《药用植物学与生药学》实验指导书湖北理工学院医学院

《药用植物学与生药学》实验指导书（供药学专业班用）黄石理工学院医学院药学系二0一0年二月编目录实验一显微测量和显微描绘技术 (1)实验二组织制片技术 (2)实验三植物细胞构造及后含物 (4)实验四保护组织、分泌组织 (5)实验五机械组织、输导组织 (7)实验六海金沙、蒲黄、松花粉、黄连、黄芩、西洋参、人参的鉴定 (9)实验七小茴香、女贞叶、金银花、薄荷和红花的鉴定 (11)实验八茯苓、山药、半夏、贝母和天麻的鉴定 (11)实验九未知粉末和中成药（六味地黄丸）的鉴定 (23)实验一显微测量和显微描绘技术【实验目的】1．光学显微镜使用方法、注意事项。

2．掌握显微作图要领。

【实验材料】仪器：生物显微镜、酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂：甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、间苯三酚试液。

【实验内容】1．光学显微镜的构造生物显微镜由光学部分和机械部分组成。

光学部分包括成像系统—目镜和物镜，照明系统—聚光器、可变光栏和反射镜。

物镜将标本作第一次放大，目镜将第一次放大的像作第二次放大，两者相乘即是观察到的放大倍数。

机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、粗细调节手轮及推动器或压夹。

使用生物显微镜时，利用反射镜将外来光线导入聚光镜中，由聚光镜将光线会聚在标本上，用光栏调节光线强度。

观察时视野范围内应均匀明亮，先用低倍镜观察，如需要放大，可将目的物调至视野中央，然后转换成高倍镜，仔细观察。

2．光学显微镜的操作方法(1)低倍镜的操作法：①将显微镜放置离桌缘约10cm处，镜臂应靠近胸前。

②对光。

上升聚光镜到载物台水平，打开光栏至最大限度，再将低倍镜转至镜筒的正下方，使对准载物台上的透光孔(转动时，听到“得”一声，即已对正)然后用二手转动反光镜，同时从接目镜向下看，直至镜中出现一明亮而均匀的视野为止。

③装片。

将欲观察的标本片从镜前方横置于载物台上，(注意盖玻片应向上)使标本对准透光孔的中央。

④调节焦距。

从侧面注视接物镜与标本片之间的距离，向外旋转粗调节手轮，使镜筒慢慢下降，直至物镜几乎与标本片相接触，但切勿触及标本片，以免造成镜头与标本片的损坏。

自目镜向下观察，同时向内旋转粗调节手轮，使物镜慢慢上升，直至在视野中看到清楚的物象为止。

若标本不在视野中，则慢慢移动标本片，使之适中，看到物象后，用压片夹固定制片，再转动细调节手轮，并调节光线，直到看到最清楚的物象为止，注意在显微镜中看到的是实物倒象。

如果观察过程中发现清晰的图像逐渐模糊，说明调节手轮失灵，应进行检修。

(2)高倍镜的操作法：应先在低倍镜下选择物像，移至视野中心，换转高倍镜，应能看到欲观察之物象，用细调节手轮使之图象清晰。

更换高倍镜时如出现镜头触及载玻片现象，则要检查标本切片是否放反，或高低倍镜是否配套。

高倍镜头观察物象时，只能用细调节手轮调节焦距。

3．显微镜使用注意：①取拿显微镜时，必须一手握住镜臂，一手托住镜座，轻取轻放，防止因撞击使镜头内各组透镜脱胶而影响观察的清晰度。

②每次观察标本片时，必须先用低倍镜观察，看清物象后，再换高倍镜。

③要注意保持显微镜的干燥和清洁，使用前后，均需将显微镜擦干净，注意镜头要用擦镜纸或绸巾单向擦拂，切勿用手、手帕或纸片等去擦，观察临时制片时，要防止水分或药液外溢以致沾污镜头及其他部分。

4．绘图要领在中药的性状和显微鉴定工作中，图可以集中地突出表现实物的主要特征，有些待征用图比摄影照片效果还好，因此除去用文字记录观察到的外形、组织、细胞及内含物特征外，有时还需要绘出中药材的外形和显微图，以补充文字叙述的不足。

