活力。
TTC测定的方法如下：
1.准备TTC溶液：将TTC粉末加入溶剂，按照所需浓度调整溶液。
2.准备种子样品：选择合适的种子数量，放入容器中。
3.加入TTC溶液：将TTC溶液加入种子样品中，搅拌均匀。
4.观察染色情况：在适当的时间内观察种子的染色情况，测定红色染料的含量。
TTC测定的效果是：通过TTC测定，可以准确评估种子的生活力，为种子的选择和保存提供依据。
此外，TTC测定还可以用于比较不同品种、不同保存条件下种子的生活力差异。
种子生活力测定原理及方法
2012/03/10
种科092 雷红琴
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• (2)抵御不良环境条件： • 高活力种子由于生命力较强，对田间逆境具有 较强的抵抗能力。如干旱地区，高活力种子可 适当深播，并有足够能量顶出土面；而低活力 种子在深播情况下无力顶出土面。 (3)抗寒力强，适于早播： • 春天种糯玉米，为了及早上市，一般提早播种 （4/5～10覆膜），高活力种子对早春低温条 件具有抵抗能力。蔬菜早种可早上市，提高经
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种科092 雷红琴
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• • • •
（1）种子发芽、幼苗生长速率和整齐度； （2）种子在不利环境条件下的出苗能力； （3）贮藏后，特别是能保持发芽力的性能。 高活力种子批即使在不适宜的环境条件下，仍 具有良好性能的潜力。 • 高活力种子发芽、出苗整齐、迅速，对不良环 境抵抗力强。 • 低活力种子，在适宜条件下虽能发芽，但发芽 缓慢，在不良环境条件下出苗不整齐，甚至不
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种科092 雷红琴
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GI为发芽指数。 (5)简易活力指数测定：适用于发芽快速的作 物种子，如油菜等。 简易活力指数（SVI）＝G×S
式中：G为发芽率，S为幼苗长度(cm)或重量(g)。 (6)平均发芽天数(MLIT)测定： 平均发芽天数＝∑(Gt×Dt)/∑Gt 式中：Gt、Dt与发芽指数公式中相同。
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种科092 雷红琴
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相应的发芽日数。∑为总和。 测定结果GI值与活力成正相关关系。 如玉米60/3+20/4+10/5=27; 60/3+30/4=27.5。数值越大：天数越少。 • （4）活力指数测定：发芽指数(GI)与幼苗长 度（cm）或重量（g）之积。 • 活力指数(VI)＝GI×S 式中：S为一定时期内幼苗长度(cm)或 幼苗重量(g)
8、种子生活力的快速测定(TTC法)
华南农业大学实验报告专业班次11农学1班组别201130010110 题目种子生活力的快速测定（TTC法）姓名梁志雄日期2012-11-21一、实验原理有活力种胚中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色TTF，如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力二、实验材料与实验器材水稻种子、恒温箱、小白瓷碗、镊子、小烧杯三、实验步骤1、实验之前将种子放在微波炉里稍微加热，将水稻种子用温水（30~35℃）浸泡2~6h，使种子充分吸涨2、随机抽取30粒水稻种子，小心剥去种皮，千万不要伤害种胚，然后把处理好的种子置于小白瓷碗中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为度，与恒温箱中（30~35℃）中保温0.5-1h。
3、染色结束后要立即进行鉴定，因放置太久会褪色。
倒出TTC溶液，再用清水将种子清洗1~2次，观察种胚染色的情况。
凡种胚全部或大部分被染成红色即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。
四、数据记录记录本实验测得染色种子25粒，无色种子5粒，其中染色的25粒种子中有19粒种子染色是比较深的，说明其生长活性物质多，生命力强。
根据以下公式种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%可以知道种子活力=25/30*100%=83.3%六、实验总结有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸过程中的代谢物质跟TTC反应生成红色TTF，且代谢物质越多，颜色越深，代谢强度越大。
从本实验结果来看，种子生命力总体上时比较强的，且其中的19粒染色较深的那些则更高。
另外TTC法还可以运用于花粉活力的测定。
种子生活力的快速测定实验报告
