实验三酶的基本性质

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实验三 酶的基本性质
(P85)
1
酶的定义: 是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生
物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶 催化下进行的。 酶的特点:
酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特 性。 温度、pH值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。
2
一、目的
通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性,了解温 度对酶活性的影响,明确最适温度的概念;
试剂
1%淀粉溶液 (含0.3%NaCl),0.1%淀粉溶 液,唾液淀粉酶液,pH7.0、8.0、5.0的磷酸 缓冲液(PB),碘液,1%NaCl,1%CuSO4, 蒸馏水(dH2O)
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四、实验方法
(一)温度对酶活性的影响
操作项目
唾液淀粉酶液(mL) 酶液处理5min
pH7.0缓冲液(mL) 1%淀粉液(含0.3%NaCl)(mL)
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二、原理 (三)酶的激活和抑制
酶的活性常受某些物质的影响。 有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂; 有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。
例如,氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂,硫酸铜为其抑 制剂。
很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有 特异性。
激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种 酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。 例如,氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的 活性。
反应10min 冷却3min 碘液(滴)
管号
1
2
3
1
1
1
0℃
37℃ 100℃
2
2
2
1
1
1
0℃
37℃ 100℃
流动水冷却
1
1
1
9
四、实验方法
(二)pH值对酶活性的影响
操作项目
管号
1
2
3
pH5.0缓冲液(mL)
3
/
/
pH7.0缓冲液(mL)
/
3
/
pH8.0缓冲液(mL)
/
/
3
1%淀粉液(含0.3%NaCl)(mL) 1
1
1
淀粉酶液(mL)
1
1
1
保温
将各管混匀37 ℃水浴中保温
检查淀粉水解程度
保温2min后,从2号试管中取出1 滴溶液置于白磁盘上,用碘液检 查淀粉的水解程度
碘液(滴)
1
1
1
10
四、实验方法
(三)酶的激活和抑制
操作项目
1%NaCl(mL) 1%CuSO4(mL)
蒸馏水(mL) 淀粉酶液(mL) 0.1%淀粉液(mL)
保温
检查淀粉水解程度
碘液(滴)
管号
1
2
3
1
/
/
/
1
/
/
/
1
1
1
1
3
3
3
将各管混匀37 ℃水浴中保温
保温1min后,从1号试管中取出1 滴溶液置于白磁盘上,用碘液检 查淀粉的水解程度
2
2
2
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五、结果与分析
(一)温度对酶活性的影响 各试管中现象,解释原因
(二)pH值对酶活性的影响 各试管中现象,解释原因
了解pH值对酶活力的影响,学习测定最适pH值 的方法;
了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响,学习检定 激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。
3
二、原理 (一)温度对酶活性的影响
酶的催化作用受温度的影响很大
最适温度
R e la tiv e A c tiv ity (% )
Байду номын сангаас
提高温度可以增加酶促反应的速 度。通常温度每升高10摄氏度, 100
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Tem perature OC
4
二、原理 (二)pH对酶活性的影响
酶的活性受环境pH的影响极为显著。 通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种
酶表现其活性最高时的pH值,称为该酶的最适pH。低于或 高于最适pH时,酶的活性逐渐降低。 不同酶的最适pH值不同,例如,胃蛋白酶的最适pH为1.52.5,胰蛋白酶的最适pH为8等。
反应速度加快一倍左右,最后反
应速度达到最大值。
80
酶是一种蛋白质,温度过高可引
60
起蛋白质变性,导致酶的失活。
因此,反应速度达到最大值以后, 40
随着温度升高,反应速度反而逐
渐下降,以至完全停止反应。
20
反应速度达到最大值时的温度称 为某种酶作用的最适温度。高于 或低于最适温度时,反应速度逐 渐降低。
(三)酶的激活和抑制 各试管中现象,解释原因
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六、讨论与心得
13
6
二、原理
本实验分别在不同温度、不同pH值及不同物质作用 的条件下使淀粉酶作用于其底物——淀粉,并用碘液检 查酶促淀粉水解程度来说明各条件与酶活力之间的关系。
淀粉 淀粉酶 糊精 淀粉酶 麦芽糖













蓝色 蓝紫色 暗褐色 红色
碘色
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三、仪器和试剂
仪器
移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴 锅、胶头滴管、白瓷反应盘
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