雅培AFP说明书-化学发光法
AFP项目性能验证方案
甲胎蛋白(AFP) 检测方法学性能验证评价报告验证内容：正确度、重复精密度、中间精密度、线性范围、临床可报告范围及参考区间的确认验证人员：王绮华、杨俊一检测系统信息项目：甲胎蛋白(AFP)仪器名称: 雅培全自动免疫分析仪仪器型号: I2000SR试剂及厂商：雅培公司检测方法：化学发光微粒子免疫检测法二厂商提供的相关参数三验证过程1 正确度1.1 目的：评价仪器测试结果与接受参考值之间的一致程度。
通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性。
1.2 评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准，最近一次参加卫生部室间质评卫生部质控值。
1.3 结果判断方式：<1/2 CLIA’88正确度验证试验数据记录表2 精密度2.1 重复精密度2.1.1 目的：考察仪器检测方法的随机误差2.1.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度2.1.3 评价方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）各20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到重复性精密度。
2.1.4 标本来源：高、低值标本均为混合血清。
2.1.5 结果判断方式：<1/4C LIA’ 88 6.25%重复性精密度验证试验数据记录表2.2 中间精密度：2.2.1 目的：考察目前实验室检测方法中间精密度。
2.2.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。
2.2.3 评价方法：取一个月的室内质控值（高值、低值）计算CV、SD，得到批间精密度。
2.2.4 结果判断方式：<1/3 CLIA’ 88 8.33%中间精密度验证试验数据记录表3 线性范围（Linearity range, AMR）3.1 目的：在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。
雅培ARCHITECTi2000化学发光仪测定6种肿瘤标记物项目的方法学性能评价
DOI: 10. 3969/ j. issn. 1673 4130. 2011. 04. 028
文献标识码: A
文章编号: 1673 4130( 2011) 04 0488 03
随 着 ISO 15189 实验 室认 证工作 在国 内大中 型医 院的 开 展, 使生化、免疫和血细胞等 检验仪 器检验项 目测定 的重要 性 日趋突出, 关于检验项目的方法学性能评价问 题已提到日程上 来, 特别是肿瘤标志物测 定的灵 敏度问 题特别 突出, 现在就 本 科室采用雅培 A RCHI T ECT i2000 型 化 学发 光仪 测 定 AF P、 CEA 、t PSA 、CA125、CA 153 和 CA19 9XR 等 6 种肿瘤 标志 物 的方法学性能评价报道如下。 1 材料与方法 1. 1 仪器与试剂 雅 培 A RCH IT ECT i2000 型 化学发 光仪, 配套试剂、校准品和质控品。 1. 2 评价方案和实验方法[ 1 4] 1. 2. 1 精密度评价实验 按照仪器的作业指导书对仪器进 行 维护保养, 选择雅培 公司生产的 综合质控血 清的低、高 2 个 质 控品( 批号: 2221 11258A ) 作 为 精密 度评 价 的样 本, 按 照 NC CL S EP 5 A [ 1] , 常规 IQ C 在控后按标本 检测程 序进行 测定, 分 别进行批内、批间精密度, 计算均值( x ) 、标准差( s) 和变异系 数 ( C V) 。 1. 2. 2 准 确度评价实 验 按照 方法比对 试验[2] 完成: 用校 准 品校准 检 测 系 统, 6 种 肿 瘤 标 志 物 校 准 品 的 批 号 为 A FP ( 75454L F00) ; CEA ( 62370L F00) ; t P SA ( 73273L F00) ; CA125 ( 42K14209) ; CA153( 41K 14209) 和 CA 19 9XR( 43K 15308) ; 再 对同一批号和不同批号的校准品进行检测, 对 各自检测结果与 靶值进行比对, 计算检测值与靶值的相对偏倚( % ) , 计算公式: Bias= ( 测定值- 靶值) / 靶值 100% 。 1. 2. 3 分 析 测 量 线 性 范 围 ( analytical measurement rang, AM R) 评价 实验 按 照 N CCL S EP6 P2[ 3] 文 件, 选 择 低 浓 度 ( L ) 和高浓度( H) 患者标 本各 1 份, 浓度覆盖 仪器给 定的线 性 范围, H 和 L 按 5L 、4L + 1H, 3L + 2H, 2. 5L + 2. 5H , 2L + 3H, 1L + 4H , 5H 的关系配制成 7 个 浓度系 列血清, 将实 测值与 预 期值 作 比 较, 计 算 回 归 方 程 Y = bX + a, 确 定 检 测 项 目 的 AM R。 1. 2. 4 生物参考区间的验证 按照 N CCLS EP 6 P2[ 3] 推荐 方 法要求进行验证。采取经体检排除血压异常, 肝、胆疾病, 溶 血 性疾病和各种原因所致疾病, 肝胆 B 超, 肝、肾 功能检 验, 乙 肝 表面抗原、丙肝抗体、抗梅毒螺旋体抗体和抗 H IV 均阴性的血 清标本。CEA 需要找部 分吸烟检 测者。采 取常规 条件测 定 6 项检验项目, 要求 20 个检测 数据只允 许有 1 个数 据在给定 的
甲胎蛋白(AFP)测定(化学发光法)