种子生活力的快速测定实验报告以下是种子生活力的快速测定实验报告：一、实验目的：1、了解种子的萌发过程；2、掌握种子活力的快速测定方法。
二、实验原理：种子的萌发是指种子在适宜的环境下，经过一定的时间后，胚根和胚芽开始向外生长并形成幼苗。
种子活力是指种子在一定时间内能够完成萌发的能力。
通过测定种子的吸水力、萌发率等指标来评估种子的活力。
常用的种子活力测定方法包括浸泡法、吸水力测定法、电导率测定法等。
三、实验材料：1、不同品种的玉米种子；2、清水；3、容器；4、计时器；5、电子天平；6、试管；7、吸水纸巾；8、显微镜。
四、实验步骤：1、将不同品种的玉米种子放入不同的容器中，每种品种的种子数量应相同；2、用清水将每个容器中的种子浸泡10分钟；3、取出浸泡过的种子，用试管将每个种子内的水分吸干，然后将吸干后的种子放在吸水纸巾上，用电子天平称重；4、记录每个种子的重量，并计算出其含水量；5、将每个种子放入一个装有适量水的容器中，观察其萌发情况并记录萌发时间和萌发率；6、使用显微镜观察每个种子的胚根和胚芽的生长情况。
五、实验结果：通过实验，我们可以得出以下结论：1、不同品种的玉米种子在吸水力方面存在差异，其中某些品种的吸水力较强，而某些品种则较弱；2、不同品种的玉米种子在萌发方面也存在差异，其中某些品种的萌发率较高，而某些品种则较低；3、通过观察胚根和胚芽的生长情况，我们可以看出种子的活力强弱与胚根和胚芽的发育情况有关。
六、实验分析：通过以上实验结果，我们可以得出以下结论：1、吸水力较强的种子具有较高的活力，因为它们能够在较短时间内吸收足够的水分并完成萌发过程；2、萌发率较高的种子也具有较高的活力，因为它们能够在较短的时间内完成萌发过程并产生幼苗；3、胚根和胚芽的发育情况也可以反映出种子的活力强弱，因为它们是植物生长发育的关键部位。
种子生活力测定原理及方法综述
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（1）种子发芽、幼苗生长速率和整齐度； （2）种子在不利环境条件下的出苗能力； （3）贮藏后，特别是能保持发芽力的性能。 高活力种子批即使在不适宜的环境条件下，仍 具有良好性能的潜力。 • 高活力种子发芽、出苗整齐、迅速，对不良环 境抵抗力强。 • 低活力种子，在适宜条件下虽能发芽，但发芽 缓慢，在不良环境条件下出苗不整齐，甚至不
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应将过湿或过干的种子平衡至相近的含水量。 • 3、幼苗评定试验 • 适用于大粒豆类种子。这些种子不能用幼苗长 度表示活力。 • 因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准 发芽方法，幼苗评定时分成不同等级。 例如，豌豆种子试验方法如下： • 取4份试样，每份50粒。砂床发芽，于20℃、 相对湿度95～98％、光照12h、光强度
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• • • • •
该分类体系被广泛接受。 现将常用的种子活力测定方法分类介绍如下： 五、种子活力测定方法： （一）发芽测定法 这类测定方法是根据高活力种子幼苗生长快、 幼苗健壮、生长正常、幼苗株大和重量较重等 生长特性，来评定种子生活力水平的方法。 • 而低活力种子则相反。 • 1、标准发芽试验法测定（发芽速率测定）
第二节 种子活力测定原理 及方法
• 种子活力（seed vigor）是种子质量的重要指 标之一，与种子田间出苗质量密切相关。活力 测定经过几十年的研究，已取得了重大进展。 在美国和欧洲，许多种子公司把活力测定作为 常规的检验项目，但国内没被列于国标。 • 一、种子活力的概念 种子活力的定义长期得不到统一，不同学 者有不同的定义，经过27年的争论，直到 1977年ISTA才确定了种子活力的定义： • 1、种子活力是决定种子或种子批在发芽和出
实验一-水稻种子活力的快速测定、发芽特性观察
实验一，水稻种子活力的快速测定、发芽特性观察一、实验目的：1、学习和掌握水稻种子活力的快速测定方法。
2、观察不同温度和水分（氧气）条件下稻种的发芽情况。
3、了解水稻种子的发芽特性及其与外界环境条件的关系.二、实验内容:（1)T.T.C法快速鉴定种子生活力原理:凡是有生命活力的种子胚，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种子胚则没有此反应。
当TTC（氯化三苯基四氮唑）深入种子胚的活细胞内时，被种胚中的脱氢辅酶还原成不溶性的红色稳定不扩散的TTF（三苯甲腙）。
（2）红墨水法快速测定种子生活力原理：凡是有活力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性，选择性吸收物质的能力,一般染料不能进入细胞内，胚部不染色。
而丧失活力的种子，其胚部细胞原生质膜会丧失选择吸收能力，于是染料便能自由进入死细胞内而染色，所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的活力。
（3）具备有发芽能力的水稻种子在一定水分、温度和氧气条件下，即能萌发生长。