绘制精确的图形要根据观察的实物进行，对所要描绘的特征要仔细观察后，再进行描绘。

因此，绘图是中药鉴定和研究工作中的一项基本技能。

绘图的精确与好坏，明显地影响中药鉴定和研究的结果与质量。

中药鉴定工作中，常用绘图方法有徒手绘图法和显微描绘法两种，若按绘图工具则常分铅笔绘图法和墨线绘图法两种。

绘制显微组织简图，要用通用的代表符号来表示，要求比例正确，形态逼真，结构清楚，对中药性状图还要求富有立体感，不能随意夸张和任意涂影。

要正确绘出实物的立体结构图，必须有一定的透视知识，如前大、后小，近明、远暗，透视方向一致等基础知识。

(1)绘图的一般原则：①一切结构均用线条来表示。

线条要求粗细均匀，圆滑，明暗一致。

②所有结构线条不能用尺或其他圆规或曲线板等工具代画，必须徒手作图，以表示生物的自然形态。

③显示立体结构可用透视线条来表示。

对球形、圆柱体或圆锥体的立体结构可以用圆点衬托明暗光线的方式，而不可用任何涂影来表示。

点要小而圆，由密到稀逐步过渡。

④各部位应先画出引线再注文字。

引线用直尺画实线来表示，要求细直、均匀、不交叉．以免误指。

图内的结构名称，可直接用文字写明，也可用数码代注，再在图下集中注明。

注字书写要求清楚、端正。

图下需注明标本的名称、部位和放大倍数。

(2)徒手绘图法的步骤：①选择最典型的标本或结构。

②仔细观察各部位的形状和结构及其间的比例关系和较明显的立体结构。

③用较淡的铅笔(2H或4H)，按照实物或显微图像的比例关系和立体投影画出轮廓草图，经反复对照修改后，再用较浓的铅笔(HB或2H)绘出修改图。

④画引线，注字。

【作业】(1)制作一张根类或茎类的横切面徒手切片，并绘出其横切面组织简图。

(2)制作一张表面制片。

实验二组织制片技术【实验目的】1．掌握徒手制片、粉末制片方法。

2．学会表面制片方法。

【实验材料】仪器：酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮，以上是每次实验必备品。

另需单(双)面刀片或剃刀。

试剂：甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、间苯三酚试液、浓盐酸，以上是实验室必备试液。

材料：制作徒手切片和表面制片，可选用新鲜药材；制作粉末片，选用干燥药材的粉末。

【实验内容】一．徒手制片法系用刀片或徒手切片器将材料切成薄片，可在显微镜下观察组织构造、细胞特征的制片法，新鲜材料应除净泥砂，干燥材料需浸软后切片。

本方法简便快速，能保持植物体原有结构的真像、色彩和内含物，适合于临时制片观察或显微化学实验，其缺点是切片较厚且厚薄不均一，不适合长期保存。

(1)取材、固定与切片；选择已软化的中药材适当部位，切割成长2～3cm的小段，用拇指及食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另手持刀片，自左向右移动手腕，牵曳切片，动作要轻而快，力求切片薄而完整，操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。

对于叶片或柔软的材料，需用稍坚固而易切的胡萝卜、马铃薯或实心大通草等将材料夹住进行切片。

徒手切片器切片：将适当长度的材料夹入切片器上口外，旋转螺丝将材料固定紧，材料略露出圆盘平面，然后将切片刀或剃刀平放在圆盘上，自左向右平拉切片，同时转动切片器下端的升降调节轮，使材料上升，以利切片，(2)装片：将切好的薄片，用毛笔小心地移入盛有清水的培养皿中浸泡，取载玻片滴加甘油或试液，用镊子或毛笔将切片移于其上，再滴一滴甘油于片上，加上盖破片，即可作临时制片观察；也可将薄片滴加水合氯醛试液加热透化,再滴加稀甘油，加上盖玻片后进行观察。