4 操作步骤
1 开机前检查
a 察看电源是否正常安全通电
b 推主机下部的前门，打开后检查洗净水与分注液的用量是否满足当日
用量废试样杯与废吸嘴是否丢弃
2 开机
a更换75%酒精，放置基质液
b 打开电脑主机及AIA-1800电源, 点击主业面进入root
c 试样吸嘴的设置及酶标识试剂，检体稀释液的设置，按主机操作版面
Reagent/Tip键，LED指示灯变为绿色，打开试剂吸嘴护罩，将酶
标识试剂，检体稀释液设置在试剂托架上，将条形码
标识面朝前
d 试剂杯的设置，按主机操作版面的Cup Sorter键，LED指示灯
变为绿色，拉开分类器抽屉将试剂托盘设置在分类器托盘上，将分类器
抽屉推到底
3 开机日检
4 日检通过后，进行标本检测，在树形菜单上进入界面设置标
本检测项目，Assay键点击开始测定
5 测定完毕后，按主机操作版面的Cup Sorter及Reagent/Tip键，LED指
示灯变为绿色，打开试剂吸嘴护罩及分类器抽屉，收集试剂放入冰箱，
更换基质液，放置75%酒精
6 点击关机，待窗口消失，关闭AIA-1800电源，在关闭电脑及主电
源
5 质量控制：
每批试剂都要使用东曹公司标准品作质量控制，请参见AIA-1800仪器操作手册。
人甲胎蛋白（AFP）说明书
人甲胎蛋白（AFP）说明书人甲胎蛋白（AFP）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中甲胎蛋白（AFP）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白（AFP）水平。
用纯化的人甲胎蛋白（AFP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白（AFP），再与HRP标记的甲胎蛋白（AFP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白（AFP）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白（AFP）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：45μg/L0.5ml×1瓶0.5m l×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书
甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）用途：科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。
供应商：上海樊克生物有限公司甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒说明书试剂盒操作步骤：温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
试剂盒样品的采集和存储血清-使用血清分离管，使样品在室温下或凝块一夜之间两个小时在大约1000×4oC G.测定新鲜制备的血清离心20分钟立即或存放样品在-20°C或稀释后使用80oC。
避免反复冻融循环。
血浆采集血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂。
15分钟，离心样品×G在2到8摄氏度范围内采集30分钟。
去除血浆和即刻检测或者储存样品液体类标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
）血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
）血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
）尿液：用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照此实行。
）细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。
化学发光SOP
第 1 页全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程第1版第 1次修改生效日期：2012年1月1日标题一. 封面雅培I 1000全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程（SOP）文件编号01是否受控是/否持有人签字XXXXXXXX医院2010年3月1日批准人质量负责人编写人生效日期第 2 页全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程第1版第 1次修改生效日期：2012年1月1日标题二 . 目录一 . 封面 1二 . 目录 2三. 标本的采集及保存 3四. 检验标准化操作规程 4五. 各项试剂 10批准人质量负责人编写人生效日期第 3 页全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程第1版第 1次修改生效日期：2012年1月1日标题三. 标本的采集及保存一、标本的采集及保存1.1 原始样本类型血清（真空干燥采血试管或带分离胶的真空采血管分离的血清）、血浆或全血（应用抗凝剂为EDTA-K3）1.2 样本量单次全套乙肝血清标志物检测需全血样本5ml1.3 患者准备•严禁使用接受过鼠单克隆抗体诊断或治疗的病人样品,因其体内含有人抗鼠抗体（HAMA），当这些样品在使用含鼠单克隆抗体分析试剂进行测试时会引起值假的升高或降低。