种子吸收水分以后,在30－35℃条件下发芽较快，但根芽生长受氧气供应程度的影响较大。
氧气充足时，先长根，而水分充足氧气缺乏时，则芽鞘先伸长。
因此，掌握适宜的温度，水分（氧气）条件进行催芽，才能达到芽齐、芽壮，为培育壮秧打好基础。
三、实验仪器、设备：1.籼（A种，B种）、粳型水稻种子（C种，D种），恒温箱，冰箱,培养皿9cm（12套）及15cm（36套）,定性滤纸15cm（一盒），烧杯250ml （12个），刀片，游标卡尺，温度计,放大镜，镊子等。
红墨水一瓶，红四氮唑（TTC）一瓶。
2。
直尺、天平、游标卡尺、干燥箱、网筛（装秧洗土)、剪刀。
四、实验要求：每5人为1组，全班分为6组。
1.水稻种子活力的测定1。
1 T。
T.C法快速鉴定种子生活力①预先浸种：每组取待测粳、籼稻种子各20粒预浸，籼稻种子浸6—8小时,粳稻种子浸24小时。
之后取出部分浸泡过的粳稻种子和籼稻种子于80℃的高温环境下煮10-15分钟并将其编号籼(A种,B种）和粳型水稻种子（C种，D种）。
第五章 种子生活力和活力测定
第五章种子生活力与活力测定本章讲2节§1、种子生活力测定原理及方法§2、种子活力测定原理及方法第一节种子生活力测定的原理与方法在种子贸易中，时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态难以通过发芽测定得到结果，种子生活力测定可以满足这一要求。
一、种子生活力概念：种子生活力(seed viability)指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力；种子生活力和发芽具有不同的含义：一些休眠种子在发芽试验中不能发芽，但它是有生活力的，破除休眠后，能长成正常幼苗。
而生活力反映的是种子发芽率和休眠种子百分率的总和。
所以，种子生活力测定，反映的是种子批的最大发芽潜力。
二、种子生活力测定的意义1、测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子，正常发芽条件下，其发芽力很低，这种情况下，仅用发芽试验测定其发芽率，就不可能测出种子的最高发芽率。
必须进行生活力测定，了解种子的发芽潜力，合理利用种子。
（怎样利用？）播种之前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理后播种。
种子检验时，发芽试验末期有新鲜不发芽的种子或硬实种子，就应接着进行生活力测定；或破除休眠后做发芽试验。
2、快速预测种子的发芽力:休眠种子可借助于各种预处理打破休眠，进行发芽试验，但时间较长；而种子贸易中，因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需的时间较长。
如小麦8d，水稻14d，菠菜21d。
而多数林木种子则需要更长的时间（如月季15～25℃发芽，70d计算发芽率）。
这时，可用生物化学法测定种子生活力作为参考；而林木种子可用生活力来代替发芽力。
种子生活力测定方法有四唑染色法、靛蓝染色法、红墨水染色法、软X射线造影法等。
本节将重点介绍四唑染色法，并简要介绍其他方法。
三、四唑测定法（GB）(一)四唑测定法概述1、发展简史四唑测定法于1942年由德国kon(莱康)教授发明，二战期间传人美国。
实验 植物种子生活力快速测定 (1)
实验十一植物种子生活力快速测定一、实验目的掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。
二、实验原理种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现（指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标），种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力（通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率）。
种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的，因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。
测定种子生活力方法常用发芽率测定法，该法是指在最适宜的条件下，在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。
它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。
但是常规方法（直接发芽）测定种子发芽率所需的时间较长，对于处于深休眠状态的种子，几乎难于应用。
特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定种子发芽率，所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。
红墨水染色法凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力，它对某些染料不让透过，因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。