加盖玻片时，应尽量避免产生气泡。

二．粉末制片法将药材研粉，过筛(50～80目)后制片。

此法是鉴定中药材最常用的方法之一，简便快速，主要鉴别细胞的形态特征。

特别坚硬的药材可用挫刀将其挫成粉末。

取粉末少许，置于洁净的载玻片上，滴加1～2滴蒸馏水或甘油醋酸试液，加上盖玻片,置显微镜下，可观察细胞中的不溶性物质如淀粉粒、脂肪油滴、色素颗粒等。

如要观察细胞的形态持征，则应采用滴加水合氯醛加热透化后装片，以除去细胞中的淀粉、油脂等，增加细胞壁的折光率，从而使细胞的形态更加清晰。

为防止水合氯醛结晶析出，水合氯醛透化后应滴加甘油盖上盖玻片，擦净溢出液即可观察。

三．表面制片法多用于对叶片、果实或草本植物茎表皮组织的观察，可观察到表皮细胞形态、气孔类型、毛茸特征和着生情况等。

通常用眼科镊子夹住叶片或果实等的表面，轻轻撕取其表皮层置于载玻片上的水、甘油或水合氯醛试液内，注意其上表面朝上方，加盖盖玻片，置显微镜下进行观察。

【作业】(1)制作一张根类或茎类的横切面徒手切片，并绘出其横切面组织简图。

(2)制作一张表面制片。

(3)制作一张粉末片，绘出粉末特征图。

(4)绘出板蓝根(或牛膝根)中药外形图。

实验三、植物细胞构造及后含物【实验目的】1．熟悉植物细胞的基本结构2．熟悉淀粉粒、草酸钙结晶的显微特征及类型3．学会撕取表皮制作临时标本片的方法4．学会粉末临时标本片的制作方法【实验材料】仪器：酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂：甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。

材料：大葱、马铃薯、半夏、贝母、大黄、黄柏、半夏。

【实验内容】一．观察大葱鳞叶表皮细胞1、操作：准备洁净的载玻片和盖玻片各一片，滴加一滴蒸馏水于载玻片中央备用。

取大葱鳞叶，撕取3-5毫米的内表皮，置于载玻片蒸馏水中，展平，盖上盖玻片，防止产生气泡，用吸水纸吸去多余的水。

2、观察：将标本片置于显微镜下观察，可见表皮细胞为长方形，排列整齐，无细胞间隙，细胞壁即为每个长方形细胞的四周壁，可分辨出胞间层和初生壁。

3、绘图：用铅笔绘出显微镜下观察到的长方形细胞的特征。

二．观察马铃薯块茎、半夏、贝母的淀粉粒1、操作：准备洁净的载玻片和盖玻片各一片，切取马铃薯块茎一小块，用刀刮取少许混浊液于载玻片中央，加一滴蒸馏水，盖上盖玻片，防止产生气泡，用吸水纸吸去多余的水。

另用半夏、贝母粉末少量，加水装片。

2、观察：将三种标本片置于显微镜下观察，可见淀粉粒大多为单粒，少数为复粒。

单粒多呈大小不等的卵圆形，较小的呈圆形，有一个明亮的脐点常偏于较小的一端，并由明暗交替的层纹环绕。

3、绘图：用铅笔绘出显微镜下观察到淀粉粒的特征。

并比较三种淀粉粒形态的区别。

三．观察大黄、黄檗、半夏的草酸钙结晶1、操作：准备洁净的载玻片和盖玻片各一片，取少量大黄、黄檗、半夏于载玻片中央，加一滴蒸馏水，盖上盖玻片，防止产生气泡，用吸水纸吸去多余的水。

2、观察：将三种标本片置于显微镜下观察，可见草酸钙结晶形态各不相同。

3、绘图：用铅笔绘出显微镜下观察到淀粉粒的特征。

并比较三种淀粉粒形态的区别。

实验四保护组织、分泌组织【实验目的】1．辨认气孔、毛茸的显微结构特征。

2．辨认油细胞、油室的显微特征。

【实验原理】仪器：酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂：甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。

材料：金银花、石韦、艾叶、橘皮、肉桂。

【实验步骤】一、观察女贞叶的气孔1、取女贞叶，撕取下表面，置于载玻片中央，加一滴水合氯醛，盖上盖玻片，防止产生气泡，用吸水纸吸去多余的水。