•对于一些有药物干扰的分析，注意避免（详情参阅试剂说明书）1.4 标本采集方法一般采用静脉采血1.5 标本采集要求•避免过度溶血，必须在无菌条件下采集•确保离心的速度（10000转/分钟）和时间（10分钟），避免颗粒物质的干扰•避免样品的反复冻融，融解后的样品需低速震荡或轻轻颠倒混匀以获得稳定的结果，当样品中有颗粒物质，红血球或浑浊物时必须离心使其澄清后再进行测试1.6 样品的稳定期和保存•上机3小时内完成检测•2︒C —8︒C ，标本可保存1~14天•如长期保存，必须将血清分离出来，冷冻保存（-10︒C或更冷）•-20︒C可稳定3个月。
标本可冻融5次。
•注意：冻融过的标本、有沉淀的标本、反复测定过的标本使用前需离心。
雅培标准操作检测程序
雅培I 2000全自动化学发光免疫分析仪标准化操作规程一、标本的采集及保存1.1 原始样本类型血清（真空干燥采血试管或带分离胶的真空采血管分离的血清）、血浆或全血（应用抗凝剂为EDTA-K3）1.2 样本量单次全套乙肝血清标志物检测需全血样本5ml1.3 患者准备•严禁使用接受过鼠单克隆抗体诊断或治疗的病人样品,因其体内含有人抗鼠抗体（HAMA），当这些样品在使用含鼠单克隆抗体分析试剂进行测试时会引起值假的升高或降低。
•对于一些有药物干扰的分析，注意避免（详情参阅试剂说明书）1.4 标本采集方法一般采用静脉采血1.5 标本采集要求•避免过度溶血，必须在无菌条件下采集•确保离心的速度（10000转/分钟）和时间（10分钟），避免颗粒物质的干扰•避免样品的反复冻融，融解后的样品需低速震荡或轻轻颠倒混匀以获得稳定的结果，当样品中有颗粒物质，红血球或浑浊物时必须离心使其澄清后再进行测试1.6 样品的稳定期和保存•上机3小时内完成检测•2︒C —8︒C ，标本可保存1~14天•如长期保存，必须将血清分离出来，冷冻保存（-10︒C或更冷）•-20︒C可稳定3个月。
标本可冻融5次。
•注意：冻融过的标本、有沉淀的标本、反复测定过的标本使用前需离心。
加热灭活的标本可使用。
1.7 试剂保存条件试剂盒，标准品，质控品、激发液和预激发液在2~8℃保存二、实验条件环境温度：15~30℃相对湿度：10~85%在25℃电源要求：47-63Hz、200-240V AC(自动选择)三、检验标准化操作规程1. 开机前准备1.1 检查电源线是否连接1.2 检查环境温度是否符合要求1.3 检查打印机连接线是否连接2. 开机2.1 打开打印机开关2.2 打开系统控制中心电源开关（必须确保此时运行模块的电源是关闭的）2.3 当Snapshot屏幕出现在显示屏幕上之后，打开运行中心电源开关2.4 当Snapshot屏幕上运行中心和样品处理中心的状态显示为Stop，选择两中心图标，按F5-STARTUP键启动仪器3. 试剂准备与检查3.1 检查仪器上原有试剂量3.2 如原有试剂量不足，取所需试剂放入仪器3.2.1检查试剂瓶是否齐全,批号和效期,确保试剂瓶没有漏液3.3 检查所有试剂、激发液、预激发液或缓冲液是否在效期之内3.4 检查所有试剂、激发液、预激发液或缓冲液量是否足够3.5 检查所有消耗品（反应杯）是否足够，废物是否清空4. 定标4.1 定标试剂：根据不同项目，定标试剂和类型分为2种，并全部为即用型标准品：4.1.1 校正曲线（2点定标）4.1.2 INDEX曲线（INDEX CAL 定性定标）4.2 定标步骤4.2.1 输入校正曲线（工厂定标）1.标准曲线的详细资料全部在试剂瓶上的条码中，当仪器扫描试剂瓶时，可自动将标准曲线保存起来4.2.2定标申请1.在Snapshot上选择ORDER2.选择Calibration order3.选择要定标的分析项目4.输入样品架及位置5.输入标准品的批号和效期6.选择运行模块（可选择）7.选择F2-Add order确认定标申请8. 选择以下一种：*重复2~7步骤申请新的项目定标*选择F1-EXIT返回Snapshot屏幕9.打印申请报告单4.2.3 定标运行1.按定标申请清单放置标准品的量和位置2.放置消耗品3.检查库存（缓冲液，激发液，预激发液和废物等）4.按RUN键运行，运行结束后浏览定标情况4.2.4浏览标准曲线1.从Snapshot选择QC-Cal，选择Calibration Status2.选择想要查看的项目3.选择F5-Detail，浏览所选项目标准曲线的详细参数4.返回Snapshot4.2.5 定标要求1.每一个新的批号试剂2.新版本软件随同试剂要求重新定标3.系统更换配件或执行系统重新定标后4.质控结果超范围后5. 质控5.1 质控品：根据不同项目分为定性，定量和混合质控品，并全部为即用型质控品：5.1.1 定性质控品：分为阴性和阳性二种5.1.2 定量质控品：分为低，中，高三种5.1.3 混合质控品：分为低，中，高三种，同时含多个项目5.2 质控步骤：5.2.1 质控定义1.从Order图标选择2.从定义屏幕中选择CONTROL3.选择一个需要定义质控的项目4.输入质控名（每个质控名带一个质控水平，如：低，中，高或阴，阳性）5.选择F2-ADD CONTROL6.重复4~5步骤输入每一个水平的质控输入质控信息1.选择一个或多个水平的质控2.选择F6-CONTROL DETAILS3.选择数据区域（一般按2个SD的范围）4.输入质控信息5.按ENTER键6.重复3~5步骤输入每个质控的信息7.选择F6-SAVE保存质控信息8.按EXIT键5.2.2 质控申请1.从Order图标选择Control order2.输入样品架的位置3.选择要分析的项目4.选定检测批号5.选择要分析的质控品的水平（高，中，低或阴，阳性）6.选择F2-Add order认可质控品申请7.选择以下一种：*重复2~6步骤申请新的质控品*选择F1-EXIT 返回Snapshot5.2.3 质控运行1.按质控申请清单放置质控品的量和位置2.检查检测试剂盒和消耗品3.检查库存（缓冲液，激发液，预激发液和废物等）4.