而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，于是染料进入死细胞，将胚完全染色。
因此，可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。
三、实验材料小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。
四、设备与试剂恒温箱，培养皿，烧杯，镊子，刀片，紫外荧光灯，滤纸（无荧光），琼脂，沸水。
5％红墨水：市售红墨水5 mL加95 mL自来水。
五、实验步骤1．红墨水染色法将待测种子在30～35℃温水中浸种（小麦、大麦、籼稻种子6～8h；玉米种子5 h 左右；粳稻种子2 h），以增加种胚的呼吸速率，使显色迅速；取吸胀的种子200 粒，沿种子胚的中心线纵切为二半，将其中的一半置于红墨水培养皿中5～10 min；用红墨水染色后，倒去废液，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止，并检查种子死活。
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种子染色时间与四唑溶液浓度有关。
浓度增加，染色反应所需时间也随之缩短，从染色效果看，以较低浓度为宜；
测定时，要求四唑溶液的 ph 值在 6 ～7 范围之内。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
△ 配制方法
称取 1 g 四唑粉剂溶解于 100 ml 磷酸缓冲溶液中，即配成
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
① 四氮唑：2,3,5-氯（溴）化三苯基四氮唑
（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride or Bromide ）
简称：四唑或红四唑 △ 理化性质
缩写：TTC， TTB，TZ
白色或淡黄色的粉剂，熔点243℃； 当温度达到245℃时就会分解，易溶于水，具有微毒； 遇到直射光线时会被还原成粉红色，
④ 过氧化氢溶液
用于某些牧草种子（黑麦草）的预湿浸种，加快酶的活化和吸胀。
⑤ 杀菌剂和抗生素
延缓衰弱种子的劣变进程。
⑥ 胶液硬化剂
有些种子浸种后，种皮表面出现胶液而变得非常光滑，难以拿牢进 行样品准备。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
6、测定程序
（1）预处理
预措：是指在种子预湿前除去种子外部的附属物和在种子
（4）鉴定前处理
① 直接观察，不需处理 ② 轻压出胚，观察鉴定 ③ 扯开营养组织，暴露出胚 ④ 切去一层营养组织，暴露出胚和活的营养组织 ⑤ 沿胚中轴纵切 ⑥ 沿种子中线纵切 ⑦ 剥去半透明的种皮或种子组织
⑧ 剥去种皮和残余营养组织
⑨ 切去切面碎片或掰开子叶 ⑩ 乳酸苯酚透明液的应用(便于小粒种子观察)
1、发展简史
1942年由德国H. Lakon发明 1950年ISTA成立四唑测定技术委员会
1953年ISTA世界大会第一次将四唑测定列入国际种子检验规程
1984年，650多个属和种
《四唑测定手册》（Handbook on Tetrazolium Test），Moore，
1995年我国将四唑测定列入农作物种子检验规程
a) 不需预湿和附加准备：如苜蓿种子 b) 采用缓慢预湿后不需样品准备：如大豆种子等
c) 穿刺或切开胚乳：小粒牧草等种子
d) 沿胚纵切：水稻、玉米、和麦类等 e) 近胚纵切：松柏和伞形科等植物种子 f) 上半粒纵切：莴苣和其他菊科等植物种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（2）染色前的样品准备
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
2、原理
无色的的三苯基四氮唑被种子吸收后，在胚部活细
胞中脱氢酶的作用下，还原成为红色的、稳定、不扩散
的三苯基甲 ，这样，就可根据染色的部位和深浅来区 分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
1.禾谷类:通过胚和约在胚乳四 分之三个纵切 2.燕麦属:靠近胚部横切 3.牧草:通过胚乳末端部分横切 和纵切 4.牧草:种子刺穿胚乳 5.莴苣属:通过子叶末端一半纵 切 6.第5种方式进行纵切时的解剖 刀部位 7.伞形科:沿胚的旁边纵切
8.针叶树:种子沿胚旁边纵切
非要害部位弄破种皮。
预湿: 为加快种子充分吸湿，软化种皮，便于样品准备，
以提高染色的均匀度，通常种子在染色前要进行预湿。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
6、测定程序
（1）预处理
预湿
水浸快速预湿：适合于水稻、大豆和花生等作物种子
纸床缓慢预湿：适合于葱、玉米和小麦等作物种子
9.两端横切,打开胚腔,并切去 小部分胚乳.