按RUN键运行，运行结束后浏览质控结果情况5.2.4 质控浏览5.2.4.1 单个质控结果的浏览1.从Snapshot选择QC-Cal2.选择QC results review3.选择所需浏览的质控结果4.选择F5-DETAILS5.或选择F8-Release，释放被选结果6.返回Snapshot5.2.4.2 浏览质控图(LEVERY-JENNINGS图)1.从Snapshot选择QC-Cal，选择Levery-Jennings graph2.选择分析项目3.选择质控水平4.选择Done浏览质控图5.返回Snapshot5.3 质控结果的判定所有质控水平必须控制在规定范围内（按试剂说明书要求在2SD范围内）5.4 质控的要求1.每新批号试剂定标通过后运行各水平质控2.每24小时运行一个水平质控6. 常规标准操作6.1 基本操作步骤--申请病人样品测试6.1.1 单个病人样品的申请1.从Snapshot选择Patient order2.输入样品架的位置编号3.输入样品编号4.如要输入病人信息，选择F2-Sample details，完成后Done返回5.如选择稀释模式，F5-Assay option , 完成后Done返回6.选择该样品要测的项目（或项目组合）7.选择F3-Add order认可病人样品申请8.选择以下一种：*重复2~7步骤申请新的病人样品*选择F1-EXIT 返回病人项目申请表9.返回Snapshot6.1.2病人样品测试的批处理申请1.从Snapshot选择Patient order2.选择Batch3.输入起始样品架的位置4.输入起始样品编号5.输入要测试的样品数6.选择该样品要测的项目（或项目组合）注：在此可选择稀释模式，测试次数7.选择F6-Add order认可病人样品申请8.选择以下一种：*重复3~7步骤申请新的批处理病人样品*选择F1-EXIT 返回病人项目申请表9.返回Snapshot6.1.3 病人测试运行1.按病人测试申请清单放置样品的量和位置2.放置检测试剂盒和消耗品3.检查库存（缓冲液，激发液，预激发液和废物等）4.按RUN键运行，运行结束后浏览病人测试结果情况6.2 检测结果查看6.2.1 浏览病人报告1.从Snapshot选择Results2.选择Results review3.选择所需浏览的病人编号4.选择F5-DETAILS5.返回Snapshot6.2.2浏览储存结果1.从Snapshot选择Results2.选择Stored review3.选择所需浏览的结果4.选择F5-DETAILS5.返回Snapshot6.3 检测结果的重检6.3.1 检测结果的稀释后重检1.从Snapshot中选择Result2.选择Results review3.选择需进行自动稀释的样品4.选择稀释模式5.选择稀释次数6.Done7.返回Snapshot6.3.2检测结果的重运行测试1.进入结果和EXCEPTION屏幕*从Snapshot中选择Result*从Snapshot中选择Exception2.选择要重运行的申请*选择一个或多个申请*选择F2-SELECT ALL 所有申请3.选择F5-DETIAlS（可选择）4.选择F6-RERUN6.4 检测结果的打印按需可选择两种打印方式：•实验室清单式打印•病人结果详情单打印6.5 检测结果的保存按需可选择三种保存或传输方式:•仪器硬盘保存•光盘保存•RS232输出端子、ASTM双向交流口传输至Host保存7. 关机•更新库存（倾倒废物）•进行每日保养•按F2键做仪器SHUTDOWN程序•关闭主机电源•关闭打印机电源四、各检测项目分析原理及参考值范围项目：乙肝表面抗原（HBsAg）1．实验原理和检验目的Architect i2000SR HBsAg是采用化学发光微粒子免疫分析（Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）技术，双抗体夹心两步法对待测样品中的乙肝表面抗原进行定量检测HBsAg定量检测常用来协助对乙肝感染患者的诊断及对感染情况的监测。
酶联免疫法与化学发光免疫法检测AFP的比较
酶联免疫法与化学发光免疫法检测AFP的比较发表时间：2013-05-09T17:14:22.000Z 来源：《中外健康文摘》2013年第8期供稿作者：黄海深陈志通唐光定江伟河[导读] 化学发光免疫法检测结果的稳定性，灵敏度，精密度均优于酶联免疫法黄海深陈志通唐光定江伟河（广东省阳山县人民医院检验科 513100）【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）08-0125-02 【摘要】目的对甲胎蛋白(AFP)试验进行方法学探讨。
方法①对比实验用酶联免疫法和化学发光免疫法同时测定88例临床送检血清标本甲胎蛋白(AFP)的含量。
②线性实验将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验。
③精密度实验用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验。
结果①结果表明，两法无显著差异(P＞0.05)，相关系数r＝0.995，提示两法呈良好相关性。
②线性实验显示酶联免疫法和化学发光免疫法分别在5～400 ng/ml和2～900 ng/ml范围内呈良好的线性关系。
③精密度实验表明化学发光重复性好于酶联免疫法,特别是病理高值化学发光明显优于酶联免疫法。
结论化学发光免疫法的精密度和准确性均优于酶联免疫法。
【关键词】酶联免疫法化学发光免疫法甲胎蛋白比较【Abstract】 Object: The methodology investigate of Alpha-fetoprotein (AFP) test. Methods: ①Comparative experiments: The simultaneous determination of the serum samples of 88 patients censorship alpha-fetoprotein (AFP) levels by ELISA and chemiluminescent immunoassay. ②Linear experiments: the standard solution is diluted at different concentrations,then doing linear experiments.③Precision experiments: Doing precision experiments on low, medium and high-value quality control materials with the two methods. Results: ①The results show that no significant difference in the two methods(P＞0.05). The correlation coefficient of r = 0.995, these two methods showed a good correlation. ②The linear experiments show that the enzyme linked immunosorbent assay and chemiluminescence immunoassay showed a good linear relationship between the range in 5～400ng/ml and 2～900ng/ml.③Precision experiments show that the repeatability of chemiluminescent immunoassay is better than the enzyme-linked immunosorbent assay, specifically at the pathological high value. Conclusion: The precision and accuracy of the chemiluminescent immunoassay are better than enzyme linked immunosorbent assay.【Key words】 ELISA Chemiluminescent immunoassay Alpha-fetoprotein Comparison 甲胎蛋白（AFP）是哺乳动物胚胎期肝脏卵黄囊合成的一种糖蛋白，是辅助诊断原发性肝癌最常用的检测指标。
雅培I2000型化学发光仪测定癌胚抗原的方法学性能评价
雅培I2000型化学发光仪测定癌胚抗原的方法学性能评价郑润桃;张保平;董莉【摘要】目的:通过对雅培I2000型化学发光仪测定癌胚抗原的方法学性能评价,探讨临床免疫学定量检测的方法学性能验证评价方案和实验方法.方法:按照CLSI推荐的方法测定癌胚抗原的精密度、正确度、线性范围和可报告范围、分析灵敏度(最低检测限)、生物参考区间的验证、携带污染率指标进行验证.结果:癌胚抗原的方法学评价结果在厂家提供的范围之内,癌胚抗原的生物参考区间范围不受地区和人群等因素的影响.结论:雅培ARCHITECT 12000化学发光分析仪检测系统性能能满足临床要求,评价方案科学可靠,厂家提供的数据必须经验证后才能引用.【期刊名称】《内蒙古医学杂志》【年(卷),期】2011(043)004【总页数】3页(P416-418)【关键词】肿瘤标记物;方法学性能;评价【作者】郑润桃;张保平;董莉【作者单位】内蒙古医学院附属医院临床检验中心,内蒙古,呼和浩特,010050;内蒙古医学院附属医院临床检验中心,内蒙古,呼和浩特,010050;内蒙古医学院附属医院临床检验中心,内蒙古,呼和浩特,010050【正文语种】中文【中图分类】R734.2随着 ISO15189实验室认可在国内医院的推开,对检验仪器测定检验项目的方法学性能评价的重要性越来越引起人们的注意,特别是肿瘤标记物的测定问题更为突出,现就我实验室的雅培I2000型化学发光仪测定癌胚抗原(CEA)肿瘤标记物的方法学性能评价总结如下。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂雅培I2000型化学发光仪,配套试剂、校准品和质控品。
1.2 评价方案和实验方法1.2.1 精密度评价实验按照仪器的作业指导书对仪器进行维护保养,选择雅培公司生产的综合质控血清的低、高2个质控品(批号:2221-11258A)作为精密度评价的样本,常规IQC在控后按标本检测程序进行测定,分别进行批内、日间精密度,计算均值( )、标准差(s)和变异系数(CV)评价。
雅培化学发光仪器介绍
雅培(Abbott) AxSYM雅培(Abbott)公司Axsym全自动微粒子酶免疫化学发光仪是集微粒子酶免分析技术(MEIA)、离子捕获免疫分析技术（ICIA）、荧光偏振免疫分析仪技术（FPLA）三种先进技术于一体的先进仪器，不同方法的结合使用，扩大了检测范围，并可根据不同被检测物的特点设计不同的反应步骤，具有灵敏度高、线性范围宽、检测速度快及检测项目齐全等特点。
Axsym(雅培化学发光仪)简易维修手册/p-6661637955883.html全自动化学发光免疫分析仪（雅培Axsym）操作/p-7803709690226.html全自动化学发光免疫分析仪（雅培Axsym）操作美国雅培i2000化学发光法发光免疫分析法是将发光反应与免疫反应相结合而产生的一种免疫分析法。
我科引进美国雅培i-2000全自动化学发光免疫分析仪，同时可检测25项，每小时200个测试，提高工作效率和检测的准确度与灵敏度，减少人为操作误差。