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
（3）染色温度和时间
农作物种子四唑染色技术规定
将准备好的种子样品放入染色盘中，加入适宜浓度的四唑溶液完全淹没种 子，移置于一定温度的黑暗控温设备内或弱光下进行染色反应。
所用染色时间因四唑溶液浓度、温度、种子种类、样品准备方法等因素的 不同而异。
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第六章 种子活力测定重复间的最大容许差距
计算各重复有生活力种子百分率，重复间误差不得
超过最大允许误差
结果计算到近似整数
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种 子 检 验 结 果 报 告 单
第六章 种子生活力测定的原理和方法
三、种子生活力的其他测定方法
g) 切去种子基端：茜草科等植物种子
h)
斜切种子：菊科、十字花科和蔷薇科等
i) 横切胚乳：黑麦草、羊茅等植物种子 j) 剥去种皮：矮牵牛、茶籽和棉花等植物种子 k) 剥开胚乳取出胚：杜仲等林木种子 l) 横切胚轴和盾片：大麦和小麦等 m) 从果实内取出胚：桃等 n) 横切种子两端：山茱萸和胡颓子等 o) 平切果种皮和胚乳，露出胚的构造：洋葱和菠菜等植物种子
农作物种子四唑染色技术规定
◎ 纸床预湿(小粒豆类种子)
◎ 纸卷预湿(大豆、菜豆、豌豆）
H2O2溶液浸种：
（为了加快种子吸胀和促进酶的活化以及
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缩短预湿时间） 0.3%, 20～30℃, 1 h
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（2）染色前的样品准备
目的：使四唑溶液快速和充分渗入种子全部活组织，加快染色反 应，采用适当方法使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来。
力。通常是指一批种子中具有生命力的种子数占种子总数的 百分率。
能发芽的种子 暂时不能发芽而具有生命力的休眠种子
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
2、测定种子生活力的意义
（1）休眠的种子必须进行生活力测定 （2）快速预测种子发芽能力
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二、种子生活力四唑染色测定（TTC test or TZ test）
于1000 ml 蒸馏水；
然后取 2 份母液Ⅰ和 3 份母液Ⅱ混合即成。
AOSA 规程法
在1000 ml 蒸馏水中加入 5.45 g NaH2PO4 和 3.79 g Na2HPO4 ，充分溶解即成。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
③ 乳酸苯酚透明液
用于小粒豆类种子或牧草种子,染色后种皮、稃壳或胚乳变为透明。
3、特点
原理可靠
结果准确(与标准发芽率误差一般不超过3-5%) 不受休眠限制 简便快速 成本低廉
6-24h
Vitascope 20-30min
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第六章
种子生活力测定的原理和方法
4、适应范围
测定休眠种子的发芽潜力 测定收获后马上要播种的种子的发芽潜力 测定发芽缓慢的种子的发芽潜力 测定发芽末期未发芽种子的生活力 测定种子收获或加工期间损伤种子的生活力 解决发芽期间遇到的问题 查明种子贮藏期间劣变衰老程度 时间紧迫，调种时快速测定种子生活力
在 20～45℃ 范围内，温度每增加 5℃，其染色时间可减少一半。 达到规定时间或染色已很明显时，倒去四唑溶液，用清水冲洗。 已达到规定时间，样品的染色仍不够充分，可适当延长染色时间，以便证 实是由于四唑溶液渗入缓慢引起，还是由于种子本身的缺陷所引起的。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
水稻：凡是胚的主要构造染成正常鲜红色，或胚根尖
端 2/3 不染色而其他部分正常染色的种子为有生活力
种子。
大豆： 凡是整个种子染成明亮红色，或仅胚根尖端
1/3 不染色，或子叶表面有小范围坏死，或子叶顶端 1/3不染色，为有生活力种子。
第六章 种子生活力测定的原理和方法
一、种子生活力的概念和测定意义
二、种子生活力四唑染色测定 三、种子生活力的其他测定方法
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
一、种子生活力的概念和测定意义
1、种子生活力（seed viability）的概念
种子生活力是指种子发芽的潜在能力和种胚所具有的生命
1.0% 四唑溶液；
称取 0.1 g 四唑粉剂溶解于 100 ml 磷酸缓冲溶液中，即配成
0.1% 四唑溶液；
可用 NaOH 或 NaHCO3 溶液调节 ph 值。
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
5、所需试剂
② 磷酸缓冲液
ISTA TZ手册法
母液Ⅰ：称取 9.078 g 磷酸二氢钾（KH2PO4）溶解于1000 ml 蒸馏水中； 母液Ⅱ：称取 9.472 g 磷酸氢二钠（Na2HPO4）或 11.876 g Na2HPO4 · 2H2O 溶解
甲烯兰法 溴麝香草酚兰法（BTB法） 红墨水染色法 软Ｘ射线造影技术
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第六章 种子生活力测定的原理和方法
一般的鉴定原则：
凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色， 且组织状态正常的，为有活力种子
凡是胚的主要构造局部不染色或染色成异常的颜色和光泽， 并且活营养组织不染成部分已超过二分之一，或超过允许范 围且组织软化的，为不正常种子
凡完全不染色或染色成无光泽的淡红色或灰白色，且组织已 腐化、虫蛀、损伤、腐烂的，为死种子。 各种植物的种子活力判别标准参照种子检验规程。