该仪器采用智能化分步冲洗，使用磷酸盐缓冲液和表面活性剂，彻底消除试验携带问题，提高了测试结果的可信度。
通过压力检测的凝块检测技术可确保样本的前处理质量。
化学发光免疫分析（CLIA）检测原理：是一种以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物直接标记抗体或抗原的一类免疫分析法。
常用的发光剂为丫啶酯类。
这类标记物在化学结构上有产生发光的特殊基团，在发光免疫分析过程中直接参与发光反应。
这类物质没有本底发光，在反应中能用于检测低浓度或微量浓度的样品。
干扰作用也较少且标记和偶联后稳定、理化性质和免疫特性不改变。
是一类发光效率很高的发光剂。
可与抗体（或抗原）结合，生成具有化学发光活性强，免疫反应特异性高的标记抗体。
检测技术中检测小分子抗原使用竞争法；检测大分子抗原用夹心法。
诊断试剂盒：已开发的诊断试剂盒主要有病毒标志物类、内分泌激素类、肿瘤标志物类、心肌标志物类、治疗性药物浓度、骨代谢指标和贫血类等方面的指标。
甲胎蛋白 化学发光法 参考值-概述说明以及解释
甲胎蛋白化学发光法参考值-概述说明以及解释1.引言1.1 概述甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是一种胚胎期间合成并在胎儿血液和胎盘中存在的蛋白质。
它起源于胎儿的肝脏和胚胎瘤细胞，并在出生后逐渐减少。
甲胎蛋白的检测在临床医学中被广泛应用，特别是用于诊断和监测某些类型的癌症，如肝癌和睾丸癌。
化学发光法是一种高度敏感的检测方法，能够测定样品中微量的甲胎蛋白。
它基于一种特殊的生化反应，即通过某些荧光标记的试剂与甲胎蛋白结合后产生可见光。
通过测量产生的光信号强度，可以确定样品中甲胎蛋白的浓度。
研究甲胎蛋白化学发光法的参考值是为了建立一个可靠的参考范围，使得医生能够准确判断患者的甲胎蛋白水平是否超过正常范围。
这些参考值通常是根据大量健康人群的数据统计得到的，而这些人群没有癌症或其他严重疾病的影响。
参考值的研究对于正确评估甲胎蛋白的检测结果至关重要，可以提高癌症早期诊断的准确性和敏感性。
总之，本文旨在介绍甲胎蛋白的化学发光法，并研究其参考值。
我们将首先介绍甲胎蛋白的概述，包括其起源和临床应用。
然后，我们将详细解释化学发光法的原理及其在甲胎蛋白检测中的应用。
最后，我们将探讨对甲胎蛋白化学发光法参考值的研究，并给出结论和总结。
通过本文的阐述，读者将深入了解甲胎蛋白化学发光法及其参考值的重要性和应用前景。
1.2 文章结构文章结构部分应包括以下内容：本文主要包括引言、正文和结论三个部分。
引言部分分为概述、文章结构和目的三个小节。
在概述中，介绍甲胎蛋白及其在医学领域中的重要性。
在文章结构中，说明本文的整体架构和组织方式。
在目的部分，明确本文的研究目标和意义。
正文部分主要分为甲胎蛋白的介绍和化学发光法的原理两个小节。
在甲胎蛋白的介绍中，详细介绍甲胎蛋白的定义、结构和功能，以及其在人体健康和疾病中的作用。
在化学发光法的原理中，解释了化学发光法是一种检测甲胎蛋白的常用方法，包括原理、步骤和相关的仪器设备。
甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒说明书
甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒说明书Elecsys Anti-HAVElecsys 2010/MODULAR ANALYTICS E17011820605 100人份【名称】通用名：甲型肝炎病毒抗体电化学发光检测试剂盒英文名：Elecsys Anti-HAV汉语拼音：Jia xing gan yan bing du kang ti dian hua xue fa guang jian ce shi ji he【使用目的】用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的甲型肝炎病毒总抗体。
甲型肝炎病毒抗体检测有助于检测过去或现在的甲肝病毒感染，观察甲肝疫苗注射后的免疫反应。
电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010和MODULAR ANALYTICS E170免疫测定分析仪。
【概述】甲肝病毒是一种没有胞膜的RNA病毒。
它属于细小的核糖核酸病毒家族。
至今，仅1种人血清型和7种基因型被记述。
病毒衣壳由三种蛋白 (VP1-VP3) 组成，在病毒颗粒表面形成一个免疫决定簇结构，它被高度表达在所有基因型。
在注射疫苗后或正常感染后这个结构诱发免疫反应1。
甲型肝炎是最普通的急性病毒性肝炎，通过消化道传播。
这种肝炎不会发展成慢性肝炎，病毒也不会持续存在组织中2。
甲型肝炎病毒是引起病毒性肝炎爆发流行的最常见原因(10-20%)3。
甲型肝炎感染发作时总的甲型肝炎抗体呈阳性。
在自然感染后，抗HAV-IgG抗体能够终生存在，如果组织再次感染会对机体起到保护作用4。
现在已经有甲肝病毒疫苗和甲肝和乙肝混合疫苗5。
在注射甲肝疫苗后, 抗HAV-IgG抗体两周后就可以检测到。
在完全免疫过程中，这种保护作用可以持续很多年6。
免疫保护作用对于抗体值没有限定，但是抗HAV浓度在10-20IU/L以上对机体有保护作用。
抗HAV抗体检测用于检查甲型肝炎病毒存在或过去感染过。
同时也用于观察甲肝疫苗注射后的免疫反应。
【原理】竞争法：总检测时间18分钟。
ABBOTT ARCHITECT AFP雅培说明书
AFP testing is not recommended as a screening procedure to detect cancer in the general population.
Prenatal testing
Many studies have confirmed the utility of AFP in the early detection of fetal open neural tube defects (NTD).18-20 In the US, NTD, primarily anencephaly and spina bifida, occur at the rate of between 1 and 2 per 1000 live births and are among the most common major congenital malformations.21 The incidence of NTD varies geographically and across racial groups.22-26
甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书
甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书
AEP(HY-10011)
（包被试管法）
测定原理：采用双抗体夹心法测定样品中AFP的浓度。
测定盒组成：
１、抗AFP多抗包被管：（2×50管）包被管置于2-8℃可保存至有效期。
２、 125I抗AFP单抗：1瓶（红色，液体），每瓶不少于370 kBq (10μCi)
３、AFP系列标准品六瓶：S0、S1、S2、S3、S4、S5，直接使用，其浓度值分别为：0、4、15、50、150、500 ng/ml .
血液样品的收集与处理：
采血后立刻分离出血清用于分析，在24小时之内使用放在2～8℃中，长期存放应保存在-20℃，并避免反复冻融。
甲胎蛋白AFP免疫放射分析药盒操作说明书阳性血清在测量时要取出20 μl用生理盐水 1.0ml 稀释（即 51 倍稀释）。
分析过程：将包被管上标明标准、质控或样品，并按下表加样。
单位：μl
数据处理：以各标准管的浓度为X轴，各标准管的放射性计数B（已扣除NSB）为Y轴，用免疫放射（IRMA）分析程序的四参数方式回归，求未知样品的AFP浓度。
作过稀释的样品所测浓度还要乘以51倍。
临床参考值：
正常值：小于10 ng/ml
建议各实验室建立自己的临床测定值。
注意事项：
1、所有试剂于2-8℃保存，在有效期前使用，使用前须平衡到室温；
2、试剂盒不要长时间置于室温下，以免影响其稳定性；
3、打开包装前将试管平衡到室温，未使用的试管放入袋中重新封好并保存在2-8℃；
4、同一次实验不要使用不同批次的包被管。
全自动化学发光免疫分析仪(雅培Axsym)操作
一、开机打开仪器电源，等待仪器自检，按键F3（STARTUP）启动，查看库存（INVENTORY）。
二、样品预处理过程1、环孢素A：在专用拇指管中加入150μl全血，依次加入50μl裂解液和300μl沉淀剂，充分振荡30秒至变色，然后11000转/分离心7分钟，上清液倒入样品杯中。
2、其它药物：肝素抗凝血以3500转/分离心10分钟，取500μl血浆放入样品杯中。
三、样品测试程序1、主菜单（MAIN MENU）选择ORDERLIST，2、选择F6（PA TIENT），3、选择F2（BA TCH），4、输入起始样品栏的位置，5、再输入起始样品编号，6、输入要测试的样品数，7、选择该样品要测试的项目，8、选择F6（ADD），9、重复4～8步骤申请新的批处理病人样品或选择F1（EXIT）返回病人项目申请表，10、返回主菜单（MAIN MENU），11、按病人测试申请单放置样品的量和位置，12、放置检测试剂盒和消耗品，13、按RUN键运行。
四、查看结果1、主菜单（MAIN MENU）选择STORED RESULTS，2、从STORED RESULTS中选择VIEW STORED RESULTS，3、选择所需浏览的结果，4、选择F6（DETAILS），5、选择PRINT键，打印出结果。
五、关机1、取出试剂（包括MUP）放入冰箱，2、更新库存（倾倒废液和废物），3、主菜单（MAIN MENU）选择MAINTENANCE，4、从MAINTENANCE中选择PROBE CLEAN，5、在系统提示下在LOAD STA TION位置放2个RV杯，6、在RV杯的预稀释孔和缓冲液孔各加1ml探针清洗液，7、选择OK键，8、待清洗完毕，返回主菜单，选择F2（SHUT DOWN）关机，9、关闭仪器电源。
六、质控要求1、每新批号试剂定标通过后运行各水平质控。
2、每8小时运行一个水平质控。
声明：各媒体转载请自觉注明文章来自《中华检验医学网》（）！原文地址：/html/20100604/2877.html。
雅培i2000SR和Beckman DXI800全自动化学发光仪测定AFP、CEA水平的可比性研究
雅培i2000SR和Beckman DXI800全自动化学发光仪测定AFP、CEA水平的可比性研究目的探讨雅培i2000SR和Beckman DXI800全自动化学发光仪检测甲胎蛋白（AFP）和癌胚抗原（CEA）结果的可比性、偏倚评估及临床可接受程度。
方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A2文件的要求，收集40例患者不同浓度的新鲜血清，分别在两台仪器上进行AFP、CEA测定，共得到40组数据。
以雅培i2000SR化学发光仪为比较方法，Beckman DXI800作为实验方法，对检测结果进行方法比对和偏倚评估。
结果AFP和CEA两个项目的检验结果在两台仪器上的相关性较好，相关系数r均>0.99，AFP和CEA在医学决定水平上的预期偏倚均可接受，AFP和CEA在两台化学发光仪上的检测结果具有较好的一致性。
结论当同一实验室出现不同仪器检测相同检验项目时，应进行方法比对和偏差评估，以保证检验结果的可比性。
标签：化学发光仪；方法比对；甲胎蛋白；癌胚抗原随着检验医学的迅速发展，免疫分析技术得到很大提高，不同型号不同检测原理的自动化免疫分析仪在国内得到广泛使用，同一实验室内使用不同仪器检测相同项目的现象越来越普遍[1]。
然而，由于不同仪器、试剂、校准品所构成的不同检测系统之间测定的结果却不一定完全一致。
临床和患者会困惑而对结果提出质疑。
因此，如何判断同一项目在不同仪器之间的检测结果是否具有可比性，以及如何保证其结果的一致性，是目前医学检验界关注和讨论的热点[2]。
本科先后引进了两台全自动化学发光免疫仪，其中雅培i2000SR全自动化学发光分析仪用于常规标本AFP和CEA的测定，Beckman DXI800全自动化学发光分析仪则用于体检标本AFP和CEA的测定。
为了确认本研究2台化学发光仪对AFP、CEA检测结果是否具有可比性，按照美国临床实验室委员会（NCCLS）[3]EP9-A2文件的要求对本科两台全自动化学发光仪检测AFP、CEA的结果进行相关性分析和偏差评估，现报道如下。
甲胎蛋白(AFP)标准操作规程
甲胎蛋白（AFP）标准操作规程1.【实验目的】为了保证癌胚抗原（CEA）可测定结果的准确性，以及可靠性。
2.【职责】2.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【样品类型及实验前准备】3.1 样本准备：3.1.1人血清，采集在肝素（钠或锂）的血浆或羊水样本可以在ARCHITECT AFP检测中使用。
其它抗凝血剂没有对是否适用于ARCHITECT AFP检测进行验证。
按照生产商有关血清或血浆采集管的处理指导进行。
3.1.2羊水必须在无菌的条件下，由适当的经过训练的人员，采取对胎儿以及母体安全相关的适当预防来进行采集。
明显血污的样本应该依据使用Kleihauer – Betke技术检查胎儿血液细胞的存在，和/或依据电泳，免疫电泳或其他可用技术检查胎儿血色素。
为胎儿血液污染的羊水样本可能出现异常高AFP值，这可能导致检测结果的曲解。
3.1.3血清或血浆样本应该进行无菌采集，这是一种避免溶血的方式。
对于母体血清或血浆分析，血液样本应该在羊水诊断开始前进行采集。
有证据表明，在羊水诊断后，在母体的血清或血浆中，出现了AFP的水平增加。
3.1.4如果检测时间超过24小时，则将血清或血浆从凝集物，血清分离器或红细胞中取出。
检测前，样品可以在2－8℃下最长7天时间。
如果检测用时超过7天，则将样品贮存于－20℃或更低温度下。
为了对结果进行优化，样本应该无纤维，血红细胞，或其他微粒物质。
使用前，对含有纤维，血红细胞，或其他微粒物质的样本进行离心分离，以确保结果的一致性。
3.2 患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况下可空腹抽血检测。
3.3 容器，添加剂类型：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA三钾、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本。
甲胎蛋白(AFP)测定(化学发光法)
4 操作步骤
1 开机前检查
a 察看电源是否正常安全通电
b 推主机下部的前门，打开后检查洗净水与分注液的用量是否满足当日
用量废试样杯与废吸嘴是否丢弃
2 开机
a更换75%酒精，放置基质液
b 打开电脑主机及AIA-1800电源, 点击主业面进入root
c 试样吸嘴的设置及酶标识试剂，检体稀释液的设置，按主机操作版面
Reagent/Tip键，LED指示灯变为绿色，打开试剂吸嘴护罩，将酶
标识试剂，检体稀释液设置在试剂托架上，将条形码
标识面朝前
d 试剂杯的设置，按主机操作版面的Cup Sorter键，LED指示灯
变为绿色，拉开分类器抽屉将试剂托盘设置在分类器托盘上，将分类器
抽屉推到底
3 开机日检
4 日检通过后，进行标本检测，在树形菜单上进入界面设置标
本检测项目，Assay键点击开始测定
5 测定完毕后，按主机操作版面的Cup Sorter及Reagent/Tip键，LED指
示灯变为绿色，打开试剂吸嘴护罩及分类器抽屉，收集试剂放入冰箱，
更换基质液，放置75%酒精
6 点击关机，待窗口消失，关闭AIA-1800电源，在关闭电脑及主电
源
5 质量控制：
每批试剂都要使用东曹公司标准品作质量控制，请参见AIA-1800仪器操作